отзыв оппонета 2

ОТЗЫВ
официального оппонента
доктора медицинских наук, профессора Гумеровой Анисы Азатовны
на диссертацию Васильевой Ольги Валерьевны
на тему: «Ангиогенные факторы в коже человека в возрастном аспекте»,
представленную на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук по специальности
03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология
Актуальность исследования
Актуальность
темы
диссертационной
работы
О.В.
Васильевой
обусловлена недостаточной изученностью механизмов старения организма в
целом и изменений клеточного состава и межклеточного вещества различных
тканей в онтогенезе. Исследований, в которых рассматриваются эти вопросы
применительно к коже, являются крайне малочисленными. В представленной
работе предпринята попытка проанализировать возрастные изменения дермы
человека с позиций изучения изменений, происходящих в сосудах кожи, а
именно, закономерностей экспрессии различных факторов, влияющих на
ангиогенез, в онтогенезе человека от фетального периода до 85 лет в
сопоставлении с динамикой количества фибробластов и их пролиферативной
активности. Предположение о связи возрастных изменений дермы именно с
состоянием кровеносных сосудов кожи является вполне логичным и
обоснованным.
Выявление взаимосвязей между экспрессией ангиогенных факторов,
возрастом и состоянием фибробластов кожи позволяет приблизиться к
пониманию процессов, лежащих в основе возрастных изменений кожи, что
имеет несомненное значение как для гистологии и клеточной биологии, так и
для разработки методов коррекции и профилактики таких изменений,
связанных с возрастом, и других похожих процессов, вызванными теми или
иными патологическими процессами в коже. Комплексное применение
О.В. Васильевой
методов
иммуногистохимического
окрашивания
и
статистического анализа при выполнении данной работы следует признать
своевременным и актуальным.
Научная новизна
Диссертантом впервые на материале образцов кожи человека всех
возрастных периодов от фетального до 85 лет жизни изучены и установлены
закономерности экспрессии в дерме различных факторов, влияющих на
процессы ангиогенеза и состояние сосудистого русла в целом. Автором
установлено, что экспрессия сосудистого эндотелиального фактора роста
VEGF в эндотелиальных клетках сосудов дермы в течение жизни
увеличивается, тогда как число самих сосудов неуклонно снижается. Данный
факт представляет несомненный интерес и требует изучения динамики
активности и количества рецепторов к данному фактору. Предположение о
роли рецепторов к VEGF подтверждается и установленным в исследовании
фактом о возрастании с возрастом экспрессии факторов, ингибирующих
ангиогенез, в частности, компонентов сигнального пути Notch Dll4 и Jag-1,
при том, что одним из механизмов ангио-ингибирующего влияния этих
компонентов является как раз подавление чувствительности рецепторов к
VEGF. В ходе исследования получены новые данные о закономерностях
экспрессии
эндотелиальными
клетками
сосудов
дермы
ангиоматина,
эндостатина, фактора роста соединительной ткани СТGF и CD31.
Научная новизна полученных результатов в значительной степени
определяет их теоретическую и практическую значимость. Результаты
проведенного исследования имеют важное значение для биологии развития,
гистологии
дополнение
и
в
клеточной
биологии,
представления
о
поскольку
фенотипе
вносят
существенное
эндотелиальных
клеток
кровеносных сосудов, динамике изменений состояния сосудистой системы
кожи, пролиферативной активности клеток дермы. С практической точки
зрения выяснение экспрессии различных факторов роста и сигнальных
молекул в сопоставлении с возрастными изменениями кожи могут быть
полезными для разработки современных методов предотвращения старения
кожи,
что
имеет
важное
значение
для
развития
дерматологии
и
косметологии.
Достоверность
результатов,
представленных
в
работе,
предопределена достаточным объемом изученного фактического материала и
использованием методов исследования и анализа, адекватных поставленным
автором цели и задачам работы. Тщательность и качество статистической
обработки полученных результатов и ее анализ также подтверждают
достоверность полученных данных.
Степень
обоснованности
научных
положений,
выводов
и
рекомендаций
Тщательная документация результатов работы, их сопоставление с
данными литературы, выполнение статистического анализа полученных
результатов делают научные положения, выводы и рекомендации работы
обоснованными и соответствующими поставленным задачам. Выводы и
положение логично вытекают из содержания диссертационной работы.
Содержание диссертации
Диссертационная работа объемом 153 страницы машинописного текста
изложена в традиционном стиле и состоит из введения, обзора литературы,
изложения материалов и методов исследования, результатов собственных
исследований, обсуждения и выводов. Работа содержит 44 рисунка,
включающих
микрофотографии
и
диаграммы,
которые
облегчают
восприятие материала диссертации. Вместе с тем, хотелось бы отметить, что
качество
микрофотографий
нельзя
признать
достаточно
хорошим.
Диссертация содержит список использованной литературы, состоящий из 268
проанализированных автором источников.
Во введении актуальность исследования достаточно обоснована, цели
и задачи сформулированы четко, раскрыты научная новизна и научнопрактическая
диссертации.
значимость
работы,
изложены
основные
положения
В обзоре литературы рассматриваются вопросы строения кожи
человека, возрастные изменения кожи и состояния ее кровеносных сосудов,
проводится анализ приведенных данных литературы. Отдельный раздел
посвящен описанию факторов, участвующих в регуляции ангиогенеза,
которые, главным образом, анализируются с точки зрения их участия в
патологических процессах. Обращает на себя внимание объективно малое
количество исследований, посвященных участию указанных факторов в
нормальном гистогенезе кожи. Вместе с тем, на мой взгляд, в обзоре
литературы недостаточно обоснован выбор включенных в исследование
факторов ангиогенеза.
Во второй главе подробно излагается способ получения материала и
его
первичная
обработка,
иммуногистохимического
описаны
методы
исследования,
гистологического
статистической
и
обработки
полученных результатов. Все исследования выполнены с соблюдением норм
действующего законодательства, одобрение локального этического комитета
получено.
В третьей и четвертой главах автором представлен статистически
обработанный материал по теме диссертации, подтвержденный рисунками и
диаграммами.
Работа
характеризуется
достаточным
количеством
иллюстративного материала. В целом структура данных глав и способ
представления материала отражают высокий методический уровень работы и
содержат новые актуальные данные, соответствующие целям и задачам
исследования.
Обоснованность и достоверность научных положений и выводов
подтверждена достаточным объемом современных исследований, а также
результатами статистической обработки собственных данных. Полученные
диссертантом
новые
научные
данные
определяют
теоретическую
и
практическую значимость работы. По теме диссертации опубликовано 14
печатных работ, в том числе 2 статьи в зарубежных и 4 статьи в
отечественных
рецензируемых
научных
журналах
и
изданиях,
рекомендованных ВАК для публикации материалов кандидатских и
докторских
диссертации,
Всероссийских
6
конференций
диссертантом,
логично
тезисов
и
вытекают
докладов
конгрессов.
из
Международных
Выводы,
материалов
и
сделанные
исследования
и
соответствуют цели и поставленным задачам.
Автореферат диссертации соответствует существующим требованиям
ВАК
РФ
и
полностью
отражает
содержание
диссертации.
Работа
соответствует паспорту специальности 03.03.04 – клеточная биология,
цитология, гистология. В целом рецензируемая диссертационная работа
производит благоприятное впечатление, однако при ознакомлении с
диссертацией возникли следующие вопросы:
1. Если автор объясняет снижение числа сосудов дермы на фоне
повышения
экспрессии
снижением
VEGF
чувствительности/количества рецепторов к этому фактору роста, то
почему это предположение не было проверено хотя бы путем
окрашивания с антителами к этому рецептору?
2. Почему
при
изучении
сосудов
использованы
маркеры,
ассоциированные в основном с эндотелиальными клетками? Не
было
бы
более
целесообразным
изучить
также
маркеры
гладкомышечных клеток сосудов?
3. Как автор может объяснить позитивное окрашивание клеток
эпидермиса со всеми использованными в работе антителами, причем
интенсивность
окрашивания
увеличивается
пропорционально
усилению общей интенсивности окрашивания?
Заключение
Диссертационная работа Васильевой Ольги Валерьевны на тему
«Ангиогенные факторы в коже человека в возрастном аспекте», выполненная
под руководством доктора медицинских наук, профессора Гунина Андрея
Германовича, представленная на соискание ученой степени кандидата
медицинских наук по специальности 03.03.04 – клеточная биология,