Устойчивость микроорганизмов к дезинфицирующим средствам
advertisement
Нижегородская государственная медицинская академия Кафедра эпидемиологии НИИ профилактической медицины Устойчивость микроорганизмов к дезинфицирующим средствам: от механизмов до мониторинга Ш карин Вячеслав Васильевич Благонравова Анна Сергеевна Ковалиш ена Ольга Васильевна II Международный конгресс «Стратегия и тактика борьбы с внутрибольничными инфекциями на современном этапе развития медицины» Москва, 23-24 ноября 2011 г. Устойчивость к АБС Устойчивость к ДС и АС Монорезистент ность Устойчивость к 1 ДС Комбинированная устойчивость Устойчивость к другим ДС и АС Устойчивость к антибиотикам одноврем енная устойчивость к ДС и антибиотикам Перекрестная Устойчивость к различны м ДС одной группы х им ических соединений с одним АДВ Ассоциирован ная Устойчивость к ДС разны х групп х им ических соединений по АДВ Сочетанная Устойчивость к 2-ум и более ДС одной группы х им ических соединений с разны м и АДВ Устойчивость к ДС Естественная Приобретенная I ntrinsic Acquired R esistance Генотипическая Мутации P lasm id-m ediated resistance , Transferable biocide resistance Перенос плазмид, транспозонов Др. изменения Фенотипическая Формирование P hysiological (phenotypic) adaptationбиопленок Индуцированная Индуцированная (Adaptive) связана с адаптацией к воздействию суббактерицидных концентраций ДС Экспериментальное формирование индуцированной устойчивости микроорганизмов к ДС Цели 1) Доказательство возможности формирования 2) Характеристика параметров формирования устойчивости 3) Оценка изменений свойств микроорганизма в процессе ее формирования для выявления механизмов Этапы 1) Проведение серии экспериментов 2) Разработка модели формирования устойчивости Виды экспериментов 1) Формирование устойчивости к средству, содержащему ЧАС, у тесткультуры микроорганизма (E.coli) в условиях лаборатории 2) Формирование устойчивости к хлорсодержащему ДС (из группы гидантоинов) у тест-культуры микроорганизма (E.coli) в условиях лаборатории Формирование устойчивости микроорганизмов к ДС в эксперименте Этапы эксперимента: 1.Подбор суббактерицидной концентрации ДС 2.Последовательное воздействие на микроорганизм ДС в суббактерицидной концентрации 3.Создание схемы эксперимента рост микроорганизма при различных концентрациях ДС (%) *** № опыта 0,5* 0,1** 0,05** 0,02** 0,01** 1 рн рн рн 30 КОЕ сплошной рост 2 рн рн рн 160 КОЕ сплошной рост рост более 300 КОЕ 3 рн рн рн 45 КОЕ оценка чувствительности микроорганизма чувствителен чувствителен чувствителен неполная чувствительность устойчив *концентрация дезинфицирующего средства, рекомендованная методическими указаниями **заниженная концентрация дезинфицирующего средства ***применялась экспозиция, рекомендованная МУ по применению ДС Схема эксперимента по выработке устойчивости к ДС 1 2 3 ДС ДС ДС 56 83 КОЕ КОЕ высев высев суточная культура суточная культура 5 ДС ДС 6 ДС Спло шной рост >300 КОЕ >100 КОЕ суточная культура КОЕ суточная культура 4 высев 100 суточная культура высев суточная культура Экспериментальное формирование устойчивости E.coli к ЧАС 1 2 0,14 2 - E.coli, после воздействия ЧАС Толщина кл.ст. в мкм 1 - Интактная E.coli 0,12 0,1 0,08 опыт инт 0,06 0,04 0,02 0 1 11 21 31 41 51 61 71 81 91 101 111 121 131 141 151 161 171 Толщина клеточной стенки бактерий в опыте и в контроле Кол-во измер. 1 1 Экспериментальное формирование устойчивости E.coli к ЧАС 2 2 Экспериментальное формирование устойчивости E.coli к ХДС 1 2 3 1 - Интактная E.coli 2, 3 - E.coli, погибшая под действием ХДС Экспериментальное формирование устойчивости E.coli к ХДС Экспериментальное формирование устойчивости E.coli к ХДС Модель формирования индуцированной устойчивости микроорганизмов к ДС Формулирование цели и задач Формиро вание устойчив ости - Определение условий эксперим ента - Вы бор ДС - Вы бор объ ектов Эксперим ент им итирует реальны е условия прим енения ДС Подбор суббактерицидной [ДС] -Оценка ж изнеспособност и м/ о -Р ост 1-299 КОЕ Систематическое воздействие на микроорганизм - м / о устойчив к бактерицидной [ДС] - рост >300 КОЕ - парам етры устойчивости - ф акторы - оценка условий сохранения Оценка ж изнеспос обности Воздействие Оценка изм енений свойств Контроль чувствител ьности Методическое обеспечение мониторинга устойчивости микроорганизмов к дезинфицирующим средствам Мониторинг устойчивости к ДС – динамическая оценка состояния чувствительности патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, выделенных из различных объектов внешней среды ЛПО, пациентов и персонала, к дезинфицирующим средствам Цель: характеристика чувствительности микрофлоры и тенденций ее изменения для своевременной коррекции дезинфекционного режима Организационно-методические принципы мониторинга Активное динамическое эпидемиологическое наблюдение Оценка эпидситуации Микробиологический мониторинг, оценка микробного пейзажа ЛПО Оценка дезинфекционного и стерилизационного режима в ЛПО: спектр применяемых групп ДС и препаратов, эффективность, причины недостаточной эффективности Внедрение методов оценки чувствительности к ДС в практику работы микробиологической лаборатории ЛПО Способ определения чувствительности микроорганизмов к ДС (в двух вариантах) имеет целью оценку состояния чувствительности микроорганизмов основан на оценке роста микроорганизмов на твердой питательной среде после экспозиции ДС является количественным, упрощенным, микрометодом имеет варианты определения чувствительности микроорганизма к дезинфицирующему средству при его применении в растворе или для обработки поверхности предназначен для применения в микробиологических лабораториях ЛПО, ФГУЗ «ЦГиЭ» в условиях рутиной практической деятельности используется для осуществления мониторинга устойчивости к ДС в ЛПО Стандарты Вариант 1 – в растворе Вариант 2 – на поверхности чувствительность 98,7 1,2 % 97,6 2,2 % специфичность 99,2 0,8 % 98,3 1,6 % точность теста 99 0,9 % 98 2% положительное прогностическое значение 98,7 1,2 % 97,6 2,2% отрицательное прогностическое значение 99,2 0,8 % 98,3 1,6 % воспроизводимость 95, 4 2,4 % 93,9 3,6 % Типы мониторинга устойчивости к ДС Тотальный Плановый Усиленный (при ухудшении эпидситуации) Направленный На отделения риска На контингенты риска На отдельные микроорганизмы Комбинированный Тотальный (во всей ЛПО в плановом порядке) Направленный на отделения риска Тотальный (исследование всех объектов) Направленный (выборочное исследование объектов) Режим мониторинга устойчивости и объём мероприятий Эпидемиологическая ситуация в ЛПО Профиль ЛПО Характеристики микробного пейзажа Особенности дезинфекционного режима: спектр применяемых ДС объем применения масштабы и длительность использования ДС в ЛПО действующие вещества ДС Характер проведения •планово •по эпидпоказаниям Периодический –для всех ЛПО при эпидемиологическом благополучии Усиленный – по эпидемическим показаниям Постоянный – в отделениях и ЛПО высокого риска, где наблюдается распространенность устойчивости к ДС и постоянное выявление резистентных штаммов Объекты мониторинга Тестируемые ДС культуры патогенных и условнопатогенных микроорганизмов, выделенные: из внешней среды (с учетом ДС разных групп хим.соединений, применяемых в ЛПО наиболее важных факторов передачи инфекции) от пациентов и персонала (с внутрибольничным ДС разных групп хим. соединений, планируемых к применению инфицированием) все штаммы, обусловившие вспышки в ЛПО все госпитальные штаммы и ДС с разными действующими веществами в пределах одной группы хим.соединений госпитальные микробные ассоциации ДС разными АДВ для ротации Создание организационнофункциональных моделей мониторинга устойчивости микроорганизмов к дезинфицирующим средствам ЛПО Роспот ребнад зор ЛПО •Проведение исследований ЛПО •Рекомендации по организации Пр-ли ДС Центр •Методический центр МУ к •Создание музея культур ДС помощь •Консультативная и проведению МУДС ЛПО ЛПО и проведение исследований при вспышках, эпиднеблагополучии ЛПО МЗ, ДЗ ЛПО Врач-эпидемиолог •Оценка эпидобстановки •Оценка микробного пейзажа •ОЭА, РЭА •Оценка, коррекция дез.режима •Определение режима, тактики МУ к ДС Центр МУ к ДС Дилеры ДС •Прием культур •Проведение исследований •Подбор эффективных ДС •Выдача результатов •Рекомендации Врач-бактериолог •Консультации •Выделение, •Апробация ДС на штаммах, циркулирующих в ЛПО •Разработка линейки ДС для ротации идентификация м/о •Сан-бак. и клинич. исследования •Хранение и передача культур ЛПО Роспот ребнад зор ЛПО ЛПО •Создание базы данных • Анализ результатов МУДС • Оценка спектра применяемых ДС Центр •Формирование стратегии ЛПО МУДС и тактики дезинфекционных мероприятий в ЛПУ Центр МУДС ЛПО ЛПО МЗ, ДЗ ЛПО БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ!
