потенцированные антитела к мозгоспецифическому белку s100

Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2003, приложение № 1
28
ÏÎÒÅÍÖÈÐÎÂÀÍÍÛÅ ÀÍÒÈÒÅËÀ Ê ÌÎÇÃÎÑÏÅÖÈÔÈ×ÅÑÊÎÌÓ
ÁÅËÊÓ S100: ÂËÈßÍÈÅ ÍÀ ÑÈÑÒÅÌÓ ÁÈÎÃÅÍÍÛÕ ÌÎÍÎÀÌÈÍÎÂ
È ÈÍÒÅÍÑÈÂÍÎÑÒÜ ÏÎË Ó ÊÐÛÑ Â ÓÑËÎÂÈßÕ ÀËÊÎÃÎËÈÇÀÖÈÈ
À.Ì.Òèòêîâà, È.Ð.Ïàí, Î.È.Ýïøòåéí*
Èíñòèòóò íåâðîëîãèè, ïñèõèàòðèè è íàðêîëîãèè ÀÌÍ Óêðàèíû, Õàðüêîâ; *Íàó÷íî-ïðîèçâîäñòâåííàÿ ôèðìà “Ìàòåðèà Ìåäèêà Õîëäèíã”, Ìîñêâà
Íà ìîäåëè ñèíäðîìà îòìåíû ïîñëå õðîíè÷åñêîãî ââåäåíèÿ àëêîãîëÿ êðûñàì âûÿâëåíî ñïåöèôè÷åñêîå âëèÿíèå ñâåðõìàëûõ äîç àíòèòåë ê áåëêó S100 íà îáìåí êàòåõîëàìèíîâ.  ñòðóêòóðàõ ãîëîâíîãî ìîçãà íîðìàëèçóåòñÿ ñîäåðæàíèå òðèïòîôàíà, òèðîçèíà,
íîðàäðåíàëèíà, â ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè ñíèæàåòñÿ ñîäåðæàíèå äîôàìèíà, àäðåíàëèíà,
íîðàäðåíàëèíà. Âëèÿíèå íà ñîäåðæàíèå ìîíîàìèíîâ â ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè óêàçûâàåò íà âîçìîæíûå ñòðåññïðîòåêòîðíûå ñâîéñòâà àíòèòåë ê S100 ïðè àëêîãîëüíîé àáñòèíåíöèè.
Êëþ÷åâûå ñëîâà: ñâåðõìàëûå äîçû, àíòèòåëà ê áåëêó S100, ýòàíîë, áèîãåííûå ìîíîàìèíû,
ïåðåêèñíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ
Èññëåäîâàëè îñîáåííîñòè âëèÿíèÿ àíòèòåë ê
ìîçãîñïåöèôè÷åñêîìó áåëêó S100 â ñâåðõìàëûõ
äîçàõ (ÏÀÒ-S100), ïîëó÷åííûõ ñ ïîìîùüþ òåõíîëîãèè ïîòåíöèðîâàíèÿ, íà öåíòðàëüíûå ìîíîàìèíåðãè÷åñêèå è ïåðèôåðè÷åñêèå ãîðìîíàëüíî-ìåòàáîëè÷åñêèå ýôôåêòû õðîíè÷åñêîãî ïîòðåáëåíèÿ ýòàíîëà êðûñàìè.
ÌÅÒÎÄÈÊÀ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
Íåëèíåéíûå êðûñû-ñàìöû ìàññîé 200-250 ã ïîëó÷àëè 25% ðàñòâîð ýòàíîëà per os â äîçå 1.52.0 ã/êã â òå÷åíèå 15 äíåé. Ïîñëå îòìåíû ýòàíîëà ÷àñòü æèâîòíûõ ïîëó÷àëà ïî 0.1 ìë ÏÀÒ-S100
(â ðàçâåäåíèè Ñ1000, ýêâèâàëåíòíî êîíöåíòðàöèè 10—2000 ìàññîâûõ äîëåé) ïî 2 ðàçà â ñóòêè â
òå÷åíèå 7 äíåé. Íà ñëåäóþùèé äåíü ïîñëå ïîñëåäíåãî âîçäåéñòâèÿ æèâîòíûõ äåêàïèòèðîâàëè.  ãèïîòàëàìóñå, ãèïïîêàìïå, ìèíäàëåâèäíîì êîìïëåêñå, ôðîíòàëüíîé îáëàñòè íåîêîðòåêñà è öåëüíîé êðîâè èçó÷àëè ñîäåðæàíèå áèîãåííûõ ìîíîàìèíîâ (äîôàìèíà, íîðàäðåíàëèíà, àäðåíàëèíà, ñåðîòîíèíà) è èõ àìèíîêèñëîòïðåäøåñòâåííèêîâ (òèðîçèíà, òðèïòîôàíà), à
òàêæå ãèñòàìèíà â êðîâè [6]. Â ïëàçìå êðîâè
îïðåäåëÿëè êîíöåíòðàöèþ ÌÄÀ [3], äèåíîâûõ
êîíúþãàòîâ [1] è àêòèâíîñòü àöåòèëõîëèíýñòåðàçû (ÀÕÝ) [5].
Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû îáðàáàòûâàëè ñòàòèñòè÷åñêè â ïðîãðàììå “Statgraphics”.
ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
×åðåç 7 ñóò ïîñëå îòìåíû ýòàíîëà ñóùåñòâåííûõ
èçìåíåíèé èçó÷àåìûõ ïîêàçàòåëåé â îáëàñòè
ôðîíòàëüíîé êîðû è ìèíäàëåâèäíîãî êîìïëåêñà íå íàáëþäàëîñü.  ãèïîòàëàìóñå è ãèïïîêàìïå íå îòìå÷åíî èçìåíåíèé â ñîäåðæàíèè òðèïòîôàíà è ñåðîòîíèíà, îäíàêî âûÿâëåíû ðàçíîíàïðàâëåííûå èçìåíåíèÿ óðîâíÿ êàòåõîëàìèíîâ:
â ãèïîòàëàìóñå — ñíèæåíèå ñîäåðæàíèÿ íîðàäðåíàëèíà è àäðåíàëèíà íà 45 è 29% ñîîòâåòñòâåííî, à â ãèïïîêàìïå — ïîâûøåíèå ñîäåðæàíèÿ äîôàìèíà, íîðàäðåíàëèíà è àäðåíàëèíà â
2.5-4 ðàçà. Ýòè óìåíüøåíèÿ ñâèäåòåëüñòâóþò, ïîâèäèìîìó, î ñîñòîÿíèè ïîâûøåííîãî ìîòèâàöèîííîãî âîçáóæäåíèÿ æèâîòíûõ [4].
Íà ôîíå ïðèìåíåíèÿ ÏÀÒ-S100 íàáëþäàëàñü êîððåêöèÿ îòìå÷åííûõ èçìåíåíèé: ïîâûñèëîñü ñîäåðæàíèå íîðàäðåíàëèíà â ãèïîòàëàìóñå, ñíèçèëñÿ óðîâåíü êàòåõîëàìèíîâ â ãèïïîêàìïå. Ïðè ýòîì íàáëþäàëîñü óìåíüøåíèå ñîäåðæàíèÿ òðèïòîôàíà â ãèïïîêàìïå è ìèíäàëåâèäíîì êîìïëåêñå, à òàêæå ñåðîòîíèíà â ïîñëåäíåì îòíîñèòåëüíî èõ óðîâíÿ â ãðóïïå àëêîãîëèçèðîâàííûõ æèâîòíûõ, ÷òî ìîæåò ïðèâîäèòü
29
Òàáëèöà 1. Ñîäåðæàíèå áèîãåííûõ ìîíîàìèíîâ (íìîëü/ë) è àìèíîêèñëîò-ïðåäøåñòâåííèêîâ (ìêìîëü/ë)
—
â ñòðóêòóðàõ ãîëîâíîãî ìîçãà êðûñ (Õ±m, n=7-11)
Ñòðóêòóðà ìîçãà, ïîêàçàòåëü
Фронтальная кора
Гипоталамус
Миндалевидный комплекс
Гиппокамп
Èíòàêòíûå
Ýòàíîë
Ýòàíîë+
ÏÀÒ-S100
тирозин
7.1±0.6
5.80±0.36
5.62±0.51
дофамин
2.40±0.17
2.67±0.50
2.79±0.23
норадреналин
1.90±0.18
1.50±0.31
1.62±0.31
адреналин
0.54±0.07
0.35±0.06*
0.34±0.03*
триптофан
13.0±1.4
5.68±1.22*
10.07±1.31
серотонин
3.00±0.34
3.32±0.23
2.40±0.42
тирозин
19.5±2.3
29.10±3.55**
20.31±1.36*
дофамин
4.70±0.58
4.51±0.54
4.20±0.38+
норадреналин
3.90±0.41
2.22±0.39*
4.81±0.89**
адреналин
1.06±0.12
0.75±0.07*
0.59±0.10
триптофан
19.8±1.9
20.48±4.23
20.22±3.36
серотонин
8.10±0.94
9.08±1.27
8.81±0.85
тирозин
10.2±0.7
13.58±1.34
9.07±0.60
дофамин
3.90±0.28
4.39±0.40
4.03±0.31
норадреналин
1.40±0.16
1.52±0.24
1.74±0.18
адреналин
0.49±0.05
0.55±0.07
0.42±0.07
триптофан
18.3±2.1
25.05±4.11
15.81±1.79
серотонин
5.00±0.54
5.26±0.32
6.61±0.86
9.1±1.6
12.41±1.86
15.15±1.18*
тирозин
дофамин
1.80±0.19
4.95±0.77*
2.61±0.22
норадреналин
1.90±0.23
8.48±1.87*
2.58±0.45+
адреналин
0.35±0.05
1.17±0.22*
0.53±0.07+
триптофан
5.70±0.31
5.52±0.66
4.47±0.44* +
серотонин
3.20±0.38
3.28±0.53
4.49±0.58
Примечание. Здесь и в табл. 2: *р<0.05, **р<0.1 по сравнению с интактными; +р<0.05,
этанола.
ê íåêîòîðîìó îñëàáëåíèþ òîðìîçíûõ ýôôåêòîâ
ñåðîòîíèíà â ýòîé çîíå ìîçãà [2].
++
р<0.1 по сравнению с группой
 ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè àëêîãîëèçèðîâàííûõ êðûñ äîñòîâåðíûõ èçìåíåíèé ïîêàçàòåëåé
Òàáëèöà 2. Ñîäåðæàíèå áèîãåííûõ ìîíîàìèíîâ (íìîëü/ë) è àìèíîêèñëîò-ïðåäøåñòâåííèêîâ (ìêìîëü/ë)
â öåëüíîé êðîâè, àêòèâíîñòü ÀÕÝ (íìîëü/ìã áåëêà â 1 ìèí) è êîíöåíòðàöèÿ ïðîäóêòîâ ÏÎË (ìêìîëü/ë)
—
â ïëàçìå êðîâè êðûñ (Õ±m, n=7-11)
Кровь
Плазма крови
Ìàòåðèàë; ïîêàçàòåëü
Èíòàêòíûå
тирозин
10.7±1.0
Ýòàíîë
Ýòàíîë+
ÏÀÒ-S100
10.30±1.45
11.44±0.83
дофамин
80.6±6.5
64.43±7.20
51.14±2.65*
норадреналин
69.3±5.7
53.43±5.86
41.14±3.51*
адреналин
37.1±3.3
45.29±5.41
20.14±1.84* ++
триптофан
16.2±0.9
21.21±2.74
23.87±2.29
серотонин
807±50
885.14±87.18
1104.14±63.48
гистамин
1685±91
1570.71±82.42*
1606.57±69.79
АХЭ
2.50±0.22
2.61±0.16
2.30±0.16
МДА
11.8±0.6
16.38±3.13
15.09±2.10
диеновые конъюгаты
50.9±9.9
97.02±11.03+
81.91±6.78
30
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2003, приложение № 1
íåéðîìåäèàòîðíîãî îáìåíà íå âûÿâëåíî, îäíàêî íàáëþäàëîñü ïîâûøåíèå êîíöåíòðàöèè
ïðîäóêòîâ ÏÎË, îñîáåííî äèåíîâûõ êîíúþãàòîâ (äî 191%), ÷òî ìîæåò óêàçûâàòü íà îñëàáëåíèå àêòèâíîñòè ýíäîãåííûõ àíòèîêñèäàíòíûõ ñèñòåì. Ïðèìåíåíèå ÏÀÒ-S100 íåñêîëüêî ñíèæàëî ýòîò ïîêàçàòåëü (äî 161%), îäíàêî
ýòà òåíäåíöèÿ íå äîñòèãàëà óðîâíÿ ñòàòèñòè÷åñêîé çíà÷èìîñòè. Âìåñòå ñ òåì âîçäåéñòâèå ÏÀÒS100 ïðèâîäèëî ê ñíèæåíèþ óðîâíÿ êàòåõîëàìèíîâ è ïîâûøåíèþ óðîâíÿ òðèïòîôàíà â êðîâè êðûñ, ÷òî ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ïðèçíàêîâ íàëè÷èÿ ó èññëåäóåìîãî ïðåïàðàòà àíêñèîëèòè÷åñêèõ ñâîéñòâ [7].
Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ïîäòâåðæäàþò ñïåöèôè÷åñêîå âëèÿíèå ÏÀÒ-S100 íà îáìåí êàòåõîëàìèíîâ: åãî êîððèãèðóþùèé ýôôåêò â ñòðóêòóðàõ ãîëîâíîãî ìîçãà àëêîãîëèçèðîâàííûõ êðûñ
è ïîäàâëÿþùèé — íà ïåðèôåðèè îðãàíèçìà, ÷òî
ìîæåò îêàçàòüñÿ ïîëåçíûì ïðè êóïèðîâàíèè àáñòèíåíòíîãî ñèíäðîìà.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Êîñóõèí À.Á., Àõìåòîâà Á.Ñ. // Ëàá. äåëî. 1987. ¹ 5.
Ñ. 335-337.
2. Òèõîíîâà Ò.Í. // Áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå âåùåñòâà
è ðåãóëÿöèÿ ôóíêöèé ìîçãà. Ñá. íàó÷. òðóäîâ.
Õàðüêîâ, 1992. Ñ. 65-70.
3. Ôåäîðîâà Ò.Í., Êîðøóíîâà Ò.Ñ., Ëàðñêèé Ý.Ã. // Òàì
æå. 1983. ¹ 3. Ñ. 25-27.
4. Berridge K.C., Robinson T.E. // Brain Res. Rev. 1998.
Vol. 28, N 3. P. 309-369.
5. Ellman G.L., Courtny K.D., Andres V.J. // Biochem.
Pharmacol. 1971. N 7. P. 88-95.
6. Endo J., Ogura J. // Jpn. J. Pharmacol. 1975. Vol. 25.
P. 610-612.
7. Swann A.C., Johnson B.A., Cloninger C.R., Chen Y.R.
// Psychopharmacology (Berl.). 1999. Vol. 143, N 4.
Ð. 380-384.