1 Cистема для выявления, подсчета и ... урогенитальных патогенных микроорганизмов.

1
A.F.GENITAL SYSTEM
Cистема для выявления, подсчета и определения чувствительности к антибиотикам
урогенитальных патогенных микроорганизмов.
Каталожный № 74156.
Описание
A.F.GENITAL SYSTEM – 24-луночная система, содержащая сухие биохимические
субстраты и антибиотики для детекции, предварительной идентификации и определения
чувствительности к антибиотикам микроорганизмов из урогенитальных образцов. Система
также обеспечивает полуколичественную оценку присутствия урогенитальных микоплазм
(Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum). Система инокулируется суспензией
клинического образца и инкубируется при t=36 +/- 1о С 18-24 часа. Тесты, используемые для
выявления, подсчета и идентификации микроорганизмов и определения чувствительности к
антибиотикам урогенитальных микоплазм из образца интерпретируются оценкой изменения
цвета в различных лунках и выполнением микроскопического исследования.
Состав набора
Набор содержит:
A.F.GENITAL SYSTEM - 20 штук
Ампулы с физиологическим раствором (7,0
мл/ампула) - 20 штук
Инструкцию
1 форму тест-результатов
Материалы необходимые, но не включенные в набор:
Реагент A.F.Genital System (каталожный № Mycoplasma Transport (каталожный № 20158)
80258)
Тампоны для взятия образца
Предметные и покровные стекла
Микроскоп
Латексный набор Strepto B (кат. № 96153)
Конфигурация
Конфигурация системы показана в табл.№ 1
Таблица № 1
Лунка
1 – GR +
2 – GR ++
3 – GR +++
4 – ADC
5 – UR
Лунка
6 – TR/YE
Лунка
7 – TE
8 – PEF
9 – OFX
10 – DO
11 – E
12 – CLA
Подсчет и идентификация микоплазм, уреаплазм
Рост микоплазм
102 < титр < 104 CFU/мл
Рост микоплазм
104 < титр < 105 CFU/мл
Рост микоплазм
титр > 105 СFU/мл
Аргинин-тест
Мочевина-тест
Выявление Trichomonas vaginalis и Candida spp.
Trichomonas vaginalis и Candida spp.
Определение чувствительности к антибиотикам
микоплазм/уреаплазм (*)
Тетрациклин – 8 мкг/мл
Перфлоксацин – 16 мкг/мл
Офлоксацин – 4 мкг/мл
Доксициклин – 8 мкг/мл
Эритромицин – 16 мкг/мл
Кларитромицин - 16 мкг/мл
2
Миноциклин - 8 мкг/мл
Йозамицин - 8 мкг/мл
Клиндамицин – 8 мкг/мл
Выявление и идентификация других
микроорганизмов
Escherichia coli
16 – ESC
Proteus spp./ Providencia spp.
17 – PRO
Pseudomonas spp.
18 – PSE
Gardnerella vaginalis
19 – GAR
Staphylococcus aureus
20 – STF
Enterococcus faecalis
21 – STR
Neisseria gonorrhoeae
22 – NES
Streptococcus agalactiae (Group B)
23 – STG
Candida spp.
24 - CAN
(*): Концентрация каждого антибиотика соответствует требованиям NCCLS – январь 2004,
том 24 № 1
13 – MN
14 – JOS
15 – CD
Лунка
Принцип метода
A.F.GENITAL SYSTEM позволяет выявлять, полуколичественно подсчитывать,
предварительно идентифицировать и определять чувствительность к антибиотикам
Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum, выявлять и идентифицировать
микроорганизмы наиболее часто выделяемые из вагинальных и уретральных мазков и
эякулята, такие как: Trichomonas vaginalis, Escherichia coli, Proteus spp./ Providencia spp.,
Pseudomonas spp., Gardnerella vaginalis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Neisseria
gonorrhoeae, Streptococcus agalactiae (Group B) и Candida spp.
•
•
•
•
•
•
•
•
Полуколичественный подсчет урогенитальных микоплазм (Mycoplasma hominis и
Ureaplasma urealyticum) обеспечивается изменением цвета от желтого до красного в
лунках 1 – GR+, 2 – GR++, 3 – GR+++
Присутствие Mycoplasma hominis выявляется изменением цвета аргининового теста
в лунке 4 – ADC от желтого до красного.
Присутствие Ureaplasma urealyticum выявляется изменением цвета уреазного теста в
лунке 5 – UR от желтого до красного.
Присутствие Trichomonas vaginalis и Candida spp. определяется микроскопическим
исследованием (40 х) капли культуральной жидкости, взятой из лунки 6-TR/YE,
оценивающим
присутствие
подвижных
реснитчатых
трофозоидов
для
идентификации Trichomonas vaginalis и/или присутствие хламидоспор или гифов для
идентификации Candida spp.
Определение чувствительности к антибиотикам урогенитальных микоплазм
оценивается наблюдаемым изменением цвета в лунках 7-TE, 8- PEF, 9- OFX,
10- DO, 11- E, 12- CLA, 13- MN, 14- JOS, 15- CD, как указано в таблице 3.
Присутствие Escherichia coli определяется изменением цвета от серо-красного до
голубого в лунке 16- ESC*
Присутствие Proteus spp./Providencia spp. определяется изменением цвета от желтого
до коричнево-черного в лунке 17-PRO
Присутствие Pseudomonas spp. определяется изменением цвета от желтого до мутнозеленого в лунке 18-PSE.. Подтвердите оксидазным тестом (A.F.GENITAL
SYSTEM REAGENT кат. № 80258).
3
* Подтвердите присутствие Eschericia coli добавлением 2 капель реагента Ковача в
лунку 17-PRO, ждите формирования розово-красного кольца.
• Присутствие Gardnerella vaginalis определяется изменением цвета от красного до
желто-оранжевого в лунке 19-GAR. Подтвердите изоляцией на селективной
питательной среде (GARDNERELLA VAG. AGAR кат. № 11054) и биохимическими
тестами (INTEGRAL SYSTEM GARDNERELLA код 71724).
• Присутствие Staphylococcus aureus определяется появлением черного кольца на дне
лунки 20-STF. Подтвердите коагулазным тестом (COAGULASE TEST код 88030).
• Присутствие Enterococcus faecalis определяется изменением цвета от желтого до
черного в лунке 21-STR.
• Присутствие Neisseria gonorrhoeae в лунке 22-NES определяется положительным
оксидазным тестом (A.F.GENITAL SYSTEM REAGENT кат. № 80258). Подтвердите
положительный результат выделением на селективной питательной среде (ТауэрМартин агар, кат. № 11040) биохимическими и серологическими тестами.
• Присутствие Streptococcus agalactiae (Group B) в лунке 23-STG определяется
изменением цвета от желтого до зеленого. Подтвердите присутствие Streptococcus
agalactiae с помощью следующих методов:
а) агглютинационным тестом – латексным набором STREPTO B latex KIT (кат. №
96153).
б) выделением на питательной среде традиционными методами.
• Присутствие Candida spp. определяется изменением цвета от зеленого до желтого в
лунке 24-CAN. Наблюдайте присутствие хламидоспор и гифов при микроскопии.
Состав
Таблица № 2
Лунка
1-GR+
2-GR++
3-GR+++
4-ADC
5-UR
6-TR/YE
7-TE
8-PEF
9-OFX
10-DO
11-E
12-CLA
13-MN
14-JOS
15-CD
16-ESC
17-PRO
18-PSE
19-GAR
20-STF
21-STR
Содержание
Питательная среда для роста микоплазм
Питательная среда для роста микоплазм
Питательная среда для роста микоплазм
Питательная среда с субстратом для декарбоксилации аргинина
Питательная среда с субстратом для гидролиза мочевины
Питательная среда с субстратом для выделения Trichomonas vaginalis и
Candida spp.
Питательная среда, содержащая тетрациклин – 8 мкг/мл
Питательная среда, содержащая пефлоксацин – 16 мкг/мл
Питательная среда, содержащая офлоксацин – 4 мкг/мл
Питательная среда, содержащая доксициклин – 8 мкг/мл
Питательная среда, содержащая эритромицин – 16 мкг/мл
Питательная среда, содержащая кларитромицин – 16 мкг/мл
Питательная среда, содержащая миноциклин – 8 мкг/мл
Питательная среда, содержащая джозамицин – 8 мкг/мл
Питательная среда, содержащая клиндамицин – 8 мкг/мл
Питательная среда с субстратом для выделения Escherichia coli
Питательная среда с субстратом для выделения Proteus spp./ Providencia
spp.
Питательная среда с субстратом для выделения Pseudomonas spp.
Питательная среда с субстратом для выделения Gardnerella vaginalis
Питательная среда с субстратом для выделения Staphylococcus aureus
Питательная среда с субстратом для выделения Enterococcus faecalis
4
Питательная среда с субстратом для выделения Neisseria gonorrhoeae
Питательная среда с хромогенным субстратом для выделения
Streptococcus agalactiae
24-CAN
Питательная среда с субстратом для выделения Candida spp.
Физиологический раствор (г/л): хлорид натрия 9 г., дистиллированная вода 1000 мл.; pH
6.8±0.2
22-NES
23-STG
Сбор и хранение образцов
Получите вагинальное или уретральное отделяемое тампоном из синтетического
волокна. Получите эякулят согласно технике, предусмотренной для микробиологического
исследования. Образцы должны быть посланы для посева в A.F.GENITAL SYSTEM
немедленно после их сбора. Не храните в холодильнике даже ограниченный период времени,
т.к. низкие температуры могут повлиять на жизнеспособность некоторых особо
чувствительных микроорганизмов, таких как Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae etc.,
изменяя конечный результат.
Ход исследования
Приготовление клинического образца
Откройте одну ампулу с физиологическим раствором, находящуюся в наборе.
1. Вагинальный мазок – уретральный мазок
Погрузите тампон (после получения клинического материла) в ампулу с
физиологическим раствором и ждите 5 минут. Осторожно отожмите тампон о стенку
ампулы так, чтобы клинический материал гомогенно диспенсировался в
физиологическом растворе. Храните тампон погруженным в питательный бульон и
инкубируйте при температуре 36±10С 24-48 часов до окончания тестирования.
2. Эякулят
Добавьте 0,2 мл образца в ампулу с физиологическим раствором, встряхните и ждите 5
минут перед посевом.
3. Клинический материал из транспортной среды – Mycoplasma transport (кат. №
20158)
Добавьте 1 мл транспортной питательной среды Mycoplasma Transport Medium,
содержащей исследуемый образец, в ампулу с физиологическим раствором,
деликатно встряхните и ждите 5 минут перед посевом.
Сохраняйте образец в среде Mycoplasma Transport Broth до получения результатов
теста.
Инокуляция системы
1. Выньте систему из упаковки и доведите ее до комнатной температуры.
2. Напишите имя пациента, дату начала исследования и тип клинического материала
3. Перенесите 0,2 мл (4 капли) суспензии клинического материала в каждую лунку
системы.
4. Внесите сверху во все лунки, включая 19-GAR, кроме 6,16,17,18,20,21 и 23, по 3
капли вазелинового масла для микробиологического использования.
5
0
5. Закройте систему прилагаемой крышкой и инкубируйте при температуре 36±1 С 1824 часа. Если ожидается присутствие Mycoplasma hominis, то инкубируйте при
температуре 36±10С свыше 24 часов.
Итерпретация результатов
В конце инкубации:
- Пронаблюдайте изменения цвета в лунках с 1-GR+ по 5-UR и интерпретируйте
результаты, используя таблицу 3 (подсчет и идентификация микоплазм/уреаплазм)
- Возьмите каплю жидкости из лунки 6 TR/YE, поместите ее на предметное стекло,
накройте сверху покровным стеклом и исследуйте под микроскопом (40х) для
обнаружения Trichomonas vaginalis и Candida spp. Интерпретируйте, как указано в
таблице 3 (выявление T.vaginalis и Candida spp.)
- Пронаблюдайте изменение цвета в лунках от 7- ТЕ до 15- СD и интерпретируйте
результаты, используя таблицу №3 (определение чувствительности к антибиотикам
микоплазм/уреаплазм)
- Пронаблюдайте изменение цвета в лунке 16-ESC и интерпретируйте результаты,
используя табл. 3.
Добавьте 2 капли реагента Ковача в лунку 17-PRO для подтверждения присутствия
Escherichia coli; подождите, пока не образуется розово-красное кольцо.
- Возьмите каплю жидкости из лунки 22-NES, поместите ее на полоску для оксидазного
теста, пронаблюдайте немедленное (в течение 10 секунд) окрашивание в синий цвет
(положительный оксидазный тест). Подтвердите присутствие Neisseria gonorrhoeae
выделением на селективной питательной среде сделайте прямой посев вагинальным
или уретральным тампоном, предварительно хранящимся в питательном бульоне (ход
исследования, пункт 1) на поверхность питательной селективной среды (ТауэрМартин агар, каталожный № 11040) инкубируйте чашку при tº36±1º С в
микроаэрофильных условиях и выполните биохимические и серологические тесты
для выросших колоний.
- Пронаблюдайте за изменением цвета в лунке 23-STG и интерпретируйте результаты,
используя таблицу 3. Подтвердите присутствие Streptococcus agalactiae, используя
следующие методы:
а) агглютинационным тестом – латексным набором STREPTO B (кат. № 96153)
б) выделением на питательной среде традиционными методами.
- Пронаблюдайте за изменением цвета в лунках с 16 по 24 и интерпретируйте
результаты, используя таблицу № 3 (Выявление и предварительная идентификация
других микроорганизмов).
- Внесите результаты в ФОРМУ для РЕЗУЛЬАТОВ ТЕСТА (сделайте необходимое
количество копий формы).
Таблица №3
Лунка
1-GR++
2-GR++
3-GR+++
4-ADC
5-UR
Подсчет и идентификация
микоплазм/уреаплазм
Рост Mycoplasma 102 < титр < 104 СFU/мл1
Рост Mycoplasma 104 < титр < 105 СFU/мл2
Рост Mycoplasma
титр > 105 СFU/мл3
Аргинин-тест: идентификация Mycoplasma
hominis
Мочевина-тест: идентификация Ureaplasma
urealyticum
CFU: колониеобразующие единицы
Цвет лунки
Положительная
Отрицательная
реакция
реакция
красный
желтый
красный
желтый
красный
желтый
красный
желтый
красный
желтый
6
Лунка
6-TR/YE
Лунка
7-TE
8-PEF
9-OFX
10-DO
11-E
12-CLA
13-MN
14-JOS
15-CD
Выявление T.vaginalis и Candida spp.
Trichomonas vaginalis/Candida Spp.
Определение чувствительности
к антибиотикам микоплазм/уреаплазм
Тетрациклин – 8 мкг/мл
Перфлоксацин – 16 мкг/мл
Офлоксацин – 4 мкг/мл
Доксициклин – 8 мкг/мл
Эритромицин – 16 мкг/мл
Кларитромицин - 16 мкг/мл
Миноциклин - 8 мкг/мл
Йозамицин - 8 мкг/мл
Микроскопическое исследование (40х)
Trichomonas vaginalis: подвижные
реснитчатые трофозоиды
Candida spp.: хламидоспоры и гифы
S
желтый
желтый
желтый
желтый
желтый
желтый
желтый
желтый
желтый
Клиндамицин – 8 мкг/мл
S= чувствительный
I=промежуточно-чувствительный
Лунка
16-ESC
17-PRO
18-PSE
19-GAR
20-STF
21-STR
22-NES
23-STG
24-CAN
Выявление и идентификация
других микроорганизмов
Escherichia coli
Proteus spp./ Providencia spp.
Pseudomonas spp.
Gardnerella vaginalis
Staphylococcus aureus
Enterococcus faecalis
Neisseria gonorrhoeae
Streptococcus agalactiae (Group B)
Candida spp.
Цвет лунки
I
оранжевый
оранжевый
оранжевый
оранжевый
оранжевый
оранжевый
оранжевый
оранжевый
оранжевый
R
красный
красный
красный
красный
красный
красный
красный
красный
красный
R=устойчивый
Цвет лунки
Положительная
Отрицательная
реакция
реакция
синий
серо - красный
черно - коричневый
желтый
мутно - зеленый
желто-синий
желто - оранжевый
красный
черное кольцо
желтый
черный
желтый
синий4
бесцветный4
зеленый
желтый
мутно - желтый
зеленый
Примечание:
1-эквивалентно 5-20 колониям, выращенным на Mycoplasma Agar A7
2- эквивалентно 20-50 колониям, выращенным на Mycoplasma Agar A7
3- более 50 колоний, выращенных на Mycoplasma Agar A7
4-после оксидазного теста
Контроль качества
Каждая партия A.F.GENITAL SYSTEM подлежит контролю качества, используя
референтные штаммы бактерий:
Mycoplasma hominis
АТСС 23114 Gardnerella vaginalis
АТСС 14018
Ureaplasma urealyticum
АТСС 27618 Staphylococcus aureus
АТСС 25923
Candida albicans
АТСС 10231 Streptococcus faecalis
АТСС 19433
Escherichia coli
АТСС 25922 Neisseria gonorrhoeae
АТСС 19424
Proteus mirabilis
АТСС 25933 Streptococcus agalactiae
АТСС 13813
Pseudomonas aeruginosa
АТСС 27853 Trichomonas vaginalis
АТСС 30001
Факторы, которые могут влиять на результаты
Недостаточная стандартизация инокулюма; неподходящий клинический материал;
использование просроченных систем и/или реагентов; несоответствие t
инкубации.
о
7
и времени
Ограничения и предостережения
Присутствие Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus agalactiae и Gardnerella vaginalis
должно быть подтверждено использованием соответствующих питательных сред,
биохимических и серологических тестов. Для окончательной идентификации
микроорганизмов необходимо использовать дополнительные подтверждающие тесты.
Качество выполнения
Результаты, полученные с помощью A.F.GENITAL SYSTEM согласуются с другими,
полученными с использованием традиционных культуральных методов. Обращение к
непараметрическим статистическим тестам Wilcoxon показывает, что для каждого
клинического материала, группы стандартных значений и значений, полученных с помощью
A.F.GENITAL SYSTEM, значительно не отличаются Р≤ 0,05(2).
Предостережения
Продукт A.F.GENITAL SYSTEM не классифицируется как опасный по действующему
законодательству, однако A.F.GENITAL SYSTEM – одноразовое приспособление, которое
используется только для диагностических целей in vitro. Оно должно быть использовано в
лаборатории специально обученным персоналом с использованием утвержденных
асептических средств и методов безопасности при обращении с патогенными веществами.
Хранение
Храните при tо 2-8о С в оригинальной упаковке. Храните вдали от источников тепла и
избегайте значительных колебаний tо С. При таких условиях продукт будет оставаться
годным до истечения срока годности, указанного на этикетке. Не используйте позже этой
даты. Уничтожьте, не используя, если имеются следы повреждения.
Размещение использованного материала
После использования A.F.GENITAL SYSTEM и материалы, которые соприкасались с
образцом должны быть обеззаражены и размещены в соответствии с техническими
приемами, используемыми в лаборатории для обеззараживания и размещения
потенциального инфицированного материала.
Представление
Продукция
A.F.GENITAL SYSTEM
Таблица символов
Код
74156
Медицинское изделие для in-vitro диагностики
Производитель
Каталожный номер
Срок годности
Температурный режим
Не использовать повторно
Рассчитан на ___ тестов
Хрупкий, обращаться осторожно
Внимание: ознакомьтесь с сопутствующими документами
Номер партии
Упаковка
20 тестов