Document 2297470

Электронный научно-образовательный вестник "Здоровье и образование в XXI веке" № 6, 2008 г. (Т. 10)
ИЗУЧЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ
СУСПЕНЗИОННЫХ КУЛЬТУР КЛЕТОК ВАСИЛИСТНИКА МАЛОГО TALICTRUM MINUS,
УНГЕРНИИ ВИКТОРА UNGERNIA VICTORIS, ЖЕНЬШЕНЯ ОБЫКНОВЕННОГО PANAX GINSENG
МЕТОДОМ МИКРОСКОПИИ И ПОДБОР КРАСИТЕЛЕЙ
1
Ходцова А.Н., 1Бабаева Е.Ю., 2Тертичная Ю.М., 1Суслина С.Н.
1
Российский университет дружбы народов,
кафедра общей фармацевтической и биомедицинской технологии,
кафедра ботаники, физиологии, патологии растений и агробиотехнологии, г. Москва
2
Всероссийский научно-исследователький институт лекарственный и ароматических растений,
отдел биотехнологии, г. Москва
Унгерния Виктора Ungernia victoris Vved. ex Artjuschenko (Amaryllidaceae), василистник малый Thalictrum minus L.
(Ranunculaceae) и женьшень обыкновенный Panax ginseng C.A. Mey. (Araliaceae) – лекарственные растения,
имеющие ограниченный или разреженный ареал. Недостаточность сырьевой базы и важность использования
препаратов на базе сырья этих растений обусловливают необходимость биотехнологического культивирования.
Цель наших исследований – изучить диагностические признаки суспензионных культур клеток Talictrum minus,
Panax ginseng и Ungernia victoris, полученных в отделе биотехнологии ГУ ВИЛАР, и подобрать оптимальные
красители для каждой из них, что даст возможность контроля за динамикой роста культур. Использовался
микроскоп ЛОМО Микмед-1. Микрофотосъемку выполняли с помощью фотоаппарата Canon (power shot A 550)
на микроскопе с различными объективами. Красители: раствор I2 в KI (раствор Люголя), 0,5% водный раствор
сафранина, H2SO4 конц., 6% уксуснокислый раствор ацетокармина.
Было произведено предварительное микроскопирование каждой культуры без окрашивания. Выявлены следующие
особенности: клетки исследуемых культур объединены в агрегаты, встречаются одиночные клетки. Одиночные
клетки культуры Talictrum minus имеют округлую или продолговатую форму. В большем числе клеток наблюдаются
многочисленные включения округлой или продолговатой формы, окрашенные в бледный желто-зеленый цвет.
Данные включения являются вакуолями с содержащимся в них берберином, так как этот алкалоид окрашен.
Присутствие таких окрашенных вакуолей является диагностическим признаком культуры клеток Talictrum minus.
Одиночные клетки культуры Panax ginseng имеют округлую или вытянутую форму. Заметны утолщенные клеточные
стенки, в центре клетки – округлое ядро бледно-серого цвета с ядрышком. Одиночные клетки культуры Ungernia
victoris могут иметь округлую, овальную либо неправильную форму. В центре клетки заметны ядро (с ядрышком)
и множество небольших округлых включений неизвестного происхождения. Таким образом, отличить клетки
культур Ungernia victoris и Panax ginseng можно по наличию (отсутствию) большого числа небольших округлых
включений.
Были подобраны красители для каждой культуры клеток: для Talictrum minus – раствор I2 в KI (раствор Люголя).
Он окрашивает вакуоли в клетках Talictrum minus в оранжево-бурый цвет, так как является общеалкалоидным
осадительным реактивом и осаждает берберин. 6% уксуснокислый раствор ацетокармина окрашивает клетки
культуры Ungernia victoris в красный цвет. Другие общеалкалоидные осадительные реактивы, использованные
при предварительном изучении (растворы пикриновой и фосфорномолибденовой кислот), видимого окрашивания
клеток суспензионных культур василистника и унгернии не давали.
0,5% водный раствор сафранина и H2SO4 конц. хорошо прокрашивают клетки Panax ginseng. H2SO4 конц. (через
1–2 минуты после нанесения на микропрепарат) дает кирпично-красное окрашивание клеток в результате
реакции с нейтральными гинзенозидами.
На основании результатов исследования можно сделать вывод о том, что исследуемые суспензионные культуры
клеток могут быть дифференцированы при микроскопическом анализе как по диагностическим признакам без
окрашивания, так и по характерному окрашиванию подобранными красителями.
ЛИТЕРАТУРА
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2007. Т. 9. № 4.
Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2006. Т. 8. № 4.
Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2005. Т. 7. № 4.
Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2004. Т. 6. № 4.
Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2003. Т. 5. № 4.
Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2002. Т. 4. № 4.
Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2001. Т. 3. № 4.
Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2000. Т. 2. № 4.
Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2007. Т. 9. № 12. URL:
http://e-pubmed.org/isu.html.
10. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2006. Т. 8. № 12. URL:
http://e-pubmed.org/isu.html.
11. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2005. Т. 7. № 12. URL:
http://e-pubmed.org/isu.html.
Материалы IX международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва
Стр. [281]
Электронный научно-образовательный вестник "Здоровье и образование в XXI веке" № 6, 2008 г. (Т. 10)
12. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2004. Т. 6. № 12. URL:
http://e-pubmed.org/isu.html.
13. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2003. Т. 5. № 12. URL:
http://e-pubmed.org/isu.html.
14. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2002. Т. 4. № 12. URL:
http://e-pubmed.org/isu.html.
15. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2001. Т. 3. № 1. URL:
http://e-pubmed.org/isu.html.
16. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2000. Т. 2. № 1. URL:
http://e-pubmed.org/isu.html.
Материалы IX международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва
Стр. [282]