На правах рукописи КОЩЕЕВА АННА ВАСИЛЬЕВНА ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ЛОШАДЕЙ ТРАКЕНЕНСКОЙ ПОРОДЫ РАЗЛИЧНЫХ ПОЛОВОЗРАСТНЫХ ГРУПП ПРИ ВВЕДЕНИИ В РАЦИОН КОНЪЮГИРОВАННЫХ ФОРМ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ 03.03.01 – Физиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва – 2012 1 Работа выполнена на кафедре физиологии, общей биологии и основ ветеринарии ФГБОУ ВПО «Тверская государственная сельскохозяйственная академия» Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент Алексеева Людмила Владимировна Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Епифанов Виктор Геннадьевич кандидат биологических наук Ревякин Артем Олегович Ведущая организация: ГНУ «Научно-исследовательский институт кормов имени В.Р. Вильямса» Защита диссертации состоится «20» февраля 2012г. в «16.00» на заседании диссертационного совета Д 220.043.09 при ФГБОУ ВПО «Российский государственный аграрный университет – МСХА имени К.А. Тимирязева» по адресу: 127550, Москва, ул. Тимирязевская 49, Учёный совет РГАУ – МСХА имени К.А. Тимирязева, тел/факс: 8(499)976-24-92 С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ имени Н.И. Железнова Российского государственного аграрного университета – МСХА имени К.А. Тимирязева Автореферат разослан, размещён в сети Интернет на сайте университета www.timacad.ru и направлен на сайт Министерства образования и науки РФ по адресу: referat vak@mоn.gov.ru «20» января 2012г. Учёный секретарь диссертационного совета А.А.Ксенофонтова 2 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. У лошадей, в отличие от других сельскохозяйственных животных, дефицит тех или иных микроэлементов в организме редко проявляется клиническими признаками. По этому проблеме микроэлементного статуса организма лошади ранее уделялось недостаточно внимания. Однако, изучая патогенез миоглобинурии лошадей в 50х-60х г.г. прошлого столетия, отечественные учёные (Лыжина В.А.,1962; Онегов А.П.,1952) предположили, что одной из причин возникновения данного заболевания может являться недостаточность некоторых микроэлементов в кормах, в частности селена. Доказано, что возникновение такого, достаточно редко встречаемого заболевания, как беломышечная болезнь жеребят напрямую связано с дефицитом селена в их организме (Lofstedt J.,1997). Учитывая тот факт, что в 2009 году на крупнейшей в России коневодческой ферме ООО «Снайп» в Тверской области была зарегистрирована вспышка беломышечной болезни жеребят, изучение селенового статуса лошадей в данном регионе, почвы которого содержат недостаточное количество некоторых микроэлементов, является актуальным. Так же немаловажным является изучение статуса меди и цинка в организме лошади. В последние десятилетия зарубежные учёные большое внимание уделяют роли меди и цинка в возникновении такого заболевания, как ортопедическая болезнь роста молодняка лошадей, которая проявляется различными патологиями опорно– двигательного аппарата жеребят (Pagan JD, Jackson SG.,1996). Рождение жеребят с врождённой деформацией конечностей, по данным некоторых исследователей, может быть результатом дефицита меди в организме их матерей. Лошадь с нежелательной конфигурацией конечностей теряет племенную и спортивную ценность, и эта проблема встречается во многих хозяйствах, занимающихся разведением спортивных лошадей на территории России. В настоящее время о важности микроэлементов для здоровья лошади упоминается в аннотациях подкормок для к применению лошадей. Но множества для комплексных обеспечения специализированных нормального течения всех физиологических процессов в организме необходимо учитывать не только содержание в рационе минеральных веществ, но и их доступность. 3 Наиболее перспективным является введение минеральных веществ в виде кнъюгированных форм - комоплексонатов. Одним из таких препаратов является Гемовит-меян. Он представляет собой комплекс микроэлементов с органическим лигандом - метионинянтарной кислотой. В данном эксперименте в хозяйственный рацион лошадей различных половозрастных групп вводился препарат Гемовит-меян и изучалось его влияние на физиологическое состояние животных и изменение концентрации некоторых микроэлементов в различных биологических средах организма. Так же оценивалось влияние препарата Гемовит – меян на формирование и развитие опорно-двигательного аппарата жеребят от кобыл, которые получали его в последние два месяца жерёбости. Цель настоящей работы – экспериментальное Цель и задачи исследований. обоснование применения препарата Гемовит-меян в кормлении лошадей с целью нормализации физиологического состояния и минерального обмена. В связи с этим были поставлены следующие задачи: - изучить влияние препарата на общие клинические и биохимические показатели крови лактирующих кобыл и жеребят - сосунов, а так же молодых лошадей, находящихся в тренинге; - изучить влияние препарата на содержание микроэлементов Se, Сu, Zn в крови и волосяном покрове; - выявить влияние кормовой добавки Гемовит-меян на развитие опорно- двигательного аппарата новорожденных жеребят; - рассчитать экономическую эффективность использования препарата в период лактации, роста и развития лошадей. Научная новизна Впервые исследований. использования кормовой добавки исследование Гемовит-меян в рационах лошадей тракененской породы различных половозрастных групп. микроэлементного статуса проведено Впервые показано изменение лошадей под воздействием кормовой добавки Гемовит- меян. Установлено его влияние на обменные процессы в организме лошадей и на формирование конечностей жеребят. Практическая значимость. Применение препарата Гемовит-меян улучшило физиологическое состояние, стимулировало эритропоэз и синтез гемоглобина, 4 активизировало минеральный обмен в организме лошадей, существенно снизило частоту возникновения врождённых деформаций конечностей жеребят. Основные положения, выносимые на защиту. Использование препарата Гемовит-меян, содержащей хелатный комплекс микроэлементов в рационе лошадей тракененской породы в дозе 30 г/гол сутки: 1. влияет на микроэлементный статус организма; 2. улучшает физиологические показатели и нормализует процессы обмена веществ; 3. снижает вероятность возникновения деформации конечностей у новорожденных жеребят; 4. повышает рентабельность выращивания племенных спортивных лошадей. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на четырёх научных конференциях: Междунар. научно- практ. конф. «Инновационные технологии и способы повышения продуктивности с.х. животных», Тверь-2010г.; XI Междунар. научно-практ. конф. « Болезни лошадей: диагностика, профилактика и лечение» Москва, 2010; V Междунар. научно-практ. конф. Посвящённой 50 летию ВНИИФБиП, Боровск 2010; Междунар. научно-практ. конф. «Инновационные процессы – основа модели стратегического развития АПК в XXI веке», Тверь 2011. Публикация результатов исследования. По результатам исследований были опубликованы 5 научных статей, отражающие основные положения диссертационной работы, в том числе одна из них в журнале, рекомендованном ВАК Министерства образования и науки РФ. Структура и объём работы. Диссертация изложена на 104 страницах, содержит 16 таблиц, 22 рисунка, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы. Библиографический список включает 140 источников, в том числе 55 на иностранных языках. 5 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ Для изучения влияния препарата Гемовит-меян на физиологическое состояние лошадей тракененской породы был поставлен научно-хозяйственный опыт. Гемовит-меян – хелатный комплекс метионинянтарной кислоты с железом, марганцем, цинком, медью, кобальтом, селеном, йодом, при следующем соотношении компонентов, масс.%: тринатриевая соль метионинянтарной кислоты 15,0-40,0; железо1,0-5,5; марганец 0,25-3,0; медь 0,1-0,55; цинк 0,05-1,5; кобальт 0,02-0,3; селен 0,02-0,06; йод 0,01-0,08. В препарате микроэлементы находятся в виде биохимических структур, сходных с транспортными белками организма, что обеспечивает их повышенную усвояемость и биодоступность. Для удобства использования Гемовит-меян распылялся на пшеничные отруби и биодобавка использовалась в рекомендованных производителем дозах, а именно 30 г/гол в сутки. Опыт проводился на базе племконефермы ООО «Ферма ПАЛЛАДА» Кимрского района Тверской области. Для исследований было сформировано две группы подсосных кобыл жеребятами, по 3 кобылы в каждой, с по принципу пар-аналогов с учетом породы, происхождения, возраста, кондиции, срока выжеребки и две группы молодых лошадей, по 3 головы в каждой, так же по принципу пар-аналогов, с учётом пола, возраста, происхождения, уровня тренированности. Препарат вводился в рацион лактирующих кобыл на третьем месяце лактации, а также в рацион молодых лошадей трёх лет находящихся в тренинге. Он скармливался в течении двух месяцев (60 дней) в количестве 30г на голову согласно рекомендации производителя в смеси с концентрированными кормами в вечернем кормлении (1 раз в сутки). Исследования проводили по представленной на рисунке 1 схеме. 6 Собственные исследования Лабораторные Общий клинический анализ крови Эритроциты Гемоглобин Лейкоциты Научно-производственные Биохимический анализ крови Изучение влияния кормовой добавки Гемовит-меян на конфигурацию конечностей новорожденных жеребят Показатели белкового, углеводного, жирового и минерального обмена Содержание в крови Se ,Cu, Zn Расчёт экономической эффективности применения биодобавки Исследование твёрдых субстратов на содержание в них Se,Cu, Zn Гемовит-меян ВЫВОДЫ И ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ Рис. 1. Схема исследований В ходе исследований для общего клинического и биохимического анализа были взяты пробы крови от опытных и контрольных животных. Для анализа содержания Se, Cu, Zn (в мг/кг) в твёрдых субстратах отбирали волосы из гривы лошадей путём состригания их ножницами в области холки. 7 В конце периода исследований были взяты повторные пробы крови и волос лошадей. Исследование проводили в лаборатории ГНУ Всероссийского научно- исследовательского института животноводства г. Дубровицы. Клинические исследования крови проводились на аппарате АБХ MICRO 60-OT(Open Tube) – автоматизированном гематологическом тестирования цельной крови анализаторе in vitro, для производство диагностического ABXHEMATOLOGIE , Франция. Биохимические исследования крови проводились на биохимическом автоматическом анализаторе Vitalab Flexor E производство Vital Scientifie, Нидерланды. Спектральный анализ твёрдых субстратов проводился на атомноабсорбционном спектрометре с пламенной атомизацией «КВАНТ-2», Россия. Для научно-производственных исследований было сформировано две группы жерёбых кобыл по 10 голов в каждой по принципу пар-аналогов с учетом породы, происхождения, возраста, кондиции и периода жерёбости. Препарат вводился в рацион кобыл в последние два месяца жерёбости и в течение первых двух месяцев лактации в количестве 30г на голову в сутки. На этом этапе мы визуально оценивали физиологическую зрелость опорно-двигательного аппарата у новорожденных жеребят, наличие или отсутствие у них врождённых деформаций конечностей. Полученный цифровой материал обрабатывали на персональном компьютере с применением программы Exсel 2003, а так же программы ACD. Данные в работе представлены в виде среднего арифметического и стандартного отклонения. Достоверность различий между параметрами оценивали с помощю критерия Стъюдента. Данные считали достоверными при уровне значимости Р≤0,05; Р≤ 0,01; Р≤ 0,001. 3.РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Влияние препарата Гемовит-меян на клинические показатели крови лошадей Наиболее важными показателями физиологического состояния любого живого организма являются общие клинические показатели крови. В рамках данного эксперимента мы определяли количество эритроцитов, лейкоцитов и уровень 8 гемоглобина в крови лошадей. В таблицах 1-2 представлены гематологические показатели различных групп лошадей в первой половине и в конце исследований. Таблица 1 Гематологические показатели крови лошадей тракененской породы в первой половине исследований Эритроциты 1012/л Гемоглобин г/л Лейкоциты 109/л Лакт. кобылы 6,98±0,32 109±0,51 7,52±0,89 Жер.- сосуны 10,31±0,46 120,4±0,58 14,13±0,61 Мол лошади 8,22±0,41 110,9±0,48 6,49±0,68 Лакт. кобылы 7,12±0,29 123,2±0,61 7,09±0,99 Жер.- сосуны 10,24±0,58 117,00±0,49 8,88±0,48 Мол лошади 8,39±0,34 123,7±0,61 6,35±0,84 Контрольная группа Опытная группа Таблица 2 Гематологические показатели крови лошадей тракененской породы в конце исследований Эритроциты 1012/л Гемоглобин г/л Лейкоциты 109/л Лакт. кобылы 7,07±0,29 128,25±0,51 6,0±0,35 Жер-сосуны 9,8±0,55 145,7±0,56 11,82±0,61 Мол. лошади 7,85±0,58 127,1±0,29 6,54±0,64 Лакт. кобылы 7,56±0,38 150,95±0,56*** 8,0±0,28 Жер-сосуны 10,57±0,35 146,3±0,61 12,48±0,48 Мол. лошади 8,71±0,56 147,93±0,71*** 6,81±0,71 Контрольная группа Опытная группа Примечание. Здесь и далее в таблицах статистическая значимость различий: *- Р≤0,05;**- Р≤ 0,01; ***-Р≤ 0,001 9 В ходе опыта была отмечена тенденция к увеличению содержания количества эритроцитов и гемоглобина в крови кобыл опытной группы на 5,8% и 18% соответственно. Повышение количества эритроцитов и гемоглобина указывает на интенсивность обменных процессов в организме, это способствует ускорению тканевого дыхания, интенсивности кровообращения в молочных железах и образования молока в период лактации, что отражается на полноценном кормлении жеребят и их росте. У жеребят в исследуемых группах количество эритроцитов в первой половине исследований было примерно одинаково. К концу исследований концентрация эритроцитов в крови жеребят опытной группы повысилась на 3%, а в контрольной группе понизился на 5%. Уровень гемоглобина в данном объекте исследований у жеребят опытной группы повысился на 20%, а в контрольной на 17 %. Повышение концентрации эритроцитов и уровня гемоглобина в крови может свидетельствовать о повышении продолжительности жизни красных кровяных телец и возростании скорости эритропоэза и синтеза гемоглобина в эритробластах. При введении в рацион молодых трёхлетних лошадей, находящихся в тренинге, препарата Гемовит – меян наблюдалось увеличение эритроцитов в крови животных опытной группы за период исследований на 3,6 %. В контрольной же группе наблюдается снижение количества эритроцитов на 4,6 %. В опытной группе количество гемоглобина в конце опыта увеличилось на 16,3%, в контрольной группе количество гемоглобина также несколько возросло, что можно объяснить увеличением уровня тренированности животных, однако, при одинаковой физической нагрузке количество гемоглобина в крови лошадей опытной группы значительно выше, что является следствием действия препарата и стимулирующим его влиянием на обмен веществ. Количество лейкоцитов в крови лошадей в ходе опыта не выходило за рамки физиологических норм и варьировало в зависимости от индивидуальных реакций организма на факторы внешней среды. 10 3.2. Влияние препарата Гемовит-меян на биохимические показатели крови лошадей Исследуя биохимические показатели белкового, углеводного, жирового и минерального обменов было установлено, что биодобавка Гемовит-меян оказала заметное влияние на белковый и углеводный обмен. Белки крови выполняют многие функции: поддерживают постоянство онкотического давления, рН крови, уровень катионов в ней, играют важную роль в образовании иммунитета, комплексов с углеводами, липидами, гормонами и другими веществами. Содержание сывороточных белков во многом зависит от состояния печени. Снижение общего белка сыворотки крови отмечают при многих нарушениях минерального обмена, таких как остеодистрофия, уровская болезнь, гипокобальтоз, энзоотический зоб. Изменения показателей белкового обмена в ходе опыта представлены в таблице 3. У подсосных кобыл опытной группы количество общего белка в ходе опыта не изменилось, а в контрольной группе произошло понижение на 8,7%. Можно предположить, что биодобавка Гемовит-меян поддерживает процесс молокообразования у лактирующих кобыл. Исследуя белковые показатели крови молодых лошадей, мы установили, что уровень общего белка в опытной группе повысился на 9,6%, что почти в 4 раза больше чем в контрольной, что, по всей видимости, благотворно влияет на накопление мышечной массы у работающих лошадей. У жеребят-сосунов существенных изменений по данному показателю не выявлено. Изменения показателей отдельных фракций остаточного азота, таких как мочевина и креатинин в наших исследованиях не имели большого значения, так как не сильно варьировали и не выходили за рамки физиологических норм. Мочевина является основным конечным продуктом азотистого обмена, значительные отклонения от физиологических норм наблюдают при заболеваниях почек, воспалительных и дегенеративных процессах, лихорадочных состояниях, если идёт значительный распад тканевых белков. 11 Таблица 3 Показатели белкового обмена лошадей Показатели Первая половина иссл-ний Контрольная Опытная Конец исследований Контрольная Опытная Подсосные кобылы Общий белок 68,41±0,99 69,28±1,04 62,46±1,29 69,31±2,01** 4,89±0,17 4,98±0,22 5,13±0,29 5,89±0,31 89,33±1.04 105,09±0,89 80,79±0,87 87,30±0,89** г/л Мочевина ммоль/л Креатинин мкмоль/л Жеребята-сосуны Общий белок 61,71±1.29 64,28±2,01 63,63±0,98 65,26±1,99* 3,84±0,17 4,09±0,21 5,91±0,17 6,39±0,42 129,17±0,99 123,17±1,24 125,09±1,20 116,73±1,02** г/л Мочевина ммоль/л Креатинин мкмоль/л Молодые лошади в тренинге Общий белок 62,92±1,06 62,83±0,89 64,58±0,87 69,51±0,31** 4,40±0,19 5,46±0,09 4,61±0,36 5,01±0,31 97,07±1,99 130,66±1,24 95,60±1,99 112,55±1,04*** г/л Мочевина ммоль/л Креатинин мкмоль/л Креатинин в организме образуется из креатина в результате дегидратации, содержится в основном в мышечной ткани, его количество в крови относительно постоянно. Повышается концентрация креатинина при почечной недостаточности, заболеваниях почек, голодании, мышечной дистрофии. Можно предположить, что более значительное понижение креатинина в пределах физиологических норм в 12 опытных группах вызвано положительным влиянием Гемовит-меян на обменные процессы в организме. На рисунке 2 представлена динамика содержания общего белка в сыворотке крови подсосных кобыл и молодых лошадей. Общий белок г/л 75 70 65 60 55 подсосные кобылы лошади в тренинге 69,28 68,41 69,51 69,31 62,92 62,46 64,58 62,83 Первая половина Конец опыта Контрольная Опытная Контрольная Опытная группа группа группа группа Рис.2. Динамика содержание общего белка в крови лошадей. На рисунке 3 представлена динамика креатинина в ходе опыта у подсосных кобыл и лошадей в тренинге. Креатинин мкмоль/л 150 100 подсосные кобылы лошади в тренинге 89,33 80,79 105,09 97,07 95,6 87,3 130,66 112,55 50 Первая половина 0 Конец опыта Контрольная группа Опытная группа Контрольная группа Опытная группа Рис.3. Динамика содержания кретинина в крови лошадей. Глюкоза – основной источник энергии для многих клеток организма. На её долю приходится постоянный более 90% уровень всех глюкозы низкомолекулярных в крови углеводов. поддерживается Относительно в результате сахароснижающего свойства инсулина и сахароповышающего свойства адреналина, глюкагона и глюкокортикоидов. Снижение сахара крови встречается при вторичной остеодистрофии и токсических поражениях печени. В данных исследованиях отмечено положительное действие препарата Гемовит-меян на организм кобыл и молодых лошадей: в пределах физиологических норм уровень глюкозы в крови опытной группы повысился на 7,6 % (с 4,59±0,35 до 4,97±0,38 ммоль/л у кобыл и с 5,58±0,36 до 6,04±0,34 ммоль/л у молодых лошадей), а в контрольной группе 13 показатель глюкозы крови понизился на 0,4 % у кобыл и на 26,3% у молодых лошадей. Повышение уровня глюкозы в пределах физиологических норм – положительный показатель, это свидетельствует об общем стимулирующем действии биодобавки на организм. В обеих группах жеребят-сосунов произошло незначительное снижение уровня глюкозы в крови, в пределах физиологических норм, что может предполагать, что действующие вещества Гемовит-меян, поступающие с молоком матери не оказали влияния на углеводный обмен сосунов. Динамика содержания глюкозы в сыворотке крови представлена на рисунке 4. подсосные кобылы лошади в тренинге Глюкоза мкмоль/л 8 6 4 2 0 4,58 5,58 5,52 4,59 4,97 4,56 6,04 4,07 Первая половина Конец опыта Контрольная Опытная группа группа Контрольная Опытная группа группа Рис.4. Содержание глюкозы в крови лошадей в ходе опыта. Исследуя показатели ферментативной активности крови, мы обратили внимание на динамику аланинаминотрансферазы и щелочной фосфатазы. Аланинаминотрансфераза (АЛТ) распределена в дольках печени. При нарушении проницаемости репаративной мембран, вызванном активностью, а повреждением, так же регенераторной метаболическими или изменениями, аланинаминотрансфераза поступает в кровоток. В случае острого поражения степень повышения её активности в крови приблизительно отражает количество повреждённых гепатоцитов. В данном исследовании активность аланинаминотрансферазы крови лошадей опытной и конрольной групп сохранялась в пределах физиологических норм на протяжении всего периода опыта, что может свидетельствовать о том, что Гемовитмеян не оказывает негативного влияния на печень лошадей. Активность щелочной фосфатазы обнаруживается, главным образом, в печени, в канальцах почек, в тонком кишечнике и в костях (остеобластах). Щелочная фосфатаза - связанный с мембраной фермент, катализирующий щелочной гидролиз самых разнообразных веществ. Общая метаболическая 14 функция этого фермента недостаточно выяснена, но он участвует в процессе образования костей. Общая активность щелочной фосфатазы в циркулирующей крови здоровых животных складывается из активности печёночных и костных изоферментов щелочной фосфатазы. Вклад активности костных изоферментов в общую активность фермента наиболее велик у растущих животных. Активность щелочной фосфатазы у взрослых лошадей, по результатам данных исследований, варьировала незначительно, а у жеребят наблюдалось повышение её активности как в контрольной, так и в опытной группах, что свидетельствует о высокой интенсивности роста скелета. 3.3. Влияние препарата Гемовит-меян на содержание селена, меди и цинка в крови лошадей Содержание в крови микроэлементов является индикатором обеспеченности ими организма животных, так как именно кровь доставляет их к органам и тканям, где микроэлементы включаются в работу обменных процессов в организме. Но уровень химических элементов в крови может сильно изменяться в зависимости от поступаемой в организм жидкости. Селен, медь и цинк играют важную роль в организме. Наиболее актуальным из всех изменений в данном исследовании является динамика содержания в крови селена. Поступая в организм в физиологически необходимых дозах, селен обеспечивает структурно-физиологическую полноценность мышц, печени, центральной нервной системы, сердечной мышцы, сосудистой стенки, органов половой системы, полноценность половой функции, развития плода, повышает резистентность эритроцитов. Селен обладает антиоксидантным и адаптогенными свойствами, так как участвует в регуляции имуногенеза через процесс перекисного окисления, стимулирует рост животных. Дефицит селена, как в сочетании с недостаточностью витамина Е, так и без неё, приводит к развитию хорошо изученного клинического синдрома у лошадей - беломышечной болезни жеребят, тогда как субклиническая его недостаточность может вызывать различные, иногда довольно серьёзные, заболевания мышц, сказывающиеся на спортивных результатах лошадей. 15 Концентрация селена за исследуемый период в крови кобыл контрольной группы осталась на прежнем уровне и составила 0,7 мкмоль/л, уровень селена в опытной группе увеличился до 0,87±0,19 мкмоль/л. За период опыта содержание селена в крови жеребят в обеих группах снижается (до 0,53±0,18 мкмоль/л в контрольной и до 0,79±0,21 мкмоль/л в опытной), это можно объяснить интенсивностью роста и недостаточным поступлением селена с молоком, однако в опытной группе снижение меньше почти вдвое. В контрольной группе молодых лошадей уровень селена в крови снизился на 3%, а в опытной после скармливания Гемовит-меян повысился на 12% и составил 0,93±0,16мкмоль/л, что, по всей видимости, является следствием действия препарата. Повышение содержания селена в крови предполагает положительное влияние этого элемента на ход окислительно-восстановительных процессов, функционирование мышечной ткани и формирование иммунного ответа организма. На рисунке 5 представлены изменения содержания селена в крови лошадей после применения препарата Гемовит-меян. подсосные кобылы жеребята‐сосуны лошади в тренинге Селен мкмоль/л 1 0,8 0,84 0,87 0,83 0,69 0,7 0,59 0,6 0,79 0,74 0,72 0,82 0,87 Первая половина Конец опыта 0,53 0,4 0,2 0 Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт Рис.5. Динамика содержания селена в крови лошадей в ходе опыта. Медь необходима для кроветворения, она катализирует включение железа в структуру гема, способствует созреванию эритроцитов на ранних стадиях. Ион меди служит активатором ряда ферментов, способствует устойчивости в крови гипофизарных гормонов. Интерес к меди в коневодстве связан, прежде всего, с присутствием её в ферменте лизил-оксидазы, которая участвует в созревании и формировании хрящевой ткани. Возникновение комплекса симптомов под общим названием ортопедическая болезнь роста (DOD) у лошадей связывают с 16 недостатком и нарушением соотношения нескольких микро и макроэлементов, меди в том числе. За период исследований содержание меди в крови кобыл контрольной группы снизилось на 5,3 % (с 15,32 мкмоль/л до 14,51мкмоль/л), в опытной группе также наблюдается снижение на 2,5 % (с 15,03 мкмоль/л до 14,65 мкмоль/л), но это меньше в два раза по сравнению с контролем. В крови жеребят-сосунов в первой половине исследований содержание меди было одинаковым и составило 20 мкмоль/л, к концу исследований в контрольной и опытной группах также наблюдается снижение уровня меди, однако в опытной группе уровень снизился всего на 3% (до 19,54 мкмоль/л), в то время как в контрольной на 8,8% (до 17,86 мкмоль/л). Снижение уровня меди у кобыл и жеребят можно объяснить большой интенсивностью её использования в период лактации и активного роста, и биодобавка Гемовит-меян восполняет потребности организма. У молодых лошадей, как контрольной так и опытной групп концентрация меди в крови за период исследования изменилась незначительно. 3.4. Влияние препарата Гемовит-меян на содержание селена, меди и цинка в волосах лошадей Для определения содержания микроэлементов в живом организме волосы являются наиболее благодатным материалом. В период роста они подпитываются циркулирующей кровью, лимфой и внеклеточной жидкостью. К моменту выхода из ростковой зоны, волосы и копытный рог затвердевают и жестко фиксируют состав и соотношение накопленных за фазу роста веществ. Если концентрация микроэлементов в жидких субстратах, таких, например, как кровь или молоко напрямую зависит от количества поступаемой в организм воды, то содержание химических элементов в волосах более постоянно и информативно. Каждый волос хранит интегральную информацию о минеральном обмене всего организма за период времени своего роста – от нескольких недель до нескольких месяцев или лет. Спектральный анализ волос дает полные сведения о минеральном балансе за продолжительный период времени. 17 Анализируя показатели, полученные в результате исследований, обнаружили значительное увеличение содержания селена в волосяном покрове лошадей под действием препарата Гемовит-меян за относительно короткий срок его использования. В опытных группах содержание селена в волосах повысилось на 31% (с 0,2±0,02 до 0,29±0,04мг/кг) - у кобыл,19% (с 0,21±0,09 до 0,26±0,08 мг/кг) - у жеребят и 21%( с 0,15±0,001 до 0,19 мг/кг) - у молодых лошадей в тренинге. Динамика содержания селена в волосах лошадей в ходе опыта представлена на рисунке 6. Селен 0,35 мкмоль/л 0,3 подсосные кобылы жеребята‐сосуны лошади в тренинге 0,29 0,26 0,25 0,23 0,2 0,2 0,2 Первая половина 0,21 0,18 0,19 0,19 0,17 Конец опыта 0,15 0,15 0,13 0,1 0,05 0 Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт Рис.6. Динамика содержания селена в волосах лошадей Содержание меди и цинка в волосах подсосных кобыл и лошадей в тренинге не выходило за рамки нормальных физиологических показателей. Наиболее значимыми нам показались изменения содержания меди в волосах жеребят-сосунов, так как медь имеет большое значение для правильного формирования опорно-двигательной системы молодого организма. На начало опыта содержание меди в волосах гривы жеребят обеих групп было почти одинаково. После двух месяцев скармливания их матерям препарата Гемовит-меян содержание меди, в волосах жеребят опытной группы повысилось на 3,4% (с 6,0±0,34 до 6,21±0,08 мг/кг), в то время как в контрольной группе содержание снизилось на 7,2% (до5,66±0,35 мг/кг). 18 3.5. Влияние препарата Гемовит-меян на конфигурацию конечностей новорожденных жеребят Конфигурации передних конечностей у молодых спортивных лошадей всегда уделялось много внимания со стороны ветеринарных врачей и коннозаводчиков. Нарушение минерального баланса в организме жерёбой кобылы (например недостаточность меди) в числе многих причин может привести к появлению деформаций конечностей. Для профилактики такого нарушения в зарубежной практике в рацион кобыл на последних месяцах жерёбости и в первые месяцы лактации вводят дополнительную медь. Это способствует депонированию меди в печени жеребёнка ещё во внутриутробном периоде. В данном эксперименте препарат Гемовит-меян применялся в рационе кобыл тракененской породы в последние 2 месяца жерёбости и первые два месяца лактации. Из 10 кобыл контрольной группы благополучно ожеребились 9. Среди жеребят этой группы мы наблюдали различной степени деформации передних конечностей у 4-х новорожденных. В опытной группе родилось 10 полноценных жеребят от 10 кобыл и только у двух жеребят были отмечены отклонения в конфигурации конечностей, что вдвое меньше, чем в контрольной группе. Развитие конечностей у жеребят является динамическим процессом, их ростовые пластинки чрезвычайно активны и жеребята растут очень быстро, набирая в среднем 1 кг в день в первые 120 дней жизни. В течение первых месяцев жизни у большинства жеребят уменьшается вальгус ангуляция и наружная ротация. В данном эксперименте спустя два месяца после рождения передние конечности жеребят контрольной группы приобрели нормальную форму у 2 жеребят из 4 , в опытной же группе произошло выправление конечностей у всех без исключения животных, родившихся с нарушением их конфигурации. Таким образом, можно предположить, что использование препарата Гемовит-меян положительно влияет на внутриутробное формирование конечностей жеребят, предупреждая развитие нежелательных конфигураций. 19 3.6. Экономическая эффективность использования кормовой добавки Гемовит-меян Применение комплексных добавок микроэлементов существенно повышает качество выращиваемых жеребят и, соответственно, увеличивает их ценность. В рамках нашего опыта мы смогли просчитать лишь предполагаемую рентабельность производства, т.к. в действительности реализация племенных спортивных лошадей не всегда происходит в возрасте 6 месяцев, как это в идеале должно было бы происходить в условиях развитой коневодческой отрасли. Для расчётов экономической эффективности была взята средняя стоимость жеребёнка-отъёмыша с нежелательной конфигурацией конечностей - 30000 рублей, а средняя стоимость племенного жеребёнка без деформации конечностей – 60000 рублей. В затраты на получение одного жеребёнка включены такие показатели, как затраты на содержание кобылы-матки в течение 17 месяцев, в том числе на корма и кормовые добавки, электроэнергию, водоснабжение, горюче-смазочные материалы, амортизацию помещений и техники, зарплату обслуживающего персонала в течение этого периода, а так же затраты на приобретение семени жеребца производителя, оплату труда зоотехника и ветврача, осуществляющих процесс осеменения кобыл и контроль протекания жерёбости, родов и периода выкармливания жеребят-сосунов. Полные затраты составили 620755 рублей в контрольной группе и 626155 рублей в опытной группе, в которой кобылы получали Гемовит-меян в течение 120 дней. Предполагаемая выручка может составить в контрольной группе 480000рублей, а в опытной 600000 рублей. Исходя из этого можно рассчитать, что предполагаемый убыток в контрольной группе, составит 140755рублей, а в опытной - 26155 рублей. Анализируя данные исследований, был сделан вывод, что использование кормовой добавки Гемовит-меян с хелатным комплексом предполагаемый уровень убыточности на 19%. микроэлементов снижает Таким образом, применение препарата Гемовит-меян жерёбым и подсосным кобылам в дозе 30г/гол в сутки способствует снижению уровня убыточности выращивания молодняка тракененской породы и делает этот процесс более экономически выгодным и оправданным. 20 ВЫВОДЫ Использование кормовой добавки Гемовит-меян в рационах лошадей комплексно воздействует на микроэлементный статус и физиологические показатели лошадей различных половозрастных групп, а именно: 1. повышается содержание эритроцитов у подсосных маток на 5,8%, жеребятсосунов на 3%, молодых лошадей на 3,6% и гемоглобина на 18% у кобыл, 20% у жеребят и 16% у молодых лошадей, что приводит к повышению интенсивности окислительно-восстановительных процессов в организме, обмена веществ и интенсивности роста молодняка; 2. повышается количество глюкозы и общего белка в крови лошадей, оказывая положительное влияние на обменные процессы в организме, процессы молокообразования у кобыл и накопления мышечной массы у работающих лошадей; 3. повышается уровень селена в крови подсосных кобыл и молодых лошадей на 3,4% и 12% соответственно и содержание селена в волосах лошадей на 25%, что предполагает активизацию имунного ответа животных и снижение риска возникновения беломышечной болезни и миоглобинурии лошадей; 4. повышается содержание меди в волосяном покрове жеребят-сосунов на 3,4%, что свидетельствует о большем депонировании меди предполагает правильное формирование в организме и опорно-двигательного аппарата молодняка; 5. снижается частота возникновения нежелательных конфигураций конечностей у новорожденных ,что способствует снижению предполагаемого уровня убыточности на 19%. 21 ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ 1. Рекомендуется применять биологически активную добавку Гемовит-меян, как средство обогащения рационов лошадей микроэлементами и для профилактики таких болезней селеновой недостаточности, как миоглобинурия и беломышечная болезнь жеребят. 2. Для улучшения физиологического состояния жерёбых и подсосных кобыл, лошадей в интенсивном тренинге и жеребят-сосунов рекомендуется применение добавки Гемовит-меян. 3. Рекомендуется применять Гемовит-меян для профилактики возникновения нежелательных конфигураций конечностей у новорожденных жеребят. 4. Рекомендуется использование добавки Гемовит-меян для повышения рентабельности выращивания племенных спортивных лошадей Список опубликованных статей 1. Кощеева А.В. Биохимические показатели сыворотки крови лактирующих кобыл при введении в рацион конъюгированных форм микроэлементов / Алексеева Л.В., Кощеева А.В. // Инновационные процессы – основа модели стратегического развития АПК в XXI веке, Материалы Междунар. научнопракт. конф., Тверь 2011.С. 168-169. 2. Кощеева А.В. Минеральный обмен у лактирующих кобыл при введении в рацион препарата комплексонатов микроэлементов / Кощеева А.В., Алексеева Л.В., Драганов И.Ф. // Проблемы биологии продуктивных животных -2011. №4. С. 28-32. 3. Кощеева А.В. Беломышечная болезнь жеребят /Кощеева А.В.// Болезни лошадей: диагностика, профилактика и лечение, Материалы XI Междун. научно-практ. конф. Москва, 2010. С.36-37. 4. Кощеева А.В.. Использование хелаткомплексного соединения микроэлементов в кормлении жерёбых лактирующих кобыл при табунном способе содержания / 22 Титова М.Ю., Кощеева А.В.// Материалы Междунар. научно-практ. конф., посвящённой 50-летию ВНИИФБиП.-Боровск, 2010.С. 127-128. 5. Кощеева А.В. Влияние введения в рацион хелатных соединений микроэлементов на биохимические показатели крови лошадей башкирской породы / Титова М.Ю., Кощеева А.В.// Инновационные направления повышения эффективности сельскохозяйственного производства, Материалы Междунар. научно-практ. конф., посвящённой 80-летию ВНИИ мясного скотоводства.- Оренбург, 2010.- С. 11-13 23