АННОТАЦИЯ диссертации на соискание ученой степени «доктор философии» (PhD) по специальности 6D120200 - Ветеринарная санитария Рыщанова Раушан Миранбаевна Гормональные стимуляторы роста в мясе: мониторинг остаточных количеств и усовершенствование метода их определения Диссертационные исследования проведены в рамках научно-технического проекта «Разработка отечественной тест-системы иммуноферментного анализа для определения эстрадиола-17 в продуктах животного происхождения», грантового финансирования МОН РК на 2012 – 2014 годы по бюджетной программе 055 «Научная и (или) научнотехническая деятельность», подпрограмма 101 «Грантовое финансирование научных исследований». В работе использованы данные, полученные автором совместно с сотрудниками Инновационного научно-образовательного центра (ИНОЦ) КГУ имени А. Байтурсынова, г. Костанай и исследователями Института сельскохозяйственной биотехнологии КАТУ имени С. Сейфуллина, г. Астана. Актуальность исследования. В последние годы одной из мировых проблем является загрязнение пищевых продуктов животного происхождения содержащимися в них остаточными количествами синтетических стероидных гормонов. Стероидные гормоны могут попадать в продукты питания в результате использования их в качестве анаболических стимуляторов роста при выращивании животных и птиц. Но главная опасность заключается в риске воздействия на здоровье человека остаточных количеств этих веществ в животноводческой продукции. Убедительные доказательства канцерогенности природных и синтетических стероидных эстрогенов (рак груди у женщин), и производных стильбена позволили Международному агентству по изучению рака (IARC) отнести их к группе признанных канцерогенов для людей. Риск, связанный с присутствием остаточных количеств анаболических агентов в животноводческой продукции привел к запрещению использования препаратов этой группы в качестве стимуляторов роста животных в Европейском Союзе с 1989 года (директива 2003/74/EC). В Российской Федерации также под запретом использование анаболических стимуляторов роста для продуктивных животных. Что касается Казахстана, то здесь можно наблюдать двойственную ситуацию. С одной стороны, в соответствии с законодательством государств-членов Таможенного союза и законом о безопасности Республики Казахстан, при изготовлении продовольственного сырья животного происхождения не допускается использование гормональных стимуляторов роста животных, с «оговоркой» если не регламентируется национальными нормативными актами. С другой стороны, отсутствуют механизмы мониторинга по контролю содержания остаточных количеств гормональных стимуляторов роста в продуктах животного происхождения отечественного и импортного производства, отсутствуют утвержденные методики обнаружения синтетических гормонов в продуктах питания. Контроль поступающей продукции из стран дальнего зарубежья и Таможенного Союза сводится лишь к проверке документов по безопасности, основанной на полном доверии в отсутствии запрещенных законодательством Казахстана остатков гормональных препаратов. Анализ имеющихся данных об отрицательном влиянии анаболических гормонов на здоровье человека, а также экспорт в Казахстан пищевых продуктов из стран, где законодательно разрешено применение этих опасных препаратов, делают актуальными исследования в данном направлении. Цель диссертационного исследования – исследование мяса импортного и отечественного происхождения на содержание остаточных количеств гормональных стимуляторов роста и усовершенствование метода иммуноферментного анализа. Для реализации целей исследований поставлены следующие задачи: - изучить степень загрязнения мяса отечественного и импортного происхождения остаточными количествами гормональных стимуляторов роста: прогестерона, тестостерона, эстрадиола 17β; - получить специфические иммунологические препараты пригодные для детекции остаточных количеств эстрадиола 17β в иммунологических реакциях; - разработать на основе полученных препаратов вариант иммуноферментного анализа выявления эстрадиола 17β в продуктах животноводства; - определить оптимальный способ экстрагирования эстрадиола из проб мяса и мясных продуктов; - разработать лабораторный регламент производства и применения набора реагентов ИФА для определения остаточных количеств эстрадиола 17 в продуктах животного происхождения. Объектом исследования является мясо разных видов животных, сыворотка крови, специфические антитела, иммуноферментный анализ выявления остаточных количеств эстрадиола 17 в продуктах животного происхождения. Методологической базой исследования являются микробиологические, иммунологические, биохимические, биотехнологические методы исследований. Научная новизна данного исследования заключается в том, что впервые изучено содержание гормональных стимуляторов роста: прогестерона, тестостерона и эстрадиола 17β в мясе отечественного и импортного происхождения. Показано, что в отечественной продукции содержание гормонов не превышало максимально допустимых уровней, в то время как в ряде образцов импортного мяса выявлены превышения МДУ, в некоторых случаях значительные. В Казахстане впервые разработана тест-система реагентов по определению эстрадиола 17β в продуктах животного происхождения: разработаны способы конъюгирования эстрадиола 17β с гетерогенными носителями, созданы специфические иммуногены, позволяющие получать от иммунизированных животных-продуцентов высокоспецифичные антитела, получены штаммы моноклональных антител к эстрадиолу, предложена эффективная методика экстракции эстрадиола из биосубстратов. Научно-практическая значимость исследования. Создана тест-система для определения остаточных количеств эстрадиола 17β в продукции животноводства, предназначенная для проведения государственного мониторинга незаконного использования их в качестве анаболического стимулятора роста. Результаты исследований позволили: - разработать лабораторный регламент производства и применения набора реагентов ИФА для определения остаточных количеств эстрадиола 17 в животноводческой продукции (утв. 02.05.2014г. Научно-техническим Советом КГУ имени А. Байтурсынова); - использовать разработанные схемы иммунизации кроликов и мышей для получения гипериммунных сывороток к различным антигенам и антигенам гаптенного происхождения в исследованиях, проводимых в ИНОЦ КГУ имени А. Байтурсынова. Разработанные способы конъюгирования гаптенов с гетерологичными носителями применяются для получения иммуногенов; - результаты диссертационных исследований используются при чтении курса лекций и проведении лабораторных занятий по ветеринарно-санитарной экспертизе, токсикологии, медицинской и ветеринарной биотехнологии студентам специальностей ветеринарии и биотехнологии КГУ имени А. Байтурсынова, а также слушателям «Центра повышения квалификации и профессиональной переподготовки работников животноводства и ветеринарии». Основные итоги диссертационных исследований были опубликованы в 10 научных изданиях, из них 4 – в журналах рекомендованных Комитетом по контролю в сфере образования и науки РК, 1 - в издании Scopus, 5 публикаций в сборниках международных научно-практических конференций, 3 из которых в зарубежных. Работа состоит из введения, трех разделов, заключения и списка использованной литературы. Общий объем диссертации 135 страниц без приложений.