МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЦВЕТКОВ

Фармация
УДК 615.322:57.08
МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЦВЕТКОВ
БЕССМЕРТНИКА ПЕСЧАНОГО
А.В. Куркина, Л.В. Тарасенко, В.М. Рыжов,
ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет»
Куркина Анна Владимировна – e-mail: Annushkae@yandex.ru
Изучены анатомические характеристики цветков бессмертника песчаного – Helichrysum arenarium (L.)
Moench. – с использованием цифровой микроскопии. Разработана модифицированная методика
микроскопического анализа сырья данного растения. Определено, что на эпидермисе листочка
обвертки содержатся блестящие, по форме четырехугольные монокристаллы призматического вида.
Выявленные и уточненные анатомические характеристики включены в проект фармакопейной статьи
«Бессмертника песчаного цветки».
Ключевые слова: бессмертник песчаный, цветки,
Helichrysum arenarium (L.) Moench., анатомические признаки.
The anatomic characteristics of flowers of Helichrysum arenarium (L.) Moench. were studied by using of the
digital microscopy. There was development the modification methodic of the microscopically analysis of this
drugs. There was shown that on the epidermis of the tepal of husk are contained bright single crystals of prismatic form. The revealed and precise anatomic characteristics were included in project pharmacopeial monograph on drug material «Helichrysum arenarium flowers».
Key words: Helichrysum arenarium (L.) Moench., flowers, anatomic characteristics.
Введение
Цветки и препараты бессмертника песчаного (настой,
жидкий экстракт, «Фламин», желчегонные сборы) применяются в медицинской практике в качестве желчегонных лекарственных средств [1, 2], однако методики анализа лекарственного растительного сырья (ЛРС) «Бессмертника песчаного цветки» не соответствуют современным требованиям
фармакопейного анализа. Так, в фармакопейной статье на
данное сырье (ст. 9 ГФ СССР XI издания) раздел «Качественные
реакции» представлен только качественной реакцией на
флавоноиды [3], которая не позволяет определять отдельные компоненты, характерные для данного растения. Кроме
того, в разделе «Количественное определение» фармакопейная методика, по результатам наших исследований, дает
завышение результатов по содержанию флавоноидов приблизительно в 2-3 раза [4, 5]. Ранее нами разработана методика количественного определения суммы флавоноидов с
использованием дифференциальной спектрофотометрии в
присутствии Государственного стандартного образца изосалипурпозида [4, 5]. Анатомо-морфологическое описание
цветков бессмертника песчаного представлено в фармакопейной статье и в литературных источниках [3, 6, 7], однако
70
микроскопические признаки данного сырья изучены в недостаточной степени. В этой связи нами были поставлены задачи по уточнению микроскопических признаков цветков бессмертника песчаного с использованием современной приборной базы.
Цель исследования
Целью настоящей работы является исследование анатомических признаков цветков бессмертника песчаного с
помощью цифровой микроскопии.
Материалы и методы. Объектами настоящего исследования служили цветки бессмертника песчаного, произрастающего в Самарской области, а также промышленные
образцысырьяпроизводстваОАО«Красногорсклексредства»
(Московская обл.) и ООО ПКФ «Фитофарм» (г. Анапа,
Краснодарский край). Для этого было выполнено более 30
микрофотографий. Для приготовления микропрепарата
сырья применяли способ горячего размачивания цветков
бессмертника песчаного при кипячении и сравнительный
анализ этого сырья с сухим образцом сырья. Согласно стандартной методике (ГФ XI издания, т. 1, стр. 278) при анализе
сырья под микроскопом с применением кипячения цветков в
5%-м растворе едкого натра наблюдается сильное разбухание
№ 4 (13) ноябрь 2010 МЕДИЦИНСКИЙ АЛЬМАНАХ
Фармация
оболочек и вымывание содержимого клеток. В этой связи
нами предложена модифицированная методика, с помощью которой анализировалось сырье, предварительно
обработанное 5%-м раствором едкого натра при выдерживании на водяной бане в течение 5–10 мин. (без кипячения),
чем достигалось оптимальное просветление изучаемого
образца. Жидкость сливали, помещали содержимое в чашку
Петри, заливали смесью вода – этиловый спирт (1:1) и
выдерживали в данном растворе около 1 часа. Для дальнейшего микроскопического анализа исследуемый материал
помещали на предметное стекло. Образец накрывали
покровным стеклом и нагревали до удаления пузырьков
воздуха. Сырье изучали с использованием цифрового
микроскопа марки «DM-111 – Digital Microscopy» (Motic
Microscopes) при увеличении объектива х4, х10, х40, х100.
Результаты и их обсуждение
С учетом обобщенных литературных данных микроскопическое исследование позволило выявить следующие диагностические признаки сырья бессмертника песчаного. Завязи цветка
имеют кольцевое основание, образованное прямоугольными
толстостенными клетками. Клетки вытянуты в горизонтальной
плоскости (перпендикулярно к завязи). Стенки клеток с хорошо развитой кутикулой, утолщены больше снаружи кольца
(рис. 1). На поверхности завязи видны многочисленные прозрачные многоклеточные волоски. Волоски густо покрывают
завязь, они наклонены косо вверх к венчику и наполнены
неструктурированным содержимым (рис. 2). Волосок состоит,
как правило, из двух клеток основания, небольших по сравнению с конечной клеткой. Хохолок на верхушке завязи цветка
состоит из многочисленных, крупных, торчащих вверх или
слегка отклоненных и сросшихся друг с другом у основания
щетинок (рис. 3). На некоторых щетинках видны зерна пыльцы. Щетинки хохолка слагаются из длинных прозенхимных
клеток. В сухом сырье в полостях этих клеток обнаруживаются
правильные ряды включений, лежащие вдоль вытянутой оси
клеток (рис. 4). Это блестящие, по форме четырехугольные
монокристаллы призматического вида, обладающие светоотражающей способностью. Форма данных образований однородная. В размоченном сырье бессмертника песчаного данные включения нами не наблюдались. Микроскопическое
исследование околоцветника показало, что на зубцах трубчатого венчика имеется хорошо выраженная бахромчатость,
которая слагается из сосочковидных выростов. По всей поверхности околоцветника, его трубки и отгиба, у краевых и у срединных цветков встречаются эфиромасличные железки (рис.
5), здесь они немногочисленны; их больше встречается на
отгибе венчика. Строение эфиромасличных железок (железистых волосков) типично для семейства сложноцветных. Они
многоклеточные, их выделительные клетки расположены
двумя рядами в 3–4 яруса (вид сбоку); при рассматривании
сверху железки видны в виде овальных образований с поперечной перегородкой, заполненные желтоватым содержимым. Наряду с этими трихомами на трубке венчика встречает-
71
ся также множество головчатых волосков с одноклеточной
головкой на 12–14-клеточной ножке. На венчике обнаружена
пыльца, экзина которой шиповатая.
Микроскопический анализ листочков обвертки показал,
что эпидермис листочка обвертки с поверхности состоит из
вытянутых клеток с заметными порами в клеточных стенках.
В суженной части листочки обвертки опушены. Волоски опушения многочисленные, по форме бичевидные, простые
(рис. 6). Они состоят из нескольких клеток – одной-двух
коротких базальных клеток и одной очень длинной конечной. Здесь также встречаются описанные ранее эфиромасличные железки.
Таким образом, приведенный видеоряд иллюстраций,
полученных в ходе микроскопического анализа, дает представление о новых технических возможностях в способах
стандартизации ЛРС. Анализ микроскопических признаков с
помощью цифрового микроскопа и модифицированной
методики позволил более детально, с большим разрешением рассмотреть анатомические признаки сырья бессмертника песчаного, уточнить и проанализировать его диагностические особенности, зафиксировать их изображение на
электронном носителе в виде цветных иллюстраций.
РИС. 1.
РИС. 2.
РИС. 3.
РИС. 4.
РИС. 5.
РИС. 6.
Кольцевое основание цветка
(кольцо клеток в основании
завязи) (х40).
Хохолок на верхушке завязи
цветка (х40).
Эфиромасличные железки и
пыльца на венчике цветка
(х400).
Волоски завязи цветка (х100).
Кристаллы щетинок (х1000).
Эпидермис листочка обвертки
(х400).
№ 4 (13) ноябрь 2010 МЕДИЦИНСКИЙ АЛЬМАНАХ
Фармация
Выводы
1. Проведено микроскопическое исследование цветков
бессмертника песчаного с использованием цифровой
микроскопии. Разработана модифицированная методика
микроскопического анализа сырья данного растения.
2. Уточнены и выявлены новые диагностические признаки
данного лекарственного растительного сырья, заключающиеся в наличии на эпидермисе листочка обвертки блестящих,
по форме четырехугольных монокристаллов призматического вида, обладающих светоотражающей способностью.
3. Результаты анатомического исследования нашли отражение в разделе «Микроскопия» проекта фармакопейной
статьи на сырье «Бессмертника песчаного цветки».
72
ЛИТЕРАТУРА
1.Куркин В.А. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармацевтических
вузов (факультетов). 2-е изд., перераб. и доп. Самара: ООО «Офорт»; ГОУ
ВПО «СамГМУ Росздрава», 2007. 1239 с.
2. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав,
использование; Семейство Asteraceae (Compositae). СПб.: Наука, 1993. С. 120–123.
3. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа.
Лекарственное растительное сырье. /МЗ СССР. 11-е изд., доп. М.: Медицина,
1989. 400 с.
4. Куркина А.В. Разработка новых подходов к химической стандартизации
сырья и препаратов бессмертника песчаного. //Труды научно-практической
конференции «Фармация из века в век». Санкт-Петербург. 2008. С. 76–79.
5. Куркина А.В. Новые подходы к стандартизации сырья бессмертника
песчаного - Helichrysum arenarium (L.) Moench. //Традиционная медицина.
2010. № 1. С. 45–49.
6. Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям по
фармакогнозии. М.: «Медицина», 1977. С. 152–153.
7. Никитин А.А., Панкова И.А. Анатомический атлас полезных и некоторых
ядовитых растений. Ленинград, 1982. 763 с.
№ 4 (13) ноябрь 2010 МЕДИЦИНСКИЙ АЛЬМАНАХ