Доклинические исследования безопасности и влияния на систему иммунитета пероральной низкодозовой аллерговакцины

Иммунопатология, аллергология, инфектология
Immunopathology, allergology, infectology
2009,№4:45-51
АЛЛЕРГОЛОГИЯ
Доклинические исследования безопасности и влияния на систему
иммунитета пероральной низкодозовой аллерговакцины
Л.Р. Выхристенко 1, В.В. Янченко 1, Н.В. Дудко 2
1
Витебский государственный медицинский университет, 210023, г. Витебск, пр-т Фрунзе, 27, Беларусь
2
Научно-производственное республиканское унитарное предприятие «Диалек», 220014, г. Минск, пер. С.
Ковалевской, 52а, Беларусь
Preclinical research of safety and influences on immune system of the low-dose
oral allergovaccine
L.R. Vykhrystsenka 1. U.V. Yanchanka ., N.V. Dudko 2
1
2
Vitebsk Medical University, Vitebsk, Belarus
Research-and-production republican unitary enterprise «Dialek», Minsk, Belarus
Аннотация
Summary
Эффективность и безопасность специфической аллерговакцинации во многом зависят от качества аллерговакцин и способа их введения в организм пациента. Разработана пероральная низкодозовая аллерговакцина АВ2П, представляющая собой комплекс водно-солевых экстрактов бытовых и эпидермальных аллергенов и инертного носителя. Целью исследования являлось изучения
острой и субхронической токсичности, иммунотоксичности нового лекарственного средства – пероральной низкодозовой аллерговакцины АВ-2П. Объект исследования:
лабораторные животные - белые крысы линии Wistar и
белые беспородные мыши. Доказано, что аллерговакцина АВ-2П характеризуется низкой токсичностью, ЛД 50 для
препарата определить не удалось. Длительное введение
АВ-2П не приводит к изменению физиологических показателей животных. АВ-2П не оказывала иммунотоксических эффектов. Пероральная аллерговакцина АВ-2П увеличивала количество нейтрофилов на фоне снижения
количества лимфоцитов, стимулировала развитие гуморального иммунного ответа на эритроциты барана у мышей, причем эффект был более выражен при введении
препарата в продуктивную фазу иммунного ответа. При
введении в эффекторную фазу иммунного ответа АВ-2П
способствовала снижению развития ГЗТ на введение
эритроцитов барана у большего количества мышей. Полученные данные доказывают, что низкодозовая пероральная аллерговакцина является безопасным иммунобиологическим препаратом.
The efficiency and safety of allergovaccination depends on
quality of allergovaccines and methods of their
administration. We designed low-dose oral allergovaccine AV2P. It comprises the complex of water-salt extract of home dust
allergen, epidermal allergen and inert carrier. The purpose of
the study was to assess acute and sub-acute toxicity,
immunotoxicity of the new drug – low-dose oral
allergovaccine AV-2P. Object of the study: laboratory animals
– white Wistar rats and mice. It was proved that allergovaccine
AV-2P is characterized by low toxicity. LD50 for this drug was
not defined. Longitudinal administration of AV-2P didn’t
cause any pathological changes in animals. The vaccine was
deprived of any immunotoxic effects, but demonstrated
evident immunobiological activity. The obtained data proved
that low-dose oral allergovaccine AV-2P is the safe and highly
active immunobiological drug.
Ключевые слова
Key words
Аллерген, пероральная аллерговакцина, специфическая
аллерговакцинация.
Allergen, oral allergovaccine, specific allergovaccination.
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2009 N°4
45
Л.Р. Выхристенко, В.В. Янченко, Н.В. Дудко
Одним из направлений совершенствования
специфической аллерговакцинации является
разработка рентабельных пероральных аллерговакцин, обладающих высокой иммуногенностью и низкой аллергенностью, изучение их иммунологических механизмов действия [1, 2].
Известно, что пероральная аллерговакцинация применяется более 100 лет, то есть с начала использования метода иммунотерапии
аллергенами [3]. В разные годы в качестве пероральных аллерговакцин использовали водно-солевые экстракты аллергенов, глицериновые и лиофилизированные аллергены, а также
аллергены, помещенные в капсулы, биодеградирующие микросферы или таблетки с кишечно-растворимой оболочкой [3-5]. Для достижения клинического эффекта использовались высокие дозы пероральных аллерговакцин - в 5-20-100 раз выше парентеральных доз.
Высокодозовые пероральные аллерговакцины
безопасны, удобны для применения и в этом
их преимущество перед парентральными аллерговакцинами, однако их производство экономически невыгодно из-за увеличения стоимости курса лечения. В последние годы опубликованы результаты экспериментальных и
клинических исследований, доказывающие
возможность формирование иммунологической толерантности к аллергену при приеме его
низких доз [6-10]. Поскольку практические
аспекты низкодозовой аллерговакцинации
изучены недостаточно, целью нашего исследования являлась разработка пероральной низкодозовой аллерговакцины для специфической аллерговакцинации пациентов с атопической бронхиальной астмой и/или аллергическим ринитом, установление степени и выраженности токсического действия вакцины на
организм животных, оценка ее иммунобиологических свойств.
Материалы и методы
Пероральная низкодозовая аллерговакцина
АВ-2П имела следующий состав на 1 таблетку
0,120 г (5 PNU, protein nitrogen unit– международная единица количественного определения
аллергенов или 0,00005 мг белкового азота): аллерген домашней пыли – 0,2 мкл; аллерген шерсти кошки - 0,1 мкл; аллерген шерсти собаки - 0,1
мкл; аллерген шерсти овцы - 0,1 мкл; микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ – инертный носитель) до 0,120 г.
Бытовые и эпидермальные аллергены, включенные в состав пероральной аллерговакцины
46
АВ-2П, произведены ОАО «Биомед» им. И.И.
Мечникова (Российская федерация). Носитель
препаратов аллерговакцин – микрокристаллическая целлюлоза не оказывает влияния на фармакологические свойства (специфичность) пероральной аллерговакцины, имеет хорошие сорбционные свойства, обладает минимальными
побочными эффектами при длительном применении и удовлетворяет технологии изготовления аллерговакцины.
Эксперименты по изучению острой, субхронической токсичности и иммунотоксичности
пероральной низкодозовой аллерговакцины
АВ-2П выполнены в соответствии с действующими нормативными документами МЗ РБ.
Изучение острой токсичности пероральной
аллерговакцины АВ-2П. Исследования проводили на животных обоего пола: крысах линии
Wistar массой 200,0 – 220,0 г и белых беспородных мышах, массой 20 - 22 г. Для определения
LD50, АВ-2П вводили крысам и мышам однократно перорально в виде водной суспензии в
объеме 5,0 мл/крыса и 0,5 мл/мышь. Максимальная введенная доза аллерговакцины составила:
для крыс - 106,5 PNU/кг (4 г/кг); для мышей 53,1 PNU /кг (2 г/кг).
За животными вели наблюдение в течение 14
суток, выявляли признаки интоксикации и учитывали гибель.
Изучение субхронической токсичности пероральной аллерговакцины АВ-2П. Субхроническую токсичность АВ-2П изучали на крысах обоего пола массой 200,0±10,0 г. Сформировали три
группы животных: контрольную, первую и вторую опытные группы.
АВ-2П вводили животным per os в виде водной суспензии ежедневно в течение 90 суток в
следующих дозах: первая опытная группа - 20,0
мг/кг, 2-я – 200,0 мг/кг. Контрольным животным
вводили очищенную воду.
В течение всего эксперимента проводили
наблюдение за животными. Оценивали: внешний вид, поведение, изменение массы тела и
внутренних органов (весовые коэффициенты), биохимические и гематологические показатели. Для определения динамики исследуемых параметров часть животных опытных и контрольной групп выводили из эксперимента на 14-е, 30-е, 60-е, 90-е сутки и по
окончании восстановительного периода (30
суток после отмены применения АВ-2П).
Биохимические показатели крови (содержание мочевины, креатинина, глюкозы, общего
белка, холестерина, активность аспартатами-
Immunopathology, Allergology, Infectology 2009 N°4
Аллергология: Доклинические исследования безопасности и влияния на систему иммунитета пероральной низкодозовой аллерговакцины
нотрансферазы, аланинаминотрансферазы,
щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы),
СОЭ, количество гемоглобина, эритроцитов,
лейкоцитов, лейкоцитарную формулу определяли по стандартным, принятым в клинической практике методикам.
Исследование иммунотоксического действия
пероральной аллерговакцины АВ-2П. Оценивали
влияние АВ-2П на факторы видового иммунитета и антигенспецифического иммунного ответа, индуцированного эритроцитами барана.
Исследование проводилось на белых мышах
самцах весом 18-20 г. Были сформированы 3
группы животных по 7 особей в каждой: контрольная, первая и вторая опытные группы.
Регламент эксперимента: в первый день провели иммунизацию животных всех групп эритроцитами барана (1х107). На 6 – е сутки эксперимента для индукции ГЗТ ввели под апоневроз
стопы задней лапы разрешающую дозу антигена – 1х108. На протяжении эксперимента животные контрольной группы получали 0,3 мл воды
очищенной, животные опытных групп – исследуемый препарат АВ-2П в дозе 0,3 г/кг по следующей схеме:
- первая опытная (аллерговакцину вводили однократно в день иммунизации животных
эритроцитами барана) – для оценки влияния
АВ-2П на развитие индуктивной фазы иммунного ответа;
- вторая опытная (аллерговакцину вводили
трехкратно: накануне, в день введения разрешающей дозы антигена и через 24 часа) – для
оценки влияния аллерговакцины на развитие
продуктивной/эффекторной фазы иммунного ответа.
Определяемые параметры: количество лейкоцитов в периферической крови, лейкоцитарная формула, показатели функциональной
активности перитонеальных макрофагов
(фагоцитарный показатель - ФП; фагоцитарное число - ФЧ, %; НСТ+-нейтрофилов –
тест восстановления нитросинего тетразолия), показатели общей активности системы
комплемента (показатель классического
пути активации комплемента - СН50, показатель альтернативного пути активации комплемента - АР50), показатели гуморального
иммунного ответа (селезеночный индекс, титр
гемагглютининов – титр ГА, АОК - число антителообразующих клеток селезенки), показатели клеточного иммунного ответа (выраженность реакции гиперчувствительности замедленного типа - ГЗТ, индекс реакции).
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2009 N°4
Статистическую обработку полученных при
исследованиях данных осуществляли на компьютере с использованием статистических программ
Microsoft Excel 7.0 и t-критерий Стьюдента.
Результаты и обсуждение
Острая токсичность низкодозовой пероральной аллерговакцины АВ-2П. По результатам испытаний исследованных образцов
LD 50 установить не удалось, все подопытные
животные выжили. Наблюдение за подопытными животными в течение 14 суток
после введения им АВ-2П не выявило каких-либо отклонений в состоянии и поведении животных по сравнению с контрольной
группой. Патологоанатомический визуальный осмотр опытных животных, умерщвленных на 14-е сутки эксперимента, не показал каких-либо изменений во внутренних
органах опытных животных в сравнении с
контрольными животными.
Таким образом, результаты изучения острой
токсичности АВ-2П свидетельствуют о ее низкой токсичности при однократном пероральном
приеме в дозах, превышающих предполагаемые
терапевтические более чем в 30 раз.
Субхроническая токсичность низкодозовой
пероральной аллерговакцины АВ-2П. Наблюдение за поведением и состоянием экспериментальных животных не выявило существенных
различий в сравнении с контрольными животными. Крысы были относительно активными,
хорошо поедали корм, имели гладкий блестящий шерстный покров. Внешних симптомов
интоксикации в виде изменения реакции на
внешние раздражители, диареи, потери аппетита и др. на протяжении 3-х месячного периода введения препарата, а также в период его
отмены (30 суток после окончания применения) отмечено не было.
Масса тела подопытных крыс соответствовала возрастным нормам. Динамика изменения
массы тела в течение изученного периода в
опытных группах не выявила существенных различий по сравнению с контрольными показателями (табл. 1).
При сравнении относительной массы внутренних органов опытных и контрольной групп,
выведенных из эксперимента в разные сроки
наблюдения, существенных изменений не обнаружено. Все отклонения от контрольных показателей в опытных группах не носили закономерного характера, и находились в пределах
физиологических норм.
47
Л.Р. Выхристенко, В.В. Янченко, Н.В. Дудко
Исследование морфологической картины
крови крыс, получавших аллерговакцину АВ-2П
в дозах 20мкг/кг и 200мкг/кг в течение 14-ти суток, выявило тенденцию к снижению уровня
гемоглобина и эритроцитов, в то время как в
другие периоды наблюдения (30, 60, 90 суток и
в течение восстановительного периода) существенных различий между опытными и контрольной группами не наблюдалось (табл. 2). Возможно, это связано с сезонными изменениями в
морфологической картине крови, характерными для крыс. Остальные показатели морфологического состава крови и СОЭ в опытных группах не отличаются существенно от контрольных
и находятся в пределах физиологических норм.
При изучении биохимических показателей
не было выявлено каких-либо существенных
отличий между животными опытных и контрольной групп.
Таким образом, в исследовании было доказано, что АВ-2П не оказывала влияния на физиологические показатели животных, получавших её перорально в дозах 20 мкг/кг и 200
мкг/кг течение 6 месяцев. Все отклонения от
контроля не носили закономерного характера
и находились в пределах нормы. При длительном введении аллерговакцина АВ-2П в изученных дозах существенно не изменяла морфологический состав крови крыс, поскольку обнаруженные изменения находились в пределах
физиологических норм.
Влияние пероральной аллерговакцины АВ-2П
на систему иммунитета. АВ-2 не оказывает влияния на показатели видового иммунитета мышей (табл. 3). Все исследованные параметры регистрировались практически на одном уровне у
животных контрольной и опытных групп.
Выявлено, что АВ-2П не влияла на количество лейкоцитов в периферической крови мышей (табл. 4).
Однако у мышей опытных групп обнаружено увеличение относительного количества нейтрофилов. Причем, в группе животных, получивших АВ-2П однократно, регистрируется достоверное в сравнении с контрольной группой
увеличение численности сегментоядерных нейтрофилов. А в группе мышей, получивших АВ2П трехкратно, достоверность различий выявляется в отношении палочкоядерных нейтрофилов, тогда как для сегментоядерных нейтрофилов регистрируется тенденция к увеличению
показателя. Такое увеличение количества нейтрофилов произошло за счет компенсаторного
снижения количества лимфоцитов в перифери-
48
ческой крови. Механизм данного перераспределения популяций лейкоцитов, скорее всего, связан с непосредственным влиянием лекарственного средства и реализовывается через изменения цитокиновой регуляции гемопоэза, что требует дополнительных исследований.
При исследовании влияния АВ-2 на показатели гуморального звена иммунного ответа обнаружен стимулирующий эффект при совмещении введения препарата с развитием продуктивной фазы иммунного ответа, индуцированного
эритроцитами барана (табл. 5).
Так, у животных опытной группы 2 зарегистрировано увеличение числа АОК селезенки и
титра гемагглютининов в сравнении с животными контрольной группы. При введении исследуемого препарата в индуктивную фазу иммунного ответа стимулирующий эффект имеет характер тенденции. В целом, такая стимуляция может отражать накопление ингибирующих антител и являться одним из компонентов механизма действия аллерговакцины.
Выраженность реакции ГЗТ у мышей отражена в таблице 6. Обнаружено увеличение численности мышей, у которых вызывается ГЗТ при
введении исследуемого препарата в индуктивную фазу иммунного ответа, тогда как в группе
животных, получавших АВ-2 в эффекторную
фазу иммунного ответа, увеличения числа животных с реакцией ГЗТ не произошло. В то же
время, существенных различий в выраженности
реакции ГЗТ у ответивших животных опытных
и контрольных групп не наблюдалось.
Таким образом, пероральная аллерговакцина
АВ-2П увеличивала количество нейтрофилов на
фоне снижения количества лимфоцитов, стимулировала развитие гуморального иммунного
ответа на эритроциты барана у мышей, причем
эффект был более выражен при введении препарата в продуктивную фазу иммунного ответа.
При введении в эффекторную фазу иммунного
ответа АВ-2П способствовала снижению развития ГЗТ на введение эритроцитов барана у большего количества мышей.
Полученные данные доказали, что пероральная аллерговакцина АВ-2П в использованных
дозах и режимах введения не оказывает иммунотоксических эффектов и обладает иммунобиологическим действием. В дальнейшем планируется использовать пероральную низкодозовую
аллерговакцину для специфической иммунотерапии аллергических заболеваний, опосредованных реакциями гиперчувствительности немедленного типа, в частности, у пациентов с атопи-
Immunopathology, Allergology, Infectology 2009 N°4
Препарат,
доза
Пол,
количество
Срок наблюдения
Исходные
14 сут
данные
30 сут
60 сут
90 сут
120 сут
Контроль
(дист. вода)
Самцы, 5
Самки, 5
193,0±2,4
192,0+1,6
245,0±6,3
194,0±5,7
219,0±9,3
225,0+7,1
300,0+7,1
228,0+5,0
279,0+6,8
242,0+7,9
318,0+11, 8
224,0+6,8
Доза 1
20мг/кг
Самцы, 5
Самки, 5
192,0±1,8
192,0±1,8
255,0±5,4
214,0+2,1*
262,0+8,2*
214,0±3,0
276,0±15, 7
216,0+2,9
303,0+8,2
224,0+6,8
284,0+11, 1
203,8+7,3
Доза 2
200мг/кг
Самцы, 5
Самки, 5
191,0+1,8
193,0+1,9
242,0±4,3
218,0±2,9*
248,0±1,4*
216,0±6,4
276,0±13, 9
234,0±2,1
274,0+9,6
224,0+5,0
308,8+15, 1
230,0+4,5
Примечание:
* - достоверность отличий в сравнении с контролем р < 0,05.
Таблица 2
Влияние аллерговакцины АВ-2П на морфологические показатели крови крыс при длительном введении (14 суток)
Препарат,
доза (мл/кг)
Пол
Нв.
животных (г/л)
Эр.х1012/л Цветной СОЭ
показатель мм/ч
Lх109/л
Контроль
(дист. вода)
Доза 1
20мг/кг
Доза 2
200мг/кг
Самцы
Самки
Самцы
Самки
Самцы
Самки
5,3±0,4
5,3±0,2
4,5±0,2
4,6±0,1
4,5±0,1
4,9±0,1
18,6±2,3
12,1±1,0
15,2±0,7
11,6±1,6
15,8±1,5
11,2±1,1
135,6±6,1
123,5±3,9
120,3±1,9
115,8±0,8
117,1±1,1*
119,6±1, 9
Примечание:
** - достоверность отличий в сравнении с контролем р< 0,05,
* - достоверность отличий в сравнении с контролем р < 0,01.
0,8±0,04
0,7±0,02
0,8±0,04
0,8±0,02
0,8±0,02
0,7±0,02
20,0±4,3
10,8±1,3
30,0±3,4
12,6±0,6
32,2±5,3
17,2±4,3
Лейкоцитарная формула
пал.%
сегм.%
эоз.%
мон.%
лимф.%
14,2±1,9
16,6±2,6
16,8±3,8
19,4±3,9
15,4±1,5
18,6±2,6
0,8±0,4
0,0±0,0
0,0±0,0
0,0±0,0
0,6±0,2
0,0±0,0
75,6±1,3
76,4±3,4
75,4±2,4
73,8±3,5
75,2±1,9
70,6±3,7
14,2±1,9
16,6±2,6
16,8±1,7
19,4±3,9
15,4±1,5
18,6±2,6
5,4±0,8
3,6±0,8
4,2±1,0
2,6±0,7
5,4±0,5
4,6±1,2
49
Аллергология: Доклинические исследования безопасности и влияния на систему иммунитета пероральной низкодозовой аллерговакцины
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2009 N°4
Таблица 1
Динамика изменения массы тела (г) крыс при пероральном введении АВ-2П
Л.Р. Выхристенко, В.В. Янченко, Н.В. Дудко
Таблица 3
Влияние АВ-2 на показатели видового иммунитета мышей (среднее значение ± стандартное отклонение)
Показатели
1.ФП,%
2. ФЧ
3. НСТ+-клетки, %
4. СН50
5.АР50
Группы животных
контроль
опыт 1
(однократное введение)
опыт 2
(трехкратное введение)
18,9 ±8,3
1,8 ±0,4
7,0 ±3,8
13,7 ±4,5
1,5 ±0,7
18,7 ±9,6
2,1 ±0,5
7,4 ±5,1
13,0 ±6,1
1,7 ±1,1
18,0 ±11,6
2,2 ± 0,5
3,9 ±3,2
12,8 ±4,1
1,5 ±0,9
Таблица 4
Влияние АВ-2П на количество лейкоцитов и лейкоцитарную формулу периферической крови мышей (среднее
значение ± стандартное отклонение)
Показатели
1. Лейкоциты, х 10у/л
2. п/я нейтрофилы,%
3. с/я нейтрофилы,%
4. эозинофилы,%
5. моноциты,%
6. лимфоциты,%
Группы животных
контроль
опыт 1
(однократное введение)
опыт 2
(трехкратное введение)
7,7 ± 3,3
4,0 ±1,5
23,1 ±7,7
6,1 ±3,1
0,3 ± 0,5
66,4 ± 9,6
7,5 ±1,9
8,3 ± 3,9*
33,4 ±14,6
7,1 ±4,1
0,3 ± 0,5
50,9 ±15,1*
7,0 ± 4,3
6,0 ± 4,3
33,0 ±4,2**
2,7 ± 3,8
1,0±1,15
57,3 ±6,2
Примечание: * - достоверные различия в сравнении с показателем контрольной группы, р < 0,05, ** - достоверные различия в сравнении с показателем контрольной группы, р < 0,02.
Таблица 5
Влияние АВ-2П на показатели гуморального иммунного ответа (среднее значение ± стандартное отклонение)
Показатели
Селезеночный
индекс
АОК селезенки
(на 10 000
спленоцитов)
Титр ГА (log2)
Группы животных
контроль
опыт 1
(индуктивная фаза)
опыт 2
(продуктивная фаза)
0,3 ±0,15
0,3 ±0,16
0,2 ±0,1
290,0 ±140,7
350,0 ±191,0
620,7 ±241,3*
4,9 ±0,7
5,6 ± 0,5
6,3 ± 0,8*
Примечание: * - достоверные различия в сравнении с показателем контрольной группы, р < 0,01.
Таблица 6
Влияние АВ-2П на показатели клеточного иммунного ответа (индекс ГЗТ, %) мышей при иммунизации их
эритроцитами барана (среднее значение ± стандартное отклонение по выборке животных, ответивших развитием признаков ГЗТ)
Группы животных
Индекс ГЗТ, %
Кол-во мышей, ответивших по ГЗТ
(абс. - % по группе)
Контроль
Опыт 1 (индуктивная фаза)
Опыт 2 (эффекторная фаза)
12,4 ± 9,8
11,9 ±5,5
10,6 + 3,7
2 - 28,6 %
4 - 57,1%
1 - 14,3 %
50
Immunopathology, Allergology, Infectology 2009 N°4
Аллергология: Доклинические исследования безопасности и влияния на систему иммунитета пероральной низкодозовой аллерговакцины
ческой бронхиальной астмой, аллергическим
ринитом. Безопасность и клинико-иммунологическая эффективность АВ-2П будет изучена в
рандомизированных плацебо-контролируемых
клинических испытаниях.
Выводы
1. Пероральная аллерговакцина АВ-2П характеризуется низкой токсичностью, ЛД50 для исследованного препарата определить не удалось. Максимально возможная для введения доза препарата не
вызывала гибели опытных крыс и мышей.
2. Длительное введение аллерговакцины АВ2П в дозах 20 мкг/кг и 200 мкг/кг не оказы-
вало влияния на физиологические показатели животных, морфологический состав
крови, биохимические показатели крови.
Все отклонения от контроля не носили закономерного характера и находились в пределах физиологических норм.
3. Пероральная аллерговакцина АВ-2П в
использованных дозах и режимах введения не оказывала иммунотоксических
эффектов. Изменения отдельных показателей иммунного ответа не носили закономерного характера и могли быть связаны с индивидуальной чувствительностью
животных.
Литература
1. WHO Position Paper. Allergen immunotherapy: therapeutic
vaccines for allergic diseases. J. Allergy. 1998; 53 (44):1-42.
2. Jutel M., Akdis M., Blaser K., Akdis C.A. et al. Mechanisms
of allergen specific immunotherapy – T-cell tolerance and
more. J. Allergy. 2006; 61: 796–807.
3. Urbach E. Allergy. / E. Urbach, P. Gottlieb. 2 edition. New
York: Grune and Stration. 1946.
4. Новиков Д.К. Выхристенко Л.Р. Современные методы
специфической иммунотерапии аллергических заболеваний. Аллергология и иммунология. 2003; 4 (2): 37-50.
7. Rask C., Holmgren J., Fredriksson M., Lindblad M. et al.
Prolonged oral treatment with low doses of allergen conjugated
to cholera toxin B subunit suppresses immunoglobulin E
antibody responses in sensitized mice. Clin. Exp. Allergy. 2000;
30 (7):1024-32.
8. Jilek S., Walter E., Merkle H.P., Corthesy B. Modulation of
allergic responses in mice by using biodegradable poly(lactideco-glycolide) microspheres. J. Allergy Clin. Immunol. 2004; 114
(4):943-50.
5. Roth-Walter F., Jensen-Jarolim E. Oral immunotherapy
against type I allergy. Journal of World Allergy Organization.
2007; 2 (2):38-44.
9. TePas E.C., Hoyte E.G., McIntire J.J., Umetsu D.T. Clinical
efficacy of microencapsulated timothy grass pollen extract in
grass-allergic individuals. Ann Allergy. Asthma Immunol. 2004;
92 (1): 1-2.
6. Sato M.N., Carvalho A.F., Silva A.O., Maclel M.J. et al. Low
dose of orally administered antigen down-regulates the T helper
type 2-response in a murine model of dust mite
hypersensitivity. Immunology. 1998; 3:338-44.
10. Charng Y.C., Lin C.C., Hsu C.H. Inhibition of allergeninduced airway inflammation and hyperreactivity by
recombinant lactic-acid bacteria. Vaccine. 2006; 24 (3334):5931-36.
Адрес для корреспонденции:
Выхристенко Людмила Ростиславна, к.м.н.,
доцент
210602 Беларусь, Витебск, пр-т Фрунзе, 27
Витебский государственный медицинский
университет
Тел.: (8021) 225-380; факс (8021) 372107,
225-380
E-mail: all-vgmu@mail.ru
Поступила 25.09.09 г.
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2009 N°4
51