ПОлОвЫе РАзлИчИя сУбПОПУляцИОннОгО сОстАвА

Реклама
иммунология № 2, 2012
© Е. Ю. Симонова, А. М. Косырева, 2012
УДК 612.112.94.017.1.6.06.083.3
Е. Ю. Симонова, А. М. Косырева
Половые различия субпопуляционного состава лимфоцитов и
фагоцитарной активности гранулоцитов периферической крови у
крыс Вистар
Кафедра клеточной биологии и гистологии биологического факультета МГУ им. М. В. Ломоносова (119991,
г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12); лаборатория иммуноморфологии воспаления УРАМН НИИ морфологии человека РАМН (117418, г. Москва, ул. Цюрупы, д. 3)
Выявлены половые различия субпопуляционного состава лимфоцитов и фагоцитарной активности гранулоцитов
периферической крови у крыс Вистар в норме. По сравнению с самцами у самок в фазе проэструса выше показатели абсолютного и относительного количества Т-хелперов (CD4+-лимфоциты) и активированных Т-клеток
(CD4+CD25+-лимфоциты), иммунорегуляторного индекса (отношение содержания Т-хелперов к количеству цитотоксических Т-клеток) и индекса стимуляции гранулоцитов, отражающего их фагоцитарную активность. По показателям абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, цитотоксических и регуляторных
Т-клеток в периферической крови различий между самцами и самками не обнаружено.
К л ю ч е в ы е с л о в а : половые различия, крысы Вистар, субпопуляции лимфоцитов, фагоцитарная активность
гранулоцитов
E.Yu. Simonova, A.M. Kosyreva
Gender differences in the lymphocyte subsets and phagocytic activity of
granulocytes in the peripheral blood of Wistar rats
This study has demonstrated gender differences in the composition of lymphocyte subpopulations and phagocytic activity
of granulocytes in the peripheral blood of Wistar rats. Females in proestrus showed a higher absolute and relative amount
of T-helpers (CD4+ lymphocytes) and activated T-cells (CD4+CD25+ lymphocytes) than males. Moreover, their immune
regulatory index (the T-helpers to cytotoxic T-cells ratio) and granulocyte stimulation index reflecting phagocytic activity of these
cells was higher in females than in males. No significant differences were revealed between the absolute and relative numbers
of T-lymphocytes, B-lymphocytes, cytotoxic and regulatory T-cells in the peripheral blood of the male and female rats.
K e y w o r d s : gender differences, Wistar rats, lymphocyte subpopulations, phagocytic activity of granulocytes
По данным литературы, морфофункциональное состояние иммунной системы у самцов и самок определяется различиями кариотипа и уровня стероидных половых гормонов [4]. Половые гормоны связываются со
специфическими рецепторами, которые представлены
на различных типах клеток иммунной системы. Все
иммунокомпетентные клетки крови человека и грызунов экспрессируют эстрогеновые рецепторы [14]. Некоторые типы клеток иммунной системы экспрессируют рецепторы к андрогенам и прогестерону [8].
Нарушения физиологического состояния организма
при стрессовых воздействиях, колебаниях гормонального фона приводят к изменению уровня экспрессии
различных функциональных молекул на иммунокомпетентных клетках [1]. Известно, что морфофункциональное состояние иммунной системы у самок циклически изменяется в зависимости от фазы эстрального
цикла [4, 24]. Фаза проэструса, при которой наблюдается максимальный уровень эстрогенов в сыворотке
крови, характеризуется наиболее интенсивной реакцией иммунной системы на антигенные воздействия
по сравнению с таковой при других фазах эстрального
цикла [5, 24]. Таким образом, эстрогеновый статус является одним из факторов, модулирующих функциональную активность иммунной системы [4].
Стероидные половые гормоны играют важную роль
в регулировании процессов пролиферации, дифференцировки, миграции и активации иммунокомпетентных
Симонова Евгения Юрьевна – асп., тел. 8(985)992-67-37;
e-mail: [email protected]
клеток [14]. Результаты анализа популяционного и субпопуляционного состава клеток периферической крови позволяют объективно оценить интенсивность этих
процессов. Данные литературы по половым различиям
субпопуляционного состава лимфоцитов представлены
работами, выполненными на обезьянах и человеке [19,
21, 22]. В экспериментальных исследованиях широко используют лабораторных животных (грызуны), поэтому
иммунофенотипический анализ основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови самцов и самок
крыс необходим для оценки влияния половых гормонов
на функционирование иммунной системы в норме и при
моделировании патологических процессов.
Целью исследования стало изучение половых различий субпопуляционного состава лимфоцитов и
фагоцитарной активности гранулоцитов периферической крови у крыс Вистар.
Материалы и методы. В работе использовали 20 половозрелых особей крыс Вистар обоего пола (питомник «Столбовая»). Масса тела самцов составляла 300–350 г, самок – 250–300
г. Фазу эстрального цикла у самок определяли по кольпоцитограмме. Отбирали самок в фазе проэструса, которая характеризуется максимальным уровнем эстрогенов в сыворотке крови [5]. Под эфирным наркозом у животных проводили забор
крови из хвостовой вены. В качестве антикоагулянтов использовали ЭДТА (5 мг/мл) и гепарин (50 ЕД/мл). С помощью гематологического анализатора Celltac alpha MEK-6400 («Nihon
Kohden», ) подсчитывали абсолютное количество лейкоцитов и
лимфоцитов в крови. Методом проточной цитофлюорометрии
на приборе Cytomics FC 500 («Beckman Coulter», ) определяли
субпопуляционный состав лимфоцитов и фагоцитарную активность гранулоцитов периферической крови у крыс Вистар.
– 120 –
Врожденный иммунитет
Для иммунофенотипического анализа основных субпопуляций лимфоцитов использовали следующие антитела («eBioscience»): anti-Rat CD3, конъюгированные с FITC и PE (маркер Т-лимфоцитов); anti-Rat CD4, конъюгированные с FITC
(маркер Т-хелперов); anti-Rat CD8a, конъюгированные с PE
(маркер цитотоксических Т-клеток); anti-Rat CD45R, конъюгированные с PE (маркер В-лимфоцитов); anti-Rat CD25,
конъюгированные с PE (маркер активированных Т-клеток);
anti-Mouse/Rat Foxp3, конъюгированные с PE-Cy5 (маркер регуляторных Т-клеток). Лизис эритроцитов в образцах цельной
крови с ЭДТА проводили с помощью раствора OptiLyse C Lysis Solution («Beckman Coulter»). Для выявления субпопуляции
регуляторных Т-лимфоцитов применяли специальный набор
Foxp3 Staining Buffer Set («eBioscience»).
Фагоцитарную активность гранулоцитов оценивали с помощью набора FagoFlowEx Kit («EXBIO Diagnostics»). Образцом отрицательного контроля служила цельная гепаринизированная кровь; в качестве стимулированного образца
использовали кровь с добавлением суспензии Escherichia
coli. В каждый из образцов добавляли дигидрородамин 123
(DHR123) и регистрировали флюоресценцию родамина
123, который образуется при окислении DHR123 в процессе респираторного взрыва в активированных гранулоцитах.
Определяли среднюю интенсивность флюоресценции (СИФ)
в контрольном и стимулированном образцах. Вычисляли индекс стимуляции – отношение СИФ активированных гранулоцитов стимулированного образца к СИФ нестимулированных гранулоцитов образца отрицательного контроля.
Проводили подсчет абсолютного и относительного количества лимфоцитов различных субпопуляций, иммунорегуляторного индекса (ИРИ; соотношение CD4/CD8) и индекса
стимуляции гранулоцитов периферической крови самцов и
самок крыс Вистар. Достоверность различий между показателями определяли с помощью непараметрического U-критерия
Манна–Уитни. Различия считали достоверными при p < 0,05.
Р е з у л ь т а т ы и о б с у ж д е н и е . При подсчете
общего содержания лейкоцитов, а также абсолютного и
относительного количества лимфоцитов в периферической крови достоверных различий между группами самцов и самок крыс Вистар не обнаружили (см. таблицу).
Полученные нами результаты не согласуются с
данными S. Uppal и соавт. [22], которые выявили, что
в норме в крови у женщин выше показатель общего
количества лейкоцитов, а у мужчин выше процентное
содержание лимфоцитов. Однако авторы не выявили
половых различий по показателю абсолютного количества лимфоцитов в периферической крови.
При иммунофенотипическом анализе основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови отметили статистически значимые половые различия по ряду
показателей. У самок в фазе проэструса абсолютное и
относительное количество Т-хелперов (CD4+-клетки) и
активированных Т-лимфоцитов (CD4+CD25+-клетки),
а также ИРИ (соотношение CD4/CD8) были достоверно выше, чем у самцов (см. таблицу). Влияние пола на
субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови изучалось у человека и приматов, тогда как
данные о половых различиях у крыс и других грызунов
в литературе отсутствуют. В исследованиях на человеке
показано, что у женщин выше абсолютное и относительное количество CD4+-Т-лимфоцитов [22]. ИРИ
Субпопуляционный состав лимфоцитов и фагоцитарная активность
(CD4/CD8 – соотношение уровня Т-хелперов
гранулоцитов периферической крови у самцов и самок крыс Вистар
к количеству цитотоксических Т-клеток) в норме у человека составляет в среднем 1,5–2 [1]; у
Показатель
Самцы (1)
Самки (2)
p
6
женщин он выше, чем у мужчин [22]. Результаты
Лейкоциты, кл/мл • 10
14,3 ± 2,1
2) 12,7 ± 1,4
p1–2 > 0,05
исследований на приматах показали, что у самок
Лимфоциты
процентное содержание CD4+-Т-лимфоцитов и
кл/мл · 106
11,0 ± 1,9
4) 9,3 ± 1,0
p1–2 > 0,05
соотношение CD4/CD8 выше по сравнению с
%
75,7 ± 3,5
6) 73,8 ± 3,3
p1–2 > 0,05
аналогичными показателями у самцов [19]. Таким образом, полученные нами данные о полоТ-лимфоциты
вых различиях количества Т-хелперов и ИРИ со6
6,5 ± 1,3
5,1 ± 0,6
p1–2 > 0,05
кл/мл · 10
гласуются с литературными.
%
57,4 ± 3,4
55,7 ± 3,2
p1–2 > 0,05
Известно, что стероидные половые гормоТ-хелперы,
ны модулируют функции CD4+-Т-лимфоцитов
[3, 25]. По данным E. Karpuzoglu и соавт. [12],
кл/мл · 106
1,1 ± 0,1
1,5 ± 0,1
p1–2 < 0,05
спленоциты и изолированные Т-лимфоциты
%
19,4 ± 2,9
29,5 ± 1,4
p1–2 < 0,05
мышей, которым вводили 17β-эстрадиол, хаЦитотоксические Т-клетки
рактеризуются повышенной экспрессией транскрипционного фактора Т-bet по сравнению с та2,9 ± 0,9
1,5 ± 0,3
p1–2 > 0,05
кл/мл · 106
ковой в контрольной группе. Экспрессия T-bet
%
39,3 ± 5,4
27,1 ± 3,5
p1–2 > 0,05
индуцируется различными цитокинами (интерВ-лимфоциты,
лейкин (ИЛ)-27, ИЛ-15 и др.), при этом акти3,4 ± 0,6
2,8 ± 0,4
p1–2 > 0,05
кл/мл · 106
вируется сигнальный каскад ИЛ-12/STAT4, что
приводит к усилению продукции интерферона
%
31,7 ± 2,2
30,4 ± 2,4
p1–2 > 0,05
(ИФН)-γ Т-лимфоцитами и поляризации имИРИ, усл. ед.
0,7 ± 0,2
1,3 ± 0,2
p1–2 < 0,05
мунного ответа по Tx1-типу [16]. Эстрогены в
Активированные Т-клетки,
высокой концентрации поляризуют иммунный
63,0 ± 10,6
119,5 ± 10,1
p1–2 < 0,05
кл/мл · 106
ответ также и по Tx2-типу [4]. Литературные
сведения о влиянии андрогенов на экспрессию
%
5,9 ± 0,6
8,2 ± 0,6
p1–2 < 0,05
T-bet немногочисленны. Показано, что тестоРегуляторные Т-клетки,
стерон снижает активность CD4+-лимфоцитов
42,1 ± 6,0
49,3 ± 6,9
p1–2 > 0,05
кл/мл · 106
[15] и угнетает продукцию Tx1-цитокинов [3].
%
4,0 ± 0,3
4,1 ± 0,3
p1–2 > 0,05
Активированные лимфоциты экспрессируют
молекулу CD25, которая представляет собой
Индекс стимуляции грану4,6 ± 0,4
6,7 ± 0,8
p1–2 < 0,05
лоцитов, усл. ед.
α-цепь рецептора к ИЛ-2 [1]. В норме у чело– 121 –
иммунология № 2, 2012
века CD25+-клетки могут составлять до 18% общей
популяции лимфоцитов [1]. Наиболее часто в клинической практике оценивают количество активированных Т-лимфоцитов (CD4+CD25+-клетки). Данные
о половых различиях количества активированных
Т-клеток в литературе не представлены, однако в исследовании на мышах показано, что введение эстрогенов приводит к увеличению количества CD4+CD25+Т-лимфоцитов в селезенке, лимфатических узлах и
крови [20], что согласуется с полученными нами данными. Однако другие авторы выявили, что содержание активированных Т-лимфоцитов не различается у
мужчин и женщин, а также у женщин в разных фазах
менструального цикла [18].
По абсолютному и относительному количеству
цитотоксических и регуляторных Т-клеток, Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов в периферической крови
статистически значимых различий между самцами и
самками крыс Вистар не обнаружили (см. таблицу).
Другие исследователи также не установили различий
по показателям абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов в крови [19, 22], однако S. Uppal
и соавт. [22] показали, что у мужчин выше процентное количество CD8+-цитотоксических Т-клеток.
Регуляторные Т-лимфоциты представляют собой
популяцию Т-клеток, супрессирующих клеточноопосредованный иммунный ответ путем изменения
функциональной активности эффекторных Т-лимфоцитов [11]. Естественные регуляторные Т-клетки
образуются в процессе тимопоэза и составляют 1–10%
общего количества CD4+ Т-лимфоцитов в тимусе, периферической крови и лимфоидных органах [11]. Важным регулятором развития и функционирования этих
клеток является транскрипционный фактор FoxP3 [11].
Регуляторные Т-клетки в норме у человека составляют
около 4% общего количества лимфоцитов [1]. По данным литературы, колебания уровня эстрадиола в течение менструального цикла изменяют содержание и супрессорную активность регуляторных Т-лимфоцитов
[18]. В секреторной фазе цикла процентное количество
регуляторных Т-клеток в периферической крови выше,
чем в пролиферативной фазе [23]. На ранних сроках беременности отмечают повышение относительного содержания регуляторных Т-лимфоцитов в крови [23]. В
исследованиях in vitro показано, что эстрадиол в физиологической концентрации стимулирует пролиферацию
регуляторных Т-клеток [18]. P. Tai и соавт. [20] обнаружили, что эстрогены усиливают экспрессию транскрипционного фактора FoxP3. У мышей, которым вводили антагонисты эстрогеновых рецепторов, снижены
количество и супрессорная активность регуляторных
Т-клеток, а также уровень экспрессии FoxP3 [18]. Мы,
однако, не выявили различий абсолютного и относительного содержания регуляторных Т-лимфоцитов в
крови у самцов и самок, что не согласуется с данными
литературы.
Показатели абсолютного и относительного количества В-лимфоцитов в периферической крови у
самцов и самок крыс Вистар статистически значимо не различались (см. таблицу). По данным литературы, стероидные половые гормоны модулируют
развитие В-клеток. Повышение уровня эстрадиола
в сыворотке крови приводит к снижению концентрации В-лимфоцитов в костном мозге и селезенке [13].
Кастрация самцов мышей вызывает повышение содержания В-клеток костного мозга, Т-клеток тимуса
и лимфоцитов селезенки [10], а введение андрогенов
подавляет развитие В- и Т-лимфоцитов [17].
Индекс стимуляции гранулоцитов периферической
крови, отражающий их фагоцитарную активность, был
достоверно выше у самок, чем у самцов (см. таблицу). Известно, что эстрогены и андрогены оказывают
влияние на функционирование нейтрофилов периферической крови. Тестостерон повышает активность
нейтрофилов, тогда как эстрогены подавляют ее путем
ограничения транспорта кальция внутрь клеток [9]. По
сравнению с нейтрофилами самцов нейтрофилы самок в фазе проэструса характеризуются повышенной
устойчивостью к активации при ожогах и посттравматическом кровотечении [9]. 17β-Эстрадиол значительно снижает продукцию нейтрофилами супероксидного
радикала и уменьшает интенсивность респираторного
взрыва [6]. D. Aldebert и соавт. [2] исследовали фагоцитарную активность гранулоцитов периферической
крови у здоровых мужчин и женщин после стимуляции
этих клеток конидиями Aspergillus. Авторы показали,
что у мужчин выше уровень экспрессии рецептора
TLR2 и процентное содержание фагоцитирующих гранулоцитов, но по уровню продукции активных форм
кислорода гранулоцитами они не установили половых
различий. Другие исследователи также продемонстрировали, что эстрогены не снижают активность респираторного взрыва в нейтрофилах [7]. Таким образом,
полученные нами данные о фагоцитарной активности
гранулоцитов периферической крови у самцов и самок
не согласуются с данными литературы, что связано,
по-видимому, с межвидовыми различиями уровня стероидных гормонов и их метаболитов.
Выводы
1. Выявлены половые различия субпопуляционного состава лимфоцитов и фагоцитарной активности
гранулоцитов периферической крови у крыс Вистар.
У самок в фазе проэструса показатели абсолютного
и относительного количества Т-хелперов и активированных Т-лимфоцитов, ИРИ и индекса стимуляции
гранулоцитов выше, чем у самцов.
2. По показателям абсолютного и относительного
содержания Т-лимфоцитов, цитотоксических Т-клеток,
регуляторных Т-клеток и В-лимфоцитов различий между самцами и самками крыс Вистар не обнаружено.
Литература
1. Чередеев А. Н., Горлина Н. К., Козлов И. Г. CD-маркеры в
практике клинико-диагностических лабораторий // Клин.
лаб. диагн. – 1999. – № 6. – С. 25–31.
2. Aldebert D., Hypolite M., Bal G. et al. Effects of age, gender and
time on receptor expression and anti-Aspergillus functions of human
phagocytes // Cell. Immunol. – 2011. – Vol. 270. – P. 230–236.
3. Angele M. K., Knöferl M. W., Ayala A. et al. Testosterone and estrogen differently effect Th1 and Th2 cytokine release following
trauma-hemorrhage // Cytokine. – 2001. – Vol. 16. – P. 22–30.
4. Angele M. K., Frantz M. C., Chaudry I. H. Gender and sex hormones influence the response to trauma and sepsis: potential therapeutic approaches // Clinics. – 2006. – Vol. 61, N 5. – P. 479–488.
5. Bebo B. F., Fyfe-Johnson A., Adlard K. et al. Low-dose estrogen
therapy ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis in two different inbred mouse strains // J. Immunol. – 2001.
– Vol. 166, N 3. – P. 2080–2089.
– 122 –
Клеточная иммунология
6. Bekesi G., Tulassay Z., Racz K. et al. The effect of estrogens on
superoxide anion generation by human neutrophil granulocytes:
possible consequences of the antioxidant defense // Gynecol. Endocrinol. – 2007. – Vol. 2. – P. 1–4.
7. Chiang K., Parthasarathy S., Santanam N. Estrogen, neutrophils
and oxidation // Life Sci. – 2004. – Vol. 75, N 20. – P. 2425–2438.
8. Cutolo M., Sulli A., Capellino S. et al. Sex hormones influence on
the immune system: basic and clinical aspects in autoimmunity //
Lupus. – 2004. – Vol. 13. – P. 635–638.
9. Deitch E. A., Ananthakrishnan P., Cohen D. B. et al. Neutrophil
activation is modulated by sex hormones after trauma-hemorrhagic shock and burn injuries // Am. J. Physiol. Heart Circ.
Physiol. – 2006. – Vol. 29, N 3. – P. 1456–1465.
10.Ellis T. M., Moser M. T., Le P. T. et al. Alterations in peripheral B
cells and B cell progenitors following androgen ablation in mice
// Int. Immunol. – 2001. – Vol. 13, N 4. – P. 553–558.
11. Itoh M., Takahashi T., Sakaguchi N. et al. Thymus and autoimmunity: production of CD25+CD4+ naturally anergic and suppressive T cells as a key function of the thymus in maintaining
immunologic self-tolerance // J. Immunol. – 1999. – Vol. 162, N
9. – P. 5317–5326.
12.Karpuzoglu E., Phillips R. A., Godal R. M., Ansar-Ahmed S. IFNgamma-inducing transcription factor, T-bet is upregulated by estrogen in murine splenocytes: role of IL-27 but not IL-12 // Mol.
Immunol. – 2007. – Vol. 44, N 7. – P. 1819–1825.
13.Kincade P. W., Medina K. L., Payne K. J. et al. Early B-lymphocyte
precursors and their regulation by sex steroids // Immunol. Rev. –
2000. – Vol. 175. – P. 128–137.
14.Klein S. L., Roberts C. W. Sex Hormones and Immunity to
Infection. – Amsterdam, 2010.
15.Maurer M., Trajanoski Z., Frey G. et al. Differential gene expression profile of glucocorticoids, testosterone, and dehydroepiandrosterone in human cells // Horm. Metab. Res. – 2001. – Vol.
33, N 12. – P. 691–695.
16.Mullen A. C., High F. A., Hutchins A. S. et al. Role of T-bet in
commitment of TH1 cells before IL-12-dependent selection //
Science. – 2001. – Vol. 292, N 5523. – P. 1907–1910.
17. Olsen N. J., Kovacs W. J. Effects of androgens on T and B lymphocyte development // Immunol. Res. – 2001. – Vol. 23. – P. 281–288.
18.Prieto G. A., Rosenstein Y. Oestradiol potentiates the suppressive
function of human CD4+CD25+ regulatory T cells by promoting
their proliferation // J. Immunol. – 2006. – Vol. 118. – P. 58–65.
19. Qiu C. L., Zhao H., Yang G. B. et al. Flow cytometric characterization
of T lymphocyte subsets in the peripheral blood of Chinese rhesus
macaques: normal range, age- and sex-related differences // Vet.
Immunol. Immunopathol. – 2008. – Vol. 124. – P. 313–321.
20.Tai P., Wang J., Jin H. et al. Induction of regulatory T cells by
physiological level estrogen // J. Cell. Physiol. – 2008. – Vol.
214, N 2. – P. 456–464.
21.Tryphonas H., Lacroix F., Hayward S. et al. Cell surface marker
evaluation of infant Macaca monkey leukocytes in peripheral
whole blood using simultaneous dual-color immunophenotypic
analysis // J. Med. Primatol. – 1996. – Vol. 25. – P. 89–105.
22.Uppal S. S., Verma S., Dhot P. S. Normal values of CD4 and CD8
lymphocyte subsets in healthy Indian adults and the effects of
sex, age, ethnicity, and smoking // Cytometry B: Clin. Cytom. –
2003. – Vol. 52. – P. 32–36.
23. Weinberg A., Enomoto L., Marcus R., Canniff J. Effect of menstrual
cycle variation in female sex hormones on cellular immunity and
regulation // J. Reprod. Immunol. – 2011. – Vol. 89. – P. 70–77.
24.Wichmann M. W., Muller C., Meyer G. et al. Different immune
responses to abdominal surgery in men and women // Langenbecks
Arch. Surg. – 2003. – Vol. 387. – P. 397–401.
25.Wunderlich F., Benten W. P., Lieberherr M. et al. Testosterone
signaling in T cells and macrophages // Steroids. – 2002. – Vol.
67, N 6. – P. 535–538.
Поступила 13.12.11
Клеточная иммунология
© Коллектив авторов, 2012
УДК 616-006.04-092:612.017.1-018.83]-092.9
Н. Ю. Анисимова2, Р. Я. Власенко1, М. В. Киселевский2, О. В. Козырева1, Ю. Е. Цветков3,
Е. А. Хатунцева3, Н. Э. Нифантьев3, Р. Н. Степаненко1
Дендритные клетки – адъювант для индукции иммунного ответа на
синтетический углеводный фрагмент, конъюгированный с белком
Федеральное государственное бюджетное учреждение Государственный научный центр Институт иммунологии Федерального медико-биологического агентства (115478, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24, корп. 2);
2
Российский онкологический научный центр им. акад. Н. Н. Блохина РАМН (115478, г. Москва, Каширское
шоссе, д. 24); 3Институт органической химии им. Н. Д. Зелинского Российской академии наук (119991, г. Москва, В-334, Ленинский пр-т, д. 47)
1
Известно, дендритные клетки (ДК) являются эффективным эндогенным адъювантом иммунного ответа на онкоантигены белковой природы. Однако это свойство ДК малоизучено в отношении гликолипидных онкоантигенов, одним из которых является ганглиозид GM3 – низкоиммуногенный опухольассоциированный антиген, представленный на клетках
меланомы, нейробластомы и некоторых других опухолей. Нами был синтезирован синтетический аналог углеводного
фрагмента этого ганглиозида. Синтезированные углеводные цепи были ковалентно присоединены к высокоиммуногенному белку гемоцианину. Цель данной работы – выяснить, способны ли ДК, пульсированные этим конъюгатом, индуцировать иммунный ответ на антигенные детерминанты, представленные на его углеводных и белковых компонентах.
Установлено, что введение мышам ДК, пульсированным конъюгатом, приводит к образованию антител, синтетическому углеводному фрагменту и гемоцианину, а также к появлению цитотоксических лимфоцитов против клеток
меланомы В16.
К л ю ч е в ы е с л о в а : дендритные клетки, опухольассоциированные антигены, иммунный ответ на опухольассоциированные антигены
– 123 –
Скачать