На правах рукописи СОДЕРЖАНИЕ ГОРМОНАЛЬНЫХ

На правах рукописи
ОСТРОВСКАЯ АННА ВЛАДИМИРОВНА
СОДЕРЖАНИЕ ГОРМОНАЛЬНЫХ СТИМУЛЯТОРОВ РОСТА В
МЯСЕ И УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДА ИХ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
16.00.06 — ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и
ветеринарно-санитарная экспертиза
АВТОРЕФЕРАТ
диссертация на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Москва - 2004
Работа
выполнена
Всероссийском
в
Государственном
научно-исследовательском
научном
институте
учреждении
ветеринарной
санитарии, гигиены и экологии Россельхозакадемии (ГНУ ВНИИВСГЭ
РАСХН).
Научный руководитель:
доктор ветеринарных наук,
профессор
В. Л. Долгов (ГНУ ВНИИВСГЭ)
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук
В. В. Светличкин (ГНУ ВНИИВСГЭ)
кандидат ветеринарных наук
М. Ф. Боровков (ФГУ ВПО МГАВМиБ)
Ведущая организация:
Государственное Учреждение Всероссийский
научно-исследовательский и технологический
институт биологической промышленности
(ГНУ ВНИиТИБП РЛСХН)
2004 г в "
Защита состоится "
" часов
на заседании диссертационного совета Д 006.008.01 при ГНУ Всероссийском
научно-исслсдовагельском институте ветеринарной санитарии, гигиены и
экологии по адресу: 123022, г. Москва, Звенигородское ш., д. 5.
С
диссертацией
Всероссийского
можно
ознакомиться
научно-исследовательского
в
библиотеке
института
ГНУ
ветеринарной
санитарии, гигиены и экологии.
Автореферат разослан "
"
2004 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета,
кандидат биологических наук
Е. С. Майстренко
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. В современном промышленном животноводстве
и
птицеводстве
для
увеличения
производства
продукции
нередко
используются различные гормональные стимуляторы роста (естественные и
синтетические стероиды, тиреостатики, бета-агонисты и др.), что может
приводить к их избыточному накоплению в мясе и мясопродуктах. Это
представляет серьезную опасность для здоровья человека, поскольку данные
соединения
нарушают
организма,
влияют
обменные
на
процессы
сердечную
и
гормональный
деятельность,
могут
статус
обладать
канцерогенным эффектом. (Неклюдов А. Д. и др., 1999; Huseby R. А., 1980;
ОГпег P. et al., 1992; Сао К. et al., 1988, и др.)
13 связи с этим во многих странах мира ужесточаются требования по
контролю за содержанием гормональных препаратов в продуктах животного
происхождения, что предусмотрено соответствующими Директивами ЕЭС
89/662/ЕЕС,
90/425/ЕЕС,
96/23/ЕС.
В
нашей
стране
Департаментом
ветеринарии МСХ РФ издано соответствующее указание по организации
Государственного ветеринарного надзора за содержанием гормональных
стимуляторов роста и тиреостатнков в продуктах животного происхождения
(№10-7-1/900
от
предупреждению
04.10.99
г.),
попадания
в
котором
гормонов
в
отражены
требования
продовольственное
по
сырье;
требования, критерии и мероприятия, касающиеся их применения в
ветеринарной практике, а также лабораторный контроль за содержанием этих
веществ в продуктах и кормах. Был утвержден также план мероприятий по
усилению
контроля
качества
и
безопасности
контроля
и
учета
продукции
за
ее
животного
происхождения,
ведению
движением
и
использованием,
в котором определены организации и лаборатории,
осуществляющие мониторинг импортного продовольственного сырья на
наличие ксенобиотиков, в том числе и гормональных стимуляторов роста
(Московская горветлаборатория, ЦНМВЛ МСХ
Для
определения содержания
инструментальные
методы
хроматографические,
гормонов используются различные
исследований
спектрометрнческие
и др.),
(радиоиммунные,
которые отличаются
трудоемкости, необходимостью иметь дорогостоящую аппаратуру, сложны
в постановке и могут использоваться только в лабораторных условиях. С
практической
ючки
зрения
наиболее
приемлемым
является
иммуноферментный метод анализа (ИФА), который обладает высокой
чувтвительностью,
малыми за фатам и времени и средств (Галкин А. В. и
др., 1998; Мафёшин Л. 13., 1999; Белоусов А. В., 2002 и др.; Commission
Decision 93/257/ЕЕC, 1993, и др.)
Дальнейшее усовершенствование данною метода позволит расширить
облаем, ею применения как для научных целей, так и для проведения
мониторинговых исследований продукции животного происхождения, чю
является в настоящее время актуальной задачей.
Цель и задачи исследовании. Целью работы являлось изучение
содержания юрмональных стимуляторов роста (прогестерона, тестостерона,
эстрадиола-17B) в мясе и усовершенствование метода их определения.
В задачи исследовании входило:
1.
Изучить
содержание
юрмональных
стимуляторов
роста
(прогестерона, тестостерона, эстрадиола-17B) в мясе отечественного и
импортного происхождения.
2.
Определить
методические
подходы
к
усовершенствованию
иммуноферментного анализа гормонов в мясе.
3. Офабогагь условия очистки и концентрации полученных экстрактов
из проб мяса, содержащих гормональные стимуляторы роста.
4. Провести сравнительную оценку усовершенствованного метода
определения содержания в мясе прогестерона, тестостерона, и эстрадиола17B с общепринятым методом.
5. Изучить влияние температурной обработки мяса на содержание в
нем гормональных стимуляторов роста.
6.
Разработать
методические
рекомендации
по
определению
гормональных стимуляторов роста (прогестерона, тестостерона, эстрадиола17B) в мясе и мясопродуктах с помощью ИФА.
Научная новизна. Изучено содержание гормональных стимуляторов
роста (прогестерона, тестостерона, эстрадиола-17B) в мясе отечественного и
импортного происхождения. Показано, что в отечественной продукции
содержание гормонов не превышало максимально допустимых уровней, в то
время как в ряде образцов импортного мяса выявлены превышения МДУ, в
некоторых случаях значительные.
Усовершенствована методика определения прогестерона, тестостерона
и эстрадиола-17B в мясе с помощью ИФА. Установлено, что применение
жидкостно-твердофазной экстракции позволяет увеличить процент выхода
гормональных стимуляторов роста из проб мяса и другой продукции
животного происхождения в среднем до 45-90% в зависимости от вида
гормона, что гораздо выше, чем при использовании общепринятой методики.
Показано, что влияние температурной обработки мяса (варка) снижает
уровень содержания
в нем
гормонов пропорционально длительности
температурного воздействия, что позволяет рекомендовать предложенные
нами режимы для практического применения.
Практическая
ценность
работы.
На
основании
результатов
исследований разработаны:
- "Методические рекомендации по определению прогестерона в мясе и
мясопродуктах
методом
иммуноферментного
анализа"
Отделением ветеринарной медицины РАСХН, 2003 г.);
(утверждены
- "Meтодические рекомендации по определению тестостерона в мясе и
мясопродуктах
методом
иммуноферменгного
анализа"
(утверждены
Отделением ветеринарной медицины РАСХН, 2003 г.);
- "Методические рекомендации по определению эстрадиола- 17B в мясе
и
мясопродуктах
меюдом
иммуноферментного
анализа"
(утверждены
Отделением ветеринарной медицины РАСХН, 2003 г.).
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены
на:
- 4-ой Международной научно-практической конференции "Актуальные
проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля
сельскохозяйственной продукции" (Москва, 2002 г.);
- Международной научной конференции "Современные достижения и
проблемы
биотехнологии
сельскохозяйственных
животных"
(ВИЖ,
Дубровицы, 2002 г.);
- пятой Международной научно-технической конференции "Пища.
Экология. Человек."(Москва, 2003 г.);
- Международной научной конференции "Современные достижения и
проблемы
биотехнологии
сельскохозяйственных
животных"
(ВИЖ,
Дубровицы, 2003 г.);
- II Международной научно-практической конференции "Научнотехнический прогресс в животноводстве России — ресурсосберегающие
технологии
производства
экологически
безопасной
продукции
животноводства" (ВИЖ, Дубровицы, 2003 г.);
- заседаниях Ученого совета ВНИИВСГЭ (2001-2003 г.г.);
- межлабораторном совещании ВНИИВСГЭ (2004 г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 научных статей.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на ПО стр.
машинописною
текста
и
состоит
из
введения,
обзора
литературы,
собственных исследовании, обсуждения результатов, выводов, практических
предложений, списка литературы и
приложений.
Список литературы
включает 136 источников (79 отечественных и 57 зарубежных авторов).
Работа иллюстрирована 14 таблицами и 2 рисунками.
СОБСТВЕННЫЕ
ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалы и методы исследований.
Работа выполнена на основании плана научно-исследовательских работ
ВНИИВСГЭ в период, с 2000 но 2003 г.г. в лаборатории ветеринарносанитарной экспертизы мяса, рыбы и других пищевых продуктов и является
частью темы 13.1, задания 05 Программы фундаментальных и прикладных
исследований, утвержденной РАСХН.
Материалом для исследований служили различные образцы мяса
отечественного и импортного происхождения, поступавшие в лабораторию
ветсанэкспертизы
института,
а также
в
Испытательную лабораторию
пищевой продукции, продовольственного сырья и кормов ВНИИВСГЭ, в том
числе при осуществлении мониторинга импортного продовольственного
сырья
на
наличие
ксенобиотиков
согласно
Указанию
Департамента
ветеринарии МСХ РФ №10-7-1/900 от 04.10.99 г.
Определение в мясе и мясопродуктах гормональных стимуляторов
роста (прогестерона, тестостерона, эстрадиола-17B) осуществляли с помощью
иммуноферментного анализа согласно "Наставлению по применению набора
для количественного определения прогестерона в продуктах животного
происхождения методом иммуноферментного анализа (ИФА-АГ-ПРОГ.)".
Утв. ДВ МСХ РФ, №13-5-02/0141 от 31.07.01.; "Наставлению по применению
набора реагентов для количественного определения тестостерона в продуктах
животного происхождения методом иммуноферментного анализа (ИФА-АГТЕСТ.)". Утв. ДВ МСХ РФ, №13-5-02/0138 от 31.07.01; "Наставлению по
применению набора для количественного определения. эстрадиола-17B в
продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа
(ИФЛ-ЛГ-ЭС1.)". Утв. ДВ МСХ РФ, №13-5-02/0146 от 31.07.01.Тестнаборы произведены ООО "Медицина. Аналитика. Ветеринария."(М.А.В.).
При
совершенствовании
использовали
методические
существующего
подходы,
метода
применяемые
ИФЛ
при
гормонов
жидкостной,
жидкостно-твсрдофазной и твердофазной экстракции, которые изложены в
соответствующих методических
руководствах
и
других
нормативных
документах (Лилли О., 1982; Смит Л., 1982; Сб. нормативных документов
ГКСЭП РФ, 1994; ZiefM., 1982, и др.).
Для очистки и концентрации экстрактов применяли концентрирующие
патроны Диапак С8 и С16, а также сорбент для хроматографии Диасорб-100С8.
Иммуноферментный
анализ
проводили
автоматическом анализаторе "Униплан"
на
иммуноферментном
производства
фирмы
"Пикон"
(Россия).
Результаты исследований
обрабатывали
методом
вариационной
статистики с определением средней арифметической величины, средней
ошибки и критерия достоверности.
Результаты исследований.
1.
Изучение содержания гормональных стимуляторов роста в
мясе отечественною и импортного происхождения.
Нами было исследовано 98 проб мяса разных видов животных (мясо
кур,
говядина,
свинина),
из
них
46
проб
—
мясо
отечественного
происхождения, 52 пробы - импортное мясо, поступившее из различных
стран (ФРГ, Польша, Бельгия, Великобритания, Нидерланды, Дания, Австрия,
США, Бразилия, Китай).
В результате проведенных исследований установлено, что в мясе
отечественного
происхождения содержание
гормональных стимуляторов
роста не превышало максимально допустимых уровней (0,015 мг/кг — для
про! естерона и тестостерона, 0,0005 мг/кг - для эстрадиола-17B). Это
свидетельствует о том, что в нашей стране данные гормональные препараты
при откорме сельскохозяйственных животных и птицы не применяются и
получаемая продукция соответствует по этому показателю ветеринарносанитарпым требованиям. Тем не менее, полностью исключить применение
гормонов в настоящее время нельзя, поскольку достаточно широкое
распространение получают различные кормовые добавки, в том числе
импортного происхождения, в составе которых могут быть и гормональные
стимуляторы роста. Все это свидетельствует о необходимости проведения
соответствующих мониторинговых исследований.
Результаты анализа мяса импортного происхождения приведены в
таблице 1.
Из представленных в таблице 1 данных видно, что из 46 проб
импортного мяса повышенное содержание хотя бы одного из определяемых
гормонов отмечено в 16 образцах, что составляет 34,8%. Превышение МДУ
прогестерона отмечено в 4 пробах (8,7%), тестостерона - в 3 пробах (6,5%),
эстраднола-
- в 11 пробах (23,9%). Уровень прогестерона в исследуемых
пробах мяса превышал максимально допустимый уровень в 1,07 - 5,3 раза,
тестостерона - в 1,13- 2,4 раза, эстрадиола-
- в 1,2 - 44 раза.
Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что проблема
поступления в нашу страну импортного мяса с повышенным содержанием
гормональных стимуляторов роста существует и никаких ограничений этому,
по-сути, нет, поскольку в существующих ныне санитарных правилах и
нормах (СанПиН 2.3.2.1078-01) исследование мяса на наличие гормонов не
предусмотрено
и
при
сертификации
продукции
этот показатель не
учитывается. В то же время в существовавших до 1997 года "Медикобиологических требованиях и санитарных нормах качества сырья и пищевых
продуктов" (МБТ №5061-89) эстрадиолдиэтилстильбэстролом, входили
и тестостерон, наряду с
в перечень показателей
безопасности,
подлежащих обязательному определению в мясе убойных животных и птицы,
но затем, по непонятным причинам, не были включены в последующие
II
Санитарные правила и нормы (СанПиН 2.3.2.560-96; СаиПиН 2.3.2.1078-01),
что, на наш взгляд, является неправильным.
2.
Совершенствование
метода
(прогестерона, тестостерона и эстраднолаПри
совершенствовании
определения
в мясе.
иммуноферментного метода определения
гормональных стимуляторов роста в мясе использовали
подходы,
применяемые
при
гормонов
жидкостной,
методические
жидкостно-твердофазной
и
твердофазной экстракции.
Поскольку
гормональные
стимуляторы
роста
являются
жирорастворимыми веществами, в качестве экстрагентов использовали такие
растворители, как диэтиловый эфир, хлороформ, гексан, ДМСО, спирты,
ацетон, а также их сочетания.
На
первом
этапе
работ
необходимо
было
оценить,
насколько
приемлемым является метод твердофазной экстракции, в основе которой
лежит принцип колоночной хроматографии, основанный на специфическом
взаимодействии распределенных в матрице компонентов с твердой фазой,
для концентрации и очистки проб. Для этого готовили пробы, содержащие
гормональные стимуляторы роста в растворителях - гексане, хлороформе и
диэтиловом эфире. Полученные пробы пропускали через активированный
патрон, а затем элюировали из патрона с использованием соответствующего
растворителя.
Результаты опытов приведены в таблицах 2-4.
Из представленных данных видно, что при использовании патронов
возрастает процент выхода исследуемых гормонов из проб по сравнению с
контролем. 13 отношение прогестерона он увеличивается в среднем в 2,11
раза (табл. 2), тестостерона - в 1,87 раза (табл. 3), эстрадиола-
- в 6,37
раза (табл. 4). При этом наиболее приемлемым для использования в качестве
растворителя проб, подготовленных для пропускания через патрон, является
гексан, лучшим активатором для патрона является поочередное пропускание
12
через нею воды и дм лиловою эфира, а предпочтительным элюентом показал
себя ДМСО.
Проведенные исследования показали, что растворение гормонов в
эфире способствовало вымыванию их из патронов при введении независимо
о п о ю , чем активировали патрон. При п о м процент вымывания гормонов из
патрона достигал 85-95 %.
Использование смесей воды и ацетона, воды и гексана, воды,
хлороформа и спирта также не способствовало удерживанию гормонов в
патроне. В то же время использование в качестве активатора воды и эфира
удерживало 100 % введенною юрмона в патроне.
В
дотаточно
качестве
элюента
использовали ДМСО,
который обеспечивал
полное выделение гормонов из патрона.
Использование для концентрации проб патронов Диапак С8 и С16 не
имело значительных отличий и показало, что оба типа патронов могут быть в
равной степени использованы в анализе.
Следующим этапом исследований была отработка стадии экстракции
гормонов из проб. Для этого определенное количество гормонов (по 50 нг
для прогестерона и тестостерона и 10 нг для эстрадиола-
вносили в 10 мл
воды, затем экстрагировали пробу гексаном, хлороформом или эфиром.
Полученный экстракт упаривали досуха, сухой остаток растворяли в 1 мл
гексана и проводили концентрирование и очистку экстрактов на патронах.
Результаты экспериментов представлены в таблице 5.
Проведенные исследования показали, что использование в качестве
жидкого экстрагента диэтилового эфира значительно повышает степень
выхода искомых веществ - до 82,8 % для прогестерона, 78,2 % для
тестостерона и 62,1% для эстраднола-17B. При этом следует отметить, что
подготовка проб без очистки на патронах значительно снижала выход
гормонов (соответственно до 38,6, 34,0 и 6,2%).
Для улучшения экстракции гормонов из проб нами был использован
сорбент Диасорб-100-С8. При проведении экспериментов гормональные
стимуляторы роста в количестве по 50 нг для прогестерона и тестостерона и
10 нг для эстрадиола вносили в 4 г сорбента, перемешивали, помещали
сорбент в деятельную воронку и промывали растворителями. Затем пробу
очищали на патронах и проводили определение гормонов.
Результаты исследований представлены в таблице 6.
Проведенные эксперименты показали, что введение в процесс
экстракции из проб сорбента не дает значительного увеличения процента
выхода гормонов.
эстрадиола-
Поэтому для выделения прогестерона, тестостерона и
из
проб
в
дальнейшем
использовали
жидкостно-
твердофазную экстракцию.
Апробацию усовершенствованного нами метода проводили на пробах
мяса различных видов животных, а также мяса рыб, сухого молока и
сливочного
масла,
в
которые
искусственно
вносили
гормональные
18
стимуляторы pocта, а затем проводили определение их уровня в исследуемых
пробах с использованием разработанных нами методических подходов.
Результаты исследований представлены в таблице 7.
Из представленных в таблице 7 данных видно, что использование
жидкостно-твердофазной экстракции позволяет увеличить процент выхода
гормональных
стимуляторов
роста
из
проб
продукции
животного
происхождения в среднем до 45 - 90% в зависимости от типа гормона и вида
19
продукта, что гораздо выше, чем
при использовании общепринятой
методики. Для прогестерона это увеличение составило 60,1 - 95,6%, для
тестостерона - 55,2 - 78,2%, для эстрадиола-17B - 40,8 - 65,2%. С
увеличением в исследуемой пробе количества жира степень экстракции
гормонов несколько снижалась, что соответствует литературным данным и
связано с трудностями разделения липидов и жирорастворимых гормонов.
В целом предлагаемая нами схема анализа состоит в следующем:
- жидкостная экстракция гормонов из проб диэтиловым эфиром;
- упаривание экстрактов и растворение сухого остатка в 2 мл гексана;
- очистка на патронах Диапак С8 или С16 (твердофазная экстракция)
с последующим элюированием ДМСО;
-
количественное определение гормонов методом ИФА с помощью
вертикальной спектрофотометрии.
3» Влияние температурной обработки мяса на содержание в нем
гормональных стимуляторов роста.
Поскольку повышенный уровень гормональных стимуляторов роста в
мясе
и
мясопродуктах
выдвигает
определенные
ограничения
для
использования такого сырья на общих основаниях, то нахождение путей его
технологической реализации является актуальной задачей.
Нами с целью изучения возможности снижения уровня гормонов в
мясе изучено влияние на содержание этих веществ температурной обработки
мяса- его замораживания с последующим хранением и варки.
В опытах использовали образцы мяса разных видов животных (мясо
птицы, говядину и свинину), в которые искусственно вносили определенное
количество гормональных стимуляторов роста, а также мясо с естественным
содержанием в нем гормонов.
Установлено, что замораживание мяса до температуры в толще
мускулатуры минус 6°С и минус 12°С и последующее хранение в течение 1030 дней не влияет на уровень исследованных нами гормонов (прогестерона,
20
тестостерона, эстрадиола-
что не позволяет рекомендовать данные
температурные режимы для его обработки.
Не влияет на уровень гормонов в мясе и его многократное (до 10 раз)
замораживание и оттаивание.
Мясо подвергали также провариванию в кипящей воде до достижения
температуры в толще мускулатуры 100°С с последующей экспозицией 30, 60
и 120 минут. В результате было установлено, что при этом происходит
снижение
первоначального
уровня
всех
изученных
нами
гормонов
пропорционально длительности температурного воздействия, хотя и в
неодинаковой степени. Для прогестерона это снижение составило при
длительности варки 30, 60 и 120 минут в среднем, соответственно, 28,6, 50 и
61,5%, для тестостерона - 16,7, 28,6 и 44,5%, для эстрадиола-
- 33,4, 52,4
и 67,8% (рис. 1).
Как видно из приведенных данных, наиболее приемлемой является
варка мяса в течение 1 — 2-х часов, что обеспечивает достаточно заметное
снижение содержания в нем гормонов.
Исходя
из
этого,
можно
рекомендовать
использовать
мясо
с
повышенным содержанием в нем гормональных стимуляторов роста после
соответствующей термической обработки, в том числе для выработки
мясопродуктов, при изготовлении которых предусматривается применение
высоких температур.
22
выводы
1. Установлено, что в мясе разных видов животных (мясо пгицы,
говядина, свинина) импортною происхождения содержание гормональных
стимуляторов роста (протестерона, тестостерона, эстрадиола-
может
превышав их максимально допустимые уровни, в то время как в мясе
отечественною происхождения этого превышения не обнаружено.
2. Из исследованных образцов импортного мяса превышение МДУ
прогестерона отмечено в 8,7 % проб, тестостерона — в 6,5 % проб и
эстрадиола-
- в 23,9 % проб; при этом величина превышения составляла
для данных гормонов, соответственно, 1,07-5,3, 1,13-2,4 и 1,2-44 раза.
3.
Усовершенствована
методика
определения
гормональных
стимуляторов роста (прогестерона, тестостерона, эстрадиола-
в мясе,
которая заключается в экстракции гормонов из проб серным эфиром, очистке
эфирных экстрактов на патронах Дианак С8 или С16 и количественном
определении содержания гормонов методом иммуноферментного анализа.
4. Показано, что применение жидкостно-твердофазной экстракции
позволяет увеличить степень выхода гормонов из проб мяса и других
продуктов животного происхождения - до 60,1-95,6 % для прогестерона, до
55,2-78,2% для тестостерона и до 40,8-65,2% для эстрадиола-
что
существенно повышает чувствительность метода и его объективность.
5. Разработанные нами методические подходы обеспечивают высокую
степень универсальности анализа при исследовании различных продуктов
животного
происхождения
— мяса,
рыбы,
молока,
жиросодержащих
продуктов.
6. Установлено, что варка мяса способствует снижению содержания в
нем гормональных стимуляторов роста пропорционально длительности
температурного воздействия. Для прогестерона это снижение составило при
23
длительности варки 30, 60 и 120 минут, соответственно, 28,6, 50 и 61,5%, для
тестостерона - 16,7, 28,6 и 44,5%, для эстрадиола7.
На
основании
проведенных
- 33,4, 52,4 и 67,8%.
исследований
рекомендуется
использовать мясо с повышенным содержанием в нем гормональных
стимуляторов роста после соответствующей термической обработки, в том
числе
для
выработки
мясопродуктов,
при
изготовлении
которых
предусматривается применение высоких температур.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ
Для
использования
лабораториях
могут
в
научно-исследовательских
быть
рекомендованы
учреждениях
разработанные
"Методические рекомендации по определению эстрадиоламясопродуктах
методом
иммуноферментного
анализа"
и
нами
в мясе и
(утверждены
Отделением ветеринарной медицины РАСХН, 2003 г.), "Методические
рекомендации по определению тестостерона в мясе и мясопродуктах
методом
иммуноферментного
анализа"
(утверждены
Отделением
ветеринарной медицины РАСХН, 2003 г.), "Методические рекомендации по
определению
прогестерона
иммуноферментного
в
анализа"
мясе
и
(утверждены
мясопродуктах
Отделением
методом
ветеринарной
медицины РАСХН, 2003 г.).
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ
1. Островская А. В. Определение гормональных стимуляторов роста в
продуктах животного происхождения // Материалы 4-ой международной
научно-практической конференции "Актуальные проблемы ветеринарной
медицины
и
ветеринарно-санитарного
продукции". Москва, 2002, стр.53.
контроля сельскохозяйственной
24
2. Островская Л. В. Контроль уровня гормональных стимуляторов
роста в мясе и мясопродуктах // Тезисы докладов Международной научной
конференции
"Современные
достижения
и
проблемы
биотехнологии
сельскохозяйственных животных". Дубровицы, 2002 г., стр. 152-153.
3. Островская Л. В. Долгов В. А., Совершенствование методов
определения гормональных стимуляторов роста в мясе и мясопродуктах //
Материалы пятой международной научно-технической конференции "Пища.
Экология. Человек". Москва, 2003, стр. 98-99.
4. Долгов В. Л., Лавина С. А., Арно Т. С, Семенова Е. А., Островская
А. В., Кулешова М. Г. Совершенствование методологии оценки ветеринарносанитарного
качества
и
безопасности
продуктов
животноводства
//
Материалы II Международной научно-практической конференции "Научнотехнический прогресс в животноводстве России - ресурсосберегающие
технологии
производства
экологически
безопасной'
продукции
животноводства". Дубровицы, 2003, стр.250-251.
5. Долгов В. А., Лавина С. А., Островская А. В, Боровков М. Ф.,
Макарова И. Е. Пути совершенствования оценки ветеринарно-санитарного
качества и безопасности продуктов животноводства // Материалы пятой
международной
научно-технической
конференции
"Пища.
Экология.
Человек". Москва, 2003, стр. 248-249.
6. Долгов В. А., Лавина С. А., Арно Т. С, Семенова Е. А., Островская
А. В., Кулешова М. Г. Поиск новых подходов в методологии оценки
ветеринарно-санитарного качества продуктов животного происхождения //
Тезисы докладов Международной научной конференции "Современные
достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных".
Дубровнцы, 2003 г., стр. 104-105.
;
,l