Клинически значимое измерение СОЭ – метод компании Алифакс Гилязова Д.Г., к.б.н., Руководитель отдела «Закрытые системы», ООО «ТДА-Восток». СОЭ: Неспецифический лабораторный показатель крови, отражающий соотношение фракций белков плазмы. Метод основывается на способности эритроцитов в некоагулированной крови оседать под действием гравитации. Изменение СОЭ может служить косвенным признаком текущего воспалительного или иного патологического процесса. В традиционных методах измерения СОЭ время и воспроизводимость являются ограничивающими факторами. Определение СОЭ Ручное Автоматическое Метод Панченкова Метод Вестергрена: - Diesse - Hospitex Diagnostics - Human - Mechatronics - Greiner - Sarstedt стеклянный капилляр длина 172 мм (раб. 100 мм), внешн. диаметр 5 мм внутр. диаметр 1 мм нормы: м – 0-10 мм/ч ж – 0-15 мм/ч Метод Вестергрена стекл. или пластик. капилляр длина 300 мм (раб. 200 мм), внутр. диаметр 2,55 мм нормы: м – 0-15 мм/ч ж – 0-20 мм/ч Оседание эритроцитов формирование столбиков типичная S-образная кривая оседание – упаковка время, мин 0 - + - + + + - + - + - + + + + - - + + - - + +- + - + + + ++ - + +- + - - - - + + - + -+ + + - + + + - + - + ++ - Факторы, влияющие на результаты измерения классическим методом Высокая температура окружающей среды Низкая температура окружающей среды Повышенная вязкость крови Низкое значение среднего объема эритроцита (MCV) Использование б/у материалов (пластик/стекло) Пониженная вязкость крови Занижение Завышение Высокое значение среднего объема эритроцита (MCV) Аморфная агрегация Анемия Механическое воздействие Разбавление неподходящим антикоагулянтом Факторы, влияющие на результаты измерения классическим методом: температура 24 мм/ч 200С 28 мм/ч 250С 38 мм/ч 370С Увеличение температуры на 1 градус приводит к изменению СОЭ на 3% Факторы, влияющие на результаты измерения классическим методом: оборудование и реактивы Использование многоразовых капилляров Использование нестандартных капилляров (материал пластика, остатки пластификаторов на поверхности капилляра, нестандартный диаметр, непостоянство диаметра капилляра) Разведение неподходящим антикоагулянтом, ошибки при разведении Невозможность обеспечить вертикальное расположение капилляров Механическое воздействие (вибрация) Непостоянная температура окружающего воздуха Факторы, влияющие на результаты измерения классическим методом: организация работы Агрегация эритроцитов – кратковременный процесс Стабильность крови ограничена во времени - общее количество времени, затрачиваемое на одну пробу: 20-30 секунд - при постановке 10 капилляров разница между первой и последней пипеткой может достигать 270 секунд = 4 мин 30 секунд Изменение СОЭ в течение 5 минут может достигать 10 мм/ч Сокращение или увеличение времени измерения с последующим пропорциональным пересчетом результата СОЭ ведет себя нелинейно во времени Факторы, влияющие на результаты измерения классическим методом: гематокрит Низкий уровень гематокрита (≤0,35) сопровождается «увеличением» СОЭ 140 Оседание (мм) 120 100 80 60 40 20 0 0 20 Hct 26 40 60 80 100 120 140 160 180 200 Время (минуты) Hct 28 Hct 34 Hct 45 Sedimentation like time function at different hematocrit values artificially obtained adding autologous plasma (Fabry T., Blood, Vol. 70, No 5, Nov. 1987: pp 1572-1576). Факторы, влияющие на результаты измерения классическим методом: гематокрит Формула Фабри WG x 15 55 - HCT Пример расчета для пробы с гематокритом 30,3: 114х15 55-30,3 = 69.2 -Измеренное значение СОЭ = 114 мм/ч -С поправкой на гематокрит = 69,2 мм/ч Пример расчета для пробы с гематокритом 26,3: 127х15 55-26,3 = 66.3 Измеренное значение СОЭ = 127 мм/ч -С поправкой на гематокрит = 66,3 мм/ч Факторы, влияющие на результаты измерения классическим методом: размер эритроцитов, вязкость плазмы Низкий MCV = уменьшенный размер эритроцитов –> снижение СОЭ Высокий MCV = увеличенный размер эритроцитов –> увеличение СОЭ Снижение вязкости плазмы - > увеличение СОЭ Повышение вязкости плазмы - > снижение СОЭ Технология Alifax – количественная капиллярная фотометрия TEST 1 определяет агрегационную способность эритроцитов с помощью измерения пропускания света - + - + + + - + - +- + - + + + - + - начало агрегации (Т=0) + + - - -+ - + + + + + + - - - после агрегации 20 сек каждая проба измеряется 1000 раз в течение 20 секунд Изменение пропускания преобразуется в мм/ч Технология Alifax – количественная капиллярная фотометрия 0 формирование столбиков 20 сек оседание, мм Результат в мм/ч! оседание уплотнение 0 20 сек ALIFAX 10 мин другие системы ≥ 10 мин время 60 мин Технология Alifax – количественная капиллярная фотометрия 370C проба 2, 175/100 мкл воздух проба 1, 175 /100 мкл Test1 Полностью автоматизированная система определения СОЭ венозной крови Максимальная загрузка 60 проб, производительность до 124 теста/час 175 µл крови с ЭДТА на исследование Первый результат через 5 минут Последующие результаты через каждые 2024 сек Единственный расходный материал – смарткарта Стандартные пробирки с ЭДТА (13х75-100 мм) Латексные контроли и калибраторы Измерение при 37°C Полная интеграция в гематологическую лабораторию Совместимость со штативами Результат гематологических анализаторов Встроенный сканер штрих-кодов Возможность подключения к ЛИС Встроенный термопринтер за секунды! Roller 20 PN Полностью автоматизированная система 20 определения СОЭ венозной и капиллярной крови Максимальная загрузка 10 проб/20 проб, производительность до 60/75 теста/час 175 µл венозной крови или 100 µл капиллярной крови с ЭДТА на исследование Первый результат через 5 минут Последующие результаты через каждые 24 сек (без учета скорости работы оператора) Единственный расходный материал – смарткарта Стандартные пробирки с ЭДТА (13х75-100 мм) для венозной крови, любые пробирки с ЭДТА для капиллярной крови Латексные контроли и калибраторы Измерение при 37°C Результат Внешний сканер штрих-кодов Встроенный термопринтер Возможность подключения к ЛИС проб за секунды! ПАТОЛОГИЯ ТЕСТ 1 и Роллер 20 Измерение кинетики агрегации эритроцитов происходит в соответствии со значениями СОЭ Результаты повторных измерений одним и тем же прибором (пипеткой) могут отличаться, даже если механизм измерения одинаков Обусловлена наличием в плазме белков, которые опосредуют агрегацию эритроцитов крови СОЭ Оседание под действием силы тяжести Непрямое измерение параметров агрегации На величину СОЭ может оказывать влияние фактор агрегации Методика измерения СОЭ по конечной точке не может быть стандартизована (Фабри, NCCLS) TEST1 отражает воспалительные процессы лучше, чем метод Вестергрена Белок Общий белок Альбумин Глобулин СРБ α1-глобулин α2-глобулин β1-глобулин β2-глобулин γ-глобулин СОЭ, TEST1 r2 P 0,084 2,65х10-4 0,000 0,913 0,123 8,58х10-6 0,127 5,97х10-6 0,222 7,25х10-10 0,305 1,16х10-13 0,001 0,668 0,469 1,12х10-22 0,047 0,007 r2 0,031 0,003 0,025 0,114 0,100 0,130 0,001 0,185 0,007 СОЭ, ВГ P 0,029 0,476 0,049 1,84х10-5 6,60х10-6 4,40х10-6 0,689 2,53х10-8 0,307 Erythrocyte Sedimentation Rate Measurements by TEST 1 Better Reflect Inflammation Than Do Those by the Westergren Method in Patients With Malignancy, Autoimmune Disease, or Infection. Cha et al. Am J Clin Pathol 2009;131:189-194 TEST1 отражает воспалительные процессы лучше, чем метод Вестергрена Б СОЭ, Тест1 (мм/ч) СОЭ, Вестергрен (мм/ч) А β2-глобулин(г/дл) β2-глобулин(г/дл) Рисунок 2. Корреляция между значениями СОЭ, полученными с помощью анализатора ТЕСТ1 (A) и метода Вестергрена (Б), с концентрацией β2-глобулина в плазме инфекционных больных (n = 41) (A, r2 = 0.566; P = 1.41 × 10–8; Б, r2 = 0.130; P =0.020). Концентрация β2-глобулина приведена в традиционных единицах измерения; для пересчета в единицы измерения системы СИ (г/л) умножьте на 10.0. Erythrocyte Sedimentation Rate Measurements by TEST 1 Better Reflect Inflammation Than Do Those by the Westergren Method in Patients With Malignancy, Autoimmune Disease, or Infection. Cha et al. Am J Clin Pathol 2009;131:189-194 Сходимость результатов Repeatibility Roller20PN s/n 065 140 Коэффициент Диапазон СОЭ вариации (КВ (мм/ч) %) 10-20 6,97 21-30 4,00 31-60 3.39 60-120 2,31 Весь (2-120) 5,72 120 y = 1,0025x + 0,4995 2nd and 3rd readings R2 = 0,9893 100 y = 1,008x + 0,7305 R2 = 0,9908 80 60 40 20 0 0 20 40 60 80 1st reading 100 120 140 Воспроизводимость результатов Roller20PN Reproducibility Коэффициент Диапазон вариации (КВ СОЭ (мм/ч) %) 140 y = 0,9976x - 0,1758 R2 = 0,9932 120 R20sn065 100 80 10-20 5,63 60 21-30 4,10 40 31-60 3,90 20 60-120 Overall (2120) 2,15 0 0 20 40 60 80 R20sn062 100 120 140 5,07 СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ! Дистрибьютор на территории России: ООО «ТДА-Восток» Г. Москва, Хорошевское шоссе, д. 43г Тел. (495) 380-36-64/67 Факс (499) 707-01-68