КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: info@novamed.co.il
КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ
ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОДНОЭТАПНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ
CAMPYLOBACTER SPP В ФЕКАЛИЯХ ЧЕЛОВЕКА.
Кат. № R-6032 (20 Определений)
Инструкция по применению
Kампилобактерный антиген, содержащийся в пробе, реагирует
со специфическими меченными моноклональными антителами,
НАЗНАЧЕНИЕ
КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ производства компании Novamed
Ltd., Израиль - иммунохроматографическая тест-система для
формируя комплекс антиген-антитело, который мигрирует по
качественного выявления антигенов Campylobacter spp. в
мембране, образуя красную цветную линию в тестовом окошке,
фекалиях
человека
с
целью
ранней
диагностики
что
оценивается
как
положительный
результат.
кампилобактериозa.
Непрореагировавший конъюгат мигрирует далее к контрольной
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
зоне, где захватывается поликлональными антимышинными
Кампилобактериоз (вибриоз) - острая инфекционная болезнь,
антителами, формируя зеленую линию в контрольной зоне
характеризующаяся
острым
началом,
лихорадкой,
тестового окошка. Kонтрольная линия появляется всегда.
интоксикацией, преимущественным поражением желудочноНаличие контрольной линии подтверждает корректность
кишечного тракта. Возбудитель кампилобактериоза относится к
результатов теста (правильный объем пробы, необходимый темп
семейству кишечных бактерий Enterobacteriaceae, роду
миграции, требуемое качество реагентов).
Campylobacter. Наиболее часто заболевания у человека вызывает
вид С. jejuni, включающий около 40 сероваров. Другие виды
КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
В состав набора входит:
возбудителя С. coli и т. д. чаще обнаруживаются у лиц с
20 тестовых устройств (кассет) КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ
выраженными иммунодефицитами. Основным источником для
упакованных в индивидуальные алюминиевые пакетики;
человека являются сельскохозяйственные животные, птицы,
20 одноразовых пластиковых пробирок-капельниц содержащих 1
синантропные и дикие грызуны. Больной человек, как источник
мл буферa для разведения пробы;
инфекции, имеет несравненно меньшее значение. Основной путь
1 инструкция к применению.
распространения инфекции - пищевой. Факторами передачи
чаще всего являются мясо и мясные продукты, птица, молоко,
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Набор КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ предназначен только для
вода. Заболевание встречается во всех возрастных группах, но
преимущественно у детей в возрасте до б лет. У взрослых
использования in vitro в целях лабораторной диагностики.
кампилобактериоз чаще наблюдается среди сельских жителей,
2. Не допускается использование набора и его компонентов после
лиц,профессионально связанных с животноводством и
истечения срока годности.
птицеводством, а также в качестве «диареи путешественников»
3. Не использовать тест из поврежденной упаковки.
регистрируется у туристов, посещающих развивающиеся страны.
4. При проведении исследования необходимо следовать правилам
Наиболее восприимчивы к кампилобактериозу лица с
работы
в
лаборатории,
в
частности,
использовать
иммунодефицитами. Кампилобактериоз регистрируется в
специализированную одежду, одноразовые перчатки, не
течение всего года, но сезонный подъем заболеваемости
принимать пищу и не курить на рабочем месте.
приходится на летние месяцы. Наблюдаются как спорадические,
5. Исследование проб фекалий регламентируется правилами
так и групповые случаи заболеваемости этой инфекцией.
работы с инфекционными агентами.
Поступление кампилобактеров в организм с пищей и водой при
6. После проведения исследования устройство должно быть
концентрации возбудителя 108 бактерий приводит к развитию
утилизировано в соответствующий контейнер для отходов.
заболевания.
Для
развития
заболевания
у
лиц
с
7. Необходимо провести тест не позднее 2 ч после вскрытия
иммунодефицитом инфицирующая доза может быть значительно
упаковки.
меньшей. В случае прорыва лимфатического барьера кишечника,
ХРАНЕНИЕ
что происходит на фоне иммунодефицита различного генеза,
КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ необходимо хранить при температуре
возникает бактериемия и генерализованная форма болезни.
2-30оС. Не замораживать! Не допускается использование набора
Решающим в установлении окончательного диагноза являются
и его компонентов после истечения срока годности. Срок
бактериологический и серологический методы исследования.
годности набора указан на упаковке. До использования тестовое
Диагноз
подтверждается
выделением
возбудителя
из
устройство
должно
находиться
в
неповрежденной
испражнений. Из серологических реакций применяют РНГА
индивидуальной упаковке.
(диагностический титр 1:160 и выше), ИФА и др. Исследуют
ОТБОР, ХРАНЕНИЕ И ПОДГОТОВКА ПРОБ.
парные сыворотки, взятые с интервалом 10-14 дней.
Фекалии собирают в чистый сухой контейнер без следов
ПРИНЦИП
консервантов или транспортных сред. Не рекомендуется
КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ производства компании Novamed
обрабатывать пробу растворами, содержащими формальдегид
Ltd., Израиль представляет собой помещенную в пластиковый
или его производные. Для проведения теста необходима проба в
футляр (кассету) полоску нитроцеллюлозной мембраны
с
количестве 1-2 г или 1-2 мл, в случае жидкого образца. До
фиксированными на ней в области добавления пробы
исследования пробу хранят в холодильнике при температуре
моноклональными
мышинными
антителами
к
+2+4 °С в течение 1-2 дней, если исследование в течение этого
кампилобактерному
антигену
конъюгированными
с
периода невозможно, пробу необходимо поместить в
окрашенными частичками латекса. В области тестового окошка
морозильную камеру при температуре -20 оС. Перед
также
зафиксированы
моноклональные
антитела
к
исследованием пробу размораживают и доводят до комнатной
кампилобактерному антигену. Поликлональные антимышинные
температуры. Остатки проб утилизируют в соответствии с
антитела зафиксированы в контрольной зоне полоски.
правилами, принятыми в данном учреждении.
ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА
Подготовка образца к тестированию (см. Рис.1):
Для каждого образца фекалий следует использовать отдельную
пробирку-капельницу с буфером для разведения. Открутить
крышку емкости пробоотборника с вмонтированным в нее
аппликатором. Аппликатор дважды погружают в фекальную
массу, при этом на кончике аппликатора должно остаться
приблизительно 150 мг образца. В случае жидкого стула,
забрать в качестве образца 150 мкл испражнений пипеткой и
перенести в пробирку-капельницу с буфером.
Рисунок 1
Забрать образец
Развести образец
в буфере
Отломить кончик
Образец фекалий
Процедура выполнения теста (см. Рис.2):
Перед началом тестирования следует довести тестовую кассету и
образец до комнатной температуры (15-30ºC). Не вскрывать
индивидуальную упаковку теста до начала исследования.
1. Непосредственно перед проведением исследования вскрыть
индивидуальную упаковку теста.
2. Маркировать
тестовую
кассету
инициалами
или
идентификационным номером пациента.
3. Суспендировать пробу энергичным встряхиванием пробиркикапельницы.
4. Отломить кончик крышки-капельницы и через открывшееся
отверстие внести 4 капли (100 мкл) тестируемой суспензии в
окошко для внесения пробы (S).
5. Результат анализа учитывают через 10 мин после загрузки
тестовой кассеты пробой.
Рисунок 2
4 капли суспензии образца в буфере
S
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Рисунок 3
NEGATIVE
C
T
C
T
C
T
POSITIVE
INVALID
Отрицательный результат: одна зеленая линия появляется в
контрольной зоне (С) тестового окошка кассеты;
Положительный результат: в дополнение к зеленой контрольной
линии появляется красная линия в тестовой зоне (Т) тестового
окошка кассеты;
Недействительный результат: отсутствие зеленой контрольной
линии (С) вне зависимости от наличия или отсутствия красной
линии в тестовой зоне (Т). Неправильный объем пробы,
несоблюдение процедуры тестирования или качество реагентов –
наиболее частые причины отсутствия контрольной линии.
Проанализируйте процедуру тестирования и повторите ее с
использованием новой тест-кассеты. Если проблема остается,
следует прекратить тестирование и связаться с
местным
дистрибьютором.
Замечания по интерпретации результатов
Интенсивность окраски красной линии в тестовой зоне кассеты
меняется в зависимости от концентрации антигенов в образце.
Однако ни количественное содержание антигенов, ни степень их
возрастания не могут быть установлены с помощью данного
качественного теста.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
1. КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ предусматривает
внутренний
контроль за правильностью проведения процедуры. Зеленая линия
появляющаяся в контрольной зоне (C) тестового окошка кассеты,
указывает на правильность проведения процедуры теста.
2. Результаты теста не учитывают в случае если неясный фон
мешает интерпретировать результаты.
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Устройство
указывает
исключительно
на
наличие
кампилобактера
в
образцах,
обеспечивая
качественную детекцию и может использоваться только для
исследования фекальных образцов.
2. Избыточное количество образца может повлечь за собой
получение некорректных результатов (появление коричневой
полосы). Необходимо повторно развести образец буферным
раствором и повторить тест.
3. Не использовать для исследования образцы, содерщащие
формальдегид и его производные.
4. Для постановки корректного диагноза необходимо обязательно
сопоставление результатов теста с прочей клинической
информацией.
Тест
обеспечивает
предварительную
диагностику и должен использоваться в совокупности с
результатаи прочих клинических тестов.
5. Отрицательный результат теста не исключает возможность
инфекции в отдельных случаях по причине низкой
концентрации вирусных антигенов.
6. Для повышения вероятности обнаружения антигенов
возбудителя тест рекомендуется проводить не позднее 1 недели
после возникновения первых симптомов заболевания
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА
Чувствительность и специфичность теста
Результаты исследования 35 фекальных образцов методом
КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ производства компании Novamed
Ltd., Израиль были подтверждены результатами таких
коммерчески
приемлемых
и
признанных
иммунохроматографических методов для определения антигена
кампилобактера в кале как ImmunoCard STAT! CAMPY (Meridian
Bioscience, Inc). При этом результаты полученные методом
КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ производства компании Novamed
Ltd., Израиль показали >99% чувствительности and >99%
специфичности.
Использование мышинных моноклональных антител в
КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ обеспечивает высокую степень
специфичности при выявлении
бактерий кампилобактера.
Антитела примененные КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ одинаково
хорошо обнаруживали эпитопы кампилобактера как в
положительных образцах кала пациентов, так и в разведениях
культуры кампилобактера in vitro. Эти предварительные данные
были взяты в расчет до появления других результатов эвалюации
теста.
Перекрестное реагирование
При исследовании с помощью КАМПИЛОБАКТЕР ТЕСТ
фекальных образцов, содержащих
заведомо известные
количества антигенов H. pylori, E. coli, Listeria monocytogenes и
Salmonella не было обнаружено каких-либо неспецифических
перекрестных реакций.
ЛИТЕРАТУРА:
1.
2.
Kawatsu,
K.
et
al.
“Development
and
Evaluation
of
Immunochromatographic Assay for Simple and Rapid Detection of
Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in Human Stool Specimens”.
Journal of Clinical Microbiology Apr. 2008 Vol 46, No. 4, p. 1226-1231.
Fernández, H. and Farace, M.I. “Manual de Procedimientos
Campylobacter”. INEI. 2003.
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
________________С.А. Гольдберг
«17» сентября 2010 г.
Представительств
о в РФ:
ООО «ГЕМ» г.
Москва, Новый
Зыковский проезд,
д. 4А.
+7 (495) 787-04-32
www.hemltd.ru
IFU-Campylobacter -R-6032-HEM-russ- v.01-10.12.11