Âîññòàíîâëåíèå ïðîòÿæåííûõ äåôåêòîâ ïåðèôåðè÷åñêèõ íåðâîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì àóòîãåííîé áåñêëåòî÷íîé

26
Íîâîñòè êëåòî÷íûõ òåõíîëîãèé
Âîññòàíîâëåíèå ïðîòÿæåííûõ äåôåêòîâ ïåðèôåðè÷åñêèõ
íåðâîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì àóòîãåííîé áåñêëåòî÷íîé
ìàòðèöû è øâàííîâñêèõ êëåòîê
Âîññòàíîâëåíèå ïðîòÿæåííûõ äåôåêòîâ ïåðèôåðè÷åñêèõ íåðâîâ (áîëåå 3-5 ñì) îñòàåòñÿ íåðåøåííîé ïðîáëåìîé
ñîâðåìåííîé ðåêîíñòðóêòèâíîé õèðóðãèè. Â íàñòîÿùåå âðåìÿ
â ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå íåò òåõíîëîãèé, ñ ïîìîùüþ êîòîðûõ
ìîæíî áûëî áû ïîìî÷ü ïàöèåíòàì, óòðàòèâøèì çíà÷èòåëüíóþ ÷àñòü íåðâà. Òîãäà êàê ìåíåå ïðîòÿæåííûå äåôåêòû
ìîæíî âîññòàíîâèòü ñ ïîìîùüþ ìîáèëèçàöèè êîíöîâ ïîâðåæäåííîãî íåðâà. Èñïîëüçîâàíèå æå äîíîðñêèõ òðàíñïëàíòàòîâ íåðâîâ îñëîæíÿåòñÿ èììóíîëîãè÷åñêèìè ðåàêöèÿìè íà ÷óæåðîäíûå òêàíè.
Ðîñò àêñîíà ïðè ðåïàðàöèè íåðâíîãî âîëîêíà - ñëîæíûé
è çàâèñÿùèé îò ðÿäà ôàêòîðîâ ïðîöåññ. Íàïðèìåð, ðîñòîâîé
êîíóñ àêñîíà, äâèãàÿñü ñîãëàñíî õåìîòàêñèñó äîëæåí íàõîäèòüñÿ â «ñîïðîâîæäåíèè» øâàííîâñêèõ êëåòîê. Îòñóòñòâèå
èõ äîñòàòî÷íîãî êîëè÷åñòâà è ñëàáûé ïðîëèôåðàòèâíûé ïîòåíöèàë, à òàêæå âñòðå÷àþùèåñÿ íà ïóòè ðóáöîâûå òêàíè
îñòàíàâëèâàþò ðîñò àêñîíîâ ñ îáðàçîâàíèåì íåâðîìû. Äëÿ
ðåøåíèÿ çàäà÷è áåñïðåïÿòñòâåííîãî ïðîäâèæåíèÿ â ïðîñòðàíñòâå ðîñòîâûõ àêñîíàëüíûõ êîíóñîâ íåîáõîäèìî èìåòü
â äîñòàòî÷íîì êîëè÷åñòâå øâàííîâñêèå êëåòêè ñ àêòèâíûì
ïðîëèôåðàòèâíûì ïîòåíöèàëîì è «ðàñ÷èñòèòü» ïóòü ïðîäâèæåíèÿ àêñîíà îò îêðóæàþùèõ òêàíåé.
 ïîñëåäíåå âðåìÿ äëÿ ðåøåíèÿ äàííîé ïðîáëåìû áûëî
ïðåäëîæåíî íåñêîëüêî ïîäõîäîâ, èñïîëüçóþùèõ ìåòîäû òêàíåâîé èíæåíåðèè. Äëÿ ýòîãî èñïîëüçîâàëè êàê ñèíòåòè÷åñêèå ìàòåðèàëû [2, 3], òàê è êîëëàãåíîâûå òðóáêè [1]. Ñîâñåì
íåäàâíî ãðóïïà Hisasue S. ïîêàçàëà âîçìîæíîñòü ðåêîíñòðóêöèè óòðà÷åííîé ÷àñòè íåðâíîãî ñòâîëà (äåôåêò - 1 ñì)
òðóáêîé èç PGA, âíóòðè êîòîðîé íàõîäèëñÿ êîëëàãåíîâûé ãåëü.
Êîíöû òðóáêè ôèêñèðîâàëèñü ê ðåçåöèðîâàííûì ó÷àñòêàì
ïîëîâîãî íåðâà êðûñ [4]. Èññëåäîâàòåëè ïðåäïîëîæèëè, ÷òî
â ðåàëèçàöèè ìåõàíèçìà äåéñòâèÿ ìåòîäà îñíîâíàÿ ðîëü
ïðèíàäëåæèò øâàííîâñêèì êëåòêàì. Ïîêàçàíî, ÷òî ïîâðåæäåíèå àêòèâèðóåò ïðîëèôåðàöèþ ýòèõ êëåòîê, ïî íèì äâèæåòñÿ ðîñòîâîé êîíóñ àêñîíà, â ðåçóëüòàòå ÷åãî ïðîèñõîäèò
âîññòàíîâëåíèå ñòðóêòóðû è ôóíêöèè íåðâà, ÷òî âûðàæàåòÿ
â ïîÿâëåíèè ýðåêöèè è ñïîñîáíîñòè ê ñîâîêóïëåíèþ [4]. Äàííóþ òåõíîëîãèþ, ïî ìíåíèþ àâòîðîâ, íåëüçÿ èñïîëüçîâàòü
äëÿ ïðîòÿæåííûõ äåôåêòîâ.
Âîçìîæíûì ðåøåíèåì ïðîáëåìû ìîãëî áû ñòàòü èñïîëüçîâàíèå øâàíîâñêèõ êëåòîê, íàíåñåííûõ âíóòðü òðóáêè èç
áèîñîâìåñòèìîãî ìàòåðèàëà, ÷òî îáåñïå÷èâàëî áû íåïðåðûâíûé ðîñò àêñîíà (âíå çàâèñèìîñòè îò ñêîðîñòè ïðîëèôåðàöèè
ýòèõ êëåòîê) ñî ñòîðîíû ïîâðåæäåííîãî íåðâíîãî ñòâîëà.
 æóðíàëå Tissue Engineering îïóáëèêîâàíî èññëåäîâàíèå, ïîêàçûâàþùåå âîçìîæíîñòü çàìåùåíèÿ ïðîòÿæåííîãî ó÷àñòêà
íåðâíîãî ñòâîëà áåñêëåòî÷íûìè ìàòðèöàìè ñ íàíåñåííûìè
íà íèõ àóòîãåííûìè øâàííîâñêèìè êëåòêàìè.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ:
1. Ahmed M.R., Vairamuthu S., Shafiuzama M. åt al. Microwave irradiated
collagen tubes as a better matrix for peripheral nerve regeneration. Brain Res.
2005; 1046: 55-67.
2. Rutkowski G.E., Miller C.A., Jeftinija S., Mallapragada S.K. Synergistic effects
of micropatterned biodegradable conduits and Schwann cells on sciatic nerve
regeneration. J. Neural Eng. 2004; 1: 151-7.
3. Bryan D.J., Tang J.B., Doherty S.A. åt al. Enhanced peripheral nerve
Ó êðûñ çàáèðàëè àóòîãåííûé ìàòåðèàë: øâàííîâñêèå
êëåòêè èç ïàðàâåðòåáðàëüíûõ ãàíãëèåâ è ó÷àñòîê ïðÿìîé
ìûøöû æèâîòà. Îäíîâðåìåííî ïðîèçâîäèëè ðåçåêöèþ ñåäàëèùíîãî íåðâà íà ïðîòÿæåíèè 2 ñì. Èç ãàíãëèåâ âûäåëÿëè
è ïåðåâîäèëè â êóëüòóðó øâàííîâñêèå êëåòêè, àóòîìûøöà
áûëà äåöåëëþëèðîâàíà êðèîäåñòðóêöèåé èëè õèìè÷åñêèì
ñïîñîáîì. Íà äåöåëëþëèðîâàííûå ìàòðèöû íàíîñèëè øâàííîâñêèå êëåòêè, è êîíñòðóêöèÿ êóëüòèâèðîâàëàñü åùå â òå÷åíèå 5 äíåé. Çàòåì êîíñòðóêöèè òðàíñïëàíòèðîâàëèñü â çîíó
ñôîðìèðîâàííîãî äåôåêòà ñåäàëèùíîãî íåðâà, íàêëàäûâàëè àíàñòîìîç «êîíåö â êîíåö» ñ èñïîëüçîâíèåì ìèêðîõèðóðãèè.  êà÷åñòâå êîíòðîëÿ ïðîèçâîäèëàñü àóòîòðàíñïëàíòàöèÿ
ôðàãìåíòà ñåäàëèùíîãî íåðâà, âçÿòîãî ñ ïðîòèâîïîëîæíîé
ñòîðîíû ó êîíòðîëüíîé ãðóïïû êðûñ.
 êîíòðîëüíîé ãðóïïå ðåãåíåðàöèþ íåðâíîãî ñòâîëà íàáëþäàëè ó 6 êðûñ èç 7 (ó îäíîé êðûñû àêñîíû â íåðâå íàéäåíû
íå áûëè, ÷òî ãîâîðèò î ãèáåëè òðàíñïëàíòàòà).  ãðóïïå ñ òðàíñïëàíòàöèåé êîíñòðóêöèè èç øâàííîâñêèõ êëåòîê è âíåêëåòî÷íîé ìàòðèöû, äåöåëëþëèðîâàííîé êðèîäåñòðóêöèåé, ðåãåíåðàöèÿ íåðâà ïðîèçîøëà ó 4 êðûñ èç 7.  ãðóïïå ñ õèìè÷åñêîé
äåöåëëþëÿöèåé ðåãåíåðàöèÿ íå ïðîèçîøëà äàæå ñïóñòÿ 12
íåäåëü, à êîíñòðóêöèÿ â çíà÷èòåëüíîé ìåðå äåãðàäèðîâàëà.
Îöåíêà ðåçóëüòàòà îñíîâûâàëàñü íà ãèñòîëîãè÷åñêîì èññëåäîâàíèè òðàíñïëàíòàòîâ.  ãðóïïå ñ êîìáèíèðîâàííûì òðàíñïëàíòàòîì (àóòîêëåòêè + ìàòðèöà) ðîñò àêñîíîâ è èõ êîëè÷åñòâî áûëè ñíèæåíû ïî ñðàâíåíèþ ñ àóòîíåðâîì (êîíòðîëü).
Ïðîðàñòàíèå ñîñóäèñòîé ñåòè â ðåãåíåðèðóåìûé íåðâíûé
ñòâîë ïðîèñõîäèëî, â îñíîâíîì, ñî ñòîðîíû íåïîâðåæäåííîãî
ó÷àñòêà íåðâà. Ôóíêöèÿ íåðâà îïðåäåëÿëàñü òåïëîâîé è áîëåâîé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ.  ãðóïïå êîíòðîëÿ îíà áûëà íîðìàëüíîé, â ãðóïïàõ ñ êîìáèíèðîâàííûì òðàíñïëàíòàòîì - áûëà
ñíèæåíà (êðèîäåöåëëþëèðîâàííàÿ ìàòðèöà + êëåòêè) èëè
îòñóòñòâîâàëà (õèìèîäåöåëëþëèðîâàííàÿ ìàòðèöà + êëåòêè).
Òàêèì îáðàçîì, äàííîå èññëåäîâàíèå ïðîäåìîíñòðèðîâàëî âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâàíèÿ áåñêëåòî÷íîé ìàòðèöû ñ
íàíåñåííûìè íà íåå øâàííîâñêèìè êëåòêàìè äëÿ ðåãåíåðàöèè íåðâíîãî ñòâîëà è âîññòàíîâëåíèÿ åãî ïðîòÿæ¸ííûõ
äåôåêòîâ. Íåóäà÷à ñ áåñêëåòî÷íîé ìàòðèöåé, ïîëó÷åííîé õèìè÷åñêèì ìåòîäîì, âîçìîæíî, ñâÿçàíà ñ íåäîñòàòî÷íîé îòìûâêîé îáðàçöîâ îò ðåàãåíòîâ, ïîñêîëüêó ïðîòîêîë ïîçâîëÿåò
ðàçðóøèòü êëåòêè, óäàëèòü ôðàãìåíòû ìåìáðàí è ðàçðóøèòü
ìîëåêóëû ÄÍÊ, íå ïîâðåæäàÿ áåëêè âíåêëåòî÷íîãî ìàòðèêñà. Ýôôåêòèâíîñòü òàêîãî ñïîñîáà îáðàáîòêè òêàíè áûëà
ïîêàçàíà â ýêñïåðèìåíòàëüíûõ ðàáîòàõ [5]. Òåì íå ìåíåå,
äàííàÿ òåõíîëîãèÿ ïîñëå èçó÷åíèÿ âñåõ íåäîñòàòêîâ è äîðàáîòêè ìîæåò ïîêàçàòü õîðîøèå ðåçóëüòàòû â ïðåêëèíè÷åñêèõ
èññëåäîâàíèÿõ, à â äàëüíåéøåì - â êëèíèêå äëÿ âîññòàíîâëåíèÿ ïðîòÿæåííûõ ó÷àñòêîâ íåðâîâ.
regeneration through a poled bioresorbable poly(lactic-co-glycolic acid) guidance
channel. J. Neural. Eng. 2004; 1: 91-8.
4. Hisasue S., Kato R., Sato Y. åt al. Cavernous nerve reconstruction with a
biodegradable conduit graft and collagen sponge in the rat. J. Urol. 2005; 173:
286-91.
5. Schultheiss D., Gabouev A.I., Cebotari S. et al. Biological vascularized matrix
for bladder tissue engineering: matrix preparation, reseeding technique and shortterm implantation in a porcine model. J. Urol. 2005; 173: 276-80.
Ïîäãîòîâèë À.Â. Âîëêîâ
Ïî ìàòåðèàëàì Tissue Eng. 2005; 11; 7-8: 1004-14
Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 1 (3), 2006