отзыв оппонета 2
реклама
ОТЗЫВ официального оппонента доктора медицинских наук, профессора Гумеровой Анисы Азатовны на диссертацию Васильевой Ольги Валерьевны на тему: «Ангиогенные факторы в коже человека в возрастном аспекте», представленную на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология Актуальность исследования Актуальность темы диссертационной работы О.В. Васильевой обусловлена недостаточной изученностью механизмов старения организма в целом и изменений клеточного состава и межклеточного вещества различных тканей в онтогенезе. Исследований, в которых рассматриваются эти вопросы применительно к коже, являются крайне малочисленными. В представленной работе предпринята попытка проанализировать возрастные изменения дермы человека с позиций изучения изменений, происходящих в сосудах кожи, а именно, закономерностей экспрессии различных факторов, влияющих на ангиогенез, в онтогенезе человека от фетального периода до 85 лет в сопоставлении с динамикой количества фибробластов и их пролиферативной активности. Предположение о связи возрастных изменений дермы именно с состоянием кровеносных сосудов кожи является вполне логичным и обоснованным. Выявление взаимосвязей между экспрессией ангиогенных факторов, возрастом и состоянием фибробластов кожи позволяет приблизиться к пониманию процессов, лежащих в основе возрастных изменений кожи, что имеет несомненное значение как для гистологии и клеточной биологии, так и для разработки методов коррекции и профилактики таких изменений, связанных с возрастом, и других похожих процессов, вызванными теми или иными патологическими процессами в коже. Комплексное применение О.В. Васильевой методов иммуногистохимического окрашивания и статистического анализа при выполнении данной работы следует признать своевременным и актуальным. Научная новизна Диссертантом впервые на материале образцов кожи человека всех возрастных периодов от фетального до 85 лет жизни изучены и установлены закономерности экспрессии в дерме различных факторов, влияющих на процессы ангиогенеза и состояние сосудистого русла в целом. Автором установлено, что экспрессия сосудистого эндотелиального фактора роста VEGF в эндотелиальных клетках сосудов дермы в течение жизни увеличивается, тогда как число самих сосудов неуклонно снижается. Данный факт представляет несомненный интерес и требует изучения динамики активности и количества рецепторов к данному фактору. Предположение о роли рецепторов к VEGF подтверждается и установленным в исследовании фактом о возрастании с возрастом экспрессии факторов, ингибирующих ангиогенез, в частности, компонентов сигнального пути Notch Dll4 и Jag-1, при том, что одним из механизмов ангио-ингибирующего влияния этих компонентов является как раз подавление чувствительности рецепторов к VEGF. В ходе исследования получены новые данные о закономерностях экспрессии эндотелиальными клетками сосудов дермы ангиоматина, эндостатина, фактора роста соединительной ткани СТGF и CD31. Научная новизна полученных результатов в значительной степени определяет их теоретическую и практическую значимость. Результаты проведенного исследования имеют важное значение для биологии развития, гистологии дополнение и в клеточной биологии, представления о поскольку фенотипе вносят существенное эндотелиальных клеток кровеносных сосудов, динамике изменений состояния сосудистой системы кожи, пролиферативной активности клеток дермы. С практической точки зрения выяснение экспрессии различных факторов роста и сигнальных молекул в сопоставлении с возрастными изменениями кожи могут быть полезными для разработки современных методов предотвращения старения кожи, что имеет важное значение для развития дерматологии и косметологии. Достоверность результатов, представленных в работе, предопределена достаточным объемом изученного фактического материала и использованием методов исследования и анализа, адекватных поставленным автором цели и задачам работы. Тщательность и качество статистической обработки полученных результатов и ее анализ также подтверждают достоверность полученных данных. Степень обоснованности научных положений, выводов и рекомендаций Тщательная документация результатов работы, их сопоставление с данными литературы, выполнение статистического анализа полученных результатов делают научные положения, выводы и рекомендации работы обоснованными и соответствующими поставленным задачам. Выводы и положение логично вытекают из содержания диссертационной работы. Содержание диссертации Диссертационная работа объемом 153 страницы машинописного текста изложена в традиционном стиле и состоит из введения, обзора литературы, изложения материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения и выводов. Работа содержит 44 рисунка, включающих микрофотографии и диаграммы, которые облегчают восприятие материала диссертации. Вместе с тем, хотелось бы отметить, что качество микрофотографий нельзя признать достаточно хорошим. Диссертация содержит список использованной литературы, состоящий из 268 проанализированных автором источников. Во введении актуальность исследования достаточно обоснована, цели и задачи сформулированы четко, раскрыты научная новизна и научнопрактическая диссертации. значимость работы, изложены основные положения В обзоре литературы рассматриваются вопросы строения кожи человека, возрастные изменения кожи и состояния ее кровеносных сосудов, проводится анализ приведенных данных литературы. Отдельный раздел посвящен описанию факторов, участвующих в регуляции ангиогенеза, которые, главным образом, анализируются с точки зрения их участия в патологических процессах. Обращает на себя внимание объективно малое количество исследований, посвященных участию указанных факторов в нормальном гистогенезе кожи. Вместе с тем, на мой взгляд, в обзоре литературы недостаточно обоснован выбор включенных в исследование факторов ангиогенеза. Во второй главе подробно излагается способ получения материала и его первичная обработка, иммуногистохимического описаны методы исследования, гистологического статистической и обработки полученных результатов. Все исследования выполнены с соблюдением норм действующего законодательства, одобрение локального этического комитета получено. В третьей и четвертой главах автором представлен статистически обработанный материал по теме диссертации, подтвержденный рисунками и диаграммами. Работа характеризуется достаточным количеством иллюстративного материала. В целом структура данных глав и способ представления материала отражают высокий методический уровень работы и содержат новые актуальные данные, соответствующие целям и задачам исследования. Обоснованность и достоверность научных положений и выводов подтверждена достаточным объемом современных исследований, а также результатами статистической обработки собственных данных. Полученные диссертантом новые научные данные определяют теоретическую и практическую значимость работы. По теме диссертации опубликовано 14 печатных работ, в том числе 2 статьи в зарубежных и 4 статьи в отечественных рецензируемых научных журналах и изданиях, рекомендованных ВАК для публикации материалов кандидатских и докторских диссертации, Всероссийских 6 конференций диссертантом, логично тезисов и вытекают докладов конгрессов. из Международных Выводы, материалов и сделанные исследования и соответствуют цели и поставленным задачам. Автореферат диссертации соответствует существующим требованиям ВАК РФ и полностью отражает содержание диссертации. Работа соответствует паспорту специальности 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология. В целом рецензируемая диссертационная работа производит благоприятное впечатление, однако при ознакомлении с диссертацией возникли следующие вопросы: 1. Если автор объясняет снижение числа сосудов дермы на фоне повышения экспрессии снижением VEGF чувствительности/количества рецепторов к этому фактору роста, то почему это предположение не было проверено хотя бы путем окрашивания с антителами к этому рецептору? 2. Почему при изучении сосудов использованы маркеры, ассоциированные в основном с эндотелиальными клетками? Не было бы более целесообразным изучить также маркеры гладкомышечных клеток сосудов? 3. Как автор может объяснить позитивное окрашивание клеток эпидермиса со всеми использованными в работе антителами, причем интенсивность окрашивания увеличивается пропорционально усилению общей интенсивности окрашивания? Заключение Диссертационная работа Васильевой Ольги Валерьевны на тему «Ангиогенные факторы в коже человека в возрастном аспекте», выполненная под руководством доктора медицинских наук, профессора Гунина Андрея Германовича, представленная на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 03.03.04 – клеточная биология,
