УДК [611.013+611.018]: 569.323.4 Диндяев С.В., Ромашин Ф.А., Урпинаев А.А.
реклама
УДК [611.013+611.018]: 569.323.4 Диндяев С.В., Ромашин Ф.А., Урпинаев А.А. КЛЕТОЧНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ В СИСТЕМЕ БИОАМИНОВОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ МАТКИ В ПРОЦЕССЕ БЕРЕМЕННОСТИ ГБОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России В данной статье цитоспектрофлуориметрического рассматриваются исследования внутри- результаты и внеорганных структур, принимающих участие в биоаминовом обеспечении процессов гистогенеза матки крыс во время беременности. Ключевые слова: матка, беременность, биогенные амины, серотонин, катехоламины, гистамин. Одно из ведущих нейрогуморальной мест регуляции в матки сложной многоуровневой принадлежит биогенным системе аминам, обладающим широким спектром биологических эффектов [1]. Нарушение уровня биогенных аминов и их отношений в структурах матки являются одной из основных причин бесплодия и прерывания беременности. Нами проведено комплексное структурно-гистохимическое исследование участия биогенных аминов (серотонина, катехоламинов и гистамина) в регуляции процессов гистогенеза в матке крыс в процессе беременности. Объектом исследования явились беспородные самки крыс в различные сроки беременности (1,4,6-7,9-10,15-16 и 20-21 сутки после спаривания). Время изучения — осенне-весенний период. Стадия эстрального цикла и начало беременности определялись по влагалищным мазкам, окрашенным 1% раствором метиленового синего. Выведение животных из эксперимента осуществлялось методом дислокации шейных позвонков. Материалы исследования: матка — криостатные и парафиновые срезы тела (внеплацентарные участки) и шейки; периферическая кровь — мазок крови, полученной после отсечения хвоста; перитонеальная жидкость — мазок. Методы исследования: 1) Параформальдегидный метод Фалька-Хилларпа в модификации Е.М. Крохиной [2] для выявления биоаминсодержащих тканевых элементов в нефиксированных криостатных срезах тела и шейки матки, пленочных препаратах брыжейки, мазках перитонеальной жидкости и крови. 2) Флуоресцентно-гистохимический метод А.Бъерклунда в модификации В.Н. Швалева и Н.И. Жучковой [3] с использованием глиоксиловой кислоты (фирма «ICN Biomedicals Jnc») для выявления биогенных аминов в нервных волокнах в нефиксированных криостатных срезах тела и шейки матки, пленочных препаратах брыжейки. 3) Флуоресцентно-гистохимический метод Кросса-Эвана-Роста [4] с использованием ортофталевого альдегида (фирма «MERCK-Schuchardt») для дифференцировки гистамина в нефиксированных криостатных срезах тела и шейки матки, пленочных препаратах брыжейки, мазках крови, содержимого влагалища, перитонеальной жидкости. Статистический компьютерный анализ проводился с помощью электронных таблиц Exel. Достоверность различий при сравнении величин определялась по непараметрическому критерию Вилкоксона и параметрическому критерию Стьюдента. Результаты исследования. С помощью флуоресцентно-гистохимических метолов дифференцированы биоаминпозитивные структуры, входящие в состав внутриорганного комплекса биоаминового обеспечения матки (ВКБО), который состоит из симпатических периваскулярных сплетений и одиночных адренергических нервных волокон, тучных клеток, макрофагов, гладких миоцитов миометрия, эпителиоцитов эндометрия. Микроспектрофлуориметрически в его компонентах в различные сроки беременности определено содержание серотонина и катехоламинов, а в клеточных элементах серотонина, катехоламинов и гистамина. Из характерных свойств ВКБО матки следует, прежде всего, обратить внимание на выявленную высокую степень линейной корреляции между концентрациями серотонина и катехоламинов по всем точкам микроспектрофлуориметрического зондирования его биоаминпозитивных элементов. Определено содержание исследуемых биоаминов во внеорганных структурах – периферической крови (суммарное количество), тучных клетках и внеклеточной фазе перитонеальной жидкости. Проведена оценка взаимосопряжений динамики оценочных параметров внутри- и внеорганных биоаминпозитивных структур в течение беременности. На ранних сроках беременности установлено, в частности, достоверное (р<0,05) снижение по сравнению со стадией эструс уровня гистамина в тучных клетках эндометрия на фоне увеличения содержания в этих структурах катехоламинов и особенно серотонина. В миометрии большинство параметров оценки биоаминового статуса тучных клеток на 4-е и 7-е сутки после спаривания достоверно увеличиваются, на 9-е и 15-е сутки — снижаются, вновь повышаясь к 20-21-м суткам. Динамика содержания катехоламинов в исследуемых клеточных элементах характеризуется меньшей степенью вариабельности по сравнению с другими моноаминами. В перитонеальной жидкости в период с 4-х по 9-е сутки беременности отмечается уменьшение количества гистамина в тучных клетках и возрастание уровня серотонина и катехоламинов (р<0,05), к 15-м суткам происходит снижение уровня всех исследуемых биоаминов и резкое повышение к 20-м суткам. В жидкостной фазе наблюдалась схожая динамика. биоаминов Характерно увеличение периферической последующим снижением крови (р<0,05) содержания к суткам 7-9-м к 15-м суткам, однако исследуемых беременности с после наблюдается достоверное увеличение биогенных аминов к концу беременности (20-21-е сутки). Наиболее высокие концентрации серотонина и катехоламинов в нервных волокнах в составе периваскулярных сплетений отмечены на 6-7-е сутки беременности. Наименьшие показатели плотности пространственного распределения нервных волокон, как свободных, так и в периваскулярных сплетений отмечены в 20-21-е сутки беременности. составе Изменения пространственных и гистохимических оценочных параметров внеорганного комплекса хроносопряженностью внутриорганного биоаминового с комплекса обеспечения колебаниями биоаминового характеризуются одноименных обеспечения параметров матки. Эти закономерности могут отражать и определять интеграцию внутри- и внеорганных структур матки, обеспечивающих ее биоаминовый обмен, при переходах организма на новые уровни гомеостаза, соответствующие периодам беременности. Литература: 1. Диндяев С.В., Виноградов С.Ю. Симпатический нервный аппарат матки крысы в динамике полового цикла // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. – 2008. – Т. 94, № 1. – С. 117-122. 2. Крохина Е.М., Александров П.Н. Симпатический (адренергический) компонент эффекторной иннервации сердечной мышцы // Кардиология. – 1969. – № 3. – С. 97–102. 3. Швалѐв В.Н., Жучкова Н.И. Улучшение гистохимического выявления адренергических нервных элементов в растворе глиоксиловой кислоты при посредстве диметилсульфоксида (ДМСО) // Архив АГЭ. – 1987. – Т. XCIII, вып. 10. – С. 91–92. 4. Cross S.W.D., Ewen S. W. B., Rost F. W. D. A study of the methods available for the cytochemical localisation of histamine by fluorescence induced with o-phthalaldehyde or acetaldehyde // Histochem. J. – 1971. – Vol. 3. – P. 471–476.
