молекулярная аллергология - Dr. Fooke Laboratorien GmbH

Сегодня множество аллергенных молекул
из различных натуральных источников
аллергенов могут быть клонированы,
секвинированы и экспрессированы
как рекомбинантные аллергены
Germany
молекулярная
аллергология
Рекомбинантные и нативные аллергены
Использование рекомбинантных аллергенов – это
важная информация о триггерных стимулах на молекулярном уровне. Исследование реактивности к рекомбинантным аллергенам даёт возможность изучать более сложные популяционные явления, такие
как географические различия в IgE-опосредованной
чувствительности и перекрёстные реакции между
различными аллергенами.
Аллергология
компонента или
молекулярная
аллергология
Доктор Фооке
Оформление заказов
Dr. Fooke Laboratorien GmbH - Доктор Фооке
121059, РФ, г. Москва. Бережковская наб. 20
Тел.: +7 (495) 799-1165, +7 (495) 725-1169
E-mail: [email protected], [email protected]
www.fooke.ru
Dr. Fooke Labolarftorien GmbH
Молекулярная аллергодиагностика
Молекулярный диагноз – сугубо дифференцированный, максимально точный. Он позволяет,
в частности, детально разграничить моно-аллергические и перекрещивающиеся аллергические реакции. Моно аллергическая – это реакция на единственный конкретный аллерген.
Перекрещивающаяся – это реакция на разные аллергены. В случае перекрещивающейся
реакции молекулярная диагностика позволяет выявить истинного «виновника». На основе
этого можно делать полные прогнозы: контакт с какими веществами вызовет у пациента аллергическую реакцию. Это те вещества, в молекулярном строении которых, присутствует
выявленный аллерген-компонент.
Тесты с рекомбинантными аллергенами открывают новые возможности прогнозирования, будет ли назначенная терапия АСИТ адекватной и эффективной. Если аллергические реакции
у пациента обусловлены сенсибилизацией к мажорному (основному) компоненту аллергена
(например, Bet v 1 пыльцы берёзы), с высокой степенью вероятности можно прогнозировать
высокий терапевтический эффект от АСИТ с экстрактом пыльцы берёзы, который будет содержать высокую концентрацию этого компонента. С другой стороны, если пациент чувствителен к другому, не к главному (минорному) компоненту аллергена (например к Bet v 2 или
Bet v 4 пыльцы берёзы), иммунотерапия с экстрактом, возможно содержащим Bet v 1 будет
недостаточно эффективной.
Вероятность успешной специфической иммунотерапии
Пыльца тимофеевки луговой
Мажорный аллерген: Phl p1/Phl p5
Минорный аллерген: Phl p7/Phl p12 (профилин)
Bet v1
положит.
Bet v1
положит.
Bet v1
отрицат.
Phl p1/ Phl p5
положит.
Phl p1/ Phl p5
положит.
Phl p1/ Phl p5
отрицат.
Bet v2
отрицат.
Bet v2
положит.
Bet v2
положит.
Phl p7/Phl p12
отрицат.
Phl p7/Phl p12
положит.
Phl p7/Phl p12
положит.
вероятна
мало
вероятна
вероятность
отсутствует
вероятна
Dr. Fooke - Доктор Фооке
мало
вероятна
вероятность
отсутствует
Оценка риска
Риск
Аллерген
Тяжёлые системные реакции
у пациентов с аллергией на арахис
Ara h2 арахис
Дополнительно изучаются другие «маркеры риска»
Определение специфических IgE (sIgE) к CCD и перекрёстной реактивности
Цель
Аллерген
Определение sIgE к перекрёстно-реагирующим
углеводным детерминантам (CCD)
Пероксидаза хрена (англ. HRP)
(сильно гликозилированная)
Рекомбинантные (не гликозилированные)
аллергены, для исключения sIgE к CCD
Все соответствующие аллергены
Определение перекрёстной реактивности на
основе семейств белков
Парвальбумин (рыба); Тропомиозин
(клещи; моллюски; ракообразные);
Mal d1; Dau c1 (Bet v1 гомолог);
Профилины (Phl p12 и Bet v2)
Предлагаются Рекомбинантные (R) и высоко очищенные Нативные (N) аллергены:
Кат. №
ND 11
ND 12
ND 21
ND 22
RE 11
NF 24
RF 131
RF 132
RF 171
RF 180
RF 311
RF 491
RF 533
RF 901
RT 301
RT 302
RG 601
RG 605
RG 607
RG 612
RW 601
RK 825
RK 826
RI 101
RI 102
RI 305
NF 253
RG 620
RG 621
Аллерген
Der p 1
Der p 2
Der f 1
Der f 2
Fer f 1
Тропомиозин
Ara h 1
Ara h 2
Cor a 1
Cyp c 1
Dau c 1
Mal d 1
Pru p 3
Ole e 1
Bet v 1
Bet v 2
Phl p 1
Phl p 5
Phl p 7
Phl p 12
Art v 1
Hev b 5
Hev b 6
Api m 1
Api m 2
Ves v 5
CCD
Phl p1 и Phl p5
Phl p7 и Phl p12
Происхождение Тип
Применение аллергена
D. pteronyssinus
D. pteronyssinus
D. farinae
D. farinae
Кошка
Креветка
Арахис
Арахис
Фундук
Карп
Морковь
Яблоко
Персик
Олива
Берёза
Берёза
Тимофеевка
Тимофеевка
Тимофеевка
Тимофеевка
Полынь
Латекс
Латекс
Яд пчелы
Яд пчелы
Яд ос
Пероксидаза хрена
Тимофеевка
Тимофеевка
Перекрёстная реактивность к Der f1
Перекрёстная реактивность к Der f2
Перекрёстная реактивность к Der p1
Перекрёстная реактивность к Der p1
Основной компонент аллергена кошки
Перекрёстная р-ть между Der, Bla, Per, Met, Pen
Риск тяжёлых системных реакций
Риск тяжёлых системных реакций
Перекрёстная реактивность к Bet v1
Перекрёстная р-ть к разным видам рыб
Перекрёстная реактивность к Bet v1
Перекрёстная реактивность к Bet v1
Риск тяжёлых системных реакций
Специфичный аллергенный компонент
Перекрёстная р-ть Bet v1 гомолог с фруктами
Перекрёстная р-ть между растениями
Перекрёстная р-ть между растениями
Перекрёстная р-ть между растениями
Перекрёстная р-ть между растениями
Перекрёстная р-ть между растениями
Специфичный аллергенный компонент
Специфичный аллергенный компонент
Специфичный аллергенный компонент
Перекрёстная р-ть между Pol и Bom
Перекрёстная р-ть между ядами Pol и Dol
Перекрёстная р-ть между ядами Api и Dol
Перекрёстная реактивность основанная CCD
Выбор эффективной иммунотерапии
Выбор эффективной иммунотерапии
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Панааллерген
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Мажорный
Маркер
Мажорный
Минорный
Dr. Fooke - Доктор Фооке
2
Specific IgE REAST with Recombinant Allergens
Молекулярная диагностика, которую предлагает сегодня Dr.Fooke Laboratorien GmbH - Доктор Фооке Германия, основана на изучении молекулярного состава потенциальных аллергенов, на выявлении в молекулярном составе так называемого аллерген-компонента. Иными
словами, новая методика позволяет выявить в составе иммуноглобулинов (IgE) «ту самую»
молекулу, на которую, собственно, и реагирует пациент. В этом случае положительный результат проб на различные аллергены не собьёт с толку врачей, ибо им становится понятен
аллерген-компонент, объединяющий эти вещества. По типу это одна и та же молекула, «болезненная» для пациента, которая присутствует в разных веществах.
Specific IgE REAST with Recombinant Allergens
Исторически сложилось так, что в диагностике аллергии I типа использовались экстракты аллергенов, содержащие соответствующие главные и второстепенные аллергены, а также неаллергические компоненты. Эти экстракты превосходно подходят для первого скринингового
тестирования пациентов, в настоящее время такие экстракты дополняются рекомбинантными или высоко очищенными нативными аллергенами, молекулярной аллергодиагностикой.
Пыльца березы
Мажорный аллерген: Bet v1 Минорный аллерген: Bet v2 (профилин) Рекомбинантные (R) и нативные (N) аллергены
1
Определение sIgE с рекомбинантными аллергенами
Компонентами аллергена являются белки, которые по своей структуре являются очень схожими (гомологичными) и относятся к тому же «белковому семейству», будучи в то же время
совершенно другого происхождения. Диагностирование аллергии на молекулярном уровне с
помощью тест-системы Specific IgE REAST вносит ясность в такой сложный вопрос – насколько специфична аллергическая реакция по отношению к данному источнику аллергии (берёза,
земляной орех и т.д.) или же имеет место соприкосновение с гомологичным элементом, относящимся к тому же «белковому семейству», и индуцированная им аллергическая реакция
значительно слабее.
В чем преимущество тест-системы Specific IgE REAST
a) тест-система с жидкофазными рекомбинантными аллергенами удобна в использовании,
она обеспечивает высокую выявляемость специфических IgE, за счёт немедленного связывания аллергенов с антителами;
b) возможность не только «ручной» постановки, но и выполнение анализа с использованием
автоматических иммуноферментных анализаторов;
c) исключают интерференцию аллерген-специфических антител других классов;
d) произвольный выбор аллергенов в зависимости от потребности лаборатории;
e) получения количественных результатов, выраженных как в классах от 0 до 6, так и в МЕ/мл;
f) длительные сроки годности, до двух лет и выше, после вскрытия аллергены годны к использованию в течение всего срока годности;
g) регистрационное удостоверение № ФСЗ 200700940 от 26.12.2007г.
Компоненты необходимые для проведения анализа
a) тест-система, доступна в 2-х форматах каталожный №0520960FL на 96 определений и каталожный №0524800FL на 480 определений;
b) набор стандартов с 6-тью калибраторами для построения 5-ти кривых, каталожный №07050FL;
c) положительный контроль, 1 флакон (1.0 мл), каталожный №07005;
d) отрицательный контроль, 1 флакон (1.0 мл), каталожный №07006;
e) при работе с контролями необходим флакон аллергена каталожный № d1-FL относительно
которого стандартизированы контроли;
f) рекомбинантные и нативные аллергены в жидкой биотинилированной форме, объёма каждого флакона (2.8 мл) достаточно для 25 тестов одного наименования, готовы к применению.
Dr. Fooke - Доктор Фооке
Специфическая иммунотерапия
Если аллерген определён не верно, нельзя назначать иммунотерапию
Когда пациенту проводят терапевтический курс инъекций аллергена (аллергоспецифическую терапию), чтобы выработать невосприимчивость к проблемному аллергену. А эта терапия очень длительная, занимает несколько лет и стоимость её - достигает десятков тысяч
рублей. В том случае, когда неправильно определён виновный тип аллергена и неверно
диагностирован основной аллерген (поставлен ошибочный диагноз), применения аллергоспецифической терапии к аллергенам к которым пациент не чувствителен, делает возможным появления у него аллергической реакция на то, на что её прежде никогда не было, что
скорее ухудшит симптомы, чем устранит их.
Правильный диагноз - что это даёт для лечения
Приведём примеры с несколькими специфическими и перекрёстно-активными аллергенкомпонентами. Так, аллерген-компоненты Bet v 2 и Bet v 4 присутствуют в пыльце берёзовых
серёжек, Ara h 1, Ara h 2, Ara h 3, Ara h 9 – в орехах, Gly m 5, Gly m 6 – в сое. А вот аллергенкомпоненты Bet v 1, Ara h 8, Gly m 4 присутствуют и в пыльце берёзовых серёжек, и в орехах,
и в сое. Допустим, диагностирована аллергическая реакция – и на берёзовую пыльцу, и на
орехи, и на продукты из сои. Прежние методы диагностики (кожные пробы, анализ крови)
способны «всего лишь» подтвердить этот факт. А вот молекулярная диагностика покажет,
реагирует ли организм пациента на Bet v 1, на Ara h 8 или на Gly m 4. В соответствии с этим
будет назначена и специфическая иммунотерапия (АСИТ), цель которой – выработка защитной реакции организма против конкретного аллерген-компонента.
Молекулярной диагностики и продукты питания
Прогноз опасности или безопасности определенных продуктов питания, сделанный по результатам молекулярной диагностики, тоже конкретен. Если пациент реагирует на перекрёстно-активные аллерген-компоненты, то на основе прежних диагностических методик
для него возможно лишь в общем и целом очертить круг потенциально опасных продуктов.
Некоторые из них действительно опасны, другие – нет. Почему? Потому, что разные аллерген-компоненты относятся к разным протеиновым семействам. В одних продуктах эти
семейства представлены незначительно, легко разлагаются при нагреве и фактически не
представляют опасности. Это лабильные протеины, они практически безопасны. В других
продуктах те же семейства представлены в большом количестве и весьма устойчивы. Это
стабильные протеины, вызывающие сильную аллергическую реакцию, вплоть до анафилактического шока. Поскольку молекулярная диагностика точно выявляет перекрёстные
аллерген-компоненты, к которым чувствителен пациент, то и прогноз опасности пищевых
продуктов столь же точен. В зависимости от лабильности или стабильности соответствующих протеиновых семейств врачи заключают: эти продукты представляют незначительную
аллергическую опасность, эти – повышенную, а эти – крайне опасны!
Оформление заказов
Dr. Fooke Laboratorien GmbH - Доктор Фооке
121059, РФ, г. Москва. Бережковская наб. 20
Тел.: +7 (495) 799-1165, +7 (495) 725-1169
E-mail: [email protected], [email protected]
www.fooke.ru
Dr. Fooke - Доктор Фооке
4
Specific IgE REAST with Recombinant Allergens
В иммуноферментном методе рекомбинантные и нативные аллергены используются совместно с тест-системой Specific IgE REAST (энзим-аллергосорбентный тест с инвертированной последовательностью добавления реагентов) производства Dr.Fooke - Доктор Фооке
для количественного определения специфических IgE-антител в сыворотке крови человека
методом иммуноферментного анализа. Высокая специфичность этой тест-системы делает
диагностику аллергии более истинной, что даёт возможность более точного выяснения характера и причины перекрёстной активности. В этом случае происхождение аллергии выясняется на уровне компонента.
Specific IgE REAST with Recombinant Allergens
В чем преимущество нового метода
3