1 005065 2 Данное изобретение относится к новому

1
Данное изобретение относится к новому
энантиомеру 1,2-аннелированного хиназолина,
его получению, фармацевтическим композициям, которые включает в себя вышеупомянутое
новое соединение, использованию этого соединения в качестве лекарственного средства, а
также методам лечения, включающим введения
указанного соединения.
Онкогены часто кодируют белковые компоненты путей трансдукции сигналов, что приводит к стимуляции клеточного роста и митогенеза. Экспрессия онкогенов в культивируемых
клетках приводит к трансформации клеток, характеризующейся способностью клеток к росту
в мягком агаре, и росту клеток в виде плотных
фокусов, не способных к контактному ингибированию, к которому способны нетрансформированные клетки. Мутация и/или сверхэкспрессия определенных онкогенов часто ассоциируется с раковыми заболеваниями человека. Особая группа онкогенов, известная как ras, была
идентифицирована у млекопитающих, птиц,
насекомых, моллюсков, растений, грибов и
дрожжей. Семейство ras онкогенов млекопитающих включает три основных члена («изоформы»): Н-rаs, K-ras и N-ras онкогены. Эти ras
онкогены кодируют близкородственные белки,
известные под общим названием p21ras. Прикрепившись 1 раз к плазматическим мембранам,
мутантная или онкогенная формa p21ras будет
обеспечивать передачу сигнала для трансформации и неконтролируемого роста клеток злокачественных опухолей. Для приобретения этого трансформирующего потенциала предшественник онкобелка p21ras должен подвергнуться
ферментативно катализируемому фарнезилированию цистеинового остатка, расположенного
на карбоксильном конце тетрапептида. Следовательно, ингибиторы ферментов, катализирующих эту модификацию, то есть фарнезилтрансферазы, будут предотвращать прикрепление p21ras к мембране и блокировать аберрантный рост ras трансформируемых опухолей. Общепризнанно, что ингибиторы фарнезилтрансферазы белков могут быть очень полезны в качестве антираковых препаратов для опухолей, в
которых ras ответственны за трансформацию.
Так как мутированные онкогенные формы
ras часто находят при многих раковых заболеваниях человека, особенно при более чем 50%
карцином толстой кишки и поджелудочной железы (Kohl et al., Science. Vol. 260, 1834-1837,
1993), предположили, что ингибиторы фарнезилтрансферазы белков могут быть очень полезны для лечения этих типов рака.
В WO 97/16443, WO 97/21701, WO
98/40383 и WO 98/49157 описаны производные
2-хинолона, проявляющие ингибирующую активность в отношении фарнезилтрансферазы.
Другие хинолоновые соединения, имеющие ингибирующую активность в отношении фарнезилтрансферазы, описаны в WO 00/12498,
005065
2
00/12499 и 00/47574. WO 00/39082 описывает
класс новых 1,2-аннелированных соединений
хинолина и хиназолина, несущих азот- или углеродсвязанный имидазол, проявляющих ингибирующую активность в отношении фарнезилтрансферазы белков. Среди таких соединений,
описанных в последнем патенте, (±)-5-(3-хлорфенил)-α-(4-хлорфенил)-α-(1-метил-1H-имидазол-5-ил)тетразоло[1,5-а]хиназолин-7-метанамин,
который был получен в форме смеси энантиомеров. Авторы настоящего изобретения разделили смесь и обнаружили, что (-)энантиомер
имеет особые полезные фармакологические
свойства в сравнении со смесью энантиомеров.
Таким образом, настоящее изобретение относится к (-)-5-(3-хлорфенил)-α-(4-хлорфенил)α-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)тетразоло[1,5-а]
хиназолин-7-метанамину и его фармацевтически приемлемым кислотно-аддитивным солям.
Указанный выше (-)энантиомер далее упоминается как соединение данного изобретения.
Соединение данного изобретения обычно
существует, по существу, в чистой форме, то
есть, по существу, в свободно от противоположного (+)энантиомера, например содержит
менее 5% мас./мас., предпочтительно менее 2%
мас./мас. и наиболее предпочтительно менее 1%
мас./мас. второго энантиомера.
Фармацевтически приемлемая кислотноаддитивная соль, как упомянуто выше, подразумевает содержание терапевтически активных
нетоксичных форм кислотно-аддитивных солей,
которые способно образовывать соединение
данного изобретения. Последнее соединение
может быть превращено в его фармацевтически
приемлемые кислотно-аддитивные соли обработкой указанного основания соответствующей
кислотой. Соответствующие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие
как галогенисто-водородные кислоты, то есть
хлористо-водородная или бромисто-водородная
кислоты, серная, азотная, фосфорная и подобные кислоты; или органические кислоты, такие
как, например, уксусная, пропановая, оксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая,
малоновая, янтарная (то есть бутандиоевая кислота), малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфокислота, этансульфокислота, бензолсульфоновая, р-толуолсульфокислота, цикламовая, салициловая, р-аминосалициловая, памовая и подобные кислоты.
Термин кислотно-аддитивные соли также
включает гидраты и сольватные формы, которые соединение данного изобретения способно
образовывать. Примеры таких форм включают
гидраты, алкоголяты и подобные. Используемый ниже термин «соединение данного изобретения» включает также фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли.
(-)Энантиомер согласно данному изобретению может быть получен разделением исходной
3
смеси энантиомеров, описанной в WO 00/39082.
Разделение может быть осуществлено общепринятым способом, например реакцией с подходящей хиральной кислотой, такой как (+)-6аминопенициллиновая кислота, D или L аспарагиновая кислота, (1S,3R) или (1R,3S)-камфорная
кислота, (1S) или (1R)-10-камфоросульфоновая
кислота, карбобензилокси-L-пролин, холевая кислота, дегидрохолевая кислота, деоксихолевая
кислота, (2S,3S) или (2R,3R)-дибензоилвинная
кислота, (2S,3S) или (2R,3R)-диацетилвинная
кислота, (2S,3S) или (2R,3R)-винная кислота,
(2S,3S) или (2R,3R)-дитолуоилвинная кислота,
2,3:4,6-ди-O-изопропилиден-2-кето-L-гулоновая
кислота, (+)-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран-2-карбоновая кислота, (R) или (S)-4-(2-хлорфенил)-2гидрокси-5,5-диметил-1,3,2-диоксафосфоринан2-оксид, D-глюконовая кислота, D или L-глутаминовая кислота, D-изоаскорбиновая кислота,
(S) или (R)-2-гидроксипропановая кислота, лактобионовая кислота, D или L-яблочная кислота,
(R) или (S)-миндальная кислота, L-2-((4-метоксипентил)сульфонил)амино пентандиоиевая кислота, L-2-((4-метилфенил)сульфонил)амино пентандиоиевая кислота, (S)-6-метокси-α-метил-2нафтален уксусная кислота, (S)-2-(фенилкарбамоилокси)пропановая кислота, (-)-3-пинан карбоновая кислота, (R) или (S)-2-пирролидон-5карбоновая кислота или (R)-тиазолидин-4-карбоновая кислота. Полученные формы солей затем разделяют, например, селективной или фракционной кристаллизацией, требуемый энантиомер выделяют в свободном состоянии с помощью щелочи.
Альтернативный способ выделения требуемой энантиомерной формы из исходной смеси включает жидкостную хроматографию с использованием хиральной стационарной фазы.
Чистая энантиомерная форма также может быть
получена из соответствующей чистой энантиомерной формы соответствующего исходного
материала, при условии, что реакция происходит стереоспецифично. Чистая энантиомерная
форма также может быть получена, исходя из
соответствующего рацемического исходного
материала, при условии, что реакция проходит
энантиоспецифично. Чистая энантиомерная
форма может быть получена реакцией исходной
смеси энантиомеров с одним энантиомером некоторых хиральных агентов, таких как кислоты
или хлорангидрид кислоты, с получением смеси
диастереоизомеров, ее разделением, например
селективной или фракционной кристаллизацией, или с использованием жидкостной хроматографии, на чистые диастереоизомеры. Соответствующий диастереоизомер затем может быть
расщеплен на требуемый энантиомер. Исходная
смесь энантиомеров может быть приготовлена в
соответствии со способом, описанным выше в
WO 00/39082 или как более конкретно описано
здесь.
005065
4
Соединение данного изобретения и его
фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли имеют ценные фармакологические
свойства, обладая ингибирующим фарнезилтрансферазу белков (ФТБ) действием, которое
неожиданно более сильное в сравнении с таковым исходной смеси энантиомеров. Таким образом, смесь имеет ингибирующую активность в
отношении фарнезилтрасферазы белков, выраженную IC50, равную 1,1 нМ, тогда как (-)энантиомер имеет соответствующую активность,
равную 0,7 нМ.
Данное изобретение относится к способу
ингибирования аномального роста клеток,
включая трансформированные клетки, введением эффективного количества соединения данного изобретения. Аномальный рост клеток относится к росту клеток независимо от нормальных
регуляторных механизмов (то есть потери контактного ингибирования). Это включает аномальный рост (1) опухолевых клеток (опухолей), экспрессирующих активированный ras
онкоген; (2) опухолевых клеток, в которых ras
белки активированы в результате онкогенной
мутации другого гена, (3) доброкачественных и
злокачественных клеток других пролиферативных заболеваний, в которых имеет место аберрантная активация ras. Более того, в литературных данных есть предположение, что ras онкогены не только способствуют росту опухолей in
vivo путем прямого воздействия на рост опухолевых клеток, но также косвенно, то есть через
через облегчение индуцированного опухолью
ангиогенеза (Rak, J. et al., Cancer Reseach, 55,
4575-4580, 1995). Следовательно, фармакологическое нацеливание на мутантные ras онкогены,
возможно, сможет подавить рост солидных опухолей in vivo, частично за счет ингибирования
ангиогенеза, индуцированного опухолью.
Это изобретение также относится к способу ингибирования роста опухолей введением
эффективного количества соединения данного
изобретения субъекту, например млекопитающим (и особенно человеку), нуждающимся в
таком лечении. В частности, это изобретение
относится к способу ингибирования роста опухолей, экспрессирующих активированный ras
онкоген, введением эффективного количества
соединения данного изобретения. Примеры
опухолей, рост которых может ингибироваться,
но которыми не ограничивается список, включают рак легких (например, аденокарцинома,
включая немелкоклеточный рак легких), рак
поджелудочной железы (например, карцинома
поджелудочной железы, такая как, например,
экзокринная карцинома поджелудочной железы), рак толстой кишки (колоректальная карцинома, такая как, например, аденокарцинома и
аденома толстой кишки), гематопоэтические
опухоли лимфоидного происхождения (например, острая лимфоцитарная лейкемия, В клеточная лимфома, лимфома Беркитта), миелоид-
5
ная лейкемия (например, острая миелоидная
лейкемия (ОМЛ)), фолликулярный рак щитовидной железы, миелодиспластический синдром
(МДС), опухоли мезенхимального происхождения (например, фибросаркомы и рабдомиосаркомы), меланомы, тератокарциномы, нейробластомы, глиомы, доброкачественные опухоли
кожи (например, кератоакантомы), карцинома
молочной железы (то есть выраженный рак молочной железы), карцинома почек, карцинома
яичников, карцинома мочевого пузыря, эпидермальная карцинома.
Это изобретение также относится к способу ингибирования пролиферативных заболеваний, как доброкачественных, так и злокачественных, при которых ras белки аберрантно активируются в результате онкогенных мутаций в
генах. Вышеупомянутое ингибирование осуществляется введением эффективного количества
соединения, описанного здесь, субъекту, нуждающемуся в данном лечении. Например, доброкачественное пролиферативное заболевание
нейрофиброматоз или опухоли, при которых ras
активируется вследствие мутации или сверхэкспрессии онкогенов тирозинкиназы, могут быть
ингибированы соединением данного изобретения.
Соединение данного изобретения может
быть использовано для других терапевтических
целей, например
а) повышения чувствительности опухоли к
лучевой терапии путем введения вещества согласно изобретению до, во время или после облучения опухоли для лечения рака, например,
как описано в WO 00/01411;
б) лечения артропатий, таких как ревматоидный артрит, остеоартрит, ювенильный артрит,
подагра, полиартрит, псориатический артрит,
анкилозирующий спондилит и системная красная волчанка, например, как описано в WO
00/01386;
в) ингибирования пролиферации гладкомышечных клеток, включая сосудистые пролиферативные заболевания, атеросклероз и рестеноз, например, как описано в WO 98/55124;
г) лечения воспалительных состояний, таких как язвенный колит, болезнь Крона, аллергический ренит, реакция трансплантата против
хозяина, конъюнктивит, астма, респираторный
дистресс синдром взрослых (РДСВ), болезнь
Бехсета, отторжение трансплантата, уртикария,
аллергический дерматит, гнездная алопеция,
склеродерма, экзантема, экзема, дерматомиозит,
акне, диабет, системная красная волчанка, болезнь Кавасаки, рассеянный склероз, эмфизема,
кистозный фиброз и хронический бронхит;
д) лечения эндометриоза, фибромы матки,
дисфункциональных маточных кровотечений и
гиперплазии эндометрия;
е) лечения глазных сосудов, включая васкулопатию с поражением сетчатки и хориоидальных сосудов;
005065
6
ж) лечения патологий, являющихся следствием фиксации на мембране гетеротримерного G протеина, включая заболевания, затрагивающие следующие биологические функции
или нарушения: обоняние, вкус, светоощущение, нейропередача, нейродегенерация, функционирование эндокринных и экзокринных желез, аутокринная и паракринная регуляция, артериальное давление, эмбриогенез, вирусная
инфекция, иммунологические функции, диабет,
ожирение;
з) ингибирования вирусного морфогенеза,
например, путем ингибирования прениляции
или постпрениляционных реакций вирусного
белка, такого как большой дельта антиген вируса гепатита Д; и лечение ВИЧ инфекции;
и) лечения поликистоза почек;
к) подавления индукции, индуцируемой
окисью азота, включая нарушения, опосредованные окисью азота или цитокинами, септический шок, ингибирование апоптоза и ингибирование цитотоксичности, опосредованной окисью азота;
л) лечения малярии.
Следовательно, данное изобретение относится к применению соединения данного изобретения в качестве лекарственного средства, а
также для приготовления лекарственного средства для лечения одного или более из вышеупомянутых состояний.
Для лечения вышеупомянутых состояний
соединение данного изобретения может быть
применено преимущественно в комбинации с
одним или более другими противораковыми
препаратами, например, выбранными из платиновых координационных соединений, например
цисплатина или карбоплатина, таксановых соединений, например паклитаксела или доцетаксела, камптотециновых соединений, например
иринотекана или топотекана, противоопухолевых алкалоидов винка, например винбластина,
винкристина или винорелбина, противоопухолевых производных нуклеозидов, например 5флуороурацила, гемцитабина или капецитабина,
алкилирующих агентов азотного иприта или
нитрозомочевины, например циклофосфамида,
хлорамбуцила, кармустина или ломустина, противоопухолевых производных антрациклина,
например даунорубицина, доксорубицина или
идарубицина, HER2 антител, например трастзумаба, и противоопухолевых производных подофиллотоксина, например этапозида или тенипозида, и антиэстрогенных агентов, включающих
антагонисты эстрогеновых рецепторов или селективные модуляторы эстрогенового рецептора, предпочтительно тамоксифен или в качестве
альтернативы торемифен, дролоксифен, фаслодекс и ралоксифен, или ингибиторов ароматазы,
таких как экземестан, анастрозол, летразол и
ворозол.
Вследствие полезных фармакологических
свойств соединение может быть сформулирова-
7
но в виде различных фармацевтических форм
для введения.
Для получения фармацевтических композиций данного изобретения эффективное количество соединения, в основной форме или форме кислотно-аддитивной соли в качестве активного ингредиента, объединяют, тщательно смешивая, с фармацевтически приемлемым носителем, который может иметь большое разнообразие форм в зависимости от формы композиции,
требуемой для введения. Эти фармацевтические
композиции предпочтительны в единичной дозированной форме, желательно для перорального, ректального, подкожного или парентерального введения в виде инъекций. Например, для
приготовления композиции в дозированной
форме для перорального введения можно применять любые обычные фармацевтические
средства, такие как, например, вода, гликоли,
масла, спирты и подобные в случае приготовления жидких препаративных пероральных форм,
таких как суспензии, сиропы, эликсиры и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, смазывающие агенты, связующие агенты, разрыхляющие агенты и подобные в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Из-за легкости введения таблетки и капсулы представляют собой наиболее предпочтительные стандартные лекарственные формы для
перорального введения, в которых обычно применяются твердые фармацевтические носители.
Для парентеральных композиций носитель
обычно включает стерильную воду, по крайней
мере, в значительной своей части, хотя могут
быть включены другие ингредиенты, например
для большей растворимости. Растворы для инъекций, например, могут быть приготовлены с
носителем, содержащим солевой раствор, раствор глюкозы или смесь солевого раствора и
раствора глюкозы. Суспензии для инъекций
могут также быть приготовлены с соответствующими жидкими носителями, суспендирующими агентами и с использованием подобных
веществ. В композициях для чрескожного введения носитель может необязательно включать
агент, увеличивающий проникающую способность, и/или подходящий смачивающий агент,
необязательно, в сочетании с подходящими добавками любой природы в малых пропорциях,
которые не оказывают существенного вредного
действия на кожу. Упомянутые добавки могут
облегчать введение в кожу и/или могут быть
получены для приготовления желаемых композиций. Эти композиции могут вводиться различными способами, например в виде трансдермального пластыря, точечно или в виде мази.
Особенно предпочтительно изготавливать
вышеупомянутые фармацевтические композиции в виде стандартной лекарственной формы,
облегчающей введение и обеспечивающей однородность дозирования. Стандартная лекарственная форма, как используется в описании и
005065
8
формуле изобретения, относится к физически
дискретным единицам, применимым как единичные дозы, каждая единица содержит предопределенное количество активного ингредиента,
рассчитанного на получение желаемого терапевтического эффекта в сочетании с требуемым
фармацевтическим носителем. Примеры таких
стандартных лекарственных форм включают
таблетки (включая рифленые и покрытые оболочкой таблетки), капсулы, пилюли, пакетики
порошков, брикеты, растворы для инъекций или
суспензии, чайные ложки, столовые ложки и
подобное, а также их объединенное множество.
Специалист в данной области может легко определить эффективное количество из результатов испытания, представленных выше. Вообще,
предполагается, что эффективное количество
составит от 0,01 до 100 мг/кг веса тела, в особенности от 0,05 до 10 мг/кг веса тела. Для
взрослого обычно предпочтительно вводить
суточную дозу от 10 до 600 мг, преимущественно от 50 до 500 мг и особенно от 100 до 400 мг
активного ингредиента, дозы 200 или 300 мг
особенно предпочтительны. Целесообразно
вводить требуемую дозу в виде двух, трех, четырех или более поддоз с соответствующими
интервалами в течение дня. Вышеупомянутые
части суточной дозы могут быть изготовлены в
виде стандартной лекарственной формы, например, содержащей от 10 до 500 мг и особенно
от 50 до 300 мг активного ингредиента на стандартную лекарственную форму; особенно предпочтительны лекарственные формы, содержащие
50, 100, 200 или 300 мг активного ингредиента.
С целью иллюстрации приведены следующие примеры.
Экспериментальная часть
Ниже «ТГФ» означает тетрагидрофуран,
«ДИПЭ» означает диизопропиловый эфир и
«EtOAc» означает этилацетат.
Пример.
а) Получение промежуточного соединения (2)
Смесь 6-(4-хлорбензоил)-4-(3-хлорфенил)2(1Н)-хиназолинон (промежуточное соединение
1) (0,0506 моль), приготовленную как описано в
WO 98/49157, в РОСl3 (100 мл), размешивают и
кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч.
Растворитель выпаривают досуха. Остаток обрабатывают СН2Сl2 несколько раз. Растворитель
выпаривают досуха. Остаток помещают в
СН2Сl2. Смесь выливают в лед/NН4OН. Органический слой отделяют, сушат (МgSO4), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (24,2 г) кристаллизуют из СН3СN. Осадок
отфильтровывают и сушат; выход 19,8 г промежуточного соединения (2) (94%); т.пл. 152°.
b) Получение промежуточного соединения (3)
9
Раствор н-бутиллития в гексане (1,6М) (90 мл)
добавляют по каплям при -70°С под потоком N2
к смеси 1-метилимидазола (0,144 моль) в ТГФ
(120 мл). Смесь перемешивают при -70°С в течение 15 мин. Хлортриэтилсилан (0,148 моль)
добавляют по каплям при -70°С и смесь перемешивают в течение 15 мин при этой температуре.
Раствор н-бутиллития в гексане (1,6М) (80 мл)
добавляют по каплям. Смесь перемешивают при
-70°С в течение 15 мин. Смесь промежуточного
соединения (2) (0,0822 моль) в ТГФ (300 мл)
добавляют по каплям. Смесь перемешивают при
-70°С в течение 1 ч, гидролизуют, экстрагируют
в EtOAc и сливают. Органический слой сушат
(MgSO4), фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают колоночной хроматографией через силикагель. Очищенные фракции
собирают и растворитель выпаривают; выход
24,9 г (61%) промежуточного соединения (3).
Промежуточное соединение 2 Промежуточное соединение 3
с) Смесь промежуточного соединения (3)
(0,0061 моль) и азида натрия (0,0079 моль) в
N,N-диметилацетамиде (ДмА) (20 мл) перемешивают при 50°С в течение 18 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры и выливают в
ледяную воду. Осадок отфильтровывают, тщательно промывают с Н2O и помещают в CH2Cl2.
Органический раствор сушат, фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток кристаллизуют
из СН3СN/ДИПЭ. Осадок отфильтровывают и
сушат, получая 2,3 г (75%) (±)-5-(3-хлорфенил)α-(4-хлорфенил)-α-(1-метил-1H-имидазол-5ил)тетразоло[1,5-а]хиназолин-7-метанола (промежуточное соединение 4); т.пл. 232-233°С.
d) Смесь промежуточного соединения (4)
(0,0573 моль) и сульфамида NН2SO2NН2 (300 г)
перемешивают при температуре 160°С в течение 5 ч и затем охлаждают. Добавляют ледяную
воду, затем метиленхлорид и смесь фильтруют
через целит. Органический слой отделяют, сушат (МgSO4), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток очищают колоночной
хроматографией через силикагель, Очищенную
фракцию собирают и растворитель выпаривают,
получая 7,5 г (26%) (±)-5-(3-хлорфенил)-α-(4хлорфенил)-α-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)тетразоло[1,5-а]хиназолин-7-метанамина (промежуточное соединение 5).
е) Промежуточное соединение (5) разделяют на его энантиомеры колоночной хроматографией на Chiralpak АD® (элюент: гексан/EtOH
50/50; 15-35 мкм). Первичные (А) очищенные
005065
10
фракции собирают и растворитель выпаривают,
получая 3,3 г остатка, который кристаллизуют
из СН3СN/ДИПЭ. Осадок отфильтровывают и
сушат, получая 2,55 г (-)-5-(3-хлорфенил)-α-(4хлорфенил)-α-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)тетразоло[1,5-а]хиназолин-7-метанамин (соединение 1) [α]20D=-7,16° (с=5 мг/мл МеОН); т.пл.
178-180°С; 1Н-ЯМР (ДМСО, 400 МГц) δ в
ч/млн: 8,73 (д, J=8,6 Гц, 1H), 8,38 (дд, J=8,6 Гц,
J=1,5 Гц, 1H); 7,74-7,67 (м, 3Н); 7,64 (с, 1H);
7,62-7,56 (м, 2Н); 7,40 (д, J=8,6 Гц, 2Н); 7,21 (д,
J=8,6 Гц, 2H); 5,93 (с, 1H), 3,43 (с, 3Н); 3,4 (с,
широкий, 2H); МС (электроспрей, рабочая позиция OR=50B) m/z: 501-505 (М+Н)+; 473477,391-395,83.
Элементный анализ (C25H18Cl2N8). Вычислено С 59,89; найдено 59,71. Вычислено Н 3,62;
найдено 3,52. Вычислено N 22,35; найдено
22,17.
Это соединение содержит менее 0,5%
мас./мас. (+)энантиомера согласно измерению с
помощью ВЭЖХ (Chiralpak AD® 10 мкмоль
элюента гексан/этанол 50/50).
Вторичные (В) фракции собирают и выпаривают, получая 3,3 г остатка, который кристаллизуют из СН3СN/ДИПЭ. Осадок фильтруют и сушат, получая 2,6 г (+)-5-(3-хлорфенил)α-(4-хлорфенил)-α-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)
тетразоло[1,5-а]хиназолин-7-метанамина (соединение 2) [α]20D=+5,9° (с=5 мг/мл МеОН). Это
соединение содержит 4% мас./мас. (-)энантиомера согласно измерению с помощью ВЭЖХ
(Chiralpak AD® 10 мкмоль элюента гексан/этанол 50/50).
Фармакологический пример B.
Пример C.1. Оценка ингибирования фарнезилтрансферазы белков in vitro.
Оценку ингибирования фарнезилтрансферазы белков in vitro проводили, по существу,
как описано в WO 98/40383, страницы 33-34.
Пример С2. Оценка реверсии фенотипа
ras-трансформированных клеток.
Оценку
реверсии
фенотипа
rasтрансформированных клеток проводили, по существу, как описано в WO 98/40383, страницы
34-36.
Пример С.3. Ингибитор фарнезилтрансферазы белков на модели вторичной опухоли.
Используют модель вторичной опухоли
для ингибитора фарнезилтрансферазы белков,
как описано в WO 98/40383, страница 37.
D. Пример композиции: таблетки с пленочным покрытием.
Приготовление сердцевины таблетки
Смесь 100 г соединения данного изобретения, 570 г лактозы и 200 г крахмала хорошо
смешивают и затем увлажняют раствором 5 г
додецилсульфата натрия и 10 г поливинилпирролидона в около 200 мл воды. Влажную порошкообразную смесь просеивают, сушат и
просеивают снова. Затем добавляют 100 г мик-
11
005065
рокристаллической целлюлозы и 15 г гидрогенизированного растительного масла. Все хорошо
перемешивают и штампуют с получением таблеток, получая 10000 таблеток, каждая из которых содержит 10 мг соединения формулы (1).
Покрытие оболочкой
К раствору 10 г метилцеллюлозы в 75 мл
денатурированного этанола добавляют раствор
5 г этилцеллюлозы в 150 мл дихлорметана. Затем добавляют 75 мл дихлорметана и 2,5 мл
1,2,3-пропантриола. 10 г полиэтиленгликоля
расплавляют и растворяют в 75 мл дихлорметана. Последний раствор добавляют к предшествующему и затем добавляют 2,5 г октадеканоата
магния, 5 г поливинилпирролидона и 30 мл
концентрированной окрашенной суспензии и
все гомогенизируют. Сердцевины таблеток покрывают оболочкой из таким образом полученной смеси в аппарате для нанесения покрытия.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. (-)-5-(3-Хлорфенил)-α-(4-хлорфенил)-α(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)тетразоло[1,5-а]хиназолин-7-метанамин и его фармацевтически
приемлемые кислотно-аддитивные соли.
2. (-)-5-(3-Хлорфенил)-α-(4-хлорфенил)-α(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)тетразоло[1,5-а]хиназолин-7-метанамин.
3. Фармацевтическая композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество соединения по п.1.
4. Фармацевтическая композиция по п.3, в
которой активный ингредиент представляет собой соединение по п.2.
12
5. Фармацевтическая композиция по п.3
или 4 в виде стандартной лекарственной формы.
6. Фармацевтическая композиция по п.5,
содержащая от 50 до 300 мг активного ингредиента в каждой стандартной лекарственной форме.
7. Фармацевтическая композиция по п.5
или 6 в форме таблетки.
8. Способ получения фармацевтической
композиции по любому из пп.3-7, где терапевтически эффективное количество активного
ингредиента тщательно смешивают с фармацевтически приемлемым носителем.
9. Применение соединения по п.1 или 2 в
медицине для ингибирования роста опухоли.
10. Применение соединения по п.1 или 2
для приготовления медикамента для ингибирования роста опухоли.
11. Способ ингибирования роста опухоли у
субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества соединения по п.1 или 2.
12. Способ по п.11, в котором соединение
вводят в дневной дозе от 10 до 600 мг.
13. Способ по п.12, в котором соединение
вводят в дневной дозе от 50 до 500 мг.
14. Способ получения соединения по п.1
или 2, который включает разделение (±)-5-(3хлорфенил)-α-(4-хлорфенил)-α-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)тетразоло[1,5-а]хиназолин-7-метанамина или его фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей на составляющие (+) и (-)
энантиомеры и выделение (-)энантиомера или его
фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2/6