Оценка ранозаживляющего действия геля АФЛОГИЛЕКС на
advertisement
2 ОЦЕНКА РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ АФЛОГИЛЕКС НА МОДЕЛИ ЛИНЕЙНОЙ КОЖНОЙ РАНЫ Объектом исследования являлся новый препарат – ГЕЛЯ АФЛОГИЛЕКС, представляющий интерес для лечения неинфицированных ран. Цель работы – выявление специфической ранозаживляющей активности нового препарата на основе пептидного комплекса на модели линейной кожной раны в сравнении с зарегистрированными на территории РФ препаратами – Солкосерил и Левомиколь. В ходе эксперимента было установлено наличие специфической активности нового препарата АФЛОГИЛЕКС. Исследуемый препарат в дозе 0,5 г/животное проявил ранозаживляющий эффект, что нашло свое отражение как в статистически значимом увеличении механического усилия, необходимого для разрыва шва, так и усиление процессов регенерации. Эффект был подтвержден гистологическими исследованиями. По своей фармакологической активности исследуемый препарат, содержащий пептиднофосфолипидный комплекс, превзошел препараты сравнения – Левомеколь и Солкосерил. Ключевые слова: Линейная рана, ранотензиометрия, АФЛОГИЛЕКС, Левомеколь, Солкосерил 3 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ ......................................................................................................................................... 6 1 Материалы и методы ....................................................................................................................... 8 1.1 Тестируемые вещества ............................................................................................................. 8 1.2 Животные .................................................................................................................................. 10 1.2.1 Акклиматизация и отбор животных для исследования ................................................. 10 1.2.2 Распределение по группам ............................................................................................... 10 1.2.3 Идентификация животных ............................................................................................... 11 1.2.4 Содержание животных ...................................................................................................... 11 1.3. Способ введения ...................................................................................................................... 11 1.4 Методология ............................................................................................................................. 12 1.4.1 Индукция патологии ......................................................................................................... 12 1.4.2 Процедура нанесения препаратов .................................................................................... 12 1.4.3 Масса тела .......................................................................................................................... 12 1.4.4 Клинические наблюдения ................................................................................................. 13 1.4.5 Гистологические исследования ........................................................................................ 13 1.4.6 Анализ данных ................................................................................................................... 13 2 Результаты исследования................................................................................................................ 14 2.1 Дизайн исследования ............................................................................................................... 14 2.2 Масса тела ................................................................................................................................. 14 2.3 Оценка регенераторных свойств препаратов......................................................................... 14 ЗАКЛЮЧЕНИЕ................................................................................................................................... 20 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ .................................................................................................................. 21 4 НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ В настоящем отчете о НИР использованы ссылки на следующие стандарты: • Национальный стандарт Российской Федерации ГОСТ Р 53434-2009 «Принципы надлежащей лабораторной практики» (Москва 2010); • Guide for the care and use of laboratory animals. National Academy press. –Washington, D.C. 1996; • Current Protocols in Pharmacology (2005) Animal Models of Disease // Contributed by Petter Hedlund, Kenshi Matsumoto, and Karl-Erik Andersson 5 ВВЕДЕНИЕ Одной из наиболее важных задач при лечении кожных ран различного генеза является создание оптимальных условий для получения наиболее полноценного регенераторного процесса. Заживление ран – это сложный процесс, итогом которого является восстановление внеклеточного матрикса и функционально активного покрова с формированием или без формирования рубца. За последние 20 лет проведены колоссальные исследования, направленные на поиск фармакологических средств, целенаправленно влияющих на полноту регенерации кожи. Исследованы различные фармакологические группы веществ: протеолитические ферменты, анаболические гормоны, антисептики синтетического ряда, адсорбенты и другие активные молекулы, стимулирующие метаболические процессы [2-4]. Следует отметить, что наиболее удобными и перспективными лекарственными форами для дерматологии являются кремы, мази и гели. Данные мягкие лекарственные формы используются накожно и/или наносятся на слизистую. Основными преимуществами данных лекарственных средств являются равномерное распределение действующего вещества, простота использования, возможность применения в детской и гериатрической практике. Однако, несмотря на высокую эффективность действующего вещества и местное применение, большинство препаратов имеют ряд побочных эффектов, которые могут носить как локальный (аллергические реакции), так и системный (глюкокортикоиды) характер. Следовательно, многие препараты имеют ряд ограничений для применения. В последние годы все более популярным становится поиск новых биопрепаратов из природных организмов, применение которых не сопровождалось бы побочными эффектами, угнетающими иммунную систему. Особое внимание исследователи уделяют экстрагированию биопрепаратов из водных организмов, обладающих противоопухолевой, противовоспалительной, антимикробной, антивирусной и регенераторной активностью за счет входящих в состав липидов, мукополисахаридов, пептидов и гликопротеинов. В последние годы, биопрепараты выделяют из устриц, мидий, крабов, креветок, трепангов и многих видов рыб [5]. Позитивные эффекты биопрепаратов были описаны еще в 40-х годах прошлого столетия, примером является успешное применение вытяжек, богатых витамином А и каротином из рыб семейства Коклюшковые (Gasterosteus) в блокадном Ленинграде в военные годы в качестве средства для лечения ран и ожогов [1]. 6 Цель Основной целью экспериментального исследования явилось изучение влияния геля АФЛОГИЛЕКС, на течение экспериментального раневого процесса. Задачи • Индукция линейной кожной раны на крысах-самцах. • Оценка влияния геля АФЛОГИЛЕКС на течение раневого процесса. • Сравнение ранозаживляющей активности геля АФЛОГИЛЕКС зарегистрированными на территории Российской Федерации: Левомеколь и мазью – Солкосерил. 7 с мазью – 1 Материалы и методы 1.1 Тестируемые вещества 1.1.1 Препарат сравнения № 1: Левомеколь (Диоксометилтетрагидропиримидин + Хлорамфеникол) Серия №: 2320810 Годен до: 03.2014 Производитель: НИЖФАРМ, Россия Лекарственная форма: мазь для наружного применения Состав препарата: активное вещество – смесь левомицетина - 0,75 г, метилурацила 4 г. Вспомогательные вещества: полиэтиленоксид 1500; полиэтиленоксид 400. Фармакологические свойства: противовоспалительное (дегидратирующее) и противомикробное действие, в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов (стафилококков, синегнойных и кишечных палочек). Легко проникает в глубь тканей без повреждения биологических мембран, стимулирует процессы регенерации. Показания: Гнойные раны, инфицированные смешанной флорой, включая стафилококки, синегнойные и кишечные палочки 1.1.2 Препарат сравнения № 2: Солкосерил Серия №: 125400 Годен до: 07.2015 Производитель: Легаси Фармасьютикалс, Швейцаря Лекарственная форма: мазь для наружного применения Состав препарата: активное вещество – депротенизироваванный диализат из крови молочных телят, в пересчете на сухое вещество 4,15 мг/г и 2,07 мг/г соответственно. Вспомогательные вещества: метилпарагидроксибензоат, пропилпарагидроксибензоат, цетиловый спирт, холестерол, белый вазелин, вода для инъекций. Фармакологические свойства: представляет собой депротенизированный гемодиализат, содержащий широкий спектр низкомолекулярных компонентов клеточной массы и сыворотки крови молочных телят с молекулярной массой 5000D (гликопептиды, нуклеозиды и нуклеотиды, олигопептиды, аминокислоты). Установлено, что Солкосерил обладает следующими свойствами: 8 • улучшает транспорт кислорода и глюкозы клетками, находящимися в условиях гипоксии; • повышает синтез внутриклеточного АТФ и способствует увеличению доли аэробного гликолиза и окислительного фосфорилирования; • активизирует репаративные и регенеративные процессы в тканях; • стимулирует пролиферацию фибробластов и синтез коллагена стенки сосудов. Показания: незначительные повреждения (ссадины, царапины, порезы), ожоги 1 и 2 степени, обморожения, трудно заживающие раны (в том числе трофические язвы и пролежни). 1.1.3 Тестируемое средство: АФЛОГИЛЕКС. Производитель: ЗАО «Санкт-Петербургский Институт Фармации»; Лекарственная форма: гель 0,02%. Серия №: 4 Годен до: 26.11.2013 Фармакологические свойства Входящий в состав препарата пептидно-фосфолипидный комплекс с молекулярной массой от 7 до 10 кДа является селективным ингибитором ЦОГ-2 (циклооксигеназа-2), ингибитором 5-ЛОГ (5-липооксигеназа), оказывает противовоспалительное и противоаллергическое действие, уменьшая воспалительные процессы, в том числе с аллергическим компонентом. По степени воздействия на организм АФЛОГИЛЕКС гель 0,02% относится к 4 классу опасности согласно ГОСТ 12.1.007 (вещества малоопасные). В рекомендуемых дозах не оказывает местно-раздражающего, эмбриотоксического и канцерогенного действия. Порядок применения АФЛОГИЛЕКС гель 0,02% применяют при воспалительных и аллергических острых и хронических процессах на коже и слизистой: дерматиты различной этиологии, экземы, маститы, эндометриты; при кожных проявлениях заболеваний внутренних органов (панкреатиты, гепатиты, нефриты, циститы и др.), а также при острых и хронических заболеваниях суставов (артриты, артрозы, спондилиты и др.). Снимает зуд, отеки, гиперемию в местах расчесов в результате укусов эктопаразитов (блох, клещей, власоедов, вшей и др.). Противопоказанием к применению лекарственного препарата является повышенная индивидуальная чувствительность животного к пептидно-фосфолипидному комплексу. 9 Препарат наносят на поврежденный участок кожи лошадей, крупного и мелкого рогатого скота и свиней 2 раза в день в количестве 0,08 г/кг; для собак и кошек 3-4 раза в день в количестве 0,23 г/кг. Курс лечения составляет 5-7 дней. Перед применением препарата с пораженных мест удаляют механические загрязнения, при необходимости выстригают шерсть. Гель наносят тонким слоем, равномерно распределяя от периферии к центру с захватом пограничной здоровой кожи до 1 см. Симптомы передозировки при применении лекарственного препарата не выявлены. При применении АФЛОГИЛЕКС геля 0,02% побочных явлений и осложнений, как правило, не наблюдается. Особенностей действия при первом применении препарата и при его отмене не выявлено. Продукцию от животных, которым применяли АФЛОГИЛЕКС гель 0,02%, используют в пищевых целях без ограничений. 1.2 Животные Крысы (беспородные самцы) получены из питомника лабораторных животных РАМН «Рапполово». Ветеринарное свидетельство № 0044266 от 20.01.11. 1.2.1 Акклиматизация и отбор животных для исследования Длительность акклиматизационного периода для всех животных составила не менее 14 дней. В течение карантина проводили ежедневный осмотр каждого животного (поведение и общее состояние), животных наблюдали в клетках (заболеваемость и смертность). Перед началом исследования животные, отвечающие критериям включения в эксперимент, были распределены на группы. Животные, несоответствующие критериям, были исключены из исследования в течение карантина. 1.2.2 Распределение по группам В экспериментальные группы были отобраны животные без признаков отклонений внешнего вида. Животных рандомизировали по группам таким образом, что каждая группа включала 6 голов. 10 1.2.3 Идентификация животных Маркировка клетки кодировала пол животных, породу, дату нанесения линейной раны, дату начала нанесения препаратов, название группы. Каждому отобранному в исследование животному был присвоен индивидуальный номер. 1.2.4 Содержание животных Животные содержались в стандартных условиях в соответствии с правилами, утвержденными ГОСТ Р 53434-2009 г., по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев). В период акклиматизации и эксперимента животные были размещены в поликарбонатных клетках фирмы Charles River laboratories Inc тип 4H со стальными решетчатыми крышками с кормовым углублением. В каждой клетке размещалось по 6 крыс-самцов (площадь пола на 1 животное составляла 300 см2). Уборка клеток и смена подстила производилась минимум 2 раза в неделю. В период акклиматизации животных кормили комбикормом ПК-120-1, приготовленным по ГОСТ Р 50258-92 в соответствии с нормами, утвержденными приказом МЗ СССР №755 от 12.08.77 г. Животные получали воду, соответствующую СОП АБ-38v2. Корм и вода довались ad libitum в кормовое углубление стальной решетчатой крышки клетки. В качестве подстила использовались опилки. Световой режим составлял 12 часов света и 12 часов темноты. Температура воздуха поддерживалась в пределах 18–22°C, относительная влажность — 50–70%. Температура и влажность воздуха регистрировались ежедневно. Никаких существенных отклонений этих параметров в период акклиматизации и в ходе эксперимента не произошло. 1.3. Способ введения Метод нанесения препаратов крысам – накожный, который является аналогом местного применения для человека, выбран в соответствии с таковым предусмотренным для клинического применения препарата. Дозы исследуемых препаратов приведены в таблице 1. Таблица 1 - Схема эксперимента на лабораторных крысах-самцах Содержание Номер Количество Доза, Описание группы активного вещества в группы животных г/животное 1,0 г, г 1 6 Контрольная нет нет Препарат сравнения хлорамфеникол 0,0075 2 6 0,5 Левомеколь метилурацил 0,04 11 депротенизироваванный диализат из крови молочных телят, в Препарат сравнения – 3 6 0,5 пересчете на сухое Солкосерил вещество 4,15 мг/г и 2,07 мг/г соответственно 0,0002 пептидноАФЛОГИЛЕКС 0,02% 4 6 0,5 фосфолипидного гель комплекса Препарат был предоставлен Заказчиком в готовом виде. Нанесение исследуемых препаратов осуществляли ежедневно. 1.4 Методология 1.4.1 Индукция патологии Индукция патологии (оперативное вмешательство по нанесению ран) осуществлялась под наркозом. В качестве анестезирующего вещества использовали «Золетил 100» («Virbac Sante Animale», Франция) - диссоциативный анестетик, разрешенный к применению на территории Российской Федерации. После наркотизации животного приступали к хирургическим вмешательствам. Для нанесения линейных ран шерсть на дорсальной поверхности животных выстригалась вдоль позвоночника на ширину 300 мм и длину 700 мм. Рана наносилась по шаблону при помощи одноразового скальпеля посередине выстриженного участка на длину 500±2 мм до собственной фасции. Затем на равном расстоянии накладывались 4 шва (нить капроновая с фторполимерным покрытием – Фторлин, Линтекс) сближающие края раны и обеспечивающие регенерацию раны от краев к центру. Для удобства последующего измерения размеров ран швы накладываются с таким расчетом, чтобы эпителий боковых краев раны не соприкасался, и эпителизация происходила от конечных краев раны. 1.4.2 Процедура нанесения препаратов Препараты наносили накожно (на область раны) в течение 14 дней, один раз в день в указанных дозах. После нанесения препаратов животные помещались в индивидуальные метаболические клетки на 1 час, для предотвращения слизывания препаратов. 1.4.3 Масса тела Взвешивание животных проводили до начала нанесения линейной раны для расчета дозы анестетика, далее на 14 сутки по окончанию нанесения веществ. 12 1.4.4 Клинические наблюдения Клинический осмотр каждого животного проводился ежедневно однократно. Выполняли подробный осмотр животного в клетке содержания и в руках. 1.4.5 Гистологические исследования Гистологическое изучение образцов поврежденной непосредственно после эвтаназии животного, вырезался кожи осуществлялось лоскут кожи 1см на 2см (с захватом пораженного и здорового участка), который помещался в фиксирующую жидкость (10% нейтральный забуференный формалин) от 24 до 72 ч. После промывки в слабощелочном растворе NH4OH осуществлялась нарезка и стандартная гистологическая проводка через спирты возрастающей концентрации и пропитывание в хлороформе с последующей заливкой в парафин. С парафиновых блоков делались срезы толщиной 4-6 мкм, окрашивались гематоксилином и эозином для выявления типовых гистологических характеристик и изучения необходимых параметров с помощью световой микроскопии. С целью выявления степени патологических изменений полуколичественным методом были оценены основные патологические процессы, характерные для регенерации (выраженность инфильтрации, степень поражения кожного слоя и подкожно-жировой клетчатки, глубина повреждения, выраженность деструктивных и воспалительных изменений, вовлеченных в патологический процесс различных структур кожи). 1.4.6 Анализ данных Для проведения статистического анализа было использовано программное обеспечение Statistica 6.0. В этой программе был использован метод описательной статистики для зависимых и независимых переменных. Межгрупповые различия анализировались параметрическим методом. Тип распределения определялся критерием Шапиро-Уилка. В качестве параметрического критерия использовался критерий Стьюдента для множественных сравнений. Статистически значимые отличия определялись при уровне достоверности 0,05. 13 2 Результаты исследования 2.1 Дизайн исследования Дизайн исследования приведен в таблице 2. Таблица 2 – Дизайн исследования Сутки эксперимента Манипуляция 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Моделирование линейной раны Нанесение препарата Регистрация массы тела Эвтаназия в СО2 – камере, с дальнейшим обескровливанием Забор образцов ткани До нанесения линейной раны животное с меткой 6 в группе Солкосерил было обнаружено мертвым, проведенная некропсия патологических изменений не выявила. 2.2 Масса тела Массу животных оценивали в двух точках эксперимента: до начала нанесения препаратов и после окончания нанесения препаратов, перед эвтаназией. Результаты представлены в таблице 3. Таблица 3 – Динамика массы тела крыс-самцов, г, M±m Сутки эксперимента Группа 1 14 Контроль 345±13 358±14 n=6 Левомеколь 0,5 г/животное 344±13 371±18 n=6 Солкосерил 0,5 г/животное 380±17 384±15 n=5 АФЛОГИЛЕКС 0,5 г/животное 368±13 383±15 n=6 × - различия статистически значимы по сравнению с группой контроль (р<0,05) В данном эксперименте масса тела животных оценивалась для расчета дозы анестетика, а также с целью выявления возможных системных побочных эффектов при применении геля АФЛОГИЛЕКС. 2.3 Оценка регенераторных свойств препаратов Эффективность лечения оценивали на основании визуальной оценки состояния раны и послеоперационного рубца, а также ранотензиометрии. 14 гистологических исследований и Визуальная оценка раны В группе контрольных животных, спустя 14 дней наблюдали переход раневого процесса от фазы регенерации к фазе рубцевания и эпителизации (рис. 1). Рис. 1 – Течение раневого процесса спустя 14 дней моделирования линейной кожной раны. Группа Контроль. При визуальной оценке раны животных данной группы воспалительных процессов не выявлено. Процесс регенерации наблюдался от краев раны к центру (ранозаживление происходило смешанным образом - как первичным, так и вторичным натяжением). В области раны у животных отмечена гиперемия. В группе животных, которым на рану наносили препарат сравнения – Левомеколь, регенерация также происходила от краев раны к центру (рис. 2). Рис. 2 – Течение раневого процесса спустя 14 дней моделирования линейной кожной раны. Группа Левомеколь 0,5 г/животное. При визуальной оценке раны животных данной группы признаков воспаления не выявлено (ранозаживление происходило смешанным образом - как первичным, так и вторичным натяжением). Гиперемия в области раны встречалась в единичных случаях. В группе животных, которым на рану наносили препарат сравнения – Солкосерил, регенерация также происходила от краев раны к центру (рис. 3). 15 Рис. 3 – Течение раневого процесса спустя 14 дней моделирования линейной кожной раны. Группа Солкосерил 0,5 г/животное. Следует отметить, что у части животных при визуальной оценке раны (спустя 14-ть дней систематического нанесения препарата сравнения - Солкосерил) наблюдали признаки воспалительного процесса по типу гнойного (рис. 4), гиперемию и зоны некроза. Ранозаживление проходило вторичным натяжением. Рис. 4 – Течение раневого процесса спустя 14 дней моделирования линейной кожной раны. Группа Солкосерил 0,5 г/животное. В группе животных, которым на рану наносили исследуемый препарат Аллеоргонет, регенерация происходила от краев раны к центру (рис. 5). Рис. 5 – Течение раневого процесса спустя 14 дней моделирования линейной кожной раны. Группа АФЛОГИЛЕКС 0,5 г/животное. При визуальной оценке раны животных данной группы признаков воспаления не выявлено (ранозаживление происходило в основном первичным натяжением). Гиперемия в области раны не наблюдалась. 16 Ранотензиометрия Ранотензиометрию выполняли на устройстве - «Тензиометр» (СПбИФ, Россия), позволяющем получать количественную оценку деформационно-прочностных свойств рубца на разрыв. Абсолютные данные были получены в «грамм-сила» (дольная единица силы в системе единиц МКГСС), далее путем математических расчетов были преобразованы в Ньютоны* (производная единица системы СИ – N). Полученные данные приведены в таблице 4. Таблица 4 – Данные ранотензиометрии, N, M±m Группа Прочность шва на разрыв, N Контроль n=6 Левомеколь 0,5 г/животное n=6 Солкосерил 0,5 г/животное n=5 АФЛОГИЛЕКС 0,5 г/животное n=6 2,60±0,42 3,60±0,71 5,59±0,78× 5,40±1,1× × - различия статистически значимы по сравнению с группой контроль (р<0,05) Примечание*: 1 грамм-силы равен 0,001 килограмм-силы (точно) или 0,00980665 Ньютонов. Из данных таблицы 4 видно, что усилие, необходимое для разрыва шва, при применении 0,02% геля АФЛОГИЛЕКС, в дозе 0,5 г/животное в среднем составило 5,40 N, что было статистически значимо выше, чем в группе контроль. При применении препарата сравнения – Левомеколь в дозе 0,5 г/животное наблюдали слабовыраженную тенденцию к увеличению прочности образовавшегося шва. При применении препарата сравнения – Солкосерил в дозе 0,5 г/животное усилие, необходимое для разрыва шва, в среднем составило 5,59 N, что было статистически значимо выше, чем в группе контроль. Гистологические исследования В ходе гистологического исследования в группе контрольных животных (рис. 6) было установлено наличие выраженных изменений дермальной и субэпидермальной зон, с явлениями хронического продуктивного воспаления: умеренный отек стромы, ангиоматоз, очаговая гиперплазия потовых желез, выраженная пролиферация переневральных зон, формирование воспалительного вала с преобладанием плазмацитарной клеточной дифференцировки. в нем лимфоцитарно- Данные изменения свидетельствуют о переходе репаративной стадии раневого процесса к эпителизации и рубцеванию, а значит 17 можно ожидать в последующем отсутствие деформирующих процессов с дальнейшим образованием келоидного рубца. Рис. 6 Контрольная группа Окраска – гематоксилин и эозин, Увх100 Рис. 7 Группа Левомеколь 0,5 г/животное. Окраска – гематоксилин и эозин, Увх100 Рис. 8 Группа Солкосерил 0,5 г/животное. Окраска – гематоксилин и эозин, Увх100 Рис. 9 Группа АФЛОГИЛЕКС 0,5 г/животное. Окраска – гематоксилин и эозин, Увх100 В группе животных, получавших препарат сравнения – Левомеколь (рис. 7), наблюдались умеренно выраженное изменение преимущественно в дермальных слоях (поверхностных), гиперкератоз, выраженный акантоз, очаговая гиперплазия гладкомышечных волокон, слабо выраженная клеточная воспалительная реакция. В группе животных, получавших препарат сравнения – Солкосерил (рис. 8) у всех животных группы наблюдались выраженные агрессивные проявления, местами достигающие глубоких отделов кожи, с захватом подкожно-жировой клетчатки и деструкцией сосудисто-нервного пучка глубоких отделов (обширные зоны некроза, местами доходящие до мышечной пластинки, ангиоматоз, диффузная мелкоочаговая воспалительная реакция, с преобладанием лимфоцитарно-плазмоцитарной клеточной дифференцировки). 18 При применении исследуемого препарата АФЛОГИЛЕКС наблюдались максимально выраженные регенераторные способности (рис. 9), о чем свидетельствуют слабо выраженные изменения, без затрагивания глубоких зон. 19 ЗАКЛЮЧЕНИЕ Изучение регенераторных свойств 0,02% геля АФЛОГИЛЕКС, проводили на экспериментальной модели линейной асептической кожной раны. В контрольной группе животных спустя 14-ть суток после нанесения раны наблюдалось хроническое продуктивное воспаление, характеризующее переход репаративной стадии раневого процесса к эпителизации и рубцеванию. Следует отметить, что воспалительных реакций (гнойного экссудата) при клиническом осмотре не выявлено. Заживление раны происходило путем первичного натяжения. Также для данной группы была проведена оценка усилия, необходимого для разрыва шва, которое составило 2,60 N. Лекарственный препарат сравнения – Левомеколь, спустя 14-ть дней систематического нанесения на область кожной раны способствовал оптимизации протекания раневого процесса, что нашло свое отражение в тенденции к увеличению усилия, необходимого для разрыва шва, по сравнению с контрольными животными. Однако гистологические исследования выявили наличие выраженного акантоза, что позволяет прогнозировать замещение эпителиальной ткани на соединительную ткань. Лекарственный препарат сравнения – Солкосерил, спустя 14-ть дней систематического нанесения на область кожной раны статистически значимо увеличивал усилие, необходимое для разрыва шва, по сравнению с контрольными животными. Следует отметить, что гистологические исследования выявили наличие очаговых воспалительных реакций, зоны некроза, местами доходящие до мышечной пластинки, что позволяет прогнозировать замещение эпителиальной ткани келоидным рубцом. Исследуемый препарат АФЛОГИЛЕКС в дозе 0,5 г/животное, спустя 14-ть дней систематического нанесения на область кожной раны способствовал оптимизации протекания раневого процесса, что нашло свое отражение в статистически значимом увеличении усилия, необходимого для разрыва шва, по сравнению с контрольными животными. Гистологические исследования подтвердили наличие ранозаживляющего эффекта у препарата. 20 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Гербильский Н.Л., Европейцева Н.В. Рыбная промышленность СССР. М.: Знание, 1945. 123 с.м 2. Ершова Т.В., Иващук П.П., Диндяев С.В. 1992. Влияние обработки кожных ран у крыс гидролитическими ферментами на синтетическую активность эпидермоцитов. Цитология. 34 (8): 70 -74. 3. Ефимов Е.А. 1999. Факторы, влияющие на полноту регенерации кожи у млекопитающих. Изв. РАН. Сер. биол. 4: 488 – 492. 4. Крутова Т.В., Ефимов Е.А., Корман Д.Б. 1984. Влияние линимента дибунола на посттравматическую регенерацию кожи мышей. блю. эксперим. биол. мед. 98 (10): 471 – 473. 5. Пилат Т.П., Иванов А.А. Биологически активные добавки к пище (теория, производство, применение). М.: Авваллон, 2002. 710 с. 21
