Афлятунова С. Ф. (г. Уфа)

ОСОБЕННОСТИ
ИММУНОПАТОГЕНЕЗА
ХРОНИЧЕСКОЙ
ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ
ЛЕГКИХ
АФЛЯТУНОВА СВЕТЛАНА ФАНИЛЬЕВНА
Научные руководители:
Доктор медицинских наук, профессор Ганцева Х.Х.
Доктор медицинских наук Азнабаева Л.Ф.
ХОБЛ- заболевание, которое можно
предотвратить и лечить,
характеризующееся существенными
внелегочными проявлениями, способными
дополнительно отягощать течение болезни у
отдельных пациентов. Ее легочная
составляющая характеризуется
ограничением скорости воздушного
потока, которая обратимо не полностью.
Ограничение скорости воздушного потока
обычно прогрессирует и связано с
патологическим воспалительным ответом
легких на действие ингалируемых
патогенных частиц или газов.
Смертность от 6 ведущих причин
смерти в США с 1970 по 2002 г
Приводится из: Jemal A, Ward E, Hao Y, Thun M. Trends in the leading causes
of death in the United States, 1970–2002. JAMA 2005;294(10):1255-9
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:
• Определение особенностей иммунопатогенеза
хронической обструктивной болезни легких,
как несостоятельности иммунного реагирования
для оптимизации диагностики и подходов к
комплексной терапии.
ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:
1. Исследовать показатели врожденного и
адаптивного иммунитета у больных ХОБЛ по
данным ОАК и иммунограммы, цитокиновую
регуляцию (ИЛ-6, МСР-1, ИЛ-4, ИФ-γ)
2. Оценить активационный потенциал Т- и Влимфоцитов в реакции бласттрансформации,
клеточный цикл и маркеры ранней
(CD4+CD25+) и поздней активации
(CD4+HLADR+)
Материалы исследования:
Под наблюдением находилось 90 больных ХОБЛ
средней степени тяжести и 24 –практически
здоровых лиц (возраст 47±3,5 лет).
1 группа – 90 человек с ХОБЛ средней
степени тяжести (возраст 52,8±4,03 лет)
• 2 группа - 24 –практически здоровых лиц
(возраст 47±3,5 лет).
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Для обследования больных использовались
следующие методы исследования:
I. Общеклинические (анамнез, общий
осмотр, пальпация, перкуссия, аускультация)
II. Инструментальные (Спирометрическое
исследование, Рентгенографическое исследование ОГК,
Компьютерная томография ОГК, Фибробронхоскопия,
ЭКГ, ЭХО-КГ)
III. Лабораторные (иммунологические)
Субпопуляционный
состав лимфоцитов
Функциональная активность
лимфоцитов оценивали в
РБТЛ
Цитокиновый
профиль
(СD3+, CD4+,
CD8+,CD16+,
CD19+,CD23+,
CD25+,CD95+HLADR+) МКАТ (Beckman
Coulter) методом
проточной
цитофлюориметрии
Митогены:
фитогемагглютинин (ФГА)–
для стимуляции
преимущественно
СD8+лимфоцитов конкавалин
А (ConA) CD4+лимфоцитов
митоген лаконоса (PWM) – Тзависимых В-лимфоцитов.
уровень ИЛ-6 и МСР-1
в сыворотке крови, ИЛ4 и ИФ-γ-продукцию
клеток крови
(спонтанную и
индуцированную)
Критерии включения:
Критерии исключения:
-мужской пол
-возраст 40-60 лет
-стаж курения 20±5 лет
-наличие хронических симптомов
(кашель, продукция мокроты,
одышка при физической нагрузке),
-функциональные признаки ХОБЛ
средней степени тяжести (по
данным спирометрии) –
постбронходилатационное
снижение показателя
ОФВ1/ФЖЕЛ<0,7,
50%≤ОФВ1<80%
-обратимость бронхиальной
обструкции после ингаляции β2агониста менее 12%
-женский пол
-возраст<40 и >60 лет
-профессиональные заболевания
-наличие в анамнезе туберкулеза
-наличие в анамнезе типичных приступов
удушья и/или атопии
-другие заболевания, сопровождающиеся
одышкой и кашлем (бронхоэктатическая
болезнь, заболевания сердца с
левожелудочковой недостаточностью)
-дыхательная недостаточность III стадии
-сопутствующие хронические заболевания в
фазе обострения
-больные с пневмонией
-леченные в течение последнего года
иммуномодулирующими препаратами.
Лейкограмма у больных ХОБЛ
10^9/л
9
***
8
7
6
***
5
группа контроля
4
ХОБЛ
***
3
2
***
1
0
Лейкоциты
Лимфоциты
Нейтрофилы
п/я
Нейтрофилы
с/я
Моноциты
(различия в группах статистически значимы относительно группы
контроля: *** - р<0,001).
Функциональная активность
нейтрофилов у больных ХОБЛ
%
%
35
0,8
50
30
0,7
40
25
60
0,6
0,5
20
30
**
0,4
15
0,3
20
10
0,2
10
5
0
Фагоцитар.
индекс
Фагоцитар.
число
0,1
0
0
НСТ-спонт
НСТ-инд
ИАН-спонт
ИАН-инд
(различия в группах статистически значимы относительно группы контроля:
* - р<0,05; ** - р<0,01).
группа контроля
ХОБЛ
Цитокиновая регуляция иммунного
ответа у больных ХОБЛ
*
пг/мл
400
пг/мл
*
10
300
200
5
100
0
группа контроля
МСР-1
ХОБЛ
0
группа контроля
ХОБЛ
ИЛ-6
(различия в группах статистически значимы относительно группы контроля: * р<0,05)
Продукция ИФ-γ и ИЛ-4 клетками крови больных ХОБЛ
(спонтанная и стимулированная ФГА)
ИФ-γ спонт
1,6
1,2
0,8
0,4
ИЛ-4 стим
0
ИФ-γ стим *
группа контроля
ХОБЛ
ИЛ-4 спонт *
(различия в группах статистически значимы относительно группы контроля:*- р<0,05)
В-клеточное звено и циркулирующие
иммунные комплексы у больных
ХОБЛ
14
у.е.
270
12
240
10
8
210
***
180
150
6
120
***
4
**
2
60
30
0
CD19+%
CD19+
CD23+%
***
90
IgG г/л
группа контроля
IgM г/л
ХОБЛ
***
***
0
Высокомолек-е
Среднемолек-е
группа контроля
Низкомолек-е
ХОБЛ
(различия в группах статистически значимы относительно группы контроля:
* - р<0,05; ** - р<0,01; ***-р<0,001).
Иммуноглобулины классов А и E у
больных ХОБЛ
г/л
г/л
300
*
5
4,5
*
270
240
4
210
3,5
3
2,5
180
2
120
1,5
90
1
0,5
60
0
30
150
IgA
0
IgE
группа контроля
ХОБЛ
группа контроля
ХОБЛ
(различия в группах статистически значимы относительно группы контроля:
* - р<0,05).
Т-клеточное звено у больных
ХОБЛ
10^9/л
**
2,5
2
1,5
**
**
1
0,5
0
CD3+ CD4+
CD3+CD8+
группа контроля
CD4+/CD8+
ХОБЛ
(различия в группах статистически значимы относительно группы
контроля: * - р<0,05; ** - р<0,01; ***-р<0,001).
Субпопуляции лимфоцитов у
больных ХОБЛ
%
80
*
70
60
50
40
30
**
20
***
10
***
0
CD3+ CD16(Т-лф)
CD19+
(В-лф)
CD19+23+
(актВ-лф)
группа контроля
CD3- CD16+
(NK)
CD3+ CD16+
(TNK)
ХОБЛ
(различия в группах статистически значимы относительно группы
контроля: * - р<0,05; ** - р<0,01; ***-р<0,001).
Функциональные показатели
Т-лимфоцитов и клеточный цикл у
больных ХОБЛ
10^9/л
100
1,4
90
1,2
**
1
80
70
60
0,8
50
0,6
0,4
40
**
30
20
0,2
10
0
СD4+CD25+
CD4+HLADR+
группа контроля
CD4+CD95+
ХОБЛ
CD45 RA+ CD4+ /
CD45RO+ CD4+
0
М1-пик
G0-фаза
G1-фаза
группа контроля
актив ац. коэф-т
ХОБЛ
(различия в группах статистически значимы относительно группы контроля:
* - р<0,05; ** - р<0,01; ***-р<0,001).
Способность лимфоцитов крови к
пролиферации в РБТЛ у больных ХОБЛ
3,5
3
2,5
**
2
группа контроля
1,5
ХОБЛ
1
0,5
0
Ответ на ФГА
(СD8+ Тлимфоциты)
ответ на PWM
ответ на ConA
(различия в группах статистически значимы относительно группы
контроля: ** - р<0,01).
Показатели состояния иммунной
системы у больных ХОБЛ
NK
РБТЛ (PWM)
*
NКакт
3
РБТЛ (ФГА)
*
лейкоциты
2,5
G1-фаза
*
моноциты
2
*
*
*
СD4+CD25+
*
нейтрофилы
1,5
CD3+CD8+
ИЛ-6
1
0,5
CD3+CD4+
*
МСР-1
0
*
CD3+ CD16-
*
IgE
*
*
ФИ
НСТ-сп
IgA
ИАН-инд
ЦИК низком
*
CD19+
ЦИК среднем
*
CD19+CD23+
ЦИК высоком
IgG
IgM
*
Корреляционные взаимоотношения
факторов активации у больных ХОБЛ
0,61
CD3+CD8+
0,56
HLADR+
0,52
CD19+CD23+
0,69
0,90
0,81
0,64
0,62
CD3СD16+
(NK)
0,67
0,53
0,62
CD3+CD4+
CD19+
0,73
0,63
0,72
CD25+
Корреляционные взаимоотношения провоспалительного цитокина
МСР-1 у больных ХОБЛ
CD3+
NK+
Лейкоциты
0,66 0,44
0,67
CD3+CD8+ 0,59
CD3+CD4+
CD4+CD25+ 0,46
CD4+HLADR+ 0,46
CD4+CD95+ 0,49
0,64
CD4+RO+
0,59
CD4+RA+
TNK+
0,7
0,51
Моноциты%
0,63
CD19+CD23+
0,37
0,72
0,57
0,55
МСР-1
CD19+
0,49
0,81
0,62
IgM
IgE
ЦИК среднемол
ЦИК низкомол
IgM ЦМВ
IgM ВПГ
Интегральные показатели иммунного
реагирования у больных ХОБЛ
Больные ХОБЛ
Фагоцит. звено Количественное
Т-звено
NK
В-звено
↑(↓)-р<0,05
ХОБЛ
↑
Функцинальное
↓
Количественное
Функцинальное
Количественное
↑
↓
↑↑
↓
Функцинальное
↓
↑↑(↓↓)- р<0,01
↓↓↓- р<0,001
=- не меняется
ВЫВОДЫ:
1. ХОБЛ сопровождается активацией врожденного иммунитета и
неадекватностью адаптивного иммунного ответа при гнойном воспалении
в виде активации Th1-пути, обусловленное цитокиновым реагированием
(превалирование продукции интерферона гамма).
2. Особенностью иммунного реагирования при ХОБЛ является увеличение
количественных показателей в сочетании с несостоятельностью
функциональных свойств клеток - метаболизма нейтрофилов,
пролиферации Т-лимфоцитов и продукции антител В-лимфоцитами
(комбинированная недостаточность).
• СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ