Тест-система для экспрессного количественного определения

Тест-система для экспрессного количественного определения
токсичности воды с помощью люминесцентного бактериального
теста (Биосенсор Эколюм-10)
Номер по каталогу ИФ 21-01
ТУ 6-09-20-236-01
Опасность загрязнения воды определяется уровнем ее возможного
отрицательного влияния на контактирующие среды, пищевые продукты и прямо
или опосредовано на человека.
Результаты обследования качества воды учитывают при определении и
прогнозе степени ее опасности для здоровья и условий проживания населения в
населенных пунктах, технических решений по реабилитации и охране водосборных
территорий, оценке эффективности санитарно-экологических мероприятий и
текущего санитарного контроля над объектами, воздействующими на окружающую
среду населенного пункта.
Острая химическая токсичность питьевых, поверхностных пресных,
грунтовых, сточных и очищенных сточных вод, атмосферных осадков в
лабораторных и полевых условиях определяется с использованием в качестве тестобъекта биолюминесцентных микроорганизмов “Эколюм” и измерительного
прибора серии “Биотокc”.
Определение токсичности воды проводится в соответствии с Методическими
рекомендациями «Методика экспрессного определения токсичности воды с
помощью люминесцентного бактериального теста «Эколюм», утвержденными
Департаментом Госсанэпиднадзора Минздрава России 08.06.2000 г. МР№ 11-1/13309, Свидетельство об аттестации методики выполнения измерений №
223.1.01.17.37/2010 от 26.04.2010.
Люминесцентный бактериальный тест «Эколюм» - это биосенсоры на основе
люминесцентных бактерий и препаратов бактериальной люциферазы. Измеряемым
параметром является биолюминесценция в видимой области спектра. Это быстрый
интегральный, чувствительный и объективный тест на загрязнение окружающей среды и
токсичность образцов. Это корреляция отклика на токсичность вещества с их действием
на высшие организмы, это недорогая и безвредная технология. Биосенсор интегрирует
эффекты смесей токсикантов, обеспечивая общий индекс токсичности образца. Тем
самым метод предпочтителен в качестве первичного теста и способен быстро ответить на
вопрос: присутствуют или нет в среде токсические агенты в опасной для живого
организма концентрации.
Принцип метода
В качестве тест-объекта используются препараты лиофилизированных
люминесцентных бактерий или ферментных препаратов бактериальной люциферазы.
Методика основана на определении изменения интенсивности биолюминесценции
биосенсора при воздействии химических веществ, присутствующих в анализируемой
пробе, по сравнению с контролем. Люминесцентные бактерии оптимальным образом
сочетают в себе различные типы чувствительных структур, ответственных за генерацию
биоповреждений (клеточная мембрана, цепи метаболического обмена, генетический
аппарат), с экспрессностью, объективным и количественным характером отклика
целостной системы на интегральное воздействие токсикантов. Уменьшение
интенсивности биолюминесценции пропорционально токсическому эффекту.
СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА
Принцип измерения токсичности образца состоит в следующем. Перед
проведением анализа на токсичность приводят биосенсор в рабочее состояние, т.е.
проводят регидратацию препарата. Для этого вскрывают флакон с лиофилизированным
биореагентом и добавляют 10 мл дистиллированной воды. Через 30 минут ее разводят
дистиллированной водой до получения рабочей суспензии. Наливают в две кюветы от
люминометра по 0.1 мл рабочей суспензии препарата «Эколюм». К контрольной кювете
добавляют 0.9 мл дистиллированной воды, к опытной добавляют равный объем
измеряемого образца и через 30 минут измеряют интенсивность биолюминесценции
контроля и затем опыта.
Измерения токсичности проводится на специализированном люминометре
«Биотокс-10», который автоматически определяет интегральный индекс токсичности,
усредненную величину токсичности многих измерений, ошибку измерения, представляет
данные об основных токсикологических характеристиках образца и осуществляет
компьютерную обработку результатов анализа с созданием банка данных.
Количественные оценки тест-реакции выражаются в виде безразмерной величины индекса токсичности «T» и функциональными токсикологическими параметрами ЕС20 и
ЕС50. Индекс токсичности «T», равный отношению T=100(Io-I)/Iо, где Io и I
соответственно интенсивность биолюминесценции контроля и опыта при фиксированном
времени экспозиции исследуемой пробы с бактериями. Методика допускает три
пороговых уровня индекса токсичности: 1) допустимая степень токсичности образца:
индекс токсичности T меньше 20; 2) образец токсичен: индекс T равен или больше 20 и
меньше 50; 3) образец сильно токсичен: индекс токсичности T равен или более 50.
ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТ-СИСТЕМЫ
Чувствительность теста: определение микроколичеств любого токсиканта.
Время проведения анализа: 5-30 минут.
Воспроизводимость результатов: ошибка не более 10%.
Количество анализируемого образца: 1 мл.
Количество анализов: 1 флакон рассчитан на проведение 100 анализов.
Срок годности набора: 12 месяцев.
Температура хранения набора: от -18оС до +4оС.
Простота аналитической процедуры: небольшое число вспомогательных операций и
автоматическое определение индекса токсичности пробы.
Корреляция с другими биотестами: высокая корреляция отклика с действием
токсикантов на животных.
Малогабаритная аппаратура измерения: возможность проведения анализов в
лабораторных и полевых условиях.
ОСНОВНЫЕ ОБЛАСТИ ПРИМЕНЕНИЯ
• Постоянный мониторинг питьевой воды, водоемов, почв, воздуха, материалов и
изделий на токсический эффект.
• Экспрессный контроль отходов и сбросов промышленных предприятий.
• Контроль технологических процессов в режиме реального времени.
• Определение качества новой продукции.
• Медицина и фармацевтика, контроль токсических эффектов материалов,
лекарственных веществ и парфюмерно-косметической продукции.
• Пищевая индустрия, гарантия безопасности и качества продуктов питания.
• Проведение научных исследований в области аналитической химии и экологии.
Методики с использованием биосенсора «Эколюм» имеют свидетельство о
метрологической аттестации (4/7-93), зарегистрированы в ФЦГиЭ Роспотребнадзора и
предназначены для измерения токсичности проб воды (№ 01.021-07), почв (№ 01.019-07),
воздушной среды (№ 01.020-07), материалов и изделий (№ 01.018-07), алкогольной
продукции (№ 01.017-07), моющих средств ( № 01.037-08) и парфюмерно-косметической
продукции (№ 01.038-08). Методика определения токсичности воды и водных вытяжек из
почв, осадков сточных вод и отходов тест-системой «Эколюм» зарегистрирована в
Министерстве природных ресурсов РФ (ПНД Ф Т 14.1:2:3:4.11-04 16.1:2.3:3.8-04), имеет
Свидетельство об аттестации методики выполнения измерений № 223.1.01.17.37/2010.