АТФ+АМФ исследование

АТФ+АМФ исследование
Самый надежный индикатор чистоты
поверхностей и эффективности
очистки
1
ЗАО Приборы
Легко,
Быстро, результат в числовом выражении
АТФ+АМФ тест
с помощью которого обнаруживается
загрязненность
Переносной люминометр
Lumitester PD‐10N
Сваб – тест LuciPac W к прибору
2
ЗАО Приборы
Чистота особенно важна в больницах в разных
точках приложения
Гигиена рук
Гигиена окружающей среды
Гигиена инструментов и приборов
многократного использования
3
ЗАО Приборы
Все знают, что чистка и дезинфекция очень
важны
→Поэтому все чистят и
дезинфицируют
Но после проведения очистки, как узнать, что
результат достигнут???
Они выглядят чистыми…
Но некоторые из них выглядели чистыми с самого
начала…
Всегда ли то, что выглядит чистым, является
чистым на самом деле???
4
ЗАО Приборы
Да, тест для определения АТФ+АМФ может
показать эффективность выбранного способа
очистки.
1 - Обнаруживает все типы загрязнения, включая
загрязнение микроорганизмами
2 - Необыкновенно чувствителен – находит
загрязнения невидимые для глаз.
3 - Быстрый
4 - Простой
5 - Результат – в виде числа.
5
ЗАО Приборы
Почему тест для определения АТФ+АМФ может
обнаруживать загрязнения?
Во-первых, разберемся, что такое тест для
определения АТФ+АМФ?
→ Количественный анализ АТФ
(аденозинтрифосфат) и АМФ
(аденозинмонофосфат).
АТФ
АМФ
6
ЗАО Приборы
Почему количественный анализ АТФ и АМФ
указывает на эффективность очистки?
АТФ и АМФ
・содержатся во всех видах загрязнений в
больнице
・Не содержатся в чистой воде
→ АТФ и АМФ являются наиболее практичной
мерой измерения уровня загрязнения. .
→Тест
для определения АТФ+АМФ показывает, была ли
выполнена очистка (или нет)
Типы загрязнения, характерные для больницы:
кровь, лимфа, пищеварительный сок, слюна, пот,
грязь, ткани, экскременты, микроорганизмы и т.д.
7
ЗАО Приборы
В случае гигиены рук
AMP
ATФ
AМФ
После обработки
AT
P
ATФ
AMФ
AТФ
ATФ
AМФ
Много грязи или микробов
много АТФ и АМФ
AМФ
Меньше грязи или микробов
меньшее количество АТФ и АМФ
(руки хорошо вымыты)
8
Как использовать прибор
ЗАО Приборы
Каждый может легко использовать в любое время в
любом месте
Возьмите смыв с
объекта
тестирования
Измерьте уровень
загрязнения при помощи
Lumitester (результат готов
через 10 сек.)
9
Методика исследования:
ЗАО Приборы
10
ЗАО Приборы
Тест АТФ+АМФ полезен и эффективен во многих
случаях:
1. Обучение принципам гигиены рук
2. Проверка уровня гигиены
окружающей среды
3. Проверка чистоты хирургических
инструментов
4. Проверка чистоты эндоскопа
5. Проверка чистоты посуды
11
1. Обучение принципам гигиены рук
ATФ
AТФ
грязь
На руках находится много грязи
и микроорганизмов
AТ
Ф
AТФ AТФ
AТФ
ATФ
ЗАО Приборы
микробы
AТФ
Контроль за распространением инфекций начинается с
гигиены рук.
12
ЗАО Приборы
1. Эффективное использование прибора в целях
обучения персонала гигиене рук
・Измерьте уровень чистоты рук до мытья.
→продемонстрируйте персоналу, данные прибора,
которые характеризуют, что их руки не очень чистые
・промойте руки
・произведите измерение снова (значения на приборе
должны быть ниже)
→объясните, что гигиена рук очень важна
→данное показательное обучение занимает 15 мин.
(для сравнения результат методом отпечатка или смыва мы получим только
через 2 дня)
13
ЗАО Приборы
2. Проверка чистоты окружающего оборудования
Проверка уровня гигиены окружающей среды очень
важна для предотвращения распространения инфекции
от человека к человеку
→Тест легко использовать в любое время в любом
месте
14
ЗАО Приборы
3. Проверка чистоты хирургических инструментов
Тест для определения АТФ занесен в директивы по
очистке хирургических приборов, опубликованные
Японским обществом медицинского инструментария.
15
ЗАО Приборы
3. Проверка чистоты хирургических инструментов.
Методы оценки
Прямой метод
・визуальный
・тест на протеины
・ATФ + AMФ тест
Преимущества：
- легко
-высокая чувствительность
- быстрый числовой
результат
Не прямой метод
・индикаторный （посев смыва
на питательные среды）
16
ЗАО Приборы
3. Проверка чистоты хирургических инструментов
Вопрос: Как найти эталонное значение для сопоставления
полученных результатов?
Исследование 1, проведенное при помощи
цифрового микроскопа
Цифровой микроскоп производства корпорации KEYENCE артикул № VH-8000
17
ЗАО Приборы
Методика
1. Очищенная тарелка из нержавеющей стали
→ фото под микроскопом → тест АТФ + АМФ
2. Нанесите кровь на тарелку
→ сделайте фотографию под микроскопом → проведите тест АТФ + АМФ
3. Очистка 10 секундной обработкой ультразвуком
→ сделайте фотографию под микроскопом → проведите тест АТФ + АМФ
4. Очистка обработкой ультразвуком в течение дополнительных
10 секунд (всего 20 секунд)
→ сделайте фотографию под микроскопом → проведите тест АТФ + АМФ
5. Очистка обработкой ультразвуком в течение дополнительных
20 секунд (всего 40 секунд)
→ сделайте фотографию под микроскопом → проведите тест АТФ + АМФ
Микроскоп: Х 3,000
Область снятия мазка 15мм x 55мм (туда и обратно 5 раз)
18
ЗАО Приборы
Исходные данные на стальной тарелке
13 RLU
После нанесения крови
over 999 999 RLU
после 10 сек.
ультразвук
после 20 сек.
ультразвук
после 40 сек.
ультразвук
21 881 RLU
375 RLU
35 RLU
Визуально это чисто.
!!!!! Но не чисто в
действительности !!!
19
ЗАО Приборы
3. Проверка чистоты хирургических инструментов
Исследование 2 - с применением моечной машины для
дезинфекции
Методика
После операции
мы вымыли несколько хирургических инструментов в
больничной моющей машине для дезинфекции
(методом посева на чашки Петри со средой показал, что машина
работает исправно).
Мы сделали АТФ+АМФ исследование
20
Результаты
ЗАО Приборы
Все хирургические инструменты показали результат меньше 100 RLU.
Мы продолжаем проводить исследования в этой сфере.
В настоящий момент мы предлагаем 100 RLU в качестве эталонного
значения для хирургических инструментов
100
90
Статистика численных данных
→ поможет вам при создании стандартной
процедуры очистки
→База данных должна быть записана
80
60
50
40
30
20
10
0
Ряд хирургических инструментов
抜
糸
剪
抜 刀
糸
剪
抜 刀
糸
剪
刀
剪
刀
鑷
子
鑷
子
鑷
子
持
針
器
持
針
器
鉗
子
鉗
子
鉗
子
鉗
子
鉗
子
鉗
子
鉗
子
鉗
子
鉗
子
筋
鉤
筋
鉤
吸
引
管
V alue (R LU)
70
21
4. Проверка чистоты эндоскопа
ЗАО Приборы
Результаты готовы через минуту
→ если результат показывает, что эндоскоп не
достаточно чист, оператор может решить вымыть
его повторно, что уменьшает риск инфицирования.
22
5. Проверка чистоты посуды.
ЗАО Приборы
Методика АТФ тестирования занесена в директивы о
методах проверки в области пищевой гигиены, созданные
под руководством Министерства Здравоохранения Японии.
Тест-системы Kikkoman PD-10N и LuciPac W уже используются
японскими центрами здравоохранения, Японской ассоциацией гигиены
пищи, Японской ассоциацией школьного питания, фабриками,
работающими с пищевыми продуктами, ресторанами, отелями и т.д.
23
ЗАО Приборы
Приложение
24
ЗАО Приборы
При температурной обработке АТФ разлагается
до АМФ
＋PPi
Нагревание
(посудомоечная машина)
АТФ
АМФ
Обнаружение как АТФ, так и АМФ чрезвычайно важно с
технической точки зрения
→ Да , наборы Kikkoman могут определять
→ Нет, наборы конкурентных фирм не могут
25
ЗАО Приборы
Принцип АТФ+АМФ тестирования
АТФ и АМФ измеряются за счет двух энзимов, люциферазы и пируватортофосфат-дикиназы. В конечном итоге АТФ и АМФ переводятся в свет. Прибор
Lumitester определяет интенсивность светового излучения.
Люцифераза
2＋
Mg
Люциферин
O2
Оксилюциферин
CO2
AТФ
LuciPac W
Pi
Пируват
На метод имеется патент
AМФ
2＋
Mg
Пируват
ортофосфат
дикиназа (PPDK)
Свет
PPi
PEP
Lumitester
26
Другие конкурентные производители
ЗАО Приборы
Определяют только АТФ
Люцифераза
2＋
Mg
Люциферин
O2
AТФ
Оксилюциферин
CO2
Свет
AMФ
27
Система циклического исследования с
использованием двух ферментов
Относительная световая
интенсивность (%)
Это приводит к стабильному
излучению света.
ЗАО Приборы
Люцифераза
Свет
AMФ
AТФ
100
PPDK
75
50
25
0
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
Время стабильного свечения (мин)
28
ЗАО Приборы
Относительные световые единицы
Стандартная кривая
107
Хорошая линейность
→точный результат
（CV
value）
6
10
(7.8)
5
10
Хороший динамический
диапазон
→хорошая адаптируемость
(7.1)
4
10
(5.3)
103
10-15 мол АТФ
→ высокая чувствительность
(4.3)
2
10
1
(21.8)
10
0
10
-16
10
-15
10
-14
10
-13
10
-12
10
-11
10
-10
10
-9
10
Количество АТФ (мол/сваб)
29
ЗАО Приборы
Lumitester PD-10N
Автораспознавание（A, B или
C）
Результат (данные
чистоты)
Заданные
эталонные значения
Результат можно
перенести в ПК.
30
ЗАО Приборы
Соотношение между количеством АТФ+АМФ и
количеством микроорганизмов
100000
Результаты в больнице
10000
1000
КОЕ
100
10
грязь
1
1
10
100
1000
10000
100000
Относительные световые единицы ＝Количество
ATФ+AMФ
грязь＝
питание для микробов
Значение КОЕ не показывает общую эффективность очистки
31
ЗАО Приборы
Соотношение между количеством АТФ+АМФ и
количеством микроорганизмов
100000
10000
1000
・Нет взаимосвязи между величиной
АТФ+АМФ и количеством микроорганизмов
→отлична цель тестирования
КОЕ
100
10
1
1
10
100
1000
10000
100000
Относит свет единицыt＝кол-во ATP+AMP
・Значение КОЕ не указывает на эффективность очистки
→Малое КОЕ не обозначает чистоту.
・Меньше АТФ+АМФ значит меньше КОЕ
→Микроорганизмы не могут размножаться в условиях малого
количества АТФ+АМФ
(Результаты измерения КОЕ получаются в течение 1-2 дней. Тест для
определения АТФ+АМФ занимает только минуту).
32
ЗАО Приборы
АТФ+АМФ тестирование по сравнению с тестом на белок
с точки зрения чувствительности
6
1E+6
10
100
standard
curve (BSA)
タ
ンパク質検量線
X10,000 dilution
1万倍希釈液（
平均）
X100,000
dilution
10万倍希釈液（平均）
detection limit
(specification
検出限界(カタ
ログ)
sheet)
検出限界（blank+3SD）
detection limit (blank+3SD)
5
1E+5
10
4
1E+4
10
3
1E+3
10
2
1E+2
10
1
1E+1
10
ATP standard curve
ATP検量線
X10,000 dilution
1万倍希釈液（
平均）
X100,000
dilution
10万倍希釈液（平均）
benchmark (example)
管理基準値
detection limit
検出限界（
blank+3SD）
0
(blank+3SD)
1E+0
10
- 11
- 10
-9
-8
-7
-6
-5
1E10 1E10 1E109 1E108 1E10 7 1E10 6 1E10 5
11
10
AТФ+AМФ (M)
ATP(M)
Abs. 595nm
595nm
吸光度
Относительные
световые
発光量（
RLU) единицы
Образец : кровь
10
1
0.1
0.1
1
10
Белок conc.(μg/mL)
タンパク
質濃度（μ g/ mL）
АТФ+АМФ имеет чувствительность в 69 раз превышающую
чувствительность теста на белок (контрольная проба+3 дубликата
образца).
100
33
Контактная информация
ЗАО Приборы
115035, г. Москва,
Климентовский пер., 12 стр.1
Тел. 8 495 937 45 94
34