011387 - 1 - Болезнь Паркинсона возникает как результат

011387
Болезнь Паркинсона возникает как результат хронической, прогрессирующей дегенерации нейронов,
причина которой до настоящего времени еще полностью не выяснена. Клинически она проявляется в форме
главных симптомов дрожаний в состоянии покоя, ригидности, брадикинезии и постуральной нестабильности.
В качестве лекарственных средств для облегчения моторных симптомов, главным образом, используют леводопу, агонисты дофамина, такие как, например, ротиготин, прамипексол, бромокриптин, ропинирол, каберголин, перголид, апоморфин и лизурид, антихолинергичекие агенты, N-метил-D-аспартатные (NMDA) антагонисты, β-блокаторы, а также ингибитор моноаминоксидазы-В (МАО-В) селегелин и
ингибитор катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) энтакапон. Большая часть этих активных веществ
вмешивается в дофаминергический и/или холинергический сигнальный каскад и таким образом симптоматически влияет на моторные расстройства, которые типичны для болезни Паркинсона.
Лечение Morbus Parkinson до настоящего времени начинали вместе с появлением главных симптомов. Как правило, считают, что Morbus Parkinson клинически подтверждается, если могут быть определены по меньшей мере два из четырех главных симптомов (брадикинезия, дрожания в состоянии покоя,
ригидность и постуральная нестабильность) и L-диоксифенилаланин (L-Dopa) оказывает действие
(Hughes, J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry 55, 1992, 181). Тем не менее, к сожалению, у пациентов, страдающих от болезни Паркинсона, моторные расстройства развиваются, только когда необратимо повреждены
от 10 до 80% дофаминергических нейронов в черной субстанции (ЧС) (Becker et al., J. Neurol. 249, 2002,
Suppl. 3: III, 40; Hornykiewicz, Encyclopaedia of Life Science 2001, 1). В это время шансы на лечение с длительными эффектами уже минимальны. Таким образом, желательно начинать лечение как можно раньше.
Современные клинические наблюдения, а также анатомические и генетические исследования в настоящее время демонстрируют, что можно диагностировать пациентов, страдающих от болезни Паркинсона, на ранней стадии и идентифицировать пациентов с высоким риском этого заболевания.
Таким образом, в качестве диагностических маркеров могут быть использованы следующие:
биохимические маркеры, такие как нейромеланин (Gerlach, Neurotox. Res. 5, 2003, 35; WO
02/31499), S-100 бета (Muramatsu, Glia 42, 2003, 307), альфа-синуклеин (WO 03/069332; WO 00/02053)
или белок паркин (Sharma, Neurol. Glin. N. Am. 20, 2002, 759) и семафорин (WO 03/007803);
генетические маркеры, такие как гены парка 1-8 (Guttman, CMAJ 4, 2003, 168); CYP2D6-B (WO
03/012137), хромосома 2q 36-37 (Pankratz, Am. J. Hum. Gen. 72, 2003, e-pub), α-синуклеин (Polymeropoulos,
Science. 276, 1997, 2045) или мутации в CYP2D6-B и делеция GSTM1 (WO 03/012137);
способы визуализации, такие как ультразвуковое исследование размера ЧС, возможно в комбинации с другими способами (Becker et al., J. Neurol. 249, 2002, Suppl. 3: III, 40) или магнитно-резонансной
томографией (MRI) (Hutchinson M., Raff U., J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 1999 Dec.; 67 (6): 815-8);
способы визуализации, такие как электронно-позитронная томография (ЭПТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОЭКТ) ((Prunier С., Bezard E. et al., Neuroimage. 2003 July; 19 (3): 810-6);
сенсорные расстройства или поведенческие аномалии, такие как расстройства сна и обонятельные
расстройства, в частности расстройства сна, имеющие тип "расстройства поведения в REM стадии сна"
(Henderson, J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry 74, 2003, 956) или когнитивные аномалии (Rammsayer, Int. J.
Neurosci. 91, 1997, 45);
органические проблемы, такие как запор (Krygowska-Wajs, Funct. Neurol. 15, 2000, 41);
депрессия (Camicioli R. Drugs Today (Bare). 2002 Oct.; 38 (10): 677-86);
короткие аномалии движения, такие как хорея или ортостатические аномалии;
комбинации вышеупомянутых маркеров (Stern, Annals of Neurol. 56, 2004, 169).
Таким образом, это создает возможность влиять на процесс заболевания в точке, когда присутствует больше нейронов, нежели чем в момент появления некоторых главных моторных симптомов Morbus
Parkinson, и таким образом сохранять большее количество нейронов. Можно ожидать, что введение эффективного нейропротективного агента на ранней стадии значительно замедлит процесс заболевания:
чем раньше будет начато лечение, тем больше шансов длительного предотвращения появления симптомов, снижающих качество жизни.
Таким образом, существует необходимость в лекарственных средствах, которые не только способны влиять на дофаминергическую передачу и ослаблять симптомы Morbus Parkinson на последующих
стадиях, но также способны обращать, предотвращать или, по меньшей мере, значительно замедлять
прогрессирующее разрушение дофаминергических нейронов на более ранних, в основном, моторноасимптоматических стадиях болезни Паркинсона (Dawson, Nature Neuroscience Supplement 5, 2002, 1058).
Замещенные 2-аминотетралины известны из патентов США US 4564628, US 4885308, US 4722933 и
WO 01/38321. Они представляют собой вещества, обладающие дофаминергическим действием, которые
известны для симптоматического лечения болезни Паркинсона. В клинических исследованиях было доказано, что ротиготин [(-)-5,6,7,8-тетрагидро-6-[пропил[2-(2-тиенил)этил]амино]-1-нафтол] в особенности
является эффективным трансдермально вводимым антипаркинсоническим лекарством. В WO 02/089777
описано, например, трансдермальное введение ротиготина пациентам, страдающим от болезни Паркинсона, и с ассоциированным улучшением оценки в соответствии с Унифицированной оценочной шкалой
болезни Паркинсона (UPDRS). Оценка в соответствии с UPDRS представляет собой важный инструмент
-1-
011387
для диагностики и мониторинга прогресса и/или лечения пациентов, страдающих от болезни Паркинсона
(Fahn S., Elton R.L., Members of the UPDRS Development Committee (1987) Unified Parkinson's Disease Rating
Scale. In: Fahn, S., C.D. Marsden, D.B. Calne, M. Goldstein (eds) Recent Developments in Parkinson's Disease.
Vol. II. Macmillan Healthcare Information, Florham Park (NJ), pages 153-163, 293-304). Тем не менее, оценка
в соответствии с UPDRS только регистрирует действие активного вещества на симптомы болезни Паркинсона. Она не дает возможности сделать какие-либо заключения относительно того, оказывает ли активное вещество влияние на разрушение дофаминергических клеток, что представляет собой причину,
лежащую в основе симптомов.
Metman et al. (Clin. Neuropharmacol. 24, 2001, 163) также описывают действие ротиготина на моторные расстройства, ассоциированные с болезнью Паркинсона. У пациентов, которых лечили, уже имелись
выраженные дискинезии, которые были уменьшены путем введения ротиготина.
Таким образом, замещенные 2-аминотетралины, в частности ротиготин, известны в соответствии с
предшествующим уровнем техники в качестве дофаминового агониста для симптоматического лечения
болезни Паркинсона. Тем не менее, лекарственные средства против болезни Паркинсона, которые оказывают действие только на симптомы, не обеспечивают какого-либо преимущества для профилактического
лечения болезни Паркинсона, поскольку они не оказывают какого-либо влияния на разрушение дофаминергических клеток или на прогресс и/или начало заболевания.
В экспериментальных тестах неожиданно было показано, что замещенные 2-аминотетралины общей формулы I
где n равно от 1 до 5;
R2 представляет собой ОА, где А выбран из Н, С1-12алкила, С1-12алкоксиметила или группы
где R6 и R7 независимо представляют собой С1-20алкил, фенил или метоксифенил;
каждый из R3 и R4 представляет собой Н;
R5 представляет собой С1-3алкил;
R1 выбран из группы
и
где X выбран из S, О или NH;
где соединение формулы I может быть представлено в виде рацемата или в виде чистого (R)- или
(S)-энантиомера,
а также физиологически приемлемые соли этих соединений,
которые до настоящего времени использовали только для симптоматического лечения болезни Паркинсона, обладают нейропротективными свойствами и, таким образом, могут быть использованы в качестве
лекарства и/или профилактического агента для профилактики утраты дофаминергических клеток, в частности
на очень ранних стадиях болезни Паркинсона или у пациентов, имеющих высокий риск этого заболевания.
Фигуры
На фиг. 1 продемонстрированы типичные примеры нейропротективного действия ротиготина, измеренные на основе плотности дофаминовых переносчиков в качестве индикатора плотности оставшихся
нервных окончаний в полосатом теле.
Группы 1-7 обрабатывали в соответствии со следующим. Группа 1: необработанная контрольная
группа; группа 2: контрольная группа, обработанная раствором носителя для ротиготина и 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридином (МФТП); группа 3: обработка МФТП; группа 4: обработка МФТП+ротиготин 0,3 мг/кг; группа 5: обработка МФТП+ротиготин 1,0 мг/кг; группа 6: обработка
МФТП+ротиготин 3,0 мг/кг; группа 7: обработка только ротиготином (3,0 мг/кг).
На фиг. 2 продемонстрировано связывание дофаминового переносчика (DAT) в дорсальном и вентральном отделе полосатого тела в различных группах путем количественной оценки плотности DAT в
соответствии с экспериментом, представленным на фиг. 1. Диаграммы 1-7 соответствуют группам 1-7 в
соответствии с представленным на фиг. 1. Группы, помеченные *, демонстрировали значительное
уменьшение связывания DAT по сравнению с контрольной группой 2. Группы, помеченные #, демонстрировали значительное увеличение связывания DAT по сравнению с группой 3, обработанной МФТП.
Описание изобретения
Предполагают, что апоптотические процессы играют важную роль в разрушении дофаминергиче-2-
011387
ских нейронов при патогенезе болезни Паркинсона (Barzilai, Cell Mol. Neurobiol. 21, 2001, 215). Таким
образом, нейропротективные вещества, которые могут остановить или даже обратить разрушение дофаминергических клеток, являются желательными. Полагают, что модель МФТП предсказывает требуемые
нейропротективные характеристики (Dawson, Nature Neuroscience Supplement 5, 2002, 1058).
Неожиданно обнаружили, что ротиготин демонстрирует желаемый фармакологический профиль в
острой и субострой модели МФТП. По результатам теста можно предположить, что апоптотические
процессы предотвращаются ротиготином.
2-Аминотетралины в соответствии с изобретением, в частности ротиготин, таким образом демонстрируют нейропротективное действие на модели болезни Паркинсона у мыши: после острого введения
МФТП, вызывающего синдром Паркинсона у людей и обезьян, с одной стороны, измеряли количество
дегенеровавших в острой фазе нейронов (табл. 1), а, с другой стороны, устанавливали функциональную
целостность полосатого тела в субострой фазе путем определения плотности дофаминового переносчика
в нервных окончаниях (фиг. 1 и 2). В обоих случаях может быть продемонстрировано, что ротиготин
обладает нейропротективным действием: с одной стороны, количество дегенерировавших в среднем мозге нейронов уменьшалось после введения ротиготина, а, с другой стороны, дофаминергическая иннервация полосатого тела почти полностью сохранялась или восстанавливалась.
Таблица 1
Количество дегенерировавших нейронов мыши, продемонстрированное путем окрашивания FluoroJade
В предварительном исследовании также проверено нейропротективное действие ротиготина на
обезьян.
В использованной модели, отражающей прогрессивное течение Morbus Parkinson у приматов,
обезьянам (макакам) инъецировали подпороговые токсические дозы МФТП в течение нескольких суток.
Симптомы Паркинсона развивались в модели в течение периода, составляющего приблизительно 2 недели. Как только был достигнут некоторый уровень повреждения, ротиготин ежедневно инъецировали в
виде препарата, который обеспечивал непрерывный уровень в плазме крови в течение 24 ч. Инъекции
МФТП прекращали, как только моторная активность уменьшалась в определенной степени (приблизительно через 5 суток). Поведение животных оценивали ежесуточно. Через 6 недель после начала введения МФТП инъекции ротиготина останавливали и за животными наблюдали в течение еще 2 недель без
обработки. Было обнаружено, что моторная активность у животных значительно улучшалась во время
обработки и также на следующей фазе клиренса.
Группу животных умерщвляли в конце введения ротиготина и фазы клиренса и состояние базальных ганглиев подвергали гистологической и биохимической оценке. Плотность нервных окончаний в полосатом теле значительно увеличивалась по сравнению с животными, не подвергнутыми обработке. Содержание препроэнкефалина, представляющее собой показатель интактной сети в "опосредованном пути" базальных ганглиев, демонстрировало тенденцию к нормализации после обработки и фазы клиренса.
Результаты демонстрируют, что нейропротективный потенциал ротиготина также может быть доказан на модели Morbus Parkinson у приматов. Таким образом, можно ожидать нейропротективное действие у людей.
Таким образом, с ротиготином и структурно родственными замещенными 2-аминотетралинами общей
формулы I для лечения предложены активные вещества, которые идеально подходят для приготовления
лекарств и/или профилактических агентов для профилактики утраты дофаминергических нейронов.
Таким образом, объектом настоящего изобретения является применение замещенных 2-аминотетралинов общей формулы I, приведенной ниже, а также, в частности, ротиготина для приготовления лекарства
для лечения или профилактики утраты дофаминергических нейронов у пациентов, страдающих от нейродегенеративного заболевания, ассоциированного с увеличенным разрушением дофаминергических клеток,
или у пациентов, имеющих увеличенный риск расширенного разрушения дофаминергических клеток.
Увеличение утраты дофаминергических нейронов регулярно возникает у пациентов, страдающих от
болезни Паркинсона, тем не менее, это также часто наблюдается при других нейродегенеративных забо-3-
011387
леваниях, например при альфа-синуклеопатиях или при хорее Гентингтона, а также при расстройствах
REM фазы сна и обонятельных расстройствах.
По сравнению с применением аминотетралинов формулы I, в частности ротиготина, до настоящего
времени, которое полностью было ограничено симптоматическим лечением пациентов, страдающих от
болезни Паркинсона, с моторными расстройствами, профилактическое лечение индивидов, демонстрирующих меньше двух главных симптомов болезни Паркинсона и кому, таким образом, требуется скорее
нейропротективное, профилактическое лечение, нежели чем симптоматическое лечение, было разработано
как новая область применения. В соответствии с описанным выше такие индивиды получают пользу от
нейропротективного действия ротиготина, поскольку благодаря введению ротиготина утрата дофаминергических клеток прекращается или замедляется по времени, когда все еще присутствует большее количество дофаминергических нейронов, чем в случае пациентов, уже демонстрирующих моторные симптомы.
Объект изобретения, таким образом, представляет собой применение замещенных 2-аминотетралинов общей формулы I
где n равно от 1 до 5;
R2 представляет собой ОА, где А выбран из Н, С1-12алкила, С1-12алкоксиметила или группы
где R6 и R7 независимо представляют собой С1-20алкил, фенил или метоксифенил;
каждый из R3 и R4 представляет собой Н;
R5 представляет собой С1-3алкил;
R1 выбран из группы
и
где X выбран из S, О или NH;
где соединение формулы I может быть представлено в виде рацемата или в виде чистого (R)- или
(S)-энантиомера,
а также физиологически приемлемых солей этих соединений
для профилактического лечения болезни Паркинсона, в частности для профилактики утраты дофаминергических клеток у индивидов, у которых перед началом профилактического лечения по меньшей
мере три из четырех главных симптомов группы: бракинезии, ригидности, дрожаний в состоянии покоя и
постуральной нестабильности, еще не присутствовали или присутствовали лишь зачаточно или частично.
Соединениями, которые особенно подходят для приготовления нейропротективного агента или
агента для профилактики болезни Паркинсона, являются те, где R2 представляет собой группу ОА и R3 и
R4 независимо представляют собой Н, причем особенно предпочтительно, чтобы А представлял собой
атом водорода или группу
где R6 представляет собой С1-12алкил, фенил или метоксифенил.
Еще в одном предпочтительном воплощении изобретения R4 представляет собой Н.
Еще в одном предпочтительном воплощении изобретения R3 представляет собой Н.
Еще в одном предпочтительном воплощении изобретения R3 и R4, оба представляют собой Н.
Еще в одном предпочтительном воплощении изобретения n равно 1, 2 или 3, в частности n равно 2 или 3.
R1 предпочтительно выбран из группы Н
и
где X выбран из S, О и NH и где особенно предпочтительно, чтобы X представлял собой атом серы.
Особенно предпочтительно, чтобы R1 представлял собой 2-тиенил.
Еще в одном предпочтительном воплощении изобретения R5 представляет собой С3алкил, в частности н-пропил.
Еще в одном предпочтительном воплощении изобретения R1 представляет собой 2-тиенил, R3 и R4,
оба представляют собой Н, R5 представляет собой С3алкил и n равно 2.
В особенно предпочтительном воплощении изобретения рацемат (+/-) 5,6,7,8-тетрагидро-6-[пропил
-4-
011387
[2-(2-тиенил)этил]амино]-1-нафтола и особенно предпочтительно чистый S-энантиомер этого соединения (ротиготин) применяют для приготовления агента для профилактики болезни Паркинсона.
Под каждым из терминов "С1-20алкил", "С1-12алкил" и C1-3-алкил" следует понимать разветвленные
или неразветвленные алкильные группы, имеющие соответствующее количество атомов С. Например,
"С1-20алкил" включает все алкилы, имеющие от 1 до 20 атомов. Алкилы могут быть возможно замещены,
например, галогеном. Алкилы предпочтительно представлены в незамещенной форме.
Под термином "алкоксиметил" следует понимать группу -СН2-О-алкил. Предпочтительный алкил
представляет собой С1-12алкил, С1-6алкил или C1-3алкил.
Индивиды, которых профилактически лечат замещенными 2-аминотетралинами, могут, вероятно,
представлять собой здоровых индивидов, чья генетическая или эпидемическая предрасположенность
может не указывать на увеличенный риск развития болезни Паркинсона.
В частности, индивиды или пациенты, имеющие высокий риск, у которых могут быть обнаружены
ранние клинические, клинические/химические или клинические/физические симптомы, но которые, тем
не менее, пока не демонстрируют два или более чем два главных симптома болезни Паркинсона, рассматривают для лечения замещенными 2-аминотетралинами, в частности ротиготином.
Наконец, 2-аминотетралины, в частности ротиготин, также могут быть использованы в качестве
нейропротективного агента, если диагноз не ясен, но можно ожидать развития симптомов в направлении
нейродегенерации паркинсонического типа.
Профилактика утраты нейронов требуется, в частности, для:
(а) индивидов, имеющих повышенный риск болезни Паркинсона, или
(б) индивидов с ранним проявлением симптомов болезни Паркинсона.
Термины "Morbus Parkinson" и "болезнь Паркинсона" в этой заявке на патент используются как синонимы и включают идиопатическую и генетическую болезнь Паркинсона. Так называемый Паркинсонплюс синдром, а также вторичный паркинсонизм отличаются от них.
Под термином "главные симптомы" болезни Паркинсона в этой заявке на патент следует понимать
один или более чем один симптом из брадикинезии, ригидности, дрожаний в состоянии покоя и постуральной нестабильности.
Под термином "индивиды с увеличенным риском болезни Паркинсона" в этой заявке на патент следует понимать, в частности, тех индивидов, у которых еще не проявляются какие-либо симптомы болезни Паркинсона, которые могут быть обнаружены, но которые имеют некоторые факторы риска.
Такими факторами риска могут быть генетические мутации (Nussbaum NEJM 348, 2003, 25). Например, ген паркин на хромосоме 6q25.2-27 (PARK2) ассоциирован с ювенильным паркинсонизмом и
чаще возникает в семьях с аутосомально-рецессивным наследованием паркинсонизма (Matsumine, Am. J.
Hum. Genet. 60, 1997, 588; Kitada, Nature 392, 1998, 605; Abbas, Hum. Mol. Genet. 8, 1999, 567; Tassin, Am.
J. Hum. Genet. 63, 1998, 88 und Lucking, N. Engl. J. Med. 342, 2000, 1560-7). Другие генные локусы, например PARK6 и PARK7, также были обнаружены с увеличенной частотой в семьях с ювенильной, рецессивно-наследуемой болезнью Паркинсона (Valente, Am. J. Hum. Genet. 68, 2001, 895; van Dujin, Am. J.
Hum. Genet. 69, 2001, 629). Мутации в гене альфа-синуклеина (PARK1) были обнаружены в семьях с
ювенильной, аутосомальной доминантно-наследуемой болезнью Паркинсона (Polymeropoulos, Science
276, 1997, 2045). В дополнение к генетической предрасположенности, факторами риска также может
быть влияние окружающей среды, такое как высокое воздействие, например, инсектицидов (Vanacore,
Neurol. Sci., Sep.; 23 Suppl. 2, 2002, page 119).
В этой заявке на патент под термином "индивиды с ранними симптомами болезни Паркинсона" следует понимать, в частности, индивидов, у которых по меньшей мере три из четырех главных симптомов
(ригидность, дрожания в спокойном состоянии, брадикинезия и постуральная нестабильность) до сих
пор не присутствуют или присутствуют лишь зачаточно или частично, но которые проявляют диагностически применимые ранние клинические, клинические/биохимические и/или клинические/физические
симптомы.
Клинические/биохимические маркеры могут представлять собой модификации картины альфасинуклеина или нейромеланина. Такие модификации могут быть следствием, например, экспрессии генетических вариантов, например альфа-синуклеина, развития агрегатов или филаментов, например альфа-синуклеина, или увеличенного высвобождения из клеточных депо, например из цитоплазмы клеток,
которые разрушены, как в случае нейромеланина.
Ранними клиническими/физическими симптомами могут быть структурные или функциональные
изменения головного мозга, которые могут быть обнаружены физически, например путем исследований
при помощи ЭПТ и ОЭКТ, путем транскраниальной эхографии (Becker, J. Neurol. 249, Suppl. 3, 2002,
111/40; Prunier C., et al., Neuroimage. 2003 Jul.; 19 (3): 810-6) или путем обнаружения биохимических маркеров, таких как нейромеланин (WO 02/31499).
Ранние клинические симптомы могут представлять собой обонятельные расстройства, депрессию,
нарушения зрительной и когнитивной функций или расстройств сна, где комбинация различных тестов
также может быть использована для ранней диагностики (Becker, J. Neurol. 249, Suppl. 3, 2002, 111/40;
Stern, Annals of Neurol. 56, 2004, 169).
-5-
011387
Как уже обсуждалось выше, приблизительно от 70 до 80% дофаминергических нейронов черной
субстанции уже разрушались к тому времени, когда впервые проявлялись по меньшей мере два из четырех главных симптомов. Для эффективного применения неожиданного нейропротективного потенциала
аминотетралинов формулы I, в частности ротиготина, таким образом, профилактическое лечение пациентов инициируется на стадии, когда у пациентов имеется меньшая утрата дофаминергических клеток в
черной субстанции (ЧС). Таким образом, предпочтительно лечат индивидов, у которых в ясно выраженной форме проявляется лишь один главный симптом или не проявляется ни один из главных симптомов
болезни Паркинсона.
Предпочтительно лечат индивидов, демонстрирующих утрату дофаминергических клеток в ЧС
меньше чем на 70, 60, 50% и особенно предпочтительно меньше чем на 40, 30, 20 или 10%.
Две шкалы могут быть использованы для диагностики и контроля лечения пациентов, уже демонстрирующих заметные моторные расстройства, т.е. оценка по Унифицированной оценочной шкале болезни
Паркинсона (UPDRS) и оценка по шкале Хена и Яра (Hoehn and Yahr).
В предпочтительном аспекте изобретения группа пациентов, которых профилактически лечат аминотетралинами формулы I, в частности ротиготином, имеет оценку по модифицированной шкале Хена и
Яра от 0 до 2, особенно предпочтительно от 0 до 1 и особенно предпочтительно 0.
Пациентов, имеющих оценку по шкале UPDRS, часть III (см. воплощение 5), по меньшей мере 10,
обычно классифицируют как пациентов, которым может быть назначено дофаминергическое лечение.
Тем не менее, группа пациентов, подходящих для получения пользы от нейропротективного действия
замещенных 2-аминотетралинов формулы I, в частности ротиготина, предпочтительно имеет очень низкую или необнаруживаемую оценку моторики по шкале UPDRS (часть III). В рамках значения настоящего изобретения, профилактическое лечение замещенными 2-аминотетралинами формулы I, в частности
ротиготином, таким образом, предпочтительно должно быть проведено на пациентах, имеющих оценку
моторики по шкале UPDRS меньше чем 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1. Особенно предпочтительно, чтобы
пациенты вовсе не демонстрировали какие-либо моторные расстройства.
Термины "предотвращение", "профилактика" и "профилактическое лечение" в этой заявке на патент
используются как синонимы. Они, в частности, включают введение лекарственного средства индивидам,
у которых по меньшей мере три из четырех главных симптомов болезни Паркинсона (ригидность, дрожания в состоянии покоя, брадикинезия, постуральная нестабильность) еще не проявляются, или являются зачаточными, или представлены частично, для предотвращения или задержки проявления или значительного развития моторных симптомов болезни Паркинсона и/или дальнейшей утраты дофаминергических нейронов, в частности в черной субстанции. У индивидов, которых лечат профилактически, предпочтительно еще не проявляются какие-либо из главных симптомов в отчетливо выраженной форме.
Соединения, имеющие формулу I, являются оптически активными и могут быть представлены в виде
рацематов или в виде чистых (R)- или (S)-энантиомеров. В этой заявке на патент понятно, что выражение
"чистый энантиомер" означает, что вещество предпочтительно представлено по меньшей мере на 90 мол.%
в форме одного энантиомера, например в форме (S), тогда как доля другого соответствующего энантиомера,
например формы (R), соответственно, является низкой. Если, например, в соответствии с изобретением для
приготовления лекарственного средства применяют ротиготин [(-)-5,6,7,8-тетрагидро-6-[пропил[2-(2-тие-6-
011387
нил)этил]амино]-1-нафтол], (R)-(+)-энантиомер предпочтительно представлен с долей меньше 10 мол.%,
особенно предпочтительно с долей меньше 2 мол.% и особенно предпочтительно с мольной долей меньше 1%, основываясь на общем количестве ротиготина в агенте для профилактики болезни Паркинсона.
Соединения, имеющие формулу I, могут быть представлены в лекарственном средстве в виде свободных
оснований или в форме физиологически приемлемых солей, например в форме гидрохлорида ротиготина.
"Физиологически приемлемые соли" включают нетоксичные соли присоединения соединением
формулы (I) в форме свободного основания с органическими или неорганическими кислотами. Примеры
неорганических кислот включают HCl.
Существует множество способов применения доступных для введения замещенных 2-аминотетралинов формулы I, в частности ротиготина, которые могут быть выбраны и адаптированы специалистом в
данной области техники в зависимости от потребности, состояния и возраста пациента, требуемой дозы и
желаемого интервала применения.
Предпочтительный способ введения замещенных 2-аминотетралинов формулы I, в частности ротиготина, представляет собой трансдермальное введение. Форма введения, в принципе, может быть выбрана, например, из мази, пасты, спрея, пленки, пластыря или устройства для йонтофореза.
Замещенные 2-аминотетралины формулы I, в частности ротиготин, предпочтительно наносят на
кожу пациента в форме пластыря, где активное вещество предпочтительно представлено в матрице адгезионного полимера, например самоадгезионного полисилоксана. Примеры подходящих препаратов для
трансдермального введения могут быть обнаружены в WO 99/49852, WO 02/89777 и WO 02/89778. Такая
форма введения дает возможность для достижения, по существу, постоянного уровня в плазме крови и,
следовательно, постоянной дофаминергической стимуляции в течение всего периода применения (WO
02/89778; Metman, Clinical Neuropharmacol. 24, 2001, 163).
С другой стороны, если желательно лекарственное средство в форме подкожного или внутримышечного депо, замещенные 2-аминотетралины формулы I, в частности ротиготин, могут быть суспендированы, например, в виде кристаллов соли, например в виде кристаллического гидрохлорида ротиготина,
в гидрофобной безводной среде и инъецированы в соответствии с описанным в WO 02/15903 или введены в форме микрокапсул, микрочастиц или имплантатов, основываясь на биоразрушаемых полимерах,
таких как полимеры, описанные, например, в WO 02/38646.
Другие возможные формы введения замещенных 2-аминотетралинов формулы I, в частности ротиготин, представляют собой препараты для введения в слизистые оболочки, например подъязычные
спреи, препараты для ректального введения или аэрозоли для введения в легкие.
Вводят подходящие дозы замещенных 2-аминотетралинов формулы I, в частности ротиготина, составляющие от 0,05 до приблизительно 50 мг/сутки, причем суточные дозы предпочтительно составляют
от 0,1 до 40 мг, и частности от 0,2 до 20 мг/сутки. Таким образом, может осуществляться постоянно увеличивающееся введение доз, т.е. лечение может возможно начинаться с низких доз, которые затем увеличиваются до достижения поддерживающей дозы.
Специалисту в данной области техники понятно, что интервал введения доз может изменяться в зависимости от применяемого количества, способа применения и суточной потребности пациента. Таким
образом, трансдермальная форма введения может быть желательна, например, для введения 1 раз в сутки, 1
раз каждые 3 суток или 1 раз каждые 7 суток, тогда как подкожное или внутримышечное депо делают
возможным введение инъекций, например, с циклами 1 раз в неделю, 1 раз в 2 недели или 1 раз в 4 недели.
Другие активные вещества, которые предотвращают прогрессирующую утрату дофаминергических
клеток, также могут находиться в нейропротективном лекарственном средстве в дополнение к замещенным 2-аминотетралинам формулы I, в частности в дополнение к ротиготину.
Примеры представляют собой вещества, обладающие антиапоптотическим действием (миноциклин,
FK-506, циклоспорин A, zVAD) a также нейротрофины, такие как, например, нейротрофический фактор
глиальных клеток (GDNF).
В комбинированном препарате может быть осуществлено последовательное введение, например в
такой форме введения, как таблетка для перорального введения, которая имеет два различных слоя с отличающимися профилями высвобождения различных фармацевтически активных ингредиентов. Специалисту в данной области техники понятно, что в контексте настоящего изобретения возможны различные формы введения и применения, все из которых образуют задачу изобретения.
Еще одна задача заявки на изобретение представляет собой набор для ранней диагностики и лечения Morbus Parkinson. Такой набор содержит: (а) диагностический агент, который дает возможность для
диагностики болезни Паркинсона и/или предрасположенности к развитию болезни Паркинсона на ранней или асимптоматической стадии, а также (б) фармацевтический препарат, содержащий замещенные 2аминотетралины общей формулы I, в частности ротиготин.
Такой набор может включать, например:
а) агент или диагностический набор для обнаружения нейромеланина,
б) фармацевтический препарат, содержащий замещенные 2-аминотетралины общей формулы I, в
частности ротиготин.
Еще в одном воплощении изобретения набор может содержать:
-7-
011387
а) агент или диагностический набор для обнаружения семаформина 3,
б) фармацевтический препарат, содержащий замещенные 2-аминотетралины общей формулы I, в
частности ротиготин.
Еще в одном воплощении изобретения набор может содержать:
в) агент или диагностический набор для обнаружения альфа-синуклеина и/или его агрегатов,
г) фармацевтический препарат, содержащий замещенные 2-аминотетралины общей формулы I, в
частности ротиготин.
Еще в одном воплощении изобретения набор может содержать:
а) агент или диагностический набор для генетического обнаружения мутации, ассоциированной с проявлением болезни Паркинсона, и/или аллели, ассоциированной с более частым проявлением болезни Паркинсона, в частности из группы генов PARK 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8, а также генных локусов CYP2D6-B и GSTM1,
б) фармацевтический препарат, содержащий замещенные 2-аминотетралины общей формулы I, в
частности ротиготин.
Воплощения
Воплощение 1. Пластырь с ротиготином.
1,8 г ротиготина (свободное основание) растворяли в 2,4 г этанола и добавляли к 0,4 г Kollidon 90F
(растворенного в 1 г этанола). Эту смесь добавляли к 74% раствору силиконовых полимеров (8,9 г BioPSA
7-4201 + 8,9 г BIO-PSA 7-4301 [Dow Corning]) в гептане. После добавления 2,65 г петролейного эфира
смесь перемешивали в течение 1 ч при 700 об./мин для получения гомогенной дисперсии. После нанесения на полиэфире ее сушили при 50°С. Окончательная масса пластыря составила 50 г/см2.
Воплощение 2. Суспензии-депо ротиготина.
(а) 1411,2 г Miglyol 812 взвешивали в колбу Дюрана. К Miglyol добавляли 14,4 г Imwitor 312 и затем
нагревали в течение 30 мин до 80°С при перемешивании. Прозрачный раствор охлаждали до комнатной
температуры и фильтровали.
(б) 1188 г раствора, приготовленного на стадии (а), переносили в стеклянный лабораторный реактор, добавляли 12 г ротиготина и гомогенизировали в течение 10 мин в атмосфере азота с использованием Ultraturrax при 10,000 об./мин. Суспензию декантировали в коричневые стеклянные флаконы при работающем Ultraturrax (2,000 об./мин).
Воплощение 3. Субострая модель МФТП.
Для задачи интоксикации мышам вводили 80 мг/кг нейротоксина 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридина (МФТП) (дозами по 20 мг/кг с двухчасовыми интервалами, группы 3-6 на фиг. 1 и 2), что
приводило к дегенерации приблизительно от 50 до 60% нейронов в черной субстанции (максимальная
дегенерация в группе 3 на фиг. 1 и 2). Ротиготин вводили ежесуточно в течение 7 суток в дозах 0,3, 1 или
3 мг/кг, соответственно, в виде так называемого "препарата с замедленным высвобождением" (см. воплощение 2, группы 4-6 на фиг. 1 и 2). Группе животных, обработанных МФТП (группа 3), давали раствор носителя ротиготина (см. воплощение 2 без ротиготина HCl) и использовали для сравнения. Группы
1, 2 и 7 служили в качестве контролей, где группу 1 не подвергали какой-либо обработке, группу 2 обрабатывали растворами носителя МФТП и ротиготина, а группа 7 получала исключительно ротиготин.
Животных умерщвляли на 8 сутки и головной мозг извлекали и замораживали. Замороженные растворы
инкубировали со 100 пм [125I] PE21 ([125I]-(Е)-N(3-йодпроп-2-енил)-2β-карбоксиметил-3β-(4'-метилфенил)
нортропан) в фосфатном буфере, рН 7,4, для того, чтобы пометить количество дофаминовых переносчиков, еще находящихся в полосатом теле, что указывает на количество функционирующих нервных окончаний. Ротиготин в зависимости от дозы улучшал выживание нейронов и их нервных окончаний. Это
ясно указывает на нейропротективные свойства вещества (фиг. 1 и 2).
Воплощение 4. Острая МФТП модель (включающая апоптоз).
Для задачи интоксикации мышам вводили 80 мг/кг нейротоксина 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридина (МФТП) (дозами по 20 мг/кг с двухчасовыми интервалами), что приводило к дегенерации
приблизительно от 50 до 60% нейронов в черной субстанции. Приблизительно за 16 ч до этого вводили
ротиготин в дозах 0,3, 1 или 3 мг/кг, соответственно, в виде так называемого "препарата с замедленным
высвобождением". Латентности диффузии и абсорбции привели к оптимальной доступности ротиготина
после введения МФТП. Животных умерщвляли через 24 ч и образцы мозга фиксировали. Срезы мозга
окрашивали FluoroJade для идентификации дегенерировавших клеток. Иммуногистохимическое мечение
тирозингидроксилазы помогало идентифицировать дофаминергические нейроны. Окрашивание тирозингидроксилазы не продемонстрировало какие-либо различия между обработанными и необработанными
животными; окрашивание FluoroJade продемонстрировало большое количество дегенерировавших нейронов;
тем не менее, нейроны не полностью удалялись; это свидетельствует о том, что разрушение клеток происходит апоптотически. Количество дегенерировавших нейронов было приблизительно на 50% меньше после
применения ротиготина, что дополнительно демонстрирует нейропротективное свойство вещества (табл. 1).
Воплощение 5. Оценка моторики по шкале UPDRS.
Оценку моторики по шкале UPDRS (часть III шкалы UPDRS) осуществляют путем проверки пациента с использованием критериев 18-31, приведенных ниже в табл. 3, с соответствующими оценками для
каждого критерия.
-8-
011387
Таблица 3
-9-
011387
- 10 -
011387
- 11 -
011387
- 12 -
011387
Воплощение 6. Превращение пролекарства в активное вещество In Vitro.
Микросомальную фракцию, которая содержит важные ферменты метаболизма, получают из гомогенатов клеток печени человека, обезьяны, собаки, крысы или мыши при помощи дифференциального
центрифугирования; альтернативно, также может быть получена цитоплазматическая фракция. Субклеточную фракцию суспендируют в буфере таким образом, что получают раствор, имеющий определенное
содержание белка. После добавления 1 мкМ тестируемого лекарства осуществляют инкубацию в течение
60 мин при 37°С. Затем количественно оценивают ротиготин при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)/детектирования в ультрафиолетовом диапазоне (УФ) или также при помощи ВЭЖХ/масс-спектрометрии (МС) и связывают с используемым количеством. Концентрацию или
временные ряды подвергают подробным анализам.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Применение соединения общей формулы I
где n равно от 1 до 5;
R1 выбран из группы
и
где X выбран из S, О или NH;
R2 представляет собой ОА, где А выбран из Н, С1-12алкила, С1-12алкоксиметила или группы
где R6 и R7 независимо представляют собой С1-20алкил, фенил или метоксифенил;
каждый из R3 и R4 представляет собой Н;
R5 представляет собой С1-3алкил;
где соединение формулы I представлено в виде рацемата или в виде чистого (R)- или (S)-энантиомера,
а также физиологически приемлемых солей этих соединений
в качестве лекарства для профилактического лечения болезни Паркинсона.
2. Применение по п.1, где профилактическое лечение осуществляют в отношении индивидов, выбранных из группы:
(а) индивидов без симптомов болезни Паркинсона, но имеющих повышенный риск развития болезни Паркинсона, или
(б) индивидов с ранним проявлением симптомов болезни Паркинсона, у которых по меньшей мере
три из четырех главных симптомов болезни Паркинсона (ригидность, дрожания в состоянии покоя, брадикинезия, постуральная нестабильность) еще не присутствуют или лишь частично присутствуют.
3. Применение по п.2, где индивиды, описанные в пункте (б), демонстрируют несколько из следующих клинических симптомов: обонятельные расстройства, депрессия, расстройства сна, имеющие
тип "расстройства поведения в REM стадии сна", запор и короткие аномалии движения.
4. Применение по п.2, где индивиды демонстрируют мутацию гена PARK и/или модификации картины альфа-синуклеина или нейромеланина.
5. Применение по одному из пп.1-4, где А представляет собой атом водорода или группу, выбранную из
где R6 представляет собой С1-12алкил, фенил или метоксифенол.
6. Применение по одному из пп.1-5, где n равно от 1 до 3.
7. Применение по одному из пп.1-6, где X представляет собой атом серы.
8. Применение по одному из пп.1-7, где R5 представляет собой С3алкил.
9. Применение по одному из пп.1-8, где R1 представляет собой 2-тиенил, R5 представляет собой
С3алкил и n равно 2.
10. Применение по одному из пп.1-9, где соединение представляет собой 5,6,7,8-тетрагидро-6-[пропил[2-(2-тиенил)этил]амино]-1-нафтол.
11. Применение по п.10, где соединение представляет собой чистый S-энантиомер (ротиготин).
- 13 -
011387
12. Применение по одному из пп.1-11, где индивиды демонстрируют утрату дофаминергических
клеток в черной субстанции меньше чем на 60% перед началом введения лекарства.
13. Применение по одному из пп.1-12, где индивиды имеют оценку по Унифицированной оценочной шкале болезни Паркинсона (UPDRS) меньше чем 10 перед началом введения лекарства.
14. Применение по одному из пп.1-13, где индивиды имеют оценку по шкале Хена и Яра (HoehnYahr) 0 или 1.
15. Применение по одному из пп.1-14, где лекарство предложено для парентерального, трансдермального введения или введения через слизистые оболочки.
16. Применение по одному из пп.1-15, где соединение общей формулы I вводят в дозе от 0,05 до 50 мг
в сутки.
17. Набор для профилактического лечения болезни Паркинсона, включающий:
(а) диагностический агент, который дает возможность диагностировать предрасположенность к
развитию болезни Паркинсона на ранней или асимптоматической стадии, и
(б) фармацевтический препарат, включающий замещенные 2-аминотетралины общей формулы I,
как определено в одном из пп.1-11.
18. Набор по п.17, где диагностический агент (а) выбран из:
(1) агента или диагностического набора для обнаружения альфа-синуклеина и/или его агрегатов или
(2) агента или диагностического набора для генетического обнаружения мутации, ассоциированной
с проявлением болезни Паркинсона, и/или аллели, ассоциированной с более частым проявлением болезни Паркинсона.
Фиг. 1
Фиг. 2
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
- 14 -