Масс ра искоренить воз

Отзыв
Официального
оппонента
на диссертацию
Ерш Анны Васильевны
«Разработка
диагностического
набора для выявления
краснухи
и эпидемического
паротита
представленную
антител к возбудителям
методом мультиплексного
на соискание ученой степени кандидата
специальности
кори,
дот-анализа»,
биологических
наук по
03.01.06 - биотехнология
Массовая вакцинация населения в ряде случаев способна практически полностью
искоренить
возбудитель
заболевания.
Именно таким образом
Сейчас на повестке дня стоит вопрос элиминирования
краснухи.
инфекциями
иммунитета
важной
инструментом
контроля
и состояния
специфического
иммунитета
Создание надёжных,
к детским
медицинской
разработке
кори, эпидемического
Необходимым
серомониторинга.
дешёвых
вакциноуправляемым
и социальной
диагностического
набора
была побеждена
заболеваемости
населения
способов
вирусным
оценки
инфекциям
оспа.
паротита и
отмеченными
являются
методы
поствакцинального
(ДВВИ)
является
задачей. Поэтому актуальность работы А.В.Ерш
для выявления
антител
к ДВВИ
по
не вызывает
сомнения.
Несмотря
на
большое
количество
форматов
настоящее время разрабатываются все новые
иммунологических
и новые их варианты.
популярность приобретают дешевые «рошт of саге testiпg»
тестов
в
Большую
- тесты прикроватной
диагностики. Это тесты способны проводится малоквалифицированным персоналом и
даже самими пациентами.
Разработанный в квалификационной работе А.В.Ерш
диагностический набор для определения антител к возбудителям кори, краснухи и
эпидемического паротита формально не относится к тестам прикроватной диагностики,
поскольку не содержит стадии иммунохроматографии, но приближается к ним по
простоте проведения.
Диссертация Ерш А.В. построена по традиционной схеме и состоит нз ведения,
обзора литературы, материалов и методов, результатов и обсуждения, заключения,
выводов и списка цитированной литературы. Работа изложена на 130 страницах, содержит
24 рисунка и 13
таблиц. Библиографический список включает 187
литературных
источника.
В
кратком
охарактеризовано
введении
современное
сформулированы
состояние
актуальность поставленных задач работы.
цели
и
задачи
исследования,
серомониторинга
ДВВИ
в
России
и
В литературном
особенности
обзоре,
занимающем
ДВВИ, характеристика
элиминации
отмеченных
поствакцинального
вирусов возбудителей
вирусных
иммунитета,
49 страниц
инфекций,
диссертации,
рассмотрены
ДВВИ, проекты
способы
оценки
типы и способы конструирования
по борьбе и
гуморального
диагностикумов
для
мультиплексного иммуноанализа.
Экспериментальная
описание использованных
Глава
часть, изложенная в главе 2 диссертации,
в работе материалов и методов.
«Результаты
и обсуждение»
данные хорошо иллюстрированы.
корректны и обоснованы
собой завершенное
мультиплексного
написана
логично.
поставленным
исследование,
диагностикума
посвященное
серомониторинга
07/81О1-482D8
диссертантом,
автором установлено,
обладает
лучшими
поскольку
не вызывает
разработке малобюджетного
ДВВИ.
белков на основе коммерческой
тестирования
выводы
задачам. Работа представляет
Прежде всего, Ерш А.В. были проанализированы
проведенного
Экспериментальные
Полученные диссертантом данные достоверны,
и соответствуют
целостное
для иммобилизации
содержит краткое
свойства различных носителей
синтетической бумаги. На основании
что бумага
Pentapгiпt
характеристиками
из
фоновых
связанных
сигналов,
всех
PR-M480/09исследованных
с трудностями
отмывки остаточного золя золота.
Автором проделана
при изготовлении
нанесение
большая работа по повышению
целевых наборов для диагностики
антигенов
на
подложку,
производительности
труда
(выкройка подложек для антигенов.
автоматизированное
наполнение
растворами
аналитических ванн).
Ерш
А.В.
проведена
процедуры блокирования
работа
значительная
матрицы от неспецифического
по
нахождению
оптимальной
связывания с антителами образца
и оптимизации условий выполнения дот-анализа.
В
визуализации
работе
диссертанта
конъюгатов,
двухкомпонентный
усовершенствована
содержащих
проявитель
и
ранее
коллоидное
усилитель
золото.
изображения
предложенная
Ерш
А.В.
система
разработала
(щелочной
раствор
тиомочевины), что существенно упрощает процедуру анализа образцов.
В целом
диссертантом
отработана
общая схема
и условия
проведения
лот-
иммуноанализа антител. По результатам проведенной работы получено два патента РФ.
Экспериментальная
серия разработанного
в лабораторных и межлабораторных
набора был протестирована
испытаниях.
Ерш А.В.
Диссертантом установлено, что
разработанный мультиплексный диагностикум имеет чувствительность, специфичность и
воспроизводимость, не уступающую коммерческим иммуноферментным тестам.
Качество оформления диссертационной
работы, в целом, - хорошее.
Поводов для
принципиальной критики работа Ерш А.В. не вызывает, однако есть ряд вопросов и
замечаний.
1.
Как
уже
отмечалось
ранее
диссертации, при этом, по-видимому,
бы быть значительно
сокращен,
вирусов, вызывающих
литературный
обзор
40%
объема
без ущерба для понимания логики работы, он мог
по крайней мере, на 20 страниц. Например, описание
ДВВИ и вакцин использующихся
было бы не приводить.
занимает
Собственно
для их профилактики
обзор литературы,
необходимый
можно
для разработки
диагностического набора, начинается с раздела 1.3 (стр 3 3 ).
2. Вызывает
недоумение
отсутствие
при обсуждении
результатов
ссылок
в
диссертации на собственные работы диссертанта.
3. На стр 84 перепутаны номера рисунков 14 и 15. Динамический
диапазон
от 60
нг до 50 пг составляет не два, а три порядка (стр 84).
4.
на стр.
62 в разделе
Материалы
разработанная программа оценки результатов
рода программ позволяет
иммуноанализа.
исключить
К сожалению,
данных
таблицы
11.
Оценка
диагностикумов.
такого
при визуальной оценке результатов
же стабильности
дот-иммуноанализа,
5. Несмотря на проведенную
были
Использование
программа была использована
визуально, поскольку в диссертации отсутствуют
не
специально
диссертант не приводит интерфейс и детальное описание
растворов набора, чувствительности
наборов
упоминается
дот-иммуноанализа,
субъективизм
программы. Кроме того, по-видимому,
получении
и Методы
решены
автором только при
биочипов,
проявляющих
по-видимому, проводили только
численные данные по этому поводу.
большую работу по автоматизации
должным
образом
несколько
К ним относятся мало производительные
стадий
производства
изготовления
стадии отмывки бума: и и
особенно двухстадийная иммобилизация антигена.
Диссертационная
представляет
собой
автореферата
работа Ерш А.В. по объему и полученным
законченную
полностью
диссертационных
научно-исследовательскую
соответствует
исследований
достаточно
выводам
работу.
диссертации.
полно опубликованы
результатам
Содержание
Результаты
в научных изданиях
и
прошли апробацию на конференциях.
Результаты работы могут быть использованы
комплексной оценке поствакциналыюго
мультиплексных диагностикумов,
Эта
диссертационная
«Положения о присуждении
как в практической работе по
иммунитета к ДВВИ, так и для разработки новых
не использующих ферментативные
работа
полностью
реакции.
соответствует
требования
п.9
ученых степеней», а автор работы Ерш А.В., несомненно,
заслуживает
присуждения
ей
ученой
степени
кандидата
биологических
наук
по
специальности 03.01.06 - биотехнология.
Официальный оппонент,
к.х.н., зав. лабораторией медицинской химии
Александр
Николаевич
Синяков,
.~.Н.Синяков
Институт
химической
биологии
и
фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, проспект академика Лаврентьева, 8.
Тел. 8(383)3635173. E-шail: siпvakoy@пiЬoch.пsc.гu
Подпись зав. ЛМХ ИХБФМ СО
П.Е.Пестряков