IOTest CD8-FITC/CD4-PE/ CD3-PC7 Специфичность Клон Гибридома Иммуноген кат№ 6607103 – 50 тестов Иммуноглобулин Вид животных Источник Способ очистки Флуоресценция PN 4238104-CB Конъюгат Молярное соотношение Регистрация светорассеяния СПЕЦИФИЧНОСТЬ Антитело к антигену CD3 является специфическим для эпсилон-цепи состоящего из пяти цепей компонента CD3 TCR комплекса.3,9 Молекулярная масса этой цепи составляет 20 kd.9 Это специфический для клеточной линии общий для Т-клеток антиген, в норме экспрессирующийся на поверхности зрелых тимоцитов и на покоящихся и активированных зрелых Т- лимфоцитах периферической крови (как в популяциях индукторов, так и супрессоров и цитотоксических клеток). Антиген CD4 имеет молекулярную массу 62 kd. Он присутствует на тимоцитах и популяции индукторов Тлимфоцитов периферической крови.13,14 Также в небольшом количестве он экспрессируется моноцитами. CD4+-лимфоциты играют ключевую роль в регуляции иммунной реакции. В периферической крови CD4+-лимфоциты выполняют функцию индуктора для взаимодействий Т-Т, Т-B и Т-макрофаг.18 Антиген CD4 вступает в реакцию с антигеном главного комплекса гистосовместимости (MHC) II класса на клетках-мишенях. Антиген CD8 имеет молекулярную массу 68 kd. Обычно он присутствует приблизительно на 80% тимоцитов и приблизительно 30-35% Т-лимфоцитов периферической крови, а также на некоторых Ткиллерах. CD8+лимфоциты играют ключевую роль в регуляции иммунной реакции посредством супрессорного (подавляющего) и цитотоксического действия. Антиген CD8 вступает в реакцию с антигеном главного комплекса гистосовместимости (MHC) I класса на клетках-мишенях. РЕАГЕНТ См. таблицу выше. CD8-FITC CD4-PE CD3-PC7 CD8 SFCI21Thy2D3 NS1 x BALB/c Лимфоциты периферической крови IgG1 Мышь Кондиционированная среда Афинная хроматография Λ возб 468-509 нм / Λ эмиссии 504-541 нм FITC (Fluorescein Isothiocyanate) CD4 SFCI21T4D11 NS1 x BALB/c Лимфоциты периферической крови IgG1 Мышь Кондиционированная среда Афинная хроматография Λ возб 486-580 нм / Λ эмиссии 568-590 нм CD3 UCHT1 NS1 x BALB/c Лимфоциты периферической крови IgG1 Мышь Кондиционированная среда Афинная хроматография Λ возб 486-580 нм / Λ эмиссии 710-800 нм PE (Phycoerythrin) PC7 (Phycoerythrin-Cy7) FITC/Ig: 4-6 PE/Ig: 0.5-1.5 PC7/Ig: 0.5-1.5 Переднее и/или боковое Переднее и/или боковое Переднее и/или боковое ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЯ 1. Не используйте реагент с истекшим сроком годности. 2. Не замораживайте реагент. 3. Перед использованием реагента необходимо дождаться, пока температура реагента достигнет комнатной (18 - 25°C). 4. Воздействие света на реагент необходимо свести к минимуму. 5. Избегайте контаминации реагента микроорганизмами, в противном случае возможно получение недостоверных результатов. 6. Растворы антител, содержащие азид натрия (NaN3), требуют осторожного обращения. Не проглатывайте, избегайте попадания на кожу, на слизистые оболочки и в глаза. В кислой среде азид натрия способен образовывать потенциально опасную азотисто-водородную кислоту. При утилизации соединений азида рекомендуется смывать их в водопроводно-канализационную систему большим количеством проточной воды. Эти меры предосторожности позволят избежать накопления азида натрия в металлических трубах и предотвратить образование взрывчатых веществ. 7. Все образцы крови следует рассматривать как потенциально инфицированные. При работе с ними необходимо соблюдать все меры предосторожности (в частности, использовать защитные перчатки, халат и очки). 8. Никогда не отбирайте образец через пипетку ртом. Избегайте контакта образца с кожей, слизистыми оболочками и глазами. 9. После завершения работы пробирки с кровью и все одноразовые материалы 1/2 необходимо поместить в специальные контейнеры для утилизации. ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ До и после вскрытия флакона жидкие конъюгаты антител необходимо хранить при температуре 2 - 8°C в защищенном от света месте. Не замораживать. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТА Не требуется. Можно использовать непосредственно из флакона. Перед использованием доведите реагент до комнатной температуры. ПРОЦЕДУРА Этот реагент предназначен для проточной цитофлуориметрии. 5 Используйте 20 мкл реагента на 5х10 кл в объеме 100 мкл или такой же объем цельной крови. Рекомендуется отмывка для получения оптимального результата. ПРИМЕР ДАННЫХ На гистограммах представлен образец нормальной крови, взятой с ЭДТА, окрашенной CD8-FITC/CD4-PE/CD3PC7 multicolor reagent (кат№ 6607103). Рисунки: Анализ на проточном цитофлуориметре COULTER EPICS XL и XL-MCL ТОРГОВЫЕ ЗНАКИ Beckman Coulter и логотип Beckman Coulter являются торговыми знаками компании Beckman Coulter, Inc. Логотип Beckman Coulter, IOTest зарегистрированы в USPTO и SIPO. Beckman Coulter, Inc. 250 S. Kraemer Blvd. Fullerton, CA 92821 www.beckmancoulter.com ЛИТЕРАТУРА 1. Terry, L.A., DiSanto, J.P., Small, T.N., Flomenberg, N. "Differential expression and regulation of the human CD8alpha and CD8beta chains", 1990, Tissue Antigens - 35 - 82-91. 2. Moebius, U., Kober, G., Griscelli, A.L., Hercend, T., Meuer, S.C., "Expression of different CD8 isoforms on distinct human lymphocyte subpopulations",1991, Eur. J. Immunol., 21, 1793-1800. 3. Sprent, J., "T lymphocytes and the thymus", 1989, Fundamental Immunology, Chap 4, 2nd Ed., 69-93. 4. Miceli, M.C., Parnes, J.R., "The roles of CD4 and CD8 in T cell activation", 1991, Immunol., 3, 133-141. 5. Tunnacliffe, A., Olsson, C., Traunecker, A., Krissansen, G.W., Karjalainen, K., De la Hera, A., "The majority of CD3 epitopes are conferred by the e chain", 1989, Leucocyte Typing IV, White Cell Differentiation Antigens. W. Knapp, et al., Eds., Oxford University Press, 295-296. 6. Bernard, A., Grottier, P., Georget, E., Lepage, V., Boumsell, L., "Joint report of the first international workshop on human leucocyte differentiation antigens by the investigators of the participating laboratories", 1984, Leucocyte Typing I, Bernard, A. et al., Springer Verlag, 9-135. 7. Shores, E.W., Love, P.E., "TCR-chain in T cell development and selection", 1997, Curr. Immunol., 9, 380-389. ЗАКАЗ РЕАГЕНТА IOTest CD8-FITC/CD4-PE/CD3-PC7 6607103 - 50 тестов (20мкл/тест) 2/2