ЗАЯВКА НА ПРОВЕДЕНИЕ КОСМИЧЕСКОГО ЭКСПЕРИМЕНТА НА РОССИЙСКОМ СЕГМЕНТЕ МКС 1. Наименование КЭ: «Оптимизация свойств бактериальных штаммов-продуцентов путём экспозиции в условиях орбитального космического полёта и последующей наземной селекции». Шифр: «Продуцент» 2. Полное наименование и реквизиты предприятия-постановщика КЭ: Открытое акционерное общество «Биопрепарат» Юридический адрес:111033, г. Москва, ул. Самокатная, д. 4а Почтовый адрес: 127299, г. Москва, ул. Клары Цеткин, д. 4 3. Наименование тематической секции КНТС: Секция 1 «Космическая биология и физиология», подсекция «Космическая биотехнология» 4. Данные о научном руководителе КЭ: Научный руководитель: Евстигнеев Валентин Иванович Место работы: ОАО «Биопрепарат». Должность: первый заместитель генерального директора ОАО «Биопрепарат» Ученая степень и звание: кандидат медицинских наук, профессор Почтовый адрес: 127299, г. Москва, ул. Клары Цеткин, д. 4 5. Ответственный исполнитель: Зеров Юрий Петрович, ООО «Протеиновый контур», начальник отдела, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник. Почтовый адрес: 194292, г. Санкт-Петербург, ул. Домостроительная, дом 4, корп.3, 6. Участники КЭ: ООО «Протеиновый контур», Почтовый адрес: ООО «Протеиновый контур», 194292, г. Санкт-Петербург, ул. Домостроительная, дом 4, корп.3, литер В РКК «Энергия» , 141070, г. Королев, ул. Ленина , 4-а НПП «БиоТехСис» Почтовый адрес: 111394, г. Полимерная, д.8, Юридический адрес: 111141, г. Москва, Зеленый проспект, д.6, корп.2 7. Желательные и технически возможные сроки проведения КЭ: Эксперимент выполняется в два этапа. Число сеансов по первому этапу – 4, число сеансов по второму этапу – 6, начиная с 2015г. по 2020г. 8. Краткое описание КЭ: Цель эксперимента - Получение штаммов-продуцентов БАВ с оптимальными свойствами по результатам экспозиции в условиях космического полета: повышенной продуктивностью, генетической стабильностью, улучшенными ростовыми характеристиками. Анализ литературных данных и собственных космических экспериментов на ОС «МИР» и РС МКС с культурами бактерий показал, что именно воздействие уникальных условий космического полёта (прежде всего, микрогравитации) обеспечивает накопление в бактериальной популяции клеток продуцента с улучшенными характеристиками Применение методов наземной селекции позволяло выделять из популяции, подвергнутой экспозиции в космическом эксперименте, варианты штаммов с улучшенными ростовыми характеристиками и повышенной продуктивностью. Это означает, что экспозиция в условиях орбитального полета с последующей селекцией на Земле можно использовать в качестве метода получения линий штаммов - продуцентов с повышенным числом копий плазмид, контролирующих синтез целевых продуктов. Это приведет к улучшению, по крайней мере, двух характеристик штаммов - продуктивности и генетической стабильности. Так, в трёх последовательных космических экспериментах продуктивность штамма– продуцента Cu,Zn-супероксиддисмутазы человека (СОД) была увеличена почти на порядок. В итоге работы был получен генетически стабильный штамм – суперпродуцент СОД с уровнем продуктивности более 1,0 г СОД с 1 литра культуры. На микроорганизмы, в первую очередь, действуют обусловленные микрогравитацией факторы: отсутствие всех видов конвекции, обусловленных гравитацией: термоконвекции, концентрационной и плотностной конвекции, а также седиментации клеток. При этом не учитываются электромагнитные эффекты, обусловленные движением клетки в магнитном поле Земли и обусловленные этим движением токами в среде и внутри клетки, а также изменениями поверхностного заряда клетки. Поскольку и сама клетка, и внутриклеточные структуры электрически заряжены, роль эффектов, обусловленных магнитным полем, может быть не менее важной, чем роль микрогравитации. Предварительные результаты, полученные в эксперименте “Биомагнистат” на ОС «МИР» показали, что экранирование геомагнитного поля улучшает ростовые характеристики культур рекомбинантных штаммов, подвергнутых экспозиции в условиях орбитального полета, без снижения сегрегационной стабильности плазмид. Необходимость проведения исследований в реальных условиях Космоса определяется целью и задачами эксперимента и диктуется невозможностью имитировать на Земле совокупность действия ФКП, присущих орбитальному полету и космическому пространству, на свойства культур штаммов бактерий – продуцентов рекомбинантных белков с полезными свойствами. В КЭ будут использоваться рекомбинантные штаммы – продуценты белков, предназначенных для создания новых лекарственных препаратов. Так в настоящее время на различных стадиях разработки находятся штаммы - продуценты: стафилококкового белка А, специфических эндопротеаз, эритропоэтина, интерлейкина-2 человека и т.д. Для реализации эксперимента необходимо оборудование: укладка «Биоэкология» и магнитоизолирующий контейнер «Биомагнистат-М». Укладка «Биоэкология» БТС.035.000.000, разработана по БТС.035.000.000.Д2, изготовитель НПП БиоТехСис. На аппаратуру «Биомагнистат-М» должна быть разработана и выпущена конструкторская документация. Для достижения поставленной цели (получение штаммов-суперпродуцентов) КЭ реализуется в 2 этапа. На первом этапе должна использоваться укладка «Биоэкология». Укладка «Биоэкология» в составе 4-х пеналов, предназначена для изучения длительного воздействия космоса на микробиологические объекты, используемые в сельском хозяйстве, ветеринарии и медицине и получения высокоэффективных штаммов- продуцентов БАВ. При реализации КЭ на втором этапе по исследованию влияния электромагнитных полей на рекомбинантные штаммы-продуценты БАВ используются пенал укладки «Биоэкология» и аппаратура «Биомагнистат-М». НА «Биомагнистат-М» представляет собой магнитоизолирующий контейнер с биообразцами, предназначенный для исследования влияния электромагнитных полей на ростовые характеристики, сегрегационную стабильность и продуктивность рекомбинантных штаммовпродуцентов БАВ . Для проведения КЭ на борт доставляются пенал укладки «Биоэкология» и контейнер «Биомагнистат», заправленные на Земле образцами культур рекомбинантных штаммов в герметически закрытых микропробирках. Образцы из пенала и контейнера подвергаются экспозиции по согласованной циклограмме. Аналогичные операции осуществляется параллельно на Земле. Основные ожидаемые результаты КЭ и их предполагаемое использование: -варианты (линии) штаммов-продуцентов БАВ с улучшенными свойствами: повышенной продуктивностью, генетической стабильностью, ростовыми характеристиками; -фундаментальные данные о роли геомагнитного поля в эффекте условий орбитального космического полета на генетические и физиологические свойства культур рекомбинантных штаммов микроорганизмов, а также данные об оптимальных условиях получения исходного материала для наземной селекции вариантов штаммов - продуцентов БАВ с повышенной продуктивностью и генетической стабильностью. Результаты КЭ найдут практическое применение при производстве рекомбинантных препаратов в интересах медицины и ветеринарии и во вновь создаваемых технологических процессах. Широкий набор штаммов позволит изучить эффект условий космического полёта на культуры продуцентов различных белков и продемонстрировать универсальность методического подхода, включающего экспозицию на МКС и последующую наземную селекцию, для получения рекомбинантных штаммов-продуцентов с улучшенными технологическими свойствами. Новизна исследований по оптимизации свойств бактериальных штаммов - продуцентов рекомбинантных белков путём экспозиции в условиях орбитального космического полета и экранированием магнитного поля и последующей наземной селекции будет также обеспечена подбором новых штаммов-продуцентов, с которыми работ в России и за рубежом не проводилось.