Лучший количественный экспресс

АР
Лучший количественный
экспресс-анализ зерна и кормов
на микотоксины — ROSA-тест
деятельности плесневых грибов, чрезвычайно токсичных для живого организма и очень распространенных в
окружающей нас среде. Факты отравления микотоксинами упоминались
еще в Ветхом Завете, а также в древних
писаниях римлян, египтян и китайцев.
Пристальное внимание эти микроорганизмы заслужили лишь полвека назад,
когда в фермерских хозяйствах Англии
произошел падёж 100 тыс. индеек.
Тогда эту болезнь назвали «заболевание X».
Микотоксины представляют собой
природные загрязнители зерна злаковых, бобовых, семян подсолнечника, а
также овощей и фруктов. Они образуются при хранении во многих пищевых
продуктах под действием развивающихся в них микроскопических грибов.
Среди возбудителей болезней растений значительная часть относится
Н
а протяжении уже длительного
времени развитие животноводства в России сдерживает целый
ряд негативных обстоятельств. Кроме
экономических и природных, существуют такие факторы, которые очень
быстро перестают быть частными и
становятся общезначимыми. Это в полной мере относится к проблеме микотоксикоза. Это заболевание характерно
для всех отраслей животноводства, так
как основу рациона животных составляет зерно, являющееся основным
источником микотоксинов. При этом
нельзя сказать, что в нашей стране произошли определенные положительные
сдвиги в понимании проблем микотоксинов. Споры вокруг методов анализа и
способов борьбы с микотоксинами все
продолжаются.
Итак, микотоксины. Что это такое?
Микотоксины — это продукты жизне-
к грибам, многие из которых образуют токсины, загрязняя ими продукты
урожая. Микотоксикоз зерна, овощей,
картофеля, фруктов и другой сельхозпродукции представляет большую
угрозу здоровью человека и животных.
Потери урожая от воздействия микотоксинов только зерновых культур ежегодно составляют до 30%.
Вследствие приема зараженной
пищи животные могут страдать токсикозом печени и почек, нарушением
гормонального баланса, у них разрушаются нервная и кровеносная системы,
снижается иммунитет. Микотоксикозы
не поддаются лечению, именно поэтому особенно большое значение имеют
первичные мероприятия по предотвращению заражения.
Сегодня ученые, занимающиеся
этой проблемой, в первую очередь
разрабатывают и активно внедряют в
Сравнительная таблица методов ИФА и ROSA
Микотоксин
Метод
анализа
Предел
Диапазон
Время анализа
обнаруже- определения,
пробы, мин.
ния, ppb
ppb
ИФА
25
4
4–40
Ридер, микротитровальный планшет, 8-канальная пипетка, таймер; стандартные
растворы афлатоксина, конъюгат, субстрат, остановочный раствор
ROSA
10
<2
0–150
Инкубатор, ридер; буферный раствор AFQ, положительный контроль
ИФА
25
250
250–5000
Стандартные растворы ДОН, конъюгат, субстрат, остановочный раствор, концентрат промывочного раствора; ридер, микротитровальный планшет, воронки
ROSA
10
<250
0–6 ppm
Буферный раствор ДОН, положительный контроль; инкубатор, ридер
ИФА
25
25
25–1000
Стандартные растворы зеараленона, конъюгат, субстрат, остановочный раствор;
ридер, микротитровальный планшет, таймер
ROSA
10
<10
0–300
Буферный раствор AFQ, положительный контроль; инкубатор, ридер
ИФА
25
2
2–40
Стандартные растворы охратоксина, конъюгат, субстрат, остановочный раствор;
ридер, микротитровальный планшет, таймер
ROSA
10
<1
0–12
Буферный раствор охратоксина, положительный контроль; инкубатор, ридер
Стандартные растворы T-2, конъюгат, субстрат, остановочный раствор; ридер,
микротитровальный планшет, таймер
Афлатоксин
ДОН
Зеараленон
Охратоксин
T-2 токсин
ИФА
25
75
75–500
ROSA
10
<10
0–250
Буферный раствор T-2—HT-2, положительный контроль; инкубатор, ридер
ИФА
25
250
250–5000
Стандартные растворы фумонизина, конъюгат, субстрат, останавливающий раствор; ридер, микротитровальный планшет, таймер
ROSA
10
<250
0–6 ppm
Буферный раствор фумонизина, положительный контроль; инкубатор, ридер
Фумонизин
46
Основное оборудование и реактивы
АгроРынок
ФЕВРАЛЬ 2012
АР
практику различные методы определения микотоксинов в образцах. Для
эффективной диагностики методы
должны быть просты в использовании,
удобны и точны.
Традиционными методами анализа
микотоксинов являются физико-химические методы. Наибольшее распространение нашли различные методы
жидкостной хроматографии с применением различных детекторов (массспектрометрического, флуоресцентного, амперометрического и т.д.). Данные
методы, безусловно, способны обеспечить достаточную специфичность и
необходимую чувствительность определения, однако являются дорогостоящими, рассчитаны преимущественно на специализированные и хорошо
оснащенные стационарные лаборатории, а также требуют высокой квалификации персонала.
Вследствие этого для постоянного
контроля сельхозсырья используется
иммуноферментный метод анализа
(ИФА или ELISA). Из-за высокой чувствительности, быстроты, сравнительно низкой стоимости оборудования
этот метод считается оптимальным.
Несколько лет назад компанией
Charm (США) был разработан еще более
быстрый метод определения микотоксинов, который называется ROSA-тест.
К преимуществам этого метода
относятся: быстрота анализа пробы
(не более 10 минут), универсальность
(возможность тестирования сырья различного происхождения), простота и
удобство.
В таблице приведено сравнение
основных характеристик методов ИФА
и ROSA.
Из приведенной сравнительной таблицы видно, что метод ИФА занимает
больше времени и требует большего
количества оборудования и реактивов
по сравнению с методом ROSA-теста,
что делает последний более экспрессным, удобным при проведении анализов на местах.
Для постановки массового анализа микотоксинов в производственных
лабораториях различными производителями компанией Charm разработаны
специальные наборы, в комплект которых входят все необходимые реагенты,
стандарты и оборудование.
ROSA (Rapid One Step Assay, дословно
«быстрый анализ за один шаг») на сегодняшний день является лучшим тестом,
который способен быстро определить
наличие микотоксинов (афлатоксина,
ДОН, фумонизина, охратоксина, T-2
Рис. 1. Система ROSA-тест:
1 — инкубатор; 2 — тест-полоска; 3 — ридер
токсина и зеараленона) в зерне и кормах, в том числе и по количеству.
Экспресс-тест ROSA портативен и
прост в использовании. Для работы
с ним требуется минимум базисного
нения тестовой линии с контрольной.
Также с помощью отдельных тест-полосок (рис. 2) можно произвести количественный подсчет, сравнив две тестовые
линии с контрольной на основании контрольной шкалы.
Спектрофотометрический метод
основан на измерении количества
интенсивности тестовой линии. Ридер
выводит результат в виде числового
значения.
Постоянное совершенствование аналитических инструментов позволило
сотрудникам компании Charm устранить ошибки других производителей
экспресс-тестов, а также лучше предсказывать и выявлять наличие микотоксинов в любых условиях.
В основу ROSA-теста ученые заложили способность рецепторов коллоидного золота притягивать частицы
микотоксинов. Это специфичная реакция антитело—антиген, позволяющая с
высокой точностью определить содержание микотоксина в анализируемой
пробе.
Конечно, мы с завидным постоянством слышим про контроль на государственном уровне, которого у нас
почему-то в полной мере нет.
На самом деле дать гарантию людям
в том, что они покупают качествен-
Рис. 2. Тест-полоски
оборудования — тест-полоски, инкубатор и ридер (только если требуется
количест венный результат анализа)
(рис. 1). Принцип работы: на тестполоску добавляется подготовленный
экстракт образца, после чего образец
помещается в термостат или инкубатор. Через некоторое время получаем
наглядный результат, позволяющий
определить наличие микотоксинов
визуально. Оценку количественных
результатов тестирования проводят с
помощью ROSA-ридера.
Итак, результаты могут оцениваться как визуально, так и спектрофотометрически.
Зрительный качественный результат позволяет обнаружить микотоксины через три минуты методом срав-
ный продукт, никто не может. С ROSAтестом вы получите качест венное
безопасное зерно для переработки и
потребления.
Стоимость тест-полоски ROSA —
300 руб.
Работа с такими тестами не требует никаких специальных знаний и
навыков.
Тесты приобретают поставщики и
переработчики зерна, в том числе и
крупные мировые компании.
А. КУРИЧЬЕВ
К. ПОДЖАРАЯ
ГНУ «ГОСНИТИ»
Публикуется в авторской редакции
Тел.: (499) 174-80-48, 976-32-17
E-mail: [email protected]
www.agrolla.ru
ФЕВРАЛЬ 2012
АгроРынок
47