Оксохром ГЛЮКОЗА 1500 (GLU GOD 6x250)

Реклама
Оксохром ГЛЮКОЗА 1500
(GLU GOD 6x250)
Ном. номер 10003223
Хранить
(с +2 до +8) °C
Набор реактивов для приготовления 1500 мл рабочего ­раст­вора к
ферментативному определению глюкозы методом GOD-POD.
Принцип метода
Глюкоза окисляется кислородом воздуха при каталитическом
действии фермента глюкозооксидазы с образованием переки­си
водорода и глюконата. Возникшую перекись водорода определяют
по реакции окислительного азо­сочетания с  заме­щенным фенолом и 4-аминоантипирином, которая катали­зируется ферментом
пероксидазой.
Литература
Trinder, P.: Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969)
Chromý, V., Breinek, P., Roháček, J.: Biochem. Clin. Bohemoslov.
16, 275 (1987)
Roháček, J., Chromý, V., Breinek, P.: Biochem. Clin. Bohemoslov.
16, 183 (1987)
Реактивы
1
2
Ферменты
пероксидаза ≥4,17 мккат,
глюкозооксидаза ≥50,0 мккат,
4-аминоантипирин 0,245 ммоль/флакон
(6 флаконов)
Буфер – хромоген
фосфатный буфер 0,14 моль/л,
3-метилфенол 0,010 моль/л
(6x250 мл)
Состав инкубационной смеси
Фосфатный буфер, рН 8 (25 °С)
Глюкозооксидаза
≥
Пероксидаза
≥
3-Метилфенол
4-Аминоантипирин
Соотношение объемов
сыворотка/инкубационная смесь
140
166
16
10
1
ммоль/л
мккат/л
мккат/л
ммоль/л
ммоль/л
1/101
Референтные величины
(нтБ) К-Глюкоза, вщ-к (ммоль/л)
3,9 – 5,6
(нтБ) С, (нтБ) П-Глюкоза, вщ-к (ммол/л)
3,88 – 5,83
сутМ - Глюкоза, вщ-клч (ммоль/24 часа)
1,4
Приведеный диапазон референтных значений является ориентировочным. Рекомендуется каждой лаборатории вычислять свои
диапазоны нормальных величин.
Калибровка и контроль
Для калибровки рекомендуем:
ЛИО КАЛ, Ном. номер 12000185
Для контроля рекомендуем:
ЛИО ГУМ Н, Ном. номер 12000186
ЛИО ГУМ П, Ном. номер 12000187
Вспомогательные реактивы
(не входят в состав набора)
Раствор трихлоруксусной кислоты, 50 г/л.
Приготовление рабочего раствора
Содержимое флакона с реактивом 1 растворяют в около 6 мл дистиллированной
воды, наливают во флакон с реактивом 2  и  перемешивают.
Устойчивость: 1 месяц (с +2 до +8) °С в темном месте.
10 дней (с +15 до +25) °С в темном месте.
Проведение анализа
Образцы: негемолитическая сыворотка, гепарин. или ЭДТА плазма
Длина волны (480 – 540) нм, с максимумом при 498 нм
Kювета 1  см
Tемпература
(с +15 до 25) °С, (37 ±0,1) °С
Определение без осаждения белков
В трёх пробирках смешивают в соотношении 100+1 или 150+1 рабочий раствор
с сывороткой или плазмой (проба), эталонным раствором глюкозы (эталон) и
дист. водой (контрольный раствор). Инкубируют 30  мин (с +15 до +25) °С или
15 мин при 37 °С. Инкубационную смесь следует защищать от действия прямого
света. До истечения 40  мин после окончания инкубации измеряют оптическую
плотность пробы (А1) и эталона (А2) против контрольного раствора.
Определение с осаждением белков
Кровь, несвёртываемую кров, гемолитическую сыворотку или плазму депротеинируют раствором трихлоруксусной кислоты. В  центри­фужной пробирке
смешивают 0,05 мл пробы с 0,50 мл раствора для осаждения белков и центрифугируют. В одинаковом соотношении разбавляют дист. водой эталонный
раствор глюкозы.
В трёх пробирках смешивают рабочий раствор в соотношении 10+1 с  надосадочной жидкостью (проба), с разбавленным водой эталонным раствором глюкозы
(эталон) и с дистиллированной водой (контрольный раствор). Дальнейший ход
определения такой же, как при анализе без осаждения белков.
Анализ мочи
Мочу разбавляют дистилированной водой в соотношении 1+10. Дальнейший ход
работы такой же, как при анализе без осаждения белков (результат x 11).
Расчет результатов
Глюкоза (ммоль/л) = а .
A1
A2
,
где а – концентрация глюкозы в эталонном растворе, ммоль/л.
Примечания
При пониженной температуре в флаконе с реактивом 2 или в  рабочем растворе могут выделиться кристаллы фосфатов, их следует растворить, нагрев
раствор до около 37 °С.
Пробу с концентрацией глюкозы свыше 22 ммоль/л следует разбавить физиологическим раствором в соотношении от 1+2 до 1+10 и  повторить анализ
(результат x разведение).
В качестве антикоагулянта можно использовать К2ЭДТА цитрат, оксалат, или
гепарин. Перед определением глюкозы кровь необходимо депротеинировать.
ВНИМАНИЕ! Эталон и  контроль­ный раствор необходимо разбавлять дистилли­
рованной водой, ни в  коем случае не раствором для осаждения белков.
При необходимости ускорить анализ на глюкозы можно сократить время инкубации при 37 °С до 10 мин, параллельно необходимо анализировать и эталон.
При кинетическом определении рекомендуется измерять изменение оптической
плотности пробы и эталона (∆А/мин, 37 °С) между 30-ой и 90-ой секундами.
Пересчет единиц
1 кат/л = 1 моль/л.с
1 мккат/л = 60 Е/л
Стабильность и хранение
Реактив следует хранить при температуре (с +2 до +8) °С в темноте.
Срок годности указан на каждой упаковке.
После использования флакон с реактивом немедленно закройте, чтобы предотварить возможность испарения реактива или его контаминации.
Рабочие (аналитические) характеристики
Диапазон измерений: до 22 ммоль/л
Оптический предел измерения (изменение оптической плотности не более
А/мин) 0,04 ммоль/л
Чувствительность / Предел определения: 0,14 - 22 ммоль/л
Воспроизводимость (при 37°C)
Внутрисерийная
(число измерений
n=20)
Среднеарифметическое
значение
SD
Среднеквадратичное
или стандартное
отклонение
CV(%)
Коэффициент
вариации
Образец 1
5,68
0,06
1,08
Образец 2
10,61
0,14
1,44
Образец 3
14,32
0,13
0,90
Межсерийная
(число измерений
n=10)
Среднеарифметическое
значение
SD
Среднеквадратичное
или стандартное
отклонение
CV(%)
Коэффициент
вариации
Образец 1
5,67
0,14
2,54
Образец 2
10,5
0,27
2,54
Образец 3
14,08
0,35
2,50
(ммоль/л)
(ммоль/л)
(ммоль/л)
(ммоль/л)
Сравнение методов
Сровнение было проведено с использованием реагентов Erba Lachema s.r.o.
и имеющихся в продаже реагентов с коммерчески доступной методикой.
Результаты: N=82, r=0,997, y=0,980 x +0,308 ммоль/л
Меры предосторожности
Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально
обученным лаборантом. Набор не содержит опасных веществ. При случайном приеме внутрь следует выпить 0,5 л воды, при попадании в глаза или
на кожный покров следует промыть их током чистой воды. Пострадавшему
необходимо оказать квалифицированную медицинскую помощь.
Ликвидация мусора
Все тестированные пробы считают материалом, который может быть инфицирован, и совместно с возможными остатками реактивов подлежит уничтожению в соответствии с утверж­ден­ными внутрибольничными правилами.
Бумажную упаковку сдайте в макулатуру, выполосканую заводскую тару
в  сортированный мусор.
Дата проведения последнего контроля: 30. 6. 2015
Представительство Erba Lachema s.r.o. в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис 503
тел. +7 (495) 755 55 80; 755 78 51, e-mail: [email protected], www.erbalachema.ru
B/PI/095/15/I
GLUKOSA GOD 1500
(GLU GOD 6x250)
Kat. č. 10003223
Skladovat
(+2 až +8) °C
Souprava činidel pro přípravu 1500 ml pracovního roztoku
k enzymovému stanovení glukosy metodou GOD-POD.
Princip metody
Glukosa se oxiduje kyslíkem za katalysy enzymem glukosaoxidasou na peroxid vodíku a glukonát. Vzniklý peroxid vodíku
se stanovuje oxidační kopulací se substituovaným fenolem
a 4-aminoantipyrinem katalysovanou enzymem peroxidasou.
Literatura
Trinder, P.: Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969)
Chromý, V., Breinek, P., Roháček, J.: Biochem. Clin. Bohemoslov. 16, 275 (1987)
Roháček, J., Chromý, V., Breinek, P.: Biochem. Clin. Bohemoslov. 16, 183 (1987)
Činidla
1 Enzymy
peroxidasa ≥ 4,17 µkat,
glukosaoxidasa ≥ 50,0 µkat,
4-aminoantipyrin 0,245 mmol/lahvičku
2 Pufr – chromogen
Fosforečnanový pufr 0,14 mol/l,
3-methyl-fenol 10 mmol/l
(6 lahviček)
(6x250 ml)
Stanovení s deproteinací
Krev, nesrážlivá krev, hemolytické sérum nebo plasma se deproteinují roztokem kyseliny trichloroctové. V centrifugační zkumavce se smíchá 0,05 ml
vzorku s 0,50 ml deproteinačního roztoku a odstředí se. Ve stejném poměru
se zředí dest. vodou standardní roztok glukosy.
Ve třech zkumavkách se smíchá pracovní roztok v poměru 10 + 1 se supernatantem (vzorek), se zředěným standardním roztokem glukosy vodou
(standard) a s destilovanou vodou (kontrolní roztok). Další postup je stejný
jako při analyse bez deproteinace.
Analysa moče
Moč se zředí dest. vodou v poměru 1 + 10. Dále se postupuje jako při stanovení bez deproteinace (výsledek x 11).
Výpočet
Glukosa (mmol/l) = a .
A1
A2
,
kde a je koncentrace glukosy ve standardním roztoku v mmol/l.
Poznámky
Při snížené teplotě se mohou v lahvičce s činidlem 2 nebo v pracovním roztoku
vyloučit krystaly fosfátů. Rozpustí se zahřátím roztoku na asi 37 °C.
U vzorku s obsahem glukosy nad 22 mmol/l se vzorek ředí dest. vodou v
poměru 1 + 2 až 1 + 10 a analysa se opakuje (výsledek x ředění).
Jako antikoagulancia lze užít K2EDTA, citrát, oxalát nebo heparin. Krev je
nutné před stanovením glukosy deproteinovat. POZOR! K ředění standardu
a kontrolního roztoku se neužívá deproteinační roztok, ale dest. voda.
Při akutním vyšetření glukosy lze inkubaci při 37 °C zkrátit na 10 min, souběžně je nutné analysovat i standard.
Pro kinetické stanovení se doporučuje měřit změnu absorbance vzorku a
standardu (∆A/min, 37 °C) mezi 30. až 90. s.
Přepočet jednotek
1 kat/l = 1 mol/l.s
1 µkat/l = 60 U/l
Složení inkubační směsi
Fosforečnanový pufr, pH 8 (25 °C)
Glukosaoxidasa
≥
Peroxidasa
≥
3-Methylfenol
4-Aminoantipyrin
Objemový poměr sérum/inkubační směs
Stanovení bez deproteinace
Ve třech zkumavkách se smíchá pracovní roztok v poměru 100 + 1 nebo
150 + 1 se sérem nebo s plazmou (vzorek), standardním roztokem glukosy
(standard) a s dest. vodou (kontrolní roztok). Inkubuje se 30 min při (+15
až +25) °C nebo 15 min při 37 °C. Inkubační směs musí být chráněna před
přímým světlem.
Do 40 min po skončení inkubace se změří absorbance vzorku (A1) a standardu (A2) proti kontrolnímu roztoku.
140 mmol/l
166 µkat/l
16 µkat/l
10 mmol/l
1 mmol/l
1/101
Referenční hodnoty
cB Glukosa (mmol/l)
3,9 – 5,6
fS, fP Glukosa (mmol/l)
3,88 – 5,83
dU Glukosa (mmol/24 hod.)
1,4
Referenční rozmezí je pouze orientační, doporučuje se, aby
si každá laboratoř ověřila rozsah referenčního intervalu pro
populaci, pro kterou zajišťuje laboratorní vyšetření.
Kalibrace a kontrola
Ke kalibraci se doporučuje:
LYO KAL, kat. č. 12000185
Ke kontrole doporučujeme:
LYO HUM N, kat. č. 12000186
LYO HUM P, kat. č. 12000187
Pomocná činidla (nejsou součástí soupravy)
Roztok kyseliny trichloroctové, 50 g/l.
Příprava pracovního roztoku
Obsah lahvičky 1 se rozpustí asi v 6 ml destilované vody, vleje se do lahvičky 2 a promíchá se.
Stabilita: 1 měsíc při (+2 až +8) °C v temnu,
10 dnů při (+15 až +25) °C v temnu.
Postup analýzy
Vzorky:
nehemolytické sérum, heparinová nebo EDTA plasma
Vlnová délka (480 – 540) nm, s maximem při 498 nm
Kyveta 1 cm
Teplota
(+15 až +25) °C, nebo (37 ±0,1) °C
Stabilita a skladování činidla
Před i po otevření skladujte činidlo při (+2 až +8) °C ve tmě.
Doba exspirace je vyznačena na obalu.
Po použití lahvičku okamžitě uzavírejte z důvodů odpařování a kontaminace
činidla.
Výkonnostní charakteristiky
Linearita: do 22 mmol/l
Limit detekce: 0,04 mmol/l
Pracovní rozsah: 0,14 - 22 mmol/l
Přesnost (při 37°C)
INTRA-ASSAY
n=20
Průměr
(mmol/l)
SD
(mmol/l)
CV
(%)
Vzorek 1
5,68
0,06
1,08
Vzorek 2
10,61
0,14
1,44
Vzorek 3
14,32
0,13
0,90
INTER-ASSAY
n=10
Průměr
(mmol/l)
SD
(mmol/l)
CV
(%)
Vzorek 1
5,67
0,14
2,54
Vzorek 2
10,5
0,27
2,54
Vzorek 3
14,08
0,35
2,50
Správnost
Srovnání bylo provedeno s komerčně dostupnou metodou. Výsledky:
N=82, r=0,997, y=0,980 x +0,308 mmol/l
Ochrana zdraví
Určeno pro in vitro diagnostické použití oprávněnou a profesionálně vyškolenou osobou.
Souprava neobsahuje nebezpečné látky. Při náhodném požití se vypije asi
0,5 l vody, při potřísnění pokožky nebo vniknutí do oka se pokožka nebo
oko vypláchnou proudem čisté vody.
Postiženému zajistíme kvalifikovanou lékařskou pomoc.
Likvidace odpadů
Na všechny zpracované vzorky je nutné pohlížet jako na potencionálně infekční
a spolu s případnými zbytky činidel je likvidovat podle vlastních interních
předpisů jako nebezpečný odpad v souladu se Zákonem o odpadech.
Papírové a ostatní vypláchnuté obaly se likvidují podle druhu materiálu jako
tříděný odpad (papír, sklo, plasty).
Datum poslední revize: 30. 6. 2015
B/PI/095/15/I
GLUKOSA GOD 1500
(GLU GOD 6x250)
Kat. č. 10003223
Skladovať
(+2 až +8) °C
Súprava činidiel pre prípravu 1500 ml pracovného roztoku na
enzýmové stanovenie glukózy metódou GOD-POD.
Princíp metódy
Glukóza sa oxiduje kyslíkom za katalýzy enzýmom glukózaoxidázou na peroxid vodíka a glukonát. Vzniknutý peroxid vodíka
sa určuje oxidačnou kopuláciou so substituo­vaným fenolom
a 4-aminoantipyrínom katalyzovanou enzýmom peroxidázou.
Stanovenie bez deproteinácie
V troch skúmavkách sa zmieša pracovný roztok v pomere 100 + 1 alebo
150 + 1 so sérom alebo plazmou (vzorka), štandardným roztokom glukózy
(štandard) a destilovanou vodou (kontrolný roztok). Inkubuje sa 30 min pri
teplote (+15 až +25) °C alebo 15 min pri 37 °C. Inkubačná zmes musí byť
chránená pred priamym ­svetlom.
Do 40 min po skončení inkubácie sa odmeria absorbancia vzorky (A1) a
štandardu (A2) oproti kontrolnému roztoku.
Stanovenie s deproteináciou
Krv, nezrážanlivá krv, hemolitické sérum alebo plazma sa deproteínujú roztokom kyseliny trichloroctovej. V centrifugačnej skúmavke sa zmieša 0,05
ml vzorky s 0,50 ml deproteinačného roztoku a odstredí sa. V rovnakom
pomere sa zriedi dest. vodou štandardný roztok glukózy.
V troch skúmavkách sa zmieša pracovný roztok v pomere 10 + 1 so supernatantom (vzorka), so zriedeným štandardným roztokom glukózy vodou
(štandard) a destilovanou vodou (kontrolný roztok). Ďalší postup je rovnaký
ako pri analýze bez deproteinácie.
Analýza moči
Moč sa zriedi dest. vodou v pomere 1 + 10. Ďalej sa postupuje ako pri stanovení bez deproteinácie (výsledok x 11).
Literatúra
Výpočet
Trinder, P.: Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969)
Chromý, V., Breinek, P., Roháček, J.: Biochem,. Clin.
­Bohemoslov. 16, 275 (1987)
Roháček, J., Chromý, V., Breinek, P.: Biochem,. Clin.
­Bohemoslov. 16, 183 (1987)
Glukóza (mmol/l) = a .
Činidlá
1 Enzýmy peroxidáza ≥ 4,17 µkat,
glukózaoxidáza ≥ 50,0 µkat,
4-aminoantipyrín 0,245 mmol/fľaštičku
2 Tlmivý roztok – chrómgen Fosforečnanový tlmivý roztok 0,14 mol/l,
3-metyl-fenol 10 mmol/l
(6 fľaštičiek)
(6x250 ml)
Zloženie inkubačnej zmesi
Fosforečnanový tlmivý roztok, pH 8 (25 °C) 140 mmol/l
Glukózaoxidáza ≥ 166 µkat/l
Peroxidáza ≥
16 µkat/l
3-Metylfenol 10 mmol/l
4-Aminoantipyrín 1 mmol/l
Objemový pomer sérum/inkubačná zmes 1/101
Referenčné hodnoty
cB Glukóza (mmol/l)
3,9 – 5,6
fS, fP Glukóza (mmol/l)
3,88 – 5,83
dU Glukóza (mmol/24 hod.) 1,4
Rozsah referenčných hodnôt je iba orientačný, odporúča sa,
aby si každé laboratórium overilo rozsah referenčného intervalu
pre populáciu, pre ktorú zaisťuje laboratórne vyšetrenie.
Kalibrácia a kontrola
Ku kalibrácii doporučujeme:
LYO KAL, kat. č. 12000185
Ku kontrole doporučujeme:
LYO HUM N, kat. č. 12000186
LYO HUM P, kat. č. 12000187
Pomocné činidlá (nie sú súčasťou súpravy)
Roztok kyseliny trichloroctovej, 50 g/l.
Príprava pracovného roztoku
Obsah fľaštičky 1 sa rozpustí v asi 6 ml destilovanej vody, vleje sa
do fľaštičky 2 a premieša sa.
Stabilita: 1 mesiac pri (+2 až +8) °C v tme,
10 dní pri (+15 až +25) °C v tme.
Postup analýzy
Vzorky:
nehemolytické sérum, heparinová alebo EDTA plazma
Vlnová dĺžka (480 – 540) nm, s maximom pri 498 nm
Kyveta 1 cm
Teplota (+15 až +25) °C, alebo (37 ± 0,1) °C
A1
A2
,
kde a je koncentrácia glukózy v štandardnom roztoku v mmol/l.
Poznámky
Pri zníženej teplote sa môžu vo fľaštičke s činidlom 2 alebo v pracovnom roztoku vylúčiť kryštály fosfátov. Rozpustia sa zahriatím roztoku asi na 37 °C.
U vzorky s obsahom glukózy nad 22 mmol/l sa vzorka riedi dest.
vodou v pomere 1 + 2 až 1 + 10 a analýza sa opakuje (výsledok
x riedenie).
Ako antikoagulancium je možné použiť K2EDTA, citrát, oxalát alebo heparín.
Krv je nutné pred stanovením glukózy deproteínovať. POZOR! Na riedenie
štandardu a kontrolného roztoku sa nepoužíva deproteinačný roztok, ale
dest. voda.
Pri akútnom vyšetrení glukózy je možné inkubáciu pri 37 °C skrátiť na 10
min, súbežne je nutné analyzovať aj štandard.
Pre kinetické stanovenie sa odporúča merať zmenu absorbancie vzorky a
štandardu (∆A/min, 37 °C) medzi 30. až 90. s.
Prepočet jednotiek
1 kat/l = 1 mol/l.s
1 µkat/l = 60 U/l
Stabilita a skladovanie činidla
Pred aj po otvorení skladujte činidlo pri (+2 až 8) °C v tme.
Doba exspirácie je vyznačená na obale. Po použití fľaštičku okamžite uzatvárajte z dôvodov odparovania a kontaminácie činidla.
Výkonnostné charakteristiky
Linearita: do 22 mmol/l
Limit detekcie: 0,04 mmol/l
Pracovný rozsah: 0,14 - 22 mmol/l
Presnosť (pri 37°C)
INTRA-ASSAY
n=20
Priemer
(mmol/l)
SD
(mmol/l)
CV
(%)
Vzorka 1
5,68
0,06
1,08
Vzorka 2
10,61
0,14
1,44
Vzorka 3
14,32
0,13
0,90
INTER-ASSAY
n=10
Priemer
(mmol/l)
SD
(mmol/l)
CV
(%)
Vzorka 1
5,67
0,14
2,54
Vzorka 2
10,5
0,27
2,54
Vzorka 3
14,08
0,35
2,50
Správnosť
Srovnanie bolo vykonané s komerčne dostupnou metódou. Výsledky:
N=82, r=0,997, y=0,980 x +0,308 mmol/l
Ochrana zdravia
Určené pre in vitro diagnostické použitie oprávnenou a profesionálne vyškolenou osobou. Súprava neobsahuje nebezpečné látky. Pri náhodnom požití
sa vypije asi 0,5 l vody. Pri zasiahnutí pokožky alebo pri vniknutí do oka sa
pokožka alebo oko vypláchnu prúdom čistej vody. Postihnutému zaistíme
kvalifikovanú lekársku pomoc.
Likvidácia odpadov
Na všetky spracované vzorky je nutno pozerať ako na potencionálne infekčné
a spolu s prípadnými zvyškami činidiel ich likvidovať podľa vlastných interných
predpisov v súlade s národnou legislatívou.
Papierové a ostatné vypláchnuté obaly sa likvidujú podľa druhu materiálu
ako triedený odpad (papier, sklo, plasty).
Dátum poslednej revízie: 30. 6. 2015
B/PI/095/15/I
Assay without deproteinization
Mix in three test tubes working solution in the ratio 100+1 or 150+1 with serum
or plasma (sample), with standard solution of glucose (standard) and with dist.
water (blank). Incubate for 15 min at 37 °C or 30 min at room temperature.
Avoid exposure to direct light. Read the absorbances of sample (A1) and
standard (A2) against the blank within 30 min after the incubation.
GLUCOSE GOD 1500
(GLU GOD 6x250)
Cat. No. 10003223
Store at
(+2 to +8) °C
For 1500 ml of GOD-POD reagent for enzymatic determination of glucose.
Principle
Glucose oxidase catalyses oxidation of glucose to hydrogen
peroxidase and gluconate. In the presence of peroxidase,
hydrogen peroxidase reacts with the chromogen and 4‑aminophenazone to form coloured product.
References
Trinder, P.: Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969)
Chromý, V., Breinek, P., Roháček, J.: Biochem. Clin. Bohemoslov. 16, 275 (1987)
Roháček, J.: Chromý, V., Breinek, P.: Biochem. Clin. Bohemoslov. 16, 183 (1987)
Reagents
1 Enzymes
POD ≥4.17 µkat, GOD ≥50 µkat
4-aminophenazone – 0.245 mmol/vial
2 Buffer-Chromogen
phosphates 0.14 mol/l,
3-methylphenol 10 mmol/l
(6 vials)
(6x250 ml)
Incubation mixture
Phosphate bufer, pH 8 (25 °C)
GOD
≥
POD
≥
3-Methylphenol
4-Aminophenazone
Serum/incubation mixture
140 mmol/l
166 µkat/l
16 µkat/l
10 mmol/l
1 mmol/l
1/101
Reference values
cB Glucose (mmol/l)
3.9 – 5.6
fS, fP Glucose (mmol/l)
3.88 – 5.83
dU Glucose (mmol/24 hrs)
1.4
The range of reference values is only approximate, it is recommended to all laboratories to verify the extention of reference
interval for their concrete examined population.
Calibration and quality control
For calibration we recommend
LYO CAL, Cat. No. 12000185
For control we recommend:
LYO HUM  N, Cat. No. 12000186
LYO HUM P, Cat. No.  12000187
Additional reagents (not included in the test)
Trichloroacetic acid, solution 50 g/l.
Working solution
Dissolve the contents of vial 1 in approx. 6 ml of dist. water and
add it into the bottle 2. Mix well.
Stability: 1 month at (+2 to +8) °C in dark,
10 days at (+15 to 25) °C in dark.
Procedure
Samples:
non-haemolytic serum, heparinized or EDTA plasma
Wavelength (480 – 540) nm, maximum at 498 nm
Cuvette 1 cm
Temperature (+15 to +25) °C or (37 ±0.1) °C
Assay with deproteinization
Deproteinize the blood, non-coagulating blood, heamolytic serum or plasma
with the solution of trichloracetic acid. Pipette into centrifuge tube 0.50 ml of
deproteinizing solution and 0.05 ml of a sample, shake and centrifuge. Dilute
the standard solution of glucose with dist. water in the same way.
Mix in three test tubes working solution in the ration 10+1 with the supernatant
(sample), standard glucose solution diluted with water (standard) and dist. water (blank). Proceed as described under the assay without deproteinization.
Analyse of urine
Dilute urine with dist. water 1 + 10 and proceed as described under the assay
without deproteinization (result x 11).
Calculation
Glucose (mmol/l) = a .
A1
A2
,
where a is the concentration of glucose in the standard solution in mmol/l.
Notes
Vial with Reagent 2 and working solution may contain phosphate crystals
which can occure at the low temperature. Redissolve the crystals by gentle
heating to approx. 37 °C.
If the glucose concentration exceeds 22 mmol/l, repeat the analysis with the
sample diluted 1 + 2 or 1 + 10 with dist. water (result x  dilution).
Anticoagulating agents K2EDTA, citrate, oxalate and heparin may be used. The
blood should be deproteinized before the determination of glucose. CAUTION!
For diluting glucose standard and blank use only dist. water!
Measurement after only 10 min at 37 °C is possible in single assay provided
that sample and standard are prepared and measured simultaneously.
For kinetic procedure, read the absorbances of the sample and standard
(∆A/min, 37 °C) between 30th and 90th seconds.
Recalculation of units
1 kat/l = 1 mol/l.s
1 µkat/l = 60 U/l
Health and storage
Store reagent at (+2 to +8) °C before and after opening in dark.
Expiration time is mentioned on the cover.
After using the vial close immediately to prevent the evaporation or contamination of the reagent.
Performance characteristic
Linearity: up to 22 mmol/l
Detection limit: 0.04 mmol/l
Measuring range: 0.14 - 22 mmol/l
Precision (at 37°C)
INTRA-ASSAY
n=20
Mean
(mmol/l)
SD
(mmol/l)
CV
(%)
Sample 1
5.68
0.06
1.08
Sample 2
10.61
0.14
1.44
Sample 3
14.32
0.13
0.90
INTER-ASSAY
n=10
Mean
(mmol/l)
SD
(mmol/l)
CV
(%)
Sample 1
5.67
0.14
2.54
Sample 2
10.5
0.27
2.54
Sample 3
14.08
0.35
2.50
Accuracy
Test was compared with commercially available test. Results:
N=82, r=0.997, y=0.980 x +0.308 mmol/l
Health protection
For in vitro diagnostic use. To be handled by entitled and professionaly
educated person.
Any dangerous reagents are not included in kits. If swallowed it is necessary
to drink of about 0.5 litre of water. On skin or eye contact rinse the place
with jet of tap water.
If necessary, consult a physician.
Waste disposal
All tested samples should be treated as potentially infectious and with the
contingent rest of the reagents should be liquidated in accordance with any
other local and national regulations relating to the safe handling of such
materials.
Put packaging paper waste and containers to recycling.
Date of last revision: 30. 6. 2015
B/PI/095/15/I
Похожие документы
Скачать