Молекулярная физиология иммунной системы
реклама
ФГБУ ФГБУ «ГНЦ «ГНЦ ИНСТИТУТ ИНСТИТУТ ИММУНОЛОГИИ ИММУНОЛОГИИ ФМБА ФМБА РОССИИ» РОССИИ» Молекулярная физиология иммунной системы и точки ее прикладного приложения Р.М. Хаитов Иммунитет Элиминация живых тел и веществ, несущих признаки генетической чужеродности (антигены) Экзогенные антигены Микроорганизмы: бактерии, грибы, простейшие, вирусы Эндогенные антигены Клетки, модифицированные вирусами, ксенобиотиками, старением, опухолевые клетки и др. 1 Распознавание чужеродного антигена 2 Элиминация антигена из организма 3 Запоминание контакта организма с антигеном Органы и ткани иммунной системы Центральные Центральные органы органы иммунной иммунной системы системы КОСТНЫЙ МОЗГ (В,М,Г) ТТ Т ппррее Т ТТ ВВ ТТ ВВ ТТ ВВ ТТ ВВ ТИМУС (Т) ВВ Селезенка Лимфати- Лимфоид- Лимфоидческие ная ткань ная ткань, узлы слизистых ассоциированная с кожей Периферические Периферические органы органы иммунной иммунной системы системы Дифференцировка лимфоцитов Кроветворная стволовая клетка Миелоидные Миелоидные клетки клетки Лимфоидные Лимфоидные клетки клетки Эритроидные Эритроидные клетки клетки Общий лимфоидный предшественник Про-В NK-клетка Про-Т Формирование Формирование рецепторов рецепторов В1 Пре-Т ТCR-γδ + Пре-В ТCR- αδ + mIgM+ mIgD+ B-клетка CD4+ Т-хелпер Незрелый Незрелый тимоцит тимоцит Селекция, Селекция, дифференцировка дифференцировка CD8+ Т-киллер Структура рецепторов для распознавания антигена на В-(BCR) и T-(TCR) лимфоцитах BCR TCR-CD3 mIgM H VH H Сμ1 L VL СL L Сμ2 СD79 β α Сμ3 Сμ4 СD79 α β γ ε Vα Vβ Сα Сβ ε δ ζ Распознавание комплекса антигенного пептида с молекулами МНС I и II класса рецептором и корецептором Т-лимфоцита ТCR Тh Тh α ТCR β α β CD4 CD8 пептид α АПК: АПК: Тк Тк пептид β макрофаги, МНС II макрофаги, дендритные клетки, дендритные клетки, В-лимфоциты В-лимфоциты α β МНС МНС I Кл-мишень Кл-мишень Распределение Т- и В-лимфоцитов в лимфатических узлах Афферентный Афферентный лимфатический лимфатический сосуд сосуд Капсула Капсула Субкапсулярный Субкапсулярный синус синус Зародышевый Зародышевый центр центр Первичный Первичный фолликул фолликул Вторичный Вторичный фолликул фолликул Паракортикальная Паракортикальная зона зона Мозговой слой Мозговой слой Кортикальная Кортикальная зона зона Эфферентный Эфферентный лимфатический лимфатический сосуд сосуд Вена Вена Артерия Артерия Пути рециркуляции лимфоцитов Селезенка Кровь Кровь Кровь Кровь Сердце Региональные Региональные ЛУ ЛУ ЛУ Кожа ЛУ Эндокринные железы ЛУ Урогенитальный тракт ЛУ Бронхолегочный аппарат Лимфа Лимфа Очаги воспаления Грудной Грудной проток проток Лимфа Лимфа Лимфа Лимфа Пейеровы бляшки Брыжеечные Брыжеечные лимфоузлы лимфоузлы Кишечник Пейеровы бляшки Т-лимфобласты Т-лимфобласты плазматические плазматические клетки клетки клетки клетки памяти памяти Миграция Т- и В-лимфоцитов в лимфатическом узле Капсула Капсула Мозговой Мозговой слой слой Корковый Корковый слой слой (В-зона) (В-зона) Эфферентный Эфферентный лимфатический лимфатический сосуд сосуд Паракортикальный Паракортикальный слой слой (Т-зона) (Т-зона) Фолликул Фолликул Посткапиллярная Посткапиллярная венула венула - В лимфоциты - Т лимфоциты Субкапсулярный Субкапсулярный синус синус Миграция Т- и В-лимфоцитов в селезенке Маргинальная Маргинальная зона зона Периартериолярная Периартериолярная муфта муфта (Т-зона) (Т-зона) Зародышевый Зародышевый центр центр Красная Красная пульпа пульпа Лимфоцитарная Лимфоцитарная корона корона (В-зона) (В-зона) Белая Белая пульпа пульпа Венозный Венозный синус синус - В лимфоциты - Т лимфоциты Активация эндотелиальных клеток Плоский Плоский эндотелий эндотелий Высокий Высокий (кубический) (кубический) эндотелий эндотелий CD62P CD34 CD34 CD62P CD62E CD62E ICAM-2 ICAM-2 CD58 CD58 Активация Активация CD58 CD58 CD62L CD62L ICAM-1 ICAM-1 ИЛ-1, ИЛ-1, ФНО ФНОα ИЛ-6, ИНФ ИНФγγ α,, ИЛ-6, MadCAM MadCAM GlyCAM GlyCAM ICAM-3 ICAM-3 ICAM-2 ICAM-2 Стадии миграции лейкоцитов (Л) из сосудистого русла в ткань 1. Качение (1-3 с) 2. Активация (до 20 с) Л CD62L CD62L CD34 CD34 Л Интегрины Интегрины Л LFA-1 LFA-1 CD15 CD15 CD62E/P Хемокины CD62E/P Хемокины 4. Миграция в ткань (10 мин) 3. Прочная адгезия (2-5 мин) ICAM-1 ICAM-1 Л VLA-4 VLA-4 VCAM-1 VCAM-1 Э Эн нд д оо тт ее л ли и аа л л ьь н ны ы ее кк л л ее тт кк и и Хемокины Хемокины Хоминг лимфоцитов Распознавание Миграция Лимфоцит Лимфоцит CD62L CD62L CD15 CD15 CD34 CD34 CD62E CD62E LFA-1 LFA-1 CD44 CD44 Просвет Просвет сосуда сосуда ICAM-1 ICAM-1 Гиалуронат Гиалуронат Высокий эндотелий Ткань Ткань лимфатического лимфатического узла узла Хемокины Хемокины Улавливание специфических клонов лимфоцитов в региональном лимфатическом узле (ЛУ) Афферентная Афферентная лимфа лимфа Эфферентная Эфферентная лимфа лимфа ЛУ Темные Темные кружки кружки -- лимфоциты, лимфоциты, способные способные распознать распознать антиген антиген Молекулярные Молекулярные основы основы межклеточной межклеточной адгезии адгезии Рецепторы Рецепторы CD72 CD72 CD40 CD40 CD58 CD58 CD86 CD86 CD80 CD80 Антиген-представляющая Антиген-представляющая клетка клетка HLA HLA I CD15 CD15 (ICAM-1) (ICAM-1) CD54 CD54 (VCAM-1) (VCAM-1) CD105 CD105 II Направление сигнала АП αβ CD8 γ ε CD2 CD2 CD5 CD5 CD154 CD154 (CD40L) (CD40L) CD28 CD28 CTLA-4 CTLA-4 (CD152) (CD152) TK lck αβ ε δ СD4 ζζ TK fyn TcR-CD3 TcR-CD3 T-лимфоцит T-лимфоцит TK lck CD49d/29 CD49d/29 (VLA-4) (VLA-4) CD11a/18 CD11a/18 CD62L β11 CD62L (LFA-1) (L-селектин) (L-селектин) (LFA-1) β22 Интегрины Интегрины Взаимодействие Т-хелперов и антиген-презентирующих клеток (АПК). Роль костимулирующих молекул. CD80/86 АПК МНС II CD28 ТCR АГ Костимуляция Рецепция Т-хелпер CD4 Костимуляция CD40 CD154 Стрелками отмечены основные направления сигнализации Последствия взаимодействия Т-клеток и АПК CD28 CD28 CD80/86 CD80/86 ТCR-CD3 CD4 Активация: Активация: экспрессия экспрессия ИЛ-2Р ИЛ-2Р и и секреция секреция ИЛ-2 ИЛ-2 CD154 CD154 ИЛ-2Р ИЛ-2Р МНС II АПК CD40 CD40 ИЛ-2 ИЛ-2 Взаимодействие Взаимодействие ИЛ-2 ИЛ-2 и и ИЛ-2Р ИЛ-2Р CD4+ Пролиферация Пролиферация Тh0 Тh Дифференцировка Дифференцировка Тh1 Тh2 Ткл памяти Развитие, взаимодействие и функции Т-хелперов типов Th1 и Th2 CD4+ Мф 22 --11 ЛЛ ИИ И ИН НФ Фγγ NK --44 Л Л И И ThО ТК ИНФ ИНФγγ (-) (-) ИЛ-2 ИЛ-2 Th1 Th2 ИЛ-4 ИЛ-4 ИЛ-10 ИЛ-10 (-) (-) ИЛ-2 ИЛ-3 ИНФ γ ФНО α ФНО β ГМ-КСФ ИЛ-4 ИЛ-5 ИЛ-6 ИЛ-9 ИЛ-10 ИЛ-13 ГМ-КСФ Обеспечение Обеспечение клеточных клеточных форм форм иммунного иммунного ответа ответа Обеспечение Обеспечение гуморальных гуморальных форм форм иммунного иммунного ответа ответа Мф Мф –– макрофаг; макрофаг; NK NK –– нормальный нормальный (естественный) (естественный) киллер; киллер; ИНФ ИНФ -- интерферон; интерферон; ТК ТК –– тучная тучная клетка; клетка; ФНО – фактор некроза опухолей; ГМ-КСФ – гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий ФНО – фактор некроза опухолей; ГМ-КСФ – гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор фактор Развитие гуморального (антительного) иммунного ответа АГ АГ Ig Ig МНС-II МНС-II TCR TCR В-лц Тh2 CD80/86 CD80/86 В-лц CD40 CD40 CD154 CD154 Тh2 0 ИЛ-4, ИЛ-4, 55,,110 В-лц В-лц В-лц – – В-лимфоцит В-лимфоцит CD154 CD154 CD28 CD28 Цитокины Цитокины Формирование и активация цитотоксических Т-лимфоцитов ЦТЛ CD80 CD28 Активация Активация Кл-мишень МНС-I АГ TCR CD8+ Т-лц CD8 Пролиферация Пролиферация ЦТЛ И ИЛ Л--2 2 CD25 CD25 ЦТЛ --22 Л Л И И CD80/86 CD28 Th1 ЦТЛ ЦТЛ –– цитотоксический цитотоксический Т-лимфоцит; Т-лимфоцит; Кл Кл -- клетка клетка ТCR АГ МНС II CD4 CD154 CD40 АПК Образование В- и Т-клеток памяти В-клетка (mIgM+) Плазматическая клетка В-клетки В-клетка памяти (mIgG+) антитела антитела Т-клетка (СD45RA+ СD44+ СD62L+) Эффекторная Т-клетка Т-клетки Т-клетка памяти (CD45R0+ CD44+ CD62L+) Конъюгированный антиген (белок-динитрофторбензол) NO NO22 = = CH CH22 NН NН Тир Тир Глу Глу Ала Ала Ала Ала Ала Ала = = = = = = = = = = = = Лиз Лиз Лиз Лиз NO NO22 Повторяющиеся Повторяющиеся единицы единицы Глу Глу Ала Ала Ала Ала Ала Ала Лиз Лиз Глу Глу Ала Ала Ала Ала Ала Ала Лиз Лиз Гал Гал ... КДО КДО .... липид липид А А ... АГФ АГФ Глю АГФ Глю Глю Глю АГФ NАГА NАГА Гал Гал Лиз Лиз Тир Тир Глю Глю Глю Глю NАГА NАГА Гал Гал Лиз Лиз Тир Тир ... ... NO NO22 NO NO22 ... ... CH CH22 NН NН22 + FF Гал Гал АГФ АГФ Глю АГФ Глю Глю Глю АГФ NАГА NАГА Гал Гал Лиз Лиз Гал Гал АГФ АГФ АГФ АГФ АГФ АГФ «Костяк» «Костяк» а О-специфическая О-специфическая боковая боковая цепь цепь Основная Основная структура структура б Строение синтетического антигена (Т, Г)-А-Л (а) и специфической части О-антигена бактерий кишечно-тифозной группы (б) Лиз Лиз -лизин, -лизин, Ала Ала -- аланин, аланин, Тир Тир -- тирозин, тирозин, Глу Глу -- глутаминовая глутаминовая кислота, кислота, КДО КДО -- кеодезоксиоктионовая кеодезоксиоктионовая кислота, кислота, АГФ АГФ -- альдогентозофосфат, альдогентозофосфат, Глю Глю -- глюкоза, глюкоза, Гал Гал -- галактоза, галактоза, NAГA NAГA -- N-ацетилглюкозамин N-ацетилглюкозамин Система HLA DPB1 LMP7 DPA1 DQB 1 TAP1 TAP2 DRB1 DQA1 * DRA DRB3 B C A LMP2 300 400 * 500 600 700 800 900 1000 2100 2200 3400 3500 Может Может отсутствовать, отсутствовать, либо либо заменен заменен на на DRB5, DRB5, DRB6 DRB6 Процессинг и экспрессия комплекса HLA/пептид Клеточная мембрана Пептиды Пептиды Аппарат Аппарат Гольджи Гольджи Протеазы Протеазы DM DM Пептиды Пептиды ТАР Протеазы Протеазы АГ Деградация (экзогенного (экзогенного происхождения) происхождения) АГ АГ (эндогенного (эндогенного LMP2, LMP2, LMP7 LMP7 происхождения) происхождения) CLIP Тирозин -калретикулиновый Тирозин-калретикулиновый комплекс комплекс Класс I β2 m Рециркуляция Рециркуляция АВ АВ Инвариантная Инвариантная цепь цепь класс класс II II … - СН2 - СН - СН2 - СН - СН2 - СНС=O N С=O NН (СН2)2 NН O2N NO2 NO2 СOOH ... Количество ТНФ-специфических ТНФ-специфических Количество АОК на на селезенку селезенку АОК Конъюгат гаптен-полиэлектролит как сильный специфический иммуноген 80 80 75 75 х103 х103 80 Первичный иммунный ответ 75 70 70 70 15 15 15 10 10 10 55 5 Контроль Контроль Вторичный иммунный ответ Контроль Контроль - IgM AOK к ТНФ - IgG AOK к ТНФ Синтетические полиэлектролиты иммуномодуляторы (-CH2-CH-)n (-СH2-CH-)n COOH Полиакриловая кислота (ПАК) (-СН2-CH-)n Поли-4-винилпиридин (ПВП) Поли-5-метил-2-винилпиридин -CH2 CH2 + - CH2 CH2 X C2H5 (-CH2-CH-)n + СН3 + Х- С2Н5 Соль кватернизованного поли-4-винилпиридина X C2H5 n n-m + - CH2 CH2 X CH2C6H5 Кватернизованные соли поликонидина m азациклмент фер Система рецептор-циклаза канал ионный птор реце АТФ-аза Поиски системы клеточной мембраны, которая может участвовать в реакции на полиион Система ионного транспорта фосфолипаза ацетилко-А: лизолецити ацилтрансферн аза Система, регулирующая текучесть липидного матрикса В результате были: открыты механизмы иммуностимулирующего действия полиэлектролитов, состоящие в активации Т- и В-клеточной миграции, клеточной кооперации, компенсации функции Т-помощников, кластеризации мембранных белков, сопровождающейся повышением проницаемости клеточной мембраны для ионов Ca2++, Na++, K++ и активацией Ca2++- и (Na++, K++)-АТФаз. Модельные искусственные антигены Комплексы БСА с производными поли-4-винилпиридина + С2Н5 + Х- С16Н33 -CH2-CH- -CH2-CH+ Х- СН2 СООН Антиген Антиген 1 1 (полимер (полимер связан связан сс белком белком солевыми и гидрофобными солевыми и гидрофобными контактами) контактами) Антиген 2 (полимер (полимер связан связан сс белком белком ковалентно) ковалентно) Иммунный ответ ответ (АОК) (АОК) Иммунный -CH2-CH- -CH2-CH- 10000 10000 8000 8000 6000 6000 4000 4000 2000 2000 Альбумин Альбумин Антиген Антиген 11 Антиген Антиген 22 Т-независимость иммунного ответа на конъюгат АГ-ПЭ АОК АОК (х10 (х1033)) 140 140 120 120 100 100 80 80 БСА БСА-ПЭ БГГ БГГ-ПЭ 60 60 40 40 20 20 44 33 22 11 nu/+ nu/+ nu/nu nu/nu nu/+ nu/+ nu/nu nu/nu ... ... C H N O ... он ни ... (Т,Г)-A-Л полиа -3)) АОК на на селезенку селезенку (х10 (х10-3 АОК Фенотипическая коррекция иммунного ответа при иммунизации конъюгатом (Т,Г)-A-Л-полиэлектролит 120 100 80 60 40 20 CBA C57BL Конъюгированная противосальмонеллезная вакцина Полисахаридный антиген бактериального тела Антиген-полимерные конъюгаты Заражение абсолютно летальной дозой 14-30 дней Иммунизация Выживаемость % Белковый антиген жгутика 100 ПС-флагеллин-ПЭ ПС-ПЭ 80 60 40 ПС 20 0,01 0,1 1,0 10 100 Конъюгированная противогриппозная вакцина 14 дней Иммунизация 12 100 80 60 40 20 Физ. раствор AОК (x10-3) Заражение абсолютно летальной дозой Выживаемость, % Вирус гриппа Конъюгаты Нейраминидаза антиген - полимер Гемагглютинин 10 8 6 4 2 Физ. раствор Разработанный принцип создания конъюгированных иммуногенов был использован для повышения иммуногенности консервативных антигенов и эпитопов вирусов, отличающихся слабой иммуногенностью, в частности, типоспецифических белков и додекапептидного фрагмента легкой цепи гемагглютинина вируса гриппа. Конъюгированная антиген-полимерная гриппозная вакцина на основе консервативных типоспецифических белков вируса А (Н1N1) Нейраминидаза Гемагглютинин М-белок Конъюгаты антиген-полиэлектролит 14 дней Иммунизация 4000 3000 2000 1000 Выживаемость, % Заражение абсолютно летальной дозой вируса А (H3N2) М-специфический иммунный ответ (ELISA-титр) NP-белок 100 80 60 40 20 + .. . NH-GLY-LEU-PHE-GLY-ALA-ILE-ALA-GLY-PHE-ILE-GLU-GLY Относительный титр легочного вируса (A/Aichi) - lg EID50 Относительная J aбсорбция 450 нм ...... Сополимер полиакриловой полиакриловой кислоты кислоты Сополимер C O 6 12 11 10 9 8 5 4 7 6 3 5 4 3 2 2 1 1 I II I II I II I II Aнтителообразование против конъюгированного антигена, тестируемое твердофазным иммуноферментным методом с конъюгатом F/A-BSA ( ) и интактными вирусами A/Aichi ( ), A/Texas ( ), A/PR/8 ( ). I - иммунизация F/A пептидным coполимерным комплексом (2,5 γ F/A /мышь CBA) II - иммунизация F/A - BSA в физиологическом растворе (2,5 γ F/A /мышь CBA) Защита мышей от инфекционного заражения (A/Aichi) через 21 день после иммунизации. - неиммунизированные контрольные мыши - F/A-BSA (2,5 γ F/A/мышь) - F/A пептидный сополимерный комплекс (2,5 γ F/A/мышь) - F/A пептидный сополимерный комплекс (10 γ F/A/мышь) ПОЛИОКСИДОНИЙ Первый оригинальный препарат нового класса гетероцепных алифатических полиаминов Сополимер N-окиси 1,4-этиленпиперазина и (N-карбоксиэтил)-1,4этиленпиперазиний бромида _ Br N О N СН2 СН2 + N N СН2 СН2 CН2СООН ММ 60000 - 100000D n Механизмы действия полиоксидония на клетки иммунной системы человека Полиоксидоний Нейтрофилы Моноциты макрофаги Активные формы О2 NK-клетки Цитотоксичность Дендритные клетки Костимуляторные молекулы Киллинг внеклеточных микробов Экспрессия HLA-DR Презентация АГ Активация Th1-клеток ИЛ-12 Cинтез интерферонаα Антивирусная защита ГМ-КСФ Провоспалит. цитокины ФНО, ИЛ-6, ИЛ-1 Активные формы азота Лейкопоэз Антибактериальная защита Т- и В-клетки Киллинг внутриклеточных микробов Характеристика вакцины ГРИППОЛ Доза ГА (5+5+5) мкг ПО 500 мкг Снижение в 3 раза прививочной дозы ГА Высокая профилактическая эффективность А1 (Н1 N1) А2 (Н3 N2) В Носитель иммуномодулятор полиоксидоний Состав Антигены вируса гриппа Вакцина ГРИППОЛ - первый вакцинирующий препарат, сконструированный на принципиально новой основе, не имеет аналогов в мировой практике Свойства Высокая степень безопасности Формирование длительной иммунной памяти Снижение заболеваний верхних дыхательных путей ВИЧРЕПОЛ Химерный рекомбинантный белок rec(24-41) Poly-His р24 gр41 N Химическая структура ВИЧРЕПОЛа Иммуномодулятор ПОЛИОКСИДОНИЙ N CH22 … CH22 Br - + + N N CH22 CH22 CH22 O CO n NH rec (24-41) C N O H m Иммунный ответ, индуцируемый химерным рекомбинантным белком rec(24-41) и его конъюгатом с полиоксидонием Титр антител антител вв ИФА ИФА Титр Иммунизация Иммунизация rec(24-41) rec(24-41) и и его его конъюгатом конъюгатом сс полиоксидонием полиоксидонием (10 (10 мкг мкг антигена антигена на на мышь, мышь, вторичный вторичный ответ) ответ) 50000 50000 40000 40000 чистый антиген rec(24-41) 30000 30000 конъюгат rec(24-41)-ПО ВИЧРЕПОЛ ВИЧРЕПОЛ вызывает вызывает образование образование антител, антител, нейтрализующих нейтрализующих ВИЧ-1 ВИЧ-1 in in vitro vitro Иммунная сыворотка 1:50 Клеточная линия MT4 (300 000 кл/лунку) ВИЧ-1 IIIB 10 TCID50 Инкубация 20000 20000 Определение белка р24 ВИЧ-1 10000 10000 00 Антиген Антиген на на твердой твердой фазе фазе -- rec(24-41) rec(24-41) Индекс нейтрализации – 55% Пролиферация Пролиферация клеток клеток вв ответ ответ на на ВИЧРЕПОЛ ВИЧРЕПОЛ Спонтанная пролиферация РБТЛ на rec(24-41) Индекс пролиферации Селезенка 1000±50 (cpm/106 кл) 10000±300 (cpm/106 кл) 10.0 Лимф. узлы 600±100 (cpm/106 кл) 5000±100 (cpm/106 кл) 8.3 Процесс дифференцировки Th1 и Th2-клеток ДК – дендритные клетки MФ – макрофаги MН – мононуклеары ТК – тучные клетки ИНФγ ФНОα ИЛ-2 2 12 И Л--1 ИЛ Th1 Th1 CD80/86 CD28 MHC-II MHC-II TCR TCR - стимуляция стимуляция ДК ДК МФ МФ МН МН 44 IILL-- ТК ИЛ-10 ИЛ-10 Антигенная Антигенная ИНФγ ИНФγ Th0 Th0 ИЛ-4 ИЛ-5 ИЛ-13 ИЛ-10 - Th2 Th2 Стимуляция Th1-клеток с помощью ПОЛИОКСИДОНИЯ (ПО) Презентация антигена (аллергена) ИЛ ИЛ-1 -12 2 Th0 Th0 CD80/86 ПО MHC-II MHC-II ДК ДК МФ МФ МН МН ДК – дендритные клетки MФ – макрофаги MН – мононуклеары CD28 ИНФγ ИНФγ Th1 ФНОα ФНОα TCR TCR ИЛ-2 ИЛ-2 Распознавание комплекса MHC-II-пептид и костимуляция Количество CD4+IFNγ+ (Th1)-клеток у больных туберкулезом до и после введения ПОЛИОКСИДОНИЯ % % 25 25 ** ** 20 20 15 15 10 10 * 5 5 Доноры Доноры Больные Больные Больные, Больные, леченные леченные ПО ПО (через (через 10 10 дней) дней) Больные, Больные, леченные леченные ПО ПО (через (через 11 мес.) мес.) * р<0,05 по сравнению с донорами ** р<0,05 по сравнению с больными (лечение без ПО) Синтез интерферона-γ лимфоцитами (Th1) больных туберкулезом до и после введения ПОЛИОКСИДОНИЯ пкг/мл пкг/мл 1800 1800 1600 1600 * * 1400 1400 1200 1200 1000 1000 * р<0,05 800 800 600 600 400 400 200 200 До До введения введения ПО ПО Через Через 10 10 дней дней после после введения введения ПО ПО Через Через 11 мес. мес. После После введения введения ПО ПО Основные этапы получения аллерготропина -- выделение выделение нативной нативной формы формы аллергена аллергена -- создание создание его его аллергоидной аллергоидной формы формы сс помощью помощью химической химической модификации модификации -- конъюгация конъюгация аллергоида аллергоида сс иммуномодулятором иммуномодулятором ПОЛИОКСИДОНИЕМ ПОЛИОКСИДОНИЕМ Аллергоид Полиоксидоний _ Br N О N СН2 СН2 + N CН2 С N СН2 СН2 О NН n аллергоид Уровни специфических IgG-«блок»-антител у мышей CBAxC57Bl(F1), сенсибилизированных нативными аллергенами пыльцы растений, после гипосенсибилизации аллерготропинами OD OD 2,5 2,5 Ал Ал Алд Алд АТ АТ Гипосенсибилизация ТИМПОЛ Сенсибилизация Ал Сенсибилизация Ал 0,5 0,5 Сенсибилизация Ал 1 1 Гипосенсибилизация 1,5 1,5 БЕРПОЛ ПОЛПОЛ 2 2 Гипосенсибилизация Условные обозначения препаратов из пыльцы: Ал Ал Алд Алд АТ АТ полыни березы тимофеевки Ал - аллерген Алд - аллергоид АТ - аллерготропин Ал Ал Алд Алд АТ АТ р<0,01 р<0,01 14 14 Ал Ал 10 10 2 2 Ал тимофеевки АТ 6 6 4 4 Условные обозначения препаратов из пыльцы: березы полыни АТ На На пике пике После После сенсигипосенсенси- гипосенбилибили- сибилисибилизации зации зации зации На На пике пике После После сенсисенси- гипосенгипосенбилибили- сибилисибилизации зации зации зации АТ ПОЛПОЛ 8 8 Ал Ал ТИМПОЛ 12 12 Ал БЕРПОЛ Количество элюата элюата Эванса, Эванса, мкг мкг Количество Уровни гомоцитотропных (специфических IgЕ)-антител у мышей до и после гипосенсибилизации аллергеном, аллергоидом и аллерготропином (реакция пассивной кожной анафилаксии по Ovary) На На пике пике После После сенсисенси- гипосенгипосенбилибили- сибилисибилизации зации зации зации Ал - аллерген АТ - аллерготропин 25 25 Условные обозначения препаратов из пыльцы: березы 20 20 10 10 ТИМПОЛ 15 15 ПОЛПОЛ полыни БЕРПОЛ Уровни высвобождения высвобождения гистамина гистамина Уровни из базофилов, базофилов, % % из Результаты сравнительного анализа активности пыльцевых аллергенов, аллергоидов и аллерготропинов в реакции аллергенспецифического высвобождения гистамина из базофилов периферической крови больных поллинозом тимофеевки 5 5 Аллергены Аллергены Аллергоиды Аллергоиды Аллерготропины Аллерготропины р<0,01 р<0,01 25 25 До АСИТ После АСИТ Условные обозначения препаратов из пыльцы: тимофеевки 20 20 березы полыни 5 5 Реакция Реакция на на Ал Ал АСИТ АСИТ Ал Ал ПОЛПОЛ 10 10 БЕРПОЛ 15 15 ТИМПОЛ Интенсивность аллергической аллергической реакции реакции Интенсивность кожи кк специфическому специфическому аллергену, аллергену, мм мм кожи Кожная чувствительность пациентов к специфическому аллергену до и после АСИТ АСИТ АСИТ АТ АТ р<0,001 р<0,001 140 140 18 18 15 15 Тимпол Тимпол Placebo Placebo Количество Количество пыльцевых пыльцевых зерен зерен злаковых злаковых трав трав вв 11 м. куб. м. куб. 120 120 100 100 12 12 99 66 33 00 80 80 60 60 40 40 20 20 00 Количество пыльцевых пыльцевых зерен зерен вв 1 1м м33 Количество 21 21 15 .0 19 5. .0 23 5. .0 27 5. .0 31 5. .0 04 5. .0 08 6. .0 12 6. .0 16 6. .0 20 6. .0 24 6. .0 28 6. .0 02 6. .0 06 7. .0 10 7. .0 14 7. .0 18 7. .0 22 7. .0 26 7. .0 30 7. .0 7. Интенсивность клинических клинических симптомов, симптомов, Интенсивность баллы баллы Графики интенсивности клинических симптомов поллиноза и количества пыльцевых зерен злаковых трав в 1 м33 после 1 курса АСИТ ТИМПОЛОМ и Placebo
