Отчет НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского (г.Москва)

ɂɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɟ ɜɥɢɹɧɢɹɩɪɟɩɚɪɚɬɚɫɬɟɥɥɚɧɢɧɧɚɜɢɪɭɫɝɟɪɩɟɫɚɩɪɨɜɨɞɢɥɨɫɶɜ
ɥɚɛɨɪɚɬɨɪɢɢɢɦɦɭɧɨɥɨɝɢɢɇɂɂɜɢɪɭɫɨɥɨɝɢɢɢɦ. Ⱦ..ɂ. ɂɜɚɧɨɜɫɤɨɝɨɊȺɆɇ.
ɐɟɥɢɢɡɚɞɚɱɢ.
-
ɂɡɭɱɟɧɢɟɩɪɨɬɢɜɨɜɢɪɭɫɧɨɣɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢɩɪɟɩɚɪɚɬɚɜɱɭɜɫɬɜɢɬɟɥɶɧɵɯɤɥɟɬɨɱɧɵɯɤɭɥɶɬɭɪɚɯ,
ɢɧɮɢɰɪɨɜɚɧɧɵɯɜɢɪɭɫɨɦɝɟɪɩɟɫɚ.
Ɇɚɬɟɪɢɚɥɵɢɦɟɬɨɞɵ.
Ʉɥɟɬɤɢ. ȼ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɢ ɛɵɥɚ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɧɵ ɩɟɪɟɜɢɜɚɟɦɚɹ ɤɭɥɶɬɭɪɚ ɤɥɟɬɨɤ ɩɨɱɤɢ
ɨɛɟɡɶɹɧ (VERO), ɩɨɥɭɱɟɧɧɚɹɢɡɤɨɥɥɟɤɰɢɢɤɭɥɶɬɭɪɬɤɚɧɟɣɂɧɫɬɢɬɭɬɚɜɢɪɭɫɨɥɨɝɢɢɢɦ.
ɂȾ. ɂɜɚɧɨɜɫɤɨɝɨɊȺɆɇ, ɢɞɢɩɥɨɢɞɧɚɹɤɭɥɶɬɭɪɚɮɢɛɪɨɛɥɚɫɬɨɜ ɥɟɝɤɨɝɨɷɦɛɪɢɨɧɚ
ɱɟɥɨɜɟɤɚ (Ɇ-22), ɩɨɥɭɱɟɧɧɚɹɢɡɂɧɫɬɢɬɭɬɚɩɨɥɢɨɦɢɟɥɢɬɚɢɜɢɪɭɫɧɵɯɷɧɰɟɮɚɥɢɬɨɜɢɦ.
Ɇɉ. ɑɭɦɚɤɨɜɚ ɊȺɆɇ.
ȼɢɪɭɫ. ȼɢɪɭɫɝɟɪɩɟɫɚɩɪɨɫɬɨɝɨ (Herpes simplex virus), ɬɢɩ 1, ɲɬɚɦɦɅ2, ɪɚɡɦɧɨɠɟɧɧɵɣɜ
ɤɥɟɬɤɚɯ Vero.
ɂɡɭɱɚɟɦɵɣɩɪɟɩɚɪɚɬ:
ɚɤɬɢɜɧɚɹɫɭɛɫɬɚɧɰɢɹ - 1,3-ɞɢɷɬɢɥɛɟɧɡɢɦɢɞɚɡɨɥɢɹɬɪɢɣɨɞɢɞ (Per. ʋɅɋɊ-000161/09)
ɩɪɨɢɡɜɨɞɫɬɜɚɈɈɈ «Ɏɚɪɦɩɪɟɩɚɪɚɬ» ɜɜɢɞɟɜɨɞɨɪɚɫɬɜɨɪɢɦɨɝɨɤɨɦɩɥɟɤɫɚɫ
ɩɨɥɢɜɢɧɢɥɩɢɪɪɨɥɢɞɨɧɨɦ (20% 1,3-ɞɢɷɬɢɥɛɟɧɡɢɦɢɞɚɡɨɥɢɹɬɪɢɣɨɞɢɞɚ + 80% ɉȼɉ) ɫɬɟɥɥɚɧɢɧ.
ɂɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɟɩɪɨɬɢɜɨɝɟɪɩɟɬɢɱɟɫɤɨɣɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢɋɬɟɥɥɚɧɢɧɚɜɨɩɵɬɚɯ in vitro.
ɋɯɟɦɚɩɪɨɜɟɞɟɧɢɹɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɹ
Ⱦɥɹɜɧɟɫɟɧɢɹɜɤɭɥɶɬɭɪɭɤɥɟɬɨɤɩɪɟɩɚɪɚɬɪɚɡɜɨɞɹɬɜɤɭɥɶɬɭɪɚɥɶɧɨɣɫɪɟɞɟɞɥɹ
ɜɵɪɚɳɢɜɚɧɢɹɤɥɟɬɨɤɛɟɡɞɨɛɚɜɥɟɧɢɹɫɵɜɨɪɨɬɤɢ. Ɋɚɡɜɟɞɟɧɢɟɩɪɟɩɚɪɚɬɚɨɫɭɳɟɫɬɜɥɹɸɬ
ɇȿɉɈɋɊȿȾɋɌȼȿɇɇɈɩɟɪɟɞɜɧɟɫɟɧɢɟɦɜɤɭɥɶɬɭɪɭ. ɉɪɟɩɚɪɚɬɜɧɨɫɹɬɜɤɭɥɶɬɭɪɭɩɨɫɥɟ
ɚɞɫɨɪɛɰɢɢɜɢɪɭɫɚɤɥɟɬɤɚɦɢɤɭɥɶɬɭɪɵɞɨɤɨɧɟɱɧɵɯɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɣ 5,0; 0,5; 0,05 ɢ 0,005 ɦɝ
ɤɨɦɩɥɟɤɫɚɦɥ (ɱɬɨɫɨɨɬɜɟɬɫɬɜɭɟɬɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢɚɤɬɢɜɧɨɝɨɜɟɳɟɫɬɜɚ 1,0; 0,1; 0,01 ɢ 0,001
ɦɝɦɥ).
Ⱦɥɢɬɟɥɶɧɨɫɬɶɢɧɤɭɛɢɪɨɜɚɧɢɹɡɚɪɚɠɟɧɧɵɯɤɥɟɬɨɤɫɩɪɟɩɚɪɚɬɨɦ: 30 ɦɢɧ, 2 ɱɚɫɚ.
Ʉɪɚɬɧɨɫɬɶɜɧɟɫɟɧɢɹɩɪɟɩɚɪɚɬɚ: 1 -ɤɪɚɬɧɨ, 5-ɤɪɚɬɧɨ.
ȼɵɱɢɫɥɹɟɬɫɹɞɨɡɚɩɪɟɩɚɪɚɬɚ, ɩɪɟɞɨɬɜɪɚɳɚɸɳɚɹɝɢɛɟɥɶ 50% ɤɥɟɬɨɤɜɡɚɪɚɠɟɧɧɨɣ
ɩɨɩɭɥɹɰɢɢ (IC50).
ȼɩɟɪɜɨɣɫɟɪɢɢɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɹ ɩɪɟɩɚɪɚɬɜɧɨɫɢɥɢɜɤɭɥɶɬɭɪɚɥɶɧɭɸɩɢɬɚɬɟɥɶɧɭɸɫɪɟɞɭɧɚ
30 ɦɢɧɭɬɩɨɫɥɟɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɢɢɤɥɟɬɨɱɧɨɝɨɦɨɧɨɫɥɨɹ ɜɢɪɭɫɨɦɝɟɪɩɟɫɚɜɪɚɡɥɢɱɧɵɯ
ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹɯɫɤɪɚɬɧɨɫɬɶɸɜɧɟɫɟɧɢɹ 1-5. ȼɨɜɬɨɪɨɣɫɟɪɢɢɷɤɫɩɟɪɢɦɟɧɬɨɜɜɤɭɥɶɬɭɪɚɥɶɧɭɸ
ɩɢɬɚɬɟɥɶɧɭɸɫɪɟɞɭɧɚɫɬɚɞɢɢɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɢɹɦɨɧɨɫɥɨɹɜɧɨɫɢɥɢɩɪɟɩɚɪɚɬɵɜ
ɫɨɨɬɜɟɬɫɬɜɭɸɳɟɣɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ ɫɜɪɟɦɟɧɟɦɷɤɫɩɨɡɢɰɢɢ 2 ɱɚɫɚ. ɑɟɪɟɡ 120 ɦɢɧɭɬ, ɧɟɭɞɚɥɹɹ
ɩɪɟɩɚɪɚɬɵɢɡɫɪɟɞɵ, ɜɧɨɜɶɜɧɨɫɢɥɢɩɪɟɩɚɪɚɬ.
ȼɢɪɭɫ.
Ʉɥɟɬɤɢɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɥɢɜɢɪɭɫɨɦɜɞɨɡɟ 100 ɌɐȾɨɢɥɢ 10 Ɍɐɐ5ɨ- ɂɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɧɵɟɤɭɥɶɬɭɪɵ
ɤɥɟɬɨɤɧɚɛɥɸɞɚɥɢɜɬɟɱɟɧɢɟ 4ɯɫɭɬɨɤɩɪɢɢɧɤɭɛɢɪɨɜɚɧɢɢɩɪɢ 37°ɋɜɚɬɦɨɫɮɟɪɟɫ 5% CO2ɢ 98%
ɜɥɚɠɧɨɫɬɢ. Ɉɩɪɨɬɢɜɨɜɢɪɭɫɧɨɣɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢɫɭɞɢɥɢɩɨɩɪɟɞɨɬɜɪɚɳɟɧɢɸɪɚɡɜɢɬɢɹɜɤɥɟɬɤɚɯ
ɰɢɬɨɞɟɫɬɪɭɤɬɢɜɧɨɝɨɷɮɮɟɤɬɚ, ɜɵɡɜɚɧɧɨɝɨɪɚɡɦɧɨɠɟɧɢɟɦɜɢɪɭɫɚɝɟɪɩɟɫɚɢɜɵɪɚɠɚɥɢɜ %
ɩɨɝɢɛɲɢɯɨɬɰɢɬɨɞɟɫɬɪɭɤɬɢɜɧɨɝɨɞɟɣɫɬɜɢɹɜɢɪɭɫɚɤɥɟɬɨɤ.
Ɋɟɡɭɥɶɬɚɬɵɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɹ.
ȼɥɢɹɧɢɟɪɚɡɥɢɱɧɵɯ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɣɢɫɫɥɟɞɭɟɦɨɝɨ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɧɚ ɪɟɩɪɨɞɭɤɰɢɸ
ɜɢɪɭɫɚɝɟɪɩɟɫɚɩɪɨɫɬɨɝɨ.
ɉɪɟɩɚɪɚɬɜɜɨɞɢɥɢɜɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹɯɨɬ 0,005 ɞɨ 5,0 ɦɝɦɥ ɫɨɝɥɚɫɧɨɫɯɟɦɟɱɟɪɟɡ 30 ɦɢɧɢ
120 ɦɢɧɭɬɩɨɫɥɟɜɧɟɫɟɧɢɹɜɢɪɭɫɚɜɞɨɡɟ 100 ɌɐȾɨ. Ⱥɤɬɢɜɧɨɫɬɶɩɪɟɩɚɪɚɬɚɢɡɭɱɚɥɢ
ɧɚɦɨɞɟɥɢɞɜɭɯɱɭɜɫɬɜɢɬɟɥɶɧɵɯɤɜɢɪɭɫɭɝɟɪɩɟɫɚɬɤɚɧɟɜɵɯɤɭɥɶɬɭɪɚɯ : ɤɥɟɬɤɚɯ VERO
ɢɞɢɩɥɨɢɞɧɵɯɤɥɟɬɤɚɯ Ɇ-22
ɉɪɟɩɚɪɚɬ ɜ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹɯ ɨɬ 0,005 ɞɨ 0,5 ɦɝɦɥ ɧɟ ɡɚɳɢɳɚɥ ɤɥɟɬɤɢ VERO ɨɬ
ɰɢɬɨɞɟɫɬɪɭɤɰɬɢɜɧɨɝɨ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɜɢɪɭɫɚ ɝɟɪɩɟɫɚ ɢ ɱɟɪɟɡ 48 ɱɚɫɨɜ ɢɧɤɭɛɢɪɨɜɚɧɢɹ ɩɪɢ
37 ɋɧɚɛɥɸɞɚɥɚɫɶ 100% ɝɢɛɟɥɶɤɥɟɬɨɤ, ɬɚɤɠɟɤɚɤɢɜɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɧɨɦɤɨɧɬɪɨɥɟ.
ɉɪɢ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ 5,0 ɦɝɦɥ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ
ɨɬɦɟɱɚɥɚɫɶ
ɡɚɳɢɬɚ ɤɥɟɬɨɤ ɧɚ 40 %.
ɀɢɡɧɟɫɩɨɫɨɛɧɨɫɬɶ ɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɧɵɯ ɤɥɟɬɨɤ ɨɫɬɚɜɚɥɚɫɶ ɧɚ ɭɪɨɜɧɟ ɧɟɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɧɨɝɨ
ɤɨɧɬɪɨɥɹ. (Ɍɚɛ. 1).
ȼ ɞɢɩɥɨɢɞɧɨɣ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ ɥɟɝɤɨɝɨ ɷɦɛɪɢɨɧɚ ɱɟɥɨɜɟɤɚ (ɧɟɫɤɨɥɶɤɨ ɦɟɧɟɟ
ɱɭɜɫɬɜɢɬɟɥɶɧɨɣɤɜɢɪɭɫɭɝɟɪɩɟɫɚ) ɡɚɳɢɬɧɵɣɷɮɮɟɤɬɨɛɨɢɯɩɪɟɩɚɪɚɬɨɜɬɚɤɠɟɧɚɛɥɸɞɚɥɢ
ɩɪɢɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ 5,0 ɦɝɦɥ, ɨɞɧɚɤɨɧɟɩɨɥɧɚɹɡɚɳɢɬɚɤɥɟɬɨɤɨɬɞɟɣɫɬɜɢɹɜɢɪɭɫɚɝɟɪɩɟɫɚ
ɧɚɛɥɸɞɚɥɚɫɶ, ɬɚɤɠɟɤɚɤɢɜɤɥɟɬɤɚɯ VERO, ɩɪɢɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢɜ 0,5 ɦɝɦɥ.
Ɂɚɳɢɬɧɵɣɷɮɮɟɤɬɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɢɡɭɱɚɥɫɹɩɪɢɜɜɟɞɟɧɢɢɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɩɨɫɥɟ
ɚɞɫɨɪɛɰɢɢɜɢɪɭɫɚ ( ɱɟɪɟɡ 30 ɦɢɧɭɬɩɨɫɥɟɜɧɟɫɟɧɢɹɜɢɪɭɫɚɜɤɭɥɶɬɭɪɚɥɶɧɭɸɫɪɟɞɭ).
ɉɪɢɦɚɥɨɣɦɧɨɠɟɫɬɜɟɧɧɨɫɬɢɢɧɮɢɰɢɪɭɸɳɟɣɞɨɡɵɜɢɪɭɫɚ ( 10 ɌɐɂȾɡɨ) ɜɤɭɥɶɬɭɪɟ
ɤɥɟɬɨɤ VERO ɩɪɟɩɚɪɚɬ ɡɚɳɢɳɚɥɤɥɟɬɤɢɨɬɰɢɬɨɞɟɫɬɪɭɤɬɢɜɧɨɝɨ
ɞɟɣɫɬɜɢɹɜɢɪɭɫɚɝɟɪɩɟɫɚɩɪɢ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɧɧɵɯɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹɯ. 5 ɦɝɦɥ
ɉɪɢɫɬɚɧɞɚɪɬɧɨɣɢɧɮɢɰɢɪɭɸɳɟɣɞɨɡɟɜɢɪɭɫɚɜ 100 ɌɐȾɡɨ 50% ɡɚɳɢɬɚɤɥɟɬɨɤɛɵɥɚ
ɧɚɛɥɸɞɚɥɚɫɶ ɥɢɲɶɜɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ 5 ɦɝɦɥɩɪɢɨɞɧɨɤɪɚɬɧɨɦɢ ɩɹɬɢɤɪɚɬɧɨɦɜɧɟɫɟɧɢɢ
ɩɪɟɩɚɪɚɬɚɜɫɪɟɞɭɢɜɪɟɦɟɧɢɷɤɫɩɨɡɢɰɢɢ 30-120 ɦɢɧɭɬ. Ʉɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹɩɪɟɩɚɪɚɬɚ 0,5%
ɨɛɟɫɩɟɱɢɜɚɟɬɡɚɳɢɬɭɥɢɲɶ 25,0-35,0 % ɤɥɟɬɨɤ
ɩɪɢɩɹɬɢɤɪɚɬɧɨɣɨɛɪɚɛɨɬɤɟɤɥɟɬɨɤ
ɩɪɟɩɚɪɚɬɨɦ. ɉɨɥɧɚɹɡɚɳɢɬɚɤɥɟɬɨɤɨɬɞɟɣɫɬɜɢɹɜɢɪɭɫɚɧɟɧɚɛɥɸɞɚɥɚɫɶ.
Ɍɚɤɢɦ ɨɛɪɚɡɨɦ,
ɢɫɫɥɟɞɭɟɦɵɣ ɩɪɟɩɚɪɚɬ ɧɚ 50,0%
ɡɚɳɢɳɚɥ
ɤɥɟɬɤɢ ɨɛɟɢɯ
ɤɭɥɶɬɭɪ ɨɬ ɰɢɬɨɞɟɫɬɪɭɤɬɢɜɧɨɝɨ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɜɢɪɭɫɚ ɝɟɪɩɟɫɚ ɩɪɨɫɬɨɝɨ ɩɪɢ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ
5,0 ɦɝɦɥ.
Ɂɚɤɥɸɱɟɧɢɟ
ɂɫɫɥɟɞɨɜɚɧɧɵɣɩɪɟɩɚɪɚɬɋɬɟɥɥɚɧɢɧ ɨɛɥɚɞɚɟɬɜɵɪɚɠɟɧɧɵɦɢɩɪɨɬɢɜɨɝɟɪɩɟɬɢɱɟɫɤɢɦɢ
ɫɜɨɣɫɬɜɚɦɢɩɪɢɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɧɢɢɞɜɭɯɤɥɟɬɨɱɧɵɯɤɭɥɶɬɭɪ ( ɤɥɟɬɤɢ VERO ɢɞɢɩɥɨɢɞɧɵɟ
ɤɥɟɬɤɢɥɟɝɤɨɝɨɷɦɛɪɢɨɧɚɱɟɥɨɜɟɤɚ - Ɇ-22) ɢɞɜɭɯɫɯɟɦɩɪɢɦɟɧɟɧɢɹ – 30 ɢ 120 ɦɢɧɭɬ
ɗɤɫɩɨɡɢɰɢɢ ɩɨɫɥɟɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɢɹ ɜɢɪɭɫɨɦ.
Ɍɚɛɥ. 1 ɐɢɬɨɬɨɤɫɢɱɟɫɤɨɟɞɟɣɫɬɜɢɟɩɪɟɩɚɪɚɬɚɧɚɤɥɟɬɤɢ VERO .
1
Ʉɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢ ȼɪɟɦɹ
Ʉɪɚɬɧɨɫɬɶ
ɐɢɬɨɬɨɤɫɢɱɟɫɤɨɟ
ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ
ɢɧɤɭɛɚɰɢɢ
ɜɧɟɫɟɧɢɹ
ɞɟɣɫɬɜɢɟ
ɦɝ/ ɦɥ
ɜɦɢɧ
ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ
ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ
5,0
30
1
10
30
5
15
120
1
10
120
5
15
30
1
0
30
5
0
120
1
0
120
5
0
30
1
0
30
5
0
120
1
0
120
5
0
30
1
0
30
5
0
120
1
0
120
5
0
5,0
0,5
0,5
0,05
0,05
0,005
0,005
Ɍɚɛɥ.2 ɉɪɨɬɢɜɨɜɢɪɭɫɧɚɹɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶɩɪɟɩɚɪɚɬɚɫɬɟɥɥɚɧɢɧ.
Ʉɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹ ȼɪɟɦɹ
Ʉɪɚɬɧɨɫɬɶ
ɉɪɨɰɟɧɬ
ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ
ɢɧɤɭɛɚɰɢɢ
ɜɧɟɫɟɧɢɹ
ɩɨɞɚɜɥɟɧɢɹ
ɦɝ/ ɦɥ
ɜɦɢɧ
ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ
ɜɢɪɭɫɧɨɣ
ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ
5,0
5,0
0,5
0,5
0,05
0,05
0,005
0,005
30
1
40
30
5
50
120
1
45
120
5
55
30
1
15
30
5
25
120
1
30
120
5
35
30
1
0
30
5
0
120
1
0
120
5
0
30
1
0
30
5
0
120
1
0
120
5
0