021467 B1 021467 B1 (11) 021467

Евразийское
патентное
ведомство
(19)
(11)
021467
(13)
B1
(12)
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45)
Дата публикации и выдачи патента
2015.06.30
(21)
Номер заявки
201100400
(22)
(51) Int. Cl. C05F 11/08 (2006.01)
C12N 1/20 (2006.01)
A01N 63/00 (2006.01)
C12R 1/00 (2006.01)
Дата подачи заявки
2011.03.23
(54)
БАКТЕРИАЛЬНОЕ УДОБРЕНИЕ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ
B1
(72)
Изобретатель:
(74)
Представитель:
(57)
Изобретение используется в сельском хозяйстве. Задача изобретения: расширение ассортимента
эффективных бактериальных удобрений с широким спектром действия, обладающих
стимулирующим действием на рост растений, более широким спектром действия против
фитопатогенов, в том числе грибов рода Verticillium, с пролонгированным сроком хранения
и действия, и разработка способа его получения. Сущность изобретения: бактериальное
удобрение содержит клетки штаммов бактерий Bacillus subtillis B-1, Bacillus megaterium BM-1,
Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1 и сорбент
- смесь биогумуса и КМЦ, взятых в массовом соотношении, равном 4:1 соответственно, при
соотношении компонентов, указанном в формуле изобретения. Способ включает культивирование
клеток штаммов Bacillus subtillis B-1, Bacillus megaterium BM-1, Azotobacter chroococcum A-2,
Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1, приготовление сорбента смешиванием
биогумуса и КМЦ, взятых в массовом соотношении, равном 4:1 соответственно, смешивание
культуральных жидкостей, полученных после культивирования клеток штаммов бактерий, и
сорбента, гранулирование.
Давранов Кахрамон Давранович (UZ)
Андрущак Г.Н. (RU)
B1
021467
(56) RU-C2-2157798
U Z -C-2788
IAP20080367
MASAAKI MORIKAWA et al. Biofilm
formation by a Bacillus subtilis strain that produces
γ-polyglutamate. Microbiology, 2006, 152, pp.
2801-2807, реферат
DAS B.K. et al. Production of antibacterials
from the freshwater alga Euglena viridis (Ehren)
World Journal of Microbiology & Biotechnology,
2005, v. 21, № 1, pp. 45-50, реферат
021467
(31) LAP 20110022
(32) 2011.01.27
(33) UZ
(43) 2012.07.30
(71)(73) Заявитель и патентовладелец:
ДАВРАНОВ КАХРАМОН
ДАВРАНОВИЧ (UZ);
ТОВАРИЩЕСТВО
С ОГРАНИЧЕННОЙ
ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "NEW TEC
GROUP" (KZ)
021467
Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к бактериальным удобрениям и
способам их получения.
Известен биопрепарат для сельскохозяйственных культур, содержащий молочно-кислые, фотосинтезирующие, азотфиксирующие бактерии, отличающийся тем, что он дополнительно содержит штаммы
родов Agrobacterium, Bacillus, Bradyrhizobium, Ervinia, Rhodopseudomonas, и способ получения указанного биопрепарата, заключающийся в том, что штаммы бактерий Azotobacter chroococcum B-2375, Agrobacterium tumefaciens B-4116, Pseudomonas B-3482, Bacillus thurengiensis B-2918, Bacillus subtilis B-6554, Bacillus megaterium B-4440, Pseudomonas fluorescens B-1138 выращивают раздельно на питательной среде,
оптимальной для каждого штамма, после чего готовят смесь суспензий штаммов в определенном соотношении (RU 2322061).
Недостатком указанного биопрепарата является недостаточно широкий спектр антагонистического
действия, например, он не действует на возбудителей вилта растений - грибов рода Verticillium, поэтому
он не может быть использован для обработки семян технических культур, в частности хлопчатника, не
обладает структурирующей способностью, недостаточно стабилен.
Известен способ получения биологического удобрения путем культивирования азотобактера на
жидкой питательной среде глубинно в аэробных условиях с добавлением гашеной извести, в котором
гашеную известь добавляют в количестве 0,25-0,35 мас.%, а к полученной культуральной жидкости азотобактера добавляют поливинилпирролидон в количестве 0,25-0,35 мас.%, далее полученную биомассу
непосредственно перед использованием смешивают с биогумусом в соотношении 1:99 (UZ 02780).
Недостатком указанного способа является то, что полученное биологическое удобрение имеет недостаточно высокий титр полезных микроорганизмов, не обладает комбинированной азотфиксирующей
и фосформобилизирующей активностями, высокими ростостимулирующими свойствами и широким
спектром антагонистического действия.
Известен способ получения препарата, включающий получение жидкого инокулянта бактерий,
представляющих собой бактерии одного или нескольких родов из Pseudomonas, Bacillus, Azotobacter,
выращенных до стационарной фазы; и добавление сорбента/носителя торфа. Препарат увеличивает выживание и стабильность микроорганизма (например, бактерии) жидкого прививочного материала в течение хранения (WO 2006071369).
Недостатком указанного способа является то, что получаемый биопрепарат обладает недостаточно
широким спектром антагонистического действия.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является бактериальное
удобрение, содержащее в качестве микроорганизма клетки Bacillus mucilaginosus, сорбент (торф, вермикулит) и остатки культуральной жидкости с метаболитами, и способ получения бактериального удобрения, содержащего в качестве микроорганизма клетки Bacillus mucilaginosus, который включает культивирование посевного материала на жидкой питательной среде, смешивание продукта, полученного после
культвирования, с сорбентом и гранулирование (RU 2157798).
Однако данное бактериальное удобрение и способ имеют ряд существенных недостатков. Дефицит
азота и доступного фосфора во многих агроландшафтах требует дополнительного азотного и фосфорного
питания, что не может обеспечить предлагаемое удобрение. Кроме того, низкий титр микроорганизмов
удобрения требует высоких доз внесения для борьбы с болезнями, что делает экономически не эффективным применение удобрения.
Таким образом, известные бактериальные удобрения, а также способы их получения не позволяют
получать бактериальное удобрение с высоким титром полезных микроорганизмов, обладающее комбинированной азотфиксирующей и фосформобилизирующей активностями, высокими ростостимулирующими свойствами, действующее на возбудителей вилта растений - грибов рода Verticillium, чтобы быть
пригодными для использования на таких технических культурах, как хлопчатник.
Задачей, на решение которой направлено заявленное изобретение, является расширение ассортимента эффективных бактериальных удобрений с широким спектром действия, обладающих стимулирующим действием на рост растений, более широким спектром действия против фитопатогенов, в том
числе, грибов рода Verticillium, с пролонгированным сроком хранения и действия, и разработка способа
его получения.
Поставленная задача решается тем, что бактериальное удобрение, содержащее клетки штаммов
бактерий Bacillus, сорбент и остатки культуральной жидкости с метаболитами, содержит клетки штаммов бактерий Bacillus subtillis B-1 и Bacillus megaterium ВМ-1 и дополнительно содержит клетки штаммов бактерий Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1, в качестве сорбента содержит смесь биогумуса и КМЦ, взятых в массовом соотношении, равном (3-5):(0,51,5) соответственно, при следующем соотношении компонентов, на 1 г вещества:
-1-
021467
Поставленная задача решается также тем, что в способе получения бактериального удобрения,
включающем культивирование клеток штаммов бактерий Bacillus, приготовление сорбента, смешивание
культуральных жидкостей, полученных после культивирования клеток штаммов бактерий, и сорбента,
гранулирование, культивируют клетки штаммов бактерий Bacillus subtillis B-1, Bacillus megaterium BM-1,
Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1, сорбент готовят
смешиванием биогумуса с КМЦ в массовом соотношении, равном (3-5):(0,5-1,5) соответственно, смешивают культуральные жидкости, полученные после культивирования клеток штаммов вышеуказанных
бактерий, и приготовленный сорбент при следующем соотношении компонентов, на 1 г вещества:
Предлагаемое бактериальное удобрение, в отличие от бактериального удобрения, выбранного в качестве наиболее близкого аналога (НБА), содержит клетки штаммов физиологически активных бактерий
Bacillus subtillis B-1, Bacillus megaterium ВМ-1, Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1,
Streptomyces atratus UZGIT-1, выделенные авторами.
Авторами было обнаружено следующее.
Штамм бактерий Azotobacter chroococcum A-2 обладает более высокой активностью в азотфиксации
атмосферного азота, в растворимости минеральных фосфатов, в продуцировании ряда витаминов группы
В и ростстимулирующих веществ по сравнению с известными штаммами данного рода. Продуктами,
синтезируемыми штаммом, являются нитрогеназы, ацетиленредуктазы, продуктами метаболизма - индолилукссуная кислота (ИУК), гибберелиновая кислота (ГК), витамины группы В.
Штамм депонирован в коллекции типовых культур Института микробиологии АН РУз под коллекционным номером СКБ-141.
Штамм бактерий Pseudomonas putida PP-1 выделен из окультуренной сероземной почвы ризосферы
хлопчатника Наманганского вилоята Республики Узбекистан, по морфологическим и физиологическим
признакам идентичен известному штамму Pseudomonas putida ВКПМВ-4308 (RU 2051586). Штамм стимулирует рост технических, зерновых и овощных культур, обеспечивая высокие темпы их роста. Авторами было обнаружена активность, которая ранее не была известна для данного штамма, было установлено, что данный штамм проявляет активность против фитопатогенов, в том числе, грибов рода Verticillium.
Штамм депонирован в коллекции типовых культур Института микробиологии АН РУз под коллекционным номером СКБ-251.
Штамм бактерий Bacillus subtillis B-1 обладает антифунгальной активностью в борьбе с грибной
инфекцией. Продуктом, синтезируемым штаммом, является биоконтрольное вещество: 1,2-дигидрокси-2пропанон. Продуктами метаболизма штамма являются антибактериальные и антифунгальные вещества.
Штамм депонирован в коллекции типовых культур Института микробиологии АН РУз под коллекционным номером СКБ-256.
Штамм бактерий Bacillus megaterium ВМ-1 обладает высокой фосформобилизующей активностью
(активно трансформирует Р2О5 из органофосфатов) и ярко выраженной фунгицидной активностью по
отношению к фитопатогенным микроорганизмам, солеустойчив.
Штамм описан в патенте Узбекистана № 02788, опубликованном в официальном бюллетене "Рас-2-
021467
мий Ахборотнома", № 4, 2005 г.
Штамм бактерий Streptomyces atratus UZGIT-1 является продуцентом глюкозо-изомеразы, синтезирует антибиотики и ферменты, продуктами его метаболизма являются витамины группы В, РР, рибофлавин.
Штамм депонирован в Центральном музее промышленных микроорганизмов под коллекционным
номером ЦМПМ ВКПМ S-751.
Кроме того, бактериальное удобрение, в отличие от НБА, содержит в качестве сорбента смесь биогумуса с КМЦ.
Заявляемый способ получения бактериального удобрения отличается от НБА тем, что культивирование проводят с использованием в качестве посевного материала клеток штаммов физиологически активных бактерий Bacillus subtillis B-1, Bacillus megaterium BM-1, Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1, используют сорбент, представляющий собой смесь биогумуса с КМЦ.
Микроорганизмам, составляющим предлагаемое бактериальное удобрение, присущи
наиболее примитивный тип получения энергии - брожение (молочно-кислое, спиртовое) и аноксигенный фотосинтез, которые эволюционно более древние, чем аэробное дыхание;
высокая естественная предрасположенность их к росту, развитию и размножению в ризосфере и
фитосфере;
способность их синтезировать биологически активные вещества: аминокислоты, витамины, ферменты, ростовые вещества, органические кислоты и др.;
многокомпонентные бактериальные удобрения значительно стабильнее в проявлении их положительного эффекта в такой сложной многофакторной среде, как почва, чем монокультуральные, вследствие более широкого набора физиолого-биохимических свойств разных систематических групп микроорганизмов.
Предлагаемое бактериальное удобрение благодаря содержанию живых клеток высокоэффективных
микроорганизмов - штаммов бактерий Bacillus subtillis B-1, Bacillus megaterium BM-1, Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1, а также синтезированных ими биологически активных соединений: витаминов групп В, РР, стимуляторов роста растений (фитогормонов),
антибиотиков, иммуномодуляторов, типа рибофлавина, оказывает благоприятное действие на растение.
Хорошо приживаясь в ризосфере растений, бактерии, входящие в состав удобрения эффективных микроорганизмов, активно фиксируют азот атмосферы и улучшают азотное питание растений.
Оно обладает способностью вырабатывать биологически активные вещества, содержит комплекс
ростовых веществ, а также макро- и микроэлементов, которые усиливают процессы обмена веществ в
растениях. Это способствует укреплению иммунитета растений, стимулирует отрастание побегов, завязей и развитие корневой системы; повышает тургор листьев; ускоряет созревание плодов. Кроме того,
стимуляция обменных процессов в растениях приводит к увеличению использования растениями минеральных удобрений, снижая при этом содержание нитратов.
Благодаря своей ферментативной активности бактериальное удобрение способствует развитию в
почве (и особенно в ризосфере) других групп микроорганизмов, а именно аммонификаторов, денитрофекаторов, аэробных целлюлозоразлагающих и фосфорных бактерий. Стимуляция развития жизнедеятельности данных микроорганизмов вызывает энергичную минерализацию органических веществ и снабжение растений элементами зольной и азотной пищи, что способствует увеличению корневой массы растений, вследствие чего увеличивается поглотительная способность корней, что ведет к мощному росту
здорового растения, дающего значительно больший урожай.
Клетки штаммов бактерий Bacillus subtillis B-1, Bacillus megaterium BM-1, Azotobacter chroococcum
A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1 при культивировании выделяют метаболиты
различной природы, в том числе и аутометаболиты. Поэтому использование остатков культуральной
жидкости с метаболитами, полученных после культивирования клеток штаммов вышеуказанных бактерий,
обеспечивает как ускоренное развитие самих клеток при севе в почву, так и более высокую сохранность их
при хранении, и обеспечивает возможность сорбции как клеток, так и продукции их метаболизма.
Биогумус улучшает структуру почвы и её водно-физические свойства. В нем повышенное содержание водорастворимых форм азота, фосфора и калия. Микроэлементы находятся в более подвижной форме. Вместе с биогумусом в почву вносятся дождевые черви и микроорганизмы, необходимые для нормального её функционирования, а также продукты жизнедеятельности последних, в том числе фитогормоны, ускоряющие рост растений. Введение биогумуса создает более благоприятные условия для размножения, жизнедеятельности бактерий и усиленного выделения ими активных ростстимулирующих
веществ.
Карбоксиметилцеллюлоза (КМЦ) снижает вымывание элементов минерального питания из удобрения и придает значительную прочность гранулам удобрения.
При этом сорбент на основе смеси биогумуса с КМЦ имеет высокую влагоемкость, позволяющую
сорбировать на нем водорастворимые гуминовые регуляторы роста, обеспечивающие оптимальные условия для иммобилизации и жизнедеятельности клеток физиологически активных микроорганизмов на
-3-
021467
сорбенте. Сорбент выполняет функцию субстрата для развития и размножения клеток полезных микроорганизмов, содержащихся в предлагаемом бактериальном удобрении. Состав и структура сорбента
обеспечивают оптимальные условия для иммобилизации и жизнедеятельности клеток микроорганизмов.
При этом за счет увеличения площади сообщающихся пор значительно улучшаются условия аэрации,
увеличивается площадь минерального питания клеток.
Сущность изобретения заключается в следующем: клетки штаммов бактерий Bacillus subtillis B-1,
Bacillus megaterium BM-1, Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus
UZGIT-1, выращивают раздельно в жидких питательных средах и в условиях, оптимальных для каждого
микроорганизма.
После окончания культивирования культуральные жидкости (КЖ) и приготовленный сорбент,
представляющий собой смесь биогумуса с КМЦ, смешивают. Далее продукт гранулируют. Полученное
бактериальное удобрение используют для корневой и внекорневой обработки растений, обработки почвы
и семян.
Пример. Выращивают раздельно клетки штаммов бактерий Bacillus subtillis B-1, Bacillus megaterium
BM-1, Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1.
Клетки штаммов бактерий Azotobacter chroococcum A-2 выращивают на жидкой питательной среде
следующего состава, г/л: экстракт хлопкового шрота - 50,0; крахмал - 70,0; сахароза - 20,0; меласса 30,0; калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,05; магний сернокислый - 0,05; железо сернокислое 0,01; марганец сернокислый - 0,02; аммоний молибденовокислый - 0,01; борная кислота - 0,1; натрий хлористый - 3,0; кальций углекислый - 3,5; рН 6,7-7,0. Культивируют при 28-32°С на качалке со скоростью
200 об/мин в течение 60 ч. Выход биомассы 5,0-,5 г/л. Титр клеток 5-7⋅108 кл/мл.
Клетки штаммов бактерий Bacillus subtillis B-1 выращивают на жидкой питательной среде следующего состава, г/л: меласса - 30,0; экстракт хлопкового шрота - 20,0; кукурузный экстракт - 5,0; калий
фосфорнокислый однозамещенный - 10,0; магний сернокислый - 0,05; аммоний азотнокислый - 1,5; аммоний молибденовокислый - 0,01; водопроводная вода - до 1 л. Культуру выращивают при 36-38°С на
качалке со скоростью 200-210 об/мин в течение 72 ч. Титр клеток 5⋅106 кл/мл.
Клетки штаммов бактерий Bacillus megaterium BM-1 выращивают на жидкой питательной среде
следующего состава, г/л: меласса - 30,0; кукурузный экстракт - 1,8; водный экстракт из навоза или биоудобрения - до 1 л. Культивирование осуществляют глубинным методом на качалке при 220 об/мин,
температуре 28-30°С в течение 6-7 суток. Титр клеток 8-9⋅106 кл/мл.
Клетки штаммов бактерий Pseudomonas putida PP-1 выращивают на жидкой питательной среде следующего состава, г/л: дрожжевой автолизат - 5,0; кукурузный экстракт - 6,5; пептон - 5,0; калий фосфорнокислый двузамещенный - 1,0; натрий хлористый - 10,0; смесь микроэлементов 1 мл, рН 7,0-7,2, магний
сернокислый - 0,05; железо сернокислое - 0,01; марганец сернокслый - 0,02; аммоний молибденовокислый - 0,01; борная кислота – 0,1; кальций углекислый - 3,5. Культивирование осуществляют при 28-30°С
в течение 30 ч. Титр клеток 1⋅109 кл/мл.
Клетки штаммов бактерий Streptomyces atratus UZGIT-1 выращивают на жидкой питательной среде
следующего состава, г/л: картофельный крахмал - 1,5; ксилоза - 0,5; дрожжевой автолизат - 0,7; магний
сернокислый - 0,05; кобальт хлористый - 0,01; рН до стерилизации 7,5-8,0. Среду стерилизуют при 0,5
атм в течение 30 мин. Колбы с засеянной средой помещают на круговую качалку, культивируют со скоростью 210-230 об/мин при 38-40°С в течение 48 ч.
Готовят сорбент смешиванием 3-5 мас.ч. биогумуса с 0,5-1,5 мас.ч. КМЦ.
Культуральные жидкости (КЖ), содержащие 1 млрд клеток штамма бактерий Azotobacter chroococcum A-2, 100 млн клеток штамма бактерий Pseudomonas putida PP-1, 50 млн клеток штамма бактерий
Streptomyces atratus UZGIT-1, 100 млн клеток штамма бактерий Bacillus megaterium BM-1, 100 млн клеток штамма бактерий Bacillus subtilis B-1 на 100 мл среды, смешивают с приготовленным сорбентом и с
остатками культуральной жидкости с метаболитами. Далее продукт гранулируют.
Результаты экспериментов показали, что оптимальным является использование 0,5-1,5 млрд клеток
штамма бактерий Azotobacter chroococcum A-2, 75-150 млн клеток штамма бактерий Pseudomonas putida
PP-1, 20-100 млн клеток штамма бактерий Streptomyces atratus UZGIT-1, 20-150 млн клеток штамма бактерий Bacillus megaterium BM-1, 20-150 млн клеток штамма бактерий Bacillus subtilis B-1, 0,2-0,3 г сорбента.
Использование указанных компонентов в количествах меньших, чем нижние численные значения,
не дает требуемого результата, использование указанных компонентов в количествах больших, чем
верхние численные значения, нецелесообразно экономически.
Результаты экспериментов, приведенные в табл. 1-5, показывают, что предлагаемое бактериальное
удобрение обладает более широким спектром действия против фитопатогенов, в том числе грибов рода
Verticillium, стимулирующим действием на рост растений, с пролонгированным сроком хранения и действия. При предпосевной бактеризации семян растений предлагаемым бактериальным удобрением, бактерии хорошо приживаются, размножаются в ризосферной почве и оказывают стимулирующий эффект
на всхожесть и прорастание семян, на рост и развитие проростков, особенно на их корнеобразование.
-4-
021467
Одновременно предлагаемое бактериальное удобрение обладает фунгицидной активностью по отношению к фитопатогенным грибам родов Verticillium, Fusarium, вызывающих вилт, гоммоз и корневую гниль
у растений.
В результате бактеризации семян снижается заболеваемость растений, стимулируется их рост и
развитие и в конечном результате повышается урожай.
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимулирующем действии предлагаемого бактериального удобрения как в лабораторных условиях, так и в условиях закрытого грунта на зерновые, овощные культуры и хлопчатник (табл. 1 и 2).
Из табл. 3 следует, что обработка семян хлопчатника предлагаемым бактериальным удобрением
обеспечивает широкое антагонистическое действие на фитопатогены, в том числе и на возбудителя вилта
хлопчатника, стимулирует всхожесть семян сельскохозяйственных растений, в результате позволяет повысить урожайность хлопчатника на 29%.
Результаты изучения влияния предлагаемого бактериального удобрения на урожай сельскохозяйственных культур представлены в табл. 4.
Данные экспериментов показывают, что предлагаемое бактериальное удобрение позволяет увеличить урожайность сельскохозяйственных культур за счет высокой азотфиксирующей активности, антагонистических свойств по отношению к фитопатогенным микроорганизмам, эффективной защиты растений от различных инфекционных заболеваний и ростстимулирующего действия.
Ростостимулирующие и фунгицидные свойства предлагаемого бактериального удобрения обусловлены, кроме других причин, продуцированием физиологически активных соединений - стимуляторов
роста растений (фитогормонов, аминокислот, флуоресцирующих пигментов и др.) и антибиотиков фунгицидного действия. Уникальное сочетание и природа этих веществ обусловливают особенности влияния предлагаемом бактериальном удобрении на растения.
Физико-химические свойства удобрения приведены в табл. 5.
Как следует из табл. 5, удобрение обладает устойчивостью к вымыванию элементов минерального
питания и более значительной прочностью гранул, что положительно сказывается на эффективности
предлагаемого бактериального удобрения, на сроке хранения, обеспечивает пролонгированное действие
удобрения.
Предлагаемое бактериальное удобрение пригодно для рекультивации почв, стимулирует продуктивность, урожайность сельскохозяйственных растений, повышает их устойчивость к неблагоприятным
условиям окружающей среды, эффективно против широкого спектра болезней сельскохозяйственных
культур, за счет содержания в нем штаммов бактерий Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida
Pp-1, Bacillus subtillis СКБ-256, Bacillus megaterium BM-1, Streptomyces atratus UZGIT-1, и используемого
сорбента.
Предлагаемое бактериальное удобрение может быть использовано для осенней, весенней и летней
обработок почвы, корневой и внекорневой подкормок в период вегетации растений, а также предпосевной обработки семян, при этом происходит оздоровление, восстановление плодородия почвы и улучшение ее структуры; увеличение всхожести семян; укрепление иммунной системы растений, повышение
сопротивляемости болезням и вредителям, что значительно увеличивает урожайность и высокое качество получаемого продовольствия.
Преимущество объясняется тем, что, в отличие от НБА, предлагаемое бактериальное удобрение для
растениеводства, благодаря предлагаемому составу эффективных почвенных микроорганизмов направленного, многофункционального действия, обеспечивает их заселение в почве, на корнях (или ризосфере), вегетативных частях культивируемых растений, которые вытесняют микроорганизмы - ингибиторы
роста растений и болезнетворные микроорганизмы, структурируют почву, синтезируют гормоны роста,
витамины, ферменты, антибиотики и другие биологически активные вещества, фиксируют атмосферный
азот, что благоприятным образом сказывается на положительной активности корней, устойчивости к заболеваниям и общей продуктивности сельскохозяйственных культур.
В сравнении с химическими средствами, применяемыми в сельском хозяйстве, микробиологические
удобрения по степени воздействия на организм относятся к веществам 4-го класса опасности; малотоксичны для человека и теплокровных животных; при применении не образуют токсичных соединений в
воздухе и сточных водах.
Предлагаемое бактериальное удобрение может заменить дорогостоящие и экологически опасные
химические препараты для обработки семян растений.
-5-
021467
Таблица 1
Стимуляция роста сельскохозяйственных культур при предпосевной обработке семян
предлагаемым бактериальным удобрением в лабораторных условиях
Таблица 2
Стимуляция роста сельскохозяйственных культур при предпосевной обработке семян
предлагаемым бактериальным удобрением в условиях закрытого грунта
-6-
021467
Таблица 3
Влияние предпосевной обработки семян хлопчатника предлагаемым бактериальным удобрением на
всхожесть семян, поражаемость грибными болезнями и урожайность хлопчатника сорта 4727
Таблица 4
Влияние на урожай сельскохозяйственных культур
Таблица 5
Стабильность гранул, срок хранения
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Бактериальное удобрение, содержащее клетки штаммов бактерий Bacillus, сорбент и остатки
культуральной жидкости с метаболитами, отличающееся тем, что оно содержит клетки штаммов бактерий Bacillus subtilis В-1 и Bacillus megaterium BM-1 и дополнительно содержит клетки штаммов бактерий
Azotobacter chroococcum A-2, Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1, в качестве сорбента
содержит смесь биогумуса и карбоксиметилцеллюлозу, взятых в массовом соотношении, равном (35):(0,5-1,5) соответственно, при следующем соотношении компонентов, на 1 г удобрения:
клетки штамма бактерий
2. Способ получения бактериального удобрения по п.1, включающий культивирование клеток
штаммов бактерий Bacillus, приготовление сорбента, смешивание культуральных жидкостей, содержащих бактерии, и сорбента и гранулирование, отличающийся тем, что культивируют клетки штаммов бактерий Bacillus subtilis В-1 и Bacillus megaterium BM-1 и дополнительно Azotobacter chroococcum A-2,
Pseudomonas putida PP-1, Streptomyces atratus UZGIT-1, готовят сорбент смешиванием биогумуса с карбоксиметилцеллюлозой в массовом соотношении, равном (3-5):(0,5-1,5) соответственно, смешивают
клетки указанных штаммов бактерий и остатки культивированной жидкости, содержащей метаболиты, с
-7-
021467
приготовленным сорбентом при следующем соотношении компонентов на 1 г удобрения: клетки указанных штаммов бактерий - 0,06-0,2, указанный сорбент - 0,2-0,3, остатки культуральной жидкости, содержащей метаболиты, - до 1 г, и гранулируют.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
-8-