Введение. Хронический периодонтит

ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ
АНТИСЕПТИКОВ В ОТНОШЕНИИ
ФИБРОБЛАСТОВ
ДЕСНЫ
Витт А.А., Лингберг Т., Будевская Т.В., Бюлин К.
УО «Белорусский государственный
медицинский университет»,
1-я
кафедра терапевтической
стоматологии, г. Минск, Беларусь;
Каролинский институт, г. Стокгольм, Швеция
Введение. Хронический периодонтит - это воспаление тканей периодонта, вызванное взаимодействием микрофлоры полости рта и иммунной системы человека. Считается, что воспаление десны инициирует
зубной налет. Дальнейшее прогрессирование связано с иммунной реакцией организма. Основные лечебные мероприятия при воспалительных
заболеваниях периодонта должны быть направлены на купирование
воспалительного процесса, создание условий для предупреждения распространения процесса вглубь, а также на восстановление анатомической структуры периодонта, его функций и достижение стабильной ремиссии. В настоящее время основное место занимают инструментальные методы лечения. В качестве дополнительной терапии могут применяться медикаменты местного и системного действия. При лечении болезней периодонта могут быть использованы многочисленные препараты в виде орошений, полосканий, аппликаций на десневой край, для
введения в десневую бороздку, периодонтальный карман, а также в виде
лечебных повязок.
Хлоргексидин (ХГ) используется для лечения болезней периодонта
уже более 30 лет и является «золотым стандартом», однако наряду с антимикробными свойствами хлоргексидин токсичен для фибробластов
десны и может снижать продукцию коллагена и неколлагеновых белков,
препятствуя заживлению [3]. Антисептик «Аквин» разрешен для применения в Республике Беларусь, показал высокий уровень антимикробной
активности в исследованиях «in vitro», однако его цитотоксические
свойства не были определены на клетках человека [1, 2].
Цель исследования - определение цитотоксичности полигексаметиленгуанидин фосфата (ПГМГ) по сравнению с хлоргексдином в отношении культуры клеток фибробластов десны.
Объекты и методы. Культура клеток фибробластов десны была получена из биоптатов десны периодонтологически здоровых пациентов
[4]. Фибробласты культивировались в 75 см3 культуральных флаконах
до достижения конфлюэнтности 80%. Для эксперимента были использованы пассажи от 10 до 14, 200 мкл суспензии фибробластов были посея-
287
ны на 96-луночные планшеты в концентрации 10000 клеток на лунку. В
первом эксперименте клеточный монослой был промыт дважды культуральной средой (DMEM) без содержания сыворотки с последующей аппликацией 200 мкл ПГМГ или ХГ в концентрации 0.05%, 0.1%, 0.2%,
0.5%, 1%, 2%. В качестве контроля использовалась культуральная среда
без добавления антисептиков.
После стимуляции клетки были инкубированы в течение 24 часов
согласно практическому руководству по определению цитотоксичности
ISO 10993-5: Cytotoxicity.
Во втором эксперименте была уменьшена экспозиция стимулирования клеток. Время инкубации после аппликации антисептиков было
уменьшено до 15 минут, после чего клетки были двукратно отмыты от
раствора антисептиков сывороткосодержащей культуральной средой и
инкубированы 24 часа.
В третьем эксперименте была уменьшена концентрация антисептиков до 0,00009%, 0,0009%, 0,005%, 0.009%, 0,05%. Время инкубации после аппликации антисептиков было таким же, как в первом эксперименте и составило 24 часа.
Жизнеспособность клеток определялась по морфологическим признакам под микроскопом.
Для приготовления растворов антисептиков для стимуляции клеток
использовали полигексаметиленгуанидин фосфат 5% - активнодействующее вещество антисептика «Аквин» (ИП «Инкраслав», Республика
Беларусь) и хлоргексидин 5% - используется как отдельно, так и в составе различных средств гигиены рта.
Результаты. В первом эксперименте при инкубации клеток в течение
24 часов с антисептиками в концентрации 0,05-2% все клетки погибли.
Во втором эксперименте при экспозиции антисептиков в течение 15
минут в концентрации 0,05-2% клетки погибли после аппликации 1%
ХГ и ПГМГ.
В третьем эксперименте при инкубации клеток в течение 24 часов с
антисептиками в концентрации 0,00009 - 0,05% клетки погибли только
при концентрации антисептиков 0,05%.
Заключение. ПГМГ и ХГ токсичны для культуры клеток фибробластов десны в концентрации начиная с 0,05% и экспозиции 24 часа.
В экспозиции, приближенной к клинической (15 мин), фибробласты
выживают после аппликации 0,5% раствора антисептиков.
288
Оба активнодействующих вещества ПГМГ и ХГ демонстрируют
схожую цитотоксичность в отношении культуры клеток фибробластов
десны. Для более детального изучения цитотоксичности необходимо
применение MTT (теста выживаемости клеток).
Литература.
1. Инструкция по применению «Гигиена рта в периодонтологии с применением
средства «Аквин» : утв. Министерством здравоохранения Респ. Беларусь13.02.2009. - Минск : БГМУ, 2009. - 4 с.
2. Инструкция по применению в медицинской практике антисептика Аквин : утв.
Министерством здравоохранения Респ. Беларусь 30.01.2007.
3. Mariotti, A.J. Chlorhexidine-induced changes to human gingival fibroblast collagen
and non-collagen protein production / A.J. Mariotti, D.A. Rumpf // Journal of periodontology. - 1999. - Vol. 70, № 12. - P. 1443-1448.
4. Yucel-Lindberg, T. Signal pathways involved in the regulation of prostaglandin E synthase-1 in human gingival fibroblasts / T. Yucel-Lindberg, T. Olsson, T. Kawakami //
Cellular signalling. - 2006. - Vol. 18, № 12. - P. 2131-2142.
ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ЭФФЕКТОВ
ЛЕКАРСТВЕННОГО
СРЕДСТВА ЛЕЙАРГУНАЛ У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ
ПЕРИОДОНТИТОМ
Волкова М.Н.
УО «Витебский государственный
медицинский университет»,
кафедра
терапевтической
стоматологии, г. Витебск, Беларусь
Введение.
Хронический
периодонтит
инфекционновоспалительное заболевание, имеющее рецидивирующее течение. Несмотря на постоянное усовершенствование методов и тактики проводимой базовой терапии хронического периодонтита, эффективность ее
часто бывает невысокой. Одна из причин - игнорирование нарушений со
стороны СИ. Значительная частота ХП, так или иначе связанных с недостаточностью системы местного иммунитета, обусловила развитие
клинических исследований по коррекции этих нарушений путем использования различных иммуномодулирующих средств и методов [1].
Предложен к использованию в комплексном лечении заболеваний
периодонта новый иммуномодулятор «Лейаргунал» производства РУП
«Гродненский завод медицинских препаратов», состоящий из Lлейцина, L-аргинина и инозина. Результаты иммунологических исследований по оценке иммуномодулирующего действия L-лейцина доказывают его стимулирующий эффект в отношении факторов неспецифической
резистентности, а метаболические последствия его перорального приме-
289