ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «НИЖЕГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНСТВА ПО ЗДРАВООХРАНЕНИЮ И СОЦИАЛЬНОМУ РАЗВИТИЮ» КАФЕДРА ГИСТОЛОГИИ С ЦИТОЛОГИЕЙ И ЭМБРИОЛОГИЕЙ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К САМОСТОЯТЕЛЬНОМУ ИЗУЧЕНИЮ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ПО ДИСЦИПЛИНЕ "ГИСТОЛОГИЯ, ЭМБРИОЛОГИЯ, ЦИТОЛОГИЯ" ДЛЯ СПЕЦИАЛЬНОСТЕЙ: 060101 (65) ЛЕЧЕБНОЕ ДЕЛО; 060103 (65) ПЕДИАТРИЯ; 060104(65) МЕДИКО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЕ ДЕЛО; 060105(65) СТОМАТОЛОГИЯ ФАКУЛЬТЕТЫ: ЛЕЧЕБНЫЙ, ПЕДИАТРИЧЕСКИЙ, МЕДИКО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЙ, СТОМАТОЛОГИЧЕСКИЙ (ДНЕВНОЕ ОТДЕЛЕНИЕ) 2006 г. 2 ФОРМЫ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ СТУДЕНТОВ (СРС) НА КАФЕДРЕ ГИСТОЛОГИИ С ЦИТОЛОГИЕЙ И ЭМБРИОЛОГИЕЙ 1.Основной формой самостоятельной работы (СР) студентов на кафедре является изучение гистологических препаратов во внеурочное время. Обьектами изучения служат демонстрационные гистопрепараты (90 наименований), рекомендованные Примерной Программой по дисциплине «Гистология, эмбриология, цитология». Занятия проводятся в специально отведённой учебной комнате по расписанию с помощью методических указаний при консультативной помощи дежурного преподавателя. Направление на СР даётся студенту преподавателем группы. СРС фиксируется в журнале дежурным преподавателем по факту присутствия студента на самоподготовке. Выполнение СР протоколируется студентов в собственном альбоме для занятий по гистологии и контролируется преподавателем группы. 2.Рефераты и конспекты в качестве СРС служат средством дополнительного внимания студента к определённым темам курса. Задание подготовить реферат или конспект даётся студенту и контролируется преподавателем группы. ТЕХНИКА СВЕТОВОГО МИКРОСКОПИРОВАНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ Микроскопическое изучение гистопрепарата начинается с подготовки микроскопа к работе. Прежде всего следует протереть линзы окуляра, обьективов, конденсора, а также поверхности зеркала и гистопрепарата с помощью мягкой чистой салфетки. Затем производится установка исходного положения регуляторных элементов микроскопа: - вращением держателя обьектива установить малое увеличение строго вертикально на защёлку револьвера; - вращением макровинта установить обьектив малого увеличения на расстоянии около 1 см от предметного столика микроскопа; - конденсор поднять в верхнее положение, полностью открыть диафрагму; - предметный столик микроскопа, если он подвижный, установить в центральное положение; - вогнутой стороной зеркала установить максимальное и равномерное освещение поля зрения от люминесцентной лампы; Микроскопирование гистопрепарата: - гистопрепарат поместить на предметный столик покровным стеклом вверх так, чтобы срез располагался под центром обьектива (это особенно важно при изучении мелких обьектов, которые легко могут оказаться за пределами поля зрения); - глядя в окуляр, медленными движениями макровинта в ту или иную сторону навести срез на резкость, опасаясь приближения обьектива к препарату во избежание повреждения стёкол; - осмотреть весь препарат на малом увеличении перемещая его рукой на предметном столике с целью опознания препарата и выбора нужного для изучения участка, учитывая, что на большом увеличении этого сделать не удастся; - оптимизировать освещённость препарата на малом увеличении путём передвижения конденсора и рычага его диафрагмы для изучения конкретной структуры в данном препарате; - при необходимости изучения конкретной структуры на большом увеличении следует расположить её в центре поля зрения; - конденсор поднять в верхнее положение, полностью открыть диафрагму; - не меняя расстояния малого обьектива от столика, установить обьектив большого увеличения на защёлку в строго вертикальное положение; нельзя переводить микроскоп на 3 большое увеличение, не добившись резкости на малом, так как в конструкции микроскопа предусмотрено соответствие между обьективами; - глядя в окуляр, медленными движениями микровинта в ту или иную сторону навести срез на резкость, опасаясь приближения обьектива к препарату во избежание повреждения стёкол; - при изучении структуры на большом увеличении следует постоянно покручивать микровинт в обе стороны в пределах одного оборота, перемещая фокус резкости между верхней и нижней сторонами среза, чтобы составить обьёмное представление об изучаемом обьекте; - вращение микровинта допустимо в обе стороны до упора ограничителя, всякий раз возвращаясь в исходное промежуточное положение; - оптимизировать освещённость препарата на большом увеличении путём передвижения конденсора и рычага его диафрагмы для изучения конкретной структуры в данном препарате, учитывая, что опускание конденсора снижает освещённость, повышая резкость изображения; - убирать препарат со столика следует после возвращения на малое увеличение во избежание повреждения препарата и линзы. Следует привыкнуть микроскопировать держа открытыми оба глаза во избежание быстрой утомляемости зрения. ГИСТОПРЕПАРАТЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОГО ИЗУЧЕНИЯ Препарат №2. Овоидные клетки с компактным ядром (эритроциты крови лягушки) Окраска: гематоксилин - эозин. При большом увеличении рассмотрите клетки овальной формы с яркой ацидофилыюй цитоплазмой. Обратите внимание на форму, плотное строение и интенсивную окраску ядра. Такие ядра называются компактными. ЗАДАНИЕ: различить форму, строение и цвет клеточных ядер. Препарат №4. Отростчатые клетки (пигментные клетки) Окраска: препарат не окрашен. Клетки имеют радиально расположенные цитоплазматические отростки с короткими ветвями. На большом увеличении видны коричневые гранулы, расположенные в цитоплазме клетки, которые и придают ей окраску. Центрально расположенное ядро имеет вид неокрашенного пузырька. ЗАДАНИЕ: различить пигментные гранулы. Препарат №33. Центриоли в делящейся клетке Окраска: железный гематоксилин. При большом увеличении в препарате найти делящуюся яйцеклетку на стадии метафазы. На полюсах такой клетки расположены разошедшиеся центриоли в вид темных круглых телец. Между центриолями протягиваются неокрашенные нити веретена деления, к которому по экватору прикрепляются хромосомы, имеющие вид тонких изогнутых палочек. ЗАДАНИЕ: различить центриоли и веретено деления. Препарат №46а. Всасывающая каемка в эпителиальных клетках тонкого кишечника Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат содержит поперечный срез стенки тонкой кишки. В данном случае нас интересует внутренняя сторона кишки, которая узнаётся на малом увеличении по многочисленным пальцевидным выростам слизистой оболочки. На большом увеличении рассмотрите однослойный призматический эпителий, выстилающий поверхность слизистой оболочки. Эпителий состоит из тесно расположенных 4 в один слой призматических клеток с овальными ядрами, лежащими в базальном конце клетки. Для лучшего различения важно выбрать в препарате именно поперечный, а не косой срез эпителия. На апикальной поверхности клеток различается более тёмно окрашенная полоска - всасывающая каемка. Последняя при рассматривании в электронный микроскоп состоит из совокупности большого числа микроворсинок. ЗАДАНИЕ: различить всасывающую каемку кишечного эпителия. Препарат №47а. Реснички эпителиальных клеток (трахея) Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат содержит поперечный срез стенки трахеи. В данном случае нас интересует внутренняя вогнутая сторона стенки, которая выстилается многорядным призматическим реснитчатым эпителием. При большом увеличении на апикальной поверхности эпителиальных клеток видны вертикально расположенные реснички в виде тонких оксифильно окрашенных нитей. Для лучшего различения важно выбрать в препарате именно поперечный, а не косой срез эпителия. ЗАДАНИЕ: различить мерцательные реснички дыхательного эпителия. Препарат №9. Белок-фермент кислая фосфатаза - маркер лизосом (клетки печени) Окраска: по методу Гомори. Препарат представляет срез печени, состоящий из плотно сомкнутых полигональных клеток. Срез обработан особым гистохимическим методом по методу Гомори, выявляющим места локализации фермента фосфомоноэстеразы, которым богаты лизосомы. При большом увеличении в поле зрения видны уже знакомые вам печеночные клетки многогранной формы. Найдите структурные компоненты клетки: шаровидное ядро, цитоплазму, клеточные границы. На светлом фоне неокрашенной цитоплазмы видны мелкие коричневого цвета гранулы. Эти гранулы - форма отложения фермента фосфомоноэстеразы в лизосомах. ЗАДАНИЕ: различить локализацию зернистости в клетке и разнообразие её концентрации. Препарат №10. Белок-фермент щелочная фосфатаза в щеточной каемке почечных канальцев Окраска: метод Гомори - эритрозин. Препарат представляет собой срез почки. При большом увеличении на поперечном срезе почечного канальца рассмотрите расположенные в один ряд призматические клетки со слабо выраженными границами, ацидофильной цитоплазмой и светлыми ядрами в базальной части. На апикальной поверхности клеток, обращенной в просвет канальца, выявляется довольно широкая, темно окрашенная полоска - щёточная каемка. Последняя, по данным электронной микроскопии, состоит из большого числа микроворсинок. Гистохимическим методом в ней выявлено содержание фермента щелочной фосфомоноэстеразы в виде гранул коричневого цвета. ЗАДАНИЕ: различить локализацию зернистости в клетках и разнообразие её концентрации. Препарат №90. Белок-фермент сукцинатдегидрогеназа - маркер митохондрий (нервные клетки) Окраска: нитро-синий тетразолий по Нахласу. При большом увеличении в поле зрения видны крупные отростчатые клетки, содержащие в цитоплазме и отростках зёрна сине-фиолетового цвета, что соответствует локализации митохондрий. ЗАДАНИЕ: различить локализацию зернистости в клетке и разнообразие её 5 концентрации. Препарат №164а. Нейтральные жиры в составе клеток (клетки надпочечника) Окраска: гематоксилин - Судан IV. Препарат представляет срез надпочечника, в клетках которого гистохимическим методом выявлено содержание нейтральных жиров. При большом увеличении видны клетки неправильной угловатой формы, расположенные в виде тяжей. Найдите базофильно окрашенное ядро и капли нейтрального жира оранжевого цвета в цитоплазме. ЗАДАНИЕ: различить локализацию жира в клетках и разнообразие её концентрации в пределах клетки и в разных клетках. Препарат №91. Включения гликогена в нервных клетках (симпатический ганглий) Окраска: ШИК-реакция. При большом увеличении в препарате видны нервные клетки, в которых гистохимическим методом выявлен гликоген. Последний обнаруживается преимущественно в виде глыбок, но может быть представлен частицами различной величины от крупных до пылевидных, окрашенных в малиновый цвет и располагающихся в цитоплазме и отростках нервных клеток. Обратите внимание, что при данном методе окраски в препарате можно выявить клетки с различным содержанием полисахарида. ЗАДАНИЕ: различить локализацию гликогена в клетках и разнообразие её концентрации в пределах клетки и в разных клетках. Препарат №13. Витамин С в клетках надпочечников Окраска: импрегнация азотнокислым серебром, гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез надпочечника, в клетках которого гистохимическим методом выявлена локализация витамина С. При большом увеличении в клетках неправильной призматической формы найдите базофильно окрашенное ядро, а в светлой цитоплазме рассмотрите мелкие черные гранулы частицы восстановленного серебра. Они откладываются в местах локализации витамина С. ЗАДАНИЕ: различить локализацию витамина С в клетках и разнообразие её концентрации в пределах клетки и в разных клетках. Препарат №173а. Пузырьковидное ядро (овоциты яичника млекопитающих) Окраска: гематоксилин - эозин. При большом увеличении в срезе яичника встречаются клетки округлой формы с круглым ядром рыхлого строения. Такие ядра называются пузырьковидными. Рассмотрите элементы ядра: кариолемму, ядрышко, глыбки хроматина, кариоплазму. ЗАДАНИЕ: различить все части ядра. Препарат №26. ДНК в ядрах клеток щитовидной железы Окраска: метод Фельгена. При большом увеличении в препарате видны округлые или овальные ядра эпителиальных клеток щитовидной железы, цитоплазма которых не окрашена и границы клеток нечёткие. Найдите все элементы ядра и обратите внимание на окраску глыбок хроматина, их локализацию. Красно-фиолетовый цвет их обусловлен наличием ДНК. Большая часть глыбок хроматина прилегает изнутри к ядерной мембране, среди них в ядрах клеток женского организма может обнаруживаться глыбка полового хроматина неправильной треугольной формы. ЗАДАНИЕ: различить локализацию ДНК в ядре; попытайтесь обнаружить половой хроматин. 6 Препарат №28. Митоз животной клетки (краевая зона печени) Окраска: железный гематоксилин. Препарат представляет срез печени состоящий из плотно сомкнутых полигональных клеток. При большом увеличении в краевой зоне печени среди интерфазных клеток рассмотрите митотически делящиеся клетки. Они узнаются по наличию хромосом при отсутствии ядра. В животных клетках митоз включает те же фазы с соответствующими морфологическими проявлениями. Однако, по сравнению с митозом в растительной клетке, выявляются и некоторые особенности. ЗАДАНИЕ: постарайтесь различить все фазы митоза. Препарат №29. Амитоз эпителиальной клетки мочевого пузыря Окраска: гематоксилин - эозин. При большом увеличении среди одноядерных неделящихся клеток в препарате найдите клетки на разных стадиях амитоза: начало перешнуровки ядра (гантелеобразная форма), двуядерная клетка с неразошедшимися и разошедшимися ядрами. ЗАДАНИЕ: различить делящиеся клетки. Препарат №187. Оплодотворение яйцеклетки лошадиной аскариды Окраска: гематоксилин. Препарат содержит немногочисленные редко расположенные крупные яйцеклетки шаровидной формы с пузырьковидными ядрами. Часть из них оплодотворена. В оплодотворённых яйцеклетках можно увидеть два ядра (мужской и женский пронуклеусы). Пронуклеусы имеют обычное строение интерфазных ядер. Позднее, когда начинается профаза кариокинеза, в ядрах становятся видимыми хромосомы. ЗАДАНИЕ: различить признаки оплодотворённой яйцеклетки. Препарат №38. Гаструляция на стадии первичной полоски (тотальный препарат) Окраска: гематоксилин. Препарат представляет целый зародыш курицы в начале второй фазы гаструляции при виде сверху. Препарат изучается на малом увеличении. Однако даже невооружённым глазом виден овальной формы зародыш, так называемый «зародышевый щиток». Вдоль зародыша по средней линии видно скопление клеток, имеющее вид тёмной полоски, называемое первичной полоской. Один конец первичной полоски утолщен и называется первичный (Гензеновский) узелок. ЗАДАНИЕ: различить первичную полоску и первичный узелок. Препарат №42. Зародыш курицы на стадии закладки сомитов и образования зачатков головного мозга - мозговых пузырей (тотальный препарат) Окраска: гематоксилин. Препарат изучается на малом увеличении. При виде сверху зародыш занимает осевую часть диска. На переднем конце зародыша видны утолщения мозговых пузырей. Мозговые пузыри кзади продолжаются в трубку зачатка спинного мозга, по сторонам от которой мезодерма сегментируется, образует сомиты. Каудальная мезодерма остаётся несегментированной. Кнаружи от зародыша клеточный массив составляет внезародышевые образования с многочисленными кровяными островками. ЗАДАНИЕ: различить мозговые пузыри, зачаток спинного мозга, сомиты, область несегментированной мезодермы, кровяные островки. Препарат №180. Зародыш млекопитающего на стадии закладки комплекса осевых зачатков (9-ти дневный эмбрион кролика) 7 Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет собой поперечный срез матки кролика вместе с заключенным в ней зародышем. Последний прошел стадию гаструляции и формирования осевых зачатков и находится на стадии обособления тела и образования основных зачатков органов и тканей. Одновременно наблюдается образование внезародышевых органов - амниона и хориона. Данный препарат рекомендуется изучать после изучения поздней гаструлы курицы и в сопоставлении с ней. Вначале рассмотрите строение самого зародыша. С дорсальной стороны он покрыт многослойной эктодермой, под которой по средней линии виден поперечный срез замкнувшейся нервной трубки с утолщенной стенкой и щелевидным просветом. Под нервной трубкой расположена хорда, а ниже - зачатки аорты и сердца. С вентральной поверхности зародыша находится однослойная эндодерма, выстилающая кишечный желобок. Мезодерма, расположенная по бокам хорды и нервной трубки, отчетливо разделяется на 3 части: медиальную, промежуточную и латеральную. В медиальной мезодерме дифференцируются: дорзальная часть - дерматомы, средняя - миотомы и медиовентральная - склеротомы. В нефротомах видны канальцы формирующейся почки. Спланхнотом состоит из 2-х листков и заключенного между ними целома. Обратите внимание, что париентальный листок сопровождает эктодерму, а висцеральный - эндодерму. По бокам зародыша можно видеть туловищную складку и формирующийся амнион. Снаружи от амниона расположен хорион, развивающийся из трофобласта и подстилающей внезародышевой мезодермы. Хорион вступает в контакт со слизистой оболочкой матки и образует плаценту. Обратите внимание на строение стенки матки в области имплантации зародыша. Она значительно разрослась, утолщена. ЗАДАНИЕ: различить зародышевые листки, целом, хорду, нервную трубку, ганглиозные пластинки, дерматом, миотом, склеротом, нефротом, зачаток аорты и сердца, туловищную складку, амнион, хорион, эндометрий. Препарат №44а. Однослойный плоский эпителий серозной оболочки (срез тонкой кишки) Окраска: гематоксилин - эозин. В препарате – поперечный срез стенки тонкой кишки. На малом увеличении следует различить внутреннюю поверхность кишки с многочисленными пальцевидными выростами и наружную гладкую поверхность кишки. На большом увеличении рассмотрите наружную гладкую поверхность кишки, покрытую одним слоем плоских эпителиальных клеток серозной оболочки. В области расположения ядра толщина клеток наибольшая, по краям - значительно тоньше и почти не видна. ЗАДАНИЕ: различить однослойный плоский эпителий. Препарат №119а. Многослойный плоский неороговевающий и однослойный плоский эпителии (роговица глаза) Окраска: гематоксилин - эозин. В препарате – поперечный срез роговицы глаза. Роговица – тонкая прозрачная плёнка, основа которой образована соединительнотканной пластинкой, а обе поверхности покрыты эпителием. На большом увеличении на наружной поверхности роговицы виден многослойный клеточный пласт. Изучение эпителия следует начать с глубоких слоев в соответствии с процессом развития клеток. Наиболее глубокий, базальный слой состоит из мелких клеток со слаборазвитой почти неразличимой цитоплазмой. Над базальным слоем клетки становятся крупными, полигональной формы с хорошо развитой слабобазофильной цитоплазмой вокруг круглого светлоокрашенного ядра. Этот промежуточный слой называется шиповатым. Ближе к 8 поверхности клетки становятся всё более вытянутой уплощенной формы, их цитоплазма становится слабооксифильной. Наружный слой называется покровным. Противоположная поверхность препарата покрыта однослойным плоским эпителием. Обратите внимание на границы эпителиев с подлежащей соединительной тканью. Оба эпителиальных пласта образуют необычайно толстые базальные мембраны, хорошо различимые на срезах под световым микроскопом. ЗАДАНИЕ: различить многослойный плоский неороговевающий эпителий и его слои, однослойный плоский эпителий, базальные мембраны. Препарат №49. Многослойный плоский ороговевающий эпителий (толстая кожа пальца) Окраска: гематоксилин - эозин. При малом увеличении рассмотрите строение многослойного плоского ороговевающего эпителия кожи пальца и найдите его слои: самый глубокий, базальный слой лежит на базальной мембране и состоит из одного ряда мелких клеток. Обратите внимание на неровную границу его с подлежащей соединительной тканью. Базальная мембрана фактически не видна, но может быть обозначена как чёткая граница между эпителием и подлежащей соединительной тканью. Над базальным слоем расположен шиповатый слой, состоящий из многих рядов полигональных клеток с хорошо развитой базофильной цитоплазмой. Следующий, зернистный слой представлен 3-4 слоями удлинённых клеток с базофильной зернистостью в цитоплазме. Затем следует блестящий слой в виде оксифильно окрашенной гомогенной полосы, где отдельные клетки становятся неразличимы. Самый поверхностный, роговой слой - наиболее толстый, неоднородно окрашенный, состоит из многих рядов роговых чешуек (ороговевших клеток). ЗАДАНИЕ: различить слои многослойного плоского неороговевающего эпителия. Препарат №51. Одноклеточные железы (бокаловидные клетки эпителия толстого кишечника) Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат содержит поперечный срез стенки тонкой кишки. В данном случае нас интересует внутренняя сторона кишки, которая узнаётся на малом увеличении по многочисленным пальцевидным выростам слизистой оболочки. На большом увеличении рассмотрите однослойный призматический эпителий, выстилающий поверхность слизистой оболочки. Эпителий состоит из тесно расположенных в один слой призматических клеток с овальными ядрами, лежащими в базальном конце клетки. Для лучшего различения важно выбрать в препарате именно поперечный, а не косой срез эпителия. Среди преобладающих призматических клеток кишечного эпителия, имеющих слабоацидофильную окраску, встречаются бесцветные пузырьковидные клетки с плохо различимыми ядрами. Такие клетки называются бокаловидными. ЗАДАНИЕ: различить бокаловидные клетки в составе кишечного эпителия. Препарат №143б. Гликопротеины в бокаловидных клетках и каемке кишечного эпителия Окраска: гематоксилин - ШИК-реакция. Препарат содержит поперечный срез стенки тонкой кишки. В данном случае нас интересует внутренняя сторона кишки, которая узнаётся на малом увеличении по многочисленным пальцевидным выростам слизистой оболочки. На большом увеличении рассмотрите однослойный призматический эпителий, выстилающий поверхность слизистой оболочки. Эпителий состоит из тесно расположенных в один слой призматических клеток с овальными ядрами, лежащими в базальном конце клетки. Среди бесцветных призматических клеток кишечного эпителия выделяются 9 фиолетово-розовые бокаловидные клетки. Эти клетки окрашиваются с помощью ШИКреакции благодаря слизистым секреторным включениям в их цитоплазме. Кроме того апикальная поверхность призматического эпителия также окрашивается в фиолетово-розовые тона, что свидетельствует о значительной концентрации гликопротеидов на всасывающей поверхности. ЗАДАНИЕ: различить локализацию гликопротеидов в клетках и разнообразие её концентрации в пределах клетки и в разных клетках. Препарат №52. Простая трубчатая железа (дно желудка) Окраска: гематоксилин - конго рот. При малом увеличении рассмотрите поперечный срез стенки желудка. В данном случае нас интересует внутренняя сторона желудка, образованая так называемой слизистой оболочкой. Она узнаётся по многочисленным характерным неровностям (желудочные ямки) и выстилающему её однослойному высокопризматическому эпителию. На строго поперечных срезах слизистой оболочки видны плотно расположенные параллельные эпителиальные трубочки с щелевидным едва различимым просветом, выстланные однимдвумя слоями эпителиальных клеток, имеющих разную окраску цитоплазы (голубую, оранжевую, бесцветную). Большую часть железы занимает ее концевой отдел трубчатой формы. Выводной проток имеет вид короткой неветвящейся трубки, открывающейся на поверхности эпителия. Такие железы называются простые трубчатые железы. ЗАДАНИЕ: различить концевой отдел и выводной проток железы, железистые клетки разной окраски. Препарат №6а. Простая разветвленная альвеолярная железа (сальная железа кожи) Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез волосистой части кожи головы. На малом увеличении рассмотрите многослойный плоский ороговевающий эпителий, покрывающий кожу. Вблизи покровного эпителия в толще кожи встречаются мешковидной формы скопления крупных плотно сомкнутых клеток, имеющих развитую слабобазофильную или бесцветную цитоплазму и круглые ядра. Так чаще всего выглядят сальные железы. В ряде случаев срез может проходить через выводной проток железы, имеющий вид короткой узкой неветвящейся трубочки, выходящей на поверхность кожи вместе с волосом. В глубоких отделах железы видны мелкие базофильные клетки, составляющих источник физиологической регенерации эпителия. Вблизи выводного протока железа состоит из погибших клеток с бесцветной цитоплазмой и нечёткми границами, содержащих, главным образом, жировые включения, образованные в ходе клеточного развития. Такой голокриновый секрет составляет кожное сало. ЗАДАНИЕ: различить концевой отдел и выводной проток железы, разновидности железистых клеток. Препарат №53. Сложная альвеолярная железа (срез века) Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез глазного века, в толще которого содежатся модифицированные сальные железы, называемые Мейбомиевы железы. По типу строения они относятся к сложным альвеолярным железам, так как уже на малом увеличении они демонстрируют многократные ветвления выводного протока, а лежащие рядом с ними многочисленные концевые отделы имеют альвеолярную форму. ЗАДАНИЕ: различить концевые отделы и ветвления выводного протока железы. Препарат №24б. Ретикулоциты крови человека (мазок крови) Окраска: бриллиант - крезиловый синий. При большом увеличении среди обычных эритроцитов рассмотрите эритроциты с 10 базофильно окрашенной сеточкой в цитоплазме. Такие молодые эритроциты называются ретикулоцитами. ЗАДАНИЕ: различить ретикулоциты крови. Препарат №113. Кровяные островки Окраска: гематоксилин-эозин. Препарат представляет поперечный срез зародыша на стадии формирования комплекса осевых зачатков. На малом увеличении следует проследить взглядом, как эктодерма, мезодерма и эндодерма продолжаются из тела зародыша во внезародышевую область. На большом увеличении во внезародышевой мезодерме (мезенхиме будущего желточного мешка) рассмотрите кровяные островки - первые зачатки сосудов и клеток крови. Они имеют вид полостей, выстланных плоскими клетками - предшественниками эндотелия. В полости сосуда видны скопления округлых клеток с ядрами и слабо базофильной цитоплазмой. Среди них есть полипотентные стволовые клетки, полустволовые и другие незрелые клетки, преимущественно эритропоэтического ряда. ЗАДАНИЕ: различить структурные элементы кровяных островков. Препарат №24п. Мазок крови новорожденного ребенка Окраска азур - эозин. При большом увеличении рассмотрите форменные элементы крови. Сравните частоту обнаружения лимфоцитов и нейтрофильных лейкоцитов в крови новорожденного ребенка и взрослого человека. Обратите внимание на слабую сегментацию ядра нейтрофильных лейкоцитов (много палочкоядерных нейтрофилов). ЗАДАНИЕ: различить возрастные особенности крови новорожденного. Препарат №61. Тучные клетки в брыжейке кишечника Окраска: толуидиновый синий. На большом увеличении тучные клетки отчетливо видны на светлом фоне межклеточного вещества благодаря яркой базофильной зернистости их цитоплазмы. Они имеют довольно крупные размеры, округлую форму и небольшое светлое ядро. Обратите внимание на наличие в цитоплазме густо расположенной окрашенной. ЗАДАНИЕ: различить тучные клетки. Препарат №92. Плазматические клетки в лимфатическом узле Окраска: по Браше (метиленовый зеленый - пиронин) Препарат приготовлен с использованием гистохимического метода. На большом увеличении в поле зрения видны плазматические клетки округлой, овальной или полигональной формы. При незначительном размере клетки имеют относительно развитую цитоплазму окрашенную в розовый цвет пиронином благодаря высокой концентрации РНК. В околоядерной зоне видно просветление («светлый дворик») место расположения центросомы и пластинчатого комплекса. Ядро чаще лежит эксцентрично и содержит грубые глыбки хроматина, расположенные радиально. ЗАДАНИЕ: различить плазматические клетки. Препарат №112. Накопление краски макрофагами лимфатического узла Окраска: трипановый синий - квасцовый кармин. Препарат представляет срез лимфатического узла животного, которому при жизни в кровь была введена краска - трипановый синий. На большом увеличении рассмотрите одиночно и группами расположенные, окрашенные в синий цвет клетки. Эти клетки, в цитоплазме которых накапливаются частицы фагоцитированной краски, называются макрофаги. Ядра макрофагов и многочисленных лим- 11 фоцитов для контраста окрашены кармином в красный цвет. ЗАДАНИЕ: различить макрофаги. Препарат №138а. Рыхлая неоформленная соединительная ткань на срезе (подслизистая оболочка желудка) Окраска: гематоксилин - конго рот. При малом увеличении рассмотрите поперечный срез стенки желудка. Прежде всего следует различить стороны стенки желудка. Внутренняя сторона, образованная так называемой слизистой оболочкой, узнаётся по многочисленным характерным неровностям (желудочные ямки) и выстилающему её однослойному высокопризматическому эпителию. Толщу слизистой оболочки составляют простые трубчатые железы, состоящие из разноцветных эпителиальных клеток. Непосредственно под слизистой оболочкой располагается подслизистая оболочка, образованная рыхлой соединительной тканью. Она узнаётся по обилию неупорядоченно расположенных пучков волокон. В отличие от плёночного препарата в данном случае клетки и волокна расположены более компактно. Здесь клеточные элементы более мелкие, контуры их слабо различимы, хорошо окрашены лишь ядра, коллагеновые волокна трудно отличить от эластических и окрашены они в оранжево-красный цвет. В составе ткани обнаруживается много поперечно срезанных кровеносных сосудов различного калибра в виде светлых отверстий с утолщенной стенкой и элементами крови в просвете. ЗАДАНИЕ: различить соединительнотканные клетки и неупорядоченно расположенные пучки волокон. Препарат №55. Эластические волокна брыжейки тонкого кишечника (тотальный препарат) Окраска: резорцин - фуксин. На большом увеличении в поле зрения видны тонкие ветвящиеся эластические волокна, окрашенные в фиолетовый цвет. ЗАДАНИЕ: различить эластические волокна. Препарат №57. Ретикулярные волокна в лимфатическом узле Окраска: импрегнация азотнокислым серебром. При малом увеличении на желтом фоне в толще органа рассмотрите густую сеть аргирофильных волокон, окрашенных в черный или коричневый цвет. Между волокнами видны чёрные точки ядер лимфоцитов и ретикулярных клеток, цитоплазма которых не окрашена. ЗАДАНИЕ: различить ретикулярные волокна. Препарат №88. Плотная оформленная коллагеновая соединительная ткань (продольный срез сухожилия) Окраска: гематоксилин - эозин. На малом увеличении хорошо виден пучковый принцип строения сухожилия, редко лежащие сухожильные клетки и плотно упакованные волокна. На большом увеличении рассмотрите строение пучка II порядка, расположенного между базофильно окрашенными прослойками эндотенония и состоящего из пучков I порядка. Обратите внимание на характер соединительной ткани эндотенония, на правильную ориентацию пучков I порядка, их окраску и разграничение с помощью параллельно расположенных рядов фиброцитов, ядра которых имеют вытянутую форму. ЗАДАНИЕ: различить ориентацию коллагеновых волокон и их организацию в пучках. Препарат №59. Плотная оформленная эластическая ткань (продольный срез эластической связки) 12 Окраска: гематоксилин - пикрофуксин по Ван-Гизону. На малом увеличении хорошо видны редко лежащие фиброциты и плотно упакованные упорядоченные волокна. При большом увеличении рассмотрите продольно расположенные, толстые пучки эластических волокон, окрашенных пикрофуксином в желтый цвет. Каждый пучок эластических волокон отграничен тонкими прослойками типичной рыхлой соединительной ткани с оксифильно окрашенным межклеточным веществом и базофильными ядрами клеток. ЗАДАНИЕ: различить ориентацию эластических волокон и их организацию в пучках. Препарат №124а. Плотная неоформленная соединительная ткань (сетчатый слой дермы кожи) Окраска: гематоксилин - эозин. На малом увеличении в толще среза видны мощные оксифильные пучки волокон, расположенные в различных направлениях и содержащие редко расположенные базофильные ядра клеток. Между пучками волокон встречаются сосуды и другие структурные элементы кожи. ЗАДАНИЕ: различить ориентацию волокон и соотношение в степени развития волокон и клеточных элементов. Препарат №63. Белая жировая ткань (тотальный препарат сальника) Окраска: гематоксилин - судан IV. На малом увеличении осмотрите общее строение жировой ткани при специфической окраске. Хорошо видны многочисленные тесно расположенные жировые клетки жёлтооранжевого цвета и тонкие прослойки волокнистой соединительной ткани между ними. На большом увеличении видно, что основную массу клетки составляет капля жира, окрашенная Суданом, а базофильное ядро с узким ободком цитоплазмы смещено на периферию. ЗАДАНИЕ: различить цитоплазму и ядро жировой клетки. Препарат №66. Фиброзный (волокнистый) хрящ Окраска: гематоксилин-эозин. Препарат представляет срез межпозвоночного диска. На малом увеличении создаётся более наглядный обзор препарата. Волокнистый хрящ располагается на месте перехода сухожилия в гиалиновый хрящ, поэтому в своей структуре имеет черты сходные с ними. Волокнистую структуру хряща составляет параллельно ориентированные пучки коллагеновых волокон, между которыми расположены узкие прослойки, состоящие из аморфного вещества и одиночных хрящевых клеток. На границе волокнистого хряща с гиалиновым образуются типичные изогенные группы. ЗАДАНИЕ: различить пучки коллагеновых волокон, изогенные группы хрящевых клеток. Препарат №67. Грубоволокнистая костная ткань (жаберная крышка рыбы) Препарат не окрашен. При малом увеличении в толще кости найдите многочисленные костные полости (лакуны) веретенообразной или звездчатой формы, локализованные без определенного порядка, с остатками остеоцитов в них. Обратите внимание на костные канальцы, отходящие от костных полостей, и анастомозирующие между собой.. Между костными полостями и канальцами располагается неокрашенное, плотное межклеточное вещество, структура которого на данном препарате не выявляется. ЗАДАНИЕ: различить костные лакуны и костные канальцы. Препарат №76. Астроциты 13 Окраска: импрегнация азотнокислым серебром по методу Кахаля. Препарат представляет поперечный срез коры больших полушарий. Астроциты - изящные звездчатой формы клетки с большим количеством радиально ветвящихся отростков и слабо заметными ядрами. ЗАДАНИЕ: различить астроциты. Препарат №77. Эпендимоциты Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез спинного мозга. На малом увеличении в центре среза виден поперечный срез центрального канала. На большом увеличении рассмотрите эпендимоциты, выстилающие спинномозговой канал. Обратите внимание на эпителиоподобный характер расположения клеток, призматическую или грушевидную форму их тел. Полярность строения эпендимоцитов выражается в наличии ресничек на апикальном конце, а также овального ядра и слабо различимого отростка в базальной части. ЗАДАНИЕ: различить эпендимоциты, их реснички и ядра. Препарат №114а. Олигодендроглия Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет срез спинномозгового узла. При большом увеличении для наглядности выберите крупный нейрон, окружённый бесцветной щелевидной полостью. Эта полость называется мантийной капсулой нейрона, потому что она образована слоем мантийных клеток. По своей природе мантийные клетки являются олигодендроглиоцитами. При рутинной окраске гематоксилином и эозином цитоплазма глиоцитов остаётся бесцветной, а светлые округлые ядра хорошо видны. Следует отличать ядра глиоцитов от расположенных кнаружи уплощенных тёмных ядер фиброцитов, образующих соединительнотканную капсулу нейрона. рассмотрите олигодендроглиоциты, расположенные во внутреннем слое капсулы, окружающей нейроны. Тела клеток олигодендроглии (мантийные клетки или сателлиты) не окрашены, но хорошо видны их светлые, слабо базофильно окрашенные ядра округлой формы. Последние заметно отличаются от .вытянутых темных ядер соединительнотканных клеток наружного слоя капсулы. ЗАДАНИЕ: различить олигодендроглиоциты. Препарат №78. Безмиелиновые нервные волокна Окраска: гематоксилин - эозин. На малом увеличении найдите продольный срез расщепленного нерва, состоящего из безмиелиновых нервных волокон. Выберите изолированно лежащий, тонкий пучок нервных волокон и рассмотрите их строение. На большом увеличении в пучке безмиелиновых нервных волокон отчетливо видны лишь овальные, базофильно окрашенные ядра леммоцитов (шванновских клеток). Цитоплазма леммоцитов окрашивается ацидофильно, а расположенные в ней осевые цилиндры слабо различимы. ЗАДАНИЕ: различить ядра леммоцитов (шванновских клеток), цитоплазму леммоцитов. Препарат №83. Аксомышечный синапс - моторная бляшка Окраска: импрегнация азотнокислым серебром. На большом увеличении в толще языка встречаются моторные бляшки – моторные нервные окончания на поверхности мышечных волокон. С помощью микровинта можно проследить, как нервное волокно утрачивает миелиновую оболочку и разветвляется в виде 14 кисточки с утолщениями на концах. ЗАДАНИЕ: различить моторные бляшки. Препарат №82. Синаптические окончания на мотонейронах спинного мозга Окраска: импрегнация азотнокислым серебром. Препарат представляет поперечный срез спинного мозга. На большом увеличении выберите светлоокрашенный нейрон, на теле и дендритах которого различаются мелкие синаптические окончания в виде колечек, пуговок, булав и тому подобных структур. Синаптические окончания на теле нейрона называются аксосоматическими, на дендритах – аксодендритическими. ЗАДАНИЕ: различить аксосоматические и аксодендритические синаптические окончания. Препарат №84. Свободное нервное окончание типа кустика в соединительной ткани Окраска: импрегнация азотнокислым серебром. На большом увеличении в толще сосочка языка можно встретить свободное нервное окончание типа кустика. Вращая микровинт микроскопа, проследите, как нервное волокно постепенно теряет свою миелиновую оболочку, истончается и древовидно разветвляется на мелкие веточки, напоминающие по форме кустик. Некоторые веточки имеют на конце утолщение в виде пуговки или пластинки и могут проникать в эпителий. В области кустика глиоциты не выявляются. ЗАДАНИЕ: различить свободное нервное окончание типа кустика и его веточки. Препарат №84а. Свободное нервное окончание типа клубочка в соединительной ткани Окраска: импрегнация азотнокислым серебром. На большом увеличении в толще сосочка языка можно встретить свободное нервное окончание типа клубочка. Вращая микровинт микроскопа, проследите, как миелиновое волокно постепенно теряет свою миелиновую оболочку и превращается в безмиелиновое. Безмиелиновое нервное волокно имеет очень извитой ход, теряет леммоциты, ветвится и закручивается в форме клубочка. ЗАДАНИЕ: различить свободное нервное окончание типа клубочка. Препарат №85. Инкапсулированное нервное окончание (тельце Мейснера) Окраска: импрегнация азотнокислым серебром. Препарат представляет собой поперечный срез толстой кожи пальца. При большом увеличении в соединительнотканном сосочке дермы можно встретить инкапсулированное нервное окончание тельце Мейснера. Оно имеет овальную форму, покрыто снаружи тонкой соединительнотканной капсулой и содержит терминальное ветвление чувствительного нервного волокна окружённое олигодендроглиоцитами. С помощью микровинта можно проследить, как подходящее к тельцу нервное волокно утрачивает миелиновую оболочку, ветвится и терминальными разветвлениями осевого цилиндра заканчивается около темных ядер глиоцитов, образуя нежную сеть. ЗАДАНИЕ: различить тельце Мейснера, терминальное ветвление чувствительного нервного волокна, ядра глиоцитов, соединительнотканная капсула. Препарат №85а. Инкапсулированное нервное окончание (тельце Фатер-Пачини) Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез кожи. При малом увеличении в глубоких слоях дермы найдите округлое образование, имеющее слоистое строение. Это чувствительное тельце Фатер-Пачини. В центре тельца видно просветление - внутренняя колба, где заканчивается осевой цилиндр нервного волокна и видны ядра глиоцитов. С поверхности внутренняя колба покрыта концентрически 15 наслоенными соединительнотканными пластинками. Между пластинками видны вытянутые ядра фиброцитов. ЗАДАНИЕ: различить внутреннюю колбу, наружную капсулу. Препарат №181. Вегетативный (симпатический) нервный узел Окраска: импрегнация азотнокислым серебром. На малом увеличении осмотрите клеточный состав ганглия. В отличие от чувствительного ганглия здесь свойственны мультиполярные нейроны. Тела нейронов и их отростки окружены окрашенными в темно-коричневой цвет ядрами глиоцитов. Между клетками расположены пучки нервных волокон и кровеносные сосуды в тонких прослойках соединительной ткани. ЗАДАНИЕ: различить тела и отростки мультиполярных нейронов, ядра глиоцитов. Препарат №182. Развитие спинного мозга : Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез зародыша. Рекомендуется на малом увеличении микроскопа расположить развивающийся спинной мозг дорсальной стороной кверху. Внутри спинного мозга проходит продольная щель невроцеля (первичной спинномозговой полости). Невроцель выстилается слоем эпендимоглиоцитов, представленный ровным рядом ядер со слаборазвитой цитоплазмой. В боковых стенках нервной трубки к невроцелю примыкает плащевой слой, состоящий из нейробластов и спонгиобластов. Плащевой слой даёт начало серому веществу, в котором видны намечающиеся задние (более длинные) и передние рога. Кнаружи от плащевого слоя находится краевая вуаль - закладка белого вещества. Обратите внимание на хондрогенные островки, расположенные вокруг развивающегося спинного мозга и образующие закладку позвонка. Латерально от спинного мозга развиваются миотомы. ЗАДАНИЕ: различить невроцель, эпендимоглиоциты, плащевой слой, краевая вуаль, зачатки переднего и заднего рога. Препарат №116. Продолговатый мозг Окраска: железный гематоксилин. Препарат представляет поперечный срез продолговатого мозга на уровне нижних олив. Рекомендуется изучать препарат в сопоставлении со схемой строения продолговатого мозга. На малом увеличении можно определить структурные образования белого и серого вещества. В дорсальной части продолговатого мозга (в области дна IV желудочка) по бокам от средней линии найдите симметрично расположенные ядра подъязычного нерва (XII пара). Латеральнее расположены ядра блуждающего нерва (X пара), ядра нежного и клиновидного пучков, а также, состоящие из нервных волокон, верёвчатые тела, ниже которых находятся ядра и нисходящие корешки тройничного нерва. Не забывайте, что термином «ядра» в мозге именуются участки серого вещества с компактным расположением тел нейронов. В вентральной части продолговатого мозга обратите внимание на симметрично расположенные нижние оливы в виде извилистой пластинки клеточного строения, волокна подъязычного нерва, пирамиды, состоящие из нервных волокон. Центральную часть продолговатого мозга занимает, тонковолокнистая, мелкоклеточная ретикулярная субстанция и волокна медиальной петли. ЗАДАНИЕ: различить основные структурные образования серого и белого вещества продолговатого мозга. Препарат №118а. Шипики на дендритах нейронов Окраска: импрегнация серебром по Гольджи. Препарат представлен поперечным срезом коры больших полушарий головного 16 мозга. На малом увеличении следует выбрать участок серого вещества, содержащий крупные пирамидные клетки с максимально различимыми дендритами. При большом увеличении на поверхности дендритов могут быть видны многочисленные тонкие короткие боковые выросты разнообразной формы, называемые шипиками. Иногда можно увидеть контакт шипика с тончайшим терминальным ветвлением аксона, где образуется аксошипиковый синапс. Следует иметь ввиду, что численность шипиков широко вариирует в разных препаратах, в разных частях одного препарата, у разных нейронов, у разных дендритов одного нейрона, на разных участках одного дендрита. Численность шипиков также зависит от функционального состояния обьекта и техники гистологического препарирования. ЗАДАНИЕ: различить шипики на поверхности дендрита. Препарат №120. Развитие глаза Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет срез глаза на стадии гистогенеза оболочек глазного яблока. На малом увеличении рассмотрите основные части развивающегося глаза. Передняя часть глаза закрыта соприкасающимися складками - веками (развитие их еще не закончено), за которыми расположена не до конца сформированная роговица. В роговице уже наметились тонкие слои. К роговице вплотную прилегает хрусталик (отметьте отсутствие камер глаза), в котором хорошо видны хрусталиковые ядросодержащие волокна и однослойный кубический эпителий с тонкой капсулой на поверхности. Хрусталик уже погружен внутрь глаза, а лежащая за ним полость заполнена структурами развивающегося стекловидного тела. Из двухслойного глазного бокала уже развился пигментный эпителий и наметились другие слои сетчатки, но их дифференцировка не закончена. Из окружающей мезенхимы намечается образование сосудистой оболочки и ее отделов (радужка, цилиарное тело), а также склеры, переходящей в строму роговицы. ЗАДАНИЕ: различить основные части развивающегося глаза. Препарат №122. Веко (поперечный срез) Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез века ребенка. Целесообразно использование схемы строения века. На малом увеличении найдите: наружную (кожную) часть века, характеризующуюся неровной складчатой поверхностью; внутреннюю гладкую или конъюнктивальную часть; край века, в котором видны ресницы. Кожная часть образована тонкой кожей. Конъюнктивная поверхность века покрыта многослойным плоским и многослойным призматическим неороговеающим эпителием. Под ним лежит розового цвета собственный соединительнотканный слой, переходящий в так называемую тарзальную пластинку, состоящую из плотной соединительной ткани. В толще тарзальной пластинки найдите срезы концевых отделов модифицированных сальных желёз (мейбомиевых желёз). По краю века видны желто-бурые срезы корней волос (ресниц) и темноокрашенные стенки эпителиальных волосяных влагалищ. Вблизи корней волос встречаются небольшие сальные железы. Между корнями ресниц располагаются мелкие округлые потовые железы (железы Моля). В толще века видны пучки поперечно-полосатых мышечных волокон. ЗАДАНИЕ: различить основные части века и их структурные компоненты: виды покровного эпителия, виды желёз, корень ресницы, тарзальную пластинку. Препарат №101б. Артериоло-венулярный анастомоз эпителиоидного типа Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез простого истинного артериоло-венулярного анастомоза эпителиоидного типа, у которого в средней оболочке артериального сегмента имеется внутренний слой необычных клеток. 17 На малом увеличении найдите нужный участок среза, а на большом увеличении рассмотрите его. Обратите внимание, что эти клетки, в отличие от гладкомышечных, имеют округлую форму, гомогенную светлую цитоплазму и крупные овальные ядра. За внешнее сходство с эпителием они получили название эпителиоидных. ЗАДАНИЕ: различить эпителиоидные клетки. Препарат №104. Эластические элементы в стенке аорты Окраска: орсеин. На малом увеличении поперечного среза стенки аорты найдите три оболочки: интиму, медиа и адвентицию. Обратите внимание на соотношение толщины оболочек и интенсивность их окраски, что обусловлено степенью развития эластических элементов. Отметьте значительное преобладание их в средней оболочке сосуда. Лежащие между ними гладкомышечные клетки остаются светлыми, неокрашенными. В светлоокрашенных внутренней и наружной оболочках расположены тонкие эластические волокна различного направления. ЗАДАНИЕ: различить оболочки сосуда, эластические элементы. Препарат №106а. Клапан сердца Окраска: анилиновый синий - орсеин. В препарате - поперечный срез атриовентрикулярного клапана сердца. Клапан представляет собой тонкую пластинку плотной волокнистой соединительной ткани, с обеих сторон покрытую эндотелием. Желудочковая сторона клапана неровная, содержит выросты; под эндотелием обнаруживаются скопления коллагеновых волокон синего цвета. На предсердной стороне под эндотелием видно густое сплетение тонких эластических волокон коричнево-фиолетового цвета и пучки гладких мышц. Гладкомышечные клетки в значительном количестве обнаруживаются также в основании клапана. ЗАДАНИЕ: различить стороны атриовентрикулярного клапана сердца по характерным особенностям строения. Препарат №107. Атипические мышечные клетки сердца Окраска: гематоксилин - эозин. В препарате – внутренняя часть поперечного среза стенки сердца коровы. При большом увеличении под эндокардом рассмотрите пучок поперечно срезанных атипичных мноцитов. Они лежат компактно и отличаются от типичных миоцитов более крупными размерами и бледной окраской саркоплазмы. Поперечно срезанные атипичные сердечные миоциты характеризуются овальной или неправильной формой. Саркоплазма имеет светлорозовую окраску и содержит небольшое количество миофибрилл, расположенных в клетках без строгой локализации. Ядра атипичных миоцитов неправильной угловатой формы и расположены эксцентрично. ЗАДАНИЕ: различить атипичные сердечные миоциты. Препарат №109а. Венозные синусы селезенки Окраска: гематоксилин. На малом увеличении в красной пульпе селезенки (последняя освобождена от кровяных элементов) видны широкие полости, выстланной эндотелием. Венозные синусы внешне отличаются от гемокапилляров лишь значительно большим просветом. ЗАДАНИЕ: различить венозные синусы. Препарат №126. Ноготь Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет собой продольный срез ногтевой фаланги пальца руки ребенка. На малом увеличении в толще среза видна хрящевая закладка ногтевой фаланги. 18 Ладонная поверхность пальца покрыта толстой кожей. На тыльной поверхности пальца расположен ноготь в виде светлоокрашенной плотной роговую пластинку, лежащей на ногтевом ложе. Ногтевое ложе у основания ограничено кожной складкой, называемой задним ногтевым валиком. Между ногтевым валиком и ногтевым ложем найдите заднюю ногтевую щель, где можно проследить переход росткового слоя эпителия ногтевого валика в эпителий ногтевого ложа (гипонихий). Роговой слой валика переходит в роговое вещество ногтя и частично покрывает его сверху (эпонихий). Отметьте различие в окраске росткового и рогового слоев эпителия заднего валика. В ногтевой пластинке найдите корень ногтя, лежащий в задней ногтевой щели, тело ногтя, расположенное на эпителии ногтевого ложа, и свободный край, выступающий над передней поверхностью фаланги. Соединительная ткань, лежащая под эпителием ногтевого ложа отличается плотным расположением волокон, отсутствием сосочков и потовых желез, обильным кровоснабжением. ЗАДАНИЕ: различить части ногтевой пластинки, ногтевой валик, гипонихий, эпонихий. Препарат №158. Легкое плода Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет собой срез легкого плода. При малом увеличении рассмотрите мелкие альвеолы, выстланные однослойным кубическим эпителием, толстые межальвеолярные перегородки, содержащие соединительную ткань с кровеносными сосудами и нервами. Мелкие бронхи имеют широкий просвет и выстланы однослойным кубическим или циллиндрическим эпителием, местами приобретающим двурядный характер. Бронхи среднего калибра выстланы многорядным эпителием, их стенки также недостаточно дифференцированы. Характерной особенностью недышавшего легкого являются спавшиеся безвоздушные альвеолы. ЗАДАНИЕ: различить нерасправленные альвеолы, недоразвитые бронхи разного калибра. Препарат №129д. Желобоватый сосочек языка Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет срез языка через желобоватые сосочки. На малом увеличении видны соединительнотканная основа желобоватого сосочка и покрывающий его многослойный плоский эпителий. Слизистая оболочка вокруг сосочка называется валиком, потому что приподнята так, что находится на одном уровне с верхней поверхностью сосочка. Сосочек окружён глубоким щелевидным жёлобом, отделяющим его от валика. На большом увеличении видно, что верхняя поверхность сосочка покрыта ороговевающим эпителием, а боковые поверхности и валики покрыты неороговевающим эпителием. На боковых поверхностях сосочка эпителий истончается, переходит на дно желобка, окружающего сосочек и далее на стенку окаймляющего валика. В глубине желобка, в эпителии сосочка и валика выделяются светлоокрашенные вкусовые луковицы. В луковицах можно различить ядра поддерживающих (опорных) и вкусовых клеток, составляющих вкусовую луковицу. Соединительнотканная основа образует высокие вторичные соединительнотканную сосочки, глубоко вдающиеся в толщу эпителия. ЗАДАНИЕ: различить вкусовые луковицы в эпителии сосочка и окружающего валика. Препарат №130. Вкусовые луковицы в листовидных сосочках языка Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет срез языка через листовидные сосочки. На большом увеличении в толще многослойного плоского неороговевающего эпителия на боковых поверхностях сосочка хорошо видны светлые овальные образования - вкусовые почки или луковицы. В луковицах можно различить ядра поддерживающих (опорных) и вкусовых 19 клеток, составляющих вкусовую луковицу. ЗАДАНИЕ: различить вкусовые луковицы. Препарат №137. Переход пищевода в желудок Окраска: гематоксилин - эозин. В препарате - продольный срез пищеварительной трубки на границе между пищеводом и кардиальным отделом желудка. На малом увеличении в этом участке многослойный плоский эпителий пищевода резко заменяется однослойным призматическим эпителием желудка. Поверхность слизистой оболочки пищевода гладкая, тогда как слизистая оболочка желудка имеет многочисленные желудочные ямки. В собственной пластинке слизистой оболочки пищевода здесь располагаются кардиальные железы, сходные с кадиальными железами желудка. В подслизистой оболочке кардиального отдела желудка на некотором протяжении прослеживаются собственные железы пищевода. Внутренний циркулярный слой мышечной оболочки пищевода здесь образует улщение – сфинктер. Мышечная оболочка желудка в этой области усложняется, приобретая дополнительный внутренний косой слой гладких мышц. Наружная оболочка пищевода здесь, также как у желудка, покрывается мезотелием и называется серозной оболочкой. ЗАДАНИЕ: различить местные особенности пищевода: кардиальные железы, сфинктер, мезотелий; резкую смену выстилающего эпителия. Препарат №139. Пилорический отдел желудка Окраска: гематоксилин - эозин. На малом увеличении на поперечном срезе стенки пилорического отдела желудка видны четыре оболочки: слизистая, подслизистая, мышечная, серозная. В отличие от фундального отдела здесь более глубокие желудочные ямки, в которые открываются пилорические железы желудка. Пилорические железы не столь густо расположены, как фундальные. Они расположены группами, разделенными значительными прослойками рыхлой соединительной ткани собственной пластинки слизистой. В пилорических железах значительно больше слизистых клеток, чем в фундальных. Подслизистая основа в пилорическом отделе несколько тоньше, чем в дне желудка, но также богато кровоснабжается и иннервируется. Мышечная оболочка состоит только из 2-х слоев, причём внутренний циркулярный слой становится более развит. Серозная оболочка имеет обычное строение. ЗАДАНИЕ: различить местные особенности желудка: желудочные ямки, пилорические железы, двуслойная мышечная оболочка, мезотелий. Препарат №143а. Ацидофильные клетки Панета в криптах тонкого кишечника Окраска: гематоксилин - эозин. На большом увеличении на дне крипт тонкого кишечника видны лежащие поодиночке или группами апикальнозернистые клетки Панета, апикальный полюс которых содержит крупные, резко оксифильные гранулы. На базальном полюсе расположено крупное округлое ядро. ЗАДАНИЕ: различить апикальнозернистые клетки Панета. Препарат №142. Нервное сплетение в стенке тонкой кишки Окраска: импрегнация азотнокислым серебром. В препарате – поперечный срез тонкой кишки. На малом увеличении в мышечной оболочке видно нервное сплетение Ауэрбаха, которое представлено сетевидно 20 расположенными пучками чёрно-коричневых нервных волокон. В толще пучков среди волокон небольшими скоплениями расположены тела мультиполярных нейронов. ЗАДАНИЕ: различить пучки нервных волокон и мультиполярные нейроны в толще мышечной оболочки. Препарат №148а. Клетки панкреатического островка Окраска: метод Маллори. Препарат представляет срез поджелудочной железы. На малом увеличении в толще долек выберите достаточно демонстративный панкреатический островок. На большом увеличении в островке различаются два основных вида клеток. Базофильные клетки (В-клетки) составляют большинство. Ацидофильные клетки (А-клетки) содержатся в меньшем количестве и расположены, в основном, на периферии островка. Ядра тех и других клеток окрашены в красный цвет. Между клеточными группами видны гемокапилляры. ЗАДАНИЕ: различить В-клетки и А-клетки, гемокапилляры. Препарат №160а. Инъецированные сосуды щитовидной железы Окраска: гематоксилин - эозин, инъекция сосудов черной тушью. На малом увеличении в препарате видны различной величины фолликулы щитовидной железы, окруженные сетью чёрных кровеносных капилляров, т. к. в кровеносное русло введена черная тушь. ЗАДАНИЕ: различить развитую капиллярную сеть. Препарат №161. Околощитовидная железа Окраска: гематоксилин - эозин. На большом увеличении видно, что паренхима паращитовидной железы состоит из неупорядоченных тяжей эпителиальных клеток, плотно расположенных между собой. В составе тяжей различаются два вида клеток: главные клетки и оксифильные клетки. Главные клетки имеют небольшие размеры, крупное ядро и бледную слабооксифильную цитоплазму. Оксифильные клетки отличаются более крупными размерами, небольшим ядром и яркорозовой цитоплазмой. Обратите внимание, что железо пронизана большим количеством кровеносных капилляров. ЗАДАНИЕ: различить главные клетки, оксифильные клетки, гемокапилляры. Препарат №164. Жировые включения в клетках коры надпочечника (суданофобный слой) Окраска: гематоксилин - шарлах рот. Препарат представляет срез надпочечника, в клетках которого гистохимическим методом выявлено содержание нейтральных жиров. На малом увеличении в срезе различаются корковое и мозговое вещество. Корковое вещество окрашено в различные оттенки красного или оранжевого цвета. Обратите внимание, что концентрация липидов в различных зонах коркового вещества неодинакова. В клубочковой зоне липиды содержатся в небольшом количестве в виде мелких капель. Этот слой на препарате имеет светло-оранжевую окраску. На границе между клубочковой и пучковой зонами в виде небольшой бесцветной полосы расположены лишенные липидных включений клетки суданофобного слоя. В наружной части пучковой зоны обнаруживаются чрезвычайно богатые липидами клетки, поэтому эта зона видна в виде ярко-оранжевой полосы. В глубоких частях пучковой зоны количество липидов в клетках заметно снижается, а в сетчатой зоне снова нарастает. В богатых липидами зонах надпочечников включения видны в виде крупных или средней величины капель, занимающих большую часть цитоплазмы. ЗАДАНИЕ: различить локализацию жира в клетках и разнообразие её концентрации 21 в разных зонах железы. Препарат №166. Накопление краски в клетках канальцев почки Окраска: гематоксилин, инъекция метиленовой сини. Данный препарат приготовлен путем прижизненного введения краски (метиленовой сини) в кровеносное русло животного с последующей окраской срезов гематоксилином. На малом увеличении в корковом веществе почки видны канальцы нефрона, содержащие введенную краску. Канальцы мозгового вещества краски не содержат. На большом увеличении в корковом веществе встречаются окрашенные метиленовой синью канальцы и неокрашенные. Таким образом можно выявить проксимальные извитые канальцы, выполняющие функцию реабсорбции первичной мочи. ЗАДАНИЕ: различить проксимальные извитые канальцы. Препарат №167. Мочеточник Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез мочеточника. На малом увеличении можно различить оболочки стенки мочеточника: слизистую, подслизистую, мышечную и адвентицию. Слизистая оболочка собрана в глубокие складки и выстлана переходным эпителием. Соединительная ткань собственного слоя слизистой без резкой границы переходит в подслизистую, поэтому часть гистологов не выделяет подслизистую оболочку. Хорошо развитая мышечная оболочка образована гладкомышечной тканью. На большем протяжении мочеточника, как в данном препарате, мышечная оболочка состоит из двух слоёв, внутреннего продольного и наружного циркулярного. Вместе с тем оба мышечных слоя имеют дополнительное спиральное направление. Снаружи мочеточник покрыт адвентицией. ЗАДАНИЕ: различить оболочки и слои стенки мочеточника. Препарат №171. Семявывыносящий проток Окраска: гематоксилин - эозин. На малом увеличении в поперечном срезе семявыносящего протока видны три оболочки: слизистая, мышечная и адвентиция. Звездчатой формы просвет выстлан двухрядным призматическим эпителием. Под эпителием расположен собственный слой слизистой оболочки. Мышечная оболочка состоит из трех слоев гладкомышечной ткани: внутреннего продольнго, средний циркулярного, наружного продольного. С поверхности семяпровод покрыт адвентицией, образованной рыхлой соединительной тканью. ЗАДАНИЕ: различить оболочки и слои стенки семявыносящего протока. Препарат №173б. Желтое тело беременности Окраска: гематоксилин - эозин. На малом увеличении рассмотрите желтое тело беременности (стадия расцвета). Обратите внимание на очень крупные светлые лютеиновые клетки, на многочисленные гемокапилляры в тончайших прослойках соединительной ткани вокруг каждой клетки. ЗАДАНИЕ: различить лютеиновые клетки, гемокапилляры. Препарат №173п. Яичник девочки Окраска: гематоксилин - эозин. На малом увеличении прежде всего следует рассмотреть общую организации яичника. На поверхности видна серозная оболочка, а под ней - белочная оболочка. В яичнике можно различить корковое и мозговое вещество. В корковом веществе различаются многочисленные примордиальные фолликулы, а 22 также некоторое количество растущих фолликулов (первичные, вторичные). В яичнике девочки возможно обнаружение нечасто встречаемых третичных фолликулов. Однако полного созревания фолликула и овуляции не происходит, поэтому желтое тело в яичнике девочки отсутствует. Атретические тела встречаются редко. ЗАДАНИЕ: различить основные части яичника, примордиальные фолликулы, растущие фолликулы. Препарат №174. Яйцевод Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез яйцевода. На малом увеличении в стенке яйцевода видны три оболочки: слизистая, мышечная и серозная. Просвет яйцевода почти полностью заполнен многочисленными ветвящимися складками слизистой оболочки, оставляя неправильной формы щелевидную полость. Поверхность слизистой оболочки выстлана однослойным мерцательным призматическим эпителием, в котором встречаются бокаловидные клетки. Основу складок образует рыхлая соединительная ткань собственной пластинки слизистой. Мышечная оболочка состоит из двух слоев гладкомышечной ткани: внутреннего циркулярного и наружного продольного. В межмышечном слое хорошо развиты кровеносные сосуды. Серозная оболочка имеет обычное строение. ЗАДАНИЕ: различить оболочки и слои стенки, складки слизистой, сосуды. Препарат №176. Влагалище женщины Окраска: гематоксилин - эозин. Препарат представляет поперечный срез стенки влагалища. На малом увеличении видны три оболочки: слизистая, мышечная и адвентиция. Слизистая покрыта многослойным плоским неороговевающим эпителием, под которым залегает мощная соединительнотканная собственная пластинка слизистой. Подслизистого слоя в стенке не различают. Мышечная оболочка содержит два слоя гладкомышечной ткани: внутренний циркулярный и наружной продольный. Обращает на себя внимание обилие кровеносных сосудов во всех оболочках, но самые крупные проходят в мышечном слое. В адвентиции, состоящей из рыхлой соединительной ткани, обнаруживается большое количество жировых клеток. ЗАДАНИЕ: различить оболочки и слои стенки влагалища.