К вопросу о диагностике диабетической нефропатии Диабетическая нефропатия (ДН) Распространенность СД По данным ВОЗ: 347 млн больных СД в мире 6-10 % населения в развитых странах более 80% смертей от диабета происходят в странах с низким и средним уровнем дохода По прогнозам к 2050 году распространенность СД достигнет 15% населения земного шара. Распространенность СД: По данным Министерства здравоохранения РФ 2009 г. 2009 год 2014 г. 3 029 397 человек больны СД Из них: 293 799 - 1 типа 2 735 775 - 2 типа 1 января 2014 года 3 964 889 человек больны СД 1 типа 2 типа Из них: 339 360 - 1 типа 3 625 529 - 2 типа Прогноз По данным Международной диабетической ассоциации (IDF), количество больных диабетом в России, с учетом не диагностированных случаев, достигает 12,7 млн чел. По самым оптимистическим прогнозам в 2030 году в России число людей, больных сахарным диабетом увеличится в 1,5 раза, т.е. составит более 5 млн. чел. Прогноз По прогнозу Международной диабетической федерации (IDF) к 2030 г. в мире количество больных диабетом в возрасте 20-79 лет достигнет 552 млн. чел. Диабетическая нефропатия • ДН осложняет с частотой 40-50% СД 1 15-30% СД 2. • Выявление ДН напрямую зависит от длительности СД. • Ежегодно у ~ 500 тыс. пациентов перестают работать почки → гемодиализ и пересадка почки. В процессе прогрессирования ДН Увеличивается количество белка выделяемого с мочой Снижается скорость клубочковой фильтрации (СКФ) Увеличивается содержание в крови продуктов распада белков (азотсодержащих соединений: креатинина и мочевины) Причины развития ДН Гипергликемия Дислипидемия Внутриклубочковая гипертензия Артериальная гипертензия Стадии развития ДН по C.E. Mogensen Стадия ДН Выделение белка, мг/л Креати-нин сыв. мкмоль/л АД Характеристики почки Сроки развития от начала заболева-ния СД 1. Стадия гиперфункции N МАУ < 20 N (60-100) N Гипертрофия почек, увеличение почечного кровотока В дебюте СД 2. Стадия начальных структурных изменений N МАУ < 20 ↑↑ N (60-120) ↑ Утолщение базальных мембран капилляров клубочков, расши-рение мезангиума > 2-5 лет 3. Стадия начинающейся ДН МАУ (20-200) ↑ Верхн. граница N ↑↑ Углубление морфологических изменений > 5 лет 4. Стадия выраженной ДН ПУ > 350 N или ↑↑↑ Не менее 50% клубочк-ов склерозировано > 10-15 лет ↓ (120-400) 5. Стадия уремии ПУ ≥2000 <10 ↑↑↑↑ ↑↑↑ Тотальный гломерулосклероз. Самоот-равление организма продуктами обмена веществ. > 15-20 лет (5-7 лет после начала ПУ) СКФ, мл/мин ↑↑ > 140 или N ↑↑ > 400 азотемия. Следует помнить Только первые 3 стадии ДН могут быть обратимыми при рано начатой коррекции гипергликемии. На стадии протеинурии терапия нарушений углеводного обмена уже не способна остановить или существенно затормозить быстрое прогрессирование ДН. Своевременная диагностика ДН на ранних стадиях - важная задача. Классификация ДН (формулировка диагноза) Стадия микроальбуминурии (МАУ) Стадия протеинурии, с сохраненной азотвыделительной функцией почки Стадия хронической почечной недостаточности (ХПН) (с нарушенной азотвыделительной функцией почки ) Диагностика ДН (обязательные методы исследования): Скорость клубочковой фильтрации (СКФ) Креатинин и мочевина сыворотки крови HbA1с, липиды крови, АД, ЭКГ, обследование глазного дна. Микроальбуминуриия (МАУ) Протеинурия (в общеклиническом анализе мочи и моче, собранной за сутки) Исследование осадка мочи (эритроциты, лейкоциты) Методы определения микроальбуминурии Иммунотурбидиметрия ИФА Тест-полоски (полукол и чес тв енны й метод) Альбуминурия В утр. порции (мкг/мин) За сутки (мг) Концентрация альбумина в моче (мг/л) Альбумин/ креатинин мочи (мг/ммоль) Норма < 20 < 30 < 20 < 2,5 (М) < 3,5 (Ж) МАУ 20-199 30-299 20-199 2,5-25,0 (М) 3,5-25,0 (Ж) Протеинурия ≥ 200 ≥ 300 ≥ 200 > 25 Методы исследования протеинурии ПГК-метод ССК-метод Тест-полоски (полуколичественный метод) Другие методы Скрининг ДН Тест на протеинурию Ретест на протеинурию да (3 раза/мес.) нет нет да Тест на МАУ да ДН стадия протеинурии нет Ретест на МАУ (3 раза/мес.) да Ежегодный скрининг на МАУ нет ДН стадия МАУ Лечение Лечение Трудности определения белка в моче обусловлены: ! низким содержанием белка в моче здорового человека, сопоставимым с чувствительностью методов; ! присутствием в моче соединений, искажающих результаты анализа; ! широким варьированием содержания и состава мочевых белков при различных заболеваниях. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОТЕИНУРИИ Метод с пирогаллоловым красным (ПГК-метод) Принцип: Метод с ПГК основан на взаимодействии белка с красителем, в результате чего образуется окрашенный комплекс, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации белка в пробе. Г А А Г А Г А А А А Альбумин составляет 30-75 % от общего белка в моче ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОТЕИНУРИИ Метод с пирогаллоловым красным (ПГК-метод) Достоинства: Простота анализа Устойчивость комплекса белка с ПГК Низкая интерференция с другими компонентами мочи Высокая чувствительность Пригоден для биохимических анализаторов ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАУ Иммунотурбидиметрический метод определения концентрации альбумина Принцип: метод основан на формировании иммунного комплекса альбумина с антителами к человеческому альбумину, в результате чего образуется преципитат, рассеивающий свет. + РЕАГЕНТ ОБРАЗЕЦ ПРЕЦИПИТАТ Иммунотурбидиметрический метод определения концентрации альбумина Высокая чувствительность Нет интерференции с другими компонентами мочи Простота анализа Пригоден для биохимических анализаторов Ранняя диагностика заболеваний почек Цель работы: Оценка информативности методов определения микроальбуминурии для ранней диагностики ДН у пациентов с СД 2 типа Яковлева Г.Е., Руяткина Л.А., Степанова Е.Г. и др. ГОУ ВПО НГМУ Росздрава; МБУЗ ГКБ №1, ЗАО «Вектор-Бест» Новосибирск Обследовано: 241 пациент с диагнозом СД типа 2 в возрасте от 42 до 74 лет, со стажем диабета от 1 до 35 лет. Методы: МАУ - иммунотурбидиметрический метод ПУ - колориметрический ПГК-метод Креатинин - кинетический метод Яффе СКФ - Кокрафт-Голт Обследованные пациенты были разделены на группы с различной стадией ДН, согласно принятой классификации по уровню МАУ Уровень МАУ у обследованных больных МАУ, мг/л N <20 20-200 > 200 193 37 11 МАУ 20-200 мг/л (37 чел.) ПГК < 120 мг/л ( 24%) 9 чел. ПГК > 120 мг\л (76%) 28 чел. Информативность методов диагностики ДН на ранней стадии У 24% обследованных пациентов с микроальбуминурией уровень белка в моче, определенный рутинным методом, был в норме. Для своевременной диагностики необходимо использование высокочувствительных методов, позволяющих выявлять небольшие количества альбумина в моче. Определение уровня общего белка наиболее эффективно на стадии протеинурии. Наборы для определения концентрации белка в моче методом с ПГК № по кат. В-8047 В-8084 Название набора Фасовка Оборудование Белок-ПГК-Ново 2100 мл 2250 мл Любое Наборы для определения концентрации альбумина в моче иммунотурбидиметрическим методом Набор реагентов № по кат. В-9515 Название набора МикроальбуминНово Состав набора Фасовка Жидкий биреагент + калибратор 148 мл 18 мл Контрольные материалы № по кат. Название набора Аналит Фасовка В-9519 МикроальбуминНово (контроль) Альбумин 2-х уровней концентрации 11 мл (Ур. 1) 11 мл (Ур. 2) Микроальбумин-Ново характеристика набора Жидкие готовые к использованию реагенты Анализируемые образцы – моча человека Калибратор входит в состав набора Высокая стабильность реагентов (срок годности 2 года) Диапазон измерений – до 400 мг/л Нормальные значения – до 25 мг/л, до 30 мг/сут Спасибо за внимание! www.vector-best.ru Наборы для определения креатинина Кат № Название набора Фасовка Форма выпуска Креатинин-Ново-А 1×100 мл 1×200 мл 1×500 мл Жидкие реагенты В-8315 В-8316 Креатинин-Ново-А (биреагент) 1×80 мл; 1×20 мл 2×200 мл; 2×50 мл Жидкие реагенты B-8332 B-8333 Креатинин-ПАП-Ново 2×20 мл; 2×5 мл 2×40 мл; 2×10 мл Жидкие реагенты В-8307 В-8302 В-8303 Оборудование Для автоматов, п/автоматов Наборы для определения мочевины Кат.№ Название набора Фасовка Форма выпуска Оборудование/метод В-8050 В-8074 Мочевина-Ново 1×100 мл; 1×20 мл 1×200 мл; 1×40 мл Жидкие реагенты Для ручного анализа и п/ автоматов (реакция Бертлота) В-8053 В-8073 Мочевина-УФНово 2×50 мл 2×100 мл Лиофилизат+ буфер В-8091 В-8092 Мочевина-УФНово (ж/ф) 2×80 мл; 2×20 мл 2×200 мл; 2×50 мл Жидкий биреагент Для п/ автоматов и автоматов (УФ-кинетический) Определение МАУ у больных СД 2 типа с различным уровнем протеинурии, определенным методом с ПГК МАУ < 20 мг/л % % 0,6 % МАУ 20-200 мг/л МАУ > 200 мг/л 31 % 83 % МАУ – 22-47 мг/л 93 % 99,4 % 69 % 7 % ПГК<80 мг/л (173 чел.) ПГК 80-120 мг/л (29 чел.) ПГК<120-400 мг/л (27 чел.) 17 % ПГК>400 мг/л (12 чел.)