причинно-следственная связь между нарушениями иммунного

НАУЧНЫ Е ВЕДО М О СТИ
С е р и я М е д и ц и н а . Ф а р м а ц и я . 2 0 1 1 . № 4 (99). В ы п у с к 13
97
УДК 616.151:618.12-002.2
ПРИЧИННО-СЛЕДСТВЕННАЯ СВЯЗЬ МЕЖДУ НАРУШЕНИЯМИ ИММУННОГО СТАТУСА
И СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ
ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ САЛЬПИНГООФОРИТЕ
Ю.И. Кобелева', АЛ. Конопля2
М.А. Цуркина1, Е.Г. Романяк2
9K.II. Омашарифа2, МЛ. Шумакова2
О бла ст н а я кли н ическая
больн и ц а Свят и т еля
И оаса ф а, г. Б елгород
2>К у р ски й государст венн ы й
м еди ц и н ски й у ни версит ет
e-m ail: kan abis@ n m .ru
В статье излож ены данные о характере и степени нару­
ш ений иммунного статуса и структурно-функциональных
свойств эритроцитарной мембраны у пациенток с хрониче­
ским сальпингоофоритом в стадии обострения. В работе уста­
новлена взаимосвязь меж ду изменениями структурно­
ф ункциональных свойств мембраны красных клеток крови и
степенью выраженности наруш ений показателей врожденно­
го и адаптивного иммунитета. Определена иммунокорриги­
рующ ая и мембранопротективная эффективность использо­
вания традиционной фармакотерапии у пациенток с хрониче­
ским сальпингоофоритом.
Ключевые слова: хронический сальпингоофорит, им ­
мунные нарушение, мембрана эритроцитов, структурно­
функциональные свойства мембраны красных клеток крови.
Н а во зн и к н о вен и е и теч ен и е во сп ал и тел ьн ого п р о ц есса при хр о н и ч еск ом
сал ьп и н гоф о ор и те о к азы вает вл и ян и е к ак н еб л аго п р и я тн ы й п р ем ор би д н ы й фон,
та к и общ ее сн и ж ен и е и м м ун о л о ги ч еск о й р ези стен тн о сти м а к р о о р га н и зм а [4]. С р е­
ди вед ущ и х ф актор ов из этой группы р и ск а м ож н о отм ети ть си ндром хр о н и ч еск ой
у ста л о сти , н ер ац и он ал ьн ое п и тан и е, реж и м тр уд а и отды ха, р яд хр о н и ч еск и х и н ­
то к си к а ц и й и со м ати ч еск и х заб о л ев ан и й (алк оголи зм , н ар к ом ан и я, анем и я, о ж и р е­
н и е и т.д .), а так ж е втор и ч н ую и м м ун о л о ги ч еск ую н ед о ста то ч н о сть (втори ч н ы й
и м м ун о д еф и ц и т), эти о п а то ген ети ч еск и е аспекты к отор ой р ассм атр и ваю тся в п о ­
сл едн ее вр ем я д о во л ьн о ш и роко [1, 4].
В больш инстве случаев, в том числе и при хрон ических воспалительны х заболе­
ваниях органов ж енской половой сферы , основны м пусковы м м еханизм ом в развитии
им м унного воспаления является бактериальная, вирусная инвазия [4]. П ри всем р аз­
н ообразии патоген н ы х агентов развивается дезорганизация плазм атических м ем бран
не только клеток-м иш еней в пораж енном органе (ткани), но и им м уноком петентны х
клеток и эритроцитов [5, 8], причем им еется сравнительно м ало дан ны х об общ их м е­
хан и зм ах наруш ений структуры и ф ункции м ем бран [3, 8].
Ц ель исследования - устан овлени е взаим освязи м еж ду показателям и им м унн о­
го статуса и состояния м ем браны красны х клеток крови у пациенток с хроническим
сальпингооф оритом в стадии обострения.
М атериалы и методы. В работе представлены дан ны е обследования и л еч е­
ния на базе ГУЗ «Белгородская областная клиническая больница Святителя И оасафа»
43 ж енщ ин в возрасте от 20 до 40 лет (средний возраст зо ± 2 ,1) с установленны м ди аг­
нозом хронический сальпингооф орит в стадии обострения (ХСО). Группа контроля со­
стояла из 18 здоровы х ж енщ ин в том ж е возрасте. П ациенты основной группы получа­
ли стандартную ф арм акотерапию (цеф отаксим 1,0 * 4 раза в день, м етронидазол
о, 25 * з р аза в день, витам ин B i и В6 1,0 внутрим ы ш ечно через день, клотрим азол вагинально по 1 свече на ночь, инф узионная терапия в зависим ости от степени тяж ести
заболевания). Все пациентки не им ели экстрагенитальной патологии, являли сь ж и ­
тельницам и Белгородской области.
Было проведено анкетирование и клиническое обследование пациенток согласно
общеклиническим стандартам при поступлении больных в стационар и при выписке.
С одерж ание ком понентов систем ы ком плем ента (С3, Сза, С4, С5, С5а), Схингибитора-ком понентов ком плем ента (C i-инг), ф актора Н, ф актора н екроза опухолиа (Ф Н О -а), ин тер лей ки н а-1а (И Л -ia ) , интерлейкина - 1(3 (И Л - 1 (3), интерлейкина-4
98
НАУЧНЫ Е ВЕДО М О СТИ
Ш
Ш
С е р и я М е д и ц и н а . Ф а р м а ц и я . 2 0 1 1 . № 4 (99). В ы п у с к 13
(И Л-4), интерлейкина-6 (И Л-6), интерлейкина-8 (И Л-8), гранулоцитарного колон ие­
стим улирую щ его ф актора (Г-КСФ), и н тер л ей к и н а-ю (И Л -ю ), интерлейкина-18
(И Л-18), ин терф ерона а и у (И Н Ф -а и И Н Ф -у), рецепторного антагониста ин терлейки­
на-1 (РАИЛ) проводилась с пом ощ ью тест-систем (ООО «Ц итокин», г. СанктП етербург) м етодом твердоф азного им м уноф ерм ентного анализа.
Активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови оце­
нивали по фагоцитарному индексу (ФИ) и фагоцитарному числу (ФЧ). Активность кислородзависимых систем нейтрофилов оценивали по реакции восстановления нитросинего
тетразолия спонтанного (НСГ-сп.) и стимулированного зимозаном (НСТ-ст.) [2, 7, 9].
Электроф орез м ем бранн ы х белков эритроцитов проводили в присутствии додецилсульф ата натрия в вертикальны х пластинах полиакрилам идного геля, определяли
сорбционную способность эритроцитов (ССЭ) и сорбционную ем кость их гликокаликса
(СЕГ). О ф ункциональном состоянии эритроцитов судили по содерж анию в них м ало­
н ового ди альдегида (М Д А) [3].
Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя
стандартны е м етоды статистики.
Р езультаты . У п а ц и е н т о к , поступи вш их в стационар с Х СО в стадии обостре­
ния, вы явлено повы ш ение концентрации провоспалительн ы х (Ф Н О а, И Л - 1 (3, ИЛ-6,
И Л -8, Г-КСФ ) и И Л -2, И Н Ф а, но наблю далось сниж ение концентрации И Л -18, акти­
вация систем ы ком плем ента (увеличение уровеней С3, Сза, С4, С5, С5а). П ри этом возрас­
тала концентрация противовоспалительны х цитокинов (И Л-4, И Л -ю , рецепторного
антагониста И Л-1 (РАИ Л )) и ингибиторов системы ком плем ента (Ci-ингибитора и ф ак­
тора Н) (табл. l).
Таблица 1
П оказатели врож денного и адаптивного имм унитета в крови
у больны х Х С О в стадии обострения (М ± т )
Показатели
Контроль
(18 чел)
Больные ХСО (43 чел)
До лечения
После лечения
1
2
и л -ip
22 , 1± 2 ДЗ
5 , 9 ± о ,52
5 °>5 ±4 Д 5 *1
3
37 , 95 ±3 , 51*112
ИЛ-2
ИЛ-6
ИЛ-8
Г-КСФ
ИЛ-18
ИНФа
ИЛ-4
И Л -ю
РАИЛ
С3
0,с>9±0,01
70,3*7,01
5 i , 4 ±5 , 2 i
82, з ±8,8
288,4*24,4
30,6*3,11
17,1*12,3
29,2*2,47
108,4*9,4
91,4*9,4
ФН Оа,пг/мл
Сза
47 ,4 ±4,4
С4
С5
8 д ± о ,78
90,2*9,4
4,7*0,41
420,5*43,5
30,6*3,1
63,2*6,14
5 , 7 ±о,Зб
Csa
Ci-инг.
Фактор И
ФИ
ФЧ
НСГ-сп.
НСГ-ст.
9 ,1±о,8 8
31,3 ±3,2
29,4*2,41*!
72,6*6,14**
176,0*14,0*!
227*24,0*!
288*21,2**
171,3 * 14, 22 *!
55 ,3 ±5 , 03 ^
45 ,o± 4 , i 2 *i
58,9±6, io *i
151, 2 ± 14, 7*!
П Д З *0^ !* 1’2
8,14± о ,82*1-2
180,1±17,4*1
220,2*20,1*!
ioi,i±9,i4*1’2
166,1*15,9**
4 ° , 12 ±3 ,44 *1’2
44 , 12 ±5 , ° 1*1
38 4 ,3 ±4 ° , 1*1
69,6*6,66**
152,0*14,9*!
142,з± ю ,1*1-2
112,2*10,3*!
21,6±2,08*!
75 , 1± 6 ,44 *1’2
13,3 3 ± 0 , 98 **.2
347,6±4°,о*!
356,1*33,4*!
4,8 i ±0,40*2
1401,0*122,0*!
144,2*14,0*!
63,7±6,22*2
4 ,5 8 ±o, 51*i.2
11,0±1,11*!-2
39 ,3 2 ±3 , 14*1.2
и , 3 ± 1Д 4 *!
1345 , 1±П 5 , 2 *!
I40,i±i3,2*i
5 0 ,3 ±5 ,4 i*i
3 , 2 ± 0 ,32 *i
15, 6 ± 1,з 6 *!
4 8 ,5 ±4 ,5 *i
*—различия достоверны (p<o,os).
Н а ф оне проводим ой стандартной ф арм акотерапии отм ечалась норм ализация
концентрации С5а и сниж ение уровн я И Л - 1 (3, Ф Н О а, ИЛ -2, И Н Ф а, Г-КСФ , С3, Сза, С4ком понентов систем ы ком плем ента, которы е, однако, оставались вы ш е норм альны х
значений (табл. 1).
НАУЧНЫ Е ВЕДО М О СТИ
С е р и я М е д и ц и н а . Ф а р м а ц и я . 2 0 1 1 . № 4 (99). В ы п у с к 13
99
У пациенток с ХСО при поступлении вы явлена супрессия ф агоцитарной актив­
ности нейтроф илов периф ерической крови и активация их м етаболической активно­
сти, тогда как после проведенной ф арм акотерапии н орм ализовались показатели ф аго­
цитарного индекса, сниж ались, но не до уровня нормы , значения ф агоцитарного числа
и спонтанного и стим улированного Н СТ-теста (табл. l).
Кроме того, у больны х ХСО в стадии обострения по сравнению с группой здоро­
вы х доноров установлены изм енения белкового спектра м ем бран эритроцитов, закл ю ­
чаю щ иеся в сниж ении представительности подф ракций спектрина, белка полосы 4.5 и
глутатион-Э-трансф еразы (Г-S-T) и повы ш ении белка полосы 4.1, дем атина, актина и
тропом иозина. Такж е наблю далось повы ш ение ССЭ и концентрация в них М Д А
(рис. 1; табл. 2).
tv
ip
T p e r D J ii ia i K H
Г-З-ФД
4.5
Рис. 1. Представительность белков мембран эритроцитов у больных ХСО
в стадии обострения на фоне проводимой традиционной фармакотерапии
Примечания:
1. - радиус окружности - значения показателей у здоровых доноров (l группа);
2 ------------------- значенияпоказателей у больных ХСО в стадии обострения (2 группа);
3 ---------------- значенияпоказателей у больных ХСО в стадии обострения после традицион­
ной фармакотерапии (3 группа);
4 - 0 - р< 0,05 по отношению к 1 группе;
5
- р<0,05 з группы по отношению ко 2 группе.
Н а ф оне проводим ого ком плексного лечения пациенток с ХСО вы явлен а н ор ­
м ализация представительности в эритроцитарной м ем бране количества актина и сн и­
ж ение, но не до уровня нормы , представительности дем атина, глутатион -Sтрансф еразы , белка полосы 4.1, ССЭ и М Д А (рис. 1; табл. 2).
Таблица 2
Структурно-ф ункциональны е свойства эритроцитов
у больны х с Х С О на ф оне проводимого традиционного лечения (М ± т )
ХСО
Показатели
Здоровые
доноры
до лечения
традиционное лечение
СЕГ
1
1,42±0,11
2
1,59±о,12
1,52±0,12
ССЭ
32,8±1,23
50,3*2,31*!
МДА
3 ,54 ±о ,15
5,36*0,35*!
3
4 0 ,3 ± 1,3 2*1-2
4 Д 2 ±о, 35 *1-2
100
НАУЧНЫ Е ВЕДО М О СТИ
Ш
Ш
С е р и я М е д и ц и н а . Ф а р м а ц и я . 2 0 1 1 . № 4 (99). В ы п у с к 13
О б с у ж д е н и е . Таким образом , исходя из ф ункций ин тегральн ы х и периф ери­
чески х белков м ем браны эритроцитов, м ож но заклю чить, что вы явленны е изм енения
направлены на ум еньш ение прочности и деф орм ируем ости эритроцитарной м ем бра­
ны, повы ш ение общ ей сорбционной способности эритроцитов и их гликокаликса и
сниж ение их м етаболической активности, что ускоряет процессы старения красны х
клеток крови [5, ю ].
П атогенез вы явлен н ы х наруш ений м ож но объяснить, основы ваясь на кон ц еп ­
ции участия эритроцитов, в частн ости их м ем браны , в регулировании им м унного го­
м еостаза [ю ]. И зм енения структурно-ф ункциональны х свойств эритроцитов входят в
цепь приспособительн ы х м еханизм ов, поддерж и ваю щ их постоянство внутренней сре­
ды как в норм е, так и в условиях патологии. Развиваю щ ийся «окислительны й взрыв»
приводит к повы ш ению процессов перекисного окисления липидов как внутри клетки,
так и в ее м ем бране, что характеризуется повы ш ением внутриклеточного количества
М ДА. Это приводит к «вымыванию » холестерина из ф осф олипидного слоя эритроци­
тарной м ем браны , ум еньш ению ее липидной части, некоторой потере периф ерических
низком олекулярны х м ем бранн ы х белков и относительном у повы ш ению количества
гликопротеидов, что, по-видим ом у, и являлось причиной повы ш ения ССЭ.
Безусловно, происходящ ие изм енения структурно-ф ункциональны х свойств
эритроцитарной м ем браны приводят к изм енению эпитопной м озаики, напрям ую и з­
м еняю щ ие м еханизм ы регулирования им м унологических ф ункций и коррекции имм унодеф ицитного состояния [5].
П олученны е результаты свидетельствую т о н еобходим ости оценки роли состоя­
ния м ем браны красны х клеток крови в патогенезе им м унн ы х наруш ений при обостре­
нии хронического сальпингооф орита и важ ности их коррекции при разработке эф ф ек­
ти вн ы х способов ф арм акологической им м унореабилитации у дан ной категории
пациенток.
Литература
1. Беда, Ю.В. Иммунологические тесты в оценке значимости условно-патогенных
микроорганизмов при гинекологических заболеваниях / Ю.В. Беда, А.А, Олина,
Т.И. Карпунина // Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2009. № 2/1. - С. 198-19 9.
2. Виксман, М.Е. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов чело­
века по реакции восстановления нитросинего тетразолия / М.Е. Виксман, А.Н . Маянский. - Казань, 1979. - 15 с.
3. Гаврилюк, В.П. Структурно-функциональные свойства эритроцитов, иммунные
и оксидантные наруш ения при аппендикулярным перитоните у детей / В.П. Гаврилюк,
А.И. Конопля // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2010. Т. 9, №1. - С. 3 0 -3 4 4. Конопля, А.А. Применение иммуномодуляторов, антиоксидантов, и мембранопротекторов в традиционном лечении обострения хронического сальпингоофорита /
А.А. Конопля // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». Курск, 2010. - № 2. - С. 64-69.
5. Конопля А.И. Взаимосвязь структуры и функции эритроцитов с иммунным го­
меостазом. - Курск: КГМУ, 2008. - 40 с.
6. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. - М.: Высш. школа, 19 8 0 .- 293 с.
7. Медведев, А.Н. Способ исследования поглотительной фазы фагоцитоза /
А.Н. М едведев, В.В. Чаленко // Лаб. дело. - 1991. - № 2. - С. 19 -2 0 .
8. Рязанцева, Н.В. Типовые наруш ения молекулярной организации мембраны
эритроцита при соматической и психической патологии / Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий
// Успехи физиологических наук. - 2004. - Т. 1, № 1. - С. 5 3 -6 5.
9. Щ ербаков, В.И. Применение НСТ-теста для оценки чувствительности нейтро­
филов к стимуляторам / В.И. Щ ербаков // Лаб. дело. - 1989. - № 1. - С. 3 0 -33 .
ю . Эритроцитзависимые эффекты лекарственных и физиотерапевтических
средств / А.И. Лазарев, А.И. Конопля, В.П. Гаврилюк и др. - Курск: КГМУ, 2008. - 333 с.
НАУЧНЫ Е ВЕДО М О СТИ
С е р и я М е д и ц и н а . Ф а р м а ц и я . 2 0 1 1 . № 4 (99). В ы п у с к 13
101
RELATIONSHIP OF CAUSE AND EFFECT BETWEEN DISTURBANCES OF THE IMMUNE
STATUS DOTH STRUCTURAL AND FUNCTIONAL PROPERTIES OF ERYTHROCYTES
AT THE CHRONIC SALPINGOOPHORITIS
Y.l. Kobeleua1, Д.Д. Konoplya2
МЛ. Curkina1, E.G. Romanyak2
G.P. Omasharifa2, M.A. Shumakoua2
2B elg o ro d region
h osp ita l o f S t. I o a s q f
-> K u rsk State
M e d ica l University
e-m ail: kanabis@ nm .ru
In article the data about character and degree of distur­
bances of the immune status and structural and functional prop­
erties of the membrane of erythrocytes at patients with a chronic
salpingoophoritis is stated. In work the interrelation between
changes of structural and functional properties of the membrane
of red blood cells and degree of expression of disturbances of indi­
cators of the congenital and got immunity is established. Correc­
tive and protective efficiency of use of traditional pharmacother­
apy at patients with chronic salpingoophoritis is defined.
Key words: achronic salpingoophoritis, immune distur­
bance, membrane of erythrocytes, structurally functional proper­
ties of the membrane of red blood cells.