Îíêîëîãè÷åñêèé æóðíàë, Ò.4, N¹4 (16), 2010; Ò.5, N¹1 (17), 2011 ÒÅÐÌÎÕÈÌÈÎÒÅÐÀÏÈß ÇËÎÊÀ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÉ ËÈÌÔÎÌÛ Â ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÅ Þ.Ï. Èñòîìèí, Ý.À. Æàâðèä, Í.Â. Ñà÷èâêî, Å.Í. Àëåêñàíäðîâà, Ï.Â. Ïî÷åøèíñêèé ÐÍÏÖ ÎÌÐ èì. Í.Í. Àëåêñàíäðîâà, ã. Ìèíñê Ключевые слова: лимфосаркома Плисса, общая гипертермия, термохимиотерапия. Цель: изучить на модели лимфосаркомы Плисса влияние общей гипертермии на противоопухолевую эффективность цитостатических препаратов. Материалы и методы: Белых беспородных крыс с лифосаркомой Плисса подвергали общей гипертермии (42 °С, 30 мин) и/или химиотерапии (карбоплатин, цисплатин, оксалиплатин, кармустин, этопозид или гемцитабин). Исследовали динамику роста опухоли, продолжительность жизни и излеченность животных после воздействий. Результаты: Введение крысам оксалиплатина (8 мг/кг), кармустина (10 мг/кг), карбоплатина (6 мг/кг) или гемцитабина (50 мг/кг) непосредственно перед сеансом общей гипертермии приводило к статистически достоверному увеличению торможения роста опухоли, по сравнению действием одного цитостатика. При комбинации цитостатиков оптимальным вариантом термохимиотерапии лимфосаркомы Плисса оказалась следующая схема: введение гемцитабина (25 мг/кг) и спустя 0 ч или 24 ч — введение цисплатина (2,5 мг/кг) с последующим сеансом общей гипертермии. Заключение: Применение общей гипертермии у крыс с лимфосаркомой Плисса позволяет повысить противоопухолевый эффект химиотерапии и снизить дозы цитостатиков. THERMOCHEMOTHERAPY FOR RAT LYMPHOSARCOMA Yu. Ð. Istomin, E.A. Zhavrid, N.V. Sachivko, E.N. Alexandrova, P.V. Pocheshinsky Key words: Pliss’ lymphosarcoma, hyperthermia, thermochemotherapy. Objective: To evaluate the effect of whole-body hyperthermia on antitumor activity of cytostatics in Pliss’ lymphosarcoma. Methods: White random-bred rats with Pliss’ lymphosarcoma were exposed to whole-body hyperthermia (42 °C, 30 min) and/or chemotherapy (carboplatin, cisplatin, oxaliplatin, carmustine, gemcitabine or etoposide). The course of tumor growth, rat survival time and cure after treatment were investigated. Results: The treatment of rats with oxaliplatin (8 mg/kg), carmustine (10 mg/kg), carboplatin (6 mg/kg) or gemcitabine (50 mg/kg) just before whole-body hyperthermia resulted in a significant decrease in tumor growth rate compared with the effect of cytostatic drug alone. The optimal regimen for Pliss’ lymphosarcoma thermochemotherapy was combination of cytostatics (gemcitabine 25 mg/kg and 0 h or 24 h later cisplatin 2.5 mg/kg) with whole-body hyperthermia. Conclusion: The use of whole-body hyperthermia in rats with Pliss’ lymphosarcoma allows to enhance the antitumor effect of chemotherapy and to reduce cytostatic doses. О ÂÂÅÄÅÍÈÅ сновным компонентом всех современных программ лечения злокачественных лимфом является химиотерапия. Разработка и внедрение в клиническую практику новых высокоэффективных противоопухолевых препаратов позволило в последнее десятилетие достичь значительного прогресса в лечении этих заболеваний. Однако попрежнему терапия больных с первичной устойчивостью опухоли к цитостатическим препаратам или развившейся в ходе лечения резистентностью остается нерешенной проблемой. Разработанные для лечения таких больных режимы, хотя и позволяют получить повторные ремиссии в 30–50 % случаев, не оказывают существенного влияния на выживаемость. В настоящее время установлено, что преодоление химиорезистентности возможно с помощью различных физико-химических воздействий, повышающих чувствительность опухолевых клеток к цитостатическим препаратам. Наиболее эффективным модифицирующим фактором считается гипертермия. В экспериментальных исследованиях на различных опухолевых моделях показано усиление в условиях гипертермии воздействии противоопухолевой активности целого ряда химиотерапевтических препаратов, отличающихся друг от друга как химическим строением, так и механизмом действия [1–9]. Максимальная эффективность термохимиотерапии отмечена при температуре 40,5–43°С и при минимальном интервале между введением препарата и гипертермическим воздействием. Коэффициент усиления противоопухолевой активности в условиях гипертермии (40–42 °С) составляет для цисплатина — 1,5–3,9; циклофосфа- 29 Îðèãèíàëüíûå èññëåäîâàíèÿ мида — 1,5–2,3; ифосфамида — 1,5; мелфалана — 1,5–3,9; нитрозомочевины—1,5–3,0; блеомицина— 1,2 [3, 4]. Необходимо отметить, что представленные в литературе экспериментальные данные не только неоднозначны, но и противоречивы. Авторы публикаций использовали различные штаммы перевивных опухолей, режимы гипертермического воздействия, дозы цитостатиков, последовательность воздействий. Так, при исследовании влияния гипертермии на противоопухолевую активность гемцитабина наблюдали как усиление цитотоксического действия, так и его отсутствие. По данным Mohamed et al., локальная гипертермия (41,5 °С в течение 30 мин) сразу после введения гемцитабина (60 или 120 мг/кг в/б) значительно увеличивала торможение роста фибросаркомы мыши по сравнению с действием одного гемцитабина [9]. Аналогичные результаты получены Bull et al. на модели аденокарциномы молочной железы крыс в условиях общего гипертермического воздействия (40 °С в течение 6 ч) [10]. В исследовании Vertees et al. установлено синергическое взаимодействие гемцитабина и гипертермии по критериям выживаемости опухолевых клеток, торможению роста опухоли и индукции апоптоза на модели немелкоклеточного рака легкого человека у бестимусных мышей [11]. Однако в работе Van Bree et al. [1] локальная гипертермия рабдомиосаркомы крысы спустя 48 ч после введения гемцитабина (в/в 20 мг/кг) приводила к увеличению задержки роста опухоли, тогда как при интервале 0 ч или 24 ч эффективность противоопухолевого действия гемцитабина не изменялась. Имеются также сообщения о повышении чувствительности лимфомы у мышей и собак к доксорубицину и митоксантрону в условиях гипертермии [2, 12, 13], однако эффективность термохимиотерапии лимфом с другими цитостатическими препаратами не изучена. Цель настоящей работы — изучить на модели лимфосаркомы Плисса крыс влияние общей гипертермии на противоопухолевую эффективность цитостатических препаратов. ÌÀÒÅÐÈÀË È ÌÅÒÎÄÛ Исследовали противоопухолевую активность при гипертермическом воздействии следующих цитостатических препаратов: карбоплатина (кемокарб, «Дабур Фарма Лтд.», Индия); оксалиплатина (элоксатин, «Санофи Винтроп Индустрия», Франция); цисплатина (цитоплатин, «ЦИПЛА Лтд.», Индия); кармустина (БиКНУ, «БристолМайерс Сквибб», Италия); этопозида (этопозидЭбеве, «Эбеве Фарма», Австрия); гемцитабина (цитогем, «Д-р Редди’с Лабораторис Лтд», Индия). 30 Препараты непосредственно перед экспериментом разводили физиологическим раствором или дистиллированной водой для инъекций, согласно прилагаемой инструкции. Исследования выполнены на 300 белых беспородных крысах с перевитой лимфосаркомой Плисса (Российская коллекция клеточных культур, Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург). Опухоли перевивали подкожно в паховую область путем введения 0,5 мл 10%-ной опухолевой взвеси в растворе Хенкса. Животные содержались в стандартных условиях пищевого и питьевого рациона при естественном световом дне в соответствии с действующими нормами содержания экспериментальных животных. Эксперименты проводились в соответствии с международными этическими и научными стандартами качества планирования и проведения исследований на животных. Гипертермическое воздействие осуществляли на 5-е сутки после перевивки опухоли. Все манипуляции на животных проводились после введения последних в состояние нейролептаналгезии (раствор дроперидола и фентанила, 2:1, по 0,2 мл на 100 г массы тела, внутримышечно). В каждой опытной и контрольной группе использовали по 7–8 крыс. Умерщвление животных осуществляли с помощью общепринятых методов эвтаназии. Общую гипертермию (ОГТ) создавали путем погружения крыс до уровня верхних конечностей в термостатирующую водяную баню с циркуляцией EXATERM U3 (Julabo, Германия). Температурный режим 42оС поддерживался автоматически в течение 30 минут. При сочетании общей гипертермии с одним химиотерапевтическим препаратом цитостатик вводили внутривенно непосредственно перед проведением сеанса гипертермии. В отдельной серии опытов изучен противоопухолевый эффект комбинации препаратов платины, вводимых в условиях гипертермии, и гемцитабина. Последний, в монорежиме или в сочетании с препаратами платины, вводили за 0 ч, 4 ч или 24 ч до сеанса общей гипертермии. Для оценки противоопухолевой активности этих комплексных воздействий исследовали следующие параметры: объем опухолей; площадь под кинетической кривой роста опухолей, что позволяет учитывать не только выраженность противоопухолевого действия, но и его продолжительность; индекс роста опухоли (отношение площади под кинетической кривой роста опухоли в исследуемой группе к площади под кинетической кривой роста опухоли в контроле) [14]; среднюю продолжительность жизни животных; число излеченных животных (отсутствие опухолевого роста в течение 60 дней наблюдения). Îíêîëîãè÷åñêèé æóðíàë, Ò.4, N¹4 (16), 2010; Ò.5, N¹1 (17), 2011 Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя программу Origin 7. ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈÉ На рис. 1 представлена динамика роста лимфосаркомы Плисса в контрольной группе животных, после гипертермического воздействия (42 °С, 30 мин), применения цитостатических препаратов в монорежиме и комбинированного действия цитостатиков с общей гипертермией. Оксалиплатин использовали в дозе 8 мг/кг, кг этопозид — 20 мг/кг, кг, кг кг, кармустин — 10 мг/кг, кг цисплатин — 5 мг/кг, кг, кг каркг, боплатин — 6 мг/кг, кг гемцитабин — 50 мг/кг. кг, кг кг. Представленные на рис. 1 данные свидетельствуют, ют что одно гипертермическое воздействие ют, (42 °С в течение 30 мин) вызывает умеренно выраженное (43,8 % по отношению к контрольной группе) торможение роста лимфосаркомы Плисса крыс на 9-е сутки после перевивки, но на 16-е сутки после перевивки наблюдалась стимуляция роста опухоли (на 48,9 %). При использовании интегрального критерия — площади под кинетической кривой роста опухоли, который характеризует совокупный эффект противоопухолевой терапии в эксперименте и учитывает не только выраженность противоопухолевого действия, но и его продолжительность [14], оказалось, что общая гипертермия не оказывает статистически значимого влияния на рост лимфосаркомы Плисса крыс (табл. 1). В противоположность этому этому, все исследованные цитостатические препараты вызывали выраженное торможение опухолевого роста. Проведение общей гипертермии одновременно с введением цитостатиков сопровождалось усилением эффекта, по сравнению с действием одной химиотерапии (рис. 1). Представленные в табл. 1 показатели противоопухолевой активности препаратов позволяют сделать вывод, что по площади под кинетической кривой роста опухоли и индексу роста опухоли лимфосаркома Плисса в нормотермических условиях оказалась наиболее чувствительной к оксалиплатину а наиболее резистентной — к кармустину платину, кармустину. В условиях гипертермии цитостатический эффект всех химиотерапевтических препаратов усилился, о чем свидетельствует уменьшение индекса роста. При этом статистически достоверное влияние общей гипертермии наблюдалось для алкилирующих препаратов оксалиплатина, кармустина, карбоплатина и антиметаболита гемцитабина. Достоверных различий в средней продолжительности жизни животных не отмечено. По критерию излеченности крыс выявленное под действием общей гипертермии усиление эффектов оксалиплатина, этопозида, цисплатина и карбоплатина было также статистически недостоверным. Ðèñóíîê 1 – Äèíàìèêà ðîñòà ëèìôîñàðêîìû Ïëèññà êðûñ â êîíòðîëå è ïîñëå ââåäåíèÿ öèòîñòàòèêîâ è/èëè îáùåé ãèïåðòåðìèè 31 Îðèãèíàëüíûå èññëåäîâàíèÿ Вопрос зависимости эффекта от интервала времени между введением цитостатика и гипертермическим воздействием остается недостаточно исследованным. В нашем исследовании для изучения данного вопроса был выбран гемцитабин, обладающий широким спектром противоопухолевой активности. Цитостатик вводили непосредственно перед началом гипертермии, за 4 ч или 24 ч до гипертермического воздействия. Полученные результаты позволяют сделать вывод, что усиление противоопухолевого эффекта наблюдается только при введении гемцитабина непосредственно перед сеансом общей гипертермии, при введении гемцитабина за 4 ч или 24 ч до сеанса общей гипертермии изменения статистически недостоверны (рис. 1, табл. 1). Поскольку в клинической практике для лечения больных чаще используются комбинации цитостатиков, несомненный интерес представляло изучение в условиях гипертермического воздействия противоопухолевой эффективности комбинации препаратов платины с гемцитабином. В этой серии экспериментов введение препаратов платины осуществляли непосредственно перед сеансом гипертермии, а гемцитабин вводили за 0, 4 или 24 ч до гипертермического воздействия. Результаты экспериментов, представленные на рис. 2 и в табл. 2, свидетельствуют о том, что при комбинации гемцитабина с карбоплатином, но без гипертермического воздействия, наиболее выраженное торможение роста опухоли (индекс роста 11,3 %), увеличение продолжительности жизни (до 27,5 суток) и излечение крыс (43 %) наблюдается при интервале 24 ч между введением препаратов. Противоопухолевый эффект этой комбинации с дополнительным гипертермическим компонентом статистически достоверно повышался при введении гемцитабина за 4 или 24 ч до сеанса гипертермии. Одновременное применение этих препаратов в условиях гипертермии практически не приводило к торможению роста опухоли. При комбинации гемцитабина с оксалиплатином животным вводили сниженную в 2 раза дозу оксалиплатина — 4 мг/кг, так как доза 8 мг/кг в монорежиме без гипертермии приводила к излечению 86 % крыс с лимфосаркомой Плисса, а с гипертермическим воздействием — 100 % животных (табл. 1). Максимальное торможение роста опухоли эта комбинация в нормальных температурных условиях вызывала при введении препаратов с интервалом 4 часа. Однако при дополнительном гипертермическом воздействии противоопухолевый эффект не усиливался. Не отмечено также усиления цитостатического эффекта при введении обоих препаратов одновременно с сеансом гипертермии. Наиболее значимое, статистически достоверное усиление противоопухолевого эффекта этой комбинации гипертермией наблюдалось при введении гемцитабина за 24 часа до сеанса гипертермии. Индекс роста опухоли снижался в этой ситуации более чем в 2 раза. Следует отметить, что эта комбинация препаратов при условии дополнительного гипертермического воздействия, независимо от временного интервала между введением цитостатиков, приводила к увеличению процента излеченных животных по сравнению с группой без гипертермии (табл. 2). Òàáëèöà 1 Âëèÿíèå îáùåé ãèïåðòåðìèè íà ïðîòèâîîïóõîëåâóþ àêòèâíîñòü öèòîñòàòè÷åñêèõ ïðåïàðàòîâ Препарат Контроль Оксалиплатин (8 мг/кг) Этопозид (20 мг/кг) Кармустин (10 мг/кг) Цисплатин (5 мг/кг) Карбоплатин (6 мг/кг) Гемцитабин (50 мг/кг) за 4 ч до ОГТ за 24 ч до ОГТ Площадь под кривой роста опухоли, см3×сутки Индекс роста опухоли, % Средняя продолжительность жизни, сутки без ОГТ с ОГТ без ОГТ с ОГТ без ОГТ с ОГТ без ОГТ с ОГТ 111,4 ± 19,0 122,9 ± 18,2 100 110 23,0 ± 1,1 22,8 ± 1,8 0 0 3,1 ± 0,3 2,2 ± 0,3* 2,8 2,0 >60 >60 86 100 12,6 ± 2,7 9,9 ± 1,9 11,3 8,9 27,7 ± 1,8 27,3 ± 1,6 0 25 33,6 ± 5,8 14,0 ± 2,5* 30,2 12,6 25,4 ± 0,7 26,7 ± 1,9 13 13 17,2 ± 3,0 13,4 ± 2,0 15,4 12,0 22,6 ± 0,2 22,8 ± 2,3 38 50 29,3 ± 4,5 16,8 ± 3,5* 26,3 15,1 24,3 ± 2,6 23,0 ± 0,5 13 38 19,4 ± 3,0 11,7 ± 2,1* 18,9 ± 4,3 25,3 ± 5,7 17,4 10,5 17,0 22,7 25,4 ± 2,9 Ïðèìå÷àíèå: * — äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ ñ ãðóïïîé áåç ÎÃÒ (p < 0,01). 32 Излечено, % 27,0 ± 2,3 28,8 ± 2,5 28,7 ± 1,4 29 14 29 0 Îíêîëîãè÷åñêèé æóðíàë, Ò.4, N¹4 (16), 2010; Ò.5, N¹1 (17), 2011 Ðèñóíîê 2 – Äèíàìèêà ðîñòà ëèìôîñàðêîìû Ïëèññà êðûñ ïîñëå òåðìîõèìèîòåðàïèè ñ ãåìöèòàáèíîì è ïðåïàðàòàìè ïëàòèíû â çàâèñèìîñòè îò èíòåðâàëà ìåæäó âîçäåéñòâèÿìè Òàáëèöà 2 Âëèÿíèå îáùåé ãèïåðòåðìèè íà ïðîòèâîîïóõîëåâóþ àêòèâíîñòü êîìáèíàöèè öèòîñòàòè÷åñêèõ ïðåïàðàòîâ Площадь под кривой роИндекс роста Средняя продолжиИзлечено, % ста опухоли, см3×сутки опухоли, % тельность жизни, сутки Препараты без ОГТ с ОГТ без ОГТ с ОГТ без ОГТ с ОГТ без ОГТ с ОГТ Контроль Гемцитабин (50 мг/кг) карбоплатин (6 мг/кг) интервал 0ч 4ч 24 ч Гемцитабин (50 мг/кг) оксалиплатин (4 мг/кг) интервал 0ч 4ч 24 ч Гемцитабин (25 мг/кг) цисплатин (2,5 мг/кг) интервал 0ч 4ч 24 ч 154,2 ± 23,9 161,5 ± 20,4 100 104,7 23,0 ± 1,1 22,8 ± 1,8 0 0 81,1 ± 8,7 76,1 ± 17,2 17,,4 ± 3,6 75,2 ± 15,9 42,8 ± 10,0* 8,,4 ± 1,4* ,4* 52,6 49,4 11,,3 48,8 27,8 5,,4 25,4 ± 0,2 25,9 ± 0,4 27,5 ± 1,2 23,3 ± 0,8 27,9 ± 1,1* 27,0 ± 2,3 0 0 43 0 0 57 68,3 ± 14,2 36,1 ± 6,3 61,,8 ± 13,,2 55,3 ± 9,6 44,9 ± 10,2 29,,1 ± 6,,9* 44,3 23,4 40, 0,1 35,9 29,1 18,,9 28,5 ± 1,3 31,5 ± 1,9 28,2 ± 0,5 29,5 ± 1,6 31,3 ± 2,2 28,8 ± 1,5 14 14 14 43 43 29 6,4 ± 0,7 2,8 ± 0,3 4,,4 ± 0,5 0, 2,1 ± 0,2* 2,4 ± 0,3 2,6 ± 0,3* 2, 4,2 1,8 2,,9 1,4 1,6 1,7 1, 28,0 ± 1,0 24,7 ± 4,4 23,3 ± 3,3 24,7 ± 5,4 25,7 ± 7,5 27,0 ± 6,5 66 50 33 50 57 57 Ïðèìå÷àíèå: * — äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ ñ ãðóïïîé áåç ÎÃÒ (p < 0,01). 33 Îðèãèíàëüíûå èññëåäîâàíèÿ Комбинация гемцитабина (50 мг/кг) с цисплатином (5 мг/кг) вызывала в нормотермических условиях максимальный, по сравнению с другими исследованными препаратами платины (карбоплатином и оксалиплатином), противоопухолевый эффект как по динамике роста опухоли, так и по излеченности животных при всех исследованных интервалах между введением препаратов (рис. 2, табл. 2). Наиболее выраженное торможение роста лимфосаркомы Плисса крыс (индекс роста 1,8 %) наблюдалось при 4-х часовом интервале между введением гемцитабина и цисплатина. Применение гемцитабина в комбинации с цисплатином в предусмотренных протоколом дозах (50 мг/кг гемцитабина и 5 мг/кг цисплатина) в сочетании с общей гипертермией, при всех интервалах (0 ч, 4 ч, 24 ч) между введением препаратов, сопровождалось гибелью животных на 3–5–е сутки после воздействия. Причина гибели связана с усилением острой токсичности цитостатиков в условиях гипертермии. Это послужило основанием для снижения доз данных цитостатиков при сочетании с общей гипертермией в 2 раза. Противоопухолевый эффект этой комбинации гемцитабина (25 мг/кг) с цисплатином (2,5 мг/кг) в условиях гипертермического воздействия, несмотря на уменьшение доз цитостатиков в 2 раза, был статистически достоверно выше при использовании обоих препаратов и гипертермии одновременно или если гемцитабин вводили за 24 часа до применения цисплатина и гипертермии. При интервале 4 ч между введением препаратов противоопухолевая эффективность термохимиотерапии совпадала с эффективностью комбинации препаратов в 2 раза более высоких дозах (50 мг/кг гемцитабина и 5 мг/кг цисплатина). ÂÛÂÎÄÛ 1. Гипертермическое воздействие 42 °С в течение 30 мин не оказывает противоопухолевого эффекта на лимфосаркому Плисса крыс. 2. Противоопухолевая активность всех изученных цитостатиков в условиях гипертермии (42 °С в течение 30 мин) повышается. Статистически достоверное влияние общей гипертермии на рост опухоли наблюдалось для алкилирующих препаратов оксалиплатина, кармустина, карбоплатина и антиметаболита гемцитабина. 3. Гипертермическое воздействие усиливает противоопухолевый эффект гемцитабина только при их одновременном применении. При введении препарата за 4 или 24 часа до гипертермии усиления торможения роста опухоли не отмечено. 4. Наиболее высоким противоопухолевым эффектом в отношении лимфосаркомы Плисса у крыс обладает комбинация гемцитабина и циспла- 34 тина, независимо от интервала между введением препаратов. В условиях гипертермии статистически достоверное усиление торможения опухолевого роста наблюдалось при одновременном применении этих препаратов, а также при введении гемцитабина за 24 часа до сеанса термохимиотерапии с цисплатином. Ñïèñîê èñïîëüçîâàííûõ èñòî÷íèêîâ 1. Van Bree, C. Effectiveness of 2’,2’difluorodeoxycytidine (Gemcitabine) combined with hyperthermia in rat R-1 rhabdomyosarcoma in vitro and in vivo / C. Van Bree [et al.] // Int. J. Hyperthermia. — 1999. — Vol. 15. — P. 549–556. 2. Adriamycin combined with hyperthermia inhibits transplanted B cell lymphoma in nude mice / H.M. Wei [et al.] // Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. — 2007. — Vol. 27, N 9. — P. 1424–1426. 3. Issels, R.D. Hyperthermia adds to chemotherapy / R.D. Issels // Eur. J. Cancer. — 2008. — Vol. 44. — P. 2546–2554. 4. Hildebrandt, B. Interaction between hyperthermia and cytotoxic drugs / B. Hildebrandt, P. Wust // Cancer Treat. Res. — 2007. — Vol. 134. — P. 185–193. 5. Song, C.W. Tumour oxygenation is increased by hyperthermia at mild temperatures / C.W. Song [et al.] // Int. J. Hyperthermia. — 2009. — Vol. 25. — P. 91–95. 6. Sugarbaker, P.H. Laboratory and clinical basis for hyperthermia as a component of intracavitary chemotherapy / P.H. Sugarbaker // Int. J. Hyperthermia. — 2007. — Vol. 23 — P. 431–442. 7. Urano, M. For the clinical application of thermochemotherapy given at mild temperatures / M. Urano, M. Kuroda, Y. Nishimura // Int. J. Hyperthermia. — 1999. — Vol. 15, N 2. — P. 79–107. 8. The effect of various chemotherapeutic agents given with mild hyperthermia on different types of tumours / M. Takemoto [et al.] // Int. J. Hyperthermia. — 2003. — Vol. 19, N 2. — P. 193–203. 9. Thermal enhancement of new chemotherapeutic agents at moderate hyperthermia / F. Mohamed [et al.] // Ann. Surg. Oncology. — 2003. — Vol. 10. — P. 463–468. 10. The importance of schedule in whole body thermochemotherapy / J.M.C. Bull [et al.] // Int. J. Hyperthermia. — 2008. — Vol. 24. — P. 171–181. 11. Vertrees, R.A. Synergistic interaction of hyperthermia and Gemcitabine in lung cancer / R.A. Vertrees [et al.] // Cancer Biol. Ther. . — 2005. — Vol. 10. — P. 1144–1153. 12. Phase III evaluation of doxorubicin and wholebody hyperthermia in dogs with lymphoma / R. L. Pagets [et al.] // Int. J. Hyperthermia. — 1992. — Vol. 8, N 2. — P. 187–197. 13. Phase I evaluation of mitoxantrone alone and combined with whole body hyperthermia in dogs with lymphoma / M.L. Hauck Prices [et al.] // Int. J. Hyperthermia. — 1995. — Vol. 12, N 3. — P. 309–320. 14. Стуков, А.Н. Индекс роста опухоли как интегральный критерий эффективности противоопухолевой терапии в эксперименте / А.Н. Стуков [и др] // Вопросы онкологии. — 2001. — Т. 47, № 5 — С. 616–618.