СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ ОБРАЗОВАНИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПРЕПАРАТОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ

УДК 615.015:615.347:612.015.11
СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ ОБРАЗОВАНИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ
КИСЛОРОДА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПРЕПАРАТОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
Цель исследования: изучить действие препаратов иммуноглобулинов на
свободнорадикальные процессы образования активных форм кислорода (АФК). В работе
оценивались препараты донорских иммуноглобулинов разных производителей:
«Хумаглобин» (Венгрия), с повышенным содержанием IgM и IgA – «Пентаглобин»
(Германия) и препарат отечественного производства – «Иммуновенин» (Уфа). Была
проведена оценка прямого влияния препаратов внутривенных иммуноглобулинов (ВВИГ)
на свободнорадикальные процессы. Для этого использовали систему, в которой
моделировались основные реакции генерации АФК. Определение АФК проводили
посредством регистрации на хемилюминомере «ХЛМ-003». Установлено, что препараты
иммуноглобулинов способны непосредственно воздействовать на свободнорадикальные
процессы образования АФК в тест-системах, что характеризует антиокислительные
свойства данных препаратов. Свободнорадикальные процессы генерации АФК фагоцитами
под влиянием ИГ могут как усиливаться, так и снижаться.
Ключевые слова: иммуноглобулины, антиоксидантные свойства, активные формы
кислорода.
The purpose of the investigation is to study the immunoglobulin effect on free radical processes
of the reactive oxygen species (ROS) generation. In the course of work there were assessed
preparations of donor immunoglobulins of different manufacturers: Humaglobine (Hungary),
Pentaglobine (Germany) with higher contents of IgM and IgA and native preparation Immunovenin
(Ufa). The IVIG direct influence on free radical processes was assessed. For this purpose a sysК.С. Мочалов,
tem was used, where basic reactions of AOS generation were simulated. AOS were determined
by recording on chemiluminometer ХЛМ-003. It was established that immunoglobulin preparaГБОУ ВПО «Башкирский
государственный медицинский tions may have a direct effect on free radical processes of AOS generation in test-systems, thus
characterizing anti-oxidant properties of the said preparations. Free radical processes of AOS
университет», г. Уфа
generation by phagocytes may be either enhanced or reduced under IG action.
Мочалов Константин Сергеевич –
Key words: immunoglobulins, antioxidant properties, reactive oxygen species.
е-mail: [email protected]
О
бразование свободных радикалов, прежде всего
активных форм кислорода (АФК), хлора и азота
имеет важное значение в регуляции иммунного и
воспалительного ответа. В то же время избыточное накопление АФК является универсальным механизмом в патогенезе многих заболеваний, в том числе при воспалении [1].
Многие лекарственные препараты могут прямо или косвенно оказывать воздействие на процессы генерации активных форм кислорода. Одними из наиболее эффективных
иммуномодуляторов и противовоспалительных средств
являются препараты иммуноглобулинов (ИГ). Механизмы
их биологической активности до сих пор полностью не раскрыты [2].
С учетом сказанного была сформулирована цель: изучить
действие препаратов иммуноглобулинов на свободнорадикальные процессы образования активных форм кислорода.
В работе оценивались препараты донорских иммуноглобулинов разных производителей: «Хумаглобин» («Human
Serum Production and Medicine Manufacturing Co Ltd.»,
29
№ 4 (9) сентябрь 2013
Венгрия), с повышенным содержанием IgM и IgA –
«Пентаглобин» («Biotest Pharma GmbH», Германия) и препарат отечественного производства – «Иммуновенин»
(филиал «Иммунопрепарат» ФГУП «НПО «Микроген» МЗ
РФ (Уфа)).
Была проведена оценка прямого влияния препаратов
внутривенных иммуноглобулинов (ВВИГ) на свободнорадикальные процессы. Для этого использовали систему, в
которой моделировались основные реакции генерации
АФК [3].
Далее были изучены свободнорадикальные процессы
образования активных форм кислорода фагоцитами,
выполняющими разные функции в процессах иммуногенеза – полиморфно-ядерные и мононуклеарные фагоциты
при добавлении различных концентраций препаратов ИГ.
Фагоцитарные клетки получали внутрибрюшинным введением животному 20 мл стерильного 8% раствора пептона.
Из экссудата перитонеальной полости получали активированные полиморфно-ядерные фагоциты через сутки после
введения пептона и активированные мононуклеарные
фагоциты через трое суток [4]. Исследуемые образцы
суспензий клеток разливали в пластиковые пробирки типа
«Эппендорф» и инкубировали при температуре 24°С в течение 24 часов с препаратами ВВИГ в концентрациях 0,05–
50,00 мг/мл.
Определение АФК проводили посредством регистрации
хемилюминесценции на хемилюминомере «ХЛМ-003».
Добавление ИГ в дозах 0,5 мг/мл вызывало снижение
параметров свечения модельной системы, генерирующей
АФК (70–80% от контроля). Увеличение доз препаратов
(5 мг/мл) усиливало снижение параметров свечения образцов в этой системе (70–60% от контроля).
Исследование хемилюминесценции фагоцитов показало,
что протекающие в них свободнорадикальные процессы
генерации АФК могут как усиливаться, так и снижаться под
действием ИГ, в зависимости от концентрации и типа клеток. Уже в минимальной использованной дозе (0,05 мг/мл)
параметры хемилюминесценции полиморфно-ядерных
фагоцитов возрастали при добавлении препарата с повышенным содержанием иммуноглобулинов класса M и А
пентаглобин, а в дозе 0,25 мг/мл хемилюминесценцию стимулировали все исследуемые препараты. В высоких же концентрациях наблюдалось противоположное по направлению воздействие: дозы 12,5 и 25,00 мг/мл вызывали угнетение генерации активных форм кислорода полиморфноядерными фагоцитами. Иной характер изменения свобод-
30
№ 4 (9) сентябрь 2013
норадикальных процессов отмечался для мононуклеарных
фагоцитов. Во всех концентрациях ИГ дозозависимо снижали показатели хемилюминесценции этих клеток.
Таким образом, препараты иммуноглобулинов способны
непосредственно воздействовать на свободнорадикальные
процессы образования АФК в тест-системах, что характеризует антиокислительные свойства данных препаратов.
Свободнорадикальные процессы генерации АФК фагоцитами под влиянием ИГ могут как усиливаться, так и снижаться. Установлена модуляция образования АФК, которая
определяется типом фагоцитов и используемой концентрацией. Сказанное дает основание считать, что выявленные в
работе свойства препаратов ИГ раскрывают один из аспектов их терапевтического действия.
ЛИТЕРАТУРА
1. Фархутдинов Р.Р. Свободнорадикальное окисление: мифы и реальность
(избранные лекции). Медицинский вестник Башкортостана. 2006. Т.1. № 1.
С. 146-152.
2. Добрица В.П., Ботерашвили Н.М., Добрица Е.В.Современные иммуномодуляторы для клинического применения: руководство для врачей. СПб.:
Политехника, 2001. 251 с.
3. Фархутдинов Р.Р., Тевдорадзе С.И. Методики исследования хемилюминесценции биологического материала на хемилюминометре ХЛ-003. Методы
оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения: Сборник докладов / под ред. проф.
Е.Б. Бурлаковой. М.: Изд-во РУДН, 2005. С. 147-154.
4. Тевдорадзе С.И. Влияние церулоплазмина на фагоцитарные механизмы
иммунной защиты и оксидативный стресс в условиях физической нагрузки:
автореф. дис. … канд. мед. наук. Уфа, 2006. 26 с.