«Патогенетические свойства вируса инфекционного бронхита

БНИИВВиМ
Государственное научное учреждение
Всероссийский научно-исследовательский институт
ветеринарной вирусологии и микробиологии
Российской академии сельскохозяйственных наук
(ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии)
601125, Владимирская область, Петушинский район, пос. Вольгинский, ул. Академика Бакулова, стр. № 1
Тел./факс: 8 (49243) 6-21-25, 6-13-85, men. 8 (49243) 6-10-82
e-mail: vniiwim@niiv.petush.elcom.ru; www.vniivvim.ru
№
О У' 0 7 / SOI
от «
От »
О У _______ 20 / Ь г.
ОТЗЫВ
официального оппонента на диссертационную работу
Дандала Али Шабли
«Патогенетические свойства вируса инфекционного бронхита
кур», представленную
на соискание ученой степени кандидата
ветеринарных наук
по специальности:
06.02.02 - ветеринарная
микробиология,
вирусология,
эпизоотология,
микология
с
микотоксикологией и иммунология.
Актуальность темы.
В птицеводческих хозяйствах постоянно
существует опасность возникновения инфекционных болезней, которые
приводят к значительным экономическим потерям. Перечень возбудителей
инфекционных болезней птиц достаточно широк, а наиболее эффективным
методом борьбы с инфекционными болезнями является специфическая
профилактика, заключающаяся в массовой иммунизации поголовья птиц
живыми и инактивированными вакцинами. Современное состояние
проблемы защиты сельскохозяйственных птиц от возбудителей вирусных и
бактериальных
болезней
характеризуется накоплением значительных
материалов по совершенствованию ранее разработанных и разработке новых
технологий получения и применения вакцинных и диагностических
препаратов, методов индикации возбудителей и оценки поствакцинального
иммунитета. Не является исключением и инфекционный бронхит куршироко
распространенное заболевание, диагностика и профилактика
которого представляют значительные трудности, связанные с наличием
различных серотипов вируса с одной стороны, и длительной персистенцией
с другой стороны.
Инфекционный бронхит (ИБК) относится к числу
высококонтагиозных
заболеваний
и
сопровождается
поражениями
респираторного тракта, почек, тонкого отдела кишечника и репродуктивных
к'
органов. Заболеваемость может достигать 90% при летальности от 5 до 30%,
а при течении в ассоциации с другими возбудителями смертность может
достигать 60%. С учётом множественности серотипов и вариантных штаммов
ИБК значительно отличающихся по антигенным и иммуногенным свойствам,
профилактика весьма затруднена, так как напряженный иммунитет в
основном формируется на гомологичный вариант вируса. Проблема часто
усугубляется
широким
распространением
возбудителя,
факторами
человеческой деятельности, связанными с переработкой и реализацией
продуктов птицеводства на обширных территориях.
Следует также
отметить, что сроки выявления возбудителей и их идентификация имеют
решающее значение в организации противоэпизоотических мероприятий по
предупреждению распространения возбудителей из очагов инфекций.
Дандал Али Шабли
объектом своих исследований избрал вирусное
заболевания птиц - инфекционный бронхит кур (ИБК) с целью изучения
патогенетических свойств возбудителя. При этом диссертантом сделан
акцент на использование ОТ-ПЦР-РВ для опосредованной оценки
инфекционного титра вируса в исследуемых объектах, что является весьма
актуальным для организации противоэпизоотических мероприятий.
В связи с вышеизложенным, актуальность темы диссертации Дандала
Али Шабли, посвященной изучению патогенетических свойств вируса
инфекционного бронхита кур сомнений не вызывает.
Работа вполне отвечает потребностям ветеринарной науки и практики и
вносит значимый вклад в практику борьбы с вирусными болезнями птиц.
Работа выполнена в условиях ФГБУ «ВНИИЗЖ», результаты разработки с
положительным эффектом проверены в лабораторных условиях.
Достоверность и новизна результатов исследований.
Достоверность и новизна исследований
сомнений не вызывают.
Положительный конечный результат достигнут на основе обширных
исследований
с использованием
новейших и стандартных методов
исследований, применяемых на современном этапе в вирусологических и
диагностических исследованиях. Новизна заключается в том, что автором
диссертационной работы установлена принципиальная возможность
использования ОТ-ПЦР-РВ для оценки накопления вируса без титрования на
куриных эмбрионах или культуре клеток куриного эмбриона.
Выводы и практические предложения обоснованы материалами
исследований . Практическая значимость несомненна и заключается в том,
что
диссертантом
разработаны
методические
рекомендации
по
использованию ОТ-ПЦР -РВ для опосредованной оценки величины титра
вируса инфекционного бронхита и методические рекомендации по
получению гипериммунных сывороток птиц к вирусу инфекционного
бронхита кур.
Содержание и оформление диссертации.
Диссертационная работа написана по общепринятому плану на 122
страницах компьютерного текста, иллюстрирована 5 таблицами и 11
рисунками. Диссертация включает: введение, обзор литературы, собственные
исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические
предложения, список цитированной литературы и приложения. Приложения
включают 2 документа.
Во введении диссертантом показана актуальность темы применительно к
состоянию проблемы профилактики и борьбы с инфекционным бронхитом
кур на современном этапе развития птицеводства.
В обзоре специальной литературы, написанном на 35 страницах, на
основе изучения 40 отечественных и 159 источников иностранных авторов
диссертантом дан обстоятельный анализ использованных источников,
подробно дана общая характеристика болезни, морфологические и
биологические свойства возбудителя, его антигенная вариабельность,
вопросы диагностики и иммунопрофилактики, вопросы
диагностики с
использованием молекулярных методов. В целом обзор литературы написан
хорошо и заслуживает положительной оценки.
Материалы и методы соответствуют поставленным целям исследования.
Собственные исследования посвящены изучению патогенетических
свойств вируса ИБК при инфицировании СПФ-эмбрионов кур, органно­
тканевых культур и цыплят разными штаммами и разработке методики
применения ОТ- ПЦР в режиме реального времени для индикации и
определения титра вируса в исследуемых материалах (тканях куриного
эмбриона и органах инфицированных цыплят).
В результате проведенных исследований предложена простая линейная
модель с высоким уровнем адекватности (969), которая использовалась для
прогноза величины инфекционного титра вируса по результатам ОТ-ПЦР-РВ
в границах, соответствующих линейному участку значений зависимого
параметра lg Tj. Эта модель оказалась приемлемой и для тканевых органных
культур. При постановке
ОТ-ПЦР-РВ используемые праймеры были
ориентированы на амплификацию участка вирусного генома, кодирующего
область капсидного белка S1, который является идентичным для всех
штаммов вируса ИБК. Это даёт возможность использования построенной
модели для прогноза величины инфекционного титра не только для штамма
Н -120, но и для других вариантов этого вируса.
Достоверно показано, что в организме куриного эмбриона вирус ИБК в
большей степени накапливается в тканях хориоаллантоисной оболочки и в
меньшей степени в тканях тельца эмбриона.
По результатам ПЦР изучена диссиминация вируса в организме цыплят и
показано, что для всех испытанных штаммов наибольшее накопление вируса
наблюдается в тканях респираторной системы, хотя и имеются некоторые
отличия отдельных штаммов. Эти отличия связаны с тропизмом штаммов к
отдельным тканям организма.
На
высоком
методическом
уровне
и
качественно
выполнены
патологоанатомические
и
гистологические
исследования,
которые
подтверждают наличие тропизма штаммов вируса ИБК к отдельным тканям
организма кур.
При назально-окулярном заражении наблюдается
характерный для ИБК респираторный симптомокомплекс с последующим
поражением других органов, а при клоачном заражении регистрировали
нефрозо-нефриты и отсутствие репираторного синдрома.
Приведенные в диссертационной работе результаты свидетельствуют о
пантропности вируса ИБК, который может репродуцироваться в клетках
нескольких тканей организма с одинаковой эффективностью.
Результаты исследований послужили автору основой для разработки
методических рекомендаций по использованию полимеразной цепной
реакции в режиме реального времени для опосредованной оценки величины
титра вируса инфекционного бронхита кур и методических рекомендаций по
получению гипериммунных сывороток птиц к вирусу инфекционного
бронхита кур, которые утверждены директором института.
Из анализа проделанной работы следует, что диссертант успешно
справился с поставленными задачами. Все основные научные положения,
заключение, выводы и практические предложения убедительно обоснованы
представленными в диссертации материалами исследования. Автореферат
соответствует материалам диссертации,
выводы и практические
предложения в диссертации и автореферате идентичны.
Замечания и предложения.
В процессе изучения материалов диссертационной работы нами
выявлены следующие недостатки:
1. По тексту диссертации иногда встречаются грамматические ошибки (
стр.11, 13, 38,42, 48, 51, 64, 72, 9 2 ), неудачные выражения (стр. 35, 39, 40, 50)
и несоответствие заглавий разделов по тексту диссертации и в оглавлении (
стр. 13,50, 78), пункт 1.10.1 в оглавлении на стр. 43, а по тексту на стр. 42.
2. Автором довольно подробно описана клиническая картина,
патологоанатомические
и
гистологические
изменения
в
органах
инфицированных вирусом ИБК цыплят, полученных из эмбрионов СПФ кур,
что позволяет в целом охарактеризовать патогенетические свойства вируса
ИБК именно для этой категории кур, но к сожалению нет контроля на
обычных цыплятах, полученных от кур промышленного стада, а это
позволило бы дать сравнительную харатеристику по выше указанным
проявлениям болезни. Не лишним был бы и контроль на фоне одной из
респираторных болезней.
Заключение. Диссертационная работа Дандала Али Шебли
«Патогенетические свойства вируса инфекционного бронхита кур» имеет
логическую последовательность в реализации научно-практической
проблемы, выполнена на большом фактическом материале с использованием
современных методов и направлена на решение одной из актуальных задач
ветеринарной медицины - обеспечение высокоэффективными средствами
диагностики в борьбе с вирусными болезнями птиц. Сформулированные
выводы обоснованы, конкретны, вытекают из полученных результатов и
отражают в полной мере цели и задачи исследования.
По своей актуальности, теоретической и практической значимости,
достоверности и новизне полученных данных, диссертационная работа
соответствует требованиям ВАК РФ, предъявляемым к кандидатским
диссертациям, а ее автор, Дандал Али Шебли, заслуживает присуждение
ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с
микотоксикологией и иммунология.
Официальный оппонент
ведущий научный сотрудник
лаборатории экспериментальной
микробиологии ГНУ ВНИИВВиМ
Россельхозакадемии, доктор
А.Т. Кушнир
ветеринарных наук, профессор
Подпись А.Т. Кушнира заверяю:
ученый секретарь ГНУ ВНИИВ
Россельхозакадемии,
кандидат биологических наук
Е.А. Балашова