Результаты молекулярно-генетических исследований пациентов

МАТЕРИАЛЫ VI СЪЕЗДА ДЕТСКИХ ОНКОЛОГОВ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ
ных структур независимо от уровня позвоночника
характеризуются уменьшением расстояния между
корнями дуг смежных позвонков (51,7%), уменьшением расстояния между поперечными отростками
(51,7%), нечеткими неровными контурами (73,6%),
искривлением позвоночника (75,9%), отсутствием
дорзального компонента. Деструктивные костные
изменения выявлены во всех случаях.
Выводы. Ионизирующие и неионизирующие
методы лучевой диагностики позволяют выявить
рентгенологические, ультразвуковые и магнитно-резонансные признаки нейрогенных интрапаравертебральных опухолей и опухолей вертебральных и паравертебральных тканей у детей с
уточнением их дифференциально-диагностических
особенностей.
В.М. Козлова2, К.А. Алексеева1, О.В. Бабенко1, Т.Л. Ушакова2, О.В. Горовцова2,
Т.П. Казубская2, Л.Н. Любченко2, В.Г. Поляков2
1
Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина Минздрава России,
Москва, Российская Федерация
2
Медико-генетический научный центр, Москва, Российская Федерация
Результаты молекулярно-генетических
исследований пациентов с ретинобластомой
282
Актуальность. Ретинобластома — эмбриональная детская опухоль сетчатки глаза, при которой отмечается высокая частота наследственных
форм. Герминальные гетерозиготные мутации
гена RB1 (хромосома 13q14.2) предрасполагают
к наследственным формам опухоли. Большинство
наследственных форм опухоли возникают de novo.
Молекулярно-генетические исследования являются основным методом для их диагностики.
Цель: анализ результатов молекулярно-генетических исследований мутаций в гене RB1 и клинических проявлений заболевания у пациентов с РБ.
Материал и методы. Молекулярно-генетические
исследования структуры ДНК гена RB1 проведено у
84 пациентов (12 семейных случаев) с РБ и 155 их
родственников. С двусторонней ретинобластомой
(ДРБ) — 44 пациента (10 семейных форм), с односторонней ретинобластомой (ОРБ) — 40 (2 семейных
случая). Материал для исследования — ДНК, выделенная из лейкоцитов периферической крови ребенка и его родителей, а также из клеток опухоли (парафинизированные блоки) в случае энуклеации глаза.
Методы анализа ДНК: ПЦР, SSCP, секвенирование
кодирующей последовательности гена RB1 (1–27
экзон), микросателлитный анализ с использованием маркеров RB2int (D13S153), RB4int, RB20int,
D13S168, D13S164, D13S165. При наличии опухоли исследование начиналось с анализа ДНК,
выделенной из клеток опухоли, и затем найденные
мутации подтверждались в лейкоцитах крови. При
отсутствии опухоли исследование проводилось по
клеткам крови.
Результаты. Из всех случаев больных РБ частота семейных форм составила 14,3%. Герминальные
мутации в гене RВ1 среди пациентов с ДРБ выявлены в 72,7% случаев (у 32 из 44). Из 44 больных с ДРБ
у 16 использованы только методы ПЦР, SSCP: мутации обнаружены в 50% случаев (у 8 из 16). Применяя
flat Onko 3-2015 22-09-2015.indd 282
современные методы ПЦР-секвенирования, микросателлитный анализ ДНК гена RB1, герминальные
мутации выявлены в 85,6% случаев (у 24 из 28). Не
выявлены мутации у 4 больных со спорадической
ДРБ. Однако мутации de novo при ДРБ могут присутствовать в виде мозаичных мутаций, которые не
обнаруживаются с помощью данных методик.
При ДРБ выявлены следующие виды мутаций:
нонсенс-мутации — 16 (6 семей), инсерции (вставки) — 3, внутригенные делеции — 7 (1 семья), мутации сайта сплайсинга — 5, миссенс-мутации — 1
семейный случай с неполной пенетрантностью (с
н/п), то есть отсутствие клинических признаков РБ
у отца-носителя герминальной мутации гена RB1.
Среди 40 пациентов с ОРБ герминальные мутации в гене RВ1 выявлены в 12,5% случаев (у 5 из
40). При ОРБ выявлены следующие виды мутаций:
миссенс-мутации — 2 (1 семейная и 1 с н/п), мутации сайта сплайсинга — 1 (семейный с н/п), внутригенные делеции — у 2 детей.
При изучении соотношения спектра мутаций в
гене RB1 и клинических данных обнаружена четкая
генотип-фенотип корреляция. При нонсенс-мутациях, больших внутригенных делециях, инсерциях
наблюдалась более тяжелая клиническая картина:
билатеральное, полифокусное поражение сетчатки, ранняя клиническая манифестация, появление
новых фокусов опухоли на фоне лечения. Интересно
также отметить, что при ДРБ, ассоциированной с
нонсенс-мутацией, в большинстве случаев проводилась односторонняя энуклеация (у 10 пациентов
из 16, у 5 больных родственников из 6). При внутригенных делециях отмечалась химиорезистентность
и высокая частота билатеральных энуклеаций (у 6
пациентов из 9). При миссенс-мутациях, мутациях
сайта сплайсинга обнаружена неполная пенетрантность и экспрессивность признаков, проявляющаяся единичными очагами опухоли, нередко с позд-
22.09.2015 18:04:19
МАТЕРИАЛЫ VI СЪЕЗДА ДЕТСКИХ ОНКОЛОГОВ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ
ней клинической манифестацией. При семейных
формах мутации в гене выявлены в 100% случаев.
В 3 семьях выявлена неполная пенетрантность
гена RB1, во всех случаях здоровыми носителями
мутации были отцы. Важно отметить, что метахронное поражение глаз отмечалось при мутации сайта
сплайсинга у 2 детей и при нонсенс-мутациях — у 3.
Выводы. Спектр молекулярно-генетических
мутаций в гене RB1 и ассоциированные с ним осо-
бенности клинического проявления заболевания
определяют степень тяжести РБ, прогноз течения и
эффективность лечения. Молекулярно-генетические
исследования РБ вносят существенный вклад в
повышение эффективности медико-генетического
консультирования, затрагивая все составные части
этого процесса: уточнение этиологии, конкретизация прогноза потомства и здоровья актуальны для
дородовой диагностики и профилактики.
Д.Ю. Комелягин, А.В. Дергаченко, С.А. Дубин, А.В. Петухов,
А.Э. Шумейко, Ф.И. Владимиров, А.В. Дергаченко, Е.В. Стрига, Х.Я. Вафина,
А.В. Пасечников, О.А. Пачес, В.Г. Слипенко, И.А. Строгонов
Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова,
Москва, Российская Федерация
Детская городская клиническая больница святого Владимира,
Москва, Российская Федерация
Устранение дефектов нижней челюсти
индивидуальными эндопротезами
при лечении детей с доброкачественными
и злокачественными опухолями
Актуальность. Восстановление костных структур при различных патологических процессах является наиболее актуальной проблемой современной челюстно-лицевой хирургии (Безруков В.М.,
2000; Bell W., 1992).
Цель: повысить эффективность лечения пациентов с дефектами нижней челюсти, образовавшихся при удалении доброкачественных и злокачественных опухолей.
Материалы и методы. С 2009 г. в ДГКБ св.
Владимира прошли лечение 5 пациентов с дефектами нижней челюсти в возрасте от 1 года до 10
лет. Все пациенты были с полным односторонним
дефектом нижней челюсти.
Всем больным проведена операция — половинная резекция нижней челюсти с вычленением
в суставе: у 2 детей по поводу рабдомиосаркомы
(предварительно больным было проведено по 9
курсов химиотерапии и 1 курс лучевой терапии);
у 2 — по поводу десмопластической фибромы; у
1 — по поводу амелобластомы. Всем детям проводилась мультиспиральная компьютерная томография черепа с шагом 0,33 мм с последующим
изготовлением твердотельной модели из ABSпластика (Acrylonitrile Butadiene Styrene, акрилонитрил-бутадиен-стирольной). Для изготовления
flat Onko 3-2015 22-09-2015.indd 283
283
моделей использовался 3d-принтер и специальное программное обеспечение. С использованием твердотельных моделей изготавливались
индивидуальные эндопротезы из реконструктивных титановых пластин с суставной ямкой из
высокомолекулярного полиэтилена марки «хирулен».
Результаты. Использование индивидуальных
эндопротезов позволило сократить время операций на 40–50%. У всех пациентов получены хорошие результаты, несмотря на то, что у 1 больного
произошло обнажение титанового эндопротеза,
которое в дальнейшем было устранено, у 1 пациента были переходящие клинические прроявления
пареза мимических мышц.
Выводы. Изготовление твердотельной модели
позволяет наиболее полно оценить патологический
процесс — его размеры и топографию; выбрать
оптимальные хирургическую тактику и метод лечения. Индивидуальный эндопротез из титана позволяет восстановить целостность нижней челюсти,
ее функцию; получить приемлемый эстетический
результат. Эндопротез из титана устойчив к осложнениям в виде воспалительного процесса, часто
сопровождающим лечение детей с данной патологией.
22.09.2015 18:04:19