МОЛЕКУЛЯРНАЯ ИММУНОЛОГИЯ
реклама
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ИММУНОЛОГИЯ УДК 576.8.097.3 РАСТВОРИМЫЕ ФОРМЫ МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВ КЛЕТОК ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЯХ В.В. Новиков Нижегородский госуниверситет Описан новый класс эндогенных иммунорегуляторных белков, представляющих собой растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы. Даны молекулярно-биологические механизмы образования растворимых форм, а также возможные пути их регулирующих воздействий на иммунную систему лиц, инфицированных вирусами гепатитов, гриппа, а также ВИЧ-инфицированных лиц. В настоящее время накапливаются данные о том, что многие поверхностные антигены иммунокомпетентных клеток могут находиться не только в мембранной, но и в растворимой форме, принимая непосредственное участие в реализации иммунного ответа. По существу, речь идет о новом классе эндогенных иммунорегуляторных молекул. Исследования, проведенные в различных лабораториях, выявили, что мембранные белки, относящиеся к так называемым дифференцировочным антигенам, наряду с белками главного комплекса гистосовместимости, обнаруживаются в сыворотке крови и в других биологических жидкостях. Содержание сывороточных форм мембранных антигенов может колебаться от исчезающих количеств до микрограммов в миллилитре. При наличии соответствующих моноклональных антител они могут быть выявлены с помощью иммуноферментного анализа (Новиков, 1996). Несмотря на то, что к началу 2000 г. охарактеризовано более 150 мембранных дифференцировочных антигенов клеток иммунной системы, сведения о количественном содержании и функциональной роли их растворимых форм немногочисленны. Тем не менее, исследования, проводимые в разных лабораториях мира, быстро наращивают информацию о существенной значимости растворимых форм поверхностных антигенов в механизмах иммунного ответа на опухолевые клетки, в развитии аутоиммунных процессов, в регуляции ответа на патогены бактериальной и вирусной природы. Растворимые формы поверхностных антигенов (s-формы) образуются либо за счет протеолитического расщепления мембранных форм (shedding), либо за счет альтернативного сплайсинга мРНК, приводящего к образованию транскрипта, соответствующего растворимой форме. Чаще всего это укороченный транскрипт, не содержащий участка, соответствующего трансмембранному региону поверхностного белка. В качестве известного всем примера растворимой формы поверхностного белка клеток иммунной системы можно привести секретируемые зрелыми Вклетками сывороточные иммуноглобулины. В процессе В-клеточного созревания 208 иммуноглобулины М последовательно экспрессируются первоначально на мембране клетки в составе В-клеточного рецептора. Затем, при дифференцировке Вклеток в плазматические клетки, альтернативный сплайсинг матричной РНК тяжелой цепи IgM приводит к продукции сывороточных иммуноглобулинов. Известны растворимые формы одного и того же мембранного антигена, которые образуются как за счет альтернативного сплайсинга, так и за счет протеолитического отщепления с поверхности мембраны. В результате, в сыворотке крови могут обнаруживаться обе формы. Так, растворимая форма (s-форма) рецептора интерлейкина-6 (CD126 антиген) может образовываться как за счет протеолиза, так и за счет альтернативного сплайсинга (Heaney et al., 1996). Обнаружены более сложные случаи, когда оба механизма участвуют в образовании растворимой формы одной и той же молекулы. В частности, s-форма CD117 антигена (рецептор фактора стволовых клеток, c-kit) появляется за счет последовательного включения альтернативного сплайсинга и протеолиза. В нескольких лабораториях продемонстрировано, что шеддинг является высоко специфическим и строго регулируемым процессом, основанным на избирательной активации протеиназ. Имеются данные об участии металлопротеиназ, сериновых и цистеиновых протеиназ в образовании s-форм дифференцировочных антигенов. Показано, что экспрессия мембранных и растворимых форм дифференцировочных антигенов имеет различные механизмы регуляции, а повышение уровня экспрессии мембранного антигена не обязательно влечет за собой увеличение уровня s-форм антигена во внеклеточном пространстве и наоборот (Schulz, 1995). Механизмы регулирующего действия растворимых форм дифференцировочных антигенов могут быть различными. Первоначально понималось, что s-формы выступают только в роли ингибиторов мембрано-связанных форм, взаимодействуя с их лигандами. Однако в настоящее время существуют данные о роли sформ в защите растворимых лигандов от деградации, в результате чего они могут участвовать в передаче сигнала, осуществляя роль межклеточных коммуникаторов и регулируя концентрацию лиганда в процессе межклеточных взаимодействий. Кроме того, растворимые формы дифференцировочных антигенов могут взаимодействовать с мембранными лигандами, имитируя или ингибируя межклеточные взаимодействия. Сам факт схода антигенов с мембраны при протеолитическом шеддинге нередко означает снижение плотности экспрессии мембранной формы, что также приводит к модуляции иммунных реакций. Таким образом, растворимые формы дифференцировочных антигенов, появляющиеся в биологических жидкостях, могут вызывать множественные эффекты, отражающие их роль в регуляции иммунологических механизмов на разных этапах реализации иммунного ответа (Новиков, 1999). Несомненный интерес для исследователей представляют молекулярные механизмы иммунного ответа, развивающиеся при наиболее распространенных вирусных инфекциях, таких как вирусные гепатиты, ВИЧ-инфекция, грипп. В настоящей работе представлены результаты исследований, проводимых на кафедре молекулярной биологии и иммунологии совместно с Нижегородским НИИ эпидемиологии и микробиологии, а также данные других исследователей, полученные в ходе изучения растворимых форм мембранных антигенов при вышеуказанных вирусных инфекциях. Среди активно исследуемых s-форм мембранных белков находятся такие, как растворимый рецептор интерлейкина-2 (sIL-2R, sCD25), s-форма CD8 антигена, характерного для цитотоксических Т-лимфоцитов, sCD95 антиген, опосредующий 209 апоптоз, sCD30 антиген, характерный для Тh2-клеток, растворимые формы антигенов адгезии и антигенов главного комплекса гистосовместимости, а также некоторые другие. Выявлены изменения в содержании таких антигенов в сыворотке крови при разных заболеваниях, в том числе и при вирусных инфекциях. Так, у HBs-положительных больных хроническим гепатитом В, характеризующихся активной репликацией вируса и высокими биохимическими показателями, были выявлены высокие уровни sCD30 антигена. Содержание данного антигена было в 2.5 раза выше, чем у доноров — носителей HBs антигена, и в 9 раз выше, чем у здоровых доноров. Обнаружена связь высоких уровней sCD30 антигена с активной стадией заболевания. Завершение репликации вируса и биохимическая ремиссия ассоциировались со снижением уровня sCD30 антигена. Высокий уровень sCD30 антигена, обнаруживаемый в активной фазе HBs-положительного хронического гепатита В, свидетельствует, по мнению авторов, о полноценности иммунного ответа у таких больных, по крайней мере, в отношении Th2 хелперного звена, отвечающего за эффективность продукции антител и принимающего совместно с вирус-специфической цитотоксичностью участие в подавлении репликации вируса гепатита В (Fattovich et al., 1996). В то же самое время при гепатите С не обнаружено значительных изменений уровня sCD30 антигена, что свидетельствует о более существенной роли Т-клеточного цитотоксического ответа при вирусном гепатите С в сравнении с гепатитом В (Sabin et al., 1997). Получены данные о повышении при вирусном гепатите В уровня сывороточных sCD54 и sCD58 антигенов, являющихся антигенами адгезии. Однако такое повышение не коррелирует с тяжестью заболевания и связано, по мнению авторов, с пониженной скоростью выведения из организма сывороточных белков вследствие нарушения функций печени (Knolle et al., 1997). Аналогичные данные получены нами при исследовании другого антигена адгезии — CD50 антигена. Последний был статистически достоверно повышен при остром гепатите В. Интересно, что в разгар заболевания в периферической крови снижалось содержание CD50-положительных мононуклеарных клеток, приближаясь к норме к моменту выписки больных из стационара. У больных хроническим гепатитом В подобных изменений не наблюдалось. Такая картина свидетельствует о том, что при остром гепатите В уровень сывороточного CD50 антигена и количество CD50-положительных клеток в крови меняются разнонаправленно. При этом повышенное количество sCD50 образуется либо за счет ускоренного шеддинга, приводящего к снижению плотности экспрессии антигена на мембране, либо за счет нарушения функций печени. В любом случае следствием может явиться торможение адгезионных процессов, которые участвуют в развитии механизмов цитотоксических реакций, резко выраженных при остром гепатите В (Птицына и др., 2000а). В другой серии исследований нами было выявлено повышенное в 1.5 раза содержание растворимого CD50 антигена в сыворотке больных хроническим гепатитом С. При остром гепатите С усредненный уровень данного показателя менялся незначительно, как и при ВИЧ-инфекции. В то же время, при микст-инфекциях (вирусные гепатиты В+С, В+С+D) уровень CD50 антигена поднимался еще выше, чем при моноинфицировании вирусом гепатита В. Вероятно, это связано с инфицированием не только вирусом гепатита С, но и вирусом гепатита В. Группа французских исследователей также провела исследование уровня ряда растворимых антигенов адгезии при хроническом гепатите С. Выявлено повышенное содержание sCD54, sCD106 (sVCAM) и sCD62E (sE-selectin) антигенов. Уровень 210 sCD54 антигена коррелировал с активностью воспалительных процессов печени, а уровни sCD106 и sCD62E коррелировали с частотой формирования фиброза печени. При хроническом гепатите С растворимые молеулы адгезии являютя, таким образом, маркерами воспалительных и фиброзных явлений (Kaplanski et al., 1997). Совместно с Институтом вирусологии РАМН нашей группой было проведено изучение содержания растворимого CD50 антигена в сыворотке крови лиц, инфицированных вирусом гепатита G. В крови лиц, несущих РНК вируса гепатита G, уровень sCD50 антигена был повышен в еще большей степени, чем при остром гепатите В. Такие же высокие уровни были зарегистрированы в крови лиц, несущих наряду с РНК вируса гепатита G, маркеры вирусных гепатитов В и С. Значительно повышенные количества sCD50 антигена при гепатите G отражают особенности формирования иммунного ответа при данной инфекции. Гепатит G характеризуется медленным развитием ответа на инфицирование вирусом. Так, в подавляющем большинстве случаев у детей, инфицированных вирусом при рождении, антительный иммунный ответ развивается только через 10–15 лет. Отличительной чертой является также редкая встречаемость иммунологических и молекулярно-биологических маркеров гепатита G одновременно. Гуморальный ответ в виде защитных антител к поверхностному белку вируса Е2 регистрируется только после исчезновения в крови РНК вируса, то есть после санации организма. Можно предположить, что повышенный уровень sCD50 антигена вносит свой вклад в торможение адгезионных процессов и формирование медленно развивающегося иммунного ответа на вирус гепатита G (Птицына и др., 2000б). Интересными представляются данные, полученные группой германских авторов, проводивших широкое эпидемиологическое изучение взаимосвязи между подверженностью лиц острым респираторным заболеваниям и уровнем sCD54 и sCD58 антигенов в крови обследованных. Была выявлена высокая обратная корреляция между уровнем sCD58, а также sCD54 антигена и частотой простудных заболеваний. Дополнительное исследование подтвердило, что частота простудных заболеваний ассоциирована с низким уровнем растворимых молекул адгезии sCD54, sCD58 (Becker et al., 1996). Тем самым было показано важное значение растворимых молекул адгезии в защите от вирусных агентов, вызывающих респираторные заболевания. С данными Беккера перекликаются результаты, полученные нашей группой при исследовании уровня sCD50 антигена адгезии в крови больных гриппом (см. статью Шломиной с соавт. в настоящем сборнике). Большое внимание уделено изучению роли растворимого СD8 антигена в патогенетических механизмах формирования ответа на вирусные инфекции. Значительное увеличение содержания sCD8 антигена, сходящего с мембраны цитотоксических Т-лимфоцитов, было зарегистрировано при различных формах поражения печени: острых вирусных гепатитах, хронических активных гепатитах, первичном билиарном циррозе, аутоиммунном гепатите, фульминантном гепатите, циррозе печени. Наиболее высокий уровень sCD8 антигена наблюдался при хроническом активном гепатите. При этом, за исключением фульминантного гепатита, не выявлено больших изменений в содержании sCD4 антигена, продуцируемого Т-хелперами. Причиной таких различий в характере изменений уровня растворимых антигенов является тот факт, что при гепатитах CD8-положительные цитотоксические Т-клетки принимают непосредственное участие в повреждении гепатоцитов, а наличие повышенных количеств sCD8 антигена отражает степень их активации. Авторы предлагают взамен определения СD4- и CD8-положительных клеток определять sCD4 и sCD8 антигены в сыворотке, соотношение которых 211 может явиться полезным маркером интенсивности иммунного ответа (Onji et al., 1994). В более поздних исследованиях было показано, что уровень sCD8 антигена выше при острых гепатитах, нежели при хронических (Hagihara et al., 1997), причем при хроническом гепатите С изменения sCD8 антигена шли параллельно с изменением уровня аланинаминотрансферазы. Выявлено снижение sCD8 антигена в ходе эффективной терапии больных альфа-интерфероном, что позволило авторам предложить тест на sCD8 антиген в качестве показателя эффективности интерферонотерапии. Одновременно авторы исследовали содержание sCD25 антигена, которое было повышенным у больных хроническим гепатитом С и еще более повышалось в ответ на введение альфа-интерферона у всех больных. Корреляции с эффективностью интерферонотерапии этот показатель не обнаружил (Maekawa et al., 1997). Большое количество информации получено при исследовании растворимых дифференцировочных антигенов в крови ВИЧ-инфицированных лиц и больных СПИДом. Известно, что нарушение продукции профиля цитокинов и других продуктов клеток играет основную роль в иммунопатогенезе ВИЧ-инфекции. В этих условиях сдвиг функции Т-хелперов с Th1- на Th0- или Th2-тип, наблюдаемый у ВИЧ-инфицированных лиц, приводит к прогрессированию заболевания. Дисбаланс цитокиновой сети сопровождается активацией иммунной системы, приводящей к потере ею способности к адекватному иммунному ответу (анергии) и развитию апоптотических процесов (Capobianchi, 1996). Ряд лабораторий исследовал во взаимосвязи прогностическое значение при ВИЧ-инфекции растворимых и мембранных форм дифференцировочных антигенов. S. Plaeger et al. (1999) показали, что прогностическими маркерами развития ВИЧ-инфекции являются: снижение относительного и абсолютного количества CD4-положительных клеток, увеличение sCD25, неоптерина и бета-2микроглобулина, увеличение относительного количества HLA-DR+CD4+-клеток, CD38+CD8+-клеток, CD71+CD4+-клеток и снижение общего количества CD25+- и СD19+-лимфоцитов. Аналогичное исследование провели R. Henkei et al. (1998). Они показали, что повышенная активация CD8+-Т-клеток, несущих мембранный CD38 антиген, очень тесно коррелирует с риском развития СПИДа и смерностью. Одновременно у ВИЧ-инфицированных лиц выявлено повышение уровня sCD8 антигена и клеток, несущих мембранные CD8 и HLA-DR антигены. Однако, когда уровень sCD8 соотнесли с количеством CD8+HLA-DR+-клеток, выяснилось, что этот индекс у ВИЧ-инфицированных лиц значительно снижен. Нужно заметить, что в описанных исследованиях на фоне повышения CD8+CD38+-клеток исследовался только уровень sCD8 антигена. В результате исследований, проведенных в нашей лаборатории, была сделана оценка уровня sCD38 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц. Было обнаружено его повышение в 1.7 раза в сравнении со здоровыми донорами. Подобные статистически достоверные различия выявлены для ВИЧ-инфицированных лиц, в крови которых содержались антитела к вирусу гепатита С или HBs-антиген. При этом у разных лиц регистрировались как близкие к нормальным значениям уровни sCD38 антигена, так и уровни, повышенные в несколько раз. Увеличенное содержание растворимой формы CD38 антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц свидетельствует об участии не только sCD8, но и sCD38 антигена в патогенетических механизмах развития ВИЧ-инфекции и предполагает его возможное использование в прогнозировании развития заболевания (Ptitsyna et al., 1999a). 212 CD38 антиген является активационным антигеном лимфоцитов. Он обладает внеклеточной ферментативной активностью, связанной с метаболизмом циклической АДФ-рибозы, служащей мощным мобилизатором внутриклеточного кальция. Растворимая форма СD38 образуется за счет протеолитического расщепления мембранного CD38. В дополнение к исследованию sCD38 антигена при ВИЧинфекции нами проведена оценка его уровня при вирусных гепатитах В и С (Птицына и др., 1999а). Выявлено, что уровень sCD38 антигена в крови больных острым гепатитом В до начала курса лечения более чем вдвое превышает его количество у здоровых доноров. Количество CD38-положительных клеток в разгар заболевания также повышено в сравнении с донорами в среднем в 2.1 раза. К моменту выписки больного из стационара количественное содержание sCD38 антигена несколько снижалось, но оставалось в 2 раза выше, чем у здоровых лиц. Процент CD38-положительных клеток у больных, прошедших курс лечения, наоборот, еще более возрастал в сравнении с нормой. При хроническом гепатите В уровень sCD38 антигена был вдвое выше, чем у здоровых лиц, однако ниже, чем у нелеченых больных с острой формой заболевания. Он соответствовал содержанию молекулы sCD38 в крови больных острым гепатитом В при выписке. Уровень мононуклеарных клеток крови, экспрессирующих CD38 антиген, был повышен, как и у больных острым гепатитом В. Таким образом, при гепатите В отсутствует параллелизм в изменениях уровня экспрессии мембранной и растворимой форм CD38. Увеличение количества CD38-положительных клеток у реконвалесцентов не сопровождается повышением уровня растворимой формы антигена. Высокое содержание sCD38 антигена в разгар гепатита В отражает, таким образом, высокий уровень цитотоксических реакций при остром гепатите В. Вероятно, повышенный уровень sCD38 антигена формируется за счет его схода с мембраны CD8+CD38+-клеток. У больных острой и хронической формой гепатита С содержание в сыворотке крови CD38 антигена достоверно не менялось. Однако, как при остром, так и хроническом гепатите С наблюдалось повышение количества CD38-положительных клеток, такое же, как при гепатите В. Уровень растворимого CD38 антигена при этой инфекции и количество активированных клеток крови не являются, таким образом, взаимосвязанными показателями и при этой вирусной инфекции. На примере вирусных гепатитов можно заключить, что активация лимфоцитов не всегда сопровождается обязательным сходом с мембраны активационных антигенов. Полученные данные свидетельствуют о нарушениях в содержании sCD38 антигена в крови больных вирусными гепатитами. Можно предполагать, что sCD38 антиген принимает участие в реализации механизмов супрессии в ответ на активацию аутоиммунных процессов, наблюдаемых при таких заболеваниях, как гепатит В. Подобное предположение подтверждают полученные нами ранее данные об увеличении уровня сывороточного sCD38 у больных ревматоидным артритом и системной красной волчанкой (Птицына и др., 1999б). Вирусная инфекция может вызывать повышение уровня одних активационных антигенов, не затрагивать другие и приводить к падению уровня третьих активационных антигенов. Примером могут служить результаты, полученные Шломиной с соавт. (см. настоящий сборник) при оценке уровня нескольких активационных антигенов в сыворотке крови больных гриппом. Так, если уровень растворимого CD38 антигена статистически достоверно не менялся, а содержание sCD95 антигена повышалось, то уровень растворимого гетеродимерного комплекса «бе213 та-2-микроглобулин-антигены HLA I класса» падал в среднем в два раза, отражая уже не активацию, а скорее подавление активационных процессов у больных гриппом. Повышенный уровень sCD95 антигена, опосредующего апоптоз, также говорит об угнетении клеточного звена иммунного ответа у больных гриппом. CD95 антиген играет важную роль в процессах клеточного и тканевого развития. Установлено, что уровень его растворимой сывороточной формы повышается при некоторых аутоиммунных заболеваниях, лимфолейкозах (Новиков, 1999). Группа японских исследователей оценила уровень sCD95 (АРО-1/FAS) антигена в крови HBs- и анти-HCV положительных больных циррозом печени и гепатоклеточной карциномой. В обеих группах было выявлено повышенное содержание sCD95 антигена. Регистрировался очень широкий разброс данных. Высокие концентрации sCD95 антигена чаще всего обнаруживались у больных карциномой. Было проведено сравнение данного теста с определением альфа-фетопротеина в крови больных. Полученные результаты позволили авторам предложить не менее эффективный, чем определение альфа-фетопротеина, тест на содержание sCD95 в качестве показателя первичного рака печени (Jodo et al., 1998). Приведенных выше данных явно недостаточно для оценки вклада вирусной инфекции в повышение концентрации sCD95 антигена у больных. В связи с этим, мы исследовали уровень данного антигена у больных вирусными гепатитами В и С. Статистически достоверных различий в содержании sCD95 антигена у здоровых доноров, больных острым и хроническим гепатитом В и С выявлено не было. Тем не менее, был выявлен широкий разброс в содержании sCD95 антигена, особенно у больных острым гепатитом В и хроническим гепатитом В. Количество сывороток с повышенным содержанием sCD95 антигена у больных данных групп было соответственно, на 64 % и 75 % больше, чем у здоровых доноров. Более высокие уровни sCD95 антигена наблюдались у больных хроническим гепатитом, в крови которых обнаруживались высокие титры HBs антигена и присутствовал маркер репликации вируса — HВe антиген. Вероятно, больные с высоким содержанием sCD95 антигена подвержены более высокому риску хронизации (Ptitsyna et al., 1999b). При хроническом гепатите С наблюдаются колебания уровня sCD95 антигена в зависимости от стадии заболевания. Латентная фаза заболевания характеризуется снижением растворимого CD95 антигена в сыворотке крови больных. В фазу реактивации уровень этого белка повышается. Противоречивые данные были получены для s-формы CD95 антигена при ВИЧ-инфекции. Если в первых исследованиях уровня sCD95 не было выявлено изменений в его содержании (Knipping, 1995), то в более поздних работах был обнаружен повышенный уровень sCD95 в сыворотоке ВИЧ-инфицированных лиц. Наряду с этим, J.D. Jiang et al. (1997) показали, что экспрессия мембранного CD95 антигена повышена у ВИЧ-инфицированных лиц на CD8-положительных клетах, в то время как повышенная экспрессия мембранного CD95 антигена на CD4+ Тклетках регистрировалась только у больных с очень низким уровнем CD4положительных клеток. Уровень sCD95 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц не коррелировал с относительным содержанием CD95-положительных мононуклеарных клеток, но обнаруживал положительную корреляцию с относительным содержанием CD8-положительных клеток, особенно с содержанием CD8+CD38+клеток. Не обнаруживалась также корреляция между sCD95 и sCD8 антигенами, хотя оба показателя повышались при ВИЧ-инфекции. В наших исследованиях уровня sCD95 антигена также было выявлено увеличение его содержания в сыво214 ротке крови ВИЧ-инфицированных лиц. Регистрировался широкий разброс данных. HBs-положительные ВИЧ-инфицированные лица имели еще более высокое содержание sCD95 антигена (Ptitsyna et al., 1999b). У большинства ВИЧ-инфицированных лиц обнаружено, кроме того, повышенное содержание sCD30 антигена, коррелирующее с содержанием в плазме крови РНК ВИЧ-1. Показано, что источником растворимой формы CD30 антигена являются CD8+CD30+-клетки, количество которых возрастает у ВИЧ-инфицированных лиц (Manetti, 1994). Высокие уровни sCD30 антигена в большинстве случаев регистрировались на самых ранних стадиях развития ВИЧ-инфекции и несли не зависимую от других показателей информацию о дальнейшем ходе инфекции, являясь неблагоприятным показателем прогноза (Rizzardi, 1996). По данным зарубежных исследователей, у больных хроническим активным гепатитом С выявлен высокий уровень растворимых антигенов HLA I класса. Прогрессирование заболевания с переходом в цирроз печени или гепатоклеточную карциному приводило к снижению его уровня (Hagihara, 1997). Аналогичные результаты получены нашей исследовательской группой в отношении уровня растворимых антигенов главного комплекса гистосовместимости I класса, ассоциированных с бета-2-микроглобулином. Как при хроническом, так и при остром гепатите С содержание растворимого гетеродимера «бета-2-микроглобулинантигены HLA I класса» составляло величину, которая была в 3–4 раза больше, чем у здоровых доноров. Подобные данные регистрировались при остром и хроническом гепатите В, а также при микст-инфицировании вирусами гепатитов В и С. Повышенные уровни растворимого гетеродимера наблюдались и при вирусном гепатите G. Однако у больных, коинфицированных вирусом гепатита G и вирусом гепатита С или вирусом гепатита В, содержание растворимого гетеродимера возрастало еще почти в два раза по сравнению с больными только гепатитом G. В данном случае наблюдался несомненный кумулятивный эффект, связанный, видимо, с вкладом каждого из вирусов в накопление растворимого гетеродимера «бета-2микроглобулин-антигены HLA I класса» в сыворотке крови. Нужно заметить, что подобный эффект отсутствует у инфицированных одновременно вирусами гепатитов В и С. Видимо, это связано с тем, что при двух последних гепатитах реализуется один и тот же механизм, приводящий к повышенному уровню растворимого гетеродимера. При инфицировании вирусом гепатита G, который является не гепатотропным, а лимфотропным вирусом, вероятно, механизм, отвечающий за повышение уровня сывороточного гетеродимера, является другим, отличным от первого. Например, можно предположить, что при вирусных гепатитах В и С источником растворимого гетеродимера являются гепатоциты. Вирус гепатита G, атакующий лимфоцитарные клетки, вызывает, по-видимому, повышенный шеддинг молекул гистосовместимости I класса с мембраны лимфоцитов. Более точную информацию могут дать только последующие исследования. Таким образом, растворимые формы поверхностных антигенов клеток иммунной системы человека наряду с мембранными антигенами принимают участие в формировании иммунных механизмов, направленных на защиту от чужеродных агентов, в том числе и от вирусов. Вклад в иммунные реакции многих из них пока далек от полного понимания. Отражением функциональной роли каждого из растворимых антигенов являются изменения в их содержании при заболеваниях различной этиологии. Использование такой «призмы» для изучения роли растворимых форм мембранных антигенов в иммунных реакциях является методическим 215 приемом, позволяющим максимально полно понять весь спектр и все разнообразие возможных механизмов, в которых принимают участие растворимые формы тех или иных поверхностных антигенов. Практическим приложением подобных исследований является сопутствующая разработка методов прогнозирования течения как инфекционных, так и соматических заболеваний. Несомненный прогресс в этом направлении достигнут в области онкогематологии (Новиков, 1996, 1999). Дальнейшее изучение роли растворимых форм в иммунных реакциях на инфекционные агенты позволит сделать новые шаги в совершенствовании инфекционной диагностики, а также в разработке индивидуально-дифференцированных методов прогнозирования инфекционной заболеваемости. ЛИТЕРАТУРА Новиков В.В. Растворимые формы дифференцировочных антигенов гемопоэтических клеток // Гематология и трансфузиология. 1996. № 6. С. 40–43. Новиков В.В. Растворимые дифференцировочные антигены // Иммунотерапия рака: Матер. Европ. школы онкологов. М., 1999. С.1–8. Птицына Ю.С. и др. Содержание растворимой формы СD38 антигена в сыворотке крови больных гепатитами В и C // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999(а). Т. 9, № 1. С. 75–75. Птицына Ю.С. и др. Различия в содержании сывороточной формы CD38 антигена при иммунных нарушениях разной этиологии // Медицинская иммунология. 1999(б). Т. 1, № 3– 4. С. 82–82. Птицына Ю.С. и др. Разработка и апробация иммуноферментной тест-системы для определения растворимой формы CD50 антигена // Фундаментальные проблемы медицинской биотехнологии. Н. Новгород, 2000а. С. 9–10. Птицына Ю.С. и др. Повышенное содержание растворимой формы CD50 антигена (ICAM-3) в сыворотке крови больных вирусным гепатитом G // Аллергология и иммунология. 2000б. Т. 1, № 2. С. 107–108. Becker N. et al. Epidemiologic investigation of serum levels of the soluble forms of CD25, CD54 and CD58, and T cell responsiveness after stimulation via the CD2-dependent pathway in a random sample of the general population // Immunobiology. 1996. V.195. P. 47–60. Capobiachi M.R. Induction of lymphomonocyte activation by HIV-1 glycoprotein gp120. Possible role in AIDS pathogenesis // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. 1996. V.10. P. 83–91. Fattovich G. et al. Serum levels of soluble CD30 in chronic hepatitis B virus infection // Clin. Exp. Immunol. 1996. V. 103. P. 105–110. Hagihara M. et al. Serum concentration of soluble HLA-class I and CD8 forms in patients with viral hepatic disorders // J. Gastroenterol. 1997. V. 32. P. 338–343. Heaney M. L. et al. Soluble cytokine receptors // Blood. 1996. V. 87. P. 847–857. Henkei R. et al. Indicators of T-cell activation: correlation between quantitative CD38 expression and soluble CD8 levels in asymptomatic HIV+ individuals and healthy controls // Cytometry. 1998. V. 90. P. 238–246. Jiang J.D. et al. Concentrations of soluble CD95 and CD8 antigens in the plasma and levels of CD8+CD38+, and CD4+CD95+ T cells markers for HIV-1 infection and clinical status // J. Clin. Immunol. 1997. V. 17. P. 185–192. Jodo S. et al. Elevated serum levels of soluble Fas/APO-1(CD95) in patients with hepatocellular carcinoma // Clin. Exp. Immunol. 1998. V. 112. P. 166–171. 216 Kaplanski G. et al. Increased levels of soluble adhesion molecules in the serum of patients with hepatitis C. Correlation with cytokine concentrations and liver inflammation and fibrosis // Dig. Dis. 1997. V. 42. P. 2277–2284. Knipping E. et al. Identification of soluble APO-1 in supernatants of human B- and T-cell lines and increased serum levels in B- and T-leukеmias // Blood. 1995. V. 86. P. 1562–1569. Knolle P. A. et al. Circulating ICAM-1 (sCD54) and LFA-3 (sCD58) in chronic hepatitis B. A longitudinal study in patients treated with interferon-alpha // J. Gastroenterol. 1997. V. 35. P. 459–467. Maekawa H. et al. Serum soluble CD8 and soluble interleukin-2 receptor levels during interferon therapy in cronic hepatitis C // Rinsho Byori. 1997. V. 45. P. 1003–1007. Manetti R. et al. CD30 expression by CD8+ T cells producing type 2 helper cytokines. Evidence for large number of CD8+CD30+ T cells in human immunodeficiency virus infection // J. Exp. Med. 1994. V. 180. P. 2407–2411. Onji M. et al. Serum levels of soluble CD4 and CD8 in patients with chronic viral hepatitis // Hepatogastroenterology. 1994. V. 41. P. 377–379. Plaeger S. et al. The prognostic significance in HIV infection of immune activation represented by cell surface antigen and plasma activation marker changes // Clin. Immunol. 1999. V. 90. P. 238–246. Ptitsyna Yu. S. et al. Increased level of soluble CD38 antigen in sera of HIV-infected persons // Russian Journal of HIV/AIDS and Related Problems. 1999a. V. 3, № 1. P. 166–167. Ptitsyna Yu. S. et al. A soluble form of Fas/Apo-1 (CD95) antigen in the serum of viral hepatitis patients // International Journal on Immunorehabilitation. 1999b. № 14. С. 110–111. Rizzardi G.P. et al. Plasma levels of soluble CD30, tumour necrosis factor and TNF receptor during primary HIV-1 infection: correlation with HIV RNA and clinical outcome // AIDS. 1996. V. 10. P. 45–50. Sabin C.A. et al. Relation between soluble CD30 levels measured soon after HIV seroconversion and disease progression in men with hemophilia // J. Acqir. Immune Defic. Syndr. Hum. Retroviral. 1997. V. 16. P. 279–283. Schulz O. et al. Der pI, a major allergen of the house dust mite, proteolytically cleaves the low-affinity receptor for human IgE (CD23) // Eur. J. Immunol. 1995. V. 25. P. 3191–3194. 217
