Государственное бюджетное образовательное учреждение среднего профессионального образования Московской области «Подольское медицинское училище (техникум)» Учебное пособие по теме «ВЗЯТИЕ КРОВИ ИЗ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ ВЕНЫ» Специальность: 34.02.01 Сестринское дело. Курс 1. Семестр 2. Профессиональный модуль: Выполнение работ по профессии младшая медицинская сестра по уходу за больными (ПМ.04). МДК 04.03. Технология выполнения медицинских услуг. Составитель: преподаватель ПМ.04 Филиппова С.Н. Подольск 2014 Оглавление ВВЕДЕНИЕ 3 РАЗДЕЛ 1. ИНФОРМАЦИОННО-ОБУЧАЮЩИЙ БЛОК 1. Подготовка к выполнению процедуры 5 2. Оснащение для взятия крови путем венепункции 8 3. Взятие диагностических проб крови путем венепункции 11 4. Обзор методов забора крови из вены 16 4.1. Забор крови из периферической вены с помощью шприца 18 4.2. Вакуумные системы для забора крови 21 4.2.1. Забор крови из периферической вены в вакуумные контейнеры 24 4.2.2. Вакуумные пробирки: виды, цветовая кодировка 27 4.2.3. Правило перемешивания 37 4.2.4. Последовательность заполнения пробирок 38 4.3. Система взятия венозной крови S-Monovette 39 4.3.1. Аспирационная техника 39 4.3.2. Вакуумная техника 41 4.3.3. Области применения S-Monovette 42 4.3.4. Переходники для S-Monovette 43 5. Возможные проблемы и осложнения, сопутствующие венепункции 45 6. Особенности при соблюдения противоэпидемического режима взятии венозной крови путем венепункции 46 7. Транспортировка и хранение проб 48 8. Правила безопасности медицинских работников 49 9. Ответственность медицинских работников 50 РАЗДЕЛ 2. БЛОК КОНТРОЛИРУЮЩИХ МАТЕРИАЛОВ 1. Вопросы для самоконтроля 51 2. Задания в тестовой форме 52 3. Ситуационные задачи 59 ПРИЛОЖЕНИЯ 62 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 69 2 ВВЕДЕНИЕ В ходе лечебно-диагностического процесса для значительной части лабораторных анализов проводится взятие венозной крови путем венепункции (чрескожное прокалывание стенки вены иглой для получения пробы крови). Правильность проведения всех аспектов диагностики определяются качеством всех этапов исследования: преаналитическим, аналитическим, постаналитическим. Преаналитический этап – это все процедуры, выполняемые до начала проведения лабораторных исследований: подготовка пациента к исследованию, забор биоматериала, правильное его хранение, транспортировка и регистрация. Аналитический (лабораторный) этап – это непосредственно проведение лабораторного теста специалистами по диагностике. Постаналитический (постлабораторный) этап связан с оцениванием результатов исследования и заключается во взаимодействии сотрудников лаборатории и клиницистов стационара. Исследования показывают, что на преналитический этап приходится от 46 до 68% все лабораторных ошибок, вследствие чего пациентам назначаются неправильное лечение (6%) и ненужные дополнительные обследования (19%) (Plebani M., Carraro P., 1997). Значительная доля ошибок обусловлена нарушением техники взятия проб крови, неправильным выбором антикоагулянта, нарушением соотношения количества крови с реактивами, неправильными манипуляциями с пробами. Оптимально проведенная преаналитическая подготовка является основным условием точной и полной лабораторной диагностики. Результаты лабораторных исследований могут быть точными только в том случае, если будут стандартизованы все условия при взятии пробы крови. Успешная венепункция – ключевое требование для адекватности образцов. 3 Не менее важным является обеспечение выполнения требований противоэпидемического режима для снижения риска возникновения гемоконтактных инфекций при проведении такой массовой манипуляции, как взятие венозной крови. Нарушения манипуляциях с при выполнении ними могут процедуры также взятия служить проб причиной крови и заболеваний гемоконтактными инфекциями пациентов и медицинского персонала. За 10летний период наблюдения выявлено, что ошибки при взятии проб венозной крови явились причиной инфицирования медперсонала вирусными гепатитами В и С в 23–25% случаев. Пособие состоит из блока информационно-обучающих материалов и блока контролирующих материалов. Первая часть настоящего пособия включает основные сведения по вопросу взятия венозной крови на исследования, необходимые для отработки умений и решения ситуационных задач; рассматриваются вопросы адекватной подготовки пациента к различным исследованиям венозной крови, демонстрируются способы качественного получения у него образцов крови, их сохранение и доставка в лабораторию. Вторая часть содержит вопросы, тестовые задания и ситуационные задачи для проверки усвоенного материала. В Приложении 1 рассмотрена памятка пациенту, которому предстоит лабораторное исследование крови (на примере иммунологического и серологического исследований). Информационный материал в Приложении 2 позволяет проанализировать особенности забора, хранения и транспортировки крови для исследования на ВИЧ на основе нормативного документа. В Приложении 3 рассмотрены условия по забору и хранению биологического материала (венозной крови), разработанной ФГУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора. Пособие предназначено для студентов медицинских училищ (колледжей), обучающихся по специальностям: «сестринское дело». 4 РАЗДЕЛ 1. ИНФОРМАЦИОННО-ОБУЧАЮЩИЙ БЛОК 1. Подготовка к выполнению процедуры При подготовке пациента к различным методам исследования венозной крови необходимо соблюдать общие принципы для обеспечения качественного выполнения исследования и достоверности результатов. Подготовка к процедуре включает в себя несколько аспектов: информирование пациента; регистрацию; идентификацию пациента и пробы; контроль соблюдения пациентом указаний; удобное расположение пациента. Информирование пациента. Перед взятием биологического субстрата необходимо получить информированное согласие пациента на выполнение процедуры. Необходимо завоевать доверие пациента (если пациент в сознании), чтобы снять у него возможное беспокойство и избежать стрессовой ситуации. В конфиденциальной обстановке сообщите пациенту в доступной форме о необходимости и сути исследования. Объясните, что процедура венепункции может быть слегка болезненной, но она кратковременна. На результаты могут влиять физиологические факторы, возраст, физическая активность, постельный режим, диета, приём алкоголя, фаза менструального цикла, ожирение, приём лекарственных препаратов, пол, время суток и т.д. Взятие крови с учетом этих факторов относится к компетенции врача, назначившего исследование. Объясните условия проведения процедуры, которые должны быть соблюдены пациентом. Он должен быть информирован: О влиянии принимаемых им лекарственных препаратов на исследуемые показатели, о соблюдении специальной диеты накануне исследования, о необходимости отбора проб натощак (за исключением случаев экстренной диагностики). 5 При взятии крови у пациента, находящегося в сумеречном состоянии, необходимо соблюдать особую осторожность, чтобы предупредить неожиданные движения и вздрагивания в момент введения иглы или нахождения ее в просвете вены. Наготове должна быть марлевая салфетка, при выпадении или смещении положения иглы жгут нужно быстро снять. О возможности повреждений необходимо предупредить врача. При плановом назначении лабораторного теста с исследованием крови материал для его выполнения следует забирать: натощак (примерно через 12 ч после еды, приема алкоголя и курения), сразу после пробуждения обследуемого (между 7-ю и 9-ю часами утра) и при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20-30 мин.). При взятии образца материала в иное время суток необходимо выяснить период времени, прошедший после последнего приема пищи (после еды в крови повышается содержание глюкозы, холестерина, триглицеридов, железа, неорганических фосфатов, аминокислот). В этом случае важно учитывать и время взятия пробы, так как содержание ряда аналитов изменяется в течение суток. Регистрация. Каждое направление на анализ крови должно быть зарегистрировано для идентификации всех документов и инструментария, относящихся к одному пациенту. В направлении на анализ крови должна быть указана следующая информация: фамилия, имя, отчество пациента, возраст, дата и время взятия крови, регистрационный номер анализа (указывает лаборатория), номер истории болезни (амбулаторной карты), фамилия лечащего врача; отделение или подразделение, направившее пациента. Идентификация пациента и пробы. Необходимо убедиться, что взятие крови будет проведено у пациента, указанного в направлении. Для идентификации пациента следует предпринять следующее: спросить пациента его имя и фамилию, возраст и/или дату рождения (если пациент в сознании) и сравнить эту информацию с указанной в направлении; 6 для неизвестных пациентов (пациентов без сознания или с сумеречным сознанием) в приемном отделении должно быть присвоено какоелибо временное, но четкое обозначение, пока его личность не будет выяснена. Пациент всегда должен отвечать на прямое обращение к нему. Пациенты с частичной или полной потерей слуха или со сниженными умственными способностями могут отвечать на вопросы типа «Вы Иванов, не так ли?» утвердительным кивком. Человек, сидящий на краю постели, может оказаться просто посетителем. Ошибки случаются не только с распространенными именами. Если персональные данные пациента недостаточно точные, процедурная сестра должна проверить данные. Для идентификации пробы используются методы фиксации на этикетке пробирки данных пациента или присвоение пробе номера (номер при этом указывается в направлении и журнале забора крови на исследования). Последний метод применяется для конфиденциальности результатов. Надежную идентификацию проб обеспечивают наклейки со штрих-кодом. Контроль соблюдения пациентом указаний. Для получения правильных результатов анализа необходимо убедиться в соблюдении назначенных ограничений и правил подготовки к определенным видам исследований крови: ограничений в диете, приёма лекарственных препаратов, приёма пищи и т.д. Необходимо удобно расположить пациента в положении лежа или сидя. При пункции вены локтевого сгиба руку пациента укладывают сгибательной стороной кверху так, чтобы плечо и предплечье образовывали прямую линию. Для максимального разгибания конечности под локоть подкладывают плотную клеенчатую подушку. 7 2. Оснащение для взятия крови путем венепункции Взятие крови из вены следует производить в процедурном кабинете, где для успешного проведения манипуляции должно быть следующее оборудование. 1. Стол для взятия проб крови. 2. Стул для пациента или специальное кресло для проведения венепункции, позволяющее создать максимальный комфорт и безопасность пациенту во время венепункции. Оба подлокотника кресла служат опорой для рук, позволяют найти оптимальную для каждого пациента позицию при венепункции. Кресло также предохраняет пациентов от падения в случае обморока. 3. Кушетка. 4. Холодильник. 5. Штативы для пробирок. 6. Иглы стерильные, соответствующие способу взятия крови. Стерильные иглы должны быть в индивидуальных упаковках с цветным кодом соответственно их калибру. Традиционно используют иглы калибром от 19G до 23G. Необходимо обращать внимание на целостность упаковки и сроки применения. 7. Иглодержатели для вакуум-содержащих пробирок и игл, соответствующие диаметру пробирок. 8. Пробирки для взятия крови: стеклянные, пластиковые, вакуумсодержащие. Не допускается применение стеклянных пробирок с колотым верхом и трещинами. 9. Шприцы инъекционные однократного применения 10-20 мл. 10. Жгуты венозные (резиновые, матерчатые в клапан-замком). 11. Стерильные ватные шарики, марлевые салфетки и/или пропитанные антисептиками салфетки в заводской упаковке. 12. Стерильный пинцет. 8 13. Антисептики (для обработки места пункции, рук и перчаток). 14. Клеенчатая подушка для выравнивания локтевого сгиба (при отсутствии специального кресла). 15. Защитная одежда: халат (костюм), шапочка (косынка), маска, защитные очки или щиток, перчатки. В случае загрязнения ее кровью должна быть предусмотрена немедленная смена спецодежды. Взятие крови осуществляется в одноразовых резиновых перчатках. Смена использованных перчаток осуществляется после взятия образца крови у каждого пациента. В тех случаях, когда это невозможно, перед каждым новым взятием образца крови производится их обработка 70% раствором этилового спирта или антисептиками, обладающими вирулицидным действием. При взятии крови из подключичного катетера перчатки должны быть стерильными одноразового использования. 16. Контейнеры для дезинфекции использованного инструментария и материала: настольный прочный контейнер для игл с устройством для безопасного снятия иглы; емкости для обеззараживания шприцев, перевязочного материала. 17. Лёд (или хладоэлемент). 18. Бактерицидный лейкопластырь. 19. Дезинфицирующее средство для обеззараживания исполь-зованного материала и рабочих поверхностей. 20. Контейнер для транспортировки пробирок. 21. Флакон с 10% раствором нашатырного спирта. 22. Карандаш, шариковая ручка или спиртовой маркер для нанесения сведений о полученной крови на этикетку пробирки (или надписей по стеклу/пластику). 23. Аптечка «Анти-ВИЧ» для защиты медицинского персонала в случае травмы. 9 24. Памятка о проводимых манипуляциях на рабочем месте процедурной медицинской сестры (выбор пробирок, минимально требуемый объем крови, особенности обращения с образцом, правила предосторожности в зависимости от того или иного планируемого исследования). В связи с тяжелым состоянием пациента взятие крови может быть произведено в отделении, непосредственно у постели больного. Перечень оснащения на одну процедуру венепункции, выполняемую у постели больного: 1. Столик манипуляционный передвижной или транспортный контейнер переносной. 2. Игла стерильная, соответствующая способу взятия крови. 3. Иглодержатель. 4. Пробирки с крышкой для взятия крови (вакуум-системы). 5. Жгут венозный. 6. Подушка клеенчатая. 7. Перчатки. 8. Стерильные салфетки или ватные шарики. 9. Лоток или непрокалываемый контейнер для использова-нного материала с дезинфицирующим средством. 10. Штатив для пробирок. 11. Пеленка стерильная. 12. Кожный антисептик. 13. Лоток или бикс для стерильного материала. 14. Стерильный пинцет. 15. Лейкопластырь, бинт медицинский. 16. Ножницы. 10 3. Взятие диагностических проб крови путем венепункции Для исследования аналитов в цельной крови, сыворотке или плазме образец крови берут чаще всего из локтевой вены, однако можно пунктировать и менее крупные и полнокровные вены тыльной поверхности запястья и кисти. При выборе места прокола для взятия крови из вены необходимо избегать участков кожи, имеющих шрамы и рубцы, родинки, нарушения целостности кожного покрова (особенно с присоединением пиогенной инфекции), гематомы. Следует проявлять особую осторожность при выборе для взятия крови вен, наиболее часто используемых для переливания инфузионных растворов. Для хорошего контурирования вен создают искусственный венозный стаз. С этой целью на несколько сантиметров выше места пункции накладывают жгут. При этом необходимо помнить, что жгут должен сдавливать только поверхностные вены, но не нарушать приток крови по артериям. Это проверяют по наличию пульса на лучевой артерии. Резиновый венозный жгут накладывают на одежду или марлевую салфетку так, чтобы его свободные концы были направлены вверх, а петля вниз (рис. 1). При применении жгутов из синтетических тканых материалов, имеющих вид широкой плоской эластичной ленты с механизмом фиксации, необходимо защелкнуть клапан и потянуть ленту за свободный конец до остановки венозного кровотока (рис. 2). Рис. 1. Наложение венозного резинового жгута. 11 Рис. 2. Наложение жгута с клапан-замком. Для усиления венозного застоя пациенту предлагают несколько раз энергично сжать и разжать кулак. Для некоторых исследований необходимо учитывать возможность повышения уровня K+ и Мg++ в результате мышечной активности (сжатие-разжатие кулака). При хорошем наполнении вены четко видны и прощупываются под кожей в виде эластичных тяжей. Кончиками пальцев левой руки исследуют вены и выбирают из них наиболее крупную и наименее смещающуюся. Все действия после наложения жгута следует выполнять быстро и последовательно. Длительный стаз (более 1 минуты) способен вызвать изменения концентрации белков на 5-15%, газов крови, электролитов (К, Са), билирубина, показателей коагулограммы. В случаях, когда определение наиболее подходящей для пункции вены затянулось, необходимо снять жгут и наложить его снова. Место венепункции обрабатывают кожным антисептиком (70% раствор этилового спирта, АХД-2000, Октенидерм) двукратно: первым шариком – площадь локтевого сгиба, вторым – непосредственно место пункции. Все движения шариков должны производиться в одном направлении. После дезинфекции не дотрагивайтесь до места пункции! Если же во время венепункции возникли сложности, и вена пальпировалась повторно, эту область нужно снова обработать. Также не рекомендуется обдувание кожи для ускорения испарения с кожи этилового спирта. Прокол кожи с видимыми следами этилового спирта на ней может приводить к гемолизу полученной крови. Для обработки места пункции 12 не применяют 96% этиловый спирт, так как он оказывает на кожу дубильное действие, приводит к закрыванию пор, в которых сохраняются жизнеспособные микроорганизмы, не подвергшиеся воздействию антисептика. После полного высыхания антисептика просят пациента зажать кулак и фиксируют вену, натянув кожу книзу. Пункцию вены производят одномоментно или в два этапа. При двухмоментной технике иглу, держа срезом вверх, вводят в кожу под углом до 30° на 1/3 длины параллельно вене, а затем, продолжая левой рукой фиксировать вену, слегка изменяют направление иглы (примерно на 15°) и осторожно пунктируют вену до ощущения «попадания в пустоту». Одномоментный способ венепункции требует большого навыка. При заборе крови из вены нельзя «изгибать» и использовать слишком тонкую иглу. Изменение просвета в изогнутой игле может повредить клетки крови и вызвать гемолиз. Как только кровь начнет поступать в шприц (пробирку), выполните взятие проб в соответствии с порядком, установленным для различных видов исследования крови. В зависимости от назначенного вида исследования образец крови должен собираться при наличии строго определенных добавок: для получения плазмы кровь собирают с добавлением антикоагулянтов: ЭДТА, цитрата, оксалата, гепарина; для исследований системы свертывания крови применяется только цитратная плазма (в точном соотношении 1:9 раствора цитрата натрия и крови); для большинства гематологических исследований используют венозную крови с солями этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА); для получения сыворотки кровь собирают без антикоагулянтов; для исследования глюкозы кровь собирают с добавлением ингибиторов гликолиза (фтористого натрия или йодоацетата); для исследования ряда нестабильных гормонов (адренокортико- тропного гормона, кальцитонина) используют апротинин; 13 с целью сохранения в образце крови эритроцитов и лейкоцитов применяют смесь антикоагулянтов с добавками. Для получения образцов крови вариантов проб для разных видов исследований необходимо соблюдать очередность заполнения пробирок. Основное правило – вначале проводится взятие крови без антикоагулянтов, затем в пробирки с антикоагулянтами во избежание загрязнения ими. Последовательность наполнения пробирок: 1) кровь без добавок – для получения гемокультуры для микробиологических исследований; 2) кровь без антикоагулянтов – для получения сыворотки, используемой при клинико-химических и серологических исследованиях; 3) кровь с цитратом – для получения плазмы, используемой при коагулологических исследованиях; 4) кровь с гепарином – для получения плазмы, используемой при биохимических исследованиях; 5) кровь с ЭТДА – для получения цельной крови, используемой при гематологических исследованиях, и плазмы, используемой для некоторых клинико-химических исследований. При использовании современных анализаторов достаточны следующие объемы образцов: для биохимических исследований: 4-5 мл; при использовании гепаринизированной плазмы – 3-4 мл; для гематологических исследований: 2-3 мл крови с ЭДТА; для исследований свертывающей системы: 2-3 мл цитратной крови; для иммуноисследований: 1 мл цельной крови для 3-4 анализов; для исследования СОЭ: 2-3 мл цитратной крови; для исследования газов крови: артериальная или венозная кровь с гепарином – 1 мл. 14 Взятие венозной крови облегчается применением вакуумных контейнеров. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута. Для обозначения содержимого с различными добавочными компонентами применяют цветное кодирование закрывающих их пробок (табл. 1). Таблица 1. Добавки в пробирках с цветным кодом [9]. Содержимое пробирки Пустая, без добавок, для сыворотки Гепарин (12-30 Ед/мл) К2 или К3-ЭДТА (1,2 – 2,0 мг/мл) Применение Биохимия, серология Плазма для биохимии Гематология и отдельные химические аналиты в плазме Цитрат натрия (0,105-0,129 моль/л) Коагулологические тесты Фторид натрия (2-4 мг/мл)/ оксалат Глюкоза, лактат калия (1-3 мг/мл) К2-ЭДТА и апротинин Нестабильные гормоны Примечание – Пробирки, содержащие кислоту-цитрат-декстрозу для сохранения клеток и кодируют желтым цветом. Цвет кода Красный / белый Зеленый / оранжевый Лиловый / красный Голубой / зеленый Серый Розовый (АЦД А и В) используют При взятии образца крови из венозного или артериального катетера, через который проводилось вливание инфузионного раствора, катетер следует предварительно промыть солевым раствором в объеме, соответствующем объему катетера, и для исследования не использовать первые 5 мл взятой из катетера крови. Недостаточное промывание катетера может привести к загрязнению образца крови препаратами, вводившимися через катетер. Из катетеров, обработанных гепарином, нельзя брать образцы крови для исследований системы свертывания крови. По окончании забора крови снять жгут, извлечь иглу, прижав к месту венепункции салфетку или ватный шарик с кожным антисептиком. Попросить пациента держать салфетку (ватный шарик) 5 минут, прижимая пальцем второй руки к месту венепункции. При взятии крови из вены локтевого сгиба рекомендуется согнуть руку в локтевом суставе. Пробирки с биологическим материалом (кровью) медицинские сестры подписывают в присутствии пациента (до или после взятия крови) маркером по стеклу/пластику или ручкой на бумажной этикетке пробирки. 15 4. Обзор методов забора крови из вены Существуют три способа взятия венозной крови: иглой, когда кровь самотеком поступает в подставленную пробирку; шприцем; вакуумными системами. Взятие крови иглой – это «традиционный», «открытый» способ с использованием иглы и пробирки. Взятие крови проводится стерильной иглой, под которую подкладывается стерильная салфетка. При этом венозная кровь естественным образом истекает в подставленную пробирку. Преимуществом этого метода является минимальное повреждение форменных элементов крови за счет отсутствия механического повреждения клеток под воздействием поршня шприца и необходимости переливания крови из шприца в пробирку. При этом способе взятия крови иглой высока вероятность попадания крови пациента на руки медицинского персонала. В этом случае руки процедурной сестры могут послужить фактором передачи в распространении возбудителей гемоконтактных инфекций другому пациенту путем контаминации кровью инъекционной ранки. Медицинский работник и сам может заразиться от источника инфекции. Взятие крови с помощью шприца с последующим переносом крови в пробирку. В большинстве случаев использования шприца с иглой следует избегать из-за его недостаточной безопасности для медицинского персонала и возможности гемолиза крови, вызванного двукратным прохождением крови через иглу (забор крови в шприц и перенос ее под давлением в пробирку). Кроме того, в момент переливания крови в пробирку она подвергается воздействию окружающей среды, что приводит к потере стерильности и снижению качества образца. Для взятия проб крови наиболее предпочтительно использовать вакуумсодержащие системы (в т.ч. шприц-пробирки). Этот способ имеет ряд 16 преимуществ, основным из которых является взятие крови непосредственно в закрытую пробирку, предотвращающую любой контакт с кровью пациента. Преимущества использования вакуум-содержащих систем: максимальная безопасность медицинских работников и обследуемых в связи с отсутствием прямого контакта с кровью пациента на всех этапах проведения анализа; стандартизация (взятие образцов проводится по однотипной методике, точное соотношение объема крови количеству реагента и четкая идентификация по цветовому коду и этикетке); удобство и простота процедуры (время взятия крови в одну пробирку всего 5-10 сек., сохраняя возможность быстрого использования двух и более пробирок для разных анализов без повторного введения иглы); забор крови происходит при минимальных неприятных ощущениях и беспокойстве; вакуумные системы для забора крови идеально подходят для обследуемых с тонкими или глубоко находящимися венами; сокращение количества лабораторных ошибок и повторных анализов, производимых из-за некачественного забора крови, ее подготовки, транспортировки и хранения; психологический эффект для персонала и пациентов (безопасность, удобство и быстрота процедуры забора крови делает ее комфортной для пациента, благоприятно сказывается на психологическом климате в процедурном кабинете, повышает трудоспособность персонала и повышает престиж лечебно-профилактического учреждения). 17 4.1. Забор крови из периферической вены с помощью шприца Цель: диагностическая. Показания: назначение врача. Оснащение: одноразовые шприцы емкостью 10-20 мл; стерильные иглы для забора крови; штатив; стерильные ватные тампоны и салфетки; перчатки; маска, защитные очки; 70% раствор этилового спирта; контейнер с ячейками для транспортировки пробирок; клеенчатая подушка; жгут; емкость с дезинфицирующим раствором, нашатырный спирт, аптечка «Анти-ВИЧ». Обязательное условие: медсестра проводит взятие материала, одетая по форме: халат, шапочка, защитные очки, перчатки. Этапы I. Подготовка к процедуре 1. Собрать информацию о пациенте до встречи с ним. Доброжелательно и уважительно представиться ему. Уточнить, как к нему обращаться. Выяснить, проходилось ли ему встречаться с данной манипуляцией; когда, по какому поводу, как он ее перенес. 2. Объяснить пациенту цель и ход предстоящей процедуры (если он с нею незнаком). 3. Получить его согласие. 4. Вымыть руки (гигиенический способ). Обоснование Установление контакта с пациентом. Психологическая подготовка к манипуляции. Соблюдение прав пациента. Обеспечение инфекционной безопасности. 5. Подготовить необходимое оснащение. Достижение эффективного проведения процедуры. 6. Помочь пациенту занять положение (лежа на Обеспечение доступа к месту спине или сидя), при котором хорошо доступна инъекции. предполагаемая область пункции. Попросить пациента освободить ее от одежды. 7. Осмотреть и путем пальпации выбрать Профилактика осложнений. непосредственное место пункции. Примечание: чаще пункция проводится в вены локтевого сгиба, возможно в вены кисти или предплечья. 8. Надеть маску, защитные очки, перчатки. Обеспечение инфекционной безопасности. 18 II. Выполнение процедуры. 9. Подложить под локоть пациента клеенчатую подушку. 10. Наложить жгут в средней трети плеча (на рубашку или марлевую салфетку). Проверить пульс на лучевой артерии. Примечание: 1) у женщин не использовать руку на стороне мастэктомии; 2) свободные концы резинового жгута должны быть направлены вверх, а петля вниз; 3) при применении специальной венозной манжеты защелкнуть клапан и потянуть за свободный конец. 11. Попросить пациента несколько раз сжать и разжать кулак, зажать его. 12. Пропальпировать вену, определяя ее ширину, глубину залегания, направление, подвижность, наличие уплотнений. Примечание: все действия после наложения жгута следует выполнять быстро и последовательно. Обеспечение максимального разгибания конечности в локтевом суставе. Обеспечение доступа к венам локтевого сгиба. Снижение болезненности при наложении жгута. Пульс не должен исчезнуть после наложения жгута. Обеспечение наилучшего наполнения вен кровью. Определение наиболее удобной для пункции вены. Длительный стаз (1 мин.) способен вызвать изменения концентрации белков, электролитов, билирубина, показателей коагулограммы. 13. Обработать перчатки ватным шариком, Обеспечение инфекционной смоченным спиртом. безопасности. 14. Обработать последовательно область Обеспечение инфекционной локтевого сгиба не менее чем двумя шариками, безопасности. смоченными спиртом. Движение шариков осуществлять в одном направлении. Первым шариком обработать площадь локтевого сгиба, вторым – непосредственно место пункции. 15. Взять шприц с иглой в правую руку: Обеспечение фиксации и указательный палец фиксирует канюлю иглы, управления иглой. остальные охватывают цилиндр шприца. 16. Натянуть кожу по ходу выбранной вены Обеспечение техники 2-хбольшим пальцем левой руки к периферии и моментной пункции вены. прижать ее, фиксируя вену. Держа шприц с Можно использовать иглой срезом вверх, пунктировать кожу и одномоментный способ ввести иглу на 1/3 длины параллельно вене. пункции вены. 17. Продолжая левой рукой фиксировать вену, Профилактика выхода иглы слегка изменить направление иглы (примерно из вены или прокола нижней на 15°) и осторожно пунктировать вену, пока не стенки вены. возникнет ощущение «попадания в пустоту». Зафиксировать правую руку со шприцем в данном положении. 19 18. Убедиться, что игла в вене: перенести левую руку на поршень и потянуть его на себя – в шприце должна появиться кровь. 19. Продолжая медленно тянуть на себя поршень, набрать в шприц необходимое количество крови. Профилактика осложнений. Слишком быстрое всасывание крови в шприц и использование игл слишком большого диаметра вызывает Следить за общим состоянием пациента. частичный гемолиз. 20. Попросить пациента разжать кулак. Восстановление венозного Развязать жгут, потянув за один из свободных кровотока. концов. Примечание: при использовании венозной манжеты нажать левой рукой на клапан замка. 21. Прижать, не надавливая на вену, к месту Профилактика осложнений. пункции шарик, смоченный спиртом, извлечь иглу и согнуть руку пациента в локтевом суставе. Попросить пациента держать руку согнутой не менее 5 минут. 22. Осторожно медленно выпустить кровь из Профилактика гемолиза шприца по стенке в пробирку. крови. Поместить шприц в лоток для использованного Обеспечение инфекционной материала. безопасности. Закрыть пробирку пробкой. 23. Спросить пациента о самочувствии. Обеспечение инфекционной Убедиться, что наружное кровотечение в безопасности. области пункции отсутствует. Забрать шарик, фиксирующий место пункции, и поместить его в дезраствор. 24. Обеспечить доставку крови в лабораторию. Обеспечение своевременной доставки в лабораторию. III. Окончание процедуры. 25. Подвергнуть дезинфекции использованный Обеспечение инфекционной инструментарий с последующей утилизацией безопасности. одноразового. 26. Снять перчатки и поместить их в емкость для дезинфекции. 27. Вымыть и осушить руки (гигиенический уровень). 28. Сделать запись о проведении процедуры и Обеспечение реакции пациента в медицинской преемственности документации. После получения результатов сестринского ухода. исследования вклеить бланк в карту стационарного больного. 20 4.2. Вакуумные системы для забора крови Вакуумные системы для забора крови представляют собой современный метод, применяемый в лечебных учреждениях. Вакуумные системы для забора крови называют закрытыми, потому, что кровь из вены через специальную двухстороннюю иглу попадает в герметично закупоренную стерильную пластиковую или стеклянную пробирку с подготовленным на заводе дозированным вакуумом. Затем эта пробирка с материалом отправляется в лабораторию, где используется непосредственно в анализаторах. Наиболее распространены вакуумные системы: Vacutainer, Vacuette, Improvacuter, Neovac и т.д. Вакуумная система состоит из трех основных компонентов: стерильная пробирка с дозированным содержанием вакуума; иглодержатель; специальная двусторонняя игла с клапаном безопасности. Для взятия крови игла вкручивается в держатель, после чего осуществляется процедура венепункции. Далее к системе игла-держатель последовательно присоединяются вакуумные пробирки. Кровь под действием вакуума втягивается через иглу из вены напрямую в пробирку и смешивается с химическим реактивом. Тщательное дозированный объем вакуума обеспечивает точное соотношение кровь-реагент в пробирке. Рис. 3. Система для взятия крови BD Vacutainer. 21 Держатели для вакуумных систем выпускаются в нескольких вариантах. Они могут быть как одноразовые, так и многоразовые. К многоразовым держателям, не имеющим контакта с кровью пациента, относятся короткая и длинные версии стандартного держателя (рис. 4, а) и держатель (б) с облегченным сбросом иглы. Последний позволяет после использования простым нажатием кнопки сбрасывателя снять иглу, что избавляет от необходимости её выкручивать. Держатель со встроенным люер-адаптером (рис. 4, в) является одноразовым и позволяет использовать стандартные иглы и катетеры без дополнительных аксессуаров. Благодаря смещенному центру и подыгольному конусу, расположенному эксцентрично, держатель позволяет вводить иглу в вену под меньшим (около 10º) углом. Камера, имеющаяся в держателе, при попадании иглы в вену сразу наполняется кровью. Все эти преимущества позволяют проводить взятие крови у пациентов с проблемными венами (педиатрия, пожилые пациенты, реанимация). Специальный держатель, предназначенный для работы с потенциально зараженными пациентами (рис. 4, г), автоматически убирает иглу внутрь корпуса при закрытии крышки держателя, сводя риск ранения персонала к минимуму. а б в г Рис. 4. Держатели (а, б – многоразовые, в, г – одноразовые): а – стандартный, б – с облегченным сбросом иглы после использования, в – со встроенным люер-адаптером (стерильный, в индивидуальной упаковке), г – для работы с потенциально зараженными пациентами. 22 Широкий выбор аксессуаров позволяет скомпоновать удобную вакуумную систему, максимально соответствующую как физио-логическим и анатомическим особенностям пациента, так и требованиям подготовки проб для любого анализа. Например, при «трудных» венах берут специальную иглубабочку; если уже установлен центральный венозный катетер, используют луер-адаптер; для длительной транспортировки и хранения подбираются пробирки с соответствующими консервантами; во избежание смешения разделенных компонентов крови после центрифугирования применяют пробирки с гелем и т.п. Вариации вакуумной системы для забора крови 1) Вакуумная пробирка, держатель, люер-адаптер и односторонняя игла. 2) Вакуумная пробирка, держатель, люер-адаптер и игла-бабочка. 3) Вакуумная пробирка, держатель с иглой-клапаном, игла-бабочка. 23 4.2.1. Забор крови из периферической вены в вакуумные контейнеры Цель: диагностическая. Оснащение: венозный жгут, вакуумная система для забора крови: вакуумные пробирки, держатель, двусторонняя игла (2-3); стерильные ватные тампоны; перчатки; контейнер для дезинфекции одноразового инструментария; лоток; ватные шарики, кожный антисептик (70% раствор этилового спирт); контейнер с ячейками для транспортировки пробирок; аптечка Анти-ВИЧ, нашатырный спирт. Обязательное условие: медсестра производит взятие материала, одетая по форме: халат, шапочка, маска, защитные очки, перчатки. Этапы I. Подготовка к процедуре 1. Собрать информацию о пациенте до встречи с ним. Доброжелательно и уважительно представиться ему. Уточнить, как к нему обращаться. Выяснить, приходилось ли ему встречаться с данной манипуляцией; когда, по какому поводу, как он ее перенес. 2. Объяснить пациенту цель и ход предстоящей процедуры (если он с нею незнаком). 3. Получить его согласие. 4. Вымыть руки (гигиенический способ), осушить. 5. Подготовить необходимое Оформить направление. 6. Надеть маску, защитные очки. Обоснование Установление пациентом. контакта с Психологическая подготовка к манипуляции. Соблюдение прав пациента. Обеспечение инфекционной безопасности пациента и персонала. оснащение. Достижение эффективного проведения процедуры. Обеспечение инфекционной безопасности пациента и персонала. II. Выполнение процедуры 7. Помочь занять удобное положение пациенту Обеспечение доступа к месту (лежа на спине или сидя), при котором хорошо инъекции. доступна предполагаемая область пункции. Попросить пациента освободить ее от одежды. 8. Путем осмотра и пальпации определить Профилактика осложнений. непосредственное место пункции. 24 9. Подложить под локоть клеенчатую подушку. Обеспечение максимального разгибания конечности в локтевом суставе. 10. Надеть перчатки. Обеспечение инфекционной безопасности. 11. Наложить венозную манжету в средней Обеспечение доступа к венам трети плеча, защелкнуть на ней клапан и локтевого сгиба. Снижение потянуть за свободный конец до остановки болезненности при наложении венозного кровотока (пульс на лучевой жгута. артерии не изменяется!). Профилактика образования Примечание: можно наложить одноразовый гематом. жгут. 12. Попросить пациента несколько раз сжать и Обеспечение наилучшего разжать кулак, а затем зажать его. наполнения вен кровью. Поступательными движениями от периферии к центру помассировать предплечье пациента. Длительный стаз (1 мин.) Пропальпировать вену, определяя ее ширину, способен вызвать изменения глубину залегания, направление, подвижность, концентрации белков на 5наличие уплотнений. 15%, газов крови, электроПримечание: все действия после наложения литов (К, Са), билирубина, жгута следует выполнять быстро и показателей коагулограммы. последовательно. 13. Обработать перчатки ватным шариком, Обеспечение инфекционной смоченным спиртом. безопасности. 14. Обработать последовательно область Обеспечение инфекционной локтевого сгиба ватными шариками, безопасности пациента и смоченными спиртом. Движение шариков персонала. осуществлять в одном направлении. Первым шариком обработать площадь локтевого сгиба, вторым – непосредственно место пункции. 15. Взять иглу левой рукой за цветной Обеспечение безопасной колпачок (зеленый, желтый, черный), правой – технологии. вывернуть и снять белый защитный колпачок. 16. Ввернуть в иглодержатель освободившийся Профилактика осложнений в конец иглы в резиновом чехле и завинтить его процессе забора крови. до упора. Снять цветной защитный колпачок с другого Подготовка к пункции. конца иглы. 17. Зафиксировать выбранную вену большим Обеспечение технологии пальцем левой руки: потянуть кожу к выполнения процедуры. периферии по ходу вены и прижать ее. 18. Ввести систему держатель-игла в вену Обеспечение технологии пациента как это делается при обычной выполнения процедуры. процедуре взятия крови шприцом: 25 держа иглу срезом вверх, не меняя положения держателя в руке, под углом до 30° пунктировать кожу и ввести иглу на 1/3 длины параллельно вене; продолжая левой рукой фиксировать вену, слегка изменить направление иглы (примерно на 15°) и осторожно пунктировать вену, пока не возникнет ощущение «попадания в пустоту». В этот момент кровь не проходит по игле, так как второй конец закрыт резиновой мембраной. Можно использовать одномоментный способ пункции вены. 19. Зафиксировать держатель левой рукой, правой взять пробирку и вставить ее крышкой в держатель. 20. Удерживать выступы держателя указательным и средним пальцем правой руки, большим пальцем надеть пробирку на иглу до упора. Обеспечение техники 2-хмоментной пункции вены. Убедиться, что игла в вене можно по появлению крови в канюле иглы. Профилактика выхода иглы из вены или прокола ее нижней стенки. Игла прокалывает резиновую мембрану и резиновую пробку в крышке пробирки – образуется канал между пробиркой с вакуумом и полостью вены. 21. Ослабить венозную манжету, нажав левой рукой на клапан замка или ослабить жгут, как только кровь начнет поступать в пробирку. 22. Извлечь пробирку из держателя после Кровь поступает в пробирку заполнения ее до необходимого объема. до тех пор, пока не компенсируется созданный в пробирке вакуум. 23. Перемешать содержимое пробирки (при Обеспечение достоверности использовании пробирок с добавками), результатов исследования. аккуратно переворачивая ее нежное От момента наложения количество раз и поставить в штатив. манжеты до перемешивания крови в пробирке должно пройти не более 2 минут. 24. Вставить в держатель следующую Резиновая мембрана при пробирку. Повторить действия с п. 22, меняя снятии пробирки с иглы пробирки необходимое число раз. возвращается в исходное Извлечь последнюю заполненную пробирку. положение и перекрывает ток крови по игле. 25. Попросить пациента разжать кулак. Восстановление венозного Развязать жгут, потянув за один из свободных кровотока. концов или нажав на клапан замка. 26 26. Прижать к месту пункции шарик, смоченный спиртом, и извлечь держатель с иглой из вены. Закрыть иглу сразу же защитным чехлом держателя или иглы. 27. Поместить иглу с держателем в специальный контейнер. Попросить больного держать руку согнутой в суставе не менее 5 минут. 28. Поместить ватный шарик по истечении положенного времени в контейнер с дезинфектантом или попросить пациента сделать это самостоятельно. 29. Спросить пациента о самочувствии. Удостовериться, что он чувствует себя нормально. Обеспечение инфекционной безопасности, профилактика травм. Профилактика осложнений. Обеспечение инфекционной безопасности. Профилактика и своевременная диагностика осложнений, обеспечение психологического комфорта пациента. 30. Промаркировать пробирки, установить их в Обеспечение доставки в контейнер с ячейками и отправить в лабораторию. лабораторию. Обеспечение инфекционной III. Окончание процедуры. 31. Снять и протереть очки, перчатки и маску безопасности (утилизация и замочить в дезинфицирующем растворе. дезинфекция вакуумных 32. Утилизировать использованный инстру- систем подобна одноразовым ментарий. шприцам). 33. Вымыть и осушить руки (гигиенический Обеспечение инфекционной уровень). безопасности. 34. Сделать запись о проведении процедуры и Обеспечение преемственности реакции пациента в медицинской сестринского ухода. документации. После получения результатов вклеить бланк в карту стационарного больного. 4.2.2. Вакуумные пробирки: виды, цветовая кодировка Вакуумные пробирки представляют собой основной компонент для взятия венозной крови. Пробирки производятся из стекла или специального материала полиэтилен-терфталата (пластика и стекла), который отличается особой прочностью и препятствует газообмену. Они изготовляются и стерилизуются в заводских условиях, предназначены для одноразового применения. Пробирки выпускаются различных объемов и размеров и уже 27 содержат все реагенты и добавки, необходимые для проведения анализа. Вакуум в пробирках обеспечивает взятие необходимого объёма крови и, соответственно, позволяет гарантировать соблюдение правильного соотношения крови и реагента. Пробирка состоит из трех основных частей: непосредственно пробирка; безопасная крышка с идентификационным кольцом; этикетка. Вакуумные пробирки с наполнителем (не реагентом) содержат в себе гель либо гранулы, и используются в случаях, когда требуется разделить составляющие крови. Гель обволакивает сгущенную кровь, обособляя ее от сыворотки, гранулы же превращаются в своеобразный барьер, работая аналогично гелю. Для некоторых видов анализов добавлен реагент (литий, гепарин, ЭДТА). Вакуумные пробирки закрываются резиновыми пробками или специальными крышками Hemogard, которые обеспечивают безопасность лаборанта при работе с пробой. Цвет крышки указывает на вид наполнителя и назначение пробирки. Цветовая кодировка пробирок соответствует международному стандарту ISO 6710. Пробирки для получения сыворотки Сыворотка крови – наиболее часто используемый материал в клиникодиагностических лабораториях. Для получения сыворотки кровь должна полностью свернуться. Пробирки для получения сыворотки бывают двух видов – стеклянные и пластиковые. В стеклянных пробирках функцию активатора свертывания выполняет непосредственно само стекло, так как в его состав входит кремний, ускоряющий процесс коагуляции. В пластиковые пробирки для ускорения процесса коагуляции добавляются активаторы свертывания – кремнезем и/или тромбин. Пробирки могут содержать также специальный гель либо гранулы для четкого отделения сыворотки от сгущенной крови. 28 Стеклянные пробирки без наполнителя и пластиковые пробирки с кремнеземом для исследования сыворотки различают по красной крышке (рис. 5, а). Пробирки для получения сыворотки с тромбином отличаются окрашенностью крышки или резиновой пробки в оранжевый цвет (рис. 5, б, в). Тромбин является природным активатором свертывания и значительно сокращает время образования сгустка (3-5 мин.). Пробирки с тромбином применяются для ускоренного получения сыворотки, поэтому чаще всего используются для экспресс-анализов, когда требуется срочно получить сведения о составе крови пациента, к примеру, в реанимационной палате и т.д. Производятся стеклянные пробирки, в которых содержится только тромбин, и пластиковые пробирки с комплексным наполнителем – тромбин с кремнеземом. Также производятся пробирки с тромбином и гелем, время свертывания крови в которых 3-5 минут. После заполнения пробирку с тромбином следует обязательно перемешать путем переворачивания 5-6 раз. Полное свертывание крови происходит за 5 минут. Пробирки с гелем для получения и отделения сыворотки производятся только из пластика, и их можно отличить по желтой крышке (рис. 5, г). С целью лучшего отделения сгустка крови от сыворотки в пробирки добавлен гель. После взятия пробы пластиковые пробирки следует перемешать путем переворачивания 5–6 раз. а б в Рис. 5. Пробирки для получения сыворотки: а – с активатором свертывания (пластиковые); б – с тромбином; в – с тромбином и гелем; г – с гелем. г 29 Пробирки для исследования плазмы Для получения плазмы в пробирках используется литиевая или натриевая соль гепарина, распыленная на внутреннюю поверхность пробирки. Гепаринизированную плазму обычно используют для биохимического и иммунологического анализа. Основное действие гепарина – торможение перехода растворимого фибриногена в нерастворимый фибрин вследствие блокирования активности тромбина. Пробирки без геля с гепарином (гепарин лития или гепарин натрия) отличаются зеленым цветом крышки. Гепарин лития используется для клинических анализов крови, гепарин натрия – при подборе дозы и мониторинге терапии препаратами лития. Пробирки с гепарином и разделительным гелем для получения плазмы имеют светло-зеленую крышку, в них используется только литиевая соль гепарина. Сразу же после заполнения пробирки и извлечения ее из держателя пробу необходимо тщательно перемешать путем переворачивания 8-10 раз. Центрифугирование следует производить сразу после взятия крови. а б Рис. 6. Пробирки для получения плазмы: а – с гепарином; б – с гепарином и гелем. Пробирки для коагулологических исследований При взятии образцов для исследования системы гемостаза стандартным антикоагулянтом является цитрат натрия. Его механизм действия основан на связывании ионизированного кальция крови, что ведет к обратимому блокированию процесса коагуляции. Выпускаются как стеклянные, так и пластиковые пробирки с крышкой голубого цвета (рис. 7). Для предотвращения испарения цитрата натрия 30 пластиковые пробирки изготовляются по особой технологии из разного рода пластика и имеют двойные стенки. Очень важно соблюдать правильное соотношение крови к антикоагулянту как 9:1. Недостаток цитрата в пробе ведет к образованию микросгустков и коагуляции пробы, а избыток – к искажению результатов за счет связывания кальция из реагентов. При взятии пробы в несколько пробирок у одного пациента пробирка с цитратом должна заполняться до пробирки с активатором свертывания. Сразу после взятия образца пробирку необходимо аккуратного перемешать 4-5 раз. Для проведения некоторых коагулологических анализов также могут использоваться пробирки с комплексным наполнителем CTAD (Цитрат натрия/Теофиллин/Аденозин/Дипиридамол). Рис. 7. Пробирки с цитратом натрия. Пробирки для гематологических исследований В качестве исследований антикоагулянта цельной крови в пробирках используется для ЭДТА гематологических (калиевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты). Противосвертывающее действие ЭДТА обеспечивается за счет связывания ионов кальция в крови. В пробирках со светло-лиловой (сиреневой) крышкой антикоагулянт находится в виде раствора или порошка, распыленного на внутреннюю поверхность пробирок (рис. 8). Для обеспечения правильного соотношения крови и антикоагулянта пробирка с ЭДТА должна заполняться точно до указанного объема. Недостаток ЭДТА в пробе приводит к ее коагуляции, а избыток – к сморщиванию клеток крови и искажению таких клинических показателей, как гематокрит, размер клеток и т.д. 31 Сразу после взятия крови в пробирку с ЭДТА ее необходимо тщательно перемешать, переворачивая 8-10 раз. Рис. 8. Пробирки для гематологических исследований цельной крови. Пробирки для специальных тестов Пробирки для исследования глюкозы Для стабилизации глюкозы используются пробирки с серой крышкой и следующими наполнителями: фторид натрия и оксалат калия, йодоацетат и лития гепарин, фторид натрия и ЭДТА. Пробирки должны заполняться полностью до указанного на них объема. После взятия пробы пробирки следует перемешать, переворачивая 6-8 раз. Поскольку пробирки с фторидом/оксалатом особенно подвержены гемолизу, их необходимо перемешивать с особой осторожностью. Рис. 9. Пробирки для исследования глюкозы. Пробирки для исследования микроэлементов Микроэлементы находятся в крови в крайне малых количествах, поэтому используемые материалы должны исключать возможность загрязнения образца инородными примесями. Это возможно при применении специальных пробирок с крышкой синего цвета (рис.10). Пробирки предназначены для исследования цинка, железа, меди, кальция, селена в крови; а также токсикологических исследований свинца, кадмия, мышьяка, сурьмы. Взятие образца и пробоподготовка производятся в соответствии с используемым наполнителем: они могут быть с активатором свертывания, К232 ЭДТА или гепарином натрия или без наполнителя. При анализе сыворотки на наличие микроэлементов в следовых количествах не рекомендуется использовать стандартные пробирки с красной крышкой, так как они содержат повышенную концентрацию цинка и других микроэлементов. При взятии крови у одного пациента сразу в несколько вакуумных пробирок необходимо пробирку для микроэлементов следует заполнять последней для снижения вероятности загрязнения пробы через иглу. Рис. 10. Пробирки для исследования микроэлементов. Пробирки для исследования нестабильных гормонов белковой природы Для сохранения нестабильных ферментов и гормонов белковой природы в пробирках вместе с антикоагулянтом ЭДТА используется ингибитор протеиназы – апротинин. Он применяется для стабилизации таких гормонов и ферментов, как ренин, адренокортикотропный гормон, глюкогон, соматостин, кальци-тонин, остеокальцин, b-эндорфин, секретин, нейротензин, вазоактивный интестинальный пептид. Апротинин содержится в пробирках объемом 5-10 мл с розовой пробкой. Пробирки для определения группы крови с розовой крышкой Эти пробирки используются как для определения группы крови, так и для перекрестной пробы при переливании крови. Выпускаются без наполнителя, с кремнеземом (активатор свертывания) или К2ЭДТА. Специальная этикетка на пробирке удобна для записи информации о доноре и пациенте. Рис. 11. Пробирки для определения группы крови. 33 Пробирки для стабилизации цельной крови (для иммуногематологии) Пробирки для стабилизации цельной крови содержат комбинированный наполнитель ACD, состоящий из активного антикоагулянта тринатрия цитрата, лимонной кислоты, которая обеспечивает буферный раствор с тринатрия цитратом, и декстрозы, являющейся питательным веществом для эритроцитов. Стеклянные пробирки с ACD можно отличить по светло-желтой крышке, они обычно используются в отделениях иммунной гематологии для анализа поверхностных антигенов лейкоцитов (HLA-типирование, некоторые приложения проточной цитометрии, исследование функций лейкоцитов и специальные иммунологические тесты). В пробирках наполнитель ACD присутствует в виде раствора (тип А или В). Цельная кровь смешивается с образцом в соотношении 1:6 (1 часть ACD обеих концентрации к 6 частям образца). Сразу же после заполнения пробирки с ACD пробу необходимо тщательно перемешать путем переворачивания 8-10 раз. Рис. 12. Стеклянные пробирки с ACD для иммуногематологии. Пробирки для измерения СОЭ по методу Вестергрена Система для определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ) по методу Вестергрена состоит из вакуумных пробирок для взятия венозной крови и штатива с градуированной шкалой. Стерильные стеклянные пробирки, закрытые черной крышкой Hemogard, содержат раствор цитрата натрия. При полном заполнении пробирки кровью (5,2 мл) достигается соотношение крови и антикоагулянта, равное 4:1. Штатив рассчитан на 10 пробирок, каждая ячейка снабжена механизмом, с помощью которого совмещается уровень пробы в пробирке с нулевой 34 отметкой шкалы штатива. Измерение СОЭ проводится в закрытой первичной пробирке, при этом пробу не нужно переливать и дополнительно разбавлять. Хранить образец до анализа нужно при комнатной температуре, вдали от солнечного света и отопительных приборов. Анализ необходимо провести в течение 6 часов после взятия пробы. Для этого необходимо пробирка помещается в специальный штатив, стоящий на ровной горизонтальной поверхности. В течение всего времени проведения теста штатив должен оставаться неподвижным. Далее совмещают нулевую метку с мениском образца и по истечении 60 минут зафиксируют показатели СОЭ по градуированной шкале штатива между осевшими эритроцитами и плазмой. Рис. 13. Система BD Seditainer для определения СОЭ по методу Вестергрена. Пробирки для проведения анализов методами молекулярной диагностики Пробирки для получения плазмы и проведения анализов методами молекулярной диагностики Эти пластиковые стерильные пробирки используются для взятия крови, пробоподготовки, транспортировки и хранения образца неразбавленной плазмы. Пробирки различаются по крышке жемчужно-белого цвета и применяются для определения вирусной нагрузки при ВИЧ-инфекции и вирусных гепатитах, а также для проведения анализов методами молекулярной диагностики (например, ПЦР) и идеально подходят для хранения и транспортировки плазмы. 35 Пробирки содержат антикоагулянт К2ЭДТА в виде порошка, распыленного на стенках пробирки, и полиэстерный гель, позволяющий отделить плазму от клеток крови во время центрифугирования. Рис. 14. Пробирки для отделения плазмы с К2ЭДТА и гелем (молекулярная диагностика). Сразу же после заполнения пробирки и извлечения ее из держателя кровь необходимо тщательно перемешать с антикоагулянтом, аккуратно переворачивая 8-10 раз. Образец до центрифугирования следует хранить при комнатной температуре не более 2-х часов, вдали от солнечного света и отопительных приборов. Плазму в пробирках можно хранить в замороженном виде при -70°C. В пробирках стабильность РНК ВИЧ и вируса гепатита С сохраняется в течение 72 часов при комнатной температуре. Пробирки для выделения мононуклеарных клеток крови (моноцитов и лимфоцитов) Пробирки позволяют отделить мононуклеарные клетки периферической крови в один прием, причем в одной первичной пробирке, внутренние стенки которой покрыты силиконом для минимизации неспецифической активации клеток. Пробирки выпускаются двух видов: с сине-черной пестрой пробкой (пробирки с натрия цитратом); с красно-зеленой пестрой пробкой (пробирки натрия гепарином). Пробирки содержат антикоагулянт разделительный гель и специальную жидкость фиколл, создающую градиент плотности мононуклеаров. Данные пробирки предназначены для: 36 для разделения исследования количественных и функциональных характеристик мононуклеарных клеток, исследования их активности, обнаружения злокачественных новообразований, анализа генетических маркеров, исследование провирусной ДНК, РНК вирусов (в т.ч. ВИЧ). Сразу же после извлечения пробирки с кровью из держателя ее необходимо аккуратно перевернуть 8–10 раз. Образец до центрифугирования следует хранить при комнатной температуре не более 2-х часов, вдали от солнечного света и отопительных приборов. Рис. 15. Пробирки для выделения мононуклеарных клеток крови. 4.2.3. Правило перемешивания Сразу после заполнения и извлечения пробирки из держателя ее нужно аккуратно перевернуть несколько раз (количество раз определяется типом наполнителя) на 180° для смешивания пробы с наполнителем (рис. 16). В плохо перемешенной пробе образуются микросгустки, ведущие к искажению результатов тестов, а также к поломкам лабораторных Рис. 16. Правило перемешивания. анализаторов вследствие закупорки пробозабирающих зондов. Интенсивное перемешивание пробы, встряхивание может вызвать коагуляцию и гемолиз. 37 4.2.4. Последовательность заполнения пробирок Таблица 2. Последовательность заполнения вакуумных пробирок. Цветовой код Стеклянные красный голубой черный Пластиковые Число перемеши- Область применения ваний Исследования сыворотки в клинической химии, серологии, иммунологии зеленый Исследование коагуляции Цитрат натрия CTAD 8-10 раз Измерение СОЭ Цитрат натрия 5-6 раз Исследования сыворотки в Активатор клинической химии, свертывания серологии, иммунологии 5-6 раз 8-10 раз 8-10 раз сиреневый розовый серый синий Без наполнителя 3-4 раза красный желтый Химические наполнители 8-10 раз 8-10 раз 8-10 раз Активатор Исследования сыворотки в свертывания и клинической химии, разделительсерологии, иммунологии ный гель Гепарин; Исследования плазмы в Гепарин и клинической химии, разделительиммунологии ный гель Гематологические исследования цельной ЭДТА крови Без Пробирки для перекрестной наполнителя; пробы (при переливании ЭДТА; крови) Активатор свертывания Фторид Na/ Оксалат калия; Исследования глюкозы Li-йодоацетат/ Li-гепарин Без Исследования наполнителя; микроэлементов Na-гепарин; ЭДТА 38 4.3. Система взятия венозной крови S-Monovette (фирма Sarstedt, Германия) S-Monovette – это закрытая система взятия венозной крови, которая предоставляет возможность выбора техники взятия крови в зависимости от индивидуальных особенностей пациента или состояния его вен. Система состоит из обоюдоострой иглы и герметично закрытого шприца, который трансформируется в транспортный контейнер и центрифужную пробирку. Данная система позволяет использовать шприцевой или вакуумный метод взятия крови, или комбинировать преимущества обеих методов. Как правило, шприцевой метод взятия крови находит применение при заборе пробы крови у пациентов с «трудными» венами, например, в педиатрии, геронтологии, онкологии. В случае многократного взятия крови первый образец может быть взят шприцевым способом. Высоко прозрачная головка крышки обеспечивает надежный визуальный контроль пункции вены. Забор каждой последующей пробы крови проводится с использованием любого из перечисленных выше способов в зависимости от состояния вен пациента. 4.3.1. S-Monovette – аспирационная техника 1. S-Monovette и игла легко собираются непосредственно перед взятием крови. Игла соединяется с S-Monovette 3-х замковым механизмом захвата. Вскройте упаковку иглы Соедините иглу с пробиркой и S-Monovette, надорвав ее по линии зафиксируйте её легким поворотом отрыва. по часовой стрелке. 39 Снимите с иглы защитный колпачок. Внимание! Фиксировать иглу S-Monovette легким поворотом по часовой стрелке следует только непосредственно перед пункцией вены. 2. Затем проводят пункцию вены. Большим пальцем свободной руки натяните кожу и зафиксируйте вену. Предупредите пациента о начале процедуры и введите иглу в вену. Ослабьте жгут и медленно оттягивайте поршень. Подождите, пока кровь не перестанет поступать в пробирку. 3. Оттягивая поршень, шприц-пробирка наполняется кровью. 4. После заполнения кровью, шприцпробирку отсоединяют от иглы легким поворотом против часовой стрелки. В случае взятия нескольких образцов крови, последующий S-Monovette соединяют с иглой, расположенной в вене. 5. Когда последний S-Monovette отсоединен от иглы, снимается жгут и игла выводится из вены. 6. После завершения процедуры взятия крови максимально оттяните поршень до характерного щелчка и отломите рукоятку. Получается готовый для транспортирования и центрифугирования контейнер (пробирка) с кровью и при необходимости наполнителем. 40 а б в Рис. 17. Шприцевой метод взятия крови системой S-Monovette. 4.3.2. S-Monovette – вакуумная техника При вакуумной технике перед взятием пробы игл уже должна быть в вене. Для взятия первой пробы системой S-Monovette рекомендуется использовать аспирационную технику. 1. Непосредственно перед проведением процедуры взятия пробы крови необходимо S-Monovette сделать вакуумной пробиркой. Для этого поршень отводится в конечное положение (до характерного щелчка) и отламывается рукоятка. 2. Провести пункцию вены иглой S-Monovette. Благодаря защитной мембране кровь из иглы не вытекает. 41 3. Подсоедините пробирку S-Monovette с вакуумом к игле, расположенной в вене, и зафиксируйте ее поворотом по часовой стрелке. Под действием вакуума кровь поступает в пробирку. Подождите, пока кровь заполнит пробирку, а затем снимите ее с иглы легким поворотом против часовой стрелки. 4. В случае взятия нескольких образцов крови, S-Monovette отсоединяют, а к закрытой мембраной игле подсоединяют следующий S-Monovette. 5. После завершения взятия крови и отсоединения последнего SMonovette, снимается жгут и игла извлекается из вены. а б в Рис.18. Вакуумный метод взятия крови системой S-Monovette. 4.3.3. Области применения S-Monovette Система S-Monovette, как и вакуумные системы, имеет широкий диапазон шприц-пробирок и обеспечивающий эффективное центрифугировании наполнителей: и коагулирующие разделение транспортировке; факторы сыворотки гепарин и + сгустка (литиевая гель, при соль); трехзамещенная калиевая соль ЭДТА; фторид натрия, обеспечивающий постоянство уровня глюкозы в образце в течение 24 часов при комнатной температуре; цитрат натрия для исследования гемостаза (табл. 3). 42 Таблица 3. Виды и цветовая кодировка шприц-пробирок S-Monovette. Цветовой код Реактив Применение Активатор свертывания Клиническая биохимия, специальные анализы Активатор свертывания + гель Клиническая биохимия, серология (только стандартная диагностика) Литий гепарин Получение плазмы биохимии, серологии ЭДТА К Гематология (например, гемоглобин, гематокрит, эритроциты, лейкоциты) Цитрат натрия (1:9) Цитрат натрия (1:4) Фторид натрия серология, для клинической Коагулологические тесты (например, время по Квику, частичное тромбопластиновое время, тромбоцитарное звено, фибриноген) Определение скорости оседания эритроцитов по методу Вестергрена или с помощью системы S-Sedivette. Определение уровня глюкозы (стабильность в течение 24 часов) Последовательность взятия проб крови Гемокультура Цельная кровь Проба с цитратом Проба с гепарином Проба ЭТДА с Проба с Фторидом 4.3.4. Переходники для S-Monovette Мультиадаптер Используется для взятия крови из соединений типа Луер (постоянный катетер, игла-«бабочка», трехходовый краник и др.) 43 Необходимо помнить о том, что если пациенту перед взятием пробы крови проводилась инфузия, первая набранная пробирка S-Monovette не должна использоваться. Мембранный адаптер Используется для взятия проб крови с помощью систем, имеющих выход типа «Луер» (например, Monovette для газов крови), через иглу S-Monovette, которая уже находится в вене. Игла S-Monovette Multifly Игла Multifly с мультиадаптером используется при пункции тонких вен. При использовании этой иглы необходимо учитывать возможность попадания воздуха, содержащегося в удлинителе бабочки, в первую пробирку SMonovette. Это приводит к нарушению соотношения реагента и пробы крови, что существенно влияет на результат анализа реакции оседания эритроцитов и свертывания крови. Поэтому первая набранная пробирка не используется. Особенности использования переходника Multifly После забора крови, удерживая защитный колпачок иглы за нижний край большим пальцем сверху и указательным пальцем снизу, удалите иглу Multifly из вены. Зафиксируйте удлинитель бабочки, слегка прижав его к ладони, и наденьте защитный колпачок на иглу, продвигая его вдоль иглы так, чтобы было видно и слышно, что игла зафиксировалась в защитном колпачке. После активации предохранительного механизма поместите закрытую иглу Multifly в специальный контейнер для отходов. 44 Безопасная игла Safety-Needle После взятия крови отсоедините последнюю пробирку S-Monovette от безопасной иглы Safety-Needle и извлеките иглу из вены. Удерживая иглу за переходник, поместите защитный колпачок иглы на устойчивую плоскую поверхность и слегка прижмите ее так, чтобы было видно и слышно, что она зафиксировалась в защитном колпачке иглы. После активации защитного механизма поместите закрытую безопасную иглу в специальный контейнер для отходов. 5. Возможные проблемы и осложнения, сопутствующие венепункции Во время проведения забора крови могут возникнуть проблемы, связанные с «плохим» состоянием вен, проколом вены или изменением положения иглы. Медицинская сестра должна быть готова к решению этих потенциальных проблем. Перед пункцией следует тщательно подбирать вены с хорошим наполнением. В случаях, когда это невозможно, используйте комплект с иглой«бабочкой» (Multifly). При проколе вены немного потяните иглу на себя. Если после предпринятого действия кровь не поступает в пробирку, следует вывести иглу. К местным осложнениям венепункции относятся: гематома – кровоизлияние в мягкие ткани; флебит – воспаление вены в месте венепункции (признаки: боль, уплотнение, гиперемия по ходу вены); повреждение нерва в результате образовавшейся гематомой; 45 его укола или сдавления воспалительные явления мягких тканей в месте венепункции – инфильтрат, абсцесс, некроз кожи. К ранним осложнениям относятся гематома и коллапс (обморок). Избежать гематомы можно созданием в месте прокола адекватного давления, наложив тугую повязку. В случае обморока пациента необходимо уложить на кушетку, дать понюхать раствор нашатырного спирта и вызвать врача. К поздним общим осложнениям венепункции относятся сепсис, являющийся потенциально опасным осложнением для жизни пациента. Отдаленными осложнениями, связанными с нарушением правил асептики, являются также парентеральные гепатиты, ВИЧ-инфекция. Количество и тяжесть осложнений может быть снижена за счет: хорошей техники венепункции; правильного выбора места венепункции; соблюдения правил асептики и антисептики; применения давящих повязок на месте венепункции; использование другой руки при повторной попытке провести венепункцию (повторное наложение жгута на ту же руку может привести к увеличению гематомы). 6. Особенности соблюдения противоэпидемического режима при взятии венозной крови путем венепункции Одноразовые шприцы и иглы, вакуумные системы для взятия крови, используемые в учреждениях здравоохранения, после проведения процедур относятся к медицинским отходам, потенциально опасным в отношении распространения инфекционных заболеваний, передаваемых с кровью, и являются медицинскими отходами классов Б (или В). Мероприятия по обеззараживанию и утилизации одноразовых вакуумных систем для взятия крови должны проводиться в соответствии с требованиями санитарных правил и иных нормативных правовых актов Российской Федерации. 46 После проведения венепункции с помощью вакуумных систем использованные иглы сбрасываются в специальные контейнеры (для игл, для одноразовых держателей). Для безопасного снятия иглы со шприца или держателя необходимо использовать бесконтактные способы, например, снятие иглы с держателя при помощи специального упора на контейнере, позволяющего легко выкрутить иглу одной рукой без риска ранения. После дезинфекции весь одноразовый инструментарий, контактирующий с кровью, утилизируются. Химический метод дезинфекции двусторонних игл не применяется, так как нет безопасного способа заполнить канал иглы дезинфицирующим раствором после использования одноразовой вакуумной системы для взятия крови. При их применении используют термические методы дезинфекции (без предварительной дезинфекции игл химическим методом) с последующим удалением отходов вместе с контейнерами. Весь использованный во время манипуляции материал необходимо продезинфицировать. Чистые многоразовые держатели после контакта с кожей пациента и руками персонала обеззараживаются в любом дезинфицирующем растворе согласно инструкции по его применению. Однако для профилактики распространения гемоконтактных инфекций рекомендуется использовать держатели однократно, так как в процессе взятия крови и смены пробирок они могут подвергаться загрязнению. Использованные ватные шарики (салфетки), испачканные кровью, обязательно следует забрать у пациента и, прежде чем поместить его в отходы, замочить в дезинфицирующем растворе. Клеёнчатый валик и столик тоже обрабатывают дезинфицирующим раствором. Одноразовые жгуты утилизируются вместе с использованным расходным материалом, а многоразовые подвергают обеззараживанию при попадании на них биологических жидкостей. Промаркированные лаборатории в пробирки специальных транспортируют плотно в соответствующие закрывающихся контейнерах, подвергающихся дезинфекции. Запрещается вкладывать в пробирки с кровью 47 направления на лабораторные исследования и закрывать пробирки ватой или марлевыми тампонами. Обеззараживание и удаление одноразовых пробирок осуществлять в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования по обращению с медицинскими отходами». 7. Транспортировка и хранение проб Доставку образцов с биологическим материалом из процедурных кабинетов в лабораторию производят регистраторы или процедурные медсестры. Со стеклянными пробирками следует обращаться с особой осторожностью, чтобы избежать риска повреждения или боя пробирки и вытекания потенциально контаминированного образца. Транспортировать пробирки следует в специальных контейнерах с крышками, подвергающимися дезинфекции. Пробирки с кровью помещают в штатив в вертикальном положении. Время и температура хранения проб прямо связаны со стабильностью аналитов и должны определяться в соответствии с клиническими руководствами по лабораторным тестам. Образцы всегда нужно хранить в закрытых сосудах для предотвращения испарения. Разделительные элементы (гель) повышают стабильность пробы и сроки хранения. Следует избегать встряхивания пробирок с пробами, так как это увеличивает риск гемолиза и коагуляции. Необходимо избегать хранения цельной крови, центрифугирование пробы должно быть выполнено в течение 1 часа после взятия крови. Пластиковые пробирки с пробами могут быть заморожены, если это не повлияет на исследуемые аналиты. Температура для большинства аналитов не должна быть ниже -20°С. Стеклянные пробирки с пробами замораживать не рекомендуется, так как они могут расколоться под действием низких температур. 48 8. Правила безопасности медицинских работников 1. Ко всем образцам крови следует относиться как к потенциально опасным в плане наличия возбудителей вирусных гепатитов и ВИЧ-инфекции. 2. Медицинский персонал, осуществляющий взятие крови, должен соблюдать меры безопасности. Работа проводится в перчатках. На лицо надеваются защитные очки, маска или защитные щитки. 3. Резиновые перчатки, снятые единожды, повторно не используются изза возможности загрязнения рук. 4. При повреждении кожных покровов необходимо немедленно снять их, выдавить кровь из ранки; затем под проточной водой тщательно вымыть руки с мылом, обработать их 70% спиртом и смазать ранку 5% раствором йода, заклеить рану пластырем и надеть другие перчатки. При загрязнении рук кровью следует немедленно обработать их в течение 30 сек. тампоном, смоченным кожным антисептиком, затем вымыть их двукратно теплой проточной водой с мылом и насухо вытереть индивидуальным полотенцем. 5. При попадании крови или других биологических жидкостей на слизистые глаз их следует сразу же промыть водой или раствором перманганата калия 1:10000; слизистую носа обработать 1% раствором протаргола, слизистую рта прополоскать 70% раствором спирта или 0,05% раствором марганцовокислого калия. 6. Поверхности рабочих столов в конце рабочего дня (а в случае загрязнения кровью – немедленно) обрабатываются дезинфицирующими средствами, предназначенными для обработки поверхностей, по режимам, изложенным в методических указаниях. 7. Медперсонал, проводящий забор крови, должен быть вакцинирован против гепатита В в полном объеме и проходить периодические медицинские осмотры в соответствии с действующими нормативными документами. 8. Не реже одного раза в год проводятся обследования персонала на маркеры вирусных гепатитов и ВИЧ-инфекцию. 49 9. Ответственность медицинских работников Врачи и медицинские сестры несут ответственность за свои действия и должны строго следовать установленным стандартам проведения тех или иных мероприятий по оказанию помощи пациентам. В соответствии со ст. 98 Федерального закона от 21.11.2011 № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» медицинские работники несут ответственность за нарушение прав в сфере охраны здоровья, причинение вреда жизни и (или) здоровью при оказании гражданам медицинской помощи в соответствии с законодательством РФ. 50 РАЗДЕЛ 2. БЛОК КОНТРОЛИРУЮЩИХ МАТЕРИАЛОВ 1. Вопросы для самоконтроля 1) Дайте определение понятиям «венепункция», «проба крови». 2) Назовите цель преаналитического этапа исследования. 3) Перечислите этапы подготовки пациента к процедуре забора крови из вены. 4) Какая информация должна быть указана в направлении на исследование крови? 5) Назовите инструменты, которые должна приготовить медицинская сестра перед манипуляцией взятия крови путем венепункции, если процедура проводится: а) в процедурном кабинете; б) в палате. 6) Что такое «идентификация пациента», «идентификация пробы», каковы их цели? 7) Пациенту назначено биохимическое исследование крови. Дайте пациенту инструкцию по подготовке. 8) Пациенту назначено серологическое исследование крови. Дайте пациенту инструкцию по подготовке. 9) Назовите методы забора крови из вены. 10) Назовите основные компоненты вакуумной системы Vacutainer. 11) Соберите вакуумную систему для взятия венозной крови на исследование из вен локтевого сгиба, если один из компонентов – односторонняя игла типа «луер». 12) Соберите вакуумную систему для взятия венозной крови на исследование из вен локтевого сгиба, если один из компонентов – держатель с иглой-клапаном. 13) Соберите вакуумную систему для взятия венозной крови на исследование для пациента с «трудными» венами, например, из малых вен предплечья. 14) Назовите преимущества использования S-Monovette. 15) Объясните особенности взятия образца крови артериального катетера. 16) Определите основное правило заполнения пробирок. 51 из венозного или 2. Задания в тестовой форме Выберите один правильный ответ. 1. Участие медицинской сестры в процедуре взятие крови на исследования расценивается как 1) независимое 2) зависимое 3) взаимозависимое 2. Перед выполнением венепункции медицинская сестра обрабатывает руки на уровне 1) социальном 2) гигиеническом 3) хирургическом 3. Венепункция для взятия крови на исследования выполняется медицинской сестрой 1) в перчатках 2) без перчаток 4. При выборе иглы для взятия крови из вены на исследование следует избегать 1) специальные двусторонние иглы 2) иглы с малым диаметром 3) иглы с большим диаметром 4) иглы длиной 60 мм 5. Объем шприца, применяемого для процедуры взятия крови из вены на биохимическое исследование (в мл) 1) 10,0-20,0 2) 5,0-10,0 3) 2,0-5,0 4) 1,0-2,0 52 6. Наиболее часто пункцию для взятия крови на лабораторные исследования проводят из вен 1) кисти 2) локтевого сгиба 3) стопы 4) подключичные 7. Для обеспечения наполнения вены кровью перед пункцией жгут накладывают 1) на 5 см ниже места пункции 2) выше места пункции 3) на верхнюю треть плеча 8. При проведении венепункции игла располагается срезом 1) вверх 2) влево 3) вниз 4) вправо 9. При венепункции забор крови проводится 1) при наложенном жгуте 2) после снятия жгута 3) без наложения жгута 10. Критерий правильности наложения жгута перед венепункцией 1) бледность кожных покровов ниже жгута 2) гиперемия кожи ниже жгута 3) отсутствие пульса на лучевой артерии 4) синюшность кожи ниже жгута 11. Проблема медицинской сестры при заборе крови из вены 1) страх пациента 2) плохие вены пациента 3) дефицит знаний пациента о данном исследовании 4) беспокойство пациента о последствиях венепункции 53 12. Время наложения жгута при взятии венозной крови на исследования составляет не более 1) 1-2 минут 2) 2-3 минут 3) 4-5 минут 4) не имеет значения 13. При взятии крови из вены жгут снимают после того как 1) наполнилась вена кровью, до введения иглы 2) ввели иглу в вену 3) собрали нужное количество крови и вынули иглу из вены 4) собрали кровь, но до вынимания иглы из вены 14. Соотношение крови и цитрата натрия при проведении забора крови на коагулологическое исследование должно быть 1) 9 частей крови и 1 часть цитрата натрия 2) 1 часть крови и 9 часть цитрата натрия 3) 1 часть крови и 4 части цитрата натрия 4) 4 части крови и 1 часть цитрата натрия 15. Кровь на биохимические анализы берется 1) утром натощак 2) после завтрака 3) в любое время суток 4) перед обедом 16. Впервые кровь на сахар берут 1) натощак 2) после завтрака 3) перед обедом 17. Анализ крови на сахар – это исследование 1) клиническое 2) иммунологическое 3) биохимическое 54 4) цитологическое 18. Кровь для исследования серологическими методами (например, анализ крови на RW) берется в количестве 1) 1,0-2,0 мл 2) 3,0-4,0 мл 3) 5,0-10,0 мл 4) 10,0-20,0 мл 19. Для биохимического исследования берется кровь в объеме 1) 3,0-5,0 мл 2) 10,0-15,0 мл 3) 1,5-3,0 мл 4) 5,0-10,0 мл 20. Анализ крови на гемокультуру относят к исследованию 1) клиническому 2) бактериологическому 3) цитологическому 4) серологическому 21. Лаборатория, осуществляющая исследование крови на содержание антител к ВИЧ, – 1) бактериологическая 2) клиническая 3) биохимическая 4) иммунологическая 22. Снизить риск инфицирования пациентов и медперсонала при проведении взятия венозной крови на исследования можно при использовании метода взятия крови 1) иглой самотеком в пробирку 2) шприцом 3) вакуумной системой 55 23. К активаторам свертывания, используемым в пробирках для получения сыворотки крови, относятся 1) гепарин натрия, гепарин лития 2) ЭДТА, фторид натрия 3) йодоацетат, цитрат натрия 4) кремнезем, тромбин 24. Пробирки с добавлением гепарина имеют крышку 1) красного цвета 2) зеленого цвета 3) голубого цвета 4) серого цвета 25. Кровь на гемокультуру при взятии биоматериала сразу в несколько вакуумных пробирок забирается 1) в первую очередь 2) во вторую пробирку 3) в последнюю очередь 4) в любое время 26. Кровь для исследования микроэлементов при взятии биоматериала сразу в несколько вакуумных пробирок забирается 1) в первую очередь 2) во вторую пробирку 3) в последнюю очередь 4) в любое время 27. По степени риска переноса ВБИ шприц и иглы относятся к группе инструментов 1) критических 2) полукритических 3) некритических 28. Ватные шарики после выполнения венепункции с целью взятия крови на исследование 56 1) оставляются у пациента 2) сбрасываются в контейнер с отходами класса «А» 3) отправляются на дезинфекцию 29. Использованные двусторонние иглы относятся к медицинским отходам класса (вне подозрения на особо опасные инфекции) 1) «А» 2) «Б» 3) «В» 4) «Г» 30. Аптечка «Анти-ВИЧ» предназначена для обеспечения инфекционной безопасности 1) пациентов 2) медицинского персонала 3) пациентов и медицинского персонала 31. Обработка кожи при попадании на нее крови пациента проводится 1) 96 спиртом 2) 70 спиртом 3) 6% раствором перекиси водорода 4) 3% раствором перекиси водорода 32. Первое действие медсестры при попадании ей в глаза крови пациента 1) надеть маску 2) закапать раствор альбуцида 3) обильно промыть глаза водой 4) сообщить о случившемся врачу 33. Причиной гематомы в месте венепункции с целью взятия пробы крови на исследование может быть 1) прокол обеих стенок вены 2) непроходимость иглы 3) нарушение асептики и антисептики 4) выполнение забора крови при неснятом жгуте 57 34. В случае прокола вены и образования гематомы необходимо сразу же 1) приложить холод к месту прокола 2) наложить спиртовой согревающий компресс 3) наложить венозный жгут выше места пункции 4) нанести йодную сетку 35. При несоблюдении правил асептики может возникнуть осложнение 1) отек Квинке 2) крапивница 3) флебит 4) гематома 36. Причиной прекращения тока крови в пробирку может быть 1) попадание воздуха в вену 2) прокол обеих стенок вены 3) нарушение асептики и антисептики 4) выполнение забора крови при неснятом жгуте 37. Для предупреждения гемолиза крови в пробирке запрещается 1) использовать слишком тонкую иглу 2) взбалтывать пробирку 3) выпускать кровь из шприца в пробирку через иглу 4) все вышеперечисленное верно 38. К поздним локальным осложнениям венепункции относится 1) тромбофлебит 2) сепсис 3) вирусный гепатит В 4) коллапс 58 3. Ситуационные задачи Задача 1. В процедурном кабинете во время проведения забора крови на биохимическое исследование пациент потерял сознание. Ваши действия? Задача 2. Пациенту перед операцией назначено комплексное исследование, включающее исследования венозной крови: 1) на группу крови и резус-фактор, 2) на антитела к ВИЧ, сифилис, инфекционные гепатиты, 3) коагулограмму (протромбин, МНО, фибриноген, антитромбин III, АЧТВ); 4) на сахар; 5) на скорость оседания эритроцитов. При необходимости проинструктируйте пациента по подготовке к лабораторному исследованию. Определите количество и цветовой код вакуумных пробирок системы «Vacutainer», последовательность их заполнения при одномоментной венепункции. Задача 3. Пациенту, находящемуся в кардиореанимационном отделении, назначено исследование венозной крови: 1) на электролиты (калий плазмы, натрий плазмы, гематокрит); 2) на сахар крови; 3) на протромбин крови; 4) серологический анализ крови на реакцию Вассермана (RW); 5) биохимический анализ крови (ЛДГ общ., ЛДГ 1, КФК общ., АСТ, холестерин). Определите количество и цветовой код вакуумных пробирок системы «Vacutainer», последовательность их венепункции. 59 заполнения при одномоментной Задача 4. Пациенту с заболеванием печени назначено исследование крови: 1) биохимическое (билирубин общ., билирубин непрямой и прямой, АЛТ, АСТ, тимоловая проба); 2) на инфекционные гепатиты (HBsAg, антитела к HCV); 3) на скорость оседания эритроцитов. При необходимости проинструктируйте пациента по подготовке к лабораторному исследованию. Определите количество и цветовой код вакуумных пробирок системы «Vacutainer», последовательность их заполнения при одномоментной венепункции. Задача 5. Пациенту, находящемуся в послеоперационной палате, назначено исследование венозной крови: 1) коагулограмма (протромбин, МНО); 2) серологический анализ крови на реакцию Вассермана (RW); 3) биохимический анализ (билирубин общ., креатинин, мочевина, сахар, общий белок); 4) экспресс-анализ крови (Hb, эритроциты, лейкоциты). Определите количество и цветовой код вакуумных пробирок системы «Vacutainer», последовательность их заполнения при одномоментной венепункции. Задача 6. Пациенту назначено исследование гормонов щитовидной железы: Т3 своб., Т4 своб., ТТГ, АТ-ТТГ, АТ-ТПО. При необходимости проинструктируйте пациента по подготовке к лабораторному исследованию. Определите количество и цветовой код вакуумных пробирок системы «Vacutainer», последовательность их заполнения при одномоментной венепункции. 60 Задача 7. Во время взятия пробы крови прекратился ток крови в пробирку. В чем причина? Ваши действия. Задача 8. Медицинская сестра процедурного кабинета для взятия крови на коагулологическое исследование подготовила пластиковую вакуумную пробирку (цвет крышки – голубой, видимого наполнителя не наблюдается), держатель и специальную двустороннюю иглу. По окончании процедуры забора крови из вены медсестра аккуратно 4-5 раз перемешала кровь в пробирке и поставила в штатив. Проба крови отправлена в биохимическую лабораторию. Оцените действия медсестры. Задача 9. Медицинская сестра процедурного кабинета проводит забор крови из вены с помощью закрытой системы S-Monovette, используя вакуумный метод. Сначала она создала вакуум в шприце-пробирке, оттянув поршень до конца и отломив рукоятку. Затем подсоединила иглу и зафиксировала ее поворотом по часовой стрелке. После пункции вены кровь в пробирку не поступает. В чем причина? Ваши действия. 61 ПРИЛОЖЕНИЯ Приложение 1 ПАМЯТКА ПАЦИЕНТУ об особенностях подготовки к иммунологическим (серологическим) лабораторным исследованиям крови Уважаемые пациенты! Вы должны подготовить себя к этому исследованию следующим образом: воздержаться от физических нагрузок, приема алкоголя и лекарственных веществ, изменений в питании в течение 24 часов до взятия крови. Вам не следует принимать пищу после ужина, лечь спать нужно накануне в обычное для вас время и встать не позднее, чем за час до взятия крови. Нельзя ничего есть в течение 12 часов, предшествующих началу исследования, но время голодания не должно превышать 16 часов. Нельзя пить соки, чай, кофе и другие напитки. Используйте для питья воду. Утром после подъема воздержитесь от курения и физической нагрузки. Если Вы испытываете трудности с отменой лекарственных препаратов, то обязательно сообщите об этом лечащему врачу. Очень важно, чтобы Вы точно следовали указанным рекомендациям, так как только в этом случае будут получены правильные результаты исследования крови. Приложение 2. 62 ПРАВИЛА ЗАБОРА, ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ КРОВИ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ НА ВИЧ (Приложение № 6 к приказу Министерства здравоохранения от 27.01.2006 г. № 16/9) 1. Для исключения ложных результатов при исследовании на антитела к ВИЧ рекомендуется неукоснительно выполнять следующие правила забора и транспортировки сывороток крови: 1.1. Кровь для первичной серодиагностики в ИФА берется из локтевой вены в количестве 3-5 мл, желательно натощак, в чистую сухую пробирку. Допускается пальцевая проба у детей. При невозможности взятия крови из вены, кровь может быть взята из пальца в кол-ве до 1 мл. 1.2. Пробирки герметично закрывают резиновыми или ватно-марлевыми, обернутыми полиэтиленовой пленкой, пробками и помещают в штатив, который доставляется в лабораторию в специальном контейнере или биксе с маркировкой «Осторожно, AIDS». Не допускается перевозка материала в сумках, портфелях и других предметах личного пользования, а также запрещается доставка биоматериала на исследование больными или родственниками пациентов. При перевозке на транспорте требуется доставлять исследуемый материал для проведения скрининговых исследований в сумкаххолодильниках (термоконтейнерах) при температуре +4 +8. При необходимости возможно использование уплотнителей (вата, поролон), которые в последующем в лаборатории подлежат обеззараживанию и утилизации. Запрещается перевозка на общественном транспорте. 1.3. Срок хранения крови, забранной для анализа на ВИЧ, – не более 12 часов при комнатной температуре и не более 1 суток в холодильнике при +4 +8 град. Наступающий гемолиз может повлиять на результат анализа. По этой причине цельная кровь должна быть лабораторию в день забора. 63 доставлена в диагностическую 1.4. Предпочтительнее сразу после взятия крови и наступления ретракции кровяного сгустка после центрифугирования (или отстаивания) отобрать сыворотку. Отдельная сыворотка переносится в чистую (лучше стерильную) пробирку, пластиковый контейнер. Если сыворотка не может быть сразу же доставлена в СПИД – лабораторию, то в таком виде она может храниться до 3 дней при температуре +4 +8 С. Категорически запрещается переливание сыворотки через край пробирки, пипетирование сыворотки ртом. Отсасывание сыворотки производит лаборант с помощью груши, лучше автоматическими пипетками с одноразовыми наконечниками, при этом необходимо обеспечить, чтобы каждый образец сыворотки отбирался индивидуальным наконечником. Стеклянные палочки и пипетки должны быть индивидуальными для каждой сыворотки. Ни в коем случае нельзя использовать повторно палочки и пипетки в процессе отделения сыворотки из разных образцов, т.к. это может привести к перекрестной контаминации отрицательных сывороток. 1.5. Пробирки маркируют карандашом по стеклу. Не рекомендуется использовать для этой цели этикетки из лейкопластыря. Номера пробирок в штативе должны соответствовать номерам в направлениях и в общем списке. Зачеркивать, вносить изменения, поправки категорически запрещается. 1.6. Сопроводительная документация составляется в 2-х экземплярах. ЛПУ при первичном (скрининговом) лабораторном исследовании пациентов на антитела к ВИЧ заполняют направление по ф. № 264/у-88. Зачеркивания, внесение изменений, поправки категорически запрещены. Направления помещают в полиэтиленовые пакеты и доставляют в лабораторию вне контейнера. 1.7. В случае поступления в лабораторию биоматериалов на исследование с направлением в виде свободной таблицы-списка, необходимо одновременно предоставить заполненный бланк направления обследуемого по ф. № 264/у-88. 64 отдельно на каждого 1.8. С целью обеспечения полноты обследования на ВИЧ, особенно в условиях работы стационаров, необходимо осуществлять забор крови на ВИЧ ежедневно, включая выходные и праздничные дни. После отстаивания или получения сыворотки путем центрифугирования рекомендуется отделить сыворотку от кровяного сгустка (лучше в стерильную пробирку) и доставить в СПИД-лабораторию в день транспортировки, сохраняя сыворотку в холодильнике при температуре +4 +8 С. 1.9. Лаборатории диагностики ВИЧ-инфекции перекладывают присланный материал в штативы или другие емкости диагностической лаборатории, помещенные на эмалированные или металлические подносы, и переносят в комнату разборки и подготовки материала для серологических исследований. Контейнеры, в которых доставлен материал, после разгрузки обрабатывают дезраствором. 1.10. Лаборатория в обмен выдает пробирки, обработанные согласно МУ 3.5.1/3.5.4.001-98, в полиэтиленовые мешки учреждений. Штативы и биксы возвращают только после дезинфекции. 1.11. Термоконтейнеры или биксы с биоматериалом доставляет в лабораторию персонал, прошедший инструктаж. Выполнение этими лицами данных функциональных обязанностей должно быть предусмотрено приказом по ЛПУ. 2. В случае положительного скринингового теста на антитела к ВИЧ проводится дальнейшая серологическая диагностика с целью подтверждения специфичности полученного результата в референс-лаборатории. 2.1. С целью окончательного лабораторного подтверждения ВИЧинфекции забор крови осуществлять лучше в стерильную пробирку, желательно натощак, свежеприготовленная сыворотка доставляется в референслабораторию в день забора крови. 2.2. При повторном взятии крови необходимо предупредить все возможные ошибки обусловленные неточностью маркировки пробирок и 65 заполнения бланков направлений, которые могут привести к подмене сывороток от разных пациентов. 2.3. При отправке в референс-лабораторию второй порции сыворотки для проведения подтверждающей серологической диагностики ВИЧ-инфекции заполняется сопроводительная документация, составленная по форме № 265/у88, заверенная подписью врача, направившего материал на референсисследование. 2.4. Сыворотка упаковывается в соответствии с правилами транспортировки инфекционного материала и доставляется в штативе, отдельном от других образцов, с собой маркировкой пробирок красным карандашом по стеклу. 2.5. Прием контейнера с сывороткой, предназначенной для проведения подтверждающих тестов, регистрируется в отдельном журнале с указанием должности, фамилии лица, ответственного за транспортировку сыворотки, направленной на перепроверку или постановку иммуноблота. 3. При проведении повторных исследований на антитела к ВИЧ, при сомнительных результатах первичного исследования сыворотки крови, (через 3 месяца и при сохранении неопределенных результатов – через 6 месяцев) – забор крови и транспортировка проводится в соответствии с п.п. 2.1 - 2.5 с обязательной отметкой в ф. № 265/у-88. 66 Приложение 3 ВЫПИСКА из Инструкции по забору и хранению биологического материала, разработанной ФГУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора Забор биологического материала (крови) для лабораторных исследований методом ПЦР Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему в пробирку с ЭДТА. При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9). Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя. Пробирка закрывается пробкой и переворачивается несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом). Пробирка с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С - +8°С. Максимальный срок хранения при исследовании на вирусные гепатиты – 2 суток, при исследовании на другие инфекции – 5 часов. Забор и хранение биологического материала (кровь) для исследований методом ИФА (инфекции) Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему (с ЭДТА или без). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в одноразовую «сухую» пробирку или в пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9). Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С - +8°С. 67 Максимальный срок хранения сыворотки при температуре +4°С-+8°С – 48 часов, при температуре -20°С – длительное хранение. Исключения: Забор крови для исследования крови на Syphilis RPR, Syphilis TPHA, Syphilis TPHA (полуколичественный анализ) производится только в «СУХУЮ» пробирку без антикоагулянта! Забор и хранение биологического материала (кровь) для исследований на сифилис (полуколичественный анализ), определения в сыворотке концетрации гормонов, онкомаркёров, аутоантител методом ИФА и для биохимических исследований Забор крови производится утром натощак (при динамическом наблюдении – всегда в одни и те же часы) и только в «сухую» пробирку объемом 5 мл с помощью одноразовой иглы или специальной вакуумной системы (без антикоагулянта). Забор шприцом нежелателен в связи с опасностью возникновения гемолиза. Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4-+8°С. Максимальный срок хранения сыворотки при температуре +4-+8°С – 48 часов, при температуре -20 °С – длительное хранение. Допускается только однократная разморозка сыворотки. Забор крови для определения субпопуляций и функциональной активности лимфоцитов и нейтрофилов Забор крови производится утром натощак (5 мл крови). Для предотвращения свёртывания в кровь при взятии добавляют антикоагулянт: 20 ед. гепарина на 1 мл крови. Лучше использовать стандартные пробирки с гепарином (например, BD Vacutainer с Na-гепарин или Li-гепарин на 5-7 мл с зелёными крышками). Перед взятием крови равномерно распределить гепарин по стенкам пробирки. При взятии шприцем, во избежание гемолиза, кровь в пробирку спускать плавно, без напора. После взятия пробирку с образцом несколько раз перевернуть. Не встряхивать и не крутить на шейкере. Кровь должна храниться 68 не более 48 часов при комнатной температуре. При перевозке температура крови должна быть +18-+24°С. Для определения иммуноглобулинов в сыворотке крови, забор крови производится только в сухую пробирку! Забор и хранение биологического материала (кровь) для гемостазиологических исследований При взятии жгут рекомендуется накладывать на минимально возможный срок. Первые 2-3 капли выпускают на салфетку. Объём необходимого количества крови для коагулограммы 5,0-10,0 мл. Взятие крови проводится только в пластиковые пробирки с цитратом натрия в соотношении 1:9. После забора кровь плавно перемешивается 2-3 раза (не встряхивать!). Забор и хранение биологического материала (кровь) для определения группы крови по системе AB0 и Резус-фактора Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему (с ЭДТА). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в одноразовую пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9). Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при температуре +4-+8°С. 69 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. ГОСТ Р 53079.4-2008 Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа. 2. Долгов В.В., Луговская С.А., Почтарь М.Е. Применение вакуумных систем BD VACUTAINER для лабораторного анализа. / Методические рекомендации. – М.: РМАПО, 2007. 3. Инструкции по забору и хранению биологического материала. / ФГУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005. 4. Инструкция о соблюдении противоэпидемического режима при взятии венозной крови путем венепункции в учреждениях здравоохранения г. Москвы. – Инструкция № 2.1.3.007-02. 5. Информация о продукции фирмы Sarstedt (Германия): «Инструкция. Закрытая система взятия крови S-Monovette», «Преаналитика: практические советы и методы» – www.sarstedt.com 6. Каталог продукции «BD Vacutainer» – www.bd.com/Vacutainer 7. Основы сестринского дела. Практикум. / Под ред. Н.В.Широковой. – М.: МОМК № 2, 2009. 8. Приложение № 6 к приказу Министерства здравоохранения от 27.01.2006 г. № 16/9 «Правила забора, хранения и транспортировки крови для исследования на ВИЧ» 9. СанПиН 2.1.7.2790-10 Санитарно-эпидемиологические требования по обращению с медицинскими отходами (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 09.12.2010 № 163). 10. Сборник стандартных операционных процедур «Стандартизованный способ получения и доставки образцов сыворотки / плазмы крови больных различными формами сифилиса из субъектов Российской Федерации» – М.: ООО «ДЭКС-ПРЕСС», 2008. – 48 с. 70 11. Федеральный закон от 21.11.2011 № 323-ФЗ (ред. от 25.06.2012) «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации». 12. Becan-Mcbride K. Взятие лабораторных проб – влияет ли процесс на результат? // Journal of Intravenous Nursing. – 1999 г. – Т. 22. – №3. 13. Plebani M., Carraro P. Ошибки в экспресс-лабораториях: их виды и частота. – Clinical Chemistry, 1997. 71