КОЛЛЕКЦИЯ ОПУХОЛЕВЫХ ШТАММОВ ЧЕЛОВЕКА

УЧРЕЖДЕНИЕ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ МЕДИЦИНСКИХ НАУК
РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР
ИМЕНИ Н.Н. БЛОХИНА
Е. М. Трещалина
КОЛЛЕКЦИЯ ОПУХОЛЕВЫХ
ШТАММОВ ЧЕЛОВЕКА
Под редакцией М. И. Давыдова
Москва
Trschalina_Verstka.indd 1
• 2009
02.12.2009 16:03:40
Оглавление
Предисловие ..........................................................................7
Введение .................................................................................9
Глава 1
Опухоли желудочно-кишечного тракта ..................... 13
1.1.
1.2.
1.3.
1.4.
1.5.
1.6.
1.7.
1.8.
1.9.
1.10.
1.11.
1.12.
1.13.
1.14.
1.15.
Рак пищевода, РПищ (СЕЕ-1)....................................... 13
Рак желудка, РЖ........................................................... 13
Рак толстой кишки 1, РТК-1 ....................................... 15
Рак толстой кишки 2, РТК-2 ....................................... 18
Рак ободочной кишки SW-620 .................................... 19
Рак толстой кишки 7, РТК-7 ........................................ 20
Рак толстой кишки 8, РТК-8 ....................................... 21
Рак толстой кишки 9, РТК-9 ....................................... 22
Рак толстой кишки 11, основная опухоль,
РТК-11о........................................................................... 23
Рак толстой кишки 11, метастаз, РТК-11м................ 24
Рак толстой кишки 12, РТК-12 ................................... 24
Рак толстой кишки 19, РТК-19.................................... 25
Рак прямой кишки 10, РПК-10 .................................... 26
Рак печени 1, РПеч-1 ................................................... 26
Рак печени 2, РПеч-2 ................................................... 27
4
Trschalina_Verstka.indd 4
02.12.2009 16:03:40
КОЛ Л Е К Ц И Я ОП У ХОЛ Е ВЫ Х Ш ТА М МОВ Ч Е ЛОВЕ К А
1.16. Рак печени 3, РПеч-3 ................................................... 28
1.17. Рак печени Hep G2 ....................................................... 29
Глава 2
Опухоли дыхательных путей......................................... 30
2.1.
2.2.
2.3.
2.4.
2.5.
2.6.
Рак гортани, РГор ........................................................ 30
Рак легкого 1, РЛ-1 ....................................................... 32
Рак легкого 3, РЛ-3....................................................... 34
Рак легкого 4, РЛ-4 ...................................................... 34
Рак легкого 5, РЛ-5я..................................................... 36
Рак легкого 6, РЛ-6 ...................................................... 36
Глава 3
Опухоли мочеполовой системы ..................................... 37
3.1.
3.2.
3.3.
3.4.
3.5.
3.6.
3.7.
3.8.
3.9.
3.10.
3.11.
3.12.
3.13.
3.14.
3.15.
3.16.
Рак почки 1, РПоч-1 ..................................................... 37
Рак почки 2, РПоч-2 ..................................................... 38
Опухоль Вильмса, OB................................................... 40
Рак мочевого пузыря, РМП......................................... 42
Опухоль вульвы, ВО..................................................... 43
Рак тела матки, РТМ .................................................... 44
Рак шейки матки, РШМ-1 ............................................ 47
Рак шейки матки 5, РШМ-5 ......................................... 47
Рак шейки матки 9, РШМ-9 ......................................... 48
Рак шейки матки 24, РШМ-24 ..................................... 49
Рак шейки матки 32, РШМ-32 ..................................... 50
Хорионэпителиома, ХЭ ............................................... 51
Рак амниона, AM .......................................................... 52
Рак яичников SKOV3..................................................... 53
Рак простаты РС3 ......................................................... 54
Рак простаты РС3-m ..................................................... 57
Глава 4
Опухоли молочной железы ............................................. 59
4.1. Рак молочной железы 1, РМЖ-1................................. 56
4.2. Рак молочной железы 3, РМЖ-3................................. 60
5
Trschalina_Verstka.indd 5
02.12.2009 16:03:41
КОЛ Л Е К Ц И Я ОП У ХОЛ Е ВЫ Х Ш ТА М МОВ Ч Е ЛОВЕ К А
4.3. Рак молочной железы 4, РМЖ-4 ................................ 61
4.4. Рак молочной железы SKBR3 ..................................... 62
Глава 5
Саркомы ................................................................................. 65
5.1.
5.2.
5.3.
5.4.
5.5.
5.6.
Остеогенная саркома, ОС ............................................ 65
Рабдомиосаркома 1, РМС-1.......................................... 66
Остеогенная саркома 2, 2Т ......................................... 67
Саркома Юинга, СЮ ..................................................... 68
Фибросаркома, ФС ........................................................ 70
Саркома средостения, ТМ-2 ........................................ 71
Глава 6
Опухоли кроветворной системы ................................... 72
6.1. Лимфома Беркитта 1, ЛБР-1 ....................................... 72
6.2. Лимфома Беркитта 2, ЛБР-2 ....................................... 73
6.2. Лейкоз К, ЛК ................................................................. 74
Глава 7
Меланомы ............................................................................. 76
7.1.
7.2.
7.3.
7.4.
7.5.
7.6.
7.7.
7.8.
Меланома 1, Мел-1 ....................................................... 76
Меланома 2, Мел-2 ....................................................... 78
Меланома 3, Мел-3 ....................................................... 78
Меланома 5, Мел-5 ....................................................... 80
Меланома 6, Мел-6 ....................................................... 81
Меланома 7, Мел-7 ....................................................... 83
Меланома 8, Мел-8 ....................................................... 86
Меланома 9, Мел-9 ....................................................... 87
Глава 8
Опухоли нервной системы .............................................. 88
8.1. Нейробластома, НБ...................................................... 88
Заключение .......................................................................... 89
Литература ........................................................................... 90
6
Trschalina_Verstka.indd 6
02.12.2009 16:03:41
Опухоли желудочнокишечного тракта
1
1.1. Рак пищевода, РПищ (СЕЕ-1)
Опухоль кардиоэзофагальной области пищевода чернокожего
больного 71 года, привезена в РФ из Кубы.
Первая имплантация: 06.07.88 г. подкожно взвесью опухолевой
ткани бестимусным мышам.
Перевивки опухоли: на бестимусных мышах или крысах подкожно с интервалом в 26 дней. Гибель мышей наступает на 28–30-й дни
после введения опухолевой взвеси. Было проведено 20 пассажей.
Метастазирование: в легкие — 10 %, в лимфоузлы — 20 %.
Гистология. Исследование опухоли проводили при первичной
трансплантации и последующем на 15 и 20-м серийном пассажах
на бестимусных мышах. Морфология подкожного опухолевого
узла, метастазов в легкие и лимфатические узлы — мелкоклеточный рак пищевода. Опухолевый узел у бестимусных крыс на 16-м
пассаже имеет строение рака пищевода.
Маркеры: рецепторы к андрогенам и эстрогенам не обнаружены.
1.2. Рак желудка, РЖ
Опухоль от больной РОНЦ (история болезни №76/268, биопсия
1195-99).
13
Trschalina_Verstka.indd 13
02.12.2009 16:03:41
1
КОЛ Л Е К Ц И Я ОП У ХОЛ Е ВЫ Х Ш ТА М МОВ Ч Е ЛОВЕ К А
Первая имплантация: 04.07.76 г. подкожно взвесь опухолевой
ткани из первичного узла одной бестимусным мыши. Опухолевый
узел появился через 2 мес.
Перевивки опухоли: на бестимусных мышах или крысах подкожно с интервалом в 26 дней. Опухолевый штамм прошел 77 серийных пассажей. Опухоль медленно растущая. Гибель мышей наступала на 88-й день после перевивки.
Метастазирование: отсутствует.
Гистология ( рис. 1 и 2). В биопсийном материале опухоли больной — картина аденокарциномы со средней степенью анаплазии. На всех этапах пассирования на бестимусных мышах опухоль
принципиально сохраняет строение аденокарциномы. На 4-м пассаже ее строение становится более мономорфным, наблюдается
небольшая продукция слизи. Далее, на 16-м пассаже аденокарцинома имеет папиллярно-дольчатое строение с тонкими фиброзными перегородками, разделяющими некоторые дольки; отдельные
дольки могут быть окружены более толстой фиброзной капсулой.
Позже на 40 и 43-м пассажах железы становятся менее ветвистыми (при сохранении продукции слизи) и видны крупные участки
с картиной солидного рака, представленного относительно мономорфными полигональными клетками со значительным числом
фигур митоза. Опухолевый узел окружен тонкой фиброзной капсулой, связанной с фиброзными прослойками внутренних отделов.
При более поздних пассажах (64-я генерация) в отдельных участках значительно развивается фиброзная строма.
Бестимусным крысам вводили опухолевый штамм РЖ, прошедший 50 и 57 пассажей на бестимусных мышах. При трансплантации на бестимусных крысах картина аденокарциномы сохраняется. В просветах железистых опухолевых структур отмечается
большое скопление PAS + вещества. На отдельных участках мощно
развивается фиброзная строма, вследствие чего рак приобретает картину скирра. Иногда на отдельных участках видна интенсивная инфильтрация опухолевой ткани лимфоцитами и плазмацитами.
ЛДГ. Штамм имеет типичное для человеческих опухолей распределение ЛДГ по 5 фракциям: I — 3,1 ± 0,4 %; II — 15,3 ± 0,2 %;
14
Trschalina_Verstka.indd 14
02.12.2009 16:03:41
Опухоли молочной железы
4
4.1. Рак молочной железы 1, РМЖ-1
Больная РОНЦ (биопсия № 14604–608/76)
Первая имплантация: 17.12.76 г. 3 мышам ввели подкожно взвесь
опухолевой ткани из основного узла. У всех мышей через месяц появилась опухоль, и через 1,5 мес. была сделана первая перевивка.
Перевивки опухоли: штамм рака молочной железы человека перевивается подкожно с интервалом 14–16 дней. Животные с опухолью доживают в среднем до 45-го (36–68) дня. Всего было сделано
59 серийных пассажей.
Получен асцитный вариант штамма опухоли молочной железы
человека РМЖ-1. Штамм перевивается на крысах.
Динамика роста опухоли: на 2–3-м пассажах после хранения
штамма в жидком азоте у 14 (100 %) из 14 бестимусных мышей появилась пальпируемая опухоль на 6–10-й дни после введения (латентная фаза роста). Измеряемая опухоль объемом (a × b × c) 67 мм3 появилась на 12-й день (V0). К 17-му дню опухоль увеличилась в 10 раз
(экспоненциальная фаза роста), на 22-й день скорость роста опухоли замедлилась в 2,1 раза и затем к 27 и 33-му дню прирост опухоли
составляет 1,6 раз (стационарная фаза роста) (рис. 93).
Гистология (рис. 94–96). В биопсии и при первичной трансплантации бестимусным мышам опухоль человека имеет структуру про-
59
Trschalina_Verstka.indd 59
02.12.2009 16:03:42
4
КОЛ Л Е К Ц И Я ОП У ХОЛ Е ВЫ Х Ш ТА М МОВ Ч Е ЛОВЕ К А
токового солидного рака и состоит из мелкодольчатых солидных
скоплений вытянутых клеток с умеренно развитой опухолевой
стромой. При перевивках (8-й пассаж) опухоль в клеточном отношении стала более мономорфной, более солидной, ее дольчатость почти не подчеркивается стромой. Формируются как бы
псевдодольки опухоли за счет ландкартнообразных узких зон некробиоза и некроза опухолевой ткани. Ближе к центру опухолевого узла появляются признаки остеогенеза с обызвествлением
мелких афункциональных костных балочек. Отмечается высокая
митотическая активность. В более поздних пассажах (30 и 32- й)
наблюдается картина низко дифференцированного солидного
рака из крупных полигональных клеток, среди которых заметны участки некроза. Между отдельными дольками и комплексами видна PAS + строма. В опухолевых клетках много атипичных
фигур митоза.
При трансплантации бестимусным крысам штамма РМЖ-1 из
29-го мышиного пассажа наблюдается картина низко дифференцированного со’лидного рака. Опухолевые клетки полигональные, крупные, светлые, с 1–3 ядрышками в ядрах, между ними выражена PAS + строма, много атипичных фигур митоза. В центре
опухолевого узла — очаги некроза.
ЛДГ. Распределение фракций ЛДГ: I — 2,2 ± 0,4 %; II —
15,4 ± 07 %; III — 26,7 ± 1,1 %; IV — 30,1 ± 1,2 %; V — 25,6 ± 0,9 %.
Отношение I и V фракций равно 11,7, отношение Н:М — 34,6:65,4.
Продолжительность клеточного цикла и его фаз : общая —
21,0 ч; продолжительность фаз: G 1 + 1/2М — 3,5 % (3,2–3,9), S —
12,4 % (11,812,5), G 2 + 1/2М — 5,1 % (4,9–5,3).
Пролиферативный пул : в момент перевивки — 93,1 % (91,6–
94,8) клеток.
Уровень синтеза ДНК в клетках: определен по интенсивности радиоактивной метки (импульс/минута): 3Н-тимидин — 2805
(2701–3983), 3Н-дезоксиуридин — 3946 (2956–4105).
Маркеры: обнаружены гормональные рецепторы человека
к эстрогенам (14,0), выражена экспрессия онкогенов ras, sis, c-myc.
Чувствительность к химиотерапии: штамм не чувствителен
к метотрексату, винкристину, 5-фторурацилу, адриамицину и ци-
60
Trschalina_Verstka.indd 60
02.12.2009 16:03:42
8
Опухоли нервной системы
8.1. Нейробластома, НБ
Штамм получен из культуры клеточной линии JMR-32 нейробластомы человека.
Первая имплантация: 08.06.86 г. 2 бестимусным мышам подкожно инокулировано по 5 × 106 клеток линии JMR-32. Через
10 дней у них появились опухолевые узелки, через 22 дня была
сделана первая перевивка.
Перевивки опухоли: на бестимусных мышах или крысах подкожно по принятой схеме с интервалом 12–14 дней. Гибель мышей — на 49 - й день после инокуляции. Проведено 34 пассажа.
Гистология. После первичной трансплантации и в процессе серийного пассирования на бестимусных мышах культуры клеточной линии JMR-32 нейробластомы человека строение опухоли не
противоречит структуре нейробластомы. В 4-й генерации опухоль
состоит из умеренно полиморфных овально-округлых и полигональных клеток с четко очерченной цитоплазмой и ядрами с грубоглыбчатым хроматином. Встречаются клетки гигантских размеров
с уродливыми ядрами. Много атипичных митозов. В последующих
генерациях (11 и 20-й пассажи) структура опухоли не изменялась.
При трансплантации штамма НБ (26-я генерация) на бестимусных крысах в опухоли сохранилась структура вышеописанной
нейробластомы, наблюдаемая при перевивке на мышах.
Маркеры: не обнаружены гормональные рецепторы человека
к андрогенам и эстрогенам.
88
Trschalina_Verstka.indd 88
02.12.2009 16:03:43
Рис. 1.
Штамм РЖ. Окраска гематоксилином и эозином, ×160
Рис. 2.
Штамм РЖ. Окраска по Крейбергу, ×160
98
Trschalina_Verstka.indd 98
02.12.2009 16:03:43
Рис. 3.
Штамм РТК-1 (50 мг п/к, 5-й пассаж)
Рис. 4.
Штамм РТК-1. Окраска гематоксилином и эозином, ×160
99
Trschalina_Verstka.indd 99
02.12.2009 16:03:43