Эффективность применения миелолизата при

Казанский медицинский журнал, 2009 г., том 90, № 6
УДК 616.832—001—002—08—084
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ МИЕЛОЛИЗАТА
ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ СПИННОМОЗГОВОЙ ТРАВМЕ,
ОТЯГОЩЕННОЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ ВОСПАЛЕНИЕМ
Николай Владимирович Мельников
Филиал «Иммунопрепарат» (директор — проф. М.М. Алсынбаев) ФГУП НПО «Микроген» МЗ РФ, г. Уфа,
e-mail: [email protected]
Реферат
При экспериментальной спинномозговой травме
у крыс, отягощенной неспецифическим воспалением, миелолизат в дозе 0,25 мл/кг способен оказывать
нейропротективное действие. Установлено, что профилактическое применение миелолизата существенно
препятствует развитию неврологических расстройств.
В раннем восстановительном периоде после травмы
миелолизат способствует нормализации показателей
двигательной активности животных.
Ключевые слова: экспериментальная спинномозговая травма, миелолизат, двигательная активность.
Актуальной задачей современной
фармакологии является поиск новых лекарственных средств, вызывающих быструю непосредственную защиту нейронов
и проводящих путей спинного мозга и
тем самым способствующих предотвращению дегенеративных повреждений этих
структур, возникающих вследствие ишемии и гипоксии при спинальной травме.
Выявление способности нового препарата миелолизата [2] нормализовать при
гипоксическом синдроме метаболизм в
мотонейронах спинного мозга, снижать
уровень эндогенной интоксикации продуктами пероксидации, нивелировать
процессы деструкции в нервных волокнах и восстанавливать их функциональную активность [3] побудило нас исследовать эффективность его использования
при экспериментальной спинномозговой
травме, отягощенной неспецифическим
воспалением.
Были изучены результаты экспериментов на 30 белых беспородных крысах-самцах массой тела 180—200 г, рандомизированных на 3 равные группы:
1-я — контрольная, 2-я — травма + йод
со спинномозговой травмой, отягощенной неспецифическим воспалением
(травма+йод), 3-я — со спинномозговой
травмой, отягощенной неспецифическим
воспалением, леченной миелолизатом
(травма+йод+миелолизат).
802
Животных 2 и 3-й групп наркотизировали внутрибрюшинным введением
нембутала в дозе 40 мг/кг, в стерильных
условиях им проводили подоболочечную
гемисекцию спинного мозга на уровне
L2—L4 дорсальным доступом [1]. В место
повреждения делали микроинъекцию
1% раствора йода с целью вызвать неспецифическое воспаление. Рану зашивали
стерильным шовным материалом и обрабатывали антисептиком. 3-й группе крыс
в течение 5 дней до нанесения травмы и
5 дней после гемисекции ежедневно внутримышечно вводили миелолизат в дозе
0,25 мл/кг [3]. Животным других групп
адекватно вводили воду для инъекций.
На следующий день после гемисекции
и на 6-е сутки эксперимента определяли
выраженность неврологических нарушений по 4-балльной шкале (табл. 1) [4], а
также фиксировали показатели эмоционального статуса и двигательной активности [1].
Таблица 1
Шкала неврологических нарушений
Баллы
Клинические проявления
1
Норма
2
Умеренный нижний парапарез, незначительная гипестезия, непроизвольное
мочеиспускание
3
Выраженный нижний парапарез и гипестезия, задержка мочеиспускания
4
Параплегия, анестезия, анурия
Статистическую обработку данных
осуществляли с помощью методов вариационной статистики с использованием
компьютерных программ в операционной среде «Windows 2000XP» с пакетом
«Microsoft Office». Различия считали достоверными при p<0,05.
В динамике эксперимента гибели
животных не наблюдалось. У крыс 2-й
Казанский медицинский журнал, 2009 г., том 90, № 6
Таблица 2
Влияние миелолизата на выраженность неврологических расстройств при спинномозговой травме, отягощенной неспецифическим воспалением (n=10; M±m)
Группы животных
Сроки наблюде- Оценка по балльния, сутки
ной шкале
1-я
2-я
3-я
1-е
1
6-е
1
1-е
3,6±0,16
6-е
3,4±0,15
1-е
2,4±0,15 *
6-е
2,1±0,03 **
* p<0,01 по сравнению с данными 2-й группы на 1-е
сутки, ** p<0,01 на 6-е сутки.
группы развитие посттравматического
синдрома в первые сутки проявлялось в
грубых неврологических расстройствах —
выраженных нижних парапарезах и параплегиях, анестезии, нарушениях функций тазовых органов. Оценка неврологических нарушений по шкале составила в
среднем 3,6±0,16 балла (табл. 2). Эмоциональный статус и двигательная активность
животных резко снижались (табл. 3).
выше, чем у крыс, не получавших превентивных инъекций исследуемого препарата (табл. 3).
Введение крысам миелолизата в дозе
0,25 мл/кг в течение 5 дней после травмы,
т.е. в раннем восстановительном периоде,
практически не сказывалось на выраженности неврологических расстройств (оценка по шкале составила 2,1±0,03 балла) по
сравнению с показателями, зафиксированными у животных этой же группы в
первые сутки после травмы. В сравнении
с группой крыс, не получавших лечения,
статистическая значимость различий сохранялась. Кроме того, миелолизат способствовал нормализации показателей
эмоционального статуса и двигательной
активности, которые хотя и не достигали
контрольных значений, но тем не менее
значимо превышали соответствующие показатели группы животных, не получавших лечения (табл. 3).
Полученные данные демонстрируют
высокие нейропротективные свойства миелолизата при экспериментальном травмаТаблица 3
Влияние миелолизата на эмоциональный статус и двигательную ктивность крыс после спинномозговой травмы,
отягощенной неспецифическим воспалением (n=10, M±m)
Эмоциональный статус
Группы животных
Двигательная активность
число пересеченных
квадратов
время удерживания на
наклонной платформе, с
время удерживания на
вращающемся стержне, с
19,0±3,0
18,6±2,7
55,5±3,8
83,0±13,0
59,2±7,7
71,5±3,4
2-я — травма + йод (n=10)
3,8±0,7 ***
4,1±1,1 ***
8,2±2,2 ***
13,6±3,5 ***
6,8±0,5 ***
7,7±2,1***
3-я — травма + йод + миелолизат (n=10)
6,6±0,9 ** +
11,4±2,2 +
41,0±5,5 * ++
39,8±6,1 * ++
6,6±0,9 ** +
13,9±1,6*** +
1-я — контроль (n=10)
* p<0,05, ** p<0,01, *** p<0,001 по сравнению с контролем, + p<0,05, ++ p<0,001 по сравнению с данными 2-й группы.
В числителе — данные в 1-е сутки, в знаменателе — на 6-е сутки.
Профилактическое применение миелолизата в дозе 0,25 мл/кг существенно
препятствовало развитию посттравматических осложнений. У животных, получавших препарат, зафиксированы нижние парапарезы умеренного характера,
незначительная гипестезия. Параплегий
задних конечностей не отмечено. Выраженность неврологических нарушений по
шкале составила 2,4±0,15 балла, что статистически значимо превышало оценку
животных 2-й группы. Эмоциональный
статус и двигательная активность крыс,
получавших миелолизат, в первые сутки
после спинальной травмы были значимо
тическом повреждении спинного мозга,
отягощенном неспецифическим воспалением, особенно при превентивном применении, и позволяют рекомендовать этот
препарат для применения с профилактической целью при плановых реконструктивных оперативных вмешательствах на
позвоночнике.
ВЫВОДЫ
1. При экспериментальной спинномозговой травме у крыс, отягощенной неспецифическим воспалением, миелолизат в
дозе 0,25 мл/кг способен оказывать ней803
Казанский медицинский журнал, 2009 г., том 90, № 6
ропротективное действие.
2. Профилактическое применение миелолизата существенно препятствует развитию неврологических расстройств.
3. В раннем восстановительном периоде миелолизат способствует нормализации показателей двигательной активности крыс.
4. Суфианова Г.З., Усов Л.А., Суфианов А.А. и др. Защитное действие агонистов аденозиновых рецепторов
на модели травматического повреждения спинного
мозга у крыс // Экспер. и клин. мед. — 2002. — Т. 65. —
№ 5. — С. 58—61.
Поступила 14.10.08.
THE EFFECTIVENESS OF MYELOLYSATE USE IN
EXPERIMENTAL SPINAL TRAUMA COMPLICATED
BY UNSPECIFIC INFLAMMATION
ЛИТЕРАТУРА
N.V. Melnikov
1. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Дж. П. Методики
и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. — М.: Высшая школа, 1991. — 385 с.
2. Мельников Н.В., Варламова Т.И., Мухамедьянова Г.Н. и др. Средство, нормализующее функциональную
активность спинного мозга, и способ его получения. —
Патент РФ № 2183126 — Опубл. 10.06.2002. — Бюлл. № 16.
3. Мельников Н.В. Корригирующие свойства миелолизата при экспериментальном гипоксическом
синдроме // Пермский мед. журн. — 2006. — Т. 23,
№ 4. — С. 65—67.
Summary
In experimental spinal injury in rats, compromised
by non-specific inflammation, myelolysate at a dose
of 0.25 ml / kg was able to provide neuroprotective
effects. Established was the fact that prophylactic use of
myelolysate significantly prevents the development of
neurological disorders. In the early recovery period after
injury myelolysate helps to normalize indicators of motor
activity in animals.
Key words: experimental spinal trauma, myelolysate,
motor activity.
УДК 616.832—085.272—084:547.96
АНТИФЛОГИСТИЧЕСКОЕ, АНАЛГЕЗИРУЮЩЕЕ И ПРОТИВОСУДОРОЖНОЕ
ДЕЙСТВИЕ МИЕЛОЛИЗАТА
Николай Владимирович Мельников
Филиал ФГУП «Иммунопрепарат» (директор — проф. М.М. Алсынбаев) НПО «Микроген» МЗ РФ, г. Уфа,
e-mail: [email protected]
Реферат
На модели острого экссудативного воспаления,
вызываемого каррагенином, выявлено умеренное
общее антифлогистическое действие миелолизата.
Исследуемый препарат также обладает умеренным
общим аналгезирующим свойством, определяемым
по его способности влиять на ноцицептивный ответ в
экспериментальной модели «уксусных корчей». Тест
коразоловых судорог показал противосудорожное
действие миелолизата.
Ключевые слова: миелолизат, антифлогистическое, аналгезирующее и противосудорожное действие.
Нами разработан новый препарат —
миелолизат, представляющий собой
естественно сбалансированную смесь
пептидов с молекулярной массой менее
10 кД и свободных аминокислот, получаемую стандартизированным гидролизом
белков спинномозговой ткани свиней [4].
Выявлены нейропротективные свойства
миелолизата при экспериментальном гипоксическом синдроме. Установлено, что
применение препарата в дозе 0,25 мл/кг и
выше способствует снижению интенсив804
ности свободнорадикальных процессов
в тканях спинного мозга, стимулирует
антиоксидантную систему, повышая активность естественного антиоксиданта —
каталазы, и тем самым снижает уровень эндогенной интоксикации. Нормализация метаболизма миелолизатом
препятствует возникновению процессов
деструкции в нервной ткани, способствует восстановлению функциональной
активности спинного мозга и поддерживает жизнедеятельность иннервируемых
структур [5].
Целью данной работы являлось изучение антифлогистического, аналгезирующего и противосудорожного действия
миелолизата.
Антифлогистические свойства миелолизата
оценивали в опыте на 40 белых беспородных
мышах обоего пола массой 18—22 г на модели
острого экссудативного воспаления, вызванного каррагенином [6]. Препаратом сравнения
служил вольтарен. Животных рандомизирова-