Согласованность между отражающей

Реклама
DOI: 10.1111/j.1468-3083.2009.03134.x
JEADV
ИСХОДНАЯ СТАТЬЯ
Согласованность между отражающей конфокальной микроскопией in vivo и
гистологией в оценке бляшечного псориаза
М. Ардиго (M Ardigo)1*, К. Кота (C Cota), 1 И. Берардеска (E Berardesca), 1 С. Гонзалез (S González)2
1
Дерматологический институт Сан-Галликано, Рим, Италия
Центр онкологических заболеваний Memorial Sloan Kettering, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США
*Корреспонденция: М. Ардиго Эл. почта: [email protected]
2
Резюме
Исходная информация Псориаз является распространенным воспалительным заболеванием кожи,
которым страдает 2% населения в мире. Бляшечный псориаз (БП) является наиболее
распространенной формой псориаза. Отражающая конфокальная микроскопия (ОКМ) in vivo
представляет собой неинвазивную, воспроизводимую методику визуализации, которая доказала, что
она способна предоставлять ценную информацию для морфометрической оценки ряда
воспалительных состояний кожи, таких как острый контактный дерматит и дискоидная волчанка.
Цель Цель настоящего исследования заключалась в определении характеристик БП при обследовании
ОКМ in vivo и анализе корреляций с результатами гистопатологического исследования.
Методы Для оценки при помощи ОКМ были выбраны псориазные поражения у 36 пациентов с
доказанным диагнозом БП. Далее из той же области брали образец пункционной биопсии размером 4
мм для гистологической оценки. В качестве контрольных образцов использовалась нормальная кожа
из тех же топографических участков 12 здоровых добровольцев.
Результаты Был определен ряд характеристик псориаза на ОКМ, которые коррелировали с
результатами гистопатологической оценки. Более чем в 90% случаев ОКМ выявила гиперкератоз,
паракератоз, уменьшенный зернистый слой или его отсутствие, папилломатоз и расширенные
кровеносные сосуды. При псориазе обнаружен акантоз, при этом его толщина колебалась от 75 до 300
мкм по сравнению с нормальной кожей, где этот показатель составляет 60-90 мкм. Диаметр сосочков
дермы оказался также увеличенным (> 100 мкм) по сравнению с результатами по нормальной коже (>
80 мкм).
Заключение По-видимому, ОКМ является эффективным инструментом микроскопической оценки
характеристик БП и обеспечивает хорошую корреляцию с результатами гистопатологии; таким
образом, ОКМ является перспективным вспомогательным инструментом для неинвазивного
микроскопического диагностирования и ведения лечения.
Получено: 14 июля 2008 г., принято 10 ноября 2008 г.
Ключевые слова
гистологическая корреляция, бляшечный псориаз, отражающая конфокальная микроскопия
Конфликт интересов:
Не заявлено.
Введение
Псориаз представляет собой распространенное воспалительное заболевание кожи. Им страдает
около 2% населения, заболевание характеризуется гетерогенным распространением в мире.
Бляшечный псориаз (БП) является наиболее часто встречающейся формой псориаза; заболевание
проявляется эритематозными шелушащимися бляшками, расположенными преимущественно на
протяженных участках, но может наблюдаться на любом участке кожи.1-3 Как правило, шелушащиеся
поражения БП легко выявляются и диагностируются, однако, БП можно спутать с другими
хроническими кожными заболеваниями, включая себорейный дерматит, экзему, красный волосистый
питириаз.1-3 Причина таких ошибок кроется в том, что пациенты часто отказываются от биопсии кожи
для подтверждения клинического диагноза. Более того, диагноз, поставленный по результатам
гистологии, может быть ошибочным, поскольку на ранних стадиях заболевания изменения могут быть
умеренными и немногочисленными.
Отражающая конфокальная микроскопия (ОКМ) in vivo представляет собой неинвазивную
методику визуализации в режиме реального времени поверхностных слоев кожи до глубины
поверхностного сетчатого слоя дермы, с разрешением до уровня клетки, схожим с разрешением
традиционной гистопатологии.4 Контраст обеспечивается различиями в коэффициенте преломления и
размере различных органелл клетки, а также внутриклеточными микроструктурами в ткани.4,5 ОКМ
использовалась для оценки ряда воспалительных состояний кожи, таких как острый контактный
дерматит6-8 и дискоидная волчанка,9 и в некоторых случаях наблюдалась корреляция с результатами
гистопатологического исследования.6,10 В 1999 г. были определены основные характеристики псориаза
при оценке ОКМ, исследование проводилось на пяти пациентах11; однако, корреляция характеристик
ОКМ с традиционной гистопатологией задокументирована в недостаточной степени и требует
дальнейшего изучения. Таким образом, цель настоящего исследования заключалась в определении
основных характеристик бляшечного псориаза на ОКМ, которые коррелировали бы с
гистопатологическими результатами исследования биоптата из тех же поражений.
Пациенты и методы
Структура исследования
Исследование включало 36 пациентов с клинически (и при необходимости гистологически)
подтвержденным диагнозом БП, которых набрали в поликлиническом отделении псориаза
Дерматологического института Сан-Галликано, Рим, Италия. Перед включением в исследование
пациенты дали информированное согласие. В группу исследования вошло 20 мужчин и 16 женщин,
медиана возраста составила 43,7, а медиана продолжительности заболевания – 12,4 года. Ни один из
пациентов не проходил системное или местное лечение по меньшей мере за 1 месяц до начала
исследования. У каждого пациента было выбрано клинически значимое плоское поражение на
туловище или руках, которому было не менее 2 недель. Поражения с выраженным
гиперкератотическим шелушением либо расположенные на волосистой части в исследование не
включались, поскольку толстые кератиновые структуры рассеивают проходящий свет, необходимый
для ОКМ, уменьшая тем самым глубину визуализации. Каждое выбранное поражение предварительно
обрабатывали салицилатами или другими кератолитическими мазями за 3 дня до проведения
исследования, чтобы уменьшить рассеивание света при ОКМ из-за наличия шелушения.
Измеримые результаты ОКМ, включая гиперкератоз, акантоз, уменьшение или отсутствие
зернистого слоя, а также папилломатоз, сравнивали с характеристиками нормальной кожи спины и
наружной части предплечья в контрольной группе, состоявшей из 12 здоровых добровольцев (5
мужчин и 7 женщин) (Таблица 2). Сравнение характеристик ОКМ с контрольной группой выполнялось
также и для того, чтобы исключить эффект смешения от кератолитических мазей. Стандартное
гистологическое исследование проводилось на месте предыдущего обследования ОКМ в целях
прямого сравнительного микроскопического изучения.
Визуализация при помощи отражающей конфокальной микроскопии
Для клинической визуализации in vivo мы использовали представленное на рынке устройство для
визуализации ОКМ Vivascope 1500* (Lucid Technologies, Генриетта, штат Нью-Йорк, США). Эта
система включает диодный лазер класса 3А (версия для Европы) с длиной волн максимум 830 нм и
мощностью не более 35 мВт на уровне ткани. Использовался объектив с водным погружением и
30-кратным увеличением, цифровая апертура 0,9. ОКМ крепили на коже при помощи кольца с целью
уменьшения артефактов от движения во время исследования. В качестве среды для погружения
использовали воду между адгезионным окном и кожей, а также гель для УЗИ между адгезионным
окном и объективом. Описание этой системы приводилось ранее.12 Отдельные снимки (0,5 x 0,5 мм)
получали с различных уровней кожи для выполнения описательного анализа.13 Кроме того,
использовалось следующее программное обеспечение:
1. ПО Viva Block™ использовалось для получения массивов из 16-64 снимков (2-4 x 2-4 мм) на
уровне границы дермы и эпидермиса. Такие массивы снимков использовались для оценки
папилломатоза, который проявлялся наличием одного или нескольких сосочков дермы (СД),
заполненных выраженными кровеносными сосудами и видимых выше границы дермы и
эпидермиса в шиповатом слое.
2. ПО Viva Stack™ для видео регистрации использовалось для получения последовательностей из 16
снимков (0,5 x 0,5 мм) на одном и том же уровне кожи и для записи динамических процессов,
включая кровоток в кровеносных сосудах на уровне сосочкового слоя дермы, как отмечалось
ранее.14 Такие снимки использовались для выявления наличия расширенных кровеносных
сосудов, заполняющих СД.
3. ПО Viva Stack™ для вертикальной визуализации использовалось для оценки гиперкератоза и
толщины эпидермиса (акантоз). Последовательность изображений получали, начиная с первого
слоя эпидермиса с ядрами и продвигаясь вглубь с интервалом в 5 мкм до границы дермы и
эпидермиса (подробнее см. Рис. 1b). Гиперкератоз оценивали, получая снимки постепенно от
верхушки рогового слоя до первого сотовидного слоя эпидермиса, однако, подтвердить эту
характеристику полностью в качестве параметра ОКМ не представляется возможным из-за
нанесения кератолитиков, необходимых для уменьшения рассеивания света кератином.
Процедура гистопатологического исследования
Мы брали пункционный биопсийный материал размером 4 мм с участка кожи в пределах
поражения, которое ранее оценивали при помощи ОКМ. Биоптат стандартным способом фиксировали
в фосфатно-буферном нейтральном формалине, погружали в парафин и делили на вертикальные срезы
в соответствии с описанной методикой.15 В конце концов срезы толщиной 5 мкм окрашивали
гематоксилином и эозином.
Анализ ОКМ / гистология
Исходя из гистологических критериев диагностирования БП,3 мы проанализировали снимки ОКМ
на наличие восьми гистологических характеристик: паракератоз, уменьшение или отсутствие
зернистого слоя (на ОКМ ранжируется как отсутствует (-), уменьшение (+) или сохранение (++)),
акантоз, папилломатоз (оценивается при помощи ПО Viva Block и ПО Viva Stack для вертикальной
визуализации, чтобы проанализировать увеличение количества и плотности СД на границе дермы и
эпидермиса, а также удлинение эпидермальных гребешков с сосочковом слое), экзоцитоз, спонгиоз,
расширенные кровеносные сосуды в сосочковом слое дермы, а также присутствие клеток воспаления в
верхнем слое дермы.7,9,16 Также проводилась количественная оценка гиперкератоза, но он не считается
надежным параметром из-за необходимости использовать кератолитики, уменьшающие реальную
толщину чешуйчатого слоя. Все параметры ОКМ и результаты гистологии анализировались двумя
независимыми исследователями.
Статистический анализ
Визуализация отдельных параметров ОКМ и общая согласованность между визуализацией ОКМ и
традиционной гистологией оценивались при помощи ПО Stata SE версия 9 (Stata Corporation, Колледж
Стейшн, штат Техас, США).
Результаты
Полученные характеристики ОКМ сравнивали с результатами гистопатологического исследования в
каждом конкретном случае (Таблица 1). Статистический анализ согласованности между показателями,
выявленными визуализацией ОКМ, и присутствием соответствующих гистопатологических
параметров показал хорошую общую согласованность (тест каппа = 0,659; P < 0,0001) (Таблица 1).
Некоторые из основных характеристик рассмотрены ниже.
Таблица 1 Отражающая конфокальная микроскопия (ОКМ) и гистологические (Гисто) характеристики псориаза, их частота и общий тест каппа
Гиперкератоз*
Случай 1
Случай 2
Случай 3
Случай 4
Случай 5
Случай 6
Случай 7
Случай 8
Случай 9
Случай 10
Случай 11
Случай 12
Случай 13
Случай 14
Случай 15
Случай 16
Случай 17
Случай 18
Случай 19
Случай 20
Случай 21
Случай 22
Случай 23
Случай 24
Случай 25
Случай 26
Случай 27
Случай 28
Случай 29
Случай 30
Случай 31
Случай 32
Случай 33
Случай 34
Случай 35
Случай 36
Паракератоз
Отсутствие или
уменьшение
зернистого слоя*
Папилломатоз*
Клетки воспаления
в эпидермисе
Спонгиоз
Гисто
ОКМ
Гисто
ОКМ
Гисто
ОКМ
Гисто
ОКМ
Гисто
ОКМ
Гисто
ОКМ
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
Акантоз с
Расширенные сосуды Клетки воспаления в
нормальной
в сосочковом слое
дерме
структурой
дермы
эпидермиса*
Гисто
ОКМ
Гисто
ОКМ
Гисто
ОКМ
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
Частота
72%
70%
94%
Итого: каппа 0,659; P < 0,001
*См. Таблицу 2.
92%
69%
92%
95%
100%
72%
69%
44%
72%
100%
100%
89%
100%
72%
78%
Таблица 2 Сравнительный анализ измеримых критериев отражающей конфокальной микроскопии
в псориазной и нормальной коже
Пациенты с псориазом
Контрольная группа
Гиперкератоз*
Гиперкератоз в диапазоне от 25 до Гиперкератоз в диапазоне от 20
150 мкм
до 40 мкм
Медиана гиперкератоза: 66 мкм
Зернистый слой
-, 64%; +, 28%; ++, 8%
++, 100%
(отсутствует (-), уменьшение
(+), сохранение (++))
Акантоз
Акантоз в диапазоне от 75 до 300 мкм Акантоз в диапазоне от 60 до 90
Медиана акантоза: 166 мкм
мкм
Папилломатоз
Медиана диаметра СД на границе Медиана диаметра СД на
дермы и эпидермиса: 151 мкм
границе дермы и эпидермиса: <
80 мкм
*Гиперкератоз не считается действительным параметром отражающей конфокальной микроскопии
вследствие предварительного нанесения кератолитиков на исследуемые поражения; СД = сосочек
кожи.
Рисунок 1 Случай 1. (a) Гистологический срез кожи, включая чешуйчатый слой (красная черта) и эпидермис
(желтая черта). (b) Оценка той же ткани при помощи отражающей конфокальной микроскопии (анализ с
использованием ПО Viva Stack), начиная с верхушки рогового слоя (первый желтый круг) до границы дермы
и эпидермиса (второй красный круг). Количество отдельных рамок, необходимых для перемещения от
верхушки рогового слоя до первого сотовидного слоя (шаг = 5 мкм), продемонстрировал степень
гиперкератоза (красные круги); толщину эпидермиса оценивали, начиная с первого сотовидного слоя до
границы дермы и эпидермиса (желтые круги).
Эпидермис
Кератолитические мази наносили за несколько дней до конфокальной визуализации. Однако
гиперкератоз отмечен в 25 из 36 псориазных повреждений по сравнению с контрольной группой. В 33
из 36 случаев роговой слой демонстрировал клетки с ядрами, хорошо отражающие свет (Рис. 2b, d, f,
k), что соответствует паракератозу и/или нейтрофилам (Рис. 2a, e, i). В нормальной коже зернистый
компартмент состоял из слоев клеток с яркими зернами в центре ядер, которые располагались
непосредственно под роговым слоем. Этот компартмент отсутствовал (-; 64%) или был уменьшен (+;
28%) в 33 из 36 псориазных поражениях (Рис. 2a, d).
Акантоз эпидермиса, присутствующий во всех случаях, оценивался при помощи ПО Viva Stack для
вертикального анализа, начиная с верхней части эпидермиса непосредственно под роговым слоем и до
границы дермы и эпидермиса, во внимание принималась вся толщина слоев клеток (Рис. 1).
Неравномерное увеличение толщины эпидермиса (акантоз) наблюдалось во всех поражениях; толщина
варьировалась от 100 до 300 мкм, по сравнению с 60-90 мкм в нормальной коже. Более того, ячеистая
структура шиповатого слоя отмечена во всех случаях, связанных с акантозом (Рис. 2c). В 26 из 36
поражений ячеистая структура была темнее окружающей кожи (не пораженной псориазом). На этих
участках мы обнаружили круглые либо многоугольные клетки с умеренной отражающей
способностью, связанные с более темными участками эпидермиса (Рис. 2j). Это явление соответствует
экзоцитозу клеток воспаления, связанному с эпидермальным спонгиозом при гистопатологии (Рис.
2i).9 Экзоцитоз отмечен в 25 из 36 случаев.
Рисунок 2 (а) Случай 1. Традиционная гистология с окрашиванием гематоксилином и эозином (400-кратное
увеличение): снимок демонстрирует акантоз с нормальной структурой эпидермиса (белый круг), уменьшение
зернистого слоя, который остается видимым только на небольшом количестве участков (красные круги), и
гиперкератоз с паракератозом (стрелки). (b) Снимок отражающей конфокальной микроскопии (ОКМ) (0,5 x 0,5
мм) рогового слоя демонстрирует многочисленные структуры с ядрами, хорошо отражающие свет (стрелки),
соответствующие кератиноцитам с паракератозом. (c) Снимок ОКМ (0,5 x 0,5 мм) шиповатого слоя
демонстрирует ячеистую структуру эпителия (круг). (d) Снимок ОКМ (0,5 x 0,5 мм) зернистого слоя показывает
уменьшение зернистого слоя, который остается видимым только на одном участке и выглядит как клетки с
яркими зернами в центре ядра, расположенные непосредственно над роговым слоем. (e) Случай 10.
Традиционная гистология с окрашиванием гематоксилином и эозином (400-кратное увеличение): снимок
демонстрирует акантоз, папилломатоз (стрелки), гиперкератоз и паракератоз с нейтрофилами в роговом слое
(круг); расширенные кровеносные сосуды в сосочковом слое дермы (звездочка). (f) Снимок ОКМ (0,5 x 0,5 мм)
рогового слоя демонстрирует паракератоз и наличие нейтрофилов, видимых как яркие круглые либо
многоугольные структуры. (g) Снимок ОКМ (0,5 x 0,5 мм) границы дермы и эпидермиса показывает
папилломатоз, выраженный в увеличении диаметра сосочков дермы (СД) (~150 мкм) (красная пунктирная линия)
и отделенный тонкой эпителиальной перегородкой (стрелки), заполнен выраженными круглыми либо
вытянутыми темными канальцевыми структурами вдоль сосочка дермы, которые соответствуют расширенным
кровеносным сосудам (звездочка). (h) Массив снимков ОКМ при помощи ПО Viva Block (3 x 3 мм) на границе
дермы и эпидермиса показывает многочисленные СД, удлиняющиеся в шиповатом слое. (i) Случай 10.
Традиционная гистология с окрашиванием гематоксилином и эозином (400-кратное увеличением)
демонстрирует паракератоз (пунктирная линия), экзоцитоз клеток воспаления (черные стрелки), связанный со
спонгиозом (круг); периваскулярная инфильтрация клеток воспаления в сосочковом слое дермы (красные
стрелки), демонстрирующая папилломатоз. (j) Снимок ОКМ (0,5 x 0,5 мм) шиповатого слоя показывает
отражающие свет ядра, соответствующие паракератозу (пунктирная линия). (k) Снимок ОКМ (0,5 x 0,5 мм)
шиповатого слоя показывает более темные участки по сравнению с окружающим эпителием шиповатого слоя,
где межклеточные пространства между кератиноцитами больше чем обычно (круг), что связано с круглыми или
многоугольными клетками, умеренно отражающими свет, в кератиноцитах (белые стрелки), что соответствует
клеткам воспаления в эпидермисе. (l) Снимок ОКМ (0,5 x 0,5 мм) шиповатого слоя показывает круглые или
многоугольные клетки, умеренно отражающие свет, вокруг кровеносных сосудов. СД виден над границей дермы
и эпидермиса, что соответствует клеткам воспаления на верхушке удлиненного сосочка (красные стрелки).
Рисунок 3 Снимок отражающей конфокальной микроскопии (0,5 x 0,5 мм) базального слоя: отсутствие колец
сосочков при бляшечном псориазе (a) по сравнению с нормальной кожей, снимок сделан на симметричных
анатомических участках (b).
На уровне границы дермы и эпидермиса в 31 из 36 псориазных поражений (~86%) не обнаружены
яркие кольца сосочков, окружающие СД, видна только тень этой структуры (Рис. 3a). И наоборот,
такие структуры легко увидеть во всех образцах нормальной (контрольной) кожи из симметричных
анатомических областей (Рис. 3b). Папилломатоз отмечен во всех случаях.
Дерма
СД были заполнены выраженными кровеносными сосудами во всех образцах кожи пациентов с
псориазом. Эти сосуды были хорошо видны выше границы дермы и эпидермиса на уровне шиповатого
слоя (Рис. 2h). Также оказалось, что диаметр СД был увеличен, колеблясь от 100 до 250 мкм, а сами СД
были разделены тонкой эпителиальной перегородкой на уровне границы дермы и эпидермиса (Рис.
2g). Вероятно, диаметр СД пропорционален глубине акантотического эпидермального гребня внутри
сосочка. Такое увеличение СД стало очевидным при сравнении с контрольной группой, где диаметр
СД составил менее 80 мкм. Исследование с использованием ПО Viva Stack с видео регистрацией
показало выраженные темные канальцевые круглые либо вытянутые структуры, заполняющие
сосочковый слой дермы через кольца СД в 100% случаев (Рис. 2l). Гистологическое исследование
показало, что это явление соответствовало расширенным кровеносным сосудам в сосочковом слое
дермы (Рис. 2i). В 28 из 36 поражений мы увидели круглые или многоугольные клетки, умеренно
отражающие свет, вокруг расширенных кровеносных сосудов в сосочковом слое дермы (Рис. 2l), что
соответствовало периваскулярной инфильтрации клетками воспаления по результатам традиционной
гистологии (Рис. 2i).
Обсуждение
Клинический диагноз БП является практически однозначным при типичных и гиперкератотических
бляшках, но в случае умеренных гиперкератотических бляшек, которые схожи с другими состояниями
кожи, такими как грибовидный микоз постановка диагноза может вызвать затруднение.1,17 При таком
клиническом сценарии требуется гистологическое исследование, чтобы определить методику лечения
и время дополнительных осмотров. В действительности гистопатологическое исследование является
стандартной процедурой для диагностирования БП, однако, ее часто не используют, чтобы не
травмировать пораженные участки еще больше и не причинять дискомфорт пациенту. В такой
ситуации ОКМ является безвредной неинвазивной методикой визуализации с высоким разрешением,
которая поможет избежать лишнего дискомфорта и ненужных шрамов, а также проанализировать
несколько поражений у одного и того же пациента без выполнения многочисленных биопсий.
В настоящем исследовании мы проанализировали корреляцию между традиционной
гистопатологией и ОКМ на группе пациентов, которым был поставлен диагноз «бляшечный псориаз».
Результаты показали высокую степень корреляции между обнаруженными показателями ОКМ и
результатами гистопатологии. ОКМ успешно выявила пять из восьми параметров ОКМ в более 90%
случаев (паракератоз, уменьшение или отсутствие зернистого слоя, папилломатоз, акантоз с
нормальной ячеистой структурой эпидермиса и расширенные сосуды в верхнем слое дермы). Более
того, четыре из этих параметров (паракератоз, акантоз, папилломатоз и расширенные сосуды в
верхнем слое дермы) были успешно визуализированы ОКМ в 100% поражений в рамках настоящего
исследования. Однако наличие рогового слоя с гиперкератозом отмечено только в 70% поражений.
Вероятно, это явилось результатом нанесения кератолитиков до визуализации для уменьшения
рассеивания света из-за наличия чешуек, однако, толщина рогового слоя колебалась от 25 мкм до
максимум 150 мкм по сравнению с контрольной группой, где этот показатель составил от 20 мкм
(сгибательная поверхность руки) до максимум 40 мкм (спина). Эти показатели согласуются с
показателями, заявленными в предыдущем отчете, хотя они и не измерялись.7
Вероятно, незначительное влияние воспалительного состояния поражений или его отсутствие стало
результатом нанесения салицилатов и кератолитических мазей, учитывая краткосрочное лечение,
выбранное исключительно для увлажнения рогового слоя и уменьшения рассеивания отражающегося
света.
Что касается слоев клеток, существенное уменьшение (28%) или полное отсутствие (64%) клеток
зернистого слоя в верхней части эпидермиса отмечено в 92% поражений (32/36) (Таблицы 2 и 3). Эти
показатели оказались удивительно отличными от результатов традиционной гистологии, где
уменьшение отмечено в меньшем количестве случаев (69%; 25/36); вероятнее всего, что такое
расхождение возникло в силу того, что зернистый слой иногда трудно увидеть на ОКМ даже в
нормальной коже.
Также в 72% (26/36) поражений обнаружен спонгиоз. Это типичная характеристика БП, как уже
ранее упоминалось при воспалительных состояниях, таких как дискоидная волчанка и острый
контактный дерматит.9 Эта характеристика оказалась менее частой по результатам традиционной
гистологии (44%; 12/36), что дает серьезные основания полагать, что при сдавливании и фиксации
ткани спонгиоз может стать менее заметным.15 На границе дермы и эпидермиса мы увидели
исчезновение колец СД, лишь остаточные явления круглой формы обнаружены в 86% поражений. И
наоборот, в нормальной коже с симметричных анатомических участков кольца сосочков видны четко.
То же явление ранее отмечено в отношении витилиго, где оно толковалось как признак уменьшения
или отсутствия меланоцитов, вырабатывающих меланин, и пигментированных кератиноцитов на
границе дермы и эпидермиса.18 В целом, сосочковый слой дермы и границу дермы и эпидермиса может
быть сложно визуализировать оптимальным образом из-за уменьшенного количества света,
доходящего до дермы в поражениях с высокой степенью паракератоза, гиперкератоза, акантоза и
спонгиоза. В двух недавних отчетах было выдвинуто предположение, что ингибирование
меланогенеза и/или повышенный апоптоз меланоцитов, вызванные повышенным содержанием
фактора некроза опухолей-α в поражениях БП, могут также влиять на эту характеристику.19,20 Эти
предположения с традиционной гистологией не сопоставлялись и требуют дальнейшего изучения.
Все образования, включенные в настоящее исследование, демонстрировали расширенные
кровеносные сосуды, заполнившие СД. Периваскулярная лимфоцитарная инфильтрация отмечена в 31
из 36 случаев при ОКМ, что согласуется с предыдущими отчетами по дискоидной волчанке.9 Она
сопровождалась повышенным экзоцитозом (69%, 25/36 случаев). Вместе эти характеристики
свидетельствуют об активном воспалении и соответствуют клинической эритеме, отмеченной в
исследованных поражениях.
Два основных ограничения при обследовании БП при помощи ОКМ заключаются в значительной
оптической границе кожи из-за рогового слоя с гиперкератозом и неровности границы дермы и
эпидермиса. Первое ограничение можно преодолеть местным применением кератолитиков, уменьшив
тем самым рассеивание света кератином, что приводит к большему проникновению света в ткань.
Второе ограничение считается классическим диагностическим признаком БП и характеризуется
удлинением эпителия между сосочками, в результате которого базальный слой проталкивается глубже
в кожу, затрудняя обследование границы дермы и эпидермиса и СД. Неровность границы дермы и
эпидермиса можно анализировать при помощи ПО Viva Block в различных слоях эпидермиса и ПО
Viva Stack для визуализации более глубоких удлиненных гребней и расширенных СД.
Заключения
Визуализация при помощи ОКМ позволяет пролить свет на основные микроскопические
характеристики БП в режиме реального времени. К таким характеристикам относятся паракератоз,
папилломатоз и акантоз с отражающей свет ячеистой структурой эпидермиса и расширенными
сосудами в верхнем слое дермы; все они хорошо коррелируют с результатами традиционной
гистопатологии. Далее, к второстепенным гистологическим критериям относят гиперкератоз (менее
надежный из-за применения кератолитических мазей) и наличие клеток воспаления в сосочковом слое
дермы вокруг кровеносных сосудов. Двумя дополнительными критериями являются отсутствие
зернистого компартмента и наличие спонгиоза, которые чаще выявляются ОКМ, чем гистопатологией.
В заключение, ОКМ можно считать перспективным инструментом для микроскопической оценки БП,
она может оказаться полезной при выборе подходящего места для биопсии и отслеживания реакции на
лечение. Необходимо провести дальнейшие исследования дифференциальных диагнозов между БП и
другими гиперкератотическими заболеваниями, такими как себорейный дерматит и красный
волосистый питириаз, чтобы точнее определить эффективную пользу ОКМ в качестве неинвазивного
средства диагностирования БП.
Скачать