Том II АГРАРНАЯ НАУКА И ОБРАЗОВАНИЕ НА

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ДЕПАРТАМЕНТ НАУЧНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ ПОЛИТИКИ И ОБРАЗОВАНИЯ УЛЬЯНОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМ. П.А.СТОЛЫПИНА Материалы V Международной научно-практической конференции АГРАРНАЯ НАУКА И ОБРАЗОВАНИЕ НА СОВРЕМЕННОМ ЭТАПЕ РАЗВИТИЯ: ОПЫТ, ПРОБЛЕМЫ И ПУТИ ИХ РЕШЕНИЯ Том II 11 июня 2013 года МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ДЕПАРТАМЕНТ НАУЧНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ ПОЛИТИКИ И ОБРАЗОВАНИЯ УЛЬЯНОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМ. П.А.СТОЛЫПИНА Материалы V Международной научно-практической конференции АГРАРНАЯ НАУКА И ОБРАЗОВАНИЕ НА СОВРЕМЕННОМ ЭТАПЕ РАЗВИТИЯ: ОПЫТ, ПРОБЛЕМЫ И ПУТИ ИХ РЕШЕНИЯ Том II 11 июня 2013 года Материалы V Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения» / - Ульяновск: ГСХА им. П.А. Столыпина, 2013, т. II - 309 с. ISBN 978-5-905970-21-4 Редакционная коллегия: А.В. Дозоров, ректор (гл. редактор) В.А. Исайчев, первый проректор - проректор по НИР (зам. гл. редактора) И.И. Богданов, начальник управления науки и инновациями Авторы опубликованных статей несут ответственность за достоверность и точность приведенных фактов, цитат, экономико-статистических данных, собственных имен, географических названий и прочих сведений, а также за разглашение данных, не подлежащих открытой публикации. Дизайн и вертска Д.Н. Хлынов © ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», 2013 АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ, МИКРОБИОЛОГИИ, БИОЛОГИИ, ЭКОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ УДК 578.81 СПЕКТР ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ И СПЕЦИФИЧНОСТЬ БАКТЕРИОФАГОВ PSEUDOMONAS FLUORESCENS А.М. Артамонов, соискатель кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Д.А. Викторов, к.б.н., старший научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», т. 8-908-477-55-73, e-mail: [email protected] Д.А. Васильев, д.б.н., профессор, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», Тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: Pseudomonas fluorescens, бактериофаги, спектр литической активности, специфичность, фагодиагностика. Авторами проведено исследование специфичности и спектра литической активности выделенных ранее бактериофагов Pseudomonas fluorescens для их дальнейшей селекции по названным критериям в целях разработки диагностического биопрепарата и оптимизации метода реакции нарастния титра фага. Актуальность. Необходимость разработки новых методов индикации бактерий Pseudomonas fluorescens вытекает главным образом из патогенных свойств данного микроорганизма, в частности, по отношению к прудовой рыбе и рыбе открытых водоёмов, вызывая заболевание псевдомоноз, распространенное в хозяйствах, применяющих индустриальные методы рыбоводства [1, 3]. Кроме того, Pseudomonas fluorescens является фитопатогенным микроорганизмом [7]. Цель: Исследование спектра литической активности и специфичности выделенных ранее бактериофагов Pseudomonas fluorescens. Материалы и методы исследования. Спектр литической активности и специфичность изучались у выделенных ранее изолятов бактериофагов P. fluorescens: Pf01F1-УГСХА, Pf01F2-УГСХА, Pf01F3-УГСХА, Pf01F4УГСХА. 3 В качестве индикаторной культуры при культивировании и пассажах названных фагов использовали штамм P. fluorescens ATCC 13525 IV-96. Посевы инкубировали при температуре 28 оС в течение 24 часов. Для определения спектра литической активности использовали референс-штаммы: P. fluorescens ATCC 13525 IV-96, В-896, В-970, В-1470, и выделенные нами ранее 28 полевых штаммов P. fluorescens. Для определения специфичности использовали 5 референс-штаммов P. putida: №901 IV�� -89; ATCC�� 12633 IV�� -87, В-899, В-550, В-1292, 33 «полевых» штамма P. �� putida�� , 3 референс-штамма бактерии �� P�� . �� aeruginosa�� : №128, №381, №1677, 2 референс-штамма бактерии �� P�� . �� chlororaphis�� : В-1246, В-1249, а также 14 штаммов бактерий других родов: �� Aeromonas hydrophila, Proteus mirabilis, Morganella morganii, Klebssiella pneumoniae, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Streptococcus spp., Bacillus cereus, E. coli, Enterobacter cloacae, Citrobacter freundii, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, Stenotrophomonas maltophila. Все названные штаммы были получены из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ при ФГБОУ ВПО Ульяновской ГСХА им. П.А. Столыпина и обладали типичными биологическими свойствами. Определение спектра литической активности и специфичности бактериофагов проводили с помощью спот-теста на газоне индикаторных и гетерогенных бактериальных культур. Посевы инкубировали при оптимальной для изучаемых бактериальных штаммов температуре, оценку результатов проводили через 18-24 ч (рис. 1). Результаты исследований. Результаты определения спектра литической активности представлены в таблице 1. Таблица 1. Спектр литической активности фагов по отношению к штаммам P. fluorescens. № п/п Штамм фага 1 2 3 4 Pf01F1-УГСХА Pf01F2-УГСХА Pf01F3-УГСХА Pf01F4-УГСХА Количество испытанных штаммов P. fluorescens 32 32 32 32 Количество лизируемых штаммов P. fluorescens 28 23 20 26 Процент лизируемых штаммов P. fluorescens, % 87,5 71,9 62,5 81,3 Наиболее широким спектром литической активности по отношению к изучаемым культурам обладает штамм фага Pf01F1-УГСХА, который лизировал 28 из имеющихся у нас 32 штаммов �� P�� . �� fluorescens�� (87,5 %). Спектр литической активности остальных исследованных фагов P. fluorescens составил от 62,5 до 81,3 %. 4 Рис. 1. Зоны лизиса в месте нанесения бактериофагов Pf01F1-УГСХА, Pf01F2УГСХА, Pf01F3-УГСХА, Pf01F4-УГСХА Установлено, что все четыре исследуемых бактериофага строго специфичны по отношению к P. fluorescens и не лизируют бактерии других видов и родов (табл. 2). Таблица 2. Специфичность выделенных бактериофагов № п/п 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. Pf01F1УГСХА P. aeruginosa P. putida P. chlororaphis A. hydrophila P. mirabilis M. morganii K. pneumoniae Salmonella S. aureus Streptococcus B. cereus E.coli E. cloacae C. freundii Y. pseudotuberculosis Y. enterocolitica S. maltophila Примечание: «-» - отсутствие лизиса. Вид бактерий Pf01F2УГСХА - Pf01F3УГСХА - Pf01F4УГСХА - 5 Вывод: По результатам определения спектра литической активности и специфичности выделенных бактериофагов пришли к выводу, что для дальнейшего конструирования диагностического биопрепарата целесообразно использовать бактериофаг Pf01F1УГСХА, срого специфичный по отношению к P. fluorescens (как и остальные изученные нами бактериофаги) и лизирующий 87,5 % имеющихся в нашем распоряжении штаммов P. fluorescens. Библиографический список: 1.Викторов Д.А. Усовершенствование методов диагностики псевдомонозов рыб / Д.А. Викторов, Т.А. Гринева, Д.А. Васильев, А.М. Артамонов, С.Н. Золотухин // Бактериофаги: теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности: Материалы международной научно-практической конференции, Ульяновск, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», 23-25 апреля 2013. – Т. 1. – Ульяновск, 2013. – С. 162-164. 2.Вялова Г.П. Методы борьбы и профилактики псевдомоноза молоди горбуши / Г.П. Вялова, А.В. Полтева, З.К. Шкурина // Информ. листок СахЦНТИ. – 1995. – № 38-95. – С. 4. 3.Инструкция о мероприятиях по профилактике и ликвидации псевдомоноза рыб, Минсельхозпрод России, Департамент ветеринарии, 1998. 4.Каттер Э. Бактериофаги : биология и практическое применение / Э. Каттер, А. Сулаквелидзе; пер. с англ.: коллектив пер.; науч. ред. рус. изд. А.В. Летаров. – Москва: Научный мир, 2012. – 636 с. 5.Методические указания по лабораторной диагностике псевдомонозов рыб, Минсельхозпрод России, Департамент ветеринарии, 1998. 6.Ревенко И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике. К., «Урожай», 1978. 7.Смирнов В.В., Киприанова Е.А. Бактерии рода Pseudomonas. Киев. Наукова думка, 1990, с. 176-187. 6 УДК 636.2.082.84 ФУНКЦИЯ РАЗМНОЖЕНИЯ ТЕЛОК ЧЕРНО-ПЕСТРОЙ ПОРОДЫ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ПЕРИОДОВ ИХ МАТЕРЕЙ М.Х. Баймишев, кандидат биологических наук, старший преподаватель ФГБОУ ВПО Самарская ГСХА тел. 8(846-63) 46-7-18, [email protected] Ключевые слова: масса, возраст, лактация, сухостой, период, цикл, осеменение, стельность, беременность, оплодотворяемость, адапатция. Изучено влияние продолжительности лактации и сухостойного периода на воспроизводительные способности телок. Установлено, что оплодотворяемость была лучше у телок, матери которых имели продолжительность лактации составила 305,0 дней, сервис-периода – 105,0 дней, продолжительности срока плодотворного осеменения – 80,0 дней. Воспроизводительная способность животных зависит от многих факторов, одной из основных причин ее нарушения у высокопродуктивных коров является уровень молочной продуктивности, и продолжительность физиологических периодов которые, во многом определяют эмбриональный период развития плода, от чего, в последующем зависят как продуктивные, так и репродуктивные качества животных [1, 3, 4, 7]. Развитие организма происходит в онтогенезе по общебиологическим закономерностям, определенным в процессе филогенеза и закрепленным генетически. Доказано, что развивающийся организм на всех этапах онтогенеза, начиная с момента его образования в виде зиготы, является относительно зрелым, совершенным и дефинитивным в той мере, в какой особенности его жизнедеятельности адаптивно соответствуют тем специфическим условиям среды, с которыми он взаимодействует на данных этапах [5, 6]. Морфофункциональная зрелость организма на каждом этапе онтогенеза определяется, прежде всего, соответствием особенностей его жизнедеятельности календарному возрасту. Вследствие этой причинно-следственной связи организм на разных возрастных периодах следует рассматривать как незавершенный по сравнению с последующими периодами, и особенно, со взрослыми половозрелыми особями данного вида животных. Рост и развитие организма животного, протекает в гармоничной последовательности периодичности развития. Только соответствие данного периода развития с необходимыми условиями его реализации позволяет получить полностью развитый и здоровый организм с определенным морфофункциональным статусом, что в дальнейшем определяет рост, развитие организма и его репродуктивные качества [2, 3, 10]. Цель исследований – повышение воспроизводительных способностей телок при оптимизации продолжительности физиологических периодов у коров-матерей с уровнем молочной продуктивности 5000-6000 кг молока. Исходя из поставленной цели, в задачу исследования входило: - изучить репродуктивные качества телок в зависимости от продолжительности физиологических периодов у коров-матерей; 7 - определить морфофункциональный статус новорожденных телок. Материал и методы исследований. Исследования проводили на базе молочной фермы ОАО «Новокуровское». Были сформированы три группы телок полученных от матерей с уровнем молочной продуктивности 5000-6000 кг молока со следующими параметрами физиологических периодов: первая группа животных (контрольная) – продолжительность срока плодотворного осеменения – 131,3; лактации – 356,3; сухостоя – 60,9 дня; вторя группа – продолжительность срока плодотворного осеменения – 104,8; лактации – 305,2; сухостоя – 80,5 дня; третья группа – продолжительность срока плодотворного осеменения – 104,2; лактации – 295,8; сухостоя – 90,2 дня. В каждой группе было по 10 телок. Были изучены: возраст и живая масса при первом осеменении, процент оплодотворяемости по половым охотам, возраст первого отела, продолжительность течения родов и послеродового периода, сроки инволюции матки. Результаты исследований. При сравнительной оценке телок по репродуктивным качествам мы обращали внимание на возраст и живую массу при первом осеменении, а так же на плодотворность осеменения в первую половую охоту. В результате проведенных нами исследований установлено, что возраст проявления первого полового цикла у животных первой группы составила 11,2±0,45, во второй группе – 9,52±0,38, в третьей группе – 9,67±0,57 месяцев. Что видимо, обусловлено отставанием в росте и развитии телок первой группы по сравнению со сверстницами второй и третьей групп. Так живая масса при первом осеменении и возраст первого плодотворного осеменения по данным Шапиева И.Ш. и др. [9] взаимосвязаны. К 18-месячному возрасту такую живую массу 428,9±4,36 кг; 427,3±3,87 кг имели телки второй и третьей групп, а телки первой группы имели живую массу 390,0±6,7 кг. Проявление стадии возбуждения, оплодотворяемость и ритмичность половых циклов по группам животных была разной. Однако возраст первого осеменения телок по группам был не одинаков, так как не все животные проявляли половую цикличность, а также у них была разница внутри группы по живой массе. Возраст первого плодотворного осеменения телок в первой группе составил 20,2, во второй группе – 18,2, в третьей группе – 18,3 месяцев, т.е. животные первой группы плодотворно осеменились на два месяца позже, чем телки второй и третьей групп. Это является следствием более низкой интенсивности их роста, развития, а также результатом более позднего и невыравненного проявления полового цикла у телок первой группы. Стадия возбуждения полового цикла у телок, полученных от коров с удлиненным сервис-периодом, продолжительной лактацией и сухостоем – 60,9 дня характеризовалась более слабым проявлением течки, полового возбуждения и укороченной фазой охоты. Нами отмечено, что у телок, второй и третьей групп, проявление феноменов стадии возбуждения было более ярким, по сравнению с их сверстницами из первой группы. Оплодотворяемость телок в первую половую охоту составила в группах: первой – 60,0%; второй – 70,0%; третьей – 70,0%. Плодотворность в первую половую охоту во второй и третьей группе на 10,0% больше, чем у сверстниц первой группы. Низкий процент оплодотворяемости животных первой группы видимо, связан со структурными изменениями в репродуктивных органах в период эмбрионального развития телок из-за отсутствия оптимальной взаимосвязи между продолжительностью лактации и сухостоем. Живая масса при первом плодотворном осеменении составила в первой группе 8 – 437,1 кг, что на 5,0; 3,1 кг больше соответственно, чем у телок второй и третьей групп, но при этом возраст осеменения у телок первой группы на два месяца больше. Следовательно, на эффективность осеменения оказывает влияние возраст и живая масса (18 месяцев, 430 кг). Таблица 1. Воспроизводительная способность телок полученных от коров с разными сроками продолжительности физиологических периодов (М±m) Показатели Количество, голов Живая масса в возрасте 18 мес., кг Возраст первого плодотворного осеменения, месяцев Живая масса при первом осеменении, кг Оплодотворяемость по половым охотам, % в первую во вторую в третью Индекс осеменения Продолжительность беременности, дней Возраст первого отела, месяцев Группы животных 1-группа 10 2-группа 10 3-группа 10 390,0±6,17 428,9±4,36 427,3±6,87 20,2 18,2 18,3 437,1±6,15 432,0±5,36 434,0±7,12 60,0 20,0 10,0 1,8 286,7±5,15 29,6±0,94 70,0 20,0 10,0 1,4 283,8±5,07 27,8±0,66 70,0 10,0 20,0 1,5 287,9±4,80 27,9±1,09 Увеличение возраста и живой массы не дает эффекта, если животные при рождении имели аномалии недоразвитости, что согласуется с мнением Солдатова А.П. [8]. Беременность у животных протекала без видимых аномалий, в период беременности абортов не было. Начиная со второй половины беременности, животных стали приучать к привязи, шуму доильных аппаратов, через неделю они привыкли к новым условиям содержания (стали более спокойными). Этот процесс адаптации быстрее прошел у животных второй и третьей группы. Продолжительность беременности была в пределах физиологической нормы. Возраст первого отела по группам животных составил: первой – 29,6±0,94; второй – 27,8±0,66; третьей – 27,9±1,09 месяцев. Продолжительность течения родов в группах составила соответственно: первой – 5,1±0,55; второй – 3,2±0,81; третьей – 3,3±0,51 часа (табл. 2) При определении продолжительности родов мы проводили отсчет времени с момента проявления первых признаков схватки до отделения последа. Продолжительность родов у животных второй и третьей групп меньше на 1,9; 1,8 ч соответственно по сравнению, с первой группой. При этом следует отметить, что отделение последа у животных второй и третьей группы по сравнению со сверстницами первой группы проходило быстрее, что, повидимому, является результатом лучшего морфофункционального состояния половых органов телок второй и третьей групп обеспеченного за счет нормы органогенеза в эмбриональный и постнатальный периоды развития. 9 Таблица 2. Течение родов и послеродового периода у первотелок в зависимости от продолжительности физиологических периодов Показатели Количество, голов Продолжительность родов, ч: в т. ч. отделение последа Окончание инволюции матки, дней: выделение лохи результаты ректального исследования Живая масса телят при рождении, кг Получено телят, голов Группа 1-группа 2-группа 3-группа 10 10 10 5,1±0,55 2,8±0,33 ** 3,2±0,81 1,6±0,47* 3,3±0,51** 1,8±0,40* 15,2±2,79 12,4±2,15 13,8±4,11 28,0±3,20 * 20,6±1,62 21,7±2,11* 35,3±2,58 9 38,5±1,65* 10 38,7±1,41* 10 От нетелей, полученных от коров-матерей имеющих более продолжительную лактацию – 356,0 дней и сухостойный период – 60,9 дня получено 9 телят, что на одного теленка меньше чем у нетелей второй и третьей групп. Таким образом, продолжительность физиологических периодов матерей оказывает влияние не только на воспроизводительные и продуктивные качества их самих, но и влияет на качественные показатели репродуктивной функции их потомства. Телята, полученные от нетелей второй и третьей групп, по морфофункциональному статусу превосходили своих сверстниц по таким показателям как проявление сосательного рефлекса, состояния кожного покрова, количества резцовых зубов которые на 1,4 штуки было меньше чем у их сверстниц сравниваемых групп. Живая масса телят полученных от нетелей, которые родились от матерей имеющих разную продолжительность физиологических периодов неодинакова так живая масса телята второй и третьей групп на 3,3; 3,5 кг больше по сравнению с их живой массой их сверстниц их первой группы. Продолжительность отделения последа в группах: первой – 2,8±0,33; второй – 1,6±0,47; третьей – 1,8±0,40 ч (Р<0,05). Продолжительность инволюции матки мы изучали по двум показателям – это выделение лохий и результаты ректального исследования матки. В первые дни после родов у первотелок наблюдали обильные кровянистые выделения, особенно в период лежания животного. На 4-5 день после родов лохии приобретают темно-вишневый цвет, на 8-9 день после родов лохии становятся слизистыми и светлеют. В зависимости от группы животных наши наблюдения имеют отклонения в сторону уменьшения продолжительности выделений у животных второй и третьей групп и увеличения у животных первой группы. Продолжительность выделения лохий составила в группах: первой – 15,2±2,79; второй – 12,4±2,15; третьей – 13,8±4,11 дня, то есть на 2,8; 1,4 дня больше соответственно во второй и третьей группе, чем в первой. Ректальным исследованием яичника, матки (состояние шейки матки, консистенция рогов матки, их размер, отсутствие выделений при массаже матки, отсутствие желтого тела в яичниках) определяли окончание инволюции матки у исследуемых групп животных. 10 При этом оказалось, что продолжительность инволюции матки во многом зависит от величины физиологических периодов, а так же коррелирует с продолжительностью родов. Продолжительность послеродового периода составила в группах: первой – 28,0±3,20; второй – 20,6±1,62; третьей – 21,7±2,11 дня (Р<0,05). Более продолжительный послеродовый период у животных первой группы, видимо, является следствием более продолжительных родов из-за нарушения развития половых органов в плодный период. Репродуктивные качества коров-первотелок, полученных от коров-матерей с разной продолжительностью физиологических периодов, также имели свои особенности. Продолжительность периода проявления первого полового цикла после родов составила во второй группе – 23,9±2,48; третьей – 22,8±2,65 дня, что на 9,9; 11,0 дней меньше чем первой группы животных, разница статистически достоверна (Р<0,01). Заключение. При уровне молочной продуктивности коров 5000-6000 кг молока продолжительность физиологических периодов: сервис-период – 105,0 дней; лактация – 305,0 дней; период плодотворного осеменения – 80,5 дней, является оптимальным, так как обеспечивает повышение воспроизводительной способности телок (дочерей) по сравнению с контролем. Библиографический список 1. Баймишев, Х.Б. Влияние продолжительности сухостоя и лактации на воспроизводительные качества коров / Х.Б. Баймишев, Р.Г. Ильин // Известия Самарской ГСХА. – Самара. – 2010. –Вып. 1. – С. 8-11. 2. Баймишев, Х.Б. Репродуктивные качества первотелок в зависимости от продолжительности физиологических периодов их матерей / Х.Б. Баймишев, В.В. Альтергот // Известия Самарской ГСХА. – Самара. – 2010. – Вып. 1. – С. 39-43. 3. Волков, Г.К. Гигиена выращивания здорового молодняка // Ветеринария. – 2007. – №1. – С. 3-6. 4. Горев, Э.Л. Восстановление репродуктивной функции и аспекты ее регуляции у коров после родов. – Душанбе, 2010. – 339 с. 5. Нежданов, А. Интенсивность воспроизводства и молочная продуктивность к�� оров / А. Нежданов, Л. Сергеева, К. Лободин // Молочное и мясное скотоводство. – 2008. – № 5. – С. 2. 6. �� Перфилов�� , А.А. Репродуктивные качества коров в условиях интенсивной техн�� ологии производства молока / Х.Б. Баймишев, А.А. Перфилов // Известия Самарской ГСХА, 2006. – С. 10-11. 7. Романенко, Л. Выращивание ремонтного молодняка в высокопродуктивных стадах / Л. Романенко, В. Волгин // Главный зоотехник. - №6. – 2008. – 12 с. 8. Солдатов, А.П. Новые пути оздоровления и повышения продуктивности молочных коров // Зоотехния. – 2008. – № 2. – С. 16. 9. Шапиев, И.Ш. Исследование в биологии воспроизводства и искусственного осеменения животных / И.Ш. Шапиев, В.М. Прокопцев, В.Б. Дмитриев // Зоотехния. – 2007. – №10. – С. 28-30. 10. Эрнст, Л. Организация воспроизводства высокопродуктивных коров / Л. Эрнст, Т. Джапаридзе, А. Варнавский // Молочное и мясное скотоводство. – 2008. – №4. – С. 2-5. 11 REPRODUCTIVE QUALITY HEIFERS OBTAINED FROM COWS WITH DIFFERENT DURATION PERIODS OF PHYSIOLOGICAL Baimishev M.H. Key words: mass, age, lactation, dead, period, cycle, insemination, stelae, In particular, pregnancy, fertility, adapattsiya. The effect of duration of lactation and dry period on restoration, the productive capacity of heifers. It is established that fertility was above the beam-heifers whose mothers had a duration of lactation was 309 days, the service period - 105 days, the length of dead - 80 days. УДК 619:579 СПЕКТР ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ БАКТЕРИОФАГОВ PROVIDENCIA Н.Г. Барт, ассистент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, E-mail: bart [email protected] С.Н. Золотухин, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, E-mail: [email protected] Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, E-mail: [email protected] Ключевые слова: Бактериофаги, бактерии рода �� Providencia�� , литическая активность, селекция, пассирование, спектр. Работа посвящена определению спектра литической активности бактериофагов Providencia. Используя метод нанесения капель бактериофагов на газон исследуемой культуры авторами установлено, что изученные фаги обладали разным диапазоном литической активности, от 10-5 до 10-10 по Аппельману и от 108 до 109 по Грациа. Введение. Литическая активность бактериофага оценивается по его способности вызывать лизис бактериальной культуры в жидких или плотных питательных средах. Активность по методу Аппельмана выражается максимальным разведением, в котором испытуемый бактериофаг проявил свое литическое действие. Более точным методом оценки литической активности бактериофага является определение количества активных корпускул фага в единице объема по методу Грациа. Материалы и методы исследований. В качестве исследуемых культур использовали 28 (2 референс штамма и 26 выделенных нами «полевых») штаммов бактерий рода 12 Providencia. На поверхность МПА в чашках Петри пипеткой наносили 3-4 капли 18-24 часовой бульонной культуры исследуемых микроорганизмов. Затем равномерно распределяли по поверхности среды стерильным шпателем. Чашки ставили в термостат для подсушивания на 15-20 минут. После чего размечали чашки маркером на три сектора: на два сектора засеянного агара легким прикосновением пипетки, наносили каплю исследуемого фага; на третий сектор по центру в качестве контроля наносили стерильный МПБ, наклоняли чашку так, чтобы капли стекли, а затем инкубировали при температуре 37 °С. Выявление лизиса бактериального газона проводили через 18-24 часа (рис.1). Рис. 1. - Выявление лизиса бактериального газона исследуемой культуры �� Providencia rettgeri Результаты исследований и их обсуждение. В результате проведенных исследований нами установлено, что изученные фаги обладали разным диапазоном литической активности (табл. 1). Широким диапазоном по отношению к изучаемым культурам обладают фаги F-73 УГСХА и F-17 УГСХА – 60,7 %, F-20 УГСХА, F-1 УГСХА и F-28 УГСХА – 64,3 %, F- 9 УГСХА и F-41 УГСХА – 53,6 %, F-67 УГСХА – 85,7%, F-87 УГСХА – 82,1 %. Для дальнейшего изучения отобрали два бактериофага с наибольшим диапазоном по отношению к изучаемым культурам – фаг F-87 УГСХА, который лизировал 82,1 % и фаг F-67 УГСХА – 85,7 % штаммов бактерий рода Providencia, а в сумме фаги проявили литическое действие в отношении 96,4 % всех исследованных культур (табл. 2). 13 Таблица 1. Спектр литической активности бактериофагов Providencia № пп 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Фаги F-73 УГСХА F-45 УГСХА F-17 УГСХА F-20 УГСХА F-1 УГСХА F-70 УГСХА F-9 УГСХА F-7 УГСХА F-67 УГСХА F-87 УГСХА F-36 УГСХА F-38 УГСХА F-28 УГСХА F-41 УГСХА Количество испытанных штаммов провиденций 28 Из них чувствительных к фагу % лизируемых штаммов 17 60,7 5 17,9 17 60,7 18 64,3 18 64,3 4 14,3 15 53,6 5 17,9 24 85,7 23 82,1 13 46,4 5 17,9 18 64,3 15 53,6 Таблица 2. Спектр литической активности фагов F – 67 УГСХА и F – 87 УГСХА Фаги F-87 УГСХА F-67 УГСХА Общий % лизируемых штаммов культур Кол-во исследованных штаммов культур Общее кол-во лизируемых штаммов культур Кол-во лизируемых штаммов культур % лизируемых штаммов культур 28 27 24 23 85,7 82,1 96,4 Заключение. Проведенные исследования показали, что наибольшим спектром литической активности обладали два бактериофага Providencia, это F – 67 УГСХА и F – 87 УГСХА. Данные штаммы фагов были отобраны для конструирования диагностического биопрепарата. Библиографический список: 1.Бабков В.В. О лизогении среди энтеропатогенных кишечных палочек серологических групп О111: В4, О26:В6 и О124; В17 / В.В. Бабков, Э.К. Ленц // Проблемы бактериофагии и биологии кишечных бактерий: сб. кафедры микробиологии 1 Лен. Мед. ин-та им. акад. И.П. Павлова. – Л., 1973. – 163 с. 2.Габрилович И.М. Общая характеристика бактериофагов / И.М. Габрилович // Основы бактериофагии. – Минск. – 1973. – С. 5-24. 14 3.Золотухин С.Н. Создание и разработка схем применения диагностических биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий / С.Н. Золотухин // Автореф. дис. ... д-ра биол. наук. - Ульяновск, 2007. – 39 с. 4.Ковалева, Е.Н. Диапазон литического действия и специфичность бактериофагов Enterococcus faecalis / Е.Н. Ковалева, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. – Москва, 2009. – Приложение 1. – Т. 11, № 2. – С.19. 5.Покровский В.И. Медицинская микробиология. / В.И. Покровский, О.К. Поздеев – М.: Медицина. – 1999. – C. 389 – 393. 6.Ревенко И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике. – Киев: Урожай. – 1978. – С. 41-88. SPECTRUM LYSIS BACTERIOPHAGES PROVIDENCIA NG Barth, SN Zolotukhin, DA Vasiliev Keywords: Bacteriophages, bacteria of the genus Providencia, lytic activity, breeding, passaging of the spectrum. Paper is to define the spectrum of lytic activity of bacteriophages Providencia. Using the method of applying drops of bacteriophages on the lawn culture under study authors found that the phages studied had a different range of political activity, from 10-5 to 10-10 on Appelmanu and from 108 to 109 by Grazia. УДК 619:578.832.1 БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПОДХОД В РАЗАРБОТКЕ МЕТОДА ИДЕНТИФИКАЦИИ BORDETELLA BRONCHISEPTICA Ю.Б. Васильева, кандидат ветеринарных наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Е.Н. Семанина, ассистент кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Е.Г. Семанин, ассистент кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ 15 ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: фагоидентификация, Bordetella bronchiseptica, бордетеллез, бактериофаги Предложена схема ускоренной идентификации В�� ordetella�� bronchiseptica с помощью индикаторных фагов B.br.-1 УГСХА и B.br.–7 УГСХА. Чувствительность культуры к указанным индикаторным фагам служит основанием для дифференциации исследуемой культуры как вида В.bronchiseptica. Срок исследования при этом составляет 66 часов. Введение В настоящее время используют бактериологический метод выделения и идентификации бактерий В�� ordetella�� bronchiseptica (В.bronchiseptica), основанный на определении биохимических свойств выделенной культуры [3]. Сложность выделения B.bronchiseptica из внешней среды и от клинически больных животных стандартными бактериологическими методами обуславливает целесообразность разработки иных методов диагностики бордетеллеза [4]. Одним из актуальных диагностических методов является идентификация бактерий специфичными бактериофагами. Фаговые тесты позволяют дифференцировать близкородственные штаммы [1-7]. Фагодиагностика основана на специфической способности фагов взаимодействовать с определенными видами (идентификация) или типами (фаготипирование) бактерий, в результате чего происходит их лизис. Феномен лизиса является основой для использования фага в диагностических целях. Метод фагодиагностики широко используется в лабораторной практике для идентификации различных видов микроорганизмов [1-7]. Материалы и методы Работа была выполнена в научно-исследовательском инновационном центре микробиологии и биотехнологии Ульяновской ГСХА. Для опыта были использованы 5 референс-штаммов Bordetella bronchiseptica из коллекции музея НИИЦМиБ Ульяновской УГСХА (№ 1, 7, 214, 22067, 8344), штаммы бактериофагов �� B�� .�� br�� .-1 УГСХА, �� B�� .�� br�� .-7 УГСХА, выделенные нами методом индукции. Для бактериологической дифференциации �� B�� .�� bronchiseptica�� предложены следующие тесты, необходимость которых обоснована результатами наших исследований: тест на оксидазу, каталазу, желатиназу, нитраты, мочевину, подвижность, реакцию агглютинации, окраску по Граму, окраску по Ольту, среда Симмонса, селективная среда УГСХА BBR 57. Результаты и их обсуждение Ход исследования бактериологическим методом и методом фагоидентификации представлен на схеме. 16 Фагоидентификация заключалась в следующем: на поверхность МПА в чашках Петри пипеткой наносили 3 - 4 капли бульонной 18 часовой культуры исследуемых микроорганизмов. Нанесённую культуру равномерно распределяли по поверхности среды стерильным шпателем. Чашки Петри ставили в термостат для подслушивания на 15-20 минут. Агар в чашке Петри делили на три сектора. На поверхность засеянной среды пастеровской пипеткой на два сектора наносили по штамму фагов B.br.–1 УГСХА и B.br.–7 УГСХА, на третий сектор в качестве контроля наносили стерильный МПБ, наклоняли чашку Петри, чтобы капли стекли. Чашки Петри подслушивали в боксе в течение 15-20 минут, затем культивировали в термостате при 37ºС 12 часов. Наличие зоны лизиса на сплошном газоне культуры, хотя бы одного из фагов, указывало на принадлежность исследуемого штамма к B.bronchiseptica. Отрицательным считали результат при отсутствии лизиса на газоне культуры. Выводы Фагоидентификация B.bronchiseptica с помощью индикаторных бактериофагов B.br.–1 УГСХА и B.br.–7 УГСХА занимает 66 часов, бактериологический метод - 120 часов. Метод фагоиндентификации возбудителя экономичнее, так как на его проведение затрачивается меньшее количество лабораторной посуды, сред и реактивов. Также методика фагодиагностики бордетеллёза является высоко специфичной. Библиографический список 1. Адамс М. Бактериофаги // - М.: Медгиз – 1961. 521 с. 2. Равилов А.3. Микробиологические среды. / А.3. Равилов, Р.Я. Гильмутдинов, М.Ш. Хусаинов // Казань: Фэн, 1999. – 398 с. 17 14. Васильев Д.А. Выделение и идентификация Bordetella bronchiseptica от животных // Д.А. Васильев, А.В. Мастиленко, Д.Г. Сверкалова, Ю.Б. Васильева Ю.Б. / Естественные и технические науки. – 2010. - № 5 – С. 233-235. 4. Катмакова Н.П. Разработка и применение диагностического биопрепарата «YP – 09 УГСХА» на основе бактериофагов Yersinia pseudotuberculosis / Н.П. Катмакова // Автореф. дис. … канд. биол. наук. – Ульяновск, 2010 – 24 с. 5. Monack D.M., Falkow S. Cloning of Bordetella bronchiseptica urease genes and analysis of colonisation by a urease-negative mutant strain in a guinea-pig model // Mol. Microbiol. – 1993. – N 10. Р. 545–553. 6. Goodnow R.A. Biology of Bordetella bronchiseptica // Microbiological Reviews, Dec. – 1980, p.722-738. 7. Bemis D.A., Greisen H.A., Appel M.J. Bacteriological variation among Bordetella bronchiseptica isolates from dogs and other species // J. Clin. Microbiol. – 1997. – N 5. – Р. 471-480. IDENTIFICATION BORDETELLA BRONCHISEPTICA WITH SPECIFIC BACTERIOPHAGES Vasilyev D.A., Vasilieva Y.B., Semanina E.N., Semanin E.G. Key words: fagoidentifikatsiya, Bordetella bronchiseptica, bordetellez, bacteriophages A scheme for the accelerated identification Bordetella bronchiseptica using indicator phages B.br. - 1 UGSKHA and B.br. - 7 UGSKHA. Cultural sensitivity to these phages indicator (the phenomenon of lysis) is the basis for the differentiation of the study of culture as a form of B.bronchiseptica. Term studies with a decrease from 120 to 66 hours with minimum media and glassware. УДК 619:578.832.1 ИНДИКАЦИЯ BORDETELLA BRONCHISEPTICA ИЗ ОБЪЕКТОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ И КЛИНИЧЕСКИХ ОБРАЗЦОВ Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ю.Б. Васильева, кандидат ветеринарных наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Е.Н. Семанина, ассистент кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] 18 Е.Г. Семанин, ассистент кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: бактериофаги, Bordetella bronchiseptica, бордетеллез, РНФ В статье приведены результаты исследований по индикации Bordetella b�� ronchiseptica в объектах внешней среды и из клинических образцов биоматериала от собак и кошек с признаками респираторных заболеваний методом реакции нарастания титра фага (РНФ). В данной работе показана перспектива использования РНФ для диагностики бордетеллеза у домашних животных. Введение. Для разработки мер борьбы и профилактики инфекции животных, вызываемой Bordetella bronchiseptica (В. Bronchiseptica), остаются актуальными вопросы диагностики и индикации микроорганизма в разных субстратах. Метод позволяет за относительно короткий срок обнаружить возбудителя в различных субстратах в присутствии посторонней микрофлоры, без выделения чистой культуры, что имеет важное значение при исследовании носоглоточных выделений животных. В связи с вышесказанным целью научного исследования явилась апробирование метода индикации B.bronchiseptica из объектов внешней среды и клинических образцов реакцией нарастания титра фага. Материалы и методы исследований. Работа была выполнена в научно-исследовательском инновационном центре микробиологии и биотехнологии ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА» им. П.А. Столыпина. Для опыта были использованы 5 референс-штаммов Bordetella bronchiseptica из коллекции музея НИИЦМБ (№ 1, 7, 214, 22067, 8344). Реакцию нарастания титра фага ставили по методике В.Д. Тимакова и Д.М. Гольдфарба (1961), В.Я. Ганюшкина (1988). Для РНФ был использован разработанный нами биопрепарат «B.br. – 11 УГСХА» при исследовании объектов внешней среды (смывы с поилок и кормушек питомника для собак) и животных (нософаренгиальные смывы). Способ получения биоматериала от животных включал их предварительную фиксацию использованием зевника или шпателя для обеспечения доступа к задней стенке глотки и непосредственный забор материала стерильным ватно-марлевым тампоном. После забора материала с задней стенки глотки, тампон осторожно вынимали из пасти, не касаясь языка и щек, и проворачивая тампон вокруг своей оси, круговыми движениями втирали материал вначале по периферии агаровой среды в виде 4-5 площадок, а затем Z�� -образным штрихом в центре чашки. Стерильным шпателем растирали центральные части посева, не касаясь площадок. Каждую исследуемую пробу вносили в стерильную колбу объемом 100 мл, содержащую мясопептонный бульон (рН 7,2-7,4) в соотношении 1:10. Содержимое колбы встряхивали с последующим отстаиванием взвеси в течение 10 минут. Готовили 3 широкие пробирки (диаметр 20 мм) и нумеровали их (№1, №2, №3). В пробирки №1 , №2 вносили по 9 мл исследуемой взвеси, в пробирку № 3 вносили 9 мл стерильного МПБ. Затем в пробирки №1, и №3 добавляли 1 мл индикаторного фага �� B�� .�� br�� . – 7 УГСХА в рабо- 19 чем разведении, а в пробирки №2 вносили 1 мл МПБ (контроль на присутствие свободного фага). Рабочее разведение фага содержало 1х104 корпускул в 1 мл. Пробирка №1, в которой находилась взвесь образца и индикаторный фаг, являлась опытной. Пробирка №2 – без фага являлась контролем для выявления в пробах свободного фага. Пробирка №3 – контроль на титр индикаторного фага. Все три пробирки выдерживали в течение 7 часов при температуре 37ºС. После культивирования при температуре 37ºС содержимое каждой пробирки разводили питательным бульоном (рН 7,4-7,6) так, чтобы при высеве 1 мл содержимого из пробирки №3 (контроль на титр фага) на чашках Петри образовалось несколько десятков негативных колоний (зон лизиса) фага. В пробирке №3 индикаторный фаг находился в концентрации нескольких тысяч корпускул в 1 мл, и для того, чтобы получить в конечном разведении несколько десятков корпускул в 1 мл, содержимое пробирки №3 разводили в 20 раз, т.е. 0,25 мл исследуемой смеси внести в 4,5 мл бульона. Содержимое опытных пробирок №1 и №2, разводили аналогично. Инактивацию микрофлоры разведенных смесей пробирок №1, №2 и №3 проводили путем обработки хлороформом (в соотношении 1 часть хлороформа и 10 частей фаголизата) в течение 15 минут. После этого содержимое пробирок исследовали на определение числа корпускул бактериофага методом агаровых слоев. Для определения числа корпускул использовали МПА, содержащий 1,5% и 0,7% агара. Питательный агар разливали в чашки Петри по 25-30 мл. Для подавления роста грамположительных бактерий перед разливом добавляли к расплавленному агару 0,04%ный спиртовой раствор генцианвиолета (0,1 мл на каждые 100 мл МПА). Чашки Петри подсушивали в термостате в течение 2-3 часов. Индикаторные культуры бордетелл выращивали в МПБ в течение 18 часов. МПА с 0,7% содержанием агара расплавляли, охлаждали до температуры 46-48ºС, и помещали в водяную баню с такой же температурой. В пробирку добавляли 0,2 мл индикаторной бульонной культуры, 1 мл разведенной и прогретой исследуемой смеси, перемешивали и выливали вторым слоем на чашки Петри с 1,5%-ным МПА. Для определения количества корпускул фага в опытной пробе и в контроле титра (пробирки №1 и №3) использовали по две чашки Петри, для пробы на свободный фаг (пробирка №2) – одну чашку Петри. Через 20-30 минут после застывания верхнего слоя агара чашки Петри помещали в термостат на 12-16 часов. Результат реакции учитывали методом подсчета негативных колоний фага в опытных и контрольных чашках Петри. Положительная реакция характеризовалась увеличением количества корпускул хотя бы одного штамма фага по сравнению с контролем в 5 и более раз. Результаты исследований и их обсуждение. В результате постановки реакции нарастания титра фага при исследовании 10 фаренгиальных смывов кошек и собак и 5 смывов с кормушек и поилок питомника в 3 пробах обнаружены микроорганизмы B.bronchiseptica (таблица). 20 Таблица. Результат РНФ при исследовании объектов внешней среды и животных на наличие бактерий B. Bronchiseptica. Объекты исследования Смывы с глотки собак Проба № 1 Проба № 2 Проба № 3 Проба № 4 Проба № 5 Смывы с глотки кошек Проба № 1 Проба № 2 Проба № 3 Проба № 4 Проба № 5 Смывы с поилок и кормушек Проба № 1 Проба № 2 Проба № 3 Проба № 4 Проба № 5 Нарастание титра, раз Результат РНФ более 20 3 – более 20 – + – – + – – – 2 8 – – – – + – – – – – – – – – – – Результаты исследований показали, что РНФ с использованием биопрепарата «�� B�� .�� br�� .–11 УГСХА» позволяет обнаружить бордетеллы в исследуемом материале за 26 часов. Заключение. Таким образом, результаты проведенного исследования показали, что реакция нарастания титра фага по технике выполнения является простым и удобным, чувствительным и специфическим методом диагностики. Рекомендуем применение метода РНФ для выявления возбудителя бордетеллеза у домашних животных, который позволяет за относительно короткий срок обнаружить возбудителя в различных субстратах в присутствии посторонней микрофлоры, без выделения чистой культуры. Библиографический список 1. Адамс М. Бактериофаги // - М.: Медгиз – 1961. 521 с. 2. Шуляк Б.Ф. Руководство по бактериальным инфекциям собак. Т.2. Грамотрицательные бактерии. М.: ОЛИТА, 2003. – 608с. 3. Monack D. M., Falkow S. Cloning of Bordetella bronchiseptica urease genes and analysis of colonisation by a urease-negative mutant strain in a guinea-pig model // Mol. Microbiol. – 1993. – N 10. Р. 545–553. 4. Goodnow, R.A. Biology of Bordetella bronchiseptica // Microbiological Reviews, Dec. – 1980, p.722-738. 21 5. Mattoo, S., A. K. Foreman-Wykert, P. A. Cotter, and J. F. Miller. Mechanisms of Bordetella pathogenesis // Front. Biosci. – 2001. 168-186. INDICATION BORDETELLA BRONCHISEPTICA IN ENVIRONMENTAL OBJECTS AND DOMESTIC ANIMALS Vasilyev D.A., Vasilieva Y.B., Semanina E.N., Semanin E.G. Key words: bacteriophages, Bordetella bronchiseptica, bordetellez, RNFy The results of studies indicating Bordetella bronchiseptica in environmental objects and animals with clinical signs of the disease by the reaction of the phage titer rise. In the study of 15 samples in 3 of them has been found Bordetella bronchiseptica. In this paper the prospect of using the RNF to diagnose bordetelleza in domestic animals. УДК 636.92:611 ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ КАРТИНА СЕЛЕЗЕНКИ КРОЛИКОВ ПРИ СТРЕССЕ Т.Я. Вишневская, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Оренбургский ГАУ» тел. 8-912-343-48-40, 8 (3532) 77-54-61, [email protected] Л.Л.Абрамова, доктор биологических наук, профессор, ФГБОУ ВПО «Оренбургский ГАУ» тел. 8 (3532) 77-54-61, [email protected] Ключевые слова: кролики, селезенка, капсула лимфоидные узелки, центральная артерия. Работа посвящена изучению особенностей гистологического строения селезенки кролика, в условиях экспериментального стресса. Выявлено изменения гистологического строения функционально активных зон селезенки у животных в условиях стресса: преобладание лимфоидных узелков неправильно овальной формы с реактивными центрами разной площади, отек стенки центральных артерий и периваскулярной зоны лимфоидных узелков. Введение. В современных условиях кролиководства, животные подвергаются воздействию технологических стресс-факторов – во время транспортировки, вакцинации, изменении кормления и температурного режима, скученности. Стресс снижает резистентность организма и как следствие приводит к заболеваемости и падежу [2, 1]. На изменение условий внешней среды очень быстро реагируют органы иммунной системы [4, 6, 5, 3] одним, из которых является селезенка - периферический и самый крупный орган. 22 Селезенка является местом специфического иммунного ответа на антигены, циркулирующие в крови, в органе происходит антигензависимая пролиферация и дифференцировка Т- и В-лимфоцитов, образование антител. Цель работы: изучение особенностей гистологического строения функционально активных зон селезенки кролика, в условиях стресса. Материалы и методы исследования. Объектом исследования служили 18 половозрелых самцов кроликов породы советская шиншилла в возрасте 8 мес., аналогичных по массе, из которых сформировали две группы: контрольную (Ι) и опытную(ΙΙ). Экспериментальное моделирование стрессового состояния животных производили в течение 14 суток, с использованием уплотненной посадки и теплового климатического фактора, на базе КФХ «Раздолье», Тюльганского района, Оренбургской области. Животных ΙΙ группы подвергали стрессу (n=9). Кролики Ι группы служили контролем, содержались отдельно от остальных, их не подвергали стрессу (�� n�� =9). Все животные находились в одинаковых условиях содержания, их кормление осуществляли по нормам ВИЖа. Для гистологического исследования селезенки забирали пробы объемом 0,5см³. Полученный материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, заключали в парафин и приготавливали срезы толщиной 5-6 мкм, которые окрашивали гематоксилином-эозином и по Романовскому-Гимза. Цифровые версии микрофотографий получали на микроскопе MICROS�� (Австрия, ув.х1500) и цифровой видиокамеры, подвергали морфометрической обработке программой Test-morfo 2,8. В образце ткани измерения каждого показателя осуществляли не менее чем в 15 полях зрения каждого объекта. Для измерения лимфоидные узелки селезенки распределили на группы по величине диаметра: крупный диаметр от 500 мкм и выше, средний - 200 -500 мкм, мелкий – до 200мкм. Результаты исследований и их обсуждение. Установлено, что соединительнотканная капсула селезенки кроликов породы советская шиншилла представлена коллагеновыми, эластическими волокнами, гладкими мышечными клетками. Толщина капсулы селезенки опытных животных (при стрессе), в сравнении с контролем, достоверно уменьшалась на 45,7 %. В крупном лимфоидном узелке селезенки, диаметр центральной артерии незначительно увеличился на 3,6%, тогда как толщина ее стенки возросла на 58,4% (Р≤0,001); в среднем лимфоидном узелке их значения увеличились на 22,4% и 49,2% (Р≤0,001), соответственно; напротив, в первичном лимфоидном узелке они достоверно уменьшались на 19,2% и 31,8 %, соответственно, в сравнении с контролем. Площадь крупного лимфоидного узелка селезенки достоверно уменьшалась на 29,5%, среднего - на 37,8%, мелкого (первичного) - на 61,9%, относительно контроля. В первичном лимфоидном узелке разделения на зоны реактивного центра, мантийной, маргинальной и периартериальной – не выявлено. В периартериальной зоне, окружающей центральную артерию крупного и среднего лимфоидных узелков выявляются Т-лимфоциты, мигрирующие через гемокапилляры центральной артерии лимфоидного узелка. Площадь периартериальной зоны крупного лимфоидного узелка достоверно (Р≤0,001) увеличивалась в 2,1 раза, а среднего в 2,3 раза. В реактивном центре лимфоидных узелков селезенки идентифицируются ретикулоциты, макрофаги, В-лимфоциты, плазматические и дендритные клетки. Площадь реактивного центра в крупном лимфоидном узелке уменьшалась на 40,1%, а в среднем - на 32,3 %, 23 относительно контроля. Мантийная зона, образована скоплением малых В-лимфоцитов, макрофагов и плазмацитов. Площадь мантийной зоны крупного лимфоидного узелка уменьшалась на 39,9%, а среднего на 33,6%, в сравнении с контролем. Маргинальная зона включает Т- и В-лимфоциты. Площадь маргинальной зоны в крупном лимфоидном узелке уменьшалась на 22,2%, а в среднем на 40,5%, относительно контроля. Заключение. Таким образом, микроскопия селезенки кроликов, подвергающихся стрессу, позволила выявить особенности гистологического строения функционально активных зон селезенки, что выразилось в отеке стенки центральных артерий и периваскулярной зоны в крупных и средних лимфоидных узелков. Преобладали лимфоидные узелки неправильно овальной формы с реактивными центрами разной площади. Наблюдали гиперплазию лимфоидных узелков, слияние отдельных узелков друг с другом, а также, в отдельных участках, слияние лимфоидных узелков с периартериальными лимфоидными зонами. Библиографический список: 1. Зимин, Ю.И., Иммунитет и стресс / Ю.И. Зимин //Итоги науки и техники. Серия Иммунология. Т.8. М., 1979. - С.173-199. 2. Ковальчикова, М. Адаптация и стресс при содержании и разведении сельскохозяйственных животных /М. Ковальчикова, К. Ковальчик. М.: Колос, 1978.-240 с. 3. Коплик, Е.В. Клеточный состав лимфоидных образований селезенки крыс при воздействии острого эмоционального стресса/ Е.В. Коплик, А.А. Бахмет // Морфология. –2008. - № 4. - С. 75. 4. Першин, С.Б. Стресс и иммунитет /С.Б. Першин, Т.В. Кончугова. М.: Крон-пресс, 1996. - 160 с. 5. Пронин, А. В. Роль цитокинов в иммуномодулирующих эффектах фосфатов полипренолов - противовирусных препаратов нового поколения / А. В. Пронин, С. В. Ожерелков, А. Н. Наровлянский [и др.] // Russian J. Immunol - 2000. - V. 5. - № 2. - P. 155-164. 6. Сапин, М.Р. Иммунная система, стресс и иммунодефицит /М.Р. Сапин, Д.Б. Никитюк. М.: АЛЛ «Джангар», 2000. - 184 с. HISTOLOGICAL PICTURE OF SPLEEN RABBITS UNDER STRESS Vishnevskaya T.J. Abramova L.L. Key words: rabbits, spleen, lymphoid nodules capsule, the central artery. The work examines the characteristics of the histological structure of the spleen rabbit in experimental stress. Revealed changes in the histological structure of functionally active zones in the spleen of the animals under stress: the prevalence of lymphoid nodules rough oval shape with reactive centers of varying sizes, swelling of the walls of the central arteries and perivascular areas of lymphoid nodules. 24 УДК 631.363 (031) ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ВЫСОКОБЕЛКОВОГО ГРАНУЛЯТА С.Н. Воякин, кандидат технических наук, доцент ФГБОУ ВПО Дальневосточный государственный аграрный университет тел.: дом. 8(416-2)53-54-39, раб. 8(416-2)52-65-86, сот. 89145525075 [email protected] А.Н. Вишневский, аспирант ФГБОУ ВПО Дальневосточный государственный аграрный университет Ключевые слова: рыбокостная мука, соевая мука, технология производства, высокобелковый гранулят. Работа посвящена разработке технологии и параметров процесса производства высокобелкового гранулята для сельскохозяйственной птицы, определены параметры смесителя – гранулятора на основании полученных экспериментальным путем математических моделей. Полноценного кормления сельскохозяйственной птицы, можно добиться только лишь путем применения сбалансированных по питательным веществам рационов, Исходное сырье и компоненты Рыбокостное сырье W=50-55% Сельдевые Лососевые Смешивание 1:1 Не обезжиренная соевая мука, W=10% Смешивание 1:1 Формование гранул Грубое измельчение Сушка, W=8 – 10% Тонкое измельчение (фарш) Фасование, хранение, реализация Рис. 1. - Технологическая схема производства белково-минерального гранулята для сельскохозяйственной птицы на основе рыбного и соевого сырья 25 содержащих высокобелковые, минеральные и витаминные компоненты. Такими компонентами являются, прежде всего соевый, рыбная мука, а также ряд других [1]. В настоящее время рыбная мука (содержание протеина – 52,5%, минеральных веществ – 32,9%) готовится из непищевой рыбы и отходов рыбоперерабатывающей промышленности, причем процесс ее приготовления является относительно дорогостоящим [2]. Авторами статьи разработана технология производства гранулированной высокобелковой добавки для птицы на основе рыбокостного сырья и необезжиренной соевой муки (рис. 1). Экспериментальными исследованиями установлена массовая доля голов рыбы и костей позвоночных в рыбокостном сырье, а также усилия их резания (см. табл. 1) полученном от переработки сельдевых и лососевых пород рыб. Совокупность полученных экспериментальных данных по рыбокостному сырью и усилиям его резания, позволяет рекомендовать для осуществления процесса получения рыбокостной пасты, такую машину как измельчитель-пастоизготовитель кормов – «Волгарь - 5». Таблица 1. Характеристика процесса резания рыбокостного сырья Вид рыбного сырья Сельдевые Лососевые Усилие резания, Н наклонное резание резание пуансоном 78,1 67,62 Наименование части продукта Массовая доля части продукта, % головы 12,5 кость позвоночная 6,9 29,0 25,80 15,2 81,4 53,55 7,1 40,3 26,20 головы кость позвоночная С учетом полученных данных разработана конструктивно-технологическая схема линии производства белково-минерального гранулята (рис.2). Параметры смесителя - гранулятора и процесса сушки сформованных гранул определили на основании полученных экспериментальным путем математических моделей. Таким образом, на основании проведенных исследований научно обоснована технология и параметры процесса производства белково-минеральной кормовой добавки для рационов сельскохозяйственной птицы. 26 сырье υптр Волгарь-5 υп ωб ωн ωш Рыбокостная паста ДБ дозатор 3 Необезжиренная соевая мука 4 ДБ дозатор 1 2 5 ωш Гранулы 6 Смеситель гранулятор Лоток сетчатый Гранулят 7 Шкаф сушильный «Универсал» ЭСПИС-4 Рис. 2. - Конструктивно-технологическая схема производства белковоминерального гранулята: 1 – измельчитель - пастоизготовитель «Волгарь-5»; 2 – шнек; 3, 4 – бункера; 5 – смеситель-гранулятор; 6 – сетчатый лоток; 7 – сушильный шкаф ЭСПИС – 4 «Универсал» с девятью режимами работы Совокупность полученных данных, позволяет проектировать эффективные технологические линии по производству белково-минерального компонента для рационов сельскохозяйственной птицы. При этом, осуществление процесса сушки гранул до 8 -10% влажности с 32 – 34% их влажности вместо 50 – 55%, позволяет вдвое снизить удельные затраты мощности и довести их до кВт×ч/кг. Библиографический список: 1.Справочник: комбикорма, кормовые добавки и ЗЦМ – для животных / Крохина В.А. и др. – М.: Агропромиздат, 1990. – 304 с. 2.�� Дацун�� В.М., �� Шнейдерман�� С.И. Технология обработки гидробионтов. Производство кормовой, технической продукции и биологически активных веществ. – Владивосток, 1999. – 121 с. TECHNOLOGY PRODUCING HIGH – PROTEIN PELLETS S.N.Vojakin, Cand.Tech.Sci., the senior lecturer Far Eastern State Agrarian University Phones: home 8(416-2) 53-54-39, work 8(416-2) 52-65-86, mobile 89145525075 [email protected] 27 A.N. Vishnevsky, postgraduate student Far Eastern State Agrarian University Keywords: fishbone flour, soybean flour, production technology, high-protein pellets. The paper deals with the technology and parameters of the production process of highprotein pellets for poultry. The paper specifies the parameters of the mixer-granulator on the basis of mathematical models experimentally obtained. УДК 579.62 ВЫДЕЛЕНИЕ БАКТЕРИЙ ВИДА AEROMONAS SOBRIA И.Г.Горшков, научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел. 9170572024, [email protected] Н.Г.Куклина, научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел 9176192488, [email protected] Д.А. Викторов, к.б.н., старший научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел 9084775573, [email protected] Д.А.Васильев, д.б.н., профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: Aeromonas sobria, питательные среды, бактериологические тесты, биохимия, микробиология, биотехнология. Работа посвящена выделению бактерии вида Aeromonas sobria из объектов окружающей среды и объектов санитарного надзора. Актуальность. Бактерии рода Aeromonas были описаны еще в конце XIX века Санарелли. Он выделил их из крови и лимфы инфицированной лягушки [4]. Род Aeromonas вместе с Oceanimonas и Tolumonas образует семейство Aeromonadaceae. Клетки бактерий рода Aeromonas граммотрицательны, имеют палочковидную форму с округленными концами, диаметр клеток от 0,3 до 1,0 мкм, длина от 1,0 до 3,5 мкм. В природе встречаются в виде одиночных палочек, попарно или в виде коротких цепей. Большинство видов подвижны: Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae, Aeromonas eucrenophila, Aeromonas schubertii, Aeromonas sobria, Aeromonas veronii, но есть и не подвижные виды, в частности, Aeromonas salmonicida [2]. Бактерии рода Aeromonas широко распространены в пресной и соленой воде. 28 Некоторые виды бактерий данного рода относятся к группе болезнетворных микроорганизмов, вызывающих заболевания рыбы. Контаминированые аэромонадами морепродукты (рыба, ракообразные, моллюски), продукты растительного происхождения (овощи, фрукты, ягоды), а также свинина, говядина, баранина и мясо птицы, молочные продукты представляют особую опасность для человека. Роль аэромонад, передающихся с питьевой водой, как патогенных видов бактерий для человека на данный момент до конца не изучена. Существуют трудности в идентификации различных видов бактерий, принадлежащих к этому роду. Эти трудности связаны с незначительными различиями между видами, которые можно обнаружить только молекулярно-биологическими методами [3]. Целью исследования стало выделение штаммов бактерии Aeromonas sobria из объектов окружающей среды и объекты санитарного надзора. Объектом исследования явились 70 образцов воды из открытых водоемов, аквариумов, а также 40 образцов рыбы (карповых и лососевых), купленной на рынках города Ульяновска. Методы исследования. Образцы воды и смывы с рыб в количестве 1,0 мл засевали на 9,0 мл мясопептонного бульона, затем пробирки с пробами помещались в термостат на сутки при температуре 27 ºС. После суток инкубации проводился посев на чашки Петри с плотной селективной средой следующего состава: вода дистиллированная – 100,0 мл, сульфат магния – 0,02 г, гидрофосфат калия – 0,10 г, хлорид натрия – 0,50 г, крахмал растворимый – 0,20 г, пептон ферментированный – 1,0 г, хлорид бария – 0,20 г, агар-агар – 1,50 г, 0,01 % спиртовой раствор брильянтового зеленого – 1,0 мл. Стерилизацию предложенной питательной среды проводили автоклавированием при 0,5 атм. в течение 15 минут. После стерилизации к среде в асептических условиях добавляется 2,0 мл 10% водного раствора трифинилтетразолхлорида. Предлагаемая питательная среда была разработана группой авторов в результате серии исследований, проведённых ранее [1]. Засеянные чашки Петри помещались в термостат при 27 ºС на двое суток. После культивирования на поверхности среды образовались колонии двух типов: мелкие белые и крупные насыщенного красного цвета. С целью получения чистой монокультуры крупные красные колонии были пересеяны на МПБ и повторно проинкубированы в термостате при 27 ºС в течение 24 часов, после чего снова рассеяны на плотную селективную среду указанного выше состава. Полученные культуры были подвергнуты тестированию по следующим биохимическим и морфологическим показателям: 1) окраска по Граму, 2) тест на оксидазу, 3) тест на каталазу, 4) рост на 3% хлориде натрия, 5) тест на разжижение желатина, 6) тест на аргинин-декарбоксилазу, 7) тест на орнитин-декарбоксилазу. Результаты биохимических тестов представлены в таблице 1. 29 Таблица 1. Биологические свойства, характерные для Aeromonas �� sobria�� (по данным определителя Берджи). Признак Результат теста, xарактерный для Aeromonas sobria окраска по грамму оксидаза + каталаза рост на 3% хлориде натрия тест на разжижение желатина аргинин-декарбоксилаза орнитин-декарбоксилазу Вывод: Таким образом, из 110 исследуемых образцов воды и товарной рыбы было выделено и изучено 8 полевых штаммов Aeromonas sobria. Библиографический список: 1.Горшков, И.Г. Исследование особенностей азотного питания бактерий родов Aeromonas и Pseudomonas / И.Г. Горшков, Т.А. Гринева, А.П. Воротников, Н.Г. Куклина, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев // Международный научно-исследовательский журнал = Research journal of international studies. – Екатеринбург, 2013. – №1(8). – Ч. 1. – С. 75-76. 2.BERGEY’S MANUAL OF Systematic Bacteriology. Second Edition. USA 2007. 3.Bonadonna L., Aeromonas in acque potabtlt: Un rischio reale �� о�� potenziale? / Bonadonna L., Di Girolamo L // Ig. e sanita pubbt. -1994. – 50, № 2-3. – С 81-90. - Ит.; рез. фр., англ., нем. 4.Knut Karst. Vorkommen von vermehrungsfaehigen Aeromonasarten in Rohrinkrustationen eines staedtischen Wasserversordnungssystems. // Dissertation zur Erlangung des Doctorgrades der Zahnmedizin des Fachbereichs Humanmedizin der Johann Wolfgang Goethe Universitaet Frankfurt am Main, 2001. ISOLATION OF BACTERIA OF AEROMONAS SOBRIA Gorshkov I.G., Kooklina N.G., Viktorov D.A., Vasilyev D.A. Keywords: Aeromonas sobria, culture media, bacteriological tests, biochemistry, microbiology, biotechnology. The work is dedicated to the isolated bacteria species Aeromonas sobria from environmental and sanitation facilities. 30 УДК 579.22 ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ PSEUDOMONAS CHLORORAPHIS Т.А. Гринева, соискатель, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Tел. +79033201410, e-mail: [email protected] Д.А. Викторов, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел. +79084775573, [email protected] Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: Pseudomonas�� chlororaphis�� , диско-диффузионный метод, антибиотикорзистентность Работа посвящена изучению антибиотикочувствительности референс-штаммов �� Pseudomonas�� chlororaphis�� subsp�� . chlororaphis�� и �� Pseudomonas�� chlororaphis�� subsp�� . au�� reofaciens�� . При проведении исследования выявлена множественная антибиотикорезистентность изученных штаммов. Введение Псевдомонозы являются инфекцией, поражающей прудовую рыбу [1, 3]. Для поиска наиболее эффективных терапевтических средств в данной работе проводилось определение антибиотикочувствительности бактерий �� Pseudomonas�� chlororaphis�� . Препаратами, отличающимися наибольшей природной эффективностью в отношении Pseudo�� monas spp. являются: цефтазидим, гентамицин, ципрофлоксацин, миропенем, имипенем. Дополнительными препаратами может служить цифоперазон [2]. Второй целью исследования является поиск селективной добавки к питательным средам для выделения Pseu�� domonas chlororaphis. Материалы и методы Определение чувствительности к антибиотикам проводили диско-диффузионным методом у референс-штаммов Pseudomonas chlororaphis subsp. chlororaphis В-1246 и Pseudomonas�� chlororaphis�� subsp�� . �� aureofaciens�� В-1249, полученных во Всероссийской коллекции микроорганизмов (г. Пущино). Для посева выращивали культуру на МПА в чашках Петри при 28º С в течение 24 часов. Затем из 3-5 колоний готовили суспензию в стерильном физиологическом растворе. Приводили мутность бактериальной суспензии в соответствие со стандартом мутности (0,5 единиц бариевого стандарта МакФарланда). Посев культуры проводили с помощью стерильного тампона, смоченного в бактериальной суспензии, штрихообразными движениями по всей поверхности агара. После этого оставляли посевы для просушки на 3-5 минут. Затем на поверхность агара укладывали стандартные бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После инкубации в термостате при 28 ºС в течение 24 часов измеряли 31 диаметр зон задержки роста вокруг дисков. Результаты и обсуждение Результаты исследования представлены в таблице 1. Была установлена резистентность к β-лактамным антибиотикам, цефалоспоринам за исключением цефтазидима, к аминогликозидам (гентамицин и стрептомицин), тетрациклинам, нитрофуранам, фузидину, хлорамфениколу, рифампицину, ванкомицину, клиндамицину, линкомицину. Бактерии чувствительны к канамицину и ко всем исследованным хинолонам (норфлоксацин, офлоксацин, ципрофлоксацин, левофлоксацин, ломефлоксацин, моксифлоксацин, энрофлоксацин). Таблица 1. Диаметры зон подавления роста штаммов Pseudomonas chlororaphis subsp. chlororaphis В-1246 и Pseudomonas chlororaphis subsp. aureofaciens В-1249 СодержаАнти-бактериальные ние в диске, препараты мкг Ампициллин Амоксициллин Бензилпенициллин Карбенициллин Оксациллин Цефоперазон Цефотаксим Цефтриаксон Цефтазидим Цефамандолом Цефазолин Цефаклор Цефуроксим Цефалотин Гентамицин Неомицин Канамицин Стрептомицин Норфлоксацин Офлоксацин Ципрофлоксацин Левофлоксацин Ломефлоксацин Моксифлоксацин Энрофлоксацин Кларитромицин 32 10 20 10 100 10 75 30 30 30 30 30 30 30 30 10 30 30 30 10 5 5 5 10 5 5 15 Диаметр зон подавления роста (мм) Pseudomonas Pseudomonas chlororaphis chlororaphis subsp. subsp. aureofaciens chlororaphis 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 15 15 13 0 0 0 19 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 14 13 17 19 22 22 10 0 28 34 29 34 30 34 28 31 27 30 24 24 25 28 0 0 Ванкомицин Клиндамицин Линкомицин Фурадонин Фуразолидон Фурагин Тетрациклин Доксициклин Полимиксин Фузидин Хлорамфеникол Рифампицин 30 2 15 300 300 300 30 30 300 10 30 5 0 0 0 0 0 0 10 15 16 0 0 11 0 0 0 0 0 0 11 15 15 0 0 12 Выводы Проведенные исследования показали, что бактерии вида Pseudomonas�� chlorora�� phis обладают множественной антибиотикорезистентностью. Наиболее эффективными препаратами для терапии псевдомонозов, вызванных �� Pseudomonas�� chlororaphis�� , являются: цефтазидим и хинолоны. В качестве селективных компонентов питательных сред могут выступать β-лактамные антибиотики. Библиографический список: 1.Гринева, Т.А. Схема выделения Pseudomonas chlororaphis / Т.А. Гринева, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев // Вестник ветеринарии. – Ставрополь: «Энтропос», 2013. – №64(1/2013). – С. 18-20. 2.Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам / Методические указания МУК 4.2.1890-04 3.Hatai K. Pseudomonas chlororaphis as a Fish Pathogen. Bulletin of the Japenese Society of Scientific Fisheries. 1975. Volume 41:11. P.1203 DEFINITION ANTIBIOTIKOCHUVSTVITELNOSTI PSEUDOMONAS CHLORORAPHIS T. A. Grineva, D. A. Victorov, D. A. Vasilyev Keywords: Pseudomonas chlororaphis, disk diffusion method, antibiotikorzistentnost. Abstract: The work is devoted to the study of antibiotic susceptibility reference strains Pseudomonas chlororaphis subsp. chlororaphis and Pseudomonas chlororaphis subsp. aureofaciens. The study revealed multiple antibiotic resistance strains studied. 33 УДК 636.5.084:612 ПРИМЕНЕНИЕ СОЕВОЙ ОКАРЫ В ПИТАНИИ КУР С.В. Дежаткина, кандидат биологических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422)55-95-47, [email protected] Н.В. Силова, кандидат биологических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» В.В. Ахметова, кандидат биологических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: соевая окара, биохимические показатели, глюкоза, организм, общий белок, сыворотка крови, куры. Установлено положительное влияние добавок соевой окары на биохимические показатели крови кур. Введение. Российское птицеводство является одной из динамичных отраслей, так как постоянно служит наукоемкой основой многих исследователей и внедрению новых разработок. На его современном этапе актуальным остается полноценное белковое питание птицы со строго определенным набором аминокислот. Поэтому идет поиск новых источников энергии и протеина, которые были бы доступными и дешевыми, а также эффективными [1, 2, 3, 4, 5. 6]. Среди белковых добавок широко применяют жмыхи и шроты, содержащие до 35…50% сырого протеина и улучшающие яйценоскость и развитие птицы [1]. Использование ферментных препаратов с учетом зерно-злаковой основы рациона, а также в комплексе с цеолитом, позволяет существенно повысить рентабельность птицеводства и положительно влияет на воспроизводительную способность птиц [4]. В качестве растительных белковых кормов в птицеводстве используют также горох, кормовые бобы, люпин, вику и сою, в них высокое содержание протеина и аминокислот, а также отходы переработки семян рапса и подсолничника. Добавляют в рационы птиц отходы и от переработки животноводческой продукции, в том числе мясо-костную муку, перьевую муку, мясо-перьевую муку, кератиновые отходы (малоценное перо, волосы, рога, копыта) и другие [5, 6]. Соевые бобы содержат до 40% сырого протеина, с высоким уровнем лизина, метионина, но сдерживающим фактором использования сырых соевых бобов в птицеводстве является высокое содержание в них ингибиторов трипсина, которые вызывают снижение использования питательных веществ рациона и продуктивности, поносы и падеж птицы [2, 3]. Одним из эффективных способов обработки сои, улучшающих ее использование, является приготовление соевого «молока». На молочных заводах в результате отжима соевого молока на фильтр-прессе получают не токсичный отход производства - соевый жмых (окару), пищевая ценность которой определяется высококачественной белковой фракцией, липидным комплексом, углеводами, пищевыми волокнами, широким спектром макро- и микроэлементов, витаминов и антиоксидантов, имея низкую себестоимость производства 1 руб/кг [2, 3]. Целью исследования стало изучение показателей крови и продуктивности кур- 34 несушек при добавлении в их рацион соевой окары. Материал и методы исследования. Для достижения поставленной цели провели физиологический опыт на курах–несушках породы Хайсек-Браун в личном хозяйстве Засвияжского района Ульяновской области РФ. Таблица 1. Схема опыта Группы птиц Куры несушки 150 дн. возраста 1 -контроль 2-группа основной рацион (ОР) ОР + соевая окара Содержание кур было групповым, со свободным доступом к воде и пище, опыт проводили в течение трех месяцев. В группу птиц формировали по 5 голов, одинаковых по возрасту, живой массе и продуктивности (схема 1). Предметом исследования была кровь кур, изучение показателей которой проводили по общепринятым методикам, используя гематологический и биохимический анализатор Stat�� Fax�� , вели учет зоотехническим параметрам (яйценоскости, массе яиц). Результаты исследований и их обсуждение. Содержание глюкозы в крови - важный физиологический показатель, при снижении концентрации сахара в крови могут наступать судороги, поскольку это основной источник энергии для ЦНС, а при повышении уровня частично переходит в гликоген, который является запасным резервом организма. Анализ полученных данных (рис. 1) показал, что у кур опытной группы по сравнению с контролем уровень глюкозы в крови изменялся в рамках норм, то есть достоверно возрастал на 14% (�� p�� <0,05), указывая на усиление процессов гидролиза углеводов с образованием дополнительной энергии. +14% 9,58 ОПЫ Т 8,4 КОНТРОЛЬ ммоль/л 0 2 4 6 8 10 Рис. 1. - Уровень глюкозы в крови кур Аналогично изменялась концентрация общего белка в сыворотке крови кур, соответственно возрастала на 17,2% (рис. 2), свидетельствуя о повышении белкового обмена, при введении в рацион кур соевой окары в качестве белковой добавки. 35 +17,2% г/л 40 30 20 34,9 10 0 куры 40,9 ОР+ок ара к онтроль Рис. 2. - Концентрация общего белка в крови кур Это подтверждается достоверным понижением концентрации продуктов белкового обмена, в том числе мочевины (рис. 3) в крови кур опытной группы на 30% (p<0,05), креатинина на 12,4% (p<0,05) (рис. 4) по сравнению с данными в контроле. ммоль/л 0,2 0,2 Контроль 0,14 ОР+окара 0,1 - 30% 0 куры Рис. 3. - Концентрация мочевины в крови кур Вероятно, введение белковой соевой окары курам опытной группы способствовало усилению биосинтеза белка и положительному азотистому балансу. +11,4% 5,88 ОПЫТ КОНТРОЛЬ 6,5 0 2 4 6 8 10 ммоль/л Рис. 4. - Уровень билирубина в крови кур Содержание холестерина в крови кур при скармливании соевой окары достовер- 36 но возрастало в опытной группе в рамках физиологических норм (рис. 5), так во опытной увеличилось 42,7% (р<0,01) в сравнении с контролем, это говорит о стимуляции образования липоидов в печени. Таблица 2. Содержание кальция и фосфора в крови кур Группы животных 1 - контроль % 2 - ОР + соевая окара % от контроля (p>0,05) Кальций ммоль/л 2,75+0,67 100 3,16+1,29 114,91 Фосфор, ммоль/л 1,78+0,23 100 2,05+0,73 115,17 Уровень кальция и фосфора в крови кур при использовании соевой окары в качестве кормовой добавки имел выраженную тенденцию к увеличению в опытной группе соответственно на 14,9% и 15,2%, по отношению к контролю (табл. 2). Заключение. Обогащение рационов кур соевой окарой способствует повышению белкового обмена, уровню глюкозы, кальция и фосфора в их крови и снижению показателей азотистого обмена. Библиографический список: 1. Буряков Н. Высокопротеиновый шрот для цыплят / Н. Буряков, А. Заикина. // Животновоство России, апрель 2012. – С. 15-16. 2. Дежаткина С.В. Соевые отходы производства в свиноводстве / С.В. Дежаткина, А.З. Мухитов. // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.- Том 206. - 2011. - С. 55-60. 3. Дозоров А. Влияние соевой окары на активность ферментов у свиноматок и поросят /А. Дозоров, С. Дежаткина. //Свиноводство. - №8, ноябрь-декабрь 2011. - С. 28-32. 4. Ерисанова О.Е. Товарные и пищевые качества яиц кур при использовании препарата Коретрон / О.Е. Ерисанова, В.Е. Улитько, А.Г. Ариткин. //Зоотехния. - № 1. - 2011. – С. 27-29. 5. Околелова Т. Влияние КСС премиксов и БАВ на профилактику желудочно-кишечных заболеваний /Т.Околелова, Т. Кузнецова, А. Кузнецов, //Птицеводство. - 2011. – №9. – С. 37-38. 6. Околелова Т. Качественная кормовая рыбная мука нужна птицеводству /Т.Околелова, Р. Мансуров, В. Бевзюк //Птицеводство. - 2011. – №12. – С. 6-7. THE USE OF SOY OKARA IN THE DIET OF CHICKEN Dezhatkina S.V., Silova N.V., Achmetova V.V. Key words: soyа okara, biochemicy indicators, glucose, organism, whole protein, whey of blood, chikens. It was arranged positive influence additions soya okara on biochemicy indicators of blood of chikens. 37 УДК 636.612+636.2 ВЛИЯНИЕ ДОБАВОК СОЕВОЙ ОКАРЫ И ЦЕОЛИТОВ НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ В ПЕЧЕНИ ПОРОСЯТ С.В. Дежаткина, кандидат биологических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422)55-95-47, [email protected] А.З. Мухитов, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: соевая окара, цеолиты, ферменты, активность, поросята. Установлено положительное влияние добавок соевой окары и цеолитов на показатели активности АСТ и АЛТ в печени поросят. Введение. Промышленное свиноводство требует изыскать и применять доступные корма высокого качества, с полноценным набором питательных веществ, минеральных элементов и витаминов, с целью увеличения выхода и качества продукции свиней [6]. Решением этой проблемы может стать использование белково-минеральных комплексных добавок, в частности соевой окары и природных цеолитов. Это дешевые добавки местного производства, белковая соевая окара является отходом производства соевого молока на молочных заводах, в состав которой входят: пищевые диетические волокна, соевый белок и жир, витамины и минеральные вещества [2, 3, 5]. Природные цеолиты осадочного типа широко распространены в Поволжском регионе и служат хорошим источником минеральных веществ, способствуют очищению организма от тяжелых металлов и радиации, а также активизируют рост и продуктивность животных [4]. Цель исследования направлена на изучение активности ферментов в печени поросят при введении в их рацион добавок соевой окары и цеолитов. Материалы и методы исследований. Для достижения поставленной цели поставили физиологический опыт на свиноматках и поросятах крупной белой породы племзавода «Стройпластмасс-Агропродукт» Ульяновской области РФ. Содержание супоросных свиноматок было групповым, со свободным доступом к воде и пище. Лактирующие свиноматки с подсосными поросятами, до отъемного периода находились в индивидуальных клетках. В группу подбирали свиноматок по методу аналогов по 5 голов, одинаковых по возрасту, живой массе и физиологическому состоянию, которых осеменяли искусственно. Все исследования были выполнены на фоне кормления свиноматок рационами, сбалансированными по основным элементам питания, при этом в опытных группах к основному рациону (ОР) дозировали соевую окару, вместо гороха в зерносмеси с учетом питательности в кормовых единицах. В качестве минеральной добавки использовали природные цеолиты осадочного типа Сиуч-Юшанского месторождения Ульяновской области (кремнеземистый мергель). Были сформированы три группы: 1-я контрольная, получала основной хозяйственный рацион (ОР) состоящего из зерносмеси (100%), питательность которого составила 3,6 кг/кг кормовых единиц (к.ед.); 2-й опытной скармливали зерносмесь (93% по питательности рациона) и соевую окару (7%, по питательности рациона), питательность 38 соответствовала ОР - 3,6 кг/кг к.ед.; 3-й опытной группе дозировали в рацион, соответственно с учетом его питательности равной уровню в контроле (ОР), зерносмесь (93%) и соевую окару (7%), а в качестве минеральной добавки, не влияющей на общую питательность рациона, использовали природный цеолит - кремнеземистый мергель (3% от сухого вещества рациона) (табл.1). Таблица 1. Схема опыта Наименование 1 -контроль Свиноматки основной рацион (ОР) 2-группа ОР (93%)+ соевая окара (7%) 3-группа ОР (93%)+ соевая окара(7%) + цеолит Проводили убой поросят в недельном и двух месячном возрасте, для исследований брали печень, из которой готовили гомогенаты (супернатанты), в них определяли активность ферментов аланин- (АЛТ) и аспартатаминотрансфераз (АСТ) по унифицированным методикам, используя используя наборы реактивов фирмы «Юнимед» на приборе биохимический анализатор «Стат Факс 1904 плюс». Результаты исследований и их обсуждение. Ферменты группы трасаминаз содержатся в тканях организма и наибольшую активность проявляют в мышцах сердца, в печени и мозге, скелетной мускулатуре и других органах. При разрушении клеток этих органов, повышается уровень активности этих ферментов в крови в десятки раз. АСТ и АЛТ - клеточные ферменты, участвующие в обмене аминокислот, трансаминирование - перенос аминогруппы от аминокислот, имеющихся в избытке в данный момент в организме, на альфа-кетокислоту с образованием новой аминокислоты и альфа-кетокислоты. Это важная реакция биосинтеза заменимых аминокислот в организме, поэтому активность этих ферментов имеет большое клинико-диагностическое значение [1]. Таблица 2. Активность аминотрансфераз в печени поросят, n=3 Группы животных Поросята 7 сут. возраста 1 - контроль % АЛТ, нкат/л АСТ, нкат/л 465,00+36,86 100 245,00+53,46* 52,69 373,33+74,74 80,29 2785,00+115,14 100 1916,66+254,66* 68,82 1633,33+150,73** 58,65 2 - ОР + соевая окара % от контроля 3 - ОР + соевая окара + цеолит % от контроля Поросята 60 сут. возраста 1 - контроль 911,33+137,11 % 100 2 - ОР + соевая окара 525,33+142,96* % от контроля 57,64 3 - ОР + соевая окара + цеолит 754,67+111,85 % от контроля 82,81 *** р<0,001, ** р<0,01, *р<0,02 3414,67+81,18 100 2109,33+163,99*** 61,77 1691,33+130,81*** 49,53 39 Анализ результатов исследования показал (рис. 1, табл. 2), что в печени поросят 2-й опытной группы отмечены достоверные изменения к снижению активности АЛТ на 47,3% (Р<0,02) в 7-и суточном возрасте и на 42,4% (Р<0,02) в 60-и суточном, по сравнению с данными в контроле. 1000 нк ат/л 911,3 754,7 800 600 400 1 ОР 525,3 465 245 373,3 2 ОР+ окара 200 3 ОР+окара+цеолит 0 7 сут. в озр. 60 сут. в озр. Рис. 1. - Активность АЛТ в печени поросят У молодняка 3-й группы происходили аналогичные выраженные изменения активности этого фермента соответственно на 19,7% (Р>0,05) и на 17,2% (Р>0,05). Подобная динамика наблюдалась с активностью АСТ в печени подопытных поросят (рис. 2, табл. 2), то есть, отмечено достоверное уменьшение ее активности: у поросят 7-и суточного возраста 2-й группы на 31,2% (Р<0,02) и 3-й на 41,3% (Р<0,01); у 60-и суточных соответственно на 38,2% (Р<0,001) и 50,5% (Р<0,001), по отношению к контролю. нк ат/л 3000 2000 3414,7 2785 1916,7 1633,3 2109,3 1691,3 1 ОР 1000 2 ОР+ окара 0 7 сут. в озр. 60 сут. в озр. 3 ОР+окара+цеолит Рис. 2. - Активность АСТ в печени поросят Таким образом, показатели активности аминотрансфераз изменялись в рамках верхних границ физиологических норм, при этом активность АСТ была превышена в два раза, говоря о повышении процессов трансаминирования в тканях печени поросят. Заключение. Добавление в рационы свиноматок и поросят белково-минеральных добавок, в частности соевой окары и соевой окары в комплексе с цеолитом не вызывает нарушений работы клеток их печени, а способствует нормализации показателей активности аминотрансфераз, снижая общую нагрузку на печень. Библиографический список: 1. Баканов М.И. Функции печени. /М.И. Баканов. //Медицинский научный и учеб- 40 но-методический журнал, 2007. –№40. - С. 3- 16. 2. Дежаткина С.В. Соевые отходы производства в свиноводстве / С.В. Дежаткина, А.З. Мухитов. //Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.- Том 206. - 2011. - С. 55-60. 3. Дозоров А. Влияние соевой окары на активность ферментов у свиноматок и поросят /А. Дозоров, С. Дежаткина. //Свиноводство. - №8, ноябрь-декабрь 2011. - С. 28-32. 4. Любин Н.А. Физиологи-биохимический статус организма коров под влиянием кремнеземистого мергеля / Н.А. Любин, В.В. Ахметова, С.В. Дежаткина, В.В. Козлов. // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.- Том 206. - 2011. – С. 130- 138. 5. Некрасов Р.В Соевый протеиновый концентрат в комбикормах для молодняка свиней / Р.В. Некрасов и [ др.]. //Свиноводство. – октябрь/ноябрь №7. – 2011. - С. 26-28. 6. Темираев В.Х. Управление формированием мясной продуктивности и качеством продукции свиней и птицы путем оптимизации кормления / В.Х. Темираев. Автореф. диссерт д.б.н. - 2005. – 350с. INFLUENCE ADDITIONS OF SOY OKARA AND ZEOLITES THE ACTIVITY OF LIVER ENZYMES OF THE YOUNG Dezhatkina S.V., Mukhitov A.Z. Key words: soy okara, zeolites, enzymes, activity, pigs. The positive effect of additives soy Okara and zeolites on the indicators of the activity of AST and ALT in the liver pigs. УДК 636.29:619.611 АНАТОМО-ПРОЕКЦИОННОЕ ОБОСНОВАНИЕ БЛОКАД ОСНОВНЫХ НЕРВОВ В ОБЛАСТИ ПЛЮСНЫ У ВЕРБЛЮДА ПОРОДЫ КАЗАХСКИЙ БАКТРИАН Г. Х. Джубанышева,магистрант А.К. Днекешев, кандидат ветеринарных наук, доцент Западно-Казахстанский аграрно-технический университет имени Жангир хана [email protected] Ключевые слова: Местное обезболивание, анатомия задней конечности, блокада нервов,заболевания конечности у животных. В данной статье на основании анатомо-проекционного изучения анатомических образовании в области плюсны у верблюда породы казахский бактриан определены точки вкола иглы для проведения проводниковой анестезии основных нервов. Проводни- 41 ковое обезболивание основных нервов в области плюсны являются одним из основных видов местной анестезии, применение которого крайне необходима при проведении различных оперативных вмешательств в дистальной части задней конечности у верблюда-бактриана. Основными показаниями для оперативного лечения при заболеваниях опорнодвигательного аппарата у сельскохозяйственных животных являются различные травмы. Они в основном связаны с технологическим или сельскохозяйственным травматизмом в хозяйствах, и отсутствие хорошо отлаженной лечебной работы приводит к тому, что первичная хирургическая обработка раненого животного запаздывает, и в участках повреждения формируются различные септические очаги [1]. Часто эти оперативные вмешательства проводятся у животных и при так называемом биологическом травматизме (некробактериозе, копытной гнили, и других хирургической инфекции), когда обширные гнойно-некротические процессы на дистальной части конечностей вынуждают ветеринарного врача проводить различные сложные ортопедические операции. И эти операции в дистальной конечности могут быть выполнены только с применением местной анестезии, и в большей части случаев они выполняются в виде проводниковой анестезии на основании анатомического исследования [2,3,4,5]. В последние годы роль научных исследований в области топографической анатомии у сельскохозяйственных животных возрастает с их видовыми и породными особенностями в строении, результаты которых позволяют разрабатывать и проводить более рациональные и обоснованные способы диагностики и лечения при хирургических заболеваниях конечностей [6,7]. Целью нашего исследования было в процессе анатомо-проекционного изучения определить проекции основных нервов в области плюсны и на основании этого разработать точки вкола при проводниковом обезболивании у взрослых верблюдов породы казахский бактриан. Материалом для определения проекции на кожу основных нервов в области плюсны у верблюда породы казахский бактриан послужили 6 препаратов (дистальных конечностей) взятых у трех клинически здоровых животных из боен и частного сектора Жанакалинского района Западно-Казахстанской области в возрасте 5-7 лет. Экспериментальную и клиническую часть исследования проводили Жанакалинском районе Западно-Казахстанской области в частном секторе у хозяев имевшие более 5 голов верблюдов, общем в опыте по проводниковой анестезии основных нервов в области плюсны были использованы 6 взрослых животных. Препаровку основных нервов в области плюсны и пальцев проводили на свежих препаратах, для разрушения соединительнотканных элементов, окружающие нервы, пользовались 5%-ным раствором уксусной кислоты, который с помощью пипетки наносили на препарируемый участок. В ходе морфометрического изучения основных нервов в области плюсны и пальцев определялась ширина и толщина на различных уровнях плюсны. Линейные измерения проводили с помощью циркуля, металлической миллиметровой линейки и штангенциркулем. Проекции основных нервов определялись «на кожу» ориентируясь на хорошо 42 прощупываемые ориентиры в области плюсны и пальцев у верблюда-бактриана. При разработке метода проводниковой анестезии пальцев верблюдов нами учитывались и использовались общепринятые методические приемы, которые обычно находят применение при подобном обезболивании у других видов животных. Нами применялась периневральная анестезия, поскольку введение раствора вблизи нервного ствола технически легче и исключает возможность грубых повреждений нерва. Ввиду того, что оболочка, окружающая нерв, препятствует быстрому действию анестезирующих веществ, обычно использовался раствор новокаина ее высокой концентрации. Весь цифровой материал, полученный в процессе исследований, обрабатывался методами вариационной статистики [8,9]. Латинские названия анатомических образований даны по международной ветеринарной анатомической номенклатуре [10]. В ходе детального анатомического исследования было выявлено, что иннервацию дистального участка тазовой конечности у верблюда-бактриана в основном осуществляется большеберцовым нервом - n. tibialis, - являющийся крупной ветвью седалищного нерва. По ходу большеберцовый нерв на уровне проксимальной части бедренной кости отдает в каудальном направлении три крупные и четыре средние ветви в заднебедренную группу мышц. Далее нерв спускается дистально и на уровне середины голени отдает в толщу кожу плантарный кожный нерв и три крупные ветви в мышцы – дистальные мускульные ветви. После отделения указанных ветвей большеберцовый нерв, отделившись от малоберцового нерва, идет дистально между головками икроножного мускула, затем он выходит на медиальную поверхность голени в мощном сосудисто-нервном пучке вместе с артерией и веной сафена. Далее большеберцовый нерв вместе с артерией и веной сафена проходит дистально по медиальной поверхности скакательного сустава и на уровне верхней трети плюсны большеберцовый нерв делится на плантарные плюсневые нервы - медиальный и латеральный. На уровне середины плюсны нерв вместе с артерией плавно отклоняется на плантарную поверхность плюсны и идет дистально. У взрослых верблюдов породы казахский бактриан ширина большеберцового нерва на уровне верхней трети плюсны в среднем по группе были равны 10,06±0,14мм и толщина 3,53±0,08мм, при лимите соответственно 9,3-10,6мм и 3,3-3,8мм, где Cv=2,08%, (p<0,05) и Cv= 2,26%, (p<0,05). Проекция большеберцового нерва в области проксимальной части плюсны лежит на линии, проведенной сверху вниз по медио-плантарному желобу до нижнего конца верхней трети плюсны. Латеральный плантарный плюсневый нерв на уровне разветвления сухожилий пальцевых сгибателей делится в свою очередь на два специальных пальцевых нерва для 4-го пальца. До разветвления на специальные нервы, латеральный плантарный плюсневый нерв иннервирует сухожилия поверхностного и глубокого пальцевых сгибателей, межкостную среднюю мышцу и дорзо-латеральную поверхность плюсны. Ширина латерального плантарного плюсневого нерва у взрослых верблюдов была равна в среднем по группе 5,51±0,13мм и толщина 2,28 ±0,02 мм, где Cv=3,65%, (p<0,001) и Cv= 2,85%, (�� p�� <0,01). Проекцией латерального плантарного плюсневого нерва будет линия, проходящая по медио-плантарной поверхности плюсны с уровня нижнего конца верхней трети плюсны до точки деления сухожилий пальцевых сгибателей. Медиальный плантарный плюсневый нерв – n. medialis plantaris, после своего 43 ответвления от большеберцового нерва идет дистально в сосудисто-нервном пучке, прилегая к передней стенке поверхностной медио-плантарной плюсневой артерии вдоль медиального края сухожилия глубокого пальцевого сгибателя. По своему ходу медиальный плантарный плюсневый нерв иннервирует дистальную часть плюсны, ее медиальную, плантарную и дорсальную поверхности. На уровне середины средней трети плюсны медиальный плантарный плюсневый нерв делится на специальные пальцевые нервы для 3-го пальца - латеральный и медиальный. У взрослых животных наблюдаются следующие показатели промеров ширины нерва – 5,10±0,13мм и толщины -2,70±0,07мм при коэффициенте вариации соответственно Cv=3,92%, (p<0,001) и Cv= 4,07%, (p<0,01). Проекция медиального плантарного плюсневого нерва идет по линии, проведенной с уровня нижнего конца верхней трети плюсны дистально по медио-плантарному желобу до середины средней трети плюсны. Дорсальный плюсневый нерв – n. dorsalis metatarsea является продолжением малоберцового нерва. Нерв в проксимальной части плюсны лежит латеральнее дорсальной плюсневой артерии. Далее нерв спускается дистально, плавно переходя на середину дорсальной поверхности плюсны. По своему ходу дорсальный плюсневый нерв иннервирует дорсальные поверхности плюсны и путового сустава. Ширина и толщина латерального специального пальцевого нерва у взрослых верблюдов равны 4,91±0,13мм и 2,41±0,03мм, при коэффициенте вариации соответственно Cv=3,20%, (p<0,05) и Cv= 2,07%, (p<0,05). Проекцией дорсального плюсневого нерва является линия, проведенная от проксимального конца плюсны дистально по середине ее до дорсальной поверхности путовой кости. Таким образом, проведенные проекционные линии на кожу основных нервов в области плюсны у взрослых верблюдов породы казахский бактриан дает достоверный и точный материал по характеру взаиморасположения их с другими анатомическими образованиями в этих областях. Такая характеристика проекции анатомических образований необходима практикующим ветеринарным врачам при проведении различных оперативных вмешательств в области плюсны и пальцев у верблюда породы казахский бактриан. Также при проведении проводникового обезболивания в области плюсны у верблюда следующих нервов: большеберцового, латерального и медиального плантарного плюсневых нервов, латерального и медиального специальных пальцевых нервов для 4-го пальца и латерального и медиального специальных пальцевых нервов для 3-го пальца. Изложенные выше анатомо-топографические данные указывают на то, что иннервация в области плюсны верблюда–бактриана осуществляется следующими основными нервами: ветвями большеберцового и малоберцового нервов на тазовой конечности. Иннервация пальцев тазовых конечностей осуществляется нервами: медиальными и латеральными пальмарными (плантарными) нервами и 4-мя специальными пальцевыми нервами для каждой конечности. В иннервации дорсальной поверхности плюсны участвуют концевые ветви лучевого и малоберцового нервов. Исходя из этих данных, нами были разработаны методики осуществления проводникового обезболивания основных нервов в этих областях. Блокада большеберцового нерва производится на уровне середины верхней трети плюсны. Ориентиром вкола служит медиальный плантарный желоб, где вначале 44 прощупывается поверхностная медио-плантарная плюсневая артерия. Затем, отступив от нее на 5мм к сухожилиям пальцевых сгибателей производим вкол иглы снизу вверх в два момента: сначала прокалывается кожа, подкожная клетчатка, поверхностная фасция, и затем -листок глубокой фасции. Глубина вкола иглы 8-10 мм, вводится 10 мл 3%ного раствора новокаина (рис.1- 1). Блокада дорсального плюсневого нерва производится на уровне середины плюсны на дорсальной ее поверхности. Ориентиром здесь служит медиальный край сухожилия длинного пальцевого разгибателя. Игла вкалывается сверху вниз до упора в плюсневую кость, затем чуть оттянув иглу вводим 5 мл 3%-ного раствора новокаина. Блокада медиального и латерального плантарных плюсневых нервов производится на уровне середины плюсны на плантарной поверхности этой области путем двух инъекций: а) для блокады медиального плантарного плюсневого нерва игла вкалывается параллельно артерии, сверху вниз, отступив от нее медиально 5мм, вводится 8 мл 3%ного раствора новокаина. Ориентиром здесь служит задний край плюсневой кости на этом уровне (рис.1 -2). б) для блокады латерального плантарного плюсневого нерва вначале прощупывается пульсация поверх- Рис.1. - Проводниковое ностной медио-плантарной плюсневой артерии и игла обезболивание области вкалывается сверху вниз параллельно артерии и, отступив плюсны (медио-плантарот нее латерально 5мм, вводится 8 мл 3%-ного раствора ная поверхность): новокаина (рис. 1-3). 1.Блокада большеберцовоКак показали экспериментальные и клинические го нерва. наблюдения на 8 тазовых конечностях подопытных вер- 2. Блокада медиального блюдов-бактрианов, при всех вышеописанных блокадах плантарного нерва. нервов пясти, плюсны и пальцев, полная анестезия на- 3. Блокада латерального ступала спустя 5-10 минут после инъекции, животные не плантарного нерва. реагировали даже на глубокие уколы иглой в области дистальных отделов конечности. Потеря болевой чувствительности пальцев в среднем продолжалась 40-60 минут. Проведенные в дальнейшем операции по клиническим показаниям: 2-х случаях при хирургических обработках ран, осложненных гнойно-некротическими процессами, в 1-ом случае при обрезании сломанного когтя у верблюда-бактриана, также наглядно показали, что разработанная нами техника проводниковой анестезии обеспечивает достаточно хорошее обезболивание области пясти, плюсны и пальцев. Библиографический список: 1.Островский Н.С. О путях перехода гнойно-некротических процессов на копыт- 45 цевый сустав у крупного рогатого скота//Труды Новочеркас. зоотехн. вет. ин-та.- Новочеркасск, 1962.-Вып.14.- С.95-98. 2.Днекешев, А.К. Топографо-анатомическое обоснование блокад нервов пальцев грудной конечности верблюда-бактриана/А.К. Днекешев//Международная научно-практическая конференция «Сохранение окружающей среды – важнейшая проблема современности». - Уральск, 2005. – С. 323-324. 3.Лебедева Н.М. К вопросу о блокаде нервов пальца грудной конечности у крупного рогатого скота// Тезисы докл. науч. конф. Ленинградского ветеринарного ин-та.- Л., 1953.- С.42-44. 4.Мосин В.В. Новое в методике новокаиновой блокады у животных// Ветеринария.- 1953.- № 1.- С.33-37. 5.Дмитриева Т.А. Общее и местное обезболивание в ветеринарной хирургии .-Оренбург.: ОГАУ, 2001.- 112 с. 6.Днекешев, А.К. Особенности постановки и формы глазницы у верблюда-бактриана /А.К. Днекешев, А.К. Жубандыков//Международная научно-практическая конференция «Сохранение окружающей среды – важнейшая проблема современности». - Уральск, 2005. – С.325-326. 7.Днекешев, А.К. К вопросу об анатомии подглазничного отверстия у верблюдабактриана/ А.К. Днекешев //Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова. – 2006. - №3. – С.6-7. 8.Лакин Г.Ф. Биометрия.- М.: Высшая школа,1980.- С.40-244. 9.Садовский Н.В. Константные методы математической обработки количественных показателей//Ветеринария.-1975.-Вып.11.-С.42-46. 10.Удовин Г.М. Международная ветеринарная анатомическая номенклатура на латинском и русском языках.-М.:Типография МВА,1980.-262 с. УДК 619:615.015.4 ИЗУЧЕНИЕ МЕСТНО-РАЗДРАЖАЮЩИХ И АЛЛЕРГЕННЫХ СВОЙСТВ ПРЕПАРАТА ЭМИДОНОЛ 10% Е.С. Енгашева, кандидат ветеринарных наук, ООО «НВЦ Агроветзащита», г. Москва, (495) 721-49-82, [email protected] Д. Д. Новиков, кандидат ветеринарных наук, ООО «НВЦ Агроветзащита», г. Москва, (495) 721-49-82, [email protected] Р. Ф. Тухфатова, кандидат биологических наук, доцент кафедры фармакологии и токсикологии им. И. Е. Мозгова ФГБОУ ВПО МГАВМиБ, [email protected] Ю. Е. Кузнецов, кандидат ветеринарных наук, ассистент кафедры паразитологи ФГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», [email protected] Ключевые слова: эмидонол 10% раствор, местно-раздражающие и аллерген- 46 ные свойства, кролики, морские свинки. Препарат не обладает местно-раздражающими свойствами и не вызывает аллергической реакции у животных в испытанных дозах. Введение. Широкий спектр фармакологического действия 2-метил-6-метил-3 оксипиридина сукцината подтвержден при лечении животных при токсикозах, стрессовых ситуациях при перевозке и т.д. (Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д., 1995; Sherding R�� .�� G�� ., 1983; Zubay�� G�� ., 1993 и др.). У животных, получавших 2-метил-6-метил-3 оксипиридина сукцинат заметно увеличивается энергетический потенциал, ярко проявлялись породные признаки собак, улучшалась управляемость ими (Бурлакова Е.Б., 1998; Антрошенко О.Н., 1997 и др.). Фирмой ООО «НВЦ Агроветзащита» разработан и представлен для изучения препарат Эмидонол 10% в форме раствора для инъекций, который содержит в 1 мл в качестве действующего вещества 2-метил-6-метил-3 оксипиридина сукцинат - 100 мг/мл. Целью наших исследований явилось изучение местно-раздражающих и аллергенных свойств препарата. Материалы и методы исследований. Кожно-резорбтивное действие препарата изучалось в повторном опыте на 20 белых мышах. Животных помещали в специальные домики, а их хвосты на 2/3 длины погружали в пробирки с чистым препаратом. Экспозиция 2 часа на протяжении 14 дней. Контрольные животные находились в тех же условиях, а их хвосты погружались в воду. При изучении способности препарата проникать через кожу использовались те же показатели, что и в предыдущем опыте. Раздражающее и аллергическое действие препарата изучалось на 5 кроликах породы «Шиншилла», согласно Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, 2007. В первой серии опыта проведено тестирование препарата в разных концентрациях. Препарат наносился на выстриженные (3х3) участки боковой поверхности кожи кроликов 5 раз в неделю на протяжении 2-х недель. Ежедневная экспозиция – 4 часа, после чего препарат смывали водой. Реакцию кожи оценивали по шкале Суворова. Этот опыт позволяет выявить опасность развития неаллергического контактного дерматита и одновременно подобрать концентрацию, не обладающую раздражающим действием. Во второй серии, препарат в «рабочей дозе» наносился на левый бок кролика, где выстригался участок кожи размером 4х4 см. Экспозиция 4 часа, 5 раз в неделю, на протяжении 20 дней. Первое тестирование по шкале оценки кожных проб проводилось через 10 дней. При этом выстригали кожу на противоположном боку кролика и наносили препарат в той же дозе. Реакцию кожи анализировали на 24, 48 и 72 часа после смывания продукта. При отрицательном результате опыт продолжили и довели число аппликаций до 20, после чего проводили повторное тестирование. Для количественной оценки сенсибилизации к препарату использовали иммунологический метод по выявлению реакции клеток крови на аллерген «in vitro» - реакцию дегрануляции тучных клеток (РНДТК) и реакцию гистаминового шока. 47 Исследование раздражающего действия препарата на слизистые оболочки глаз проводили на кроликах. Препарат в количестве 3-х капель вносился в конъюнктивальный мешок правого глаза трем кроликам. Левые глаза кроликов служили контролем. Наблюдение за состоянием животных проводилось в течение 2-х недель. Оценку раздражающего действия проводили по рекомендациям A. Maida и K.Chrusaielska, учитывая изменение кровенаполнения конъюнктивы, состояние роговицы и радужной оболочки, количество выделений из глаз. Результаты исследований и их обсуждение. Опыт проведен на 10 кроликах. Результаты исследования раздражающих свойств препарата показали, что нанесение Эмидонола 10% на кожу в дозах 0,2 – 0,4 мл/кг ежедневно в течение 15 суток не вызывало у кроликов изменений кожного покрова. Не отмечено покраснения кожи, утолщения кожной складки и выпадения подстриженной шерсти и шерсти граничащей с выстриженными участками. При пальпации выстриженных участков кожи не наблюдали болезненной реакции у животных. Данные гематологических показателей свидетельствуют, что нанесение препарата на выстриженные участки кожи кроликов в дозах 0,2 и 0,4 мл в течение 15 суток существенно не изменяли картину крови животных (таблица 1 и 2). Опыт по изучению раздражающих свойств препарата на слизистые оболочки глаз провели на 5 кроликах. Раздражающее действие препарата на слизистые оболочки глаз определяли по «глазной пробе» (В.В. Гацура, 1974). В конъюнктивальный мешок левого глаза 5-и кроликам закапывали 1-2 капли препарата, а в конъюнктивальный мешок правого - 1-2 капли воды. За животными вели наблюдение на протяжении 15 суток. Оценку раздражающего действия проводили через 1,2, 3, 4 и 24 часа, 3-7 и 15 суток визуально по изменению кровенаполнения конъюнктивы, наличию лакримации и состоянию роговицы по 10-ти бальной системе согласно таблице 3. Таблица 1. Гематологические показатели кроликов до и после многократного нанесения препарата в дозе 0,2 мл/кг в течение 15 дней (средние данные по 5 животным) Сроки наблюдения Гемоглобин ммоль/л До опыта 1час 1 сутки 5 суток 10 суток 7,2±0,2 8,8±0,3 6,0±0,5 7,4±0,2 8,2±0,4 Эритроциты 1012/л 3,8±0,3 4,4±0,1 4,2±0,2 4,0±0,3 4,3±0,3 Лейкоциты 109/л 6,7±0,4 6,4±0,3 6,8±0,2 7,3±0,1 6,9±0,3 СОЭ мм/ч 2,0±0,2 2,8±0,1 3,1±0,3 2,8±0,3 2,6±0,2 Таблица 2. Гематологические показатели кроликов до и после нанесения препарата в дозе 0,4 мл/кг в течение 15 дней (средние данные по 5 животным) Сроки наблюдения До опыта 48 Гемоглобин ммоль/л 6,4±0,2 Эритроциты 1012/л 5,0±0,3 Лейкоциты 109/л 6,4±0,4 СОЭ мм/ч 2,2±0,1 1час 1 сутки 5 суток 10 суток 7,5±0,4 8,6±0,3 7,0±0,5 6,8±0,2 4,8±0,2 4,6±0,3 5,4±0,5 6,1±0,2 7,2±0,1 7,4±0,4 7,6±0,2 7,3±0,3 2,8±0,4 3,0±0,2 3,4±0,5 3,2±0,4 Таблица 3. Интенсивность реакции Отсутствие реакции Слабая реакция Выраженная гиперемия Наличие лакримации Наличие выделений Длительная, ярко выраженная гиперемия, лакримация, отек век Оценка в баллах 0 2 4 6 8 10 Раздражающий эффект Отсутствует Слабый Слабо выраженный Умеренный Выраженный Сильно выраженный Через 1 час после введения препарата у всех опытных животных наблюдали слезотечение и выраженную гиперемию конъюнктивы с оценкой 4 балла. Через 2, 3 и 4 часа конъюнктива оставалась слабовыраженной в той же степени - 4 балла. Спустя 24 часа у всех кроликов на слизистой глаз имело место наличие лакримации и отека век (раздражающий эффект - умеренный). На 2 сутки отмечали ярко выраженную гиперемию и лакримацию (раздражающий эффект - умеренный). На 4-е сутки признаки раздражения слизистой глаз постепенно исчезали. На 7 сутки видимых изменений на слизистой оболочки глаз не наблюдали. Таким образом, было установлено, что испытуемый препарат обладает умеренным раздражающим эффектом на слизистые оболочки глаз в течение первых 2 суток. Изучение аллергизирующего действия Эмидонола 10%. При введении подопытным животным гистамина наблюдалась следующая реакция: возбуждение, частая дефекация, мочеиспускание, учащенное дыхание, судороги и смерть. Критерием оценки служило время от момента введения гистамина до момента бокового положения животных. Время наступления гистаминового шока у подопытных и контрольных животных находилось в близких пределах (Р>0,05). Не было отмечено укорочения периода наступления гистаминового шока при введении Эмидонола 10% как в терапевтической, так и в три раза увеличенной терапевтической дозах (таблица 4). Препарат в указанных дозах не потенцировал эффекта гистамина и, следовательно, не проявлял аллергизирующих свойств. У подопытных морских свинок характер протекания гистаминового шока не отличался от такового у контрольных животных. В своих исследованиях мы применили также тест непрямой реакции дегрануляции тучных клеток крыс (РНДТК). 49 Таблица 4. Результаты изучения аллергизирующей активности препарата Эмидонол 10% (метод гистаминового шока, Р>0,05) Доза, мг/кг по ДВ Время введения гистамина после Эмидонола 10%, час 20 60 3,0 3,0 Время наступления гистаминового шока, мин Животные Подопытные Контрольные М±m М±m 20,3±0,10 20,09±0,30 20,19±0,12 20,10±0,20 Опыты по изучению аллергенных свойств по тесту «непрямой реакции дегрануляции тучных клеток» показали, что при подкожном введении препарата в терапевтической и в три раза увеличенной дозах на первые сутки после введения, процент дегранулированных клеток не превышал десяти (таблица 5). На 5, 10 и 15 сутки после введения препарата, процент дегранулированных клеток находился в пределах 4,8±0,2 – 2,8±0,30. Таким образом, наибольший процент дегранулированных клеток наблюдался на первые сутки после введения препарата Эмидонол 10% в дозах: 0,2 и 0,6 мл/кг, но и в эти сроки по количеству дегранулированных клеток, реакция считается отрицательной. Таблица 5. Результаты изучения аллергенной активности препарата Эмидонол 10% в реакции непрямой дегрануляции тучных клеток Доза мг/кг по ДВ Способ введения 20 60 20 60 20 60 20 60 Подкожно Подкожно Подкожно Подкожно Подкожно Подкожно Подкожно Подкожно Сроки убоя животных, сутки 1 1 5 5 10 10 15 15 Процент дегранулированных клеток 9,6±0,3 9,4±0,4 4,8±0,2 3,6±0,2 3,9±0,12 3,0±0,10 3,7±0,12 2,8±0,3 Реакция (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) Таким образом, с использованием двух высокочувствительных тестов для определения аллергизирующей активности препарата Эмидонол 10%: «гистаминового шока» и РНДТК, мы установили, что препарат при подкожном пути введения в терапевтической и в три раза увеличенной дозах, не потенцирует влияние гистамина и не вызывает дегрануляции тучных клеток крыс, выходящие за пределы нормы. Заключение. Препарат не обладает местно-раздражающими свойствами и не вызывает аллергической реакции у животных в испытанных дозах. Библиографический список: 1.Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта /2-ое изд. переработ. доп.- Л.: Мед. Литература, 1963. с. 152 , 81-101. 50 2.Бурлакова Е.Б. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии. М., 1976. 3.Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты вчера, сегодня, завтра: Сборник трудов V Международной конференции Биоантиоксидант. М., 1998. 4.Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д.- Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС.-М.- 1995.-272 С. STUDY LOCAL IRRITANT AND ALLERGENIC PROPERTIES OF THE DRUG EMIDONOL 10% Engasheva E.S., Novikov D.D., Tuhfatova R.F., Kuznetsov Y.E. Key words: emidonol 10% solution, local irritant and allergenic properties, rabbits, guinea pigs. Drug has no local irritant and does not cause an allergic reaction in the animals tested doses. УДК 619:615.015.4 КУМУЛЯТИВНЫЕ СВОЙСТВА ПРЕПАРАТА ЭМИДОНОЛ 10% Е.С. Енгашева, кандидат ветеринарных наук, ООО «НВЦ Агроветзащита», г. Москва, (495) 721-49-82, [email protected] В.В. Напалкова, кандидат биологических наук, ФГБУ «ВГНКИ» г. Москва, [email protected] Ю. Е. Кузнецов, кандидат ветеринарных наук, ассистент кафедры паразитологи ФГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», [email protected] Р. Ф. Тухфатова, кандидат биологических наук, доцент кафедры фармакологии и токсикологии им. И. Е. Мозгова ФГБОУ ВПО МГАВМиБ, [email protected] Ключевые слова: крысы, эмидонол 10% раствор, кумуляция. Эмидонол 10% обладает слабовыраженной как материальной, так и функциональной кумуляцией, проявляющейся только в результате получения в конце эксперимента больших суммарных доз, в несколько раз превышающих рекомендуемую для практического применения. Введение. Лекарственное средство Эмидонол 10% относится к антиоксидантным препаратам. Механизм действия эмидонола заключается в специфическом влиянии на 51 энергетический обмен посредством снижения интенсивности перекисного окисления липидов в мембранных клетках и связывания свободных радикалов, что приводит к увеличению степени энергизации клеток в условиях кислородной недостаточности. В лечебной практике препарат находит все большее применение. Фирмой ООО «НВЦ Агроветзащита» разработан и представлен для изучения кумулятивных свойств препарат Эмидонол 10% в форме раствора для парентерального применения, который содержит в 1 мл в качестве действующего вещества субстанцию эмидонол® – 100 мг и вспомогательное вещество. Материалы и методы исследований. Использовался метод, рекомендованный для нетоксичных соединений (Беленький М.Л., 1963, Методы определения токсичности и опасности химических веществ, 1970). Препарат вводился в желудок белых крыс в постоянной дозе, составляющей 1/5 от максимально-введенной дозы (МПД) 10,15 г/кг, т.е ежедневно вводимая доза составляла 2,0 г/кг, с постоянной корректировкой дозы в зависимости от массы тела животных. Учитывали как материальную (гибель животных), так и функциональную кумуляцию. При изучении функциональной кумуляции проводилась оценка ряда показателей: -регистрировалась масса тела, измерялась ректальная температура, определялся суммационно-пороговый показатель (СПП), проводился анализ периферической крови (гемоглобин, лейкоциты, эритроциты), регистрировались некоторые поведенческие реакции животных. Длительность эксперимента 15 дней. Всего введено 3 МПД, введенных однократно. Результаты исследований и их обсуждение. На основании полученных результатов (таб. 1) проведен расчет среднесмертельной дозы в повторном эксперименте. Поскольку 100% гибель получить не удалось, использовать формулу Кербера для определения ЛД50-п, не представляется возможным. Поэтому этот параметр, а также ЛД16, ЛД84 и ЛД100 были рассчитаны с помощью графического метода анализа «доза – эффект». Для этого результаты гибели животных от каждой из суммарных доз были нанесены на график в двойном логарифмическом масштабе, а затем аппроксимированы прямой. От точек, соответствующих введенным дозам, был опущен перпендикуляр до пересечения с осью абсцисс. С помощью полученного графика определены названные параметры токсичности, которые составили – ЛД16=24,3 г/кг; ЛД50=32 г/ кг; ЛД84=41,0 г/кг; ЛД100=50,0 г/кг. Стандартная ошибка устанавливалась по формуле Гаддама S=(K x s x d)/ n; где K=0.564; d (средняя интервала между дозами)=2,0; s=(ЛД84 – ЛД16)/2= (42-24,3)/2=8,35 г/кг. Таблица 1. Результаты определения гибели животных в подостром эксперименте Суммарная доза, г/кг 22,0 24,0 26,0 28,0 30,0 52 Гибель животных Количество % 0/10 0 1/10 10 2/10 30 4/10 40 5/10 50 Дни гибели 1-11 12 13 14 15 При этом использовались результаты таблицы №2. Таблица 2. Данные к определению ЛД50п в условиях повторного введения препарата Эмидонол 10% в желудок белых крыс. Доза, г/кг 22,0 24,0 26,0 28,0 30,0 Выжило 10 9 8 6 5 Погибло 0 1 2 4 5 Z 0,5 1,5 3,0 4,5 D 2,0 2,0 2,0 2,0 Zd 1,0 3,0 6,0 9,0 Обозначения: Z- среднее арифметическое из числа животных, у которых отмечен учитываемый эффект под влиянием 2-х смежных доз; �� d�� - интервал между двумя смежными дозами. В результате стандартная ошибка (±S) составила: S= ------------------------= 0.97 г/кг 10 Таким образом, расчетная ЛД50п Эмидонола 10% в условиях повторного введения в желудок белых крыс составляет 32,0±0,97 г/кг массы тела. Коэффициент кумуляции, как правило, рассчитывается по отношению средне эффективных доз подострого и острого опытов. Однако, поскольку ЛД50 в остром опыте определить не удалось, Ккум определяется по следующему соотношению: ЛД50п Ккум = --------МПД (максимально-переносимая доза) В результате данный коэффициент составил – 3,2, что согласно классификации Ю.С. Кагана, относит препарат Эмидонол 10% к умеренно кумулятивным соединениям (3 класс опасности). Для выявления функциональной кумуляции животные обследовались на 5, 10 и 15 дни опыта (при этом животные получили суммарные дозы – 10, 20 и 30 г/кг, соответственно). Результаты представлены в таблицах 5-6. В таблице 3 представлены результаты изменения массы тела животных и суммационно-пороговый показатель (СПП). 53 Таблица 3. Масса тела и суммационно-пороговый показатель у крыс в условиях подострого воздействия Эмидонола 10% Показатели Масса тела (г) СПП, усл.ед группа Контроль опыт Контроль 5 день (n=10) 190,5±2,5 185,8±2,8 3,3±0,8 10 день (n=10) 209,8±2,1 198,5±2,0 3,4±0,5 опыт 3,2±0,5 3,6±0,6 Восстановительный период - - 15 день (n=9) 222,4±2,5 219,3±3,2 3,3±0,4 5,5±0,5 Р˂0,05 К-3,5±0,9 Оп-3,8±1,2 Как следует из таблицы, у опытных животных, на 15 день после получения суммарной дозы 30 г/кг отмечалось повышение суммационно-порогового показателя (СПП) (при Р˂0,05), и, как следствие, заторможенность животных. Восстановление СПП наступало уже через 3 дня после прекращения дачи препарата. Результаты изменения ректальной температуры, анализа гематологических показателей и некоторых поведенческих реакций животных представлены в таблице 4. Как следует из представленных данных, все показатели, характеризующие функциональное состояние периферической крови, а также ректальная температура у опытных животных достоверно не отличались от контроля на всем протяжении опыта. Что касается поведенческих показателей, - наблюдалась некоторая тенденция к их снижению у опытных животных на 15 день воздействия, однако разница по сравнению с контролем была статистически не достоверной. Таблица 4. Состояние некоторых функциональных показателей крыс в подостром эксперименте. Показатели Гемоглобин, г/л Лейкоциты, х 109/л Эритроциты, х 1012/л Ректальная температура, 0С «Тест вставания», (за 3 мин.) «Горизонтальный стержень» (сек.) Группы Контроль 5 день 113,2±2,1 10день 111,7±2,4 14 день 112,6±2,1 Опыт 112,9±3,1 110,4±2,8 113,0±2,9 Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль 11,3±2,1 10,9±2,4 5,4±0,35 6,1±0,41 37,1±0,25 36,9±0,3 5,8±1,45 5,5±1,35 32,3±2,5 12,1±2,3 12,8±2,4 5,8±0,31 6,3±0,45 37,2±0,21 37,5±0,20 5,8±1,05 6,1±1,30 33,8±2,3 12,8±2,5 13,1±2,1 6,1±0,32 5,6±0,45 37,2±0,5 36,9±0,5 6,3±1,19 5,6±1,52 31,2±2,5 Опыт 33,4±2,1 40,1±3,1 29,9±2,1 Заключение. Эмидонол 10% обладает слабовыраженной как материальной, так и функциональной кумуляцией, проявляющейся только в результате получения в конце 54 эксперимента больших суммарных доз, в несколько раз превышающих рекомендуемую для практического применения. Библиографический список: 1.Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / 2-ое изд. переработ. доп.- Л.: Мед. Литература, 1963. с.152 , 81-101. 2.Бурлакова Е.Б. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии. М., 1976. 3.Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты вчера, сегодня, завтра: Сборник трудов V Международной конференции Биоантиоксидант. М., 1998. 4.Вальдман А.В., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д., Тилекеева У.М., Дюмаев К.М.Влияние производных 3-оксипиридина на центральную нервную систему.- Бюлл. экспер. биол. и мед.-1985.-Т. ХСIХ.- № 1.- С. 60-62. 5.Воронина Т.А., Неробкова Л.Н., Маркина Н.В. и др. Возможные механизмы действия мембраноактивных веществ с антиоксидантными свойствами в экстремальных ситуациях: Клеточные механизмы реализации фармакологического эффекта/Под редакцией С.Б. Середенина. М., 1990. 6.Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д.- Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС.-М.- 1995.-272 С. CUMULATIVE PROPERTIES OF THE DRUG EMIDONOL 10% Engasheva E.S., Napalkova V.V., Kuznetsov Y.E., Tuhfatova R.F. Key words: rat, emidonol 10% solution, cumulation. Emidonol 10% have mild, both material and functional cumulation, which is manifested only as a result of the end of the experiment large total doses several times higher than recommended for practical use. УДК 619:615.015.4 МУТАГЕННОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭМИДОНОЛА 10% Е.С. Енгашева, кандидат ветеринарных наук, ООО «НВЦ Агроветзащита», г. Москва, (495) 721-49-82, [email protected] Р. Ф. Тухфатова, кандидат биологических наук, доцент кафедры фармакологии и токсикологии им. И. Е. Мозгова ФГБОУ ВПО МГАВМиБ, [email protected] Н.П. Бирюкова, кандидат биологических наук, ФГБУ «ВГНКИ», г. Москва, [email protected] 55 Ключевые слова: эмидонол 10% раствор, крысы, мутагенное действие, эстральный цикл, эмбриональное развитие. Эмидонол 10% не вызывает наследственных изменений в половых клетках при внутрибрюшинном введении препарата самцам белых крыс на разных стадиях спермиогенеза и не приводит к гибели потомков первого поколения в период эмбрионального развития ( Р<0,05). Введение. Лекарственное средство Эмидонол 10% относится к антиоксидантным препаратам. Механизм действия эмидонола заключается в специфическом влиянии на энергетический обмен посредством снижения интенсивности перекисного окисления липидов в мембранных клетках и связывания свободных радикалов, что приводит к увеличению степени энергизации клеток в условиях кислородной недостаточности. При введении препарата увеличивается сохранность молодняка, прирост массы тела и т.д. (Дюмаев К.М. и др., 1365; Бурлакова Е.Б., 1998). Фирмой ООО «НВЦ Агроветзащита» разработан и представлен для изучения мутагенного действия препарат Эмидонол 10% в форме раствора для парентерального применения, который содержит в 1 мл в качестве действующего вещества субстанцию эмидонол® – 100 мг и вспомогательное вещество. Материалы и методы исследований. Опыты проводили на 5 взрослых самцах и 30 самках белых крыс с нормальным эстральным циклом. Самцам опытной группы внутрибрюшинно однократно вводили Эмидонол 10% в дозе 100 мг\кг массы тела по ДВ (данная доза превышает терапевтическую для грызунов в 5 раз) в объеме 1,0 мл. С целью определения доминантных летальных мутаций самцов на (1-й – 14-й), (15-й – 35-й), (36-й – 49-й), (50-й – 56-й), (57-й – 72-й) дни после инъекции препарата спаривали с интактными самками и определяли время наступления беременности. На 20-й день мышей убивали и учитывали общую, предимплантационную и постимплантационную смертность. Результаты исследований и их обсуждение. Таблица. Определение мутагенного действия Эмидонола 10% Показатели Общая эмбриональная смертность, % Группы мышей Конт-роль 1 2 3 4 5 16,5±2,4 18,3±2,1 16,2±2,2 18,5±2,0 15,1±2,3 19,2±1,2 0,1±0,01 0,09±0,01 0,11±0,01 0,10±0,01 0.11±0,01 0,10±0,01 0,08±0,01 0,08±0,01 0,06±0,01 0,08±0,01 0,06±0,01 0,06±0,01 Предимпланта-ционная смертность, ед. Постимпланта-ционная смертность, ед. Заключение. Эмидонол 10% не вызывает наследственных изменений в половых клетках при внутрибрюшинном введении препарата самцам белых крыс на разных стади- 56 ях спермиогенеза и не приводит к гибели потомков первого поколения в период эмбрионального развития ( Р<0,05). Библиогафический список: 1.Бурлакова Е.Б. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии. М., 1976. 2.Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты вчера, сегодня, завтра: Сборник трудов V Международной конференции Биоантиоксидант. М., 1998. 3.Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д.- Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС.-М.- 1995.-272 С. MUTAGENIC EFFECT OF THE DRUG EMIDONOL 10% Engasheva E.S., Tuhfatova R.F., Biryukova N.P. Key words: emidonol 10% solution, rats, mutagenic effects, the estrous cycle, embryonic development. Emidonol 10% does not cause genetic changes in the germ cells of the drug when administered intraperitoneally to male albino rats at different stages of spermatogenesis and leads to death in the first generation offspring during fetal development (P <0.05). УДК 619:615.015.4 ОСТРАЯ И СУБХРОНИЧЕСКАЯ ТОКСИЧНОСТЬ ПРЕПАРАТА ЭМИДОНОЛ 10% Е.С. Енгашева, кандидат ветеринарных наук, ООО «НВЦ Агроветзащита», г. Москва, (495) 721-49-82, [email protected] Д.Д. Новиков, кандидат ветеринарных наук, ООО «НВЦ Агроветзащита», г. Москва, (495) 721-49-82, [email protected] Р. Ф. Тухфатова, кандидат биологических наук, доцент кафедры фармакологии и токсикологии им. И. Е. Мозгова ФГБОУ ВПО МГАВМиБ, [email protected] Ключевые слова: острая и субхроническая токсичность, крысы, гематологические показатели крови. Изучена острая и субхроническая токсичность препарата Эмидонол 10%. Установлено, что LD50 при пероральном введении препарата составляет 10,5 г/кг, при внутрибрюшинном – 2,5 г/кг. При изучении субхронической токсичности препарат не вызывает сдвигов в гематологических и биохимических показателях крови. Введение. Использование антиоксидантов в лечебной практике находит все большее применение, т.к. после внутримышечной инъекции улучшается клинические по- 57 казатели, сохранность молодняка, среднесуточный прирост массы тела, нормализуется энергетический баланс, значительно усиливается жизненный потенциал животных (Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д., 1965). Фирмой ООО «НВЦ Агроветзащита» разработан и представлен для изучения препарат Эмидонол 10% в форме раствора для парентерального применения, который содержит в 1 мл в качестве действующего вещества субстанцию эмидонол® – 100 мг и вспомогательное вещество. Материалы и методы исследований. Изучение острой токсичности препарата проводили на 60 белых крысах при пероральном и внутрибрюшинном введении. Препарат в нативном виде насильно вводился в желудок с помощью металлического зонда. Было испытано 5 доз: 3,0; 4,5; 6,0; 8,5 и 10,0 г/кг массы тела. При внутрибрюшинном введении были испытаны дозы от 1,0 до 3,5 г/кг животного. Каждая доза вводилась 6 животным. Контрольные животные получали воду для инъекций в тех же объемах. За животными вели наблюдение в течение 2-х недель после введения препарата, отмечая сроки гибели или выздоровления животных. Учитывали общее состояние животных, сохранение двигательных функций, аппетита, состояние шерстного покрова, дыхания, реакцию на внешние раздражители (Беленький М.Л., 1963). Субхронический эксперимент проводили на половозрелых нелинейных крысахсамцах и самках изначальной массой 140,0±7,6 г в течение 90 дней. Крыс содержали в виварии НЦБМТ РАМН в пластиковых клетках при естественном освещении и температуре 20-22 ºС, кормили брикетированными комбикормами. Животные были взяты в эксперимент после 10 дней карантина. Группы формировались методом случайной выборки. В каждой группе было по 10 животных. Опытным животным в течение 90 дней вводили перорально Эмидонол 10% в дозах 1/10 и 1/100 от LD�� 50. Крысы контрольной группы находились в аналогичных условиях, что и опытные животные. В течение всего опыта вели наблюдение за состоянием животных в динамике по интегральным и функциональным показателям основных органов и систем, в том числе физиологическим, гематологическим и биохимическим. Результаты исследований и их обсуждение. Для определения острой токсичности при введении препарат в желудок крыс были испытаны дозы – 3,0; 4,5; 6,0; 8,5 и 10,0 г/ кг. В течение 2-х недель за животными велось наблюдение. Результаты представлены в таблице 1. Как следует из таблицы, в результате введения доз в диапазоне 3-10,5 г/кг гибели животных не выявлено. Максимально-переносимой дозой следует считать дозу 10,5 г/кг. Таблица 1. Результаты острой токсичности препарата при пероральном введении Доза г/кг Выжило Погибло Z D 58 3,0 4,5 6,0 8,5 10,5 6 0 6 0 6 0 6 0 6 0 0 1,5 0 1,5 0 2,5 0 2,0 Zd 0 0 0 0 Обозначения: �� Z�� – среднее арифметическое из числа животных, у которых отмечен учитываемый эффект под влиянием 2-х смежных доз; d – интервал между двумя смежными дозами. При внутрибрюшинном введении в диапазоне доз 1,0 – 3,5 г/кг, гибель животных наступала от дозы 1,5 г/кг. ЛД50 – 2,5 г/кг по лекарственной форме. Клиническая картина интоксикации не выражена. Наблюдалось лишь некоторая заторможенность животных при введении дозы 10,5 г/кг, что связано с введением значительных объемов данного средства. Через 2-3 дня все опытные животные практически не отличались от контрольных. При проведении патологоанатомического вскрытия животных макроанатомических изменений печени, почек, сердца и селезенки выявлено не было. При изучении субхронической токсичности масса тела подопытных крыс не отличалась достоверно от массы тела животных из контрольной группы. Изменения частоты дыхания и температуры тела животных, зарегистрированные на протяжении курса введения Эмидонола 10% не установлено, температура тела у животных опытных групп, не отличались от физиологической нормы и аналогичных показателей контрольных животных. Показатели периферической крови крыс (лейкоциты, эритроциты, тромбоциты) групп животных, получающих препарат Эмидонол 10% не имели достоверных отличий от показателей животных контрольной группы (табл. 2). Таблица 2. Состояние периферической крови крыс после введения препарата Эмидонол 10% на 90 день эксперимента Показатели крови Эритроциты, x 1012 Гемоглобин, г/л Лейкоциты, x 109 Тромбоциты Т/мкл 1 группа 8,4±0,25 130,8±0,45 12,3±1,0 716,5±55,9 Группы животных 2 группа 8,3±0,5 120,7±1,20 11,5±1,3 695,0±41,3 контроль 7,9±0,3 120,8±0,21 9,32±099 670±46,3 Так же не было выявлено достоверных отличий по содержанию белков в плазме крови животных подопытных групп. Биохимические показатели крови животных опытной группы не имели достоверных различий с контрольной группой (табл. 3). Таблица 3. Биохимические показатели крови крыс после введения препарата Эмидонол 10% Показатели Глюкоза, mmol/l АЛТ, U/l АСТ, U/l 1 группа 5,7±0,04 65,1±4,59 164,1±3,96 2 группа 6,2±0,01 74,5±2,7 184,4±6,52 контроль 5,5±0,04 74,3±2,65 176,0±9,79 59 ЩФ, U/l Холестерин, мг/дл 261±34,7 26,0±2,31 284,7±10,6 34,2±1,1 263,2±9,37 34,7±1,2 Осмотр показал, что все животные были достаточно активными, имели правильное телосложение, вес соответствующий возрастной норме. Гладкий и блестящий волосяной покров, блестящие, обычной окраски слизистые оболочки, чистые и опрятные естественные отверстия. При макроскопическом исследовании внутренних органов каких-либо патологических изменений обнаружено не было. Толщина подкожной жировой клетчатки в месте инъекции была в пределах нормы, признаков отеков и кровоизлияний не выявлено. Мышцы и костная система развиты соответственно возрасту. Полости тела. Брюшная полость содержала следы светлой, прозрачной жидкости, брюшина была гладкая, влажная, блестящая, брыжейка тонкого и толстого кишечника умеренно развита, мелкодольчатого строения. Отмечалось более выраженное развитие брыжейки у некоторых особей. Внутренние органы расположены правильно, спаек и сращений не выявлено. Плевральная полость содержала следы прозрачной светло-желтой жидкости, листки висцеральной и париетальной плевры были гладкие, влажные, блестящие, спаек и сращений, патологических наложений не выявлено. Полость перикарда свободна, влажная, без спаек и сращений. Центральная нервная система. Головной мозг мягковато-эластичной консистенции, на разрезе светло-серого цвета, с гладкими полушариями переднего мозга и хорошо развитыми обонятельными долями. Оболочки головного мозга не напряжены, жемчужного цвета, прозрачные. Органы эндокринной системы. Тимус серовато-розового цвета, не увеличен. У некоторых животных отмечалось более выраженное замещение ткани тимуса жировой клетчаткой, что не является патологией. Щитовидная железа была розоватого цвета с хорошо различимыми паращитовидными железами. Надпочечники без каких-либо изменений, желтоватого цвета, типично расположены. Органы дыхания. Слизистая оболочка гортани, трахеи, бронхов розоватого цвета, блестящая, гладкая, влажная. В просвете бронхов небольшое количество прозрачного слизистого секрета. Правое легкое несколько большего размера по сравнению с левым, представлено четырьмя долями. Левое легкое состоит из одной доли. Легкие однородной плотности, светло-розового цвета во всех отделах, ткань легких воздушная, без признаков отека и воспаления. Органы кровообращения. Жировая клетчатка под эпикардом отсутствует, сердце имеет массу, соответствующую возрасту животных, желудочки не утолщены. Полости сердца не расширены. Пристеночный эндокард гладкий, блестящий, влажный. Клапанный аппарат сформирован правильно. Миокард красноватого цвета, эластичной консистенции, влажный, блестящий. Коронарные артерии без особенностей, спадаются на разрезе. Интима аорты и легочной артерии желтоватого цвета, влажная, гладкая, блестящая. Органы пищеварения. Слизистая оболочка пищевода, желудка и тонкого кишечника розоватого цвета, блестящая, влажная. Печень обычного размера и строения, эластичной консистенции, с тонкой прозрачной капсулой и гладкой поверхностью, на раз- 60 резе темно-красного цвета. Поджелудочная железа представлена тяжом серовато-белой студенистой ткани, расположенной в брыжейке. Мочеполовые органы. Почки одинакового размера, с легко снимающейся капсулой, бобовидной формы, типично расположены. На разрезе отмечается четкое деление на корковое и мозговое вещество. Лоханки не расширены, слизистая оболочка блестящая, влажная, серовато-розового цвета. Половые органы без каких-либо патологических изменений. Органы кроветворной системы. Лимфатические узлы многочисленные, определяются в брыжейке тонкого кишечника, эластичной консистенции, серовато-белого цвета, размером до 0,3 см в диаметре. Селезенка обычного размера, узкая, уплощена, вишневого цвета, с гладкой прозрачной капсулой, мягковатой консистенции. Заключение. Препарат Эмидонол 10% при внутрижелудочном введении максимальной дозы 10,5 г/кг не вызывает гибели крыс, можно считать практически не токсичным соединением. Согласно классификации (ГОСТ 12.1.007-76), препарат – малоопасное соединение (4-й класс опасности). При внутрибрюшинном введении Эмидонола 10% крысам ЛД50 составила 2,5 г/кг, что согласно ГОСТ 12.1.007-76 позволяет отнести препарат к 4 классу опасности. Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что при 90-дневном воздействии препарата отсутствовали существенные различия в подопытных группах и в контроле со стороны показателей клеточного состава периферической крови, биохимических тестов, характеризующих обмен веществ и функции жизненно важных органов, а также со стороны состояния выделительной системы. Библиографический список: 1.Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта /2-ое изд. переработ. доп.- Л.: Мед. Литература, 1963. с.152 , 81-101. 2.Бурлакова Е.Б. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии. М., 1976. 3.Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты вчера, сегодня, завтра: Сборник трудов V Международной конференции Биоантиоксидант. М., 1998. 4.Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д.- Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС.-М.- 1995.-272 С. ACUTE, SUB-CHRONIC TOXICITY OF THE DRUG EMIDONOL 10% Engasheva E.S., Novikov D.D., Tuhfatova R.F. Key words: acute and sub-chronic toxicity, rats, hematological parameters of blood. Studied the acute and sub-chronic toxicity of the drug Emidonol 10%. Found that oral LD50 of the preparation is 10.5 g / kg, i.p. - 2.5 g / kg. In the study of sub-chronic toxicity of the drug does not cause changes in hematological and biochemical parameters of blood. 61 УДК 619:615.015.4 ЭМБРИОТОКСИЧЕСКОЕ И ТЕРАТОГЕННОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭМИДОНОЛА 10% РАСТВОРА Е.С. Енгашева, кандидат ветеринарных наук, ООО «НВЦ Агроветзащита», г. Москва, (495) 721-49-82, [email protected] Д. Д. Новиков, кандидат ветеринарных наук, ООО «НВЦ Агроветзащита», г. Москва, (495) 721-49-82, [email protected] А.В. Морозова, кандидат биологических наук, ФГБУ «ВГНКИ» г. Москва, [email protected] Ю. Е. Кузнецов, кандидат ветеринарных наук, ассистент кафедры паразитологи ФГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», [email protected] Ключевые слова: антиоксидант, эмидонол 10%, крысы, эбриотоксическое и тератогенное действие. Эмидонол 10% не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действиями при многократном подкожном введении крысам в 5 раз превышающей терапевтическую дозировку (100 мг/кг). Введение. Лекарственное средство Эмидонол 10% относится к антиоксидантным препаратам-ингибиторам свободно радикальных процессов в организме. Механизм действия эмидонола заключается в специфическом влиянии на энергетический обмен посредством снижения интенсивности перекисного окисления липидов в мембранных клетках и связывания свободных радикалов, что приводит к увеличению степени энергизации клеток в условиях кислородной недостаточности. Препарат повышает энергетический баланс, усиливает жизненный потенциал животных. Фирмой ООО «НВЦ Агроветзащита» разработан и представлен для изучения эмбриотоксического и тератогенного действия препарат Эмидонол 10% в форме раствора для парентерального применения, который содержит в 1 мл в качестве действующего вещества субстанцию эмидонол® – 100 мг и вспомогательное вещество. Материалы и методы исследований. Определение эмбриотоксического и тератогенного действия Эмидонола 10% проводили по методу Шицковой А.П. и др.(1977) на 60 самках белых крыс-аналогов массой 190-200 г. Исследования проводили в плодном, неонатальном и постнатальном периодах. Самок спаривали с интактными половозрелыми самцами, подсаживая последних к самцам в соотношении 3:1. Начало беременности устанавливали по наличию сперматозоидов во влагалищных мазках, после этого, самцов отсаживали. Беременность контролировали просмотром мазков из влагалища на 5-6 и 9-10 дни после оплодотворения. Показателем наступления беременности служило наличие в мазках (на 5-6 дни) большого количества слизи и лейкоцитов. На 9-10 дни в мазках обнаруживали эритроциты, что говорило о нормальном течении беременности у животных. С первого дня беременности крысы были распределены на 3 группы по 20 гол. в каждой (2 – опытные и 1- контрольная). Животным опытных групп подкожно вводили 62 Эмидонол 10% из расчета 20 мг/кг по ДВ (терапевтическая доза) и 100 мг/кг массы тела (пятикратно увеличенная доза). Для определения эмбриотоксического действия, препарат вводили в течение 17-18 дней, а для определения тератогенного до конца беременности (21-23) дня. Крысы опытных и контрольной групп содержались при свободном доступе к воде и пище, за животными всех групп вели ежедневное наблюдение, учитывая клиническое состояние, аппетит и поведение. На 19 - 20-й день беременности, методом дислокации шейных позвонков были умерщвлены по 10 крыс из каждой группы. После вскрытия, у животных извлекали матку и яичники. С помощью стереомикроскопа МБС-9 подсчитывали число желтых тел беременности, в матке – количество мест имплантации живых и мертвых эмбрионов. Доимплантационную, постимплантационную и общую эмбриональную смертность рассчитывали по методу Малашенко А.М. и Егорова И.К., (1967). От оставшихся самок крыс, для определения тератогенного действия препарата, было получено потомство. Затем, был проведен сравнительный анализ плодов опытных и контрольной групп, который не показал достоверных различий при взвешивании плацент и крысят и определении длины тела крысят. Также, не было выявлено уродств и отклонений от нормального развития при осмотре плодов под бинокулярной лупой. Результаты исследований и их обсуждение. Таблица. Результаты эксперимента по определению эмбриотоксического и тератогенного действия Эмидонола 10% Показатели Группы животных Опытные Контрольная 20 мг/кг 100 мг/кг Эмбриотоксическое действие Количество живых эмбрионов 9,8±0,31 9,8±0,41 на 1 самку Количество мертвых эмбрионов 1,1±0,52 1,4±0,41 на 1 самку Количество желтых тел на 1 13,2±0,40 16,2±0,43 самку Количество мест имплантации 10,6±0,41 10,9±0,42 на 1 самку Общая эмбриональная гибель, % 11,4±0,72 12,7±0,35 Доимплантационная гибель, % 3,3±0,41 3,0±0,35 Постимплантационная гибель, % 10,1±0,73 9,4±0,42 Выживаемость, % 88,5±10,4 87,2±9,2 Тератогенное действие Средняя масса плаценты, мг 314,5±40,4 310,4±45,3 Средний вес крысят, мг 6153±200,2 6215±196,2 10,0±0,31 1,3±0,42 12,8±0,50 10,7±0,51 12,4±0,21 2,9±0,24 9,1±0,40 89,2±10,5 315,6±40,9 6195±242,1 63 Средняя длина туловища крысят, мм Уродства, аномалии развития внутренних органов и скелета 47,5±0,5 46,9±0,74 47,8±0,45011 Нет нет Нет Заключение. Эмидонол 10% раствор не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действиями при многократном подкожном введении крысам в 5 раз превышающей терапевтическую дозировке (100 мг/кг). Библиографический список: 1.Бурлакова Е.Б. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии. М., 1976. 2.Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты вчера, сегодня, завтра: Сборник трудов V Международной конференции Биоантиоксидант. М., 1998. EMBRYOTOXICITY OR TERATOGENICITY EMIDONOL 10% SOLUTION Engasheva E.S., Novikov D.D., Morozova A.V., Kuznetsov Y.E. Key words: antioxidant, emidonol 10%, rats, ebriotoksicheskoe and teratogenic effects. Emidonol 10% do not have embryotoxic and teratogenic effects after repeated subcutaneous administration to rats at 5 times the therapeutic dose (100 mg/kg). УДК 576.8:574.5 ИНВАЗИРОВАННОСТЬ МОЛЛЮСКОВ РОДА LYMNAEA ЛИЧИНКАМИ ТРЕМАТОД НА ТЕРРИТОРИИ УЛЬЯНОВСКОЙ ОБЛАСТИ Е.М. Романова, доктор биологических наук Д.С. Игнаткин, кандидат биологических наук Т.А. Индирякова, кандидат биологических наук М.А. Видеркер, кандидат биологических наук ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-38, [email protected] Ключевые слова: моллюски, личинки трематод, трематодофауна моллюсков, трематодозы Исследовано 4020 моллюсков рода Lymnaea из 26 водоемов Ульяновской области. У 20,64% моллюсков выявлены инвазии личинками трематод 23 видов. Большое влияние 64 на становление трематодофауны моллюсков оказывают птицы. В водоемах области присутствует потенциальная опасность заражения человека трематодозами. Введение. Моллюски являются промежуточными хозяевами различных паразитических червей и играют важную роль в распространении опасных заболеваний сельскохозяйственных животных и человека. Они находятся в тесных биоценотических взаимоотношениях со всеми компонентами водоема. Большое значение в циркуляции трематодозов играют моллюски рода Lymnaea, имеющие повсеместное распространение и входящие в состав паразитарных систем многих видов трематод. Изучению трематодофауны моллюсков в зоне Среднего Поволжья посвящены единичные работы [1]. Поэтому целью наших исследований явилось определение роли моллюсков р. Lymnaea как промежуточных хозяев трематод в Ульяновской области. Материалы и методы исследований. Материал для исследований был собран в 26 водоемах Ульяновской области. Исследования проводились в мае-октябре 2005-2011 гг. Компрессорным методом было исследовано 4020 моллюсков р. Lymnaea, в том числе 2415 экз. Lymnaea stagnalis, 1307 экз. Lymnaea ovata, 108 экз. Lymnaea palustris, 96 экз. Lymnaea auricularia и 94 экз. Lymnaea corvus. Систематическую принадлежность личинок трематод устанавливали по морфологическим признакам при микроскопии препаратов. Для количественной характеристики инвазированности моллюсков личинками трематод определяли экстенсивность инвазии (ЭИ), под которой понимали отношение моллюсков, инвазированных личиночными стадиями трематод, к общему числу исследованных моллюсков (в %). ЭИ вычисляли, если число моллюсков было не менее 10. Результаты исследований и их обсуждение. Общая ЭИ обследованных моллюсков личинками трематод составила 20,64%. При этом партенитами и церкариями было инвазировано 16,11% моллюсков, метацеркариями – 4,73%. Наиболее высокий показатель зараженности личинками трематод был отмечен для L. stagnalis (25,36%) и L. corvus (25,00%), наименьший – для L. ovata (11,48%). ЭИ L. palustris составила 18,81%, L. auricularia – 17,44%. В результате проведенных исследований было охарактеризовано видовое разнообразие личинок трематод у моллюсков. В водоемах области было отмечено паразитирование 23 видов трематод, относящихся к 9 семействам. Видовое разнообразие трематод моллюсков р. Lymnaea Сем. Echinostomatidae Dietz, 1909: -Echinostoma robustum Yamaguti, 1935; -Echinoparyphium aconiatum Dietz, 1909; -Hypoderaeum conoideum (Bloch, 1782) Dietz, 1909; -Moliniella anceps (Molin, 1859) Hűbner, 1939; -Neoacanthoparyphium echinatoides (de Filippi, 1854), Odening, 1962; -Echinostomatidae gen. sp. Сем. Plagiorchiidae (Lűhe, 1901) Ward, 1917: -Haplometra cylindracea (Zeder, 1840) Looss, 1899; -Opisthioglyphe ranae (Froelich, 1791) Loos, 1907; -Plagiorchis elegans (Rudolphi, 1802) Braun, 1902; 65 -Plagiorchis laricola Skrjabin, 1924; -Plagiorchis multiglandularis Semenov, 1927. Сем. Notocotylidae Lűhe, 1909: -Notocotylus sp. I; -Notocotylus sp. II. Сем. Strigeidae Railliet, 1919: -Apatemon minor Yamaguti, 1933; -Cotylurus cornutus (Rudolphi, 1808) Szidat, 1928; -Strigeidae gen. sp. I. Сем. Diplostomidae Poirier, 1886: -Diplostomum sp. I; -Diplostomum sp. II. Сем. Schistosomatidae Looss, 1899: -Trichobilharzia sp.; -Bilharziella polonica (Kowalewski, 1895). Сем. Cyatocotylidae (Műhling, 1898) Poche, 1926: -Cyatocotylidae gen. sp. Сем. Monorchiidae Odhner, 1911: -Asymphylodora tincae (Modeer, 1790) Lűhe, 1909. Сем. Sanguinicolidae Graff, 1907: -Sanguinicola sp. Наиболее многочисленными по видовому составу оказались сем. Echinostomatidae (6 видов) и Plagiorchiidae (5 видов). Для 18 видов трематод окончательными хозяевами являются птицы, и только для четырех видов трематод ими являются амфибии и рыбы (по два вида). В целом видовой состав личинок трематод, отмеченный для моллюсков р. Lymnaea в Ульяновской области, соответствует описанию трематодофауны позвоночных животных лесостепной зоны. Так, И.Е. Быховская-Павловская (1962) в лесостепной зоне выявила 177 видов трематод птиц, относящихся в основном к сем. Echinostomatidae, �� Plagiorchiidae�� , �� Strigeidae�� , �� Diplostomidae, Cyclocoeliidae и являющихся в большинстве случаев паразитами водоплавающих птиц [2]. Наибольшее видовое разнообразие трематод было отмечено для L. stagnalis – 16 видов. У �� L�� .�� ovata�� и L�� .�� palustris�� зарегистрировано по 9 видов личинок трематод, у L auricu�� laria – 4 вида, L. corvus – 3 вида. У моллюсков L�� . �� stagnalis�� чаще всего отмечались инвазии партенитами и церкариями трематод сем. Plagiorchiidae: P. multiglandularis (8,42%), O. ranae (4,23%), P. laricola (3,41%), и�� сем�� . Diplostomidae (4,06%). �� Среди метацеркарных инвазий наиболее часто регистрировалась инвазия C. cornutus (2,16%). Сходная картина была отмечена и у L�� .�� palustris�� : у них преобладали инвазии спороцистами и церкариями P. multiglandularis и P. laricola, метацеркариями C. cornutus (по 2,97%). Моллюски L�� .�� ovata�� , согласно результатам исследований, в большинстве случаев выступали в роли второго промежуточного хозяина. У них инвазии метацеркариями отмечались в четыре раза чаще, чем партенитами и церкариями. 66 Видовой состав личинок трематод и экстенсивность инвазии ими моллюсков различалось в зависимости от водоема. Наибольшее видовое разнообразие трематод было выявлено в реке Свияге (8 видов). Наименьшее число видов (2-3) отмечалось нами в стоячих водоемах искусственного происхождения. Экстенсивность инвазии моллюсков в стоячих водоемах была в 1,7 раза выше, чем в проточных, и составляла 44,43±9,44 и 25,97±4,12%, соответственно. Существенных различий в качественном составе инвазированности моллюсков личинками трематод в зависимости от типа водоема отмечено не было. Различия касались лишь единичных случаев обнаружения той или иной локальной гемипопуляции личинок трематод, что связано, скорее, не с характером водоема, а с низкой степенью распространения инвазии в популяциях окончательных хозяев и способностью многих из них (особенно птиц) к миграции. Более выраженную приуроченность к определенным биотопам мы наблюдали у локальных гемипопуляций партенит, завершающих развитие в амфибиях, что может быть обусловлено оседлостью этих животных. Таким образом, существует тесная связь экологии окончательных хозяев с характером трематодозного очага. В водоемах исследованного региона у моллюсков моноинвазии отмечались значительно реже, чем, например, биинвазии (20,83% и 0,38% случаев, соответственно). Отметим, что многие из зарегистрированных у моллюсков видов трематод имеют существенное народно-хозяйственное и медицинское значение, поскольку вызывают заболевания промысловых, домашних животных и человека. Так, трематоды сем. �� Diplostomidae�� являются широко распространенными паразитами рыб. Наибольшую опасность они представляют для личинок, мальков и сеголетков прудовых рыб. Потенциально неблагополучными по диплостомозам могут быть все водоемы, в которых обитают моллюски р. Lymnaea, и которые хотя бы изредка посещаются рыбоядными птицами, выступающими окончательными хозяевами диплостомид. Более того, некоторые исследователи допускают возможность заражения личинками диплостомид человека [3]. Представители сем. Echinostomatidae являются распространенными трематодами, паразитирующими в кишечнике, желчных протоках печени и фабрициевой сумке птиц. Они вызывают тяжелые заболевания домашней птицы и наносят значительный экономический ущерб. Кроме того, эхиностоматиды способны вызывать заболевания млекопитающих, а некоторые виды – и людей [2,4]. Известно более 10 видов эхиностоматид, паразитирующих у человека. Регистрируются они в основном в Восточной и ЮгоВосточной Азии и связаны с употреблением в пищу сырых пресноводных моллюсков, рыб и амфибий (лягушек). В других районах земного шара отмечаются только спорадические случаи заболевания людей [5]. В Ульяновской области четыре вида трематод сем. Echinostomatidae, отмеченных у моллюсков р. Lymnaea, представляют потенциальную опасность для здоровья человека. Заражению эхиностоматидами подвержен немногочисленный контингент лиц – это, прежде всего, гурманы, бомжи и семьи рыбаков. Следует обратить внимание и на присутствие в водоемах риска заболевания людей трихобильгарциозным дерматитом (церкариозом), так как у 0,17% моллюсков L. stagnalis отмечена инвазия Trichobilharzia sp. При этом четкой приуроченности инвазии 67 моллюсков к конкретным экологическим условиям не наблюдается, что обусловлено широким распространением окончательных хозяев шистосоматид (кряквы). Заключение. Таким образом, моллюски р. Lymnaea на территории Ульяновской области участвуют в формировании как минимум 23 паразитарных систем трематод. На становление трематодофауны моллюсков выраженное воздействие оказывают птицы. В паразитарные системы может вовлекаться человек, как неспецифический окончательный хозяин трематод, в связи с чем во многих водоемах области присутствуют потенциальный и реальный риски заражения человека церкариозом, а также вероятность инвазии эхиностоматидами. Библиографический список: 1. Куприянова-Шахматова Р.А. Некоторые наблюдения по экологии личинок трематод // Helminthologia. – T. III. – Bratislava: АН СССР, 1961. – С. 193-200. 2. Быховская-Павловская И.Е. Трематоды птиц фауны СССР. – М.-Л.: АН СССР, 1962. – 407 с. 3. Шималов В.В. Личинки гельминтов рыб реки Буг, опасные для человека // Мед. паразитология и паразитар. болезни. – 2001. – №2. – С. 28-30. 4. Судариков В.Е., Шигин А.А., Курочкин Ю.В. и др. Метацеркарии трематод – паразиты пресноводных гидробионтов Центральной России. – М.: Наука, 2002. – 298 с. 5. Шималов В.В., Шималов В.Т. Эхиностомататы (Trematoda, Fasciolida) млекопитающих Белорусского полесья, способные паразитировать у человека // Мед. паразитология и паразитар. болезни. – 2002. – № 1. – С. 47-50. INFECTION MOLLUSK OF A GENUS LYMNAEA TREMATODES LARVAE IN THE ULIYANOVSK REGION Ignatkin D.S. Key words: mollusks, trematodes larvae, trematodofauna of mollusks, trematodosis A total of 4020 mollusks of the genus Lymnaea from 26 water bodies in the Uliyanovsk region were examined. 20,64% mollusks were infected of 23 larval trematodes species. Significant role in formation of the fauna mollusks trematodes belongs to bird. Water bodies of the region have a potential danger for the infection the people trematodosis. 68 УДК 636.2.084 ВЛИЯНИЕ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ НА МИЕЛОПЕРОКСИДАЗНУЮ АКТИВНОСТЬ ОВЕЦ РОМАНОВСКОЙ ПОРОДЫ Э.Р. Исмагилова, доктор ветеринарных наук, профессор, И.Ж. Хисамов, аспирант ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, Введение. К настоящему времени в нейтрофильных гранулоцитах выявлены и изучены четыре бактерицидные системы: миелопероксидазная, лизоцим, лактоферин и неферментные катионные белки. Миелопероксидаза является лизосомальным ферментом, катализирующим в присутствии перекиси водорода окисление различных субстратов. Она локализуется преимущественно в специфических азурофильных гранулах в цитоплазме гранулоцитов. В сегментоядерных нейтрофилах выявляется высокая активность миелопероксидазы в виде гранул, заполняющих цитоплазму. Бактерицидное действие миелопероксидазы проявляется при наличии в среде галогенов (йод, кобальт, хлор) и перекиси водорода. Все три компонента содержатся в фаголизосоме нейтрофилоцитов, что объясняет появление в них при фагоцитозе мощной антибактериальной системы, эффект которой по своей силе значительно превышает соответствующий эффект составляющих ее компонентов. Снижение концентрации любого из трех компонентов миелопероксидазной системы и при наследственном дефекте ферментных систем резко снижается специфическая и неспецифическая резистентность организма животных[2,3,5,6]. При патологии и снижении фагоцитарной активности нейтрофилов резко уменьшается количество гранул, дающих желто-коричневую окраску [1,2,3,4]. Низкое содержание эссенциальных элеметов в почве, воде, кормах соответственно и в организме подавляет естственную резистентность организма. В этой связи нами проведены исследования по выявлению влияния эссенциальных микроэлементов на миелопероксидазную активность овец. Материалы и методы исследования. Материалом для исследования явились овцематки романовской породы. Научно-производственный опыт проводили в ЛПХ Калимуллин А.М., расположенный в Альшеевском районе республики Башкортостан. Овец разделили на две группы: опытные и контрольные. Опытной группе животных к общему рациону добавляли минеральный премикс (в расчете на животное): меди сульфата -30 мг, кобальта углекислого — 2 мг, селенита натрия -1,5 мг, йода, -10 мг (чистого элемента — 1 мг и серы — 0,8 г.) в 5 дневной дозе один раз в неделю в течение 3 месяцев. Контрольные группы находились только на общем рационе. Миелопероксидазную активность выявляли в нейтрофилах крови. В цитохимических реакциях активность фермента определяли по окислению хромогенов (бензидина, о-дианизидина и других) по методу Грэхема–Кнолля. Метод основан на цитохимическом выявлении пероксидазоположительных гранул и составлении лизосомограмм и лизосомально-пероксидазной формулы нейтрофилов. Удаление эритроцитов из суспензии иммунокомпетентных клеток является первым обязательным этапом методики. Полученный осадок ресуспензировали сывороткой крови и готовили мазки, сушили и фиксировали в холодном спиртовом растворе формалина в течение 2 минут. Затем выдерживали в 69 инкубационном растворе в течение 10 минут в вытяжном шкафу. Промытые препараты окрашивали 0,1-0,5%-ным раствором метиленовой сини в течение 1—2 секунд. После подсушивания мазки микроскопировали с использованием иммерсионной системы. В каждом мазке насчитывали 100 нейтрофилов с учетом удержания в них гранул желтокоричневого цвета и составляли лизосомограмму. Результаты исследований и их обсуждение. При клиническом осмотре у 8 — 1 2 % обследованных животных наблюдали покраснение, припухлость десен, на зубах черный налет неправильное их стирание или отсутствие и разрастание копытец. У животных нами выявлена низкая миелопероксидазная активность. У большинства из них количество лизосомных гранул в нейтрофилоцитах снижено. Плотность прореагировавших лизосомных гранул, дающих реакцию с бензидином, проявлялась бледно-желтой окраской. Средний гистохимический индекс миелопероксидазы у этих животных составил 0,52 ед с колебанием от 0,32 до 0,67ед. Количество окрашенных лизосомных гранул в нейтрофилах крови снижено. В лизосомограмме с интенсивностью реакции 0 степени было от 64 до 76 % (68,5±2,25%), I от 5 до 31% (13,5±2,56%), II от 9 до 19% (13,0±1,52%), III от 3 до 7% (4,0± 0,44%), IV — 0 до 1% (0,6±0,20) прореагировавших гранул на реакцию с бензидином. После 90 дневной подкормки микроэлементами в биотических дозах клиническое проявление микроэлементозов у овец было незначительно, и усилилась плотность прореагировавших гранул. В нейтрофильных лейкоцитах отсутствовали неокрашенные лизосомные гранулы. С интенсивностью реакции I степени выявили от 19 до 40% (26,1±2,70%), II — 14—47% (40,9±4,21%), III — 14—34% (22,3±2,15%) и IV степени от 0до 33% (11,70±3,12%) окрашенных лизосомных гранул. Значение среднего гистохимического индекса миелопероксидазы достигло уровня 2,69 единиц (2,18±0,09), что свидетельствует о повышении уровня неспецифической резистентности организма животных. Активность миелопероксидазы в виде гранул, заполняющих цитоплазму с интенсивностью реакции 0 степени снизилась в 68,5 раза ( р< 0,001). Выраженное увеличение окрашенных гранул отметили в опытной группе животных. Количество гранул с интенсивностью реакции I степени увеличилось в 1,91 раза, �� II�� – в 3,14 раза, III�� – в 5,57 раза и IV�� –в 3,9 раза. Следовательно, при нарушении минерального обмена в организме овец подавляется миелопероксидазная активность, выполняющая функцию клеточного фактора защиты крови, а при восполнении недостающих микроэлементов достигает оптимальных величин. Заключение. В биогеохимической зоне с недостаточностью йода, кобальта и цинка количество и плотность прореагировавших пероксидазосодержащих гранул в нейтрофильных лейкоцитах снижается, что указывает на понижение функциональной активности щитовидной железы и метаболических процессов в организме. Подкормка же овец недостающими микроэлементами увеличивает их количество, и плотность пероксидазосодержащих гранул в нейтрофилоцитах. Таким образом, повышение миелопероксидазной активности является благоприятным прогностическим тестом в определении уровня неспецифической резистентности организма животных при нарушении минерального обмена. Библиографический список: 1.Исмагилова Э.Р. Активность миелопероксидазы у животных при йодной недостаточности // Морфология.– 2002. – Т. 121. – №2 –3. – С. 59. 70 2.Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. – М.: Медицина, 1978. – С.14. 3.Роговин В.В., Пирузян Л.А., Муравьев Р.А. Пероксидазосомы. – М.: Наука, 1977. – 204 с. 4.Шарова А.С., Чмелев Г.Е., Радцева М.П. Микроэлементы медь, цинк, кобальт, молибден, марганец, бор в серых лесных почвах Башкирии // Серые лесные почвы Башкирии / Тр. БФАН. – Уфа, 1963. – С. 209 – 275. 5.Klebanoff, Hamon. Role of myeloperoxidase-mediated antimicrobial systems in intact leucocytes // J. Reticuloendothelial Soc. –1972. – Vol. 12. – № 1. – Р.170 – 196 6.Lehrer R.I. Leucocyte myeloperoxidase deficiency and disseminated candidiases: the role of myeloperoxidase in resistance to Candida infection /J. Clin. Invest. – 1969. – Vol. 48. – P. 1478. EFFECT OF TRACE ELEMENTS ON MIELOPEROKSIDAZNUYU ACTIVITY OF SHEEP BREEDS ROMANOWSKI Ismagilova ER Khisamov I.Zh. Key words: azurophilic granulocytes, myeloperoxidase, peroksidazosomy, antimicrobial peptides, lysosomal enzymes The paper presents results of research activity in mieloperoksidaznoy biogeocenotic area with iodine and cobalt deficiency, before and after applying icronutrients Romanov ewe breed. УДК 619:616 – 07 ВЛИЯНИЕ ЛЕЧЕБНО - ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ НА ОСНОВЕ ДИАТОМИТА С БАКТЕРИОФАГАМИ НА КУР НЕСУШЕК ПОРОДЫ ЛОМО – БРАУН Н. Н.Карамышева, ассистент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» 8(8422)55-95-47, Natali – [email protected] Д. А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» 8(8422)55-95-47, dav [email protected] Д.А. Викторов, ст. преподаватель ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» 8(8422)55-95-47, [email protected] С. Н. Золотухин, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» 8(8422)55-95-47, [email protected] 71 Ключевые слова: Бактериофаги, пуллороз, диатомит, кормовая добавка Работа посвящена определению влияния кормовой добавки на основе диатомита с добавлением бактериофагов на течение пуллороза у кур Введение. Пуллороз (бациллярный белый понос) – инфекционное заболевание, протекающее в острой форме у цыплят и хронически в скрытой форме у взрослой птицы. Заболевание наносит значительный экономический ущерб, так как ухудшается сохранность поголовья и соответственно уменьшается выход готовой продукции. При этом проведение лечебно – профилактических мероприятий достаточно затратно. Возбудитель – бактерии �� Salmonella�� pullorum�� и Salmonella�� gallinarum�� представляющие собой две разновидности одного и того же вида, способные вызывать заболевание и падеж, как среди молодняка, так и среди взрослой птицы в зависимости от вирулентности штамма. Исходя из этого, целью наших исследований явилась апробация действия лечебно - профилактической кормовой добавки на основе диатомита с бактериофагами на разновозрастную птицу с клиническими признаками пуллороза. Материалы и методы исследований. Материалом для исследования явилась разновозрастная больная пуллорозом птица породы Ломо – Браун. Диагноз павшей птицы был подтверждён патологоанатомическими и бактериологическими исследованиями. Для опыта была отобрана больная птица в возрасте 66 дн., 95дн и 275 дн в количестве 20 голов каждая группа. В свою очередь каждая группа из 20 голов была разбита по 10 голов на подгруппы 1 и 2. В первой подгруппе лечение проводилось по классической схеме антибиотиками, во 2 подгруппе птице давали кормовую добавку на основе диатомита с добавлением смеси стерильных фильтратов бактериофагов шигелл, сальмонелл, кишечной палочки, стафилококка. Время проведения опыта 5 дней. Результаты исследований и их обсуждение. Поступившая с ООО «Ульяновская птицефабрика» птица находилась в угнетенном состоянии, понос белого цвета, гребень синюшный. Полученные результаты опыта отображены в таблице 1. Таблица 1. Сравнительный анализ количества выжившей и павшей птицы при различных методах лечения Дни 66 дн. (антибиотик) 10 гол. 95дн (антибиотик) 10 гол. 66 дн (2) 10 гол. 95дн (2) 10 гол. 275 дн (антибиотик) 10 гол. 275 дн (2) 10 голов пало выжило пало выжило пало выжи ло пало выжило пало выжило пало выжило 1 10 - 10 5 2 8 - 10 3 7 - 10 2 - - 5 - 1 9 - 10 - 7 - 10 3 - - - - - 9 - 10 - 7 - 10 4 - - - - - 9 - 10 - 7 - 10 5 - - - - - 9 - 10 - 7 - 10 72 Как видно из таблицы при лечении антибиотиками в течение 2х суток пало по 3 головы в каждой подопытной подгруппе в возрасте 95 и 275 дней. В возрастной группе 66 дней выжившей птицы нет в обеих подгруппах. При добавлении в корм лечебно – профилактической добавки павшей птицы нет, состояние стабилизировалось уже через 24 часа после введения в рацион биодобавки, понос полностью прекратился. Через пять дней от начала опыта птица пришла в норму, состояние хорошее. Заключение. На основании полученных данных можно утверждать, что введение в рацион птицы, в возрастной категории 99 – 275 дней, биодобавки на основе диатомита с бактериофагами вполне целесообразно, так как способствует быстрому выздоровлению заболевшей птицы и является эффективным профилактическим средством сезонных заболеваний птицы. Библиографический список: 1 Калюжнов В.Т., Злобина И.Е. Цеолиты как источник микроэлементов в рационах цыплят-бройлеров // Тез.докл.конф. по птицеводству.-Горки., 1990.-С.90-91. 2. Мотовилов К.Я., Бгатов В.И. Механизм действия гравия в организме сельскохозяйственной птицы // Докл. РАСХН-1997.-№3.-С. 30-32. 3. Мотовилов К.Я, Ланцева Н.Н., Перспективы использования кудюритов в рационах животных для повышения продуктивности и получения экологически чистой продукции// Природные минералы на службе человека: Материалы научно-практической конференции.- Новосибирск, 1999.-С.189-191. EFFECT OF MEDICAL - PREVENTIVE FEED ADDITIVES BASED ON DIATOMITE WITH BACTERIOPHAGES LAYING HENS BREED LOMO – BROWN Karamysheva N. N., Vasiliev D. A., Victors D.A. Zolotukhin S.N. Key words: Bacteriophages pulloroz, diatomite, feed additive The work is devoted to determining the effect of the feed additive based on diatomite with the addition of bacteriophages for a pulloroza in chickens 73 ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СВИНЕЙ ПРИ ВВЕДЕНИИ В ИХ РАЦИОН СОЕВОЙ ОКАРЫ И ЦЕОЛИТОВ К.К. Кузнецов аспирант, Н.А. Любин доктор биологических наук, профессор, С.В. Дежаткина кандидат биологических наук, доцент, А.З. Мухитов кандидат биологических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА имени П.А. Столыпина» тел. 8(8422)55-95-47, [email protected] Ключевые слова: соевая окара, свиноматка, поросята, кровь, показатели. Установлено положительное влияние добавок соевой окары и цеолитов на показатели крови свиней. Для нормального функционирования организма сельскохозяйственных животных, особенно при получении от них высокой продукции животноводства, необходимо обеспечить их рационы полноценными питательными и биологически активными веществами. А длительное использование традиционных кормов, где часто отмечают дефицит протеина, аминокислот, витаминов и минеральных веществ, приводит к изменениям в крови, а затем и в целом организме животных, вызывая нарушения в работе органов и оказывая значительное влияние на продуктивность. В связи возникает интерес к использованию белково-минеральных комплексных добавок, в частности соевой окары и природных цеолитов [1, 2, 3]. Кровь является подвижной средой, в которой происходит постоянная смена всех ее составных частей. «Гематологическая картина» в каждый данный момент соответствует функциональному состоянию организма, поэтому эти исследования являются важным клиническим методом [4]. Целью исследования стало изучение гематологических показателей у свиней при введении в их рацион добавок соевой окары и цеолитов. Материалы и методы исследований. Опыт провели на свиноматках и поросятах крупной белой породы в племенном свиноводческом хозяйстве Ульяновской области. Содержание супоросных свиноматок было групповым. В группу подбирали по 5 голов методом аналогов, сформировали три группы. Контрольная (1-я) группа получала основной хозяйственный рацион, 2-я дополнительно соевую окару (7%), 3-я - соевую окару (7%) и цеолиты (3% от сухого вещества рациона) (схема 1). Кровь брали на 105 день супоросности, исследовали общепринятыми методами, используя микроскоп, камеру Горяева, гемометр Сали, центрифугу. Таблица 1. Схема опыта Группы животных Свиноматки супоросные 74 1 -контроль 2-группа 3-группа основной рацион (ОР) ОР + соевая окара ОР + соевая окара +цеолит Результаты исследований. Проведенные исследования выявили положительные изменения в крови свиноматок при дозировании в их рацион соевой окары и окары в сочетании с цеолитом. Динамика уровня красных клеток – эритроцитов, выполняющих транспортную и дыхательную функцию, шла в пределах нормы. Отмечено их увеличение в опытных группах, так у животных 2-й группы на 9,5% (p>0,05) и достоверно в 3-й на 20,1% (�� p�� <0,05) (табл. 2). Это указывает на повышение эритропоэза – процесса образования эритроцитов, под влияние скармливаемых добавок. Таблица 2. Содержание эритроцитов в крови свиноматок, n=3 Группы животных Er*1012/л 4,93+0,49 100 5,40+0,70 52,69 5,92+0,34* 80,29 1 - контроль % 2 - ОР + соевая окара % от контроля 3 - ОР + соевая окара + цеолит % от контроля *р<0,05 Анализ результатов исследования в крови свиноматок уровня гемоглобина (дыхательного пигмента, главного переносчика кислорода) выявили аналогичные изменения (рис. 1), так во 2-й группе этот показатель выражено возрастал на 3,8%, а в 3-й – на 9,8%, по отношению к контролю. Это говорит о повышении обогащения крови свиноматок кислородом, так необходимого в период развития плода, для которого характерно гипоксическое состояние. +9,8% +3,8% 116,7 ОР+ок ара+цеолит г/л 120 80 40 0 св иноматки 110,3 106,3 ОР+ок ара к онтроль Рис. 1. - Содержание гемоглобина в крови свиноматок Показатель гематокрита – показывает, сколько форменных элементов (эритроцитов) содержится в ста объемах крови. По нашим данным этот показатель закономерно варьировал у маток опытных групп (рис. 2). В контроле гематокритное число составило 33,7%, во 2-й группе оно заметно не изменялось, в 3-й группе возросло на 9,5% (p>0,05). 75 3- ОР+ок ара+цеолит 37,0% 2- ОР+ок ара 34,0% 1- Контроль 33,7% 0 10 20 30 +9,5% % Рис. 2. - Показатель гематокрита у свиноматок Число тромбоцитов – кровяных пластинок, принимающих активное участие в процессах свертывания крови и выполняют дополнительные функции, в крови свиноматок групп, с применением добавок в их рацион, также имело выраженную тенденцию к увеличению. Так количество тромбоцитов у контрольных животных составило 188,3+21,58*109/л, а при даче изучаемых добавок возросло во 2-й группе на 53,9%, в 3-й на 135%. Количество белых клеток – лейкоцитов, выполняющих главную защитную роль в организме животных имело аналогичную тенденцию к увеличению во 2-й группе на 8,3% и в 3-й на 12,9% (рис. 3), указывая на повышение защитных механизмов организма. +12,9% +8,3% 17,33 *10/л 15 15,35 5 0 ОР+ок ара+цеолит 16,63 10 ОР+ок ара к онтроль св иноматки Рис. 3. - Число лейкоцитов у свиноматок Заключение. Добавление в рационы свиноматок белково-минеральных добавок, в частности соевой окары и соевой окары в комплексе с цеолитом не вызывает нарушений в крови, показатели изменяются в рамках физиологических норм характерных для данной группы животных. Под влиянием применяемых белково-минеральных добавок установлено: - усиление гемопоэза - процесса образования клеток крови; - улучшение дыхательной функции крови, возможно за счет легкоусвояемой формы железа содержащейся в соевой окаре; 76 - повышение защитной функции организма. Библиографический список: 1. Дежаткина С.В. Соевые отходы производства в свиноводстве / С.В. Дежаткина, А.З. Мухитов. // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.- Том 206. - 2011. - С. 55-60. 2. Кузнецова А.А., Левочкина Л.В. Соевая окара для комбинированных изделий. //Пищевая промышленность. – 2008. - №8. – С. 30-31. 3. Ахметова В.В. Повышение качественных показателей продуктивности и физиолого-биохимического статуса за счет природных добавок / В.В. Ахметова, С.В. Дежаткина. Материалы международной научно-практической конференции «Наука в современных условиях: от идеи до внедрения». Димитровград. - 2011. – С. 9-13. 4. Скопичев В.Г. Частная физиология. Ч.2. Физиология продуктивных животных / В.Г. Скопичев, В.Н. Яковлев. - М.: «КолосС». - 2008. – 555 с. INDICATORS THE BLOOD OF SOWS AND PIGLETS ENRICHMENT OF DIETS OF SOYA OKARA AND ZEOLITES Key words: soyа okara, sows, pigs, blood, indicators. The positive effect of additives soy Okara and zeolites on the indicators of the activity of AST and ALT in the liver pigs. УДК 636.612+636.2 МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ СВИНОМАТОК ПРИ ДОБАВЛЕНИИ В ИХ РАЦИОН СОЕВОЙ ОКАРЫ И ЦЕОЛИТОВ К. К. Кузнецов, аспирант ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», тел. 8(8422)55-95-47, [email protected]:[email protected] Н.А. Любин, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» С.В. Дежаткина, кандидат биологических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: соевая окара, цеолит, свиноматка, кровь, показатели. Установлено положительное влияние добавок соевой окары и цеолитов на морфологический состав крови свиноматок. Введение. Длительное использование традиционных кормов, в которых часто отмечают дефицит протеина, аминокислот, витаминов и минеральных веществ, приводит 77 к изменениям в крови, а затем и в целом организме животных, вызывая нарушения в работе органов и оказывая значительное влияние на продуктивность. В связи возникает интерес к использованию белково-минеральных комплексных добавок, в частности соевой окары и природных цеолитов [1, 2, 4, 5]. Кровь является подвижной средой, в которой происходит постоянная смена всех ее составных частей. «Гематологическая картина» в каждый данный момент соответствует функциональному состоянию организма, поэтому эти исследования являются важным клиническим методом [3, 6]. Целью исследования стало изучение гематологических показателей у свиней при введении в их рацион добавок соевой окары и цеолитов. Материалы и методы исследований. Опыт провели на свиноматках и поросятах крупной белой породы в племенном свиноводческом хозяйстве Ульяновской области. Содержание супоросных свиноматок было групповым. В группу подбирали свиноматок по методу аналогов по 5 голов, одинаковых по возрасту, живой массе и физиологическому состоянию, которых осеменяли искусственно. Все исследования были выполнены на фоне кормления свиноматок рационами, сбалансированными по основным элементам питания, при этом в опытных группах к основному рациону (ОР) дозировали соевую окару, вместо гороха в зерносмеси с учетом питательности в кормовых единицах. В качестве минеральной добавки использовали природные цеолиты осадочного типа Сиуч-Юшанского месторождения Ульяновской области (кремнеземистый мергель). Были сформированы три группы: 1-я контрольная, получала основной хозяйственный рацион (ОР) состоящего из зерносмеси (100%), питательность которого составила 3,6 кг/кг кормовых единиц (к.ед.); 2-й опытной скармливали зерносмесь (93% по питательности рациона) и соевую окару (7%, по питательности рациона), питательность соответствовала ОР - 3,6 кг/ кг к.ед.; 3-й опытной группе дозировали в рацион, соответственно с учетом его питательности равной уровню в контроле (ОР), зерносмесь (93%) и соевую окару (7%), а в качестве минеральной добавки, не влияющей на общую питательность рациона, использовали природный цеолит - кремнеземистый мергель (3% от сухого вещества рациона) (табл.1). Таблица 1. Схема опыта Наименование Свиноматки 1 -контроль основной рацион (ОР) 2-группа ОР (93%)+ соевая окара (7%) 3-группа ОР (93%)+ соевая окара(7%) + цеолит Результаты исследований и их обсуждение. Проведенные исследования выявили положительные изменения в крови свиноматок при дозировании в их рацион соевой окары и окары в сочетании с цеолитом. Динамика уровня красных клеток, выполняющих транспортную и дыхательную функцию, шла в пределах нормы. Отмечено их увеличение в опытных группах, так у животных 2-й группы на 9,5% (p>0,05) и достоверно в 3-й на 20,1% (�� p�� <0,05) (табл. 2). Это указывает на повышение эритропоэза – процесса образования эритроцитов, под влияние скармливаемых добавок. Анализ результатов исследования в крови свиноматок уровня гемоглобина (дыхательного пигмента, главного переносчика кислорода) выявили аналогичные изменения (рис. 1), так во 2-й группе этот показатель выражено возрастал на 3,8%, а в 3-й – на 9,8%, 78 по отношению к контролю. Таблица 2. Содержание эритроцитов в крови супоросных свиноматок, n=3 Группы животных Er*1012/л 4,93+0,49 100 5,40+0,70 109,53 5,92+0,34* 120,10 1 - контроль % 2 - ОР + соевая окара % от контроля 3 - ОР + соевая окара + цеолит % от контроля *р<0,05 Это говорит о повышении обогащения крови свиноматок кислородом, так необходимого в период развития плода, для которого характерно гипоксическое состояние. +9,8% +3,8% 116,7 ОР+ок ара+цеолит г/л 120 80 40 0 св иноматки 110,3 106,3 ОР+ок ара к онтроль Рис. 1. - Содержание гемоглобина в крови супоросных свиноматок Показатель гематокрита – показывает, сколько форменных элементов (эритроцитов) содержится в ста объемах крови. По нашим данным этот показатель закономерно варьировал у маток опытных групп (рис. 2). 37,0% 3- ОР+ок ара+цеолит 34,0% 2- ОР+ок ара 33,7% 1- Контроль 0 10 +9,5% 20 30 % Рис. 2. - Показатель гематокрита в крови супоросных свиноматок В контроле гематокритное число составило 33,7%, во 2-й группе оно заметно не изменялось, в 3-й группе возросло на 9,5% (p>0,05). 79 Число тромбоцитов – кровяных пластинок, принимающих активное участие в процессах свертывания крови и выполняют дополнительные функции, в крови свиноматок групп, с применением добавок в их рацион, также имело выраженную тенденцию к увеличению. Так количество тромбоцитов у контрольных животных составило 188,3+21,58*109/л, а при даче изучаемых добавок возросло во 2-й группе на 53,9%, в 3-й на 135%. Количество белых клеток – лейкоцитов, выполняющих главную защитную роль в организме животных имело аналогичную тенденцию к увеличению во 2-й группе на 8,3% и в 3-й на 12,9% (рис. 3), указывая на повышение защитных механизмов организма. +12,9% +8,3% 17,33 *10/л 15 10 15,35 5 0 ОР+ок ара+цеолит 16,63 ОР+ок ара к онтроль св иноматки Рис. 3. - Число лейкоцитов в крови супоросных свиноматок Заключение. Добавление в рационы свиноматок белково-минеральных добавок, в частности соевой окары и соевой окары в комплексе с цеолитом не вызывает нарушений в крови, показатели изменяются в рамках физиологических норм характерных для данной группы животных. Под влиянием применяемых белково-минеральных добавок установлено: - усиление гемопоэза - процесса образования клеток крови; - улучшение дыхательной функции крови, возможно за счет легкоусвояемой формы железа содержащейся в соевой окаре; - повышение защитной функции организма. Библиографический список: 1. Дежаткина С.В. Соевые отходы производства в свиноводстве / С.В. Дежаткина, А.З. Мухитов. // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.- Том 206. - 2011. - С. 55-60. 2. Кузнецова А.А., Левочкина Л.В. Соевая окара для комбинированных изделий. //Пищевая промышленность. – 2008. - №8. – С. 30-31. 3. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики / И.П. Кондрахин. Справочник.- М.: КолосС, 2004.-520с. 4. Любин Н.А. Физиологи-биохимический статус организма коров под влиянием кремнеземистого мергеля / Н.А. Любин, В.В. Ахметова, С.В. Дежаткина, В.В. Козлов. // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. 80 Баумана.- Том 206. - 2011. – С. 130- 138. 5. Любин Н. Соевые отходы – в кормовые ресурсы /Н. Любин, А. Дозоров, С. Дежаткина, А. Мухитов А. // Животноводство России, № 12, 2011. – С. 24-29. 6. Скопичев В.Г. Частная физиология. Ч.2. Физиология продуктивных животных / В.Г. Скопичев, В.Н. Яковлев. - М.: «КолосС». - 2008. – 555 с. MORPHOLOGICAL COMPOSITION OF BLOOD OF SOWS AT ADDITION IN DIET SOYA OKARA AND ZEOLITES Key words: soyа okara, zeolit, sows, pigs, blood, indicators. The positive effect of additives soy Okara and zeolites on the morphological composition of blood. УДК 579.22 ИЗУЧЕНИЕ КУЛЬТУРАЛЬНЫХ СВОЙСТВ БАКТЕРИИ ВИДА AEROMONAS SALMONICIDA Н.Г.Куклина, научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел 9176192488, [email protected], И.Г.Горшков, научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел. 9170572024, [email protected], Д.А.Викторов, к.б.н., старший научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел 9084775573, [email protected], Д.А. Васильев, д.б.н., профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: дифференциально-диагностические среды, �� Aeromonas�� salmonicida, аэромоноз. В статье исследуются особенности роста бактерии вида �� Aeromonas�� salmoni�� cida на различных дифференциально-диагностических средах. Введение. Аэромоноз – инфекционное заболевание промысловых рыб, вызываемое бактерией вида Aeromonas salmonicida. Aeromonas�� salmonicida�� – короткая неподвижная грамотрицательная палочка. Оптимальная температура роста – 20-28 ºС. Оксидазо- и каталазоположительная. Обычно положительны по аргининдигидролазе и отрицательны по орнитиндекарбоксилазе [2, 5]. 81 Колонии на мясо-пептонном агаре после 24 ч заостренные. После 48–72 ч колонии округлые, выпуклые, полупрозрачные, цельные и хрупкие [1]. Цель исследования: изучение особенностей роста бактерий вида �� Aeromonas�� sal�� monicida�� на различных питательных средах, используемых для бактериологической идентификации и дифференциации. Материалы и методы. Для исследования нами были взяты 10 штаммов бактерии �� A�� . salmonicida�� , выделенных нами из водоемов Ульяновской области и использованы следующие дифференциально-диагностические среды: бактоагар Плоскирева (для изучения ферментации лактозы), среда Левина (способность к разложению лактозы), висмут-сульфит агар (способность к образованию сероводорода), среда Симмонса (способность к использованию цитрата), ацетатный агар (способность к утилизации ацетата) [3]. АН1-УГСХА (среда накопления для Aeromonas�� salmonicida�� ), АН2-УГСХА (плотная селективная среда для выделения Aeromonas salmonicida), разработанные коллективом авторов [2]. Среды были приготовлены согласно рекомендациям изготовителя. Суточные культуры A. salmonicida были посеяны методом Дригальского. Посевы культивировали в термостате в течение 24 часов при температуре 28 ºС. Результаты исследования и обсуждение. На бактоагаре Плоскирева – колонии мелкие, правильной круглой формы, с ровным краем, слабоокрашенные, что говорит об отсутствии ферментации лактозы (лактозоотрицательные колонии). На агаре Левина колонии мелкие, круглые, ровные, прозрачные с розоватым оттенком – лактозоотрицательные. На висмут-сульфит агаре колонии мелкие, круглые, с ровным краем, коричневые, что говорит от отсутствии образования сероводорода. Колонии на среде Симмонса – мелкие, округлые, с ровным краем, цвет среды изменился с зеленого на синий, что свидетельствует о утилизации цитрата. В пробирках с ацетатным агаром – колонии мелкие, цвет среды изменяется с зеленого на синий, что говорит об утилизации ацетата. В пробирках со средой АН1-УГСХА наблюдалось помутнение прозрачного бульона, образование поверхностной плёнки, осадка, рост бактерий сопровождался изменением окраски среды с голубой на желто-зеленую. На чашках Петри со средой АН2-УГСХА были обнаружены однородные блестящие колонии округлой формы с ровными краями бордового цвета, плотной консистенции размером от 1 до 5 мм. Согласно определителю Берджи, бактерии вида A. salmonicida имеют следующие признаки [4]: Признак 1. Ферментация лактозы 2. Утилизация цитрата 3. Утилизация ацетата 4. Образование сероводорода 82 Результат, характерный для A. salmonicida + + - Выводы. Результаты исследования показали, что рост бактерий вида �� A�� . �� salmonicida на рассмотренных питательных средах имеет характерные для них признаки. Библиографический список: 1.Блинов А.И., Глушанова Н.А. // Аэромонады: выделение, идентификация и дифференциация, учебно-методические рекомендации, Новокузнецк, 1997. 2.Куклина, Н.Г. Конструирование питательных сред для выделения и индикации бактерий рода Aeromonas / Н.Г. Куклина, И.Г. Горшков, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев // Вестник ветеринарии. – Ставрополь: «Энтропос», 2013. – №64(1/2013). – С. 75-77. 3.Методические указания по санитарно- бактериологической оценке рыбохозяйственных водоемов. Указание министерство Здравоохранения РФ. 27 сентября 1999г. № 13-4-2/1742. 4.Определитель Берджи в 2-х томах. : Под ред. Дж.Хоулта, Н.Крига, П.Снита, Дж.Стейли, С.Уилльямса. – 2005. 5.Hirvela-koski Varpu. Fish pathogens Aeromonas salmonicida and renibacterium salmoninarum: diagnostic and epidemiological aspects.// academic dissertation, Helsinki,on September 23th 2005 (перевод). STUDY OF CULTURAL PROPERTIES BACTERIA OF AEROMONAS SALMONICIDA Kuklina N.G., Gorshkov I.G., Viktorov D.A., Vasiliev D.A. VPO Ulyanovsk Agricultural Academybehalf of the PA Stolypin, Ulyanovsk Keywords: differential diagnostic media, Aeromonas salmonicida, aeromonos. The article examines the growth characteristics of the bacteria Aeromonas salmonicida species at various differential diagnostic environments. УДК 57:001 ИНФОРМАЦИЯ В БИОЛОГИИ И.С. Ларионова, доктор философских наук, профессор ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени.К.И.Скрябина» В.Н. Байматов, доктор ветеринарных наук, профессор ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени.К.И.Скрябина» Е.В. Хромова, аспирант ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени.К.И.Скрябина» Тел. 8- 967-197-78-09, [email protected] 83 Ключевые слова: Информация, энтропия, ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота, РНК – рибонуклеиновая кислота, стероидные гормоны, гормоны белковой природы, цАМФ – циклический аденозинмонофосфат. Живая материя не всегда существовала на нашей планете, она прошла чрезвычайно длительный путь своего зарождения и эволюционного развития. И вполне очевидно, что для того, чтобы «вдохнуть жизнь» в структуры материи должны были быть не только веские причины, но и необходимые природные условия и предпосылки. Первопричиной появления жизни на Земле является универсальная способность материи к различным типам взаимодействия, видам движения и формам развития. Введение. Моделирование происходит на основании информации. Информация - смысловое содержание любого сигнала, которое может быть закодировано и раскодировано. Свойство материальных тел: пространство, время, энергия [4]. «Теория информации, пишет Г.Кастлер, это только одна из теорий систем. В отличие от родственных ей теорий для неё характерно определение степени специфичности объекта (или условия, или события), иначе говоря, степени отличия объекта от других возможных объектов (условий, событий). Связь и организация рассматриваются в терминах взаимной специфичности [8]. Сущность теории информации можно пояснить, сравнивая ее со статистикой. Статистика рассматривает разнообразие как зло и пытается выяснить, что же может всётаки утверждать или сделать, несмотря на разнообразие. Теория информации рассматривает разнообразие как положительное явление, без которого такие операции, как отбор, связь, представление, специфика, были бы невозможны; эта теория стремится, чего можно достичь благодаря некоторой степени разнообразия». Чтобы извлечь пользу из информации, мы должны уметь ее записать, особенно ту информацию, которая идёт из патологического очага, нужно знать семантическую сторону этой информации. В сознательной информации вырабатываются условия, код, например: отсутствие светового сигнала означает отсутствие неприятеля, один сигнал – приближение по суше, два сигнала – приближение по морю. «Информация есть нечто невещественное; она всегда связана с некоторым реальным носителем – каким – либо объектом или событием. Формально допустимо относится к носителям информации элементы речи или точки в пространстве событий, или конфигурации свойств» (Кастлер) [8]. Живые системы обладают удивительными природными свойствами самоуправления, самообновления и самовоспроизведения. Причем, даже отдельная клетка является сложнейшей биокибернетической системой, выполненной в миниатюре, где все компоненты, структуры и биохимические процессы упорядочены и функционируют на недосягаемом нано и молекулярном уровне. Наука показывает, что жизнь на нашей Земле существует, поддерживается и развивается благодаря наследственной информации [3,4,6,7]. Целью настоящей работы являлось выявления особенности информации в биологии. Для реализации были поставлены следующие задачи: 1) Характеристика свойств информации. 2) Реализация информации в биологических объектах. Материал и методы. Нами были подобраны литературные источники характеризующие информацию физики, химии и биологии. Проанализированные и показаны механизмы преобразования информации в клетке и её расшифровка. Формула для энтропии 84 была получена в XIX веке Больцманом в его работах по статистической физике. Больцман показал, что если в газе, состоящем из большого числа молекул, вероятности состояний отдельных молекул равны , то энтропия системы определяется соотношением некоторых констант. Можно считать, что энтропия системы является мерой неопределенности состояния молекул, составляющих эту систему. Эта интерпретация позволяет понять, почему Шеннон использовал ту же формулу в теории информации. Информация — это убыль неопределенности. До осуществления случайного события мы пребываем в полной неопределенности относительно того, какое из своих состояний оно может принять. После осуществления события, неопределенность устраняется. Величина энтропии может быть интерпретирована как количество информации, содержащейся в событии. Если молекулы равны, то энтропия системы определяется соотношением где — некоторая константа. Можно считать, что энтропия системы является мерой неопределенности состояния молекул, составляющих эту систему [13]. Шеннон пишет: «Эта теорема, равно как и необходимые, для ее доказательства условия, не являются необходимыми для собственно излагаемой теории». Она приведена, главным образом, для придания правдоподобия некоторым последующим определениям. Действительное же обоснование этих определений, однако, остается за их применениями. Свойства энтропии (Шеннон приводит 5 формул для энтропии,5 теорем и доказательств). Шеннон говорит об информационной избыточности и дает понятие об информации. Он рассмотрел величину характеризующую степень неопределенности события. Равенство этой величины нулю означает, что состояние события заранее известно; большее или меньшее значение числа соответственно отвечает неопределенности события. Предшествующее событие может ограничить количество возможных состояний для события и тем самым уменьшить степень его неопределенности [13]. Для того чтобы состояние события могло сказаться на последующем событии , необходимо, чтобы оно не было известно заранее; поэтому можно рассматривать как вспомогательное событие, также имеющее несколько допустимых состояний. Условная энтропия при условии выполнения события оказывается не больше первоначальной энтропии того же события. Эту разность называют количеством информации относительно события. Введенное определение, можно «развернуть», и определить энтропию как информацию о событии, содержащуюся в самом событии или как наибольшую информацию относительно, какую только можно иметь. Иными словами, энтропия равна той информации, которую мы получаем при осуществлении этого события, т.е. средней информации. Гормоны обеспечивают информационное взаимодействие клеток на уровне центральной и вегетативной нервной системы; отдельных желез внутренней секреции; в плазме крови; в органах – мишенях; в процессах метаболизма печени, почках и других органах (рис.1). Информация, каналы Рис.1 Схема гормональной связи, перерабатывающие информацию, система и регуляции каналы распоряжения от центров осуществляется, 85 прежде всего, нервной системой, структура которой отвечает этой функции. В организме имеются нервные образования, рецепторы, способные воспринимать изменения всех видов энергии внешней и внутренней среды и образовывать электрический сигнал, который является важным элементом информации об изменении состоянии среды. Вместе с этим, мы воспринимаем не просто свет, но и разнообразие красок его, встречающихся в Рис.2 Гормоны природе [12]. Мы воспринимаем не просто звук, но и многообразие, создаваемое природой, музыкантами, производством, и белковой при этом различаем не только силу, но и характер и особенности природы его. Если мы будем думать, что специфика информации зависит от рецепторов, то мы столкнемся в этом направлении с большими трудностями. Нужно допустить, что информация о многообразии той или иной энергии, падающей на организм, складывается не только от рецепторов, но и связанных с ними каналов связи; мы имеем в виду нервные проводки. По способу передачи информации выделяют аутокринное, изокринное, паракринное, телекринное и нейрокринное действие гормонов. 1) Аутокринное действие оказывают гормоны, высвобождающиеся из секретирующей клетки и действующие на нее же. 2) Изокринно действуют секретируемые вещества, переносимые от клетки к клетки по контактам их поверхностей. 3) Паракрийным действием обладают вещества (тканевые гормоны), поступающие из секретирующей клетки в межклеточное пространство и влияющие путем местной диффузии на соседние клетки. 4) Телекринное дествие (на незначительном удалении от места образования) оказывают гормоны, которые приносят клеткам-мишеням с током крови. Дистантным сигнальным действием обладают все традиционные «классические» гормоны желез внутреннней секреции. 5) Нейрокринное действие обеспечивается нейросекретами белковой и пептидной природы, которые высвобождаются из окончаний нейросекреторных клеток [12]. Передача информации в организме: Выделяют 2 группы: гормоны белковой природы, стероидные гормоны. Многие гормоны влияют на обмен веществ уже на клеточном уровне через вторичных посредников. Расположенные на цитоплазматической мембране рецепторы обеспечивают спецефическое распознование гормона и активируют мембранную аденилатциклазу(рис.2). Происходит активация ферментов, фосфолирование белков-протеиназ и осуществляется клеточный ответ. Спецефичность ответной реакции на клеточном уровне зависит не столько от цАМФ (циклической аденозинмонофосфат), сколько от активности рецепторов, функционально сопряженных с аденилатциклазой [11,12]. Под их влиянием активизируется синтез рибосомальной и инфармационной РНК. Стероидные гормоны связываются с надмембранными рецепторами клеток «мишеней» (рис.3). Гормоны проникают в ядро, где связываются с хроматином, и таким образом, влияют на биосинтез белка и ряда клеточных ферментов, синтез любого фермента определен структурой ДНК (рис.4). Они изменяют также проницаемость мембран митохондрий, влияют на ферментные системы этих субклеточных органелл, обеспечивают синтез АТФ, регулируют биосинтез белка, оказывая активирующее влияние на РНК-полимеразу, что в свою очередь повышает активность матричной ДНК, т-РНК, и-РНК и рибосомальной РНК, которые участвуют в синтезе белка [11]�� . Из исследований Хидена, что различные раздражения вызывают не только изменения количества РНК, но и соотношение азотистых 86 оснований в ней. Так, у контрольных кроликов отношение аденина к урацилу ядерной РНК 1:0,6±0,08, а у крыс – с выработанным рефлексом – 1:3,5±0,10 (Хиден и Эшга). Таким образом зашифровывается информация в клетке. Изменение количества РНК в нейронах при раздражении их ведет к выработке новых белков, обладающих иной ферментативной активностью. С этим связано и изменение содержание РНК в железистых образованиях, синтезирующих белок на экспорт Рис.3 Стероидные и в периферических органах, что ведет к функциональным и гормоны структурным изменениям их. Таким образом, зашифровывается информация в клетке [12]. Заключение. Нескончаемый поток энергии в клетке, поток энергии от одной клетки к другой или от одного организма к другому и составляет сущность жизни. Живые клетки обладают сложными и эффективными регуляторными системами для превращения одного вида энергии в другой. Изучением превращений энергии в живых организмах занимается биоэнергетика. Различают три основных вида превращения энергии под действием информации: 1) Лучистая энергия солнечного света превращается в химическую энергию. Она используется для синтеза из двуокиси углерода и воды углеводов сложных молекул. Энергия солнечного света, представляющая собой одну из форм кинетической энергии, которая превращается в один из типов потенциальной энергии. Химическая энергия запасается в молекулах углеводов и других питательных веществ в форме энергии связей между входящими в их состав атомов. 2) Химическая энергия углеводов и других молекул превращается в процессе клеточного дыхания в биологически доступную энергию макроэргических фосфатных связей. Такого рода превращения энергии осуществляются в митохондриях. 3) Превращение энергии этих фосфатных связей происходит для выполнения механической работы — при мышечном сокращении, электрической — при передаче нервного импульса, осмотической — при передвижении молекул против градиента концентраций, химической — при синтезе молекул в процессе роста. Часть энергии при этом теряется, рассеиваясь в форме тепла. Термодинамика дала несколько научных принципов для отражения химических процессов в организме. Энергия не создается и не исчезает, а лишь переходит из одной формы, в другую. В этом состоит первый закон термодинамики, который иногда называют законом сохранения энергии: общее количество энергии в любой изолированной системе остается постоянным. Различие между содержанием энергии системы в ее исходном и конечном состояниях точно соответствует изменению содержания энергии в окружающей среде. Биологические системы, в основном, изотермичны: температура частей или отдельных клеток примерно одинакова. Второй закон термодинамики гласит «Энтропия вселенной возрастает». Энтропия — это неупорядоченное состояние внутренней энергии (которая не способна производить работу). Второй закон можно выразить и иначе: Биосинтез и «Физические и химические процессы в замкнутой си- Рис.4 стеме происходят таким образом, что энтропия системы использование белков стремится к максимуму». Следовательно, энтропия — 87 это мера хаотичности или неупорядоченности. Поскольку почти все превращения энергии сопровождаются потерей некоторого количества тепла, обусловленной беспорядочным движением молекул, энтропия окружающей среды при этом повышается. Живые организмы «низкоэнтропийные» за счет повышения энтропии внешней среды. Корма и пища превращаются в двуокись углерода и воду, которые выделяются во внешнюю среду за счет чего повышается энтропия среды. Все физические и химические процессы протекают с уменьшением свободной энергии до тех пор, пока не достигается состояние равновесия, при котором свободная энергия системы минимальна, а энтропия максимальна. Свободная энергия — это полезная энергия, а энтропия служит мерой энергии, которую уже нельзя использовать. Информационные – регуляторные системы организма обеспечивают равновесие с внешней средой и обеспечивают гомеостаз. Библиографический список: 1. На пути к теоретической биологии. I. Пролегомены. (Материалы симпозиума 1966 в Беладжо, Италия. Пер. с англ., под ред. и с предисловием Б.Л.Астаурова). М.: Мир, 1970. 2. Л. Бриллюэн. Наука и теория информации. М.: Физматгиз, 1960. 3. N.Wiener. Cybernetics or control and communication in the animal and machine // The Technology Press and John Wiley & Sons, Inc., New York – Hermann et Cie, Paris, 1948. [Имеется перевод: Норберт Винер, Кибернетика, или управление и связь в животном и машине. – М.: Советское радио, 1968.] 4. С. Е. Здор. Об информационной сущности жизни и разума – М.: Спутник, 2008. 5. Д.Н.Зубарев. Неравновесная статистическая термодинамика. М.: Наука, 1971. 6. Ю.Я.Калашников.Триада жизни (вещество, энергия, информация). Дата публикации 29 ноября 2007, источник: SciTecLibrary.ru. 7. Ю. Я. Калашников. Информация – гениальное изобретение живой материи. Дата публикации: 13 июля 2007, источник: SciTecLibrary.ru. 8. Г. Кастлер. Возникновение биологической организации. М.: Наука. 1967. 9. А.Н. Колмогоров. Три подхода к определению понятия количества информации. //Проблемы передачи информации. 1965. Вып. 1. Т.1, С. 3. 10. Р.П.Поплавский. Термодинамика информационных процессов. М..: Наука, 1981. 11. А.А. Сысоев. Физиология сельскохозяйственных животных. – М.:Колос,1980. 12. А.Г.Савойский, В.Н.Байматов, В.М.Мешков. Патологическая физиология/Под ред.В.Н.Байматова.-М.: КолосС, 2008. 13. К.Шеннон. Работы по теории информации и кибернетике. – М.: Изд. ин.лит., 1963. INFORMATION IN BIOLOGY Larionova I.S., Baymatov V.N., Khromova E.V. Key words: Information, entropy, DNA - deoxyribonucleic acid, RNA - ribonucleic acid, 88 steroid hormones, protein nature of cAMP - cyclic adenosine monophosphate. Living matter is not always existed on the planet, it was an extremely long path of its origin and evolution. It is quite obvious that in order to “breathe life” into the structure of matter had to be not only a good reason, but also the necessary natural conditions and prerequisites. The root cause of the emergence of life on Earth, the universal ability of matter to the different types of interaction, types of movements and forms of development. УДК 579.62 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ БАКТЕРИИ YERSINIA RUCKERI – ВОЗБУДИТЕЛЯ БОЛЕЗНИ КРАСНОГО РТА ФОРЕЛИ (ERM) Е. Г. Логинова, студент факультета ветеринарной медицины, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел. +79297919518, [email protected], Д.А. Викторов, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел. +79084775573, [email protected], Д. А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: Yersinia�� ruckeri�� , болезнь красного рта форели, ERM, микробиология, биотехнология. В работе представлен литературный обзор по рассматриваемой тематике, приведены данные о биологических свойствах бактерий рода Yersinia. Болезнь красного рта (ERM) является одной из самых серьезных болезней, затрагивающих пресноводную форель, которая вызывается микроорганизмом Yersinia ruckeri. Данная бактерия была изначально изолирована от радужной форели. Однако существует вероятность, что указанным инфекционным агентом поражаются все виды лососевых. Есть данные, что Y. ruckeri была выявлена у озерной форели, чавычи, семги, пескарей, сиги, осетра, белокорого палтуса, у карпа, угрей, налима, серебристой сайды и арктического гольца, у ондатры, пустельги, стервятников, чаек, речного рака, людей, а также из сточных вод, и речной воды (Altinok, 2004). Бактерия Y. ruckeri может находиться больше 3 месяцев в водах рек, озёр, в отложениях устьев рек (Romalde и др., 1994). Инфекционная доза Y. ruckeri для лососевых и других восприимчивых разновидностей неизвестна (Stone, MacDiarmid�� , Pharo�� , 1997). К факторам, способствующим возникновению и распространению заболевания, относятся неблагоприятные условия окружающей среды, а также высокие показатели плотности посадки рыб (Altinok, 2004, Altinok, Grizzle, 2011). 89 Таблица 1. Биохимическая характеристика бактерий рода Yersinia. Показатели Y. enterocolitica Y. pseudotuberculosis окраска по грамму Оксидаза образование индола +/проба с метиловым красным + + реакция Фогеса-Проскауэра +/цитрат(среда Симонса) Образование сероводорода гидролиз мочевины + + Орнитиндекарбоксилаза + Подвижность + + гидролиз желатины 22⁰ использование малоната образование кислоты из D-глюкозы + + образование газа из D-глюкозы образование кислоты из : D-адонитола L- арабинозы + +/Глицерола + +/Дульцитола D-ксилозы +/+ Лактозы мальтозы + + D-маннитола + + D-маннозы + + Мелибиозы +/L-рамнозы +/Раффинозы Салицина Сахарозы + Трегалозы + + восстановление нитрата + + образование каталазы + + Примечания: «+» - положительная реакция, «-» - отрицательная реакция, «+/-» - вариабельная реакция. Y. ruckeri + +/+ + +/+/+ +/+ + + + + + Род Yersinia�� , согласно «определителю бактерий Берджи» (1997), входит в семейство энтеробактерий. Бактерии Y. ruckeri характеризуются как подвижные грамотрицательные палочки (Brenner, Krieg, Staley, Garrity, 2005). Температурный оптимум – 25-28 ⁰С. Границы рН для роста – в пределах 5,8-8,0; оптимум – 6,9-7,2. Факультативные анаэробы. 90 Обладают дыхательным и бродильным типами метаболизма. Не требовательны к питательным веществам. Штаммы Y�� . ruckeri�� растут на агаре Мак-Конки и XLD�� -агаре (�� Xylose�� Lysine Desoxycholate), добавление дефибринированной 7-10% крови овец усиливает их рост. Рост может также быть получен на tryptone soya agar (Oxoid CM131). Если есть подозрения на присутствие вторичной микрофлоры, то образцы должны также быть культивированы на агаре XLD (Oxoid CM469) или предпочтительно на Ribose Ornithine Desoxycholate agar (�� ROD�� ). Среда Shotts-Waltman – полуселективная среда для бактерий Y. ruckeri, с избирательными свойствами эквивалентными агару Мак-Конки. Индикация основана на способности штаммов Y. ruckeri гидролизировать твин 80, и неспособности производить кислоту из сахарозы. На агаровых средах Y. ruckeri растет в виде круглых беловатых сливающихся колоний. На бульоне вызывает равномерное помутнение. Биохимические свойства штаммов трёх видов Yersinia, с которыми работают сотрудники центра представлены в таблице 1. Библиографический список: 1.Stone M A B, MacDiarmid S C, Pharo H J. (1997). Import health risk analysis: salmonids for human consumption. Ministry of Agriculture Regulatory Authority, New Zealand. 2.Brenner, D. J., N. R. Krieg, J. T. Staley, and G. M. Garrity. 2005. Bergey’s manual of systematic bacteriology, 2nd edition. Springer-Verlag, New York. 3.Altinok I. The infectious route of Yersinia ruckeri is affected by salinity. Bull. Eur. association Fish // Pathologists. 2004. V. 24. 4.Altinok I., Grizzle J.M. Effects of salinity on Yersinia ruckeri infection of rainbow trout and brown trout // J. Aquatic Animal Health. 2011. V. 3. 5.J Carson, T Wilson. Australia and New Zealand Standard Diagnostic Procedure. Jan 2009. MICROBIOLOGICAL CHARACTERISTICS OF BACTERIA YERSINIA RUCKERI - RED MOUTH DISEASE PATHOGEN TROUT (ERM). E.G. Loginova, D.A. Viktorov, D.A. Vasilyev Keywords: Yersinia ruckeri, red mouth disease of trout, ERM, microbiology, biotechnology. This paper presents a review of literature on the subjects, data on the biological properties of bacteria of the genus Yersinia. 91 УДК634.4.084 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В РАЦИОНАХ СВИНЕЙ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМ ВИТАМИНА А И БЕТА-КАРОТИНА ДЛЯ СТИМУЛИРОВАНИЯ ПРОДУКТИВНЫХ КАЧЕСТВ СВИНОМАТОК И РОСТА ПОРОСЯТ Любин Н.А. , доктор биологических наук, профессор Стеценко И.И., доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный педагогический университет им. И.Н. Ульянова» Ключевые слова: витамин А, бета-каротин, антиоксиданты, продуктивные показатели свиноматок, рост и сохранность поросят Исследовано влияние скармливания различных форм витамина А и бета-каротина на показатели продуктивности свиноматок. Отмечено улучшение интенсивности роста опытных животных и более высокая их сохранность непосредственно с момента рождения и до отъема от маток. Введение. В условиях промышленной технологии ведения свиноводства необходимым её атрибутом является обеспечение равномерного круглогодичного воспроизводства стада свиней - важного показателя ритмичной работы промышленных комплексов с целью наиболее полного удовлетворения потребности населения в мясе. Однако современные интенсивные технологии содержания сельскохозяйственных животных приводят к возрастанию функциональных нагрузок на их организм и нарушению обменных процессов, ухудшению физиологического состояния, ослаблению естественных защитных сил. Прежде всего, это обусловлено развитием хронического стресса и его вредных последствий, которые становятся основными факторами снижения продуктивности. Одним из ведущих адаптивных эффектов ответной реакции организма на различные по своей этиологии стрессы является активация процессов перекисного окисления липидов. Поэтому руководствуясь биологической концепцией о функциональной взаимосвязи систем организма, одним из самых результативных подходов в решении проблемы повышения здоровья и продуктивности животных, следует признать регуляцию его антиоксидантноантирадикальной системы [2]. В этом отношении весьма перспективным является добавление в рационы животных различных стимуляторов, включая антиоксиданты, в виде кормовых добавок, премиксов, витаминов [8]. В последнее время возросло количество научных исследований по целесообразности применения в животноводстве биоантиоксидантов. В частности, значительное внимание в этом отношении привлекает витамин А и его предшественник бета-каротин [1,6,7,9,10]. Тем не менее, вопрос их роли на воспроизводительные качества свиноматок, рост, развитие и сохранность поросят остается спорным. Таким образом, изучение действия в организме свиней различных каротин и витамин А-содержащих добавок на продуктивность свиноматок, сохранность и рост поросят в подсосный период остается актуальным и по сей день, что и определило необходимость проведения наших иссле- 92 дований. Материалы и методы исследований. Для решения поставленной задачи были проведены исследования на свинокомплексе хозяйства «Стройпластмасс-агропродукт» Ульяновского района Ульяновской области на свиноматках крупной белой породы. По принципу аналогов были сформированы четыре группы животных, которые содержались на хозяйственных рационах при соблюдении зоотехнических и ветеринарных требований. Супоросные и лактирующие свиноматки всех групп получали одинаковый основной рацион (ОР). Первая (контрольная) группа получала ОР без дополнительных добавок. С 87-го дня супоросности и в течение лактации свиноматки 2-й, 3-й и 4-й групп дополнительно к основному рациону получали очищенный витамин А, каротинсодержащий препарат «Бетацинол» и витамин А с гепатапротектором соответственно. Выпаивание препаратов производилось с молочной сывороткой 10 дневными курсами из расчета: витамин А, витамин А с гепатопротектором − по 0,3 мл на животное для супоросных, 0,55 мл – подсосным свиноматкам; бетацинол − 2 мл для супоросных, 3 мл – подсосным свиноматкам на животное в сутки. Влияние препаратов на продуктивные качества свиноматок оценивали по многоплодию, крупноплодности и массе гнезда при рождении и при отъеме, учитывали сохранность поросят в подсосный период. Полученные данные обработаны биометрически и приведены в таблицах 1,2. Результаты исследований и их обсуждение. В результате проведенных зоотехнических исследований было установлено, что дополнительное скармливание к основному рациону воднодиспергированных форм «Витамин А», «Бетацинол», «Витамин А с гепатопротектором» в последнюю треть супоросности, когда происходит максимальная интенсивность роста плодов, – положительно повлияло на воспроизводительные показатели свиноматок. Так анализ результатов определения живой массы животных при рождении показал, что поросята, полученные от свиноматок второй, третьей и четвертой опытных групп имели большую массу, чем новорожденные, полученные от контрольных животных (таб.1). В итоге средняя живая масса гнезда поросят при рождении была выше во второй группе на 17,2%, в третьей группе – на 20,7% в четвертой на 12,6% по сравнению с животными из первой группы. Таблица 1. Репродуктивные показатели свиноматок Показатели Количество поросят, гол.: всего в т.ч. живых (многоплодие) Крупноплодность, кг Живая масса гнезда при рождении, кг Группы 2 опытная 3 опытная группа группа 4 опытная группа 10,00±1,73 9,6±2,03 10,30±0,61 10,30±0,61 10,00±1,00 9,8±1,07 10,00±0,32 9,8±0,49 0,87±0,03 1,05±0,02 1,07±0,02 1,00±0,02 8,70±1,12 10,20±0,52 10,50±1,08 9,80±0,29 1 группа (контрольная) Следует отметить, что количество поросят при рождении во всех опытных группах было практически одинаковым, однако жизнеспособность молодняка при рождении в 93 группах, где дополнительно животные получали «Витамин А», «Бетацинол», «Витамин А с гепатопротектором» была более высокой (таб.1). Предполагаем, что это связано с лучшей выживаемостью поросят в эмбриональный период за счет профилактики недостаточности витамина А. Установлено, что существует прямая зависимость между живой массой поросят при рождении и смертностью в первые недели жизни. Так, при живой массе менее 1 кг потери при традиционном выращивании могут составить 30 - 70% [3], что объясняет важность изучения динамики роста молодняка. Анализ полученных данных свидетельствуют, что, родившись более крупными, поросята второй, третьей и четвертой опытных групп лучше развивались и в подсосный период (таб.2). Так, в первой группе средняя живая масса поросят к 30-суточному возрасту была 5,91 кг, а у молодняка второй, третьей и четвертой опытных групп составляла 6,24, 6,36 и 6,33 кг, что было на 5,58%, 7,61% и 7,11% больше, чем в первой. Повышение приростов живой массы поросят в гнезде к 30- суточному возрасту также имело положительную динамику (таб.2), что очевидно, следует связывать с действием применяемых различных форм витамина А и бета-каротина на формирование приспособительных реакций в ответ на стрессовые периоды рождение и отъема. В целом, за опыт, среднесуточные приросты массы животных во второй и четвертой опытных группах, где поросята пре- и постнатально получали «Витамин А» и «Витамин А с гепатопротектором», составили 178,43 г и 177,20г соответственно, что на 18,9% и 18,13% больше, чем у первой группы, получавшей основной рацион. Среднесуточные привесы молодняка третьей группы, получавших каротинсодержащий препарат «Бетацинол», за период исследования увеличились по сравнению с контрольной группой на 32,53 % (Р<0,05) и составили 198,8г. Таблица 2. Интенсивность роста поросят Показатели: 1 группа контрольная 2 опытная группа 3 опытная группа Живая масса поросят 0,87±0,03 1,05±0,02 1,07±0,02 при рождении, кг Живая масса гнезда 8,7 ±1,12 10,2 ±0,52 10,5 ±1,08 при рождении, кг Сохранность, % 96,7 100 98 Живая масса поросят 5,91±0,28 6,24±0,13 6,36±016 на 30 сутки, кг Живая масса гнезда 43,4 ±0,84 58,8 ±4,21** 61,0 ±4,91** на 30 сутки, кг Сохранность, % 73,3 91,5 96 Среднесуточный 150,00±5,50 178,43±9,39 198,80±12,91* привес за опыт, г *Р<0,05 по сравнению с контрольной группой **Р<0,01 по сравнению с контрольной группой 94 4 опытная группа 1,00±0,02 9,8 ±0,29 98 6,33±0,16 58,2 ± 2,94** 92 177,20±14,11 Эффективность применения препаратов подтвердилась не только улучшением интенсивности роста опытных животных, но и более высокой сохранностью их непосредственно с момента рождения и до отъема от свиноматок (таб.2). Заключение. Таким образом, динамика живой массы поросят, а также показатели воспроизводительных качеств свиноматок позволяют утверждать, что скармливание воднодиспергированных форм бета-каротина, витамина А и его комбинации с биофлавоноидами способствует увеличению живой массы молодняка, оказывает положительное влияние на эмбриональный и постэмбриональный рост, развитие и сохранность приплода. Учитывая установленное ранее антиоксидантное действие применяемых форм [4,5], предполагаем, что изучаемые добавки обеспечивают более оптимальное течение обменных процессов в организме свиноматок, за счет стимулирования ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной системы, ретенции минеральных веществ и балансирования А-витаминного питания, и тем самым способствуют благоприятному течению беременности и лактации, питанию плода, рождению многочисленного здорового потомства, которое в более полной мере использовало генетический потенциал скорости роста. Библиографический список. 1.Антипов В.А. Бета-каротин: применение при воспроизводстве животных и птицы / В.А. Антипов. А.Н. Турченко, В.С. Самойлов, Р.В. Казарян, С.П.Кудинова, Е.В.Кузьминова // Информационный обзор. Краснодар, 2002. – 56с. 2.Галочкин В.А. Рекомендации по повышению неспецифичской резистентности и продуктивности животных и птицы с применением селенсодержащих препаратов / В.А. Галочкин, В.П. Галочкина, Е.В. Крапивина, Г.И. Боряев // Боровск, 2007. – 20с. 3.Кошелева Г. Получение здорового молодняка//Свиноводство, №3, 2004.-с. 1518. 4.Любина Е.Н. Перекисное окисление липидов и система антиоксидантной защиты у свиноматок при использовании новых воднодисперигированных препаратов витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина, В.А. Галочкин // Проблемы биологии продуктивных животных, 2012, №1. – с. 37-46 5. Любина Е.Н. Функциональное состояние антиоксидантной защиты и свободнорадикального окисления у свиней в зависимости от применения различных форм витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина, Н.А. Любин, И.И. Стеценко // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии, 2013, №1 (21). - с. 54-59. 6.Любина Е.Н. Эффективность использования новых форм препаратов витамина А и бета каротина в рационах моногастричных животных /Е.Н. Любина // Ученые записки КГАВМ им. И.Э. Баумана. том 205. - Казань, 2011, - С.–130-135 7.Марьина О.Н. Влияние применения препарата β-каротина на продуктивность свиней / О.Н. Марьина, Н.А. Любин / Известия Оренбургского государственного аграрного университета, 2008. - Т.3. - №19. -с. 214-215. 8.Сидоров И.В Роль биооксидантов в обменных процессах в организме животных / И. В. Сидоров., Н.А. Костромитинов, Е.М. Уколова // Ветеринария, №12, 2003, с.42-45. 9.Ткачева Л.В. Влияние селенопирана и витаминов А, Д, Е на естественную рези- 95 стентность и воспроизводительную функцию ремонтных бычков. автореферат диссерт. на соиск. степени к.б.н., Москва, 2002.- 20с. 10. Kostoglou P. Effect of β-carotene on health status and performance of sows and their litters /P. Kostoglou, S.C. Kyriaris, A. Papasteriadis,N. Rovmpies, C. Alexopoulos, K. Saoulidis // J.Anim.Nutr.2000,83, №3.- p.150-157. USE IN DIETS OF PIGS DIFFERENT FORMS OF VITAMIN A AND BETA-CAROTENE INCENTIVE FOR PRODUCING QUALITY GROWTH SOWS AND GROWTH PIGS Lubin N.A., Stecenko I.I. Key words: vitamin A, beta-carotene, antioxidants, productive indices sows, piglets growth and preservation The effect of feeding different forms of vitamin A and beta-carotene on productivity of sows. Marked improvement in the intensity of growth of experimental animals and the higher their safety from the moment of birth until weaning sows. УДК 612.753:619 РОЛЬ ВИТАМИНА А И БЕТА-КАРОТИНА В РЕГУЛЯЦИИ БИОМЕХАНИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК КОСТЕЙ СКЕЛЕТА ПОРОСЯТ Любина Е.Н. , кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: витамин А, бета-каротин, антиоксиданты, минерализация кости, момент инерции, прочность кости В статье описано влияние скармливания воднодиспергированных форм витамина А и бета-каротина на накопление кальция, фосфора и прочностные характеристики костей в раннем постнатальном онтогенезе у поросят. Введение. Современное свиноводство направлено на увеличение скорости роста живой массы поросят и продуктивных качеств свиноматок. Рациональное выращивание молодняка и получение максимальной продукции невозможно без познания закономерностей процессов, протекающих в костной системе, так как увеличение массы тела, прежде всего, связано с развитием костяка. Животное может иметь хороший экстерьер и развитые мясные стати тела только в случае нормального роста и развития костной ткани [3, 11,12]. Однако более чем у 50-80% поголовья молодняка обнаружены болезни костной системы [5, 9]. Особенностью онтогенеза поросят является высокая интенсивность их роста. Так 96 к 60-суточному возрасту живая масса поросят превышает массу при рождении в 15-20 раз, а к моменту окончания роста – в 200 и более раз [7]. Под грузом мышечной массы скелет может подвергаться деформационным изменениям, кроме того, возникающая при недостатке минеральных веществ, деминерализация костей, приводит к ослаблению костяка и связочно-суставного аппарата, создает предрасположенность животных к различным костным заболеваниям и травмам. По этой причине зачастую приходится преждевременно снимать животных с откорма с низкой живой массой. Известно, что предпосылки прочности скелета закладываются внутриутробно и процесс этот помимо генетического влияния связан с состоянием минерального обмена [6]. Недостаток ряда макро- и микроэлементов может быть причиной некоторых форм рассасывания минерального компонента костной ткани, а, следовательно, снижения её прочности. Также, формирование надежности скелета осуществляется путем функциональной адаптации к меняющимся условиям внешней среды, в том числе и к факторам питания. Ввиду известной роли ретинола [1] в процессах роста, научный интерес представляют исследования состояния костной ткани свиней при использовании витамина А и его предшественника бета-каротина. Известно, что инъекции масляных форм ретинола имеют низкую усвояемость, поэтому перспективным является скармливание воднодиспергированных препаратов, которые к тому же обладают большей биологической доступностью. В задачу данной работы входило исследование минерализации и прочностных характеристик костной ткани поросят на фоне применения различных воднодисперигированных форм витамина А и бета-каротина. Материалы и методы исследований. Для решения поставленной задачи были проведены исследования на свинокомплексе хозяйства «Стройпластмасс-агропродукт» Ульяновского района Ульяновской области на свиноматках и полученных от них поросятах крупной белой породы. По принципу аналогов были сформированы четыре группы животных, которые содержались на хозяйственных рационах при соблюдении зоотехнических и ветеринарных требований. Супоросные и лактирующие свиноматки всех групп получали одинаковый основной рацион (ОР). Первая (контрольная) группа получала ОР без дополнительных добавок. С 87-го дня супоросности и в течение лактации свиноматки 2-й, 3-й и 4-й групп дополнительно к основному рациону получали «Витамин А», каротинсодержащий «Бетацинол» и «Витамин А с гепатапротектором» соответственно. Выпаивание изучаемых форм производилось 10 дневными курсами из расчета: витамин А, витамин А с гепатопротектором − по 0,3 мл на животное для супоросных, 0,55 мл – подсосным свиноматкам; бетацинол − 2 мл для супоросных, 3 мл – подсосным свиноматкам на животное в сутки. В возрасте 1- и 40-суток был проведен убой поросят по три головы из каждой группы и на анализ взяты большеберцовые кости животных, которые отличаются повышенным содержанием неорганических веществ. Элементный анализ проводили с помощью атомно-абсорбционного анализа. Механические свойства костей изучали при помощи разрывной машины МИП-100-2, определяя прочность кости на изгиб - нагрузку в кг, необходимую для полного разрушения кости в поперечном направлении. Для этих исследований на столе пресса устанавливали две трехгранные призмы, на которые помещали костный образец. Нагрузка на кость осуществлялась через третью призму, укрепленную на верхней плоскости пресса, до полного разрушения кости. Полученные данные обработаны биометрически и приведены в таблицах 1-3. 97 Результаты исследований и их обсуждение. Известно, что рост и развитие нормального костяка связывают с обеспеченностью растущего организма минеральными веществами, приоритет среди которых принадлежит кальцию и фосфору. Дефицит именно этих химических элементов лимитирует рост и развитие костей скелета, приводит к возникновению заболеваний [4], а их соотношение рассматривается как индикатор состояния минерализации кости. Результаты наших исследований свидетельствуют, что наибольшая скорость кальцификации большеберцовой кости у новорожденных поросят наблюдалась во 2-й, 3-й и 4-й опытных группах (на 12,5, 9,9 и 13,4% выше по сравнению с контролем, табл. 1). Таблица 1. Минеральный состав костной ткани у 1-суточных поросят Группы 1 2 3 Кальций, г/100 г 18,2±1,1 20,4±1,2 20,0±0,9 Фосфор, г/100 г 9,90±0,72 9,93±0,52 9,93±0,47 Са/Р 1,83±0,03 2,05±0,05* 2,01±0,01** *Р<0,05 в сравнении с контрольной группой **Р<0,01 в сравнении с контрольной группой Показатели 4 20,6±1,2 9,90±0,49 2,07±0,02** Аналогичные сдвиги в накоплении кальция в костной ткани наблюдались у 40-суточного молодняка (табл. 2). При изучении возрастной динамики содержания кальция в большеберцовой кости поросят за период от 1- до 40-суточного возраста в опытных группах, получавших витамин А, бетацинол и витамин А с гепатопротектором, наблюдалось большее накопление этого элемента по сравнению со сверстниками из контрольной группы, в которой уровень кальция практически не изменился. В норме отложение кальция в ранний постнатальный период онтогенеза в трубчатых костях происходит с постоянным увеличением его концентрации [2]. Возможно, у животных контрольной группы имела место тканевая конкуренция за кальций и другие минеральные вещества. У новорожденных поросят содержание фосфора в костной ткани во всех группах было практически одинаковым. У 40-суточных животных накопление этого элемента в группах, получавших витамин А, бетацинол и витамин А с гепатопротектором, было выше на 16,6, 9,3 и 11,5% соответственно больше, чем в 1-й группе. Таблица 2. Минеральный состав костной ткани у 40-суточных поросят Группы 1 2 3 4 Кальций, г/ 100г 18,5±0,6 23,1±1,0* 21,7±1,2 22,1±0,5** Фосфор, г/ 100г 9,20±0,43 10,7±1,0 10,1±0,7 10,3±0,4 Са/Р 2,01±0,04 2,13±0,08 2,16±0,04 2,16±0,08 *Р<0,05 в сравнении с контрольной группой **Р<0,01 в сравнении с контрольной группой Соотношение кальция и фосфора в большеберцовой кости у суточных поросят Показатели 98 было более высоким у животных, получавших воднодиспергированные формы витамина А и бета-каротина по сравнению со сверстниками из контрольной группы: в контрольной группе оно составляло 1/1,83, а у поросят 2-й, 3-й и 4-й групп − 1/2,05 (Р<0,05), 1/2,01(Р<0,01) и 1/2,07(Р<0,01) соответственно. Более высокие значения коэффициента Ca/Р у поросят, получавших препараты, обусловлены увеличением уровня кальция на фоне неизменного уровня фосфора в костной ткани у животных этих групп. В костной ткани 40-суточных поросят отношение Са/Р также было выше во 2-й, 3-й и 4-й группах, относительно первой, хотя эти изменения носили характер тенденции. В целом, за период от 1- до 40-суточного возраста во всех группах величина коэффициента Ca�� /Р повышалась, что характеризует качественные изменения в составе костного аппарата. Согласно литературным данным [10], при этом уменьшается доля растворимого оксикальцийфосфата и возрастает доля нерастворимого оксиаппатита. Возможно, более низкие значения соотношения �� Ca�� /Р у поросят контрольной группы свидетельствуют о том, что в костной ткани этих животных кристаллы оксиапатита недостаточно сформированы. Одним из важных показателей, отражающих степень минерализации скелета, является прочность костей на изгиб, которая зависит от макро- и микроскопической архитектоники и состава костной ткани. Анализ данных, полученных в ходе проведенных испытаний костей на прочность, свидетельствует о том, предел прочности большеберцовой кости на изгиб у 1-суточных поросят 2-й, 3-й и 4-й групп был значительно выше, чем в первой группе (табл.3). Таблица 3. Механические свойства большеберцовой кости у 1-суточных поросят Показатели Предел прочности кости на изгиб, кг/см2 Момент инерции, см4 ×103 Группы 1 2 3 4 821±108 1058±205 980±119 1164±45‫٭‬ 5,75±0,91 3,20±0,62 3,47±0,17 3,35±0,17 Момент инерции (мера площади и поверхности, на которую прилагается сила) также изменилась под в влиянием применяемых воднодисперигированных форм бетакаротина, витамина А. Так у поросят 2-й, 3-й и 4-й групп она была ниже на 44,34%, 39,65% и 41,73% соответственно по сравнению с контрольными животными. Выявленная нами положительная корреляционная зависимость между пределом прочности бедренной кости на изгиб и уровнем ретинола в печени у 1-суточных поросят (r=0,62;Р<0,05), свидетельствует о взаимосвязи между этими показателями. Заключение. Таким образом, в результате проведенного исследования выявлено повышение прочности большеберцовой кости у поросят, получавших различные формы витамина А и бета-каротина при одновременном увеличении накопления кальция, фосфора и отношения Са/Р, что свидетельствует о положительном влиянии этих добавок на зрелость костной ткани и состояние костяка в целом. Следует учитывать также и то, что причины возникновения слабости конечностей можно связать не только с напряженным фосфорно-кальциевым обменом. Предполагается, что определенную роль в возникновении и развитии костной патологии играют 99 производственные стрессы при промышленном выращивании. Активные формы кислорода при их накоплении способны осуществлять окислительную деструкцию компонентов внеклеточного матрикса кости, что сопровождается изменением физико-химических свойств коллагена усиливая резорбцию костной ткани. Таким образом, окислительный стресс прямо или опосредовано влияет на метаболизм минерализованных структур, что в определенных условиях может привести к выраженным нарушениям опорно-двигательной системы. Выявленное в предыдущих исследованиях [8] антиоксидантное действие применяемых воднодиспергированных форм витамина А, бета-каротина и комбинации витамина А с биофлавоноидами, таким образом, благоприятно действует и на состояние костяка в целом, что говорит о целесообразности их применения в рационах супоросных и лактирующих свиноматок для повышения крепости костей полученных от них поросят. Библиографический список: 1.Вальдман А.Р. Витамины в животноводстве. Рига. Зинатне. – 1979. – 352с. 2.Иванов А.А. Формирование минерального состава костной ткани цыплят бройлеров при включении в их рацион регуляторов минерального обмена / А.А. Иванов, А.Н. Ильященко // Известия ТСХА, 2010. – выпуск 3, с.-115-119 3.Ивановский С.А. Сроки созревания костной ткани у телок // С.А. Ивановский, Г.И. Ивановская // сб.Нарушения обмена веществ и дерматиты животных:науч. тр.Башкирского с.-х.института.-Уфа, 1990.-с.26-29 4.Ильичева И.В. Изменение упругости копытцевого рога под действием минеральных веществ рациона / И.В. Ильичева, Г.М. Туников, И.Ю. Быстрова // Зоотехния, 2009. - №4. –с.19-20. 5.Кузнецов С.Г. Биохимические критерии обеспеченности животных минеральными веществами / С.Г. Кузнецов // Методы исследований питания сельскохозяйственных животных, Боровск, 1998. – с. 342-359. 6.Кузнецова Г.В. Минерализация костной ткани у детей с различным уровнем физического развития / Г.В. Кузнецова, А.Г. Ильин // Педиатрическая фармакология, 2008. –том 5, №6. –с. 58-6 7.Любина Е.Н. Минерализация и биомеханические свойства костной ткани у поросят при использовании воднодиспергированых добавок витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина, Б.Д. Кальницкий // Проблемы биологии продуктивных животных, 2011. - №4. - с.22-27 8.Любина Е.Н. Функциональное состояние антиоксидантной защиты и свободнорадикального окисления у свиней в зависимости от применения различных форм витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина, Н.А. Любин, И.И. Стеценко // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии, 2013, №1 (21). - с. 54-59. 9.Нуртдинов М.Г. Повышение биологического потенциала свиней при использовании энтеродетоксимина B / М.Г. Нуртдинов, И.Н. Яманчева, Н.А. Любин // Ветеринарный врач, 2007. - №2. - с. 24-27 10. Прохончуков А.А. Гомеостаз костной ткани в норме и при экспериментальных возействиях / А.А. Прохончуков, Н.А. Жижина, Р.А. Тигранян // М.: «Наука», 1984. – 200с. 11. Стеценко И.И. Активность роста и прочность костей скелета свиней при введе- 100 нии в рацион минеральных добавок / И.И. Стеценко, Н.А. Любин, Т.М. Шленкина // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии, 2011, №2 - с. 41-46. 12. Pupavac Snjezana, Sinovec Z., Jarak M. The effect of supplemental fungal fhytase on the performances and bone characteristic of piglets//Acta.vet.-2000.-v.50.-№2-3.- c.119-130 THE ROLE OF VITAMIN A AND BETA-CAROTENE IN THE REGULATION OF BIOMECHANICAL PARAMETERS OF THE SKELETON PIGS Lubina E.N. Key words: vitamin A, beta-carotene, antioxidants, bone mineralization, moment of inertia, strength of bone The article describes the effects of feeding water-soluble form of vitamin A and betacarotene on the accumulation of calcium, phosphorus and bone strength characteristics in early postnatal piglets. УДК 602.3:579.8 ОБНАРУЖЕНИЕ БАКТЕРИЙ РОДА KLEBSIELLA C ПОМОЩЬЮ РЕАКЦИИ НАРАСТАНИЯ ТИТРА ФАГА В ПИЩЕВОМ СЫРЬЕ И ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ Е.А. Ляшенко, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47,[email protected] С.Н. Золотухин, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» 8(8422) 55-95-47, [email protected] Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: обнаружение бактерий, клебсиелла, бактериофаги, пищевое сырье Работа основывается на обнаружении бактерий рода Klebsiella�� с помощью реакции нарастания титра фага в пищевом сырье и продуктах питания. Введение. Клебсиеллы широко известны как возбудители внутрибольничных инфекций [1] кроме того, клебсиеллы самостоятельно и в совокупности с другими энтеробактериями способны вызывать пищевые отравления [1,2]. 101 Целью наших исследований стала обнаружение бактерий рода Klebsiella�� с помощью реакции нарастания титра фага (РНФ) в пищевом сырье и продуктах питания. Материалы и методы исследований. В работе использовали специфические бактериофаги и индикаторные штаммы бактерий рода Klebsiella из музея НИИЦМиБ ФГБОУ ВПО «Ульяновской ГСХА им. П.А. Столыпина», материалом для исследования были образцы мяса. Индикацию бактерий рода Klebsiella в образцах мяса проводили с помощью реакции нарастания титра фага по методике описанной В.Д. Тимаковым, Д.М. Гольдфарбом (1961), В.Я. Ганюшкиным (1988). ». Полученный в исследованиях цифровой материал обрабатывали с использованием стандартных программ статистического анализа «�� STATISTIKA». Результаты исследований и их обсуждение. Индикаторные бактериофаги К - 10 УГСХА, К - 81 УГСХА использовали в рабочем разведении, содержащем не более 105 фаговых корпускул в миллилитре [3]. Кусочки говядины массой 5 г растирали в стерильной фарфоровой ступке и помещали в колбы объемом 100 мл, заливали стерильным МПБ из расчета 10 мл бульона на 1 г. В опытные колбы вносили индикаторные штаммы бактерий рода �� Klebsiella�� в концентрации 105, 104, 103, 102, 101 м.к./мл. Одновременно ставили контроль – колба с не контаминированной пробой мяса. Приготавливали для опытной и контрольной проб по 3 широких пробирки для каждого разведения культуры. Пробирка № 1, в которой находилась взвесь мяса и индикаторный фаг – опытная. Пробирка № 2 – без фага была контрольной для выявления в пробах мяса свободного фага. Пробирка № 3 – контроль на титр индикаторного фага. В пробирки № 1, № 2 вносили по 9 мл взвеси мяса с культурой, в пробирку № 3 – 9 мл стерильного МПБ. Затем в пробирки № 1, № 3 добавляли 1 мл индикаторного фага в рабочем разведении, а в пробирку № 2 вносили по 1 мл взвеси мяса (контроль на присутствие свободного фага). После культивирования при температуре 37 °С содержимое каждой пробирки разводили в 20 раз, т.е. 0,25 мл исследуемой смеси вносили в 4,5 мл МПБ так, чтобы при высеве 1 мл содержимого из пробирки № 3 на чашках образовалось несколько десятков негативных колоний фага. Инактивацию микрофлоры разведенных смесей в пробирках № 1, № 2, № 3 проводили путем прогревания в водяной бане при температуре 58 – 60 °С в течение 30 минут. После этого содержимое пробирок исследовали на количество образовавшихся корпускул бактериофага методом агаровых слоев. Для исследования методом агаровых слоев использовали 1,5 % МПА. Агар разливали в чашки по 25 – 30 мл, а перед разливом, для подавления роста воздушной микрофлоры в колбу с расплавленным агаром добавляли 0,04 % спиртовой раствор генцианвиолета (0,1 мл на каждые 100 мл МПА). Чашки подсушивали в термостате в течение 2 – 3 часов. Затем в пробирки с 2,5 мл расплавленного и остуженного (46 – 48 °С) 0,7 % агара, вносили 0,2 мл бульонной культуры и 1 мл разведенной и прогретой исследуемой смеси, перемешивали и выливали вторым слоем на чашки с 1,5 % МПА. Через 20 – 30 минут после застывания верхнего слоя агара чашки помещали в термостат. Учет результатов проводили через 12 – 16 часов инкубирования, подсчитывая число негативных колоний фага, образовавшихся на плотной питательной среде в опытной пробе и в контроле (контроль титра фага). Оценку РНФ проводили согласно представленной таблицы 1. 102 При наличие в исследуемом материале свободного фага (пробирка № 2) подсчитывали число фаговых частиц на чашке и вычитали из числа фаговых частиц индикаторного фага в опытных чашках (пробирка № 1). Полученную разницу сравнивали с контролем (пробирка № 3). РНФ, оцененная как сомнительная или слабо положительная, не имела диагностического значения. Учитывалось увеличение свыше 5 и более раз. Таблица 1. Показатели увеличения титра фага в РНФ Увеличение количества фаговых частиц в опытной пробе № 1 по отношению к контролю № 3 Оценка результатов Увеличение до 2,5 раз Сомнительная Увеличение от 3 до 5 раз Слабо положительная Увеличение свыше 5 раз Положительная Увеличение более 10 раз Резко положительная Данный критерий гарантировал достоверность результатов, поскольку он позволял исключить технические погрешности при титровании, при которых возможно выявление невысокой степени увеличение количества фага. Увеличение титра фагов К - 10 УГСХА и К - 81 УГСХА более чем в 5 раза произошло при концентрации бактерий рода Klebsiella 103 м.к./г мяса (табл. 2). Таблица 2. Увеличение количества фага в искусственно инфицированном мясе Бактериофаги Концентрация индикаторных штаммов К - 10 УГСХА Количество Увеличение колоний фага кол-ва фага (М ± m) (раз) К - 81 УГСХА Количество Увеличение колоний фага кол-ва фага (М ± m) (раз) 105 лизис > 10 лизис > 10 10 лизис > 10 лизис > 10 10 690 ± 3,21 10 770 ± 2,88 10,2 10 164 ± 2,08 2,3 159 ± 2,08 2,1 10 70 ± 5,68 1 68 ± 3,51 0 69 ± 0,57 0 75 ± 2,64 0 0 0 0 0 4 3 2 1 Контрольная проба Контроль «дикого» фага Полученные данные при исследовании мяса подтверждают увеличение титра фагов более чем в 5 раз при минимальной концентрации бактерий рода Klebsiella 103 м.к./ мл. 103 Заключение. В результате проведенных исследований по обнаружению бактерий рода �� Klebsiella�� в контаминированном указанными микроорганизмами мясе, можно утверждать об успешном применении метода РНФ, диагностическая чувствительность которого позволяет обнаруживать бактерии рода Klebsiella в минимальной концентрации 103 – 104м.к./ мл за 18 – 22 часа. Библиографический список: 1. Бакулов И.А., Смирнов А.М., Васильев Д.А. Токсикоинфекции и токсикозы 2. Поздеев О.К., Федоров Р.В. Энтеробактерии: руководство для врачей. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007.- 720 с. 3. Ляшенко Е.А. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Klebsiella, конструирование на их основе биопрепарата: Автореф. дис. … канд. биол. наук. – Саратов, 2006. – 20 с. DETECTION BACTERIA OF THE GENUS KLEBSIELLA C RISE BY REACTIONS FHAGE TITER IN FOOD RAW MATERIALS AND FOOD Lyashenko E.A., Zolotukhin S.N., Vasiliev D.A. Key words: detection of bacteria, Klebsiella, bacteriophages, food raw materials The work is based on the detection of bacteria of the genus Klebsiella by the reaction of phage titer rise in food raw materials and food products. УДК 636.612+636.2 ВЛИЯНИЕ ГИДРОФИЛЬНЫХ МАЗЕЙ НА ГЕМОСТАЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПЛАЗМЫ КРОВИ У ТЕЛЯТ С ГНОЙНЫМИ РАНАМИ П.М. Ляшенко, кандидат ветеринарных наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8-84231-5-11-59, [email protected] В.А. Ермолаев, доктор ветеринарных наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: кровь, гемостаз, фибриновый сгусток, телята. Установлено положительное влияние при местном применении гидрофильной мази «Гипофаевип» на гемостазиологические показатели плазмы крови у телят с гнойными ранами. Введение. Проблема интенсификации животноводства, увеличение производ- 104 ства молока и мяса в настоящие время являются одним из наиболее актуальных направлений в сельском хозяйстве. Вместе с тем, за последние десятилетия уровень заболеваемости животных с болезнями незаразной этиологии остаётся на высоком уровне [ 2, 3]. Поэтому на современном этапе развития молочного скотоводства разработка и внедрение новых препаратов и методов лечения гнойных ран у крупного рогатого скота имеет большое практическое значение [1, 3]. В этой связи большой интерес приобретает изучение влияния различных звеньев гемостаза на раневой процесс [2]. Актуальность изучения особенностей реакции системы гемостаза при гнойно-некротических поражениях у коров обусловлена важностью выявления опасных периодов по развитию тромбогеморрагических осложнений, что необходимо для организации системы лечебно-профилактических мероприятий в определённые фазы воспалительного процесса, обнаружения механизмов и выработку методов воздействия, оптимизирующих индивидуальную реакцию гемокоагуляции и фибринолиза на организм животного [1, 2, 3]. Решение этих задач имеет существенное значение при поиске средств корректного вмешательства в ход воспалительной реакции, способствующих ускорению очищения раневой поверхности от гнойного экссудата, ранней ликвидации воспалительных явлений и более быстрому появлению здоровых грануляций в ране, а также ускорению перехода воспалительно-дистрофической фазы в регенеративную фазу. Цель исследования направлена на изучение гемостазиологических показателей плазмы крови у телят, с экспериментально воспроизведёнными гнойными кожно-мышечными ранами, а также изменение этих показателей в зависимости от предпринятого лечения. Материалы и методы исследований. Работа выполнялась в период с октября по декабрь 2009 года на базе научно-производственной лаборатории «�� VITA�� » кафедры хирургии, акушерства и ОВД факультета ветеринарной медицины Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. В эксперимент были подобраны десять бычков чёрно-пёстрой породы – в возрасте 12 месяцев, с живой массой 200-220 кг. Сформировано две группы по пять голов по принципу парных аналогов. Всем животным воспроизводили модель гнойной кожно-мышечной раны, в области бедра с латеральной стороны. Инфицирование раны проводили путём фиксирования провизорными швами тампона, смоченного суточной микробной взвесью Enteroccocus fecalis (1 мл взвеси 1 млрд. микробных клеток). Заживление ран проходило по вторичному натяжению. К лечению приступали через сутки после инфицирования. У животных производили хирургическую очистку раны, затем смазывали раневую поверхность соответствующей эксперименту мазью: в опытной группе – Гипофаевип, в контрольной – Левомиколь. Кровь для исследований брали из ярёмной вены на протяжении всего эксперимента до нанесения ран (фоновые показатели), на 1, 3, 5, 7, 9, 11, 15, 19, 23 сутки и в день полного выздоровления. Гемостазиологические показатели крови определяли согласно методическим рекомендациям [1]. Полученный цифровой материал подвергался статистической обработке на ком- 105 пьютерной программе «Statistica 6». Разницу считали достоверной при Р<0,05. Результаты исследований и их обсуждение. В ходе эксперимента были получены следующие гемостазиологические данные. Количество фибриногена на первые сутки лечения увеличился в обеих группах. В подопытной группе максимальный подъём уровня фибриногена наблюдали на третий день лечения – 96,3%, затем снижался к концу лечения состав 21,1% ниже фона. В контрольной группе максимум количества фибриногена наблюдалось на 12-е сутки – 86,2%, а к концу лечения уровень фибриногена был ниже на 15% относительно фона. Активизация фибринолитической активности началась, через час после нанесения ран эти показатели были схожими и не имели достоверной разницы: в подопытной группе они составили 2,98% и контрольной – 2,82%. Однако в разгар начавшихся воспалительных процессов в ране с третьих по девятые сутки лечения, мы наблюдали в подопытной группе с шестых по 27-е сутки лечения плавное восстановление к фоновыми значениям. В контрольной же группе на шестые и девятые сутки фибринолитическая активность была выше, чем в подопытной в 6 раз. С 12-го дня в этой группе отмечалось снижение уровня фибринолиза. При исследовании этанолового скрининг-теста в фоновых показателях все животные реагировали отрицательно. На 6-е сутки в обеих группах в 100% случаев положительная реакция на наличие продуктов деградации фибрина (ПДФ) в кровеносном русле, что связано с разгаром воспалительных явлений. Начиная с 9-х суток в подопытной группе образование ПДФ уменьшается до 60%, а в контрольной до 80%. На 27 сутки в подопытной группе все животные реагировали отрицательно, а в контрольной – 20% положительно-реагирующих животных. Исходя из полученных данных, в обеих группах отмечено усиление гиперкоагуляционных процессов с первых суток лечения, далее в подопытной группе равновесие между процессами коагуляции восстанавливается, а в контрольной группе отмечались процессы вторичной гиперкоагуляции, в связи с ухудшением раневого процесса и возобновления воспалительных явлений. Заключение. Анализ проведённых исследований плазмы крови у телят, с экспериментально-воспроизведёнными гнойными кожно-мышечными ранами показал, что в подопытной группе, где применяли лечение гидрофильной мазью гипофаевип, гемостазиологические показатели восстанавливались до фоновых значений. Библиографический список: 1.Ермолаев В.А. Методы исследования системы гемостаза в ветеринарии. Методические рекомендации / В.А. Ермолаев, Б.С. Семёнов, С.И. Лютинский. Ульяновск: УГСХА, 1998. – 73 с. 2.Ляшенко П.М., Ермолаев В.А. Гемостазиологические показатели при гнойно-некротических поражениях копытец крупного рогатого скота при различных способах лечения // Материалы Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых. Ульяновск, 2004.- Ч.1.- С.292 – 294. 3. Ляшенко П.М., Ермолаев В.А. Применение гидроксильного геля и корректора гемостаза при лечении гнойных ран в области пальцев у крупного рогатого скота // Актуальные проблемы ветеринарии и зоотехнии в XXI веке: Сборник научных трудов. - Самара, 2004.- С. 25-26. 106 INFLUENCE OF HYDROPHILIC OINTMENTS ON GEMOSTAZIOLOGICHESKIYE INDICATORS OF PLASMA OF BLOOD AT CALFS WITH PURULENT WOUNDS Lyashenko P. M., Yermolaev V.A. Key words: blood, hemostasis, fibrinous clot, calfs. Positive influence at local application of hydrophilic Gipofayevip ointment on gemostaziologichesky indicators of plasma of blood at calfs with purulent wounds is established. УДК 619.636.2.082 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АДАПТОГЕНА «УТЕРОМАСТИН» ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПОСЛЕРОДОВЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ У КОРОВ О.Н. Пристяжнюк, аспирантка ФГБОУ ВПО Самарская ГСХА тел. 8(846-63) 46-7-18, [email protected] Х.Б. Баймишев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО Самарская ГСХА тел. 8(846-63) 46-7-18, [email protected] Ключевые слова: эндометрит, матка, лохии, период, роды, оплодотворяемость, осеменение. На основании проведенных исследований установлено, что препарат растительного и животного происхождения утеромастин эффективнее при лечении острого послеродового эндометрита сокращается срок инволюции половых органов и количество дней бесплодия. Эффективность производства молока во многом зависит от воспроизводительной функции коров. Одним из основных факторов нарушения функции размножения являются послеродовые патологии. По данным исследователей послеродовые осложнения (эндометрит) у коров составляют 15-18% от числа отелившихся животных. В основе послеродовых осложнений лежит снижение нервно-мышечного тонуса миометрия�� , резистентности организма и гомеостаза, что способствует развитию воспаления слизистой оболочки матки [5, 7, 8]. В последние годы при послеродовых осложнениях все больше используют препараты, имеющие растительное и животное происхождение, так как при их применении больное животное получает целый комплекс природных соединений, 107 и они действуют на организм легче, чем химические и синтетические средства, лучше переносятся и не обладают как антибиотики аккумулятивными свойствами [1, 2, 3, 4, 6]. Цель исследований – повышение эффективности лечения послеродового эндометрита у коров. На основании чего были поставлены следующие задачи: - определить этиологию послеродового эндометрита; - провести сравнительную оценку эффективности лечения препаратом утеромастин со схемой лечения применяемой в хозяйстве; - изучить показатели восстановления репродуктивных качеств коров исследуемых групп. Материал и методы исследований�� . Исследования проводились на коровах черно-пестрой породы в условиях СПК «им. Калягина» Самарской области. Для чего из числа животных с послеродовым эндометритом были сформированы две группы животных по 10 голов в каждой. Диагностировали эндометрит на основании анамнестических данных, клинических симптомов, которые проявлялись чаще всего на 4-7 день после отела, и результатов гинекологических исследований. При остром эндометрите из наружных половых органов выделялся экссудат чаще жидкой консистенции, серо-бурого или желто-бурого цвета. Его обнаруживали на полу, где лежали животные или при массаже матки через прямую кишку. Слизистая оболочка влагалища отечна, шейка матки приоткрыта и гиперемирована с наличием экссудата, стенка матки дряблая, сама матка опущена в брюшную полость. Иногда отмечали ее флюктуацию вследствие скопления экссудата. Животных контрольной группы лечили по следующей схеме: энгимицин 10% в дозе 3,0 мл на 50 кг живой массы, внутримышечно в течение недели ежедневно; тривитамин и АСД фракция-2 в соотношение 10:1 в дозе 1,0 мл с интервалом три дня, внутримышечно; метростим�� -а – 1,0 мл на 100 кг живой массы, трехкратно с интервалом 48 ч, подкожно. Животным опытной группы внутриматочно вводили утеромастин в дозе 100 мл с использованием шприца Жанэ. Препарат вводили через двое суток, но не более 5 раз, согласно временному наставлению № гос. регистрации 065/00569ТУ929/007-05377152-2008 [9]. Утеромастин – биологически активный, антибактериальный, лекарственный препарат в форме суспензии. В его состав входит: экстракт активированных эмбриональных и внеэмбриональных тканей птиц, а также экстракт активированных вегетативных тканей. Экстракт активированный – животного происхождения оказывает стимулирующее действие на энергетический обмен в клетке, повышает активность тканевых ферментов, нормализует обменные процессы. Экстракт лекарственных растений – оказывает выраженное противовоспалительное, дезинфицирующее, ранозаживляющее, биостимулирующее, антисептическое и обезболивающее действие. Критерием выздоровления служило изменение клинических признаков: резкое снижение выделений из матки (они становились светлыми, вязкими), отсутствие ихорозного запаха, нормализация температуры тела и пульса. При ректальном исследовании матка находилась в тазовой полости, рога матки эластично-упругие. Эффективность лечения оценивали по продолжительности курса кратности введения препаратов, проценту выздоровления животных, отдельным результатам (сроки проявления полового цикла, индекс осеменения, продолжительность сервис- 108 периода). Полученные данные обработаны биометрически с использованием критерия Стьюдента. Результаты исследований и их обсуждение�� . В результате мониторинга и данных ветеринарной службы хозяйства основными причинами послеродовых осложнений в форме эндометрита являются: задержание последа – 20%; трудные роды – 60% (�� крупноплодие�� , слабые схватки и потуги); патологические роды – 20%. Этиология эндометрита в хозяйстве связана с нарушениями технологии содержания и кормления животных. Так содержание коров в хозяйстве круглогодовое – привязное. Животным не организован ежедневный активный моцион, у коров укороченный сухостойный период – 40-50 дней, при продолжительности лактации – 345 дней, что обуславливает слабую подготовленность коров к родам. Это и является причиной слабых схваток и потуг, возникновения патологических взаимоотношений плода с организмом матери. По результатам биохимических исследований крови у коров. находящихся в запуске, отмечено снижение показателей сахара на 40%, каротина на 70%, а содержание в сыворотке крови кетоновых тел указывает на ацидотическое состояние коров перед отелом. Анализ эффективности лечения послеродового эндометрита с использованием утеромастина по сравнению со схемой лечения, используемой в хозяйстве, показал, что от способа лечения зависит продолжительность срока выздоровления коров, а также и продолжительность течения послеродового периода. Таблица 1. Инволюция половых органов у исследуемых групп Показатель Прекращение выделения лохий, суток Прекращение вибраций маточных артерий, дней Инволюция тела и рогов матки, дней Инволюция шейки матки, дней Регрессия желтого тела, дней Восстановление вульвы, дней Процент выздоровления коров Срок выздоровления, дней Группа животных контрольная опытная 15,48±0,62 13,44±0,23 10,63±0,98 7,02±0,54 26,72±2,40 21,13±1,17 18,77±0,64 7,82±0,43 80,0 22,40±2,18 21,56±1,82 16,30±0,81 15,27±0,72 5,44±0,55 100,0 17,52±1,43 Так, прекращение выделения лохий (табл. 1) завершилось у животных контрольной группы на 2,04 суток позднее чем в опытной группе, где применялся утеромастин. Инволюция тела и рогов матки у животных опытной группы завершилась на 5,61 дня раньше, чем у коров контрольной группы. Продолжительность регрессии желтого тела составила у животных контрольной группы 18,77 день, что на 3,5 дня больше чем у коров опытной группы. Показатели инволюции матки являются определяющими в процессе выздоровления животных больных эндометритом. Процент выздоровления в опытной группе составил 100,0%, а в контрольной группе – на 20,0% меньше. В опытной группе коров срок выздоровления составил 17,52 дня, что на 4,88 дня меньше по сравне- 109 нию с контрольной группой животных. На основании полученных данных показателей срока инволюции матки и процента выздоровления коров, исследуемых групп установлено�� , что применение препарата утеромастин при лечении послеродового острого эндометрита более эффективно по сравнению с комплексом препаратов, применяемых в хозяйстве. Изучение восстановления репродуктивной функции у коров исследуемых групп (табл. 2) показало, что градиенты в группах имели достоверные различия. Так, проявление первого полового цикла после отела в контрольной группе составило 40,20 дня, а в опытной – 31,0 дня, что на 9,2 дня меньше чем в контрольной группе животных. Осеменение коров проводили после проявления первой половой охоты. Оплодотворяемость (стельность) в первую половую охоту составила в опытной группе коров – 55,0%, а в контрольной – 35,0%, что на 20,0% меньше чем в опытной группе животных, где для лечения острого эндометрита применяли тканевый препарат растительного и животного происхождения утеромастин. Таблица 2. Репродуктивные качества коров в зависимости от использования препаратов при лечении острого послеродового эндометрита Показатель Количество животных, голов Проявление 1 полового цикла после отела, дней Оплодотворяемость, % в половую охоту в первую во вторую в последующие Всего осеменилось, голов Индекс осеменения Интервал между половыми циклами, дней Продолжительность сервис-периода, дней Группа животных контрольная опытная 20 20 40,20±4,26 34,00±2,18 40,0 10,0 20,0 14 2,4 29,7±3,76 112,50±8,60 50,5 20,0 10,5 18 1,5 23,1±2,14 97,42±6,23 Всего осеменилось в опытной группе 90,0% коров, что на 25,0% больше чем в контрольной группе животных. Индекс осеменения составил у животных контрольной группы 2,4, что на 0,9 больше, чем у коров опытной группы. Продолжительность сервиспериода составила в опытной группе животных 87,42 дня, что на 25,08 дня меньше чем аналогичный показатель в контрольной группе, что, по-видимому, является следствием положительного влияния тканевого препарата смешанного происхождения на функцию половых органов коров. Заключение�� . Таким образом, результаты проведенных сравнительных исследований указывают на то, что использование препарата растительного и животного происхождения утеромастин при лечении послеродового острого эндометрита более эффективно, чем применяемая схема лечения в хозяйстве. Применение препарата утеромастин повышает на 20,0% показатель выздоровления животных, за счет сокращения сроков инволюции половых органов, а также повышает оплодотворяемость коров в период 110 половой охоты, что способствует уменьшению срока плодотворного осеменения коров после отела на 15,08 дня. Библиографический список 1.Баженова, Н.Б. Применение биологически активных препаратов для профилактики задержания последа у коров / Н.Б. Баженова, В.У. Давыдов, Т. Токторбаев, Т.С. Степанов // Научные основы профилактики и лечения патологии воспроизводительной функции сельскохозяйственных животных. – Воронеж, 1998. – С. 12-13. 2.Баймишев, М.Х. Профилактическая эффективность адаптогенов при патологии послеродового периода у коров / М.Х. Баймишев, В.С. Григорьев // Ветеринария. – 2010. – №6. – С. 39-42. 3.Безбородов, Н.В. Лечение, коров больных эндометритом / Н.В. Безбородов, Е.Г. Яковлева // Зоотехния. – 2004. – №2. – С. 22-23. 4.Болотин, В.М. АйСиДивит для профилактики послеродовых осложнений у коров // В.М. Болотин, А.М. Кобольков, Д.Д. Новиков, Т.И. Кугелева // Ветеринария. – 2009. – №4. – С. 35-36. 5.Горев, Э.Л. Восстановление репродуктивной функции и аспекты ее регуляции у коров после родов. – Душанбе, 2004. – 339 с. 6.Мерзляков, С.В. Применение хитозана для повышения воспроизводительной способности коров / С.В. Мерзляков, Л.Ю. Топурия, В.А. Кленов // Известия ОГАУ. – 2006. – №3. – С. 71-73. 7.�� Морякин�� , С.В. Патология репродуктивных функций у высокопродуктивных молочных коров / С.В. Морякин, В.А. Анзоров // Зоотехния. – 2008. – №2. – С. 25-26. 8.Нежданов, А.Г. Послеродовая инволюция половых органов у коров // Ветеринария. – 2008. – №2. – С. 48-51. 9.Тимченко, Л.Д. Временное наставление на препарат «Утеромастин» /Л.Д. Тимченко, И.В. Ржепаковский. – номер гос.регистрации 065/00569ТУ929/-007-053771522008. USE ADAPTOGEN «UTEROMASTIN» IN THE TREATMENT OF OBSTETRIC COMPLICATIONS IN COWS Pristyazhnyuk O.N., Baimischev H.B. Key words: endometritis, uterus, lochia, period, childbirth, fertility, insemination. On the basis of these studies found that the drug plant and animal origin uteromastin effective in the treatment of acute postpartum endometritis shortens involution sexual organs and the number of days of infertility. 111 МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ОСЕТРОВЫХ РЫБ НА НАЛИЧИЕ ГЕРПЕСВИРУСА И ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА ПОЛУЧЕННОГО ПИЩЕВОГО СЫРЬЯ Васильев Д.А., Мерчина С.В., Калабеков И.М., Кавеева А.Р. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: SbSHV - герпесвирус�� , нуклеиновые кислоты, полимеразная цепная реакция (ПЦР), GeneBank. Введение Промышленному выращиванию осетровых рыб уделяется возрастающее внимание во всем мире. Это обусловлено, с одной стороны, угрозой исчезновения ценных видов осетровых рыб, а с другой, - значительным увеличением спроса на деликатесную продукцию - икру и мясо осетровых. Вместе с тем опыт показывает, что интенсификация аквакультуры сопряжена с появлением ряда негативных факторов, одним из главных среди которых являются болезни объектов разведения. Как и в аквакультуре в целом, основной ущерб осетроводству наносят вирусные болезни [�� Hedrick et al., 2001]. Первые работы по изучению вирусных болезней осетровых рыб были выполнены в США Р. Хедриком в середине 80-х годов прошлого столетия, в лаборатории которого получены первые линии клеток белого осетра и впервые выделены вирусы осетровых рыб. На сегодня у североамериканских видов осетровых обнаружено 10 разных вирусов, наиболее опасными из которых являются: аденовирус, иридовирус и два герпесвируса белого осетра [�� Hedrick et al., 1985; Watson et al, 1995; Georgiadis et al., 2000]. Эти вирусы вызывают болезни у мальков и сеголетков белого осетра, которые обычно развиваются весной или в начале лета, реже - осенью. Осетроводство в России в последние годы становится одной из наиболее перспективных отраслей аквакультуры. В результате обследований культивируемых осетровых рыб вирусных агентов до последнего времени обнаружено не было [Щелкунов И.С, 2000; 2006]. Весной �� 2006 г. на племенном рыбоводном предприятии - Конаковском заводе товарного осетроводства (КЗТО, Тверская обл.) наблюдали массовую гибель сеголетков сибирского осетра, Acipenser �� baeri, которая в отдельных партиях доходила до 100%. Аналогичные вспышки болезни регистрировали позднее в других осетровых хозяйствах. Исключение паразитов и бактерий как возможных возбудителей указывало на необходимость проведения исследований по установлению роли вирусов в этиологии этой болезни. Целью данной работы является аплекация метода ПЦР в структуру ветеринарносанитарной экспертизы промысловых рыб. Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи: 1.Выделить нуклеиновые кислоты из исследуемых проб рыбы семейства осетровых. 2.Поставить ПЦР в режиме «реального» времени. 112 3.Проанализировать полученный результат. Материалы и методы исследований Материалом для выполнения исследования послужили внутренние органы охлажденной рыбы семейства осетровых из Московской области, г.Орехово-Зуево, ООО «МИГЕКО» . Были отобраны 7 проб от биоматериала : − Сердце − Печень − Почки − Ротовой аппарат − Жабры − Мышечная ткань у хвоста − Верхние плавники Отбор проб проводили с соблюдением условий асептики, исключая возможность попадания микроорганизмов из внешней среды. Для анализа пробы отбирали стерильными инструментами по (20-30г) в стерильные полипропиленовые пробирку на 1,5см³ и подписывали маркером. Для анализа нуклеотидного состава ДНК герпесвируса осетра были использованы базы данных GeneBank. Для разработки специфических праймеров и зондов использовали пакет прикладных программ «Oligo 6.0». Специфичность рассчитанных олигонуклеотидов проверяли при помощи интернет-сервиса BLAST (http://www.ncbi.gov.nlm.com). Для проведения ПЦР-РВ был использован программируемый термоциклер «Rotor-Gene» 6000 («Corbett Research», Австралия). Постановку полимеразной цепной реакции проводили в микропробирках емкостью 0.2мл. Таблица. Состав реакционной смеси для проведения ПЦР-РВ: № п/п Кол-во на 1 пробу (мкл) Реактив Кол-во на N проб (мкл) 1 Бидистилированная вода 9.5 9.5 х (N+1) 2 5-кратный ПЦР буфер 5 5 х (N+1) 3 Смесь праймеров (10pM) 2 2 х (N+1) 4 dNTP 1 1 х (N+1) 5 Магний хлористый (25mM) 2 2 х (N+1) 6 Зонд (10pM) 0,5 0,5 х (N+1) 7 Фермент Taq-полимераза 0,15 0,15 х (N+1) Реактивы вносили в последовательности, приведенной в таблице. В последнюю очередь добавляли фермент. Смесь перемешивали и разливали по 20 мкл�� в пр�� едварительно промаркированные пробирки для ПЦР. В соответствующие пробирки вносили по 5мкл нуклеиновой кислоты. Пробирки с готовой ПЦР-смесью встряхивали на смесители на смесителе, все капли со стенок осождали центрифугированием в течение 5-10 сек. Переносили пробирки в амплификатор и проводили ПЦР при следующих 113 температурных режимах: − Активация TaqF-полимеразы при 95⁰С – 5мин − Денатурация при 95⁰С – 20сек; − Отжиг при 60⁰С – 20сек; 1этап в течение 5циклов − Элонгация при 72⁰С – 20сек; − Денатурация при 95⁰С – 20сек; − Отжиг при 60⁰С – 20сек., учет сигнал 2этап – 35 циклов − Элонгация при 72⁰С – 20сек. Параллельно с исследуемыми образцами ставили отрицательный контрольный образец (с деионизированной водой). Смесь для контрольного образца готовили по той же прописи, что и для анализируемых образцов. Результаты исследований Результаты интерпретировали на основании наличия (или отсутствия) пересечения кривой флюоресценции с установленной на соответствующем уровне (0.05) пороговой линии (treshhold) значения порогового цикла «Ct». Образец считали отрицательным, если значение «Ct» по каналу FAM отсутствовало. Результат учитывали только в случае прохождения положительных и отрицательных контролей амплификации и отрицательного контроля выделения нуклеиновых кислот. Результаты исследования образцов внутренних органов рыбы семейства осетровых с помощью ПЦР в режиме «реального» времени представлены на рисунке 1. Рис. 1. - Кривая флюоресценции проб №1, №2, №3, №4, №5, №6, №7, ОКВ, ПВК. Образец №4 и №5 дал положительный результат.. 114 Заключение В ходе данной работы нам удалось выделить нуклеиновые кислоты из всех 7 проб охлажденной рыбы семейства осетровых: Сердце, Печень, Почки, Ротовой аппарат, Жабры, Мышечная ткань у хвоста, Верхние плавники. Методом Real time PCR мы провели выявление герпесвируса (? ) анализируемых проб. Таким образом, в результате проведенных исследованиях были выявлены две пробы с положительным результатом, это №4- сердце и №5- печень, можно заключить, что данные две пробы контаминированны герпесвирусом . В настоящее время нет доказательств заражения и клинических проявлений заболевания у людей. Поэтому ветеринарно - санитарная оценка при данной инфекции не разработана. Считаем необходимым работникам здравоохранения обратить особое внимание на указанное заболевание, так как возможность заражения человека герпесвирусом не исключена. Библиографический список 1.Щелкунов А.И. Биологические, физико-химические и молекулярногенетические свойства герпесвируса сибирского осетра. – 2010. №. – С.14 С.52 2.Герпесвирусная болезнь у осетровых рыб в России/ И.С. Щелкунов, Т.Н. Щелкунова, А.И. Щелкунов, Ю.П. Колбасова, Л.В. Диденко, А.Ф. Быковский// Российский вет. журнал. Сельскохозяйственные животные. - 2007. - № 1. - С. 10-12. 3.Щелкунов, А.И. Герпесвирусная болезнь сибирского осетра/ А.И. Щелкунов, И.С. Щелкунов//Ветеринария.-2010. -№ 1.-С. 18-21. 4.Щелкунов, А.И. Биологические свойства герпесвируса сибирского осетра in vitro/ Щелкунов А.И., Щелкунова Т.П. // Вопросы рыбного хозяйства Беларуси: сб. науч. трудов. - Минск: РУП Институт рыбного хозяйства, 2008. - Вып. 24. - С. 501-503. MOLECULAR GENETIC RESEARCH METHODS FOR THE PRESENCE OF STURGEON HERPESVIRUS AND SANITARY AND VETERINARY EVALUTION OF THE FOOD RAW MATERIALS Vasilyev D.A., Merchina S.V., Kalabekov I.M., Kaveeva A.R. VPO «Ulyanovsk State Agricultural Academy named. PA Stolypin « Keywords: SbSHV - herpes virus, nucleic acid polymerase chain reaction (PCR), GeneBank. 115 УДК 613: 615.8/ 636: 3.075 ПРОВЕДЕНИЕ ОПЕРАТИВНОГО ДОСТУПА К КРУГЛОЙ СВЯЗКЕ ПЕЧЕНИ У КОШЕК МЕТОДОМ ЛАПАРОТОМИИ Романов А.В., аспирант ФГБОУ ВПО Уральская государственная академия ветеринарной медицины, тел. 8 (906) 890-35- 71, [email protected] Ключевые слова: Печень, кошки, лапаротомия, наркоз, брюшная полость, круглая связка печени, операционное поле, апоневроз, хирургический прием, нейролептик, хирургические цапки. В статье описывается методика оперативного доступа при помощи лапаротомии к круглой связке печени у кошек. Введение. В настоящее время, для лечения собак и кошек с патологиями печеночного аппарата незаразной этиологии, применяются многие методы и приемы хирургических манипуляции, одними из них, являются оперативные хирургические вмешательства. Целью некоторых хирургических операции, проводимых в условиях современных ветеринарных клиник, является не только удаление различных патологических очагов, но и проведение оперативного доступа и ревизии состояния органов брюшной полости у мелких домашних животных, а также для местного медикаментозного введения лекарственных веществ в определенные системы органов с лечебными целями. Характерным примером таких операции является лапаротомия для доступа к круглой связке печени. Целью нашего исследования явилось проведение оперативного доступа к органам и тканям брюшной полости, а конкретно - проведение оперативного доступа к круглой связке печени, для изучения ее анатомо — топографических особенностей и проведения лечебных манипуляции на печени. Объектами для проведения наших исследовании, послужили беспородные кошки средней упитанности в количестве 6 голов, возрастом от 2 до 5 лет, живой массой 3, 5 — 5 кг., из них 3 кота и 3 кошки. Кошки для исследовании, отбирались из числа оставленных на эутаназию, так как раствор бриллиантовой зелени, является сосудистым ядом и при введении, токсичен для печени. Методом исследования, явилась лапаротомия брюшной полости с лечебнодиагностической целью. Местом проведения лапаротомии, является асептические условия операционной ветеринарной клиники « 9 жизней», город Южноуральск. Результаты исследования и их обсуждение. Для проведения оперативного вмешательства к круглой связке печени, необходимы условия строгой асептики и антисептики. Желательно для проведения лапаротомии, выдерживание исследуемых животных на 12- 24 часовой голодной диете, но без ограничения дачи им воды [1]. При невозможности 116 голодной диеты, перед оперативным вмешательством, животным ставится опорожняющая клизма. Для опорожнения мочевого пузыря, применима дополнительная катетеризация или надавливание на брюшную стенку. Кошки фиксируются на операционном столе в положении на спине, лапы дополнительно фиксируются марлевыми тесемками. По возможности, приподнимается задняя половина туловища, для оттеснения органов к диафрагме и предотвращении выпячивания кишечника. Перед оперативным вмешательством, шерсть на брюшной стенке в предпупочной области выбривается, кожа моется с теплой водой с мылом, обезжиривается спиртом. Оперативное поле ограничивается марлевыми салфетками, фиксированными к коже с помощью пинцета Микулича. Операция проводится под общим наркозом, в качестве которого, применяли «Золетил 100» в дозе 0,01 мл./ кг. живой массы. Для проведения лапаротомии с диагностической целью в ветеринарной практике, проводится одна из ее разновидностей — срединная лапаротомия или медианный разрез по белой линии живота, дающим хороший доступ к органам брюшной полости. Еще этот метод называется нижняя лапаротомия или лапаротомия на вентральной брюшной стенке. Достоинством данного метода, является сохранение целостности нервов, сосудов и мускулатуры брюшной стенки, а недостатком является замедленная регенерация сухожилия белой линии, а также угроза расхождения ее краев с выпадением петель кишечника и образования пупочных грыж. Так как, круглая связка печени, является по своей природе облитерированной пупочной веной, отходящей от пупочного кольца, то оптимальным местом для проведения хирургического разреза, является предпупочная область. Сначала аккуратно рассекается кожа, положение скальпеля при этом «писчее перо», затем рассекается рыхлая клетчатка, поверхностную фасцию и белую линию. Разрез оптимально производить, исходя из длины среднего пальца хирурга, на протяжении 6- 8 см. Перед рассечением пристеночной брюшины, с помощью тампонады или гемостатических зажимов, останавливают кровотечение, положение скальпеля при этом, указательным пальцем на верхнюю часть лезвия для предупреждения сопротивления при разрезе. Рану расширяют с помощью крючков или хирургических цапок, брюшину приподнимают двумя анатомическими пинцетами и между ними при помощи ножниц или скальпеля делают небольшое отверстие, в которое хирург вводит указательный и средний пальцы и завершает разрез. Эта манипуляция, выполняется с целью предупреждения травмирования органов брюшной полости при оперативном доступе. На края раны брюшины, накладывают зажимы и не снимают их до конца проведения доступа. Под края вскрытой брюшины с помощью пинцетов, стерильный марлевый тампон, который также фиксируется к краям разреза при помощи зажимов Микулича [2]. Картина оперативного доступа к круглой связке следующая. В пупочной области, различают следующие слои — кожа, подкожная клетчатка с желтой брюшной фасцией, мышечно — апоневротический слой, поперечная фасция и брюшина. От мышечно — апоневротического слоя брюшиной стенки в области пупочного кольца, круглая связка печени, начинается в виде тонкого и плотного соединительнотканного тяжа, длиной 4 см., переходящего в полупрозрачный дорсальный участок связки, длиной около 5 см., идущий к воротам печени. К париетальной стенке брюшины в области пупочного кольца, 117 вентральный участок круглой связки печени, прикреплен с помощью двух апоневрозов в виде прозрачных пленок, отходящих справа и слева от вентрального участка круглой связки печени. Кроме этого, в области пупочного кольца к париетальной брюшине, круглая связка печени, фиксирована с помощью своеобразной сальниковой сумки, представленной рыхлой жировой ткань ( рис.1,2). Рис.1. - Сальниковая сумка в области пупочного кольца в месте выхода круглой связки печени Рис.2. - Тот же участок. Сальниковая сумка удалена. Вентральная часть круглой связки печени крепится к париетальной брюшине Для отделения круглой связки печени от окружающих тканей брюшины, произведено ее отпрепарирование от окружающих тканей (рис. 3) 118 Рис. 3. - Этап выделения круглой связки печени из предбрюшинной клетчатки, методом ее отпрепарирования от окружающих ее тканей либо методом липоаспирации Для уяснения механизма движения лекарственных веществ по круглой связке печени, в ее участок в области пупочного кольца, в месте перехода плотной соединительной ткани в рыхлую ткань связки, с помощью шприца, инъецировался водный раствор бриллиантовой зелени, для визуализации окрашивания связки и отражения картины движения жидкости по ее полости через определенные промежутки времени (рис4). Рис. 4. - Введение раствора бриллиантовой зелени в полость круглой связки. Место входа связки в ворота печени, показано на рис.5 119 Рис.5. - Дорсальная часть круглой связки, входит в ворота печени После проведения оперативного доступа к круглой связке печени, приступают к закрытию операционной раны. При ушивании брюшины, избегают попадание в разрез стенок кишечника. Для этого, в углу раны брюшину подтягивают двумя кровоостанавливающими пинцетами наружу и соединяют ее края под контролем зрения. Брюшная стенка ушивается глухим двухэтажным швом. Первый этаж, накладывается непрерывным скорняжным швом на брюшину и ткани белой линии, второй — прерывистым узловатым швом с валиками на кожу Библиографический список: 1. Большаков, О.П. Оперативная хирургия и топографическая анатомия // О.П. Большаков, Г.М. Семенов, Спб, Питер, 2004, с. 34-45 2. Чубарь, В.К. Оперативная хирургия домашних животных // В.К. Чубарь, Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, М., 1951, с. 36-38 HOLDING OF OPERATIVE ACCESS IN LIGAMENT ROUND OF LIVER FOR METHODS OF LAPAROTOMY Romanov A.V. Key words: Liver, cats, laparotomy, narcosis, abdominals cavity, ligament round of liver, operative field, aponevrosis, surgical technique, neiroleptics, surgical spuds. In the article described methodics of intra operative researches abdominal cavity for causes of laparotomy for ligament round of liver in cats. 120 УДК 619: 616.36- 091:636.7 ТОПОГРАФИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ВНУТРИБРЮШИННОГО ХОДА ПУПОЧНОЙ ВЕНЫ У ЩЕНКОВ И КОТЯТ Романов А.В., аспирант ФГБОУ ВПО Уральская государственная академия ветеринарной медицины, тел. 8 (906) 890-35- 71, [email protected] Ключевые слова: брюшная полость, пупочная вена, раствор формалина, воротная вена, анастомоз, латекс, пупочное кольцо, щенки, котята В статье отражены основные моменты топографии пупочной вены у новорожденных щенков и котят. Местом проведения исследовании, является научная лаборатория, кафедры анатомии и гистологии сельскохозяйственных животных ФГБОУ ВПО Уральской государственной академии ветеринарной медицины. Для проведения исследовании, в качестве объектов использовались трупы клинически здоровых новорожденных щенков и котят, взятые в течение родов. Целями проведения исследовании, являлось макро — микропрепарирование устья пупочной вены у щенков и котят с использованием бинокулярной лупы МБС — 2 [1]. Для проведения исследовании, провели отбор новорожденных щенков и котят, с соблюдением принципов гуманности к опытным животных, посредством передозировки эфирным наркозом. Для проведения анатомических исследовании, все щенки и котята, были разделены на группы, в зависимости от половой разницы, возраста и массы. Для микропрепарирования, использовались только свежеумерщвленные трупы без фиксации в растворе формалина. Далее с помощью шприц под давлением через устье пупочной вены в толще пупочного канатика, в ее устье производили заливку жидкого раствора строительного латекса, для придания пупочной вене наполненной естественной конфигурации. Наливка устья пупочной вены раствором латекса, производилась сразу после усыпления животного в течение 10 минут, при этом, использовался теплый раствор латекса, для предупреждения сосудистого спазма в пупочной вене. После заливки раствора латекса в устье пупочной вены, щенки и котята, заворачивались во влажную ветошь для застывания раствора латекса и помещались в холодное место. При проведении препарирования, предпочтение отдавали глазным пинцетам с минимальной шириной лезвия, для того чтобы не порвать мелкие сосудистые магистрали. Сначала вскрывалась брюшная полость щенка и осматривалось интаабдоминальное положение пупочной вены до входа ее в ворота печени. Затем для мацерирования паренхимы печени, аккуратно под воздействием маленькой струи воды и спринцовки с уксусной кислотой проводили изучение внутриорганного хода русла пупочной вены. Струя воды подавалась для увлажнения сосудистых магистралей, а раствор уксусной кислоты для удаления излишков тканей при исследовании. После предварительной мацерации паренхимы печени и снятии ее капсулы, щенки и котята помещались на 5 дней в 20 % - ный раствор формалина который придавал 121 паренхиме печени крошкообразную консистенцию и дальнейшее мацерирование печени не представляло большого труда. Морфометрию проводили по градуированной шкале окуляр- микрометра с известной ценой деления. После выдержки в растворе формалина и мацерировании паренхимы печени, препараты промывались под теплой струей воды, изучались, описывались, зарисовывались и фотографировались. Щенки и котята помещались в банки с раствором формалина в качестве рабочих макропрепаратов. Картина препарирования следующая. Из плаценты, пупочная вена, начинается двумя — тремя тонкими веточками, которые объединяются в одну а иногда и в две ветви пупочного вены в толще канатика, что чаще отмечалось у щенков. В толще пупочного канатика, пупочные вены или одна пупочная вена, идут параллельно с пупочными артериями. В области пупочного кольца в случае их двойственности они сливаются в дону магистраль, а при одинарной пупочной вене она продолжается вглубь брюшной полости Рис. 1. - Анастомоз пупочной вены и воротной вены у щенков. Пупочная вена приподнята с помощью иглы. Рис. 2. - Тот же анастомоз у котят. Пупочная вена, занимает вентральное положение, воротная вена, приподнята с помощью иглы. Вверх отходит венозный ( Аранциев ) проток. 122 до ворот печени. В области пупочного кольца пупочная вена имеет два апоневроза в виде тонких пленок справа и слева от нее, для фиксации ее к пупочному кольцу. У котят эти апоневрозы выражены в меньшей степени чем у щенков (рис 1, рис.2). На уровне границы левой и квадратной долей печени, пупочная вена входит в ворота печени, у щенков на уровне ниже 3- 4 мм. венозного протока, а у котят на уровне 5- 6 мм. ниже венозного протока. В толще печеночной паренхимы магистраль пупочной вены анастомозирует с воротной веной, особенно хорошо выражен ее анастомоз с левой ветвью воротной вены, с правой ветвью анастомоз представлен более мелкой ветвью. Не доходя до места анастомоза с воротной веной печени, пупочная вена отдает ветвь каудальной полой вене в виде венозного или Аранциевого протока [2]. Внутри паренхимы печени у котят, а у щенков этот анастомоз может быть и вне паренхимы печени в области ее ворот. После рождения, пупочная вена и Аранциев проток подвергаются процессу облитерации и превращаются в круглую связку печени и венозную связку печени соответственно. Морфометрия пупочной вены у новорожденных щенков и котят следующая. Длина пупочной вены у щенков в среднем составляет 14,4 + 0, 44 * мм., а у котят 9,6 + 0, 25* мм. ( р< 0, 05) что очевидно связано с многоплодностью кошек и размером котят при рождении. Толщина вентрального, среднего и дорсального участков пупочной вены у новорожденных щенков и котят следующая. У щенков, толщина вентрального участка составила 1, 2 + 0, 24 мм , среднего 2, 4 + 0, 46 мм**, дорсального 3, 2 + 0,34 мм.. У котят эти показатели составили 1,3+ 0,23 мм, 2, 1+ 0,44 мм и 3,1+ 0,22 мм**. соответственно. Таким образом, в ходе исследования, выяснен а закономерность хода пупочной вены, частота ее двойственности в толще пупочного канатика, чаще происходит у щенков чем у котят, длина пупочной вены у щенков выше чем у котят. Венозный проток у котят, анастомозирует с пупочной веной внутри печени, а у щенков встречались случай экстраорганного их анастомоза. Библиографический список 1.Автандилов, Г.Г. Медицинская морфометрия [Текст]: справочник // Г.Г. Автандилов.- М.: Медицина, 1990. - с. 11- 13 2. Акаевский, А.И. Анатомия домашних животных [Текст]: учебник // А.И. Акаевский, Ю.Ф. Юдичев, С.А. Селезнев, М.: Аквариум - Принт, 2005.- с. 86- 87 МORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS OF UMBILICAL CORD IN NEWBORN PUPPIES AND KITTENS Romanov A.V. ФГБОУ ВПО Уральская государственная академия ветеринарной медицины, тел. 8 (906) 890-35- 71, [email protected] Key words: abdominal cavity, umbilical vein, solution saline, portal vein, anastomosis, latex, umbilical ring, puppies, kittens. In the article to describe moments of topography of umbilical vein of newborn puppies and kittens. 123 УДК 619:616.36:615.032:611.36:636.8 МЕТОДИКА ВВЕДЕНИЯ КОНТРАСТНЫХ ВЕЩЕСТВ В ОБЛАСТЬ КРУГЛОЙ СВЯЗКИ ПЕЧЕНИ У КОШЕК ПРИ ГЕПАТОЗАХ Романов А.В., аспирант ФГБОУ ВПО Уральская государственная академия ветеринарной медицины, тел. 8 (906) 890-35- 71, [email protected] Ключевые слова: Печень, кошки, динамика, рентгеновский аппарат,наркоз, контрастное вещество, круглая связка печени В статье описывается методика введения контрастных веществ, как аналог лекарственных веществ в область круглой связки печени у кошек. Введение. Всовременных ветеринарных клиниках и лечебницах, на долю незаразной патологии печеночного аппарата, приходится до 75%всех заболевании. Болезни печени наносят большой ущерб, заключающийся в потере породно— племенных и экстерьерных качеств у породных животных. Ветеринарные специалисты, при диагностикегепатопатологии, особенно при различных формах гепатозов, а также диагностике портокавальных шунтов и сосудистых аномалии в системе воротной вены,чаще прибегают кконтрастному рентгенологическомуисследованию печени, так как этот метод дает более объективную характеристику визуализации состояния патологического процесса в печени ина его основании специалист ставит рациональный способ лечения. Цельюнашего исследования, явилось установлениединамики движения контрастного вещества по круглой связке печени под контролем рентгеновского аппарата, через определенные промежутки времени до достижения паренхимы печени. Объектами для проведения рентгеноконтрастныхисследовании, послужилибеспородные кошки средней упитанности в количестве6 голов, возрастом от 2 до 5 лет, живой массой 3, 5 — 5 кг.,из них 3 кота и 3 кошки. Методомисследования,явилось введение контрастноговещества, путем инъекции в область круглой связки печени. В качестве контрастного контрастного веществадля введения,использовали2% - ный раствор«Верографина» (производства Венгрии) в дозе 0,5 мл. / кг. в шприце, объемом5мл.на одну голову,который выступает как аналог лекарственных веществ, применяемых при гепатопатологиях.Для рентгеновской съемки, использовалась стационарная рентгеновская установка РУМ 20 — М с цифровым преобразователем рентгеновской пленки. Местом проведенияисследования,является кинологический центр «Таир»,город Златоуст. Результаты исследования и их обсуждение. По данным доступной нам литературы, было установлено, что круглая связка печени, представляет собойзапустевшую пупочную вену, которая в постнатальном онтогенезе, претерпевает процесс естественной 124 анатомической облитерации [1]. У кошек, от 2 до 3 лет, она тянется от пупочного кольца, плотно прилегая к стенкам брюшины в области пупочного кольца, а у кошек в возрасте 3- 5 лет , в области пупочного кольца, она обрастает сальниковой сумкой, удерживающей ее. Тяж связки более плотный у молодых животных,облитерированная часть в области пупочного кольца, представленная плотной эластической тканью, также более плотная у молодых кошек, у животных старше, часть из плотной соединительной ткани заметно утончается, при перетирании его между двумя пальцами, ощущается его скольжение. При гистологическом исследовании образцов круглой связки печени,отобранных от кошек в возрасте 2 — 5 лет, нами выяснено, что ее полость в дорсальной части связки, заполнена рыхлой соединительной тканью, по своей структуре имеющей ячеистое строение в форме « пчелиных сот». Рыхлую ткань,снаружи окружает трубка из эластическойсоединительной ткани. В связи с этим фактом и был предпринят способ введения лекарственных веществ в область круглой связки печени,так как вводимая жидкость, попадая в полость круглой связки при влиянии диффузии из области с наибольшей ее концентрацией в областьс наименьшей ее концентрацией,движется по этим ячеям. Ход проведения манипуляции следующий. Кошка подверглась общему наркозу. Для основного наркоза, использовали «Золетил 100», в дозе 0,01 мл., для премедикации, использовали нейролептик « Рометар 2%», в дозе 0,1 мл. на килограмм живой массы. Шерсть в пупочной области выбривалась, кожа моется теплой водой с мыломи обрабатывалась спиртом.Место инъекции, определялось исходя из отступа на 3 см краниально от пупочного кольца и на 3 см. ниже реберной дуги ( проекция рис1). Игла при инъекции ставилась перпендикулярно, при введении ее, ощущался щелчок прокола апоневроза и далее игла проводилась под углом в 90 градусов, вглубь брюшной полости. Затем непосредственно проводилась инъекция контрастного вещества. Для проведения первого снимка, сначала вводилась болюсная доза контраста в дозе 2 мл., затем производился первый снимок,который позволял определить место распространениеконтраста после инъекции,после чего вводилось оставшаяся доза5 мл. контрастного вещества ( рис.2) [2]. Рис. 1. - Проекцияна брюшной стенке при инъекции контрастного вещества 125 Рис. 2. - Место инъекции и положение иглы при введении контрастного веществав область круглой связки печени Далее животное помещалосьнапросвинцованную пластину рентгеновского стола.Рентгенологическую съемку, осуществляли в положении животногона спине и в боковом положении. Первый снимок движения контрастного вещества, выполнялся сразу после его введения, а последующие снимки, выполнялись с интервалом в 15 мин. в течение 1 часа, до достижения контрастного вещества паренхимы печени. Рентгенологическая картина следующая. В первые 15 минут после инъекции, контраст заполнил подкожную клетчатку, в форме полукруга,, которое хорошо видно на латеральных снимках ( рис 3). Рис. 3. - Первая серия снимков. Контраст распространился по брюшной полости в области круглой связки печени Во втором снимкедвижение контраста по круглой связке печени,наметилось едва 126 заметной чертой, нечетко различимой на снимках в обоих проекциях ( рис. 4). Рис. 4. - Вторая серия снимков. Контраст распространился по круглой связке печени В третьей серии снимков, движение контраста по круглой связке печени, отметилось более отчетливее, при движении его в дорсальном участке связки, на вентральной проекции (в положении на спине), движение контраста и достижение его паренхимы печени, имело форму гриба,ножка которого представляла проекцию круглой связки в брюшной полости. При проведении рентгенологической съемки в четвертый раз,на рентгенограммах визулизировалось контраст, который достигпаренхимы печени. Исходя из этой серии снимков, фиксировалось время достижения контрастапаренхимы печени для каждой половозрастной группы кошек ( рис.5). Рис. 5. - Третья серия снимков. Контраст достиг воротной вены печени 127 При проведении рентгенографии, были отмечены следующие особенности. У молодых кошек, возрастом до 3 лет, контраст достигал паренхимы печени, в течение 45 минут, у котов этой возрастной группы, контрастирование паренхимы, наблюдалось в течение 30 минут. Укошек, возрастом до 5 лет, контраст в течение часа достигал паренхимы печени, у котов этой же возрастной группы, контраст достигал паренхимы печени за 50 минут. Критерием достижения контрастного вещества паренхимы печени, служила визуализацияпоследних рентгеновских снимков, где контрастное вещество достигло воротной вены печени и распространилось по ней [3]. Заключение. Таким образом в ходе исследования выяснено, что при введении контрастного вещества в область круглой связки печени, оно достигает паренхимы печени и распространяется по воротной вене. В связи с этим, можно рекомендовать оптимальный способ гепатокоррекции функциональных нарушении печени, используя метод введения лекарственных веществ в область круглой связки печени у кошек. Библиографический список: 1.Акаевский А.И. Анатомия домашних животных // А.И. Акаевский, М., 1984, с. 80- 82 2.Липин В.А. Ветеринарная рентгенология // В.А. Липин, М.Т. Терехина, А.Л. Хохлов, М., Колос, 1966, с.200- 207 3.Шерстнев, С.В. Чтение рентгеновских снимков // С.В. Шерстнев, Екатеринбург: Филантроп, 2002, с. 23-28 METHODICS OF INJECTION CONTRASTSSUBSTANCES IN REGION OF LIGAMENT ROUND OF LIVER IN CATS FOR HEPTOSIS Romanov A.V. Key words: Liver, cats, dynamic, rentgenological apparatus, narcosis, contrasts substance, ligament round of liver In the article described methidics of injection contrasts subjects for analogy of remediumin region of ligament round of liver in cats. 128 УДК 636.7/.8: 611-013.85 МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТРОЕНИЯ ПУПОЧНОГО КАНАТИКА У НОВОРОЖДЕННЫХ ЩЕНКОВ И КОТЯТ Романов А.В., аспирант ФГБОУ ВПО Уральская государственная академия ветеринарной медицины, тел. 8 (906) 890-35- 71, [email protected] Ключевые слова: Пупочный кнатик, щенки, котята, пупочные артерии, пупочная вена, аллантоис, вартонов студень, медия. В статье описывается морфологическая характеристикастроения пупочного канатикаи входящих в него сосудов у новорожденных щенков и котят. Местом проведениягистологических исследовании, является научная лаборатория, кафедры анатомии и гистологии сельскохозяйственных животных ФГБОУ ВПО Уральской государственной академии ветеринарной медицины. Объекты исследования. Для проведениягистологических исследовании,в качестве объектов использовалисьпупочные канатики новорожденных щенков и котят, взятые во время родов. Целями проведения гистологических исследовании,явилось изучение особенностей гистологического строения пупочного канатика (пуповины)у плодов сук, его сравнение с гистологическим строением строения пупочного канатика у плодов кошек. Материалы и методы исследования.Для проведенияисследовании, произвелиотбор свежих кусочков пупочных канатиков, объемом не более 1 см, производили фиксацию в 10% формалине, в течение суток, затем промывали их в проточнойводе. Далее, проводили обезвоживание в спиртах понарастающей концентраций, начиная с 50% и до концентраций 100%.Затем материал, заливали в парафин, в стеклянных чашках,для его уплотнения, в течение 1 суток,нарезали на парафиновые блоки. Парафиновые блоки, нарезали на микротоме, срезы делали, толщиной 8 - 10 мкм.Препараты окрашивалигематоксилин – эозином. Обсуждение. Роды у суки,наступили на 60 сутки беременности и роды у кошки, наступили на 62 сутки беременности. Длительность родового периода, напрямую зависит отколичества щенков или котят в помете, примногоплодии, имеют место ранние роды, если 1 или 2, то период беременности затягивается и роды – поздние.Длина пупочного канатика, у сук,в среднем, достигала около 12 см., у кошек, в среднем, достигала 10 см. Толщина пупочного канатика у сук, составляет в среднем 0,3- 0, 8 мм., укошек,в среднемв пределах 0,5 – 0, 8 мм. В ходе эксперимента, были выявлены следующие результаты. На рис. 2, представлено гистологическоестроение пупочного канатика у плодов сук. Пупочный канатик, представляет собойтрансформацию амниотической ножки у плода, серо – голубого цвета с поверхности. Сверху пупочныйканатик,покрыт однослойным столбчатым мерцательнымэпителием, который называется амнион, с ядром овальной формы, расположенном ближе к базальному полюсу клеток,на апикальнойповерхности которого, имеются мер- 129 цательные волоски, именуемый амниальной оболочкой(амниотический эпителии пупочного канатика). Подамниальная оболочка, представлена вязким студенистым веществом, именуемым «вартонов студень» или так называемаямезенхимальная соединительная оболочка, эта оболочка, развивается из внезародышевой мезодермы, во взрослом организме, онане встречается.В его составе, мывыделиликлетки овальной формы -мукоциты, которые являются составляющими клетками слизистой массы студня,состоящие из липопротеидной клеточной оболочки,ядра, и вязкого вещества цитоплазмы, которое содержит гликопротеиды.Ядро мукоцитов, окрашено базофильно в синий цвет, а цитоплазма – в оксифильный малиновый цвет. Эти клетки, выполняют роль депо питательных веществ. Межклеточное вещество вартонова студня, представлено мезенхимой – эмбриональной соединительной тканью. В ее структуре, выделяют клетки -мезенхимоцитыотростчатой формы,отростки которых,формируютсетчатую структуру.Сверху мезенхимоциты, покрытылипопротеидной оболочкой.В цитоплазме мезенхимоцитов, также имеется аморфная масса малинового (оксифильного цвета) и синее (базофильное) ядро. Межклеточное вещество мезенхимоцитов,представляетвязкуюаморфную массу студенистой консистенции [1].Основнаяфункция вартоновастуденя, заключается в предотвращений давления на сосуды пуповины из вне, оберегание сосудов пуповины отперекручивания,осуществление их трофики, то есть вартоновстудень, выполняеттрофическую, амортизационную и буферную функций. Также в вартоновом студенее, расположены сетевидно сосуды сосудов пупочного канатика. В составе пупочного канатика у сук сразу выделяют четыресосуда. В состав этих сосудов, входят две пупочные артерии, две пупочные вены и проток аллантоиса(мочевой проток -урахус).Стенки пупочных сосудов, в составе пупочного канатика, очень толстые. По пупочным венам, осуществляется кровоток свежей артериальной крови к печени плода, а пупочные артерии,наоборот,уносят от плодавенозную кровь богатую углекислотой и метаболитами. Печеньплода, выполняет кроветворную функцию, а защитную роль в эмбриональный период, выполняет плацента. Проток аллантоиса, или такназываемый мочевой проток (урахус мочевого пузыря плода), выполняет функциютранспортаметаболической жидкости, которая выделяется плодом в околоплодные воды.Стенкипупочных артерии -плотные, в их оболочках,различают эндотелии интимы, представленный клетками призматической формы с овальными ядрами,подэндотелиальных слой,представленный рыхлой соединительнойтканью, который в пупочном канатике, бывает плохо выражен, мышечную пластинку (медию) артерии, представленной двумя слоями гладкихмиоцитов, веретенообразной формы,внутренний слой – косой(поперечный или циркулярный) и наружный слой – продольный,между клетками в видепрослоек, также лежит рыхлая соединительная ткань. Внутренний циркулярный слой, у пупочных артерии, со стороны интимы, снаружи покрыт внутренней эластической мембраной,которая отделяетего от подэндотелиальной рыхлой соединительной ткани. Имеется и наружная эластическая мембрана, которая отделяет наружный слой гладких миоцитов от адвентиции артерии. Адвентицияартерии – наружная оболочка сосудов, представлена рыхлой соединительнойтканью, содержащая коллагеновыеволокна, которые ориентированы параллельно друг другу и окружающими кровеносный сосуд спирально, в некоторыхместах пупочного канатика, адвентиция представлена вартоновым студенем. Между волокнами прослеживается тонкие прослойки соединительной ткани.В оболочках вен, выделяют такие 130 же слои, как и у артерии, внутренняя эластическая мембрана,покрывающая внутренний циркулярный слой, наружний продольный слой и наружная эластическая мембрана, покрывающая внешний продольный слой у пупочных венотсутствуют. В мышечной оболочке вен, выделяют большое количество сетевидно расположенных эластических волокон, между которыми имеются фибробласты. В мышечных оболочкахпупочных артерии и вен, как у собак, так и у кошек,также наблюдали остатки мезенхимоцитов звездчатой формы, причем у кошек они особо отличимы при гистологическом исследованииИсключительно выделяют то, что мышечная пластинка вены в пупочном канатике,хотя и мощная, тем не менее, уступает по толщине мышечной пластинкепупочных артерии.В просвете пупочного кольца,мышечная оболочка вен, наиболеетонкая, так как пупочные вены там, имеют наименьший диаметр [2]. Рис. 1. - Пупочный канатик котенка. Гематоксилин — эозин, ув. X 400 На рис.1, представлено гистологическое строение пупочного канатика у плодов кошек. Также как у сук, пуповина кошек, покрыта сверху однослойным столбчатым мерцательным эпителием, имеющим мерцательные волоски на апекальной поверхности, имеющим ядро овальной формы, расположенное ближе к базальному полюсу клеток и цитоплазму. Имеется также и вартонов студень, принципиально не отличающиеся от строения у собак, который содержит клетки слизистого вещества – мукоциты и межклеточное вещество, представленное ретикулярной тканью. В составе пупочного канатика, выделяется также пять сосудов. Пупочные вены, несущая кровь к плоду, две артерии, несущая кровь от плода и мочевой проток (проток аллантоиса), выполняющий транспорт выделении от плода. Еще одной отличительной особенностью, является то, что в пупочном канатике у кошек, при исследовании, выявлено обильное скопление мезенхимоци- 131 тов в некоторых его участках, по периферии пупочных сосудов, что очевидно связано с поздней закладкой дополнительных артериальных и венозных магистралей или «сосуды сосудов» пупочного канатика в процессе филогенеза животного, но эти сосуды не успевают совершить свое развитие к моменту окончательного формирования плода. Рис. 2. - Пупочный канатик щенка. Гематоксилин- эозин, ув. X 400 При проведении анатомического вскрытия брюшной полости у плодов щенков и котят, мы отмечаем тот момент, что при входе в пупочное кольцо, пупочные вены анастомозируют между собой в одну магистраль, ведущую к печени плода, в то время как при исследовании пупочного канатика, мы отмечаем наличие двух пупочных вен. Эта особенность, связана с морфологической перестройкой хода пупочных вен в процессе внутриутробного развития плодов щенков и котят в процессе онтогенеза [3]. Также в ходе анатомического вскрытия плодов, мы отметили, что вязкость пупочного канатика у сук выше вязкости пупочного канатика у кошек, который по консистенции более плотный и упругий, чем у собак. Как у собак, так и у кошек, пупочный канатик слизистой консистенции, серовато — голубого цвета, в его полупрозрачной толще видны проходящие в нем кровеносные сосуды. Выводы. Таким образом, в ходе исследования, были выяснены некоторые гистологические особенности в строении пупочного канатика плодов сук и кошек в период их рождения. Отличие по качественной характеристике сосудов и длины пупочного канатиа у кошек, объясняется тем, что они, более плодовиты, чем суки, и плоды у них, соответственно обладают меньшими размерами и наименьшей массой, чем плоды сук. Также имеется существенное отличие в количестве мезенхимальных клеток и их концентрированности в пупочном канатике у сук. Библиографический список 1. Афанасьев, Ю.Н. Гистология, цитология и эмбриология // Афанасьев Ю. Н., Юрина Н.А., Котовский Е.М., М.: Знание, 2002, с. 45 – 48 2. Богач, П.Г. Гладкомышечная клетка Л.: Наука, 1974, с. 23- 28 132 3. Дзержинский, Ф.Я. Сравнительная анатомия позвоночных животных // Ф.Я. Дзержинский, М.: Аспект – Пресс, 2005, с. 56 – 64 МORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS OF UMBILICAL CORD IN NEWBORN PUPPIES AND KITTENS Romanov A.V. ФГБОУ ВПО Уральская государственная академия ветеринарной медицины, тел. 8 (906) 890-35- 71, [email protected] Key words: Umbilical cord, puppies, kittens, umbilical arteries, umbilical vein, allantois duct, Whartonovs jelly, media. Summary: In the article to describe morphological characteristics umbilical cord and his vessels in newborn puppies and kittens. УДК 577.486 СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА РЕПРОДУКТИВНЫХ ХАРАКТЕРИСТИК КОМПОСТНОГО ЧЕРВЯ EISENIA FETIDA (SAVINGY, 1926) ЛОКАЛЬНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ УЛЬЯНОВСКОЙ ОБЛАСТИ Е.М. Романова, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-38, [email protected] М.Э. Мухитова, кандидат биологических наук тел. 8(8422) 55-95-38, [email protected] Д.С. Игнаткин, кандидат биологических наук тел. 8(8422) 55-95-38, [email protected] ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: вермикультура, репродукционный потенциал, биология компостных червей Ульяновской области. Работа посвящена исследованию репродукционных особенностей отдельных популяций компостных червей Ульяновской области. Установлены такие характеристики плодовитости как: продукция коконов, количество личинок в коконе, продолжительность инкубационного потенциала. Введение. Почвенные беспозвоночные животные играют важную роль в трансформации органического вещества и соединений питательных элементов наземных экосистем. Большое значение в этих процессах принадлежит дождевым червям. Они 133 осуществляют первичную деструкцию растительного опада, трансформируя его в специфические продукты жизнедеятельности – вермикомпост. Вермикомпостирование - это экологически чистый способ утилизации органических отходов различного происхождения с помощью сообщества компостных червей [1]. В технологиях вермикомпостирования одним из важных критериев является прирост биомассы и воспроизводительные способности червей. В связи с этим в литературе в последние годы часто приводятся данные детального изучения биологии дождевых червей из различных регионов страны. В разных выборках червей установлены существенные различия ритмов формирования коконов и скорости продукции молоди [2, 3]. Цель исследования: оценка репродуктивных способностей компостных червей локальных популяций Ульяновской области с перспективой дальнейшего использования их в технологии вермикомпостирования. Задачи: 1. Определение продукции коконов в неделю; 2. Определение числа личинок в одном коконе; 3. Определение инкубационного периода коконов. Материалы и методы: Объектом исследования стали половозрелые черви, собранные в органических субстратах частного подворья г. Димитровграда, р.п. Старая Майна и п. Октябрьский (Чердаклинский район) Ульяновской области. Исследования проводили в лабораторных условиях. Температура в лаборатории варьировала от 16 до 230 С. Учитывали количество коконов, отложенных за неделю. Для этого сформировали по пять пар половозрелых червей из каждой выборки, которых поместили в оптимизированный субстрат, содержащий ферментированный навоз, бытовые отходы и измельченный листовой опад и считали число коконов, которые черви отложили за неделю. Учитывали количество личинок, вылупившихся их одного кокона и инкубационный период созревания коконов. Для этого коконы поместили в чашки Петри на увлаженную вату и культивировали в термостате при температуре 230С. Результаты снимали через день. Результаты исследований и их обсуждение. Продукция коконов. Средняя продукция коконов Димитровградской популяции в расчете на одного червя составила 1,28±0,16 штук в неделю. Динамика откладки коконов в основном сходна для 5 исследуемых пар червей. Максимальная продукция коконов была отмечена на 7 недели опыта и составила четыре кокона, на третьей неделе опыта в большинстве сосудов не было отложено ни одного кокона, что может быть связано со снижением температуры в лаборатории. Половозрелые черви п. Октябрьский в среднем откладывали 1,11±0,18 коконов в неделю. Тенденция откладки коконов сохранилась. Максимальная продукция коконов также отмечена на 6 и 7 неделе опыта и составила три кокона, на 3 и 4 неделе опыта большинство червей или отложили по одному кокону, или не отложили ни одного кокона. Достоверных отличий по продукции коконов между червями Димитровградской популяции и популяцией п. Октябрьский не установлено (р>0,95). Средняя продукция коконов червями р.п. Старая Майна составила 0,90±0,20 кокона в неделю. Достоверных отличий не установлено (р>0,95). Максимальное число коконов также было отложено на 7 неделе – пять коконов, часто независимо от недели опыта черви Старомайнской популяции откладывали один кокон, или не откладывали ни одного кокона. 134 Количество личинок в коконах. Установили, что наибольшее число личинок в одном коконе у червей Димитровградской популяции - 3,86±0,47 лич./кок. При этом минимальное количество личинок в одном коконе – одна, максимальное – шесть. В ходе наблюдений обнаружили, что наиболее чаще из одного кокона вылуплялись 1-2 личинки, 6 личинок из одного кокона вылупились один раз. Коэффициент вариации был довольно высок и составил 45±0,9%. Варьирование числа личинок в коконах может быть связан с возрастными особенностями червей. У червей Октябрьской популяции количество личинок в одном коконе достоверно ниже – 2,57±0,21 лич./кок (р>0,95). Размах признака от Димитровградской популяции не отличался, минимальное количество личинок в одном коконе – одна, максимальное значение – пять. Наиболее часто из одного кокона вылуплялись 2 личинки. Коэффициент вариации был также высоким и составил 37±0,5%. Наименьшее количество личинок в одном коконе наблюдали у червей Старомайнской популяции – 2,0±0,30 лич./кок (р>0,95). Установили, что минимальное количество личинок в одном коконе у Старомайнской популяции – одна, максимальное – три. Наиболее часто из одного кокона также вылуплялись 2 личинки. Вариабельность признака составила 33±0,3%. Инкубационный период. Средняя продолжительность инкубационного периода коконов у Димитровградской популяции червей составила 16,28±0,69 дней. У популяции червей из п. Октябрьский продолжительность инкубационного периода коконов составила 15,90±0,37 дней. У червей из р.п. Старая Майна – 15,25±1,79 дней. Достоверных отличий по данному признаку у исследуемых популяций не выявлено (р>0,95). Результаты проведенных исследований приведены в таблице 1. Таблица 1. Репродукционные характеристики компостного червя E. fetida локальных популяций Ульяновской области Показатели Средняя продукция коконов, шт./нед. min-max продукции коконов, шт./нед. Среднее количество личинок в одном коконе, лич./кок. min-max личинок в коконе, экз. Инкубационный период, сутки min-max инкубационного периода, сутки Димитровградская популяция Октябрьская популяция Старомайнская популяция 1,28±0,16 1,11±0,18 0,90±0,20 0-4 0-3 0-5 3,86±0,47 2,57±0,21 2,0±0,30 1-6 16,28±0,69 1-5 15,90±0,37 1-3 15,25±1,79 11-20 13-19 10-18 Выводы: 1. По величине продукции коконов достоверных отличий между исследуемыми популяциями E. fetida не выявлено (р>0,95); 2. По параметру число личинок в одном коконе выявлены достоверные отличия 135 между отдельными популяциями. У червей E. fetida Димитровградской популяции число, вышедших из кокона личинок составило 3,86±0,47 лич./кок., что достоверно выше, чем у Октябрьской и Старомайнской популяций (р>0,95). 3. По параметру период инкубации коконов отличий между исследуемыми популяциями не выявили (р>0,95). Библиографический список: 1. Покровская С.Ф. Использование дождевых червей для переработки органических отходов и повышения плодородия почв (вермикультура) / С.Ф. Покровская. - М.: Агропром., 1991. - 32 с. 2. Кодолова О.П. Сравнительное исследование репродукционного потенциалалокальных поселений компостного червя Eisenia foetida (�� Savingy�� , 1926) (�� Oligochaeta�� , Lumbric�� idae) / О.П. Кодолова, Б.Р. Стриганова, Т.Н. Сидорова // Серия биологическая: Экология. №4- 1993 – С. 558-567. 3. Мухитова М.Э. Изучение репродуктивного потенциала видов семейства Lumbricidae/ Е.В. Титова, Мухитова М.Э.// Татищевские чтения: актуальные проблемы науки и практики: мат-лы междунар. научно-практ. конф. - Тольятти, 2008. – С. 107-113. COMPARATIVE ASSESSMENT OF REPRODUCTIVE CHARACTERISTICS OF KOMPOSTNOGO OF THE WORM OF EISENIA FETIDA (SAVINGY, 1926) OF LOCAL POPULATIONS OF THE ULYANOVSK REGION E.M. Romanova, M.E. Mukhitova, D.S. Ignatkin Keywords: reproductive potential, biology of kompostny worms. Work is devoted to research of reproductive features of separate populations of kompostny worms of the Ulyanovsk region. Such characteristics of fertility as are established: production of cocoons, quantity of larvae in a cocoon, duration of incubatory potential. 136 УДК 619:615.083 ЗАЖИВЛЕНИЕ ИНФИЦИРОВАННЫХ КОЖНО-МЫШЕЧНЫХ РАН У СОБАК ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕ СВЕТОДИОДНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ КРАСНОГО ДИАПАЗОНА А.В. Сапожников, В.А. Ермолаев, Е.М. Марьин, П.М. Ляшенко Россия, ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П.А. Столыпина» Ключевые слова: рана, гистология, собака В статье говорится о положительной динамике гематологических, цитологических и гистологических показателей при лечении инфицированных кожно-мышечных ран у собак комплексным способом – фотофорезом с 10% метилурациловой мази светодиодным излучением красного диапазона. Перспективным направлением в клинической медицине является метод фототерапии, истоки которого лежат на рубеже ХIХ и ХХ веков. В медицинских источниках появилось ряд работ (Янтарева Л.И. с соавторами, 1996; Колесникова С.З., 1997), об использовании светодиодного излучения красного диапазона, которое является альтернативным лазерному, но более щадящим для организма и оказывает противоспалительное, противоотечное, обезболивающее действие, повышает иммунный статус, не вызывая структурно-функциональных нарушений в микроциркуляторном русле. Целью нашего исследования явилось экспериментальное изучение влияния светодиодного излучения красного диапазона на морфологическую картину тканей при лечении инфицированных кожно-мышечных ран собак. Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи: - исследовать динамику гематологических, клинико-физиологических показателей процесса заживления кожно-мышечных тканей в области массетера при воздействии 10% метилурациловой мази, светодиодного излучения красного диапазона, 10% метилурациловой мази в сочетании со СДИКД; - изучить цитологические и морфологические изменения кожно-мышечных тканей при лечении вышеизложенными способами в сравнительной характеристике. Эксперимент проводили на беспородных собаках в возрасте от 6 до 12 месяцев, весом от 5 до 15 кг. Животные были разбиты на 3 группы по 11 голов. Всем экспериментальным животным наносились кожно-мышечные раны, в вертикальном направлении, в центре левого массетера, размером: кожная рана - 4 см длиной, мышечная -3 см длиной и общей глубиной – 1,5 см. Через сутки с поверхности ран были взяты смывы для определения бактериологического фона. Из всех проб смывов патогенного протея, возбудителей стафилококкоза, стрептококкоза и псевдомоноза не выделено. Однако во всех исследуемых пробах была выделена условно-патогенная микрофлора, чувствительная к левомицетину и гентамицину, и не чувствительная к тетрациклину, ампициллину, бензилпенициллину, стрептомици- 137 ну, эритромицину, неомицину, оксациллину, фузидину. Лечение осуществляли после взятия смывов с поверхности ран. Перед лечебным воздействием раны подвергались механической очистке стерильными ватно-марлевыми тампонами, смоченными стерильным физиологическим раствором. 1-я группа – «контрольная», подвергалась лечению ран 10% метилурациловой мазью; 2-я группа – «1-я опытная», лечению светодиодным излучением красного диапазона, экспозицией 2 мин., с размещением прибора на 2-3 мм от поверхности раны; 3-я группа – «2-я опытная», фотофорезом 10% метилурациловой мази светодиодным излучением красного диапазона, экспозицией 2 мин., с размещением излучателя на 2-3 мм от поверхности раны. Проведённые нами исследования показали, что во всех трёх группах у животных в течение первых суток место ранения характеризовалось классическими признаками воспаление – отёк, гиперемия, болезненность, что соответствует стадии сосудистых изменений. В это время происходит чёткая воспалительная демаркация очага поражения, нежизнеспособных тканей, наступает стадия отторжения. Воспаление характеризовалось расплавлением мёртвых тканей с накоплением в них гнойного экссудата. Характер экссудата имел свои особенности. Так, в контрольной группе на протяжении всего лечения обильно выделялся серо-желтый экссудат от слизистой до сливкообразной консистенции, количество которого уменьшалось к 15-м суткам; в первой опытной группе до одиннадцатых суток в большом количестве наблюдался серо-зелёный экссудат, сметанообразной консистенции, с резким неприятным запахом; во второй опытной группе экссудат имел серо-жёлтый цвет и слизистую консистенцию, его уменьшение отмечалось к седьмым суткам. Некроз тканей был ярко выражен у животных первой опытной группы. Околораневой дерматит с изъязвлением кожи у животных контрольной и первой опытной групп развивался на протяжении всего лечения, а у животных второй опытной группы это явление было единичным и менее выраженным. Грануляция ран выраженно и равномерно проходила у животных второй опытной группы, начиная с пятых суток. В контрольной и первой опытной группах данное явление носило менее выраженный характер и начиналось с седьмых и пятых суток, соответственно и характеризовалось лишь зачатками грануляционной ткани. Заполнение полости ран равномерной, мелкозернистой грануляцией произошло в контрольной группе на 19-е сутки, в первой и второй опытных группах - на 15-е и одиннадцатые сутки соответственно. Эпителизация ран начиналась в контрольной группе на 15-е сутки, в первой и второй опытных группах - на одиннадцатые. Для изучения морфологии крови у животных осуществлялся её забор в следующие сроки: за 2-3 дня до нанесения раны (фоновые показатели крови), через 1 час, 1, 3, 5, 7, 11 сутки после нанесения раны и после полного её заживления. Из полученных данных видно, что уровень эритроцитов в 3 сутки исследований, по отношению к фоновым показателям, на 3,6% ниже в контрольной группе, на 10,2% и 21,7% выше в первой и второй опытных группах соответственно. На 5 сутки он составил на 3,6% меньше фоновых показателей в контрольной группе, 6,1% и 13% выше фоновых показателей в первой и второй опытных группах соответственно. На 7 сутки в контрольной группе ниже на 7,2%, а в первой и второй опытных группах выше на 2% и 4,3% соответственно. К 11 суткам исследований показатель эритроцитов продолжал уменьшаться в контрольной и первой опытной группах и составил на 9% и 2% меньше фоновых показате- 138 лей, а во второй опытной наблюдался рост эритроцитов и был выше на 2,2% предыдущего показателя. По той же схеме, по отношению к фоновым данным, изменялись показатели гемоглобина и лейкоцитов. Забор мазков отпечатков для цитологического исследования с раневых поверхностей проводили через 1 час, на 1, 3, 5, 7, 11, 17 сутки после нанесения раны по общепринятой методике (Камаев М.Ф., 1970). Для изучения раневых отпечатков использовали алгоритмический способ оценки по наличию следующих морфологических признаков: эритроцитов, лимфоцитов, зрелых макрофагов, клеток регенеративного зачатка, фибробластов, эпителиальных клеток (Белянин В.Л., Цыплаков Д.Э., 1999). Через час после нанесения ран в мазках отпечатках всех трёх групп эритроциты приравнивались к 50–60%, нейтрофилы 10-20%, лимфоциты в первой группе 10–20%, во второй и в третьей менее 5%. На первые сутки в первой группе эритроциты составляли менее 5%, во второй и в третьей по 10-20%. Нейтрофилы 75-80% и 50-60% соответственно. Лимфоциты менее 5 % в первой группе, 10-20% во второй и в третьей группах. Показатели эритроцитов, нейтрофилов и лимфоцитов на третьи сутки не отличались между группами и были равны менее 5%, 75-80%, менее 5% соответственно по показателям. Во всех трёх группах отмечалось появление клеток регенеративного зачатка: в первой группе единичное количество, во второй и в третьей группах менее 5%. На пятые сутки в первой и третьей группах эритроциты находились в единичном количестве, во второй не изменились. Нейтрофилы в первой и во второй группах составляли 50-60%, в третьей группе 75-80%. Лимфоциты во всех трёх группах оставались неизменными. Клеток регенеративного зачатка в первой и во второй группах было менее 5%, в третьей 10-20%. В эти же сутки во всех трёх группах наблюдали появление зрелых макрофагов: в первой и во второй группах менее 5%, в третьей в единичном количестве. Одновременно в третьей группе - единичное появление фибробластов. Во всех группах на седьмые сутки эритроциты находились в единичном количестве, нейтрофилы составляли 50-60%, зрелые макрофаги и клетки регенеративного зачатка отмечали в 10-20%-х приделах. Лимфоциты в первой группе приравнивались к 10-20%, во второй и в третьей менее 5%. Фибробласты в первой группе обнаруживались в единичном количестве, во второй менее 5%, в третьей 10-20%. Во всех группах на одиннадцатые сутки эритроциты были неизменны, нейтрофилы и лимфоциты снизились до отметки менее 5%, фибробласты увеличились до 50-60%. Зрелые макрофаги в первой и во второй группах составляли менее 5%, в третьей 10-20%. Клетки регенеративного зачатка в первой группе наблюдали в единичном количестве, во второй и в третьей группах менее 5%. В этот период во второй и в третьей группах появились в единичном количестве эпителиальные клетки. На 17 сутки эритроциты во второй и в третьей группах отсутствовали, а впервой насчитывались менее 5%. Нейтрофилы в первой группе менее 5%, во второй в единичном количестве, в третьей отсутствовали. Лимфоциты в первой группе отсутствовали, во второй находились в единичном количестве, а в третьей группе составляли менее 5%. Зрелые макрофаги в первой и третьей в единичном количестве, во второй менее 5%. Клетки регенеративного зачатка в первой и во второй группах составляли менее 5%, в третьей группе находились в единичном количестве. Фибробласты в первой группе были в приделах 50-60%, во второй и в третьей единицы. Эпителиальные клетки в первой группе содержались в единичном количестве, во второй и в 139 третьей группах 75-80%. Для изучения гистологической картины ран мы осуществляли взятие гистосрезов на 1-е, 3-е, 5-е, 7-е, 11-е и 19-е сутки после нанесения ран. Взятый материал обрабатывался стандартными гистологическими методами и окрашивался азур II-эозином и по Шику. Гистологическая картина ран в результате исследований оказалась следующей. В контрольной группе значительно выражена экссудация, которая затрагивает подкожную клетчатку и скелетную мускулатуру. К концу первой недели происходит исчезновение воспалительной инфильтрации в глубоких отделах раны и сохранение её грануляции. На седьмые сутки на фоне хороших процессов пролиферации и неокапиллярогенеза, отмечалось наличие щелевидных язв, распространяющихся в глубь раны с участками пролиферации фибробластов и незрелого коллагена. На третьи сутки в сосудах микроциркуляции выраженные явления пареза с эритростазами и лейкостазами, и исчезновение указанных явлений к концу первой недели. Появление первых очаговых пролиферативных изменений с третьих суток и неокапиллярогенеза с пятых суток, который носит незрелый характер без образования чётких сосудистых просветов. На одиннадцатые сутки отмечалось неполное созревание грануляционной ткани с неполным её замещением незрелыми коллагеновыми волокнами. На 19 сутки происходит усиление воспалительной инфильтрации в поверхностных отделах рубцовой ткани. Во второй группе в первые трое суток наблюдали резкое прогрессирующее воспаление серозно-гнойного характера с распространением в поперечно-полосатую скелетную мускулатуру, резко выраженный отёк с геморрагиями. На третьи сутки происходит резкое уменьшение отёчных явлений, к пятым суткам – купирование воспалительных инфильтратов в глубоких отделах раны и в пограничной поверхностной зоне на одиннадцатый день. В острой стадии (первые – третьи сутки) отмечается резко выраженная гиперемия и парез сосудов микроциркуляции, набухание базальных мембран и эндотелия. В капиллярном русле - сладжи и эритростазы. В венулах в большом количестве – фибриновые и фибринозно-эритроцитарные тромбы, их исчезновение происходит к пятому дню. В первые трое суток пролиферация незрелых мезенхимальных и эндотелиальных клеток слабо выражена, новообразование капилляров не наблюдается. С пятого дня происходит усиление пролиферативных процессов с появлением большого количества новообразованных капилляров и значительное их увеличение с седьмых суток, с хорошо развитыми сосудистыми просветами, и одновременное дифференцирование незрелых мезенхимальных клеток в фибробласты в глубоких отделах раны. На одиннадцатые сутки имеются значительные склеротические изменения в глубоких слоях раны. На 19 день на фоне склероза глубоких отделов, имеется эпителизация раны, при сохранении кое-где под эпителием молодой грануляционной ткани. В третьей группе воспалительная инфильтрация полиморфоклеточного состава, с преобладанием нейтрофилов, распространяющаяся до подкожной клетчатки. В поверхностных отделах раневой поверхности в первые дни (до пятых суток) отмечается формирование микроабсцессов (острое гнойное воспаление). Исчезновение воспалительной инфильтрации в глубоких отделах раны происходит к пятому дню, а в поверхностных к одиннадцатому дню. В острой стадии (третьи - пятые сутки) в сосудах микроциркуляции – выраженные явления пареза и гиперемии с усиленным тромбообразованием и тромболизисом к седьмому дню. Пролиферативные изменения хорошо выражены с третьего 140 дня, с формированием эндотелиальных почек и новообразованных капилляров во всех отделах раны и имеющие характер пролиферативных нодулей, со слиянием их к пятым суткам. Созревание грануляций и появление более дифференцированных сосудов с базальными мембранами начинается с седьмых суток, сопровождающихся очаговым склерозированием в глубоких отделах. На 19 сутки отмечается усиление регенеративного процесса, благодаря чему происходит очищение большей части раневой поверхности, ускоряется эпителизация, с частичным восстановлением цитоархитектоники тканей, при наличии умеренного склероза. Сопоставление гематологических, цитологических и морфологических изменений в организме и ране позволяет сделать следующее заключение: 1 - однотипность экссудативной реакции в первые трое суток фазы экссудации; 2 - более раннее наступление (с третьих суток) пролиферативных изменений с неокапиллярогенезом (к пятым суткам) и появлением чётких сосудистых просветов с очаговой дифференциацией сосудов (венул и артериол) во второй и в третьей группах; 3 - сохранение экссудативного компонента (и даже некоторое его усиление с одиннадцатого по 19-й день) в первой группе исследования; 4 - созревание грануляций в первой группе с десятых – одиннадцатых суток, во второй и в третьей с седьмых суток; 5 - отсутствие эпителизации к концу срока наблюдения в первой группе; 6 - хорошую динамику процесса регенерации с эпителизацией во второй и в третьей группах; 7 - сохранение молодой грануляционной ткани под эпителием на 19-е сутки во второй группе, по сравнению с эпителизацией и восстановлением цитоархитектоники с умеренным склерозом в третьей группе; 8 - нормализация окислительно-восстановительных процессов не только в организме, но и в пораженных тканях животных (Сапожников А.В., 2006, 2007). Следовательно, лечение СДИКД (светодиодным излучением красного диапазона) в сочетании с 10% метилурациловой мазью эффективнее обеспечивает заживление инфицированных кожно-мышечных ран и стимулирует регенеративные процессы. Библиографический список: 1.Белянин, В.Л. Диагностика реактивных гиперплазий лимфатических узлов / В.Л. Белянин, Д.Э. Цыплаков. – СПб – Казань, 1999. - 328 с. 2.Камаев, М.Ф. Инфицированная рана и её лечение / М.В. Камаев // 2-е издание перераб. и доп. – М.: Медицина, 1970. - 159 с. 3.Колесникова, С.З. Красный свет поднимает иммунитет / С.З. Колесникова. – А.: Мир.-1997. -№ 4. - С. 63. 4.Сапожников А.В. ЛЕЧЕНИЕ ИНФИЦИРОВАННЫХ КОЖНО-МЫШЕЧНЫХ РАН У СОБАК СВЕТОДИОДНЫМ ИЗЛУЧЕНИЕМ КРАСНОГО ДИАПАЗОНА/ А.В. Сапожников: автореф. . . . к.в.н. . – Оренбург: ОГАУ, 2006. – 24 с. 5.Сапожников А.В. ЛЕЧЕНИЕ ИНФИЦИРОВАННЫХ КОЖНО-МЫШЕЧНЫХ РАН У СОБАК СВЕТОДИОДНЫМ ИЗЛУЧЕНИЕМ КРАСНОГО ДИАПАЗОНА (экспериментальное клиническое исследование)/ А.В. Сапожников: диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Ульяновск, 2006. – 254 с. 6.Сапожников А.В. ЛЕЧЕНИЕ ИНФИЦИРОВАННЫХ КОЖНО-МЫШЕЧНЫХ РАН У СОБАК СВЕТОДИОДНЫМ ИЗЛУЧЕНИЕМ КРАСНОГО ДИАПАЗОНА)/ А.В. Сапожников: автореф. . . . к.в.н. . – Оренбург: ОГАУ, 2007. – 24 с. 141 7.Янтарёва, Л.И. Сравнительное изучение влияний лазерного и светодиодного излучений красного диапазона на клиническое течение заболеваний пародонта и процессов микроциркуляции в эксперименте / Л.И. Янтарёва, Л.А. Ермолаева, Л.И. Воробьева и др. // Стоматология.- Материалы III�� общероссийского съезда стоматологической ассоциации. - М., 1996. - С. 95-96. CICATRIZATION OF THE INFECTED SCIN-MUSCULE WOUNDS AT DOGS UNDER ACT OF LIGNDIODE RADIATION OF RED RANGE. A.V. Sapozhnikov, V.A. Ermolaev, E.M. Maryin, P. M. Lyashenko FSED HPE «Ulyanovsk state academy of agriculture P.A.Stolypin’s name » Keywords: wound, histology, dog An application of complex method of treatment of infected scin-muscule wounds at dogs with fitofores 10% metiluracil ointment with lightdiode radiation of red range is instrumental in apositive dynamics of hematological, cytological and histological features. УДК 636.612+636.2 АКТИВНОСТЬ ЭНЗИМОВ КРОВИ СВИНОМАТОК ПРИ ДОБАВЛЕНИИ В ИХ РАЦИОН БЕЛКОВЫХ ДОБАВОК Седова Е.А., аспирант, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», Н.А. Любин, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», С.В. Дежаткина, кандидат биологических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: свиноматки, соевая окара, горохова мука, сывороточные ферменты, рацион, кровь. Работа посвящена изучение активности сывороточных ферментов в крови свиней при использовании добавок гороховой муки и соевой окары. В ходе биохимических исследований авторами установлено, что в организме свиноматок, получающих дополнительно к основному рациону белковые добавки, происходит изменение активности ферментов сыворотки крови. Выявлено положительное влияние добавок соевой окары на активность ферментов и стимуляцию белкового обмена у свиноматок. Введение. Ускоренное развитие свиноводства, обеспечивается высокой плодовитостью свиней, их скороспелостью, окупаемостью затрат корма, высоких качественных характеристик мяса. Это в основном зависит от генетического потенциала свиней и 142 полноценности их рациона. Если суточное потребление животными белка и аминокислот недостаточно удовлетворяет их потребности генетического максимума, то рост мышечной ткани замедляется [1]. Этого можно избежать, применяя полноценные комбикорма, кормосмеси и премиксы, но по ряду причин большинство животноводческих хозяйств не располагает средствами на дорогие корма и добавки. Большим спросом пользуются белковые добавки, среди которых жмыхи, шроты, а также гороховая мука. Внимание исследователей привлекает не дорогая соевая окара (отход производства соевого молока) как белковая добавка в рационы животных, которая в своем составе содержит не только высокоценный белок и аминокислоты, а также витамины и минеральные вещества [2, 4]. Анализ внеклеточной жидкости (плазма, сыворотка) по активности определенных энзимов позволяет выявить изменения, происходящие внутри клеток различных органов и тканей организма. Большая группа белков (свыше 3000) в организме животного выполняет роль биологических катализаторов химических реакций, а поэтому практически все реакции рассматриваются как ферментативные [3]. Аспартатаминотрансфераза (АСТ) и аланинаминотрансфераза (АЛТ) содержатся в митохондриях в растворимой фракции цитоплазмы клеток, их роль сводится к передаче аминогрупп аминокислот на кетокислоты. Гамма-глутамилтранфераза обеспечивает превращение глутаминовой кислоты в альфа-кето-глутаровую, имеет высокую ферментативную активность в печени и особенно – в митохондриях гепатоцитов [3]. Учитывая вышесказанное целью нашего исследования было изучение активности сывороточных ферментов у свиноматок на фоне добавления в их рацион гороховой муки и соевой окары. Материалы и методы исследования. Для достижения поставленной цели провели физиологический опыт на свиноматках крупной белой породы племзавода в Ульяновской области РФ. Содержание супоросных свиноматок было групповым, со свободным доступом к воде и пище. Группы животных формировали по 5 голов, одинаковых по возрасту, живой массе и физиологическому состоянию, которых осеменяли искусственно. Все исследования были выполнены на фоне кормления свиноматок рационами, сбалансированными по основным элементам питания. Были сформированы три группы: 1-я контрольная, получала основной хозяйственный рацион (ОР) состоящего из зерносмеси (100%), питательность которого составила 3,6 кг/кг кормовых единиц (к.ед.); 2-й опытной скармливали зерносмесь (93% по питательности рациона) и гороховую муку (7%, по питательности рациона), питательность соответствовала ОР - 3,6 кг/кг к.ед.; 3-й опытной группе дозировали в рацион, соответственно с учетом его питательности равной уровню в контроле (ОР), зерносмесь (93%) и соевую окару (7%) (табл.1). Таблица 1. Схема опыта Наименование Свиноматки 1 -контроль основной рацион (ОР) 2-группа 3-группа ОР (93%)+ ОР (93%)+ соевая гороховая мука (7%) окара(7%) Предметом исследования была кровь свиноматок, которую брали из хвостовой вены, до утреннего кормления на 105 день супоросности. Биохимические исследования 143 уровня активности ферментов аланин- (АЛТ) и аспартатаминотрансфераз (АСТ), гаммаглутамилтранфераза (ГГТ) проводили по унифицированным методикам, используя реактивы БИО-ТЕСТ Лахема Диагностика. Результаты исследований и их обсуждение. Исследования показали, что в крови свиноматок на 105 день супоросности показатели активности сывороточных ферментов изменялись в пределах физиологических норм для данной возрастной группы животных. 800 +15,88 % +5,61% Контроль 600 ОР+гороховая мука 400 594,43 627,76 688,88 ОР+соевая окара 200 0 АЛТ Рис. 1. - Активность АЛТ в крови у супоросных свиноматок, нкат/л В опытных группах активность АЛТ имела четкую тенденцию к увеличению во 2-й группе на 5,61%, в 3-й на 15,88% по сравнению с контролем (рис. 1), возможно это связанно с более высокой интенсивностью биосинтеза белка в организме свиноматок групп с использованием белковых добавок, обусловленной оптимальным количеством аминокислот, поступающих из желудочно-кишечного тракта. 800 +8,33 % 600 -25 % ОР+гороховая мука 400 533,33 200 400 Контроль 577,76 ОР+соевая окара 0 АСТ Рис. 2. - Активность АСТ в крови у супоросных свиноматок, нкат/л Неоднозначно шла динамика активности АСТ у маток 2-й группы, где добавлялась гороховая мука, отмечалась выраженная тенденция к уменьшению на 25%, а в 3-й группе с добавлением соевой окары напротив повышалась на 8,33% (рис. 2), по отношению к данным в контроле, что вероятно связано с разным аминокислотным составом добавок. 144 600 500 400 300 200 600 -32,41% -33,34 % Контроль ОР+гороховая мука 405,55 400 100 ОР+соевая окара 0 ГГТ Рис. 3. - Активность ГГТ в крови у супоросных свиноматок, нкат/л Активность ГГТ-азы в крови свиноматок опытных групп была меньше, чем в контроле, так во 2-й группе ГГТ ниже на 32,41% (p>0,05), а в 3-й на 33,34% (p>0,05) (рис. 3), указывая на снижение общей нагрузки на гепатобилиарную систему организма супоросных маток. Заключение. Добавление в рацион супоросных свиноматок белковых добавок гороховой муки и соевой окары влияет на активность ферментов сыворотки, которое проявляется усилением течения обмена белков в их организме. Библиографический список: 1. Борин А.В. Оптимизация уровня белково-витаминно-минеральных добавок в рационах молодняка свиней / А.В. Борин. Автореф. дисс. к.б.н. -Саранск. - 2003. - 21 с. 2. Дозоров А., Дежаткина С. Влияние соевой окары на активность ферментов у свиноматок и поросят /А. Дозоров, С. Дежаткина.//Свиноводство, №8, ноябрь-декабрь 2011. – С. 28-32. 3. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики / И.П. Кондрахин. Справочник.- М.: КолосС, 2004.-520с. 4. Любин Н. Соевые отходы – в кормовые ресурсы /Н. Любин, А. Дозоров, С. Дежаткина, А. Мухитов А. // Животноводство России, № 12, 2011. – С. 24-29. ACTIVITY OF ENZYMES OF BLOOD OF SOWS AT ADDITION IN DIET PROTEIN SUPPLEMENTS Key words: sow, soy okara, pea flour, diet, serum enzymes. The work is devoted to the study of serum enzymes of pigs by using additives pea flour and soy okara. In the course of biochemical studies, the authors found that sows in the body, in addition to receiving the basic diet protein supplements, there is a change in the activity of serum enzymes. Besides the positive impact of supplementation of soy okara on serum enzyme activity and stimulation of protein metabolism in sows. 145 УДК 636:591 ЗАКОНОМЕРНОСТИ ПОСТНАТАЛЬНОГО МОРФОГЕНЕЗА НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ Н.Г. Симанова, С.Н. Хохлова, Н.П. Перфильева, А.Н. Фасахутдинова, А.А. Степочкин, С.Г. Писалева ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина ». Ключевые слова: постнатальный морфогенез, нервная система, спинной мозг, блуждающий нерв, симпатический отдел, нейроциты, ганглии, ядерно-нейроплазменное отношение, гетерохрония. Изучали постнатальный морфогенез нейроцитов и нервных волокон центрального и периферического отделов нервной системы домашних млекопитающих и птиц (крупный рогатый скот, свинья, собака, кролик, песец, курица). В указанных нервных структурах происходят изменения объема нейроплазмы и ядер нейроцитов, ядернонейроплазменного отношения, нейроглиального индекса, количества и состава волокон. В разные возрастные периоды, в разных участках нервной системы и у разных животных названные преобразования протекают с различной интенсивностью. Изучению морфогенеза нервной системы посвящены работы многих исследователей [1-17]. Большинство из них единодушны в том, что в постнатальном онтогенезе продолжается формообразование нейроцитов и нервных волокон. В месте с тем, в доступной литературе мы не нашли обобщения накопленных фактов об особенностях морфогенеза нейроцитов и нервных волокон в различных отделах нервной системы, его возрастных границах и видовых особенностях. Такие обобщения представляют несомненный интерес для теоретической и клинической нейрологии. Настоящее сообщение является попыткой обобщения накопленных данных более чем за 30 лет исследований под руководством доктора биологических наук, профессора, заслуженного деятеля науки России Николая Алексеевича Жеребцова. Нейрогистологическими методами (импрегнация серебром по Бильшовскому Грос, Белецкому, Кампосу) с использованием элементов морфометрии исследовали постнатальный морфогенез нейроцитов и нервных волокон центрального и периферического отделов нервной системы домашних млекопитающих и птиц (крупный рогатый скот, свинья, собака, кролик, песец, курица). В качестве оценочных показателей морфогенеза нейроцитов и нервных волокон учитывали объём ядра и нейроплазмы нервных клеток, ядерно-нейроплазменное отношение, морфологию дендритного аппарата, нейроглиальный индекс, общее количество, толщину и соотношение нервных волокон. Для морфометрии использовалась методика Н.А.Жеребцова (2003). Теоретическую нейробиологию, практическую ветеринарию и животноводство интересует: какие факторы, в какой степени и в каком направлении влияют на постнатальный морфогенез нейроцитов? На основании анализа результатов накопленного в нашей лаборатории материа- 146 ла мы пришли к заключению, что в основе гетерохронии постнатального и пренатального морфогенеза нейроцитов лежит генетически обусловленная прямая коррелятивная связь между уровнями морфофункциональной зрелости нервных и иннервируемых структур. Это подтверждается, в частности, данными, приведенными на рис. 1-5. Рис. 1 показывает, что у новорожденных телят и поросят, уже способных следовать за матерью, нейроциты спинальных ганглиев по величине ядерно-нейроплазменного отношения близки к таковым половозрелых животных. Тогда как у щенков и крольчат, являющихся незрелорожденными и неспособными к активному передвижению, названный показатель далек от зрелого состояния. Этот факт противоречит мнению о зависимости зрелости нейроцитов от продолжительности периода внутриутробного развития. У собаки период беременности вдвое длиннее, чем у крольчихи (соответственно 62 и 30), а уровень зрелости исследованных нейроцитов одинаков. Рис.1. Возрастны е особенности величины ядерно-плазменного отношения нейроцитов 1-ого крестцового спинального ганглия домашних животны х Величина ядерноплазменного отношения 0,14 собака 0,12 0,1 кролик 0,08 0,06 св инья 0,04 0,02 коров а 0 Возраст животны х, мес. Из анализа данных рисунка 2 следует, что у новорожденных поросят наиболее зрелыми являются мотонейроны спинного мозга, регулирующие деятельность функционально отностительно зрелой скелетной мускулатуры. Наименее зрелы нейроциты межмышечного сплетения тощей кишки. Иннервирующие ее компоненты нервного аппарата далеки от зрелого состояния. Нейроциты дистального ганглия блуждающего нерва (рис. 3,4), выполняющие чувствительную иннервацию внутренних органов, в период рождения по своей зрелости занимают промежуточное положение между нейроцитами кишечника и мотонейронами спинного мозга [11]. Это подтверждает более раннее развитие чувствительной иннервации кишечника, чем двигательной. Развитие нейроцитов краниального шейного ганглия в месячном возрасте опережает таковое звездчатого ганглия, что видно по изменениям показателей ядерно-нейроплазменного отношения (рис. 11) и объясняется различными объектами иннервации: сосудов головы и органов грудной полости. 147 Рис. 2. Возрастные особенности величины ядерно-плазменного отношения нейроцитов различных ганглиев у свиньи Ядерно-плазменное отношение 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 0 6 межмышечный ганглий тощей кишки каудальный брыжеечный ганглий моторное ядро 1-ого крестцового нейросегмента 1-ый крестцовый спинальный ганглий дистальный ганглий Возраст, мес. Рис. 3. Нейроциты дистального Рис. 4. Нейроциты дистального ганглия блуждающего нерва ганглия блуждающего нерва месячного поросёнка. Импрегнация новорожденного поросёнка. по Бильшовскому-Грос. Ок.7. Об. 40. Импрегнация серебром. Ок. 7. Об. 40. Анализ данных рис. 5 свидетельствует об отставании морфогенеза нейроцитов межмышечного сплетения слепой кишки от такового тонкого кишечника у кур. Этот факт согласуется с задержкой начала активной функции слепых кишок у кур, о чём можно судить по отсутствию в них содержимого до месячного возраста [1]. 148 Ядерно-плазменное отношение Рис. 5. Возрастные особенности величины ядерно-плазменного отношения нейроцитов мышечно-кишечного сплетения кур 0,25 0,2 нейроциты 12-перстной кишки 0,15 нейроциты тощей кишки 0,1 мультиполярны е нейроциты слепой кишки 0,05 0 0 10 20 30 60 120 180 360 500 псевдоуниполярны е нейроциты слепой кишки Возраст кур (дни) Обнаружена гетерохрония постнатального морфогенеза однотипных нейронов. По нашему мнению она может быть обусловлена иннервацией структур различного уровня морфофункциональной зрелости, например, одни нейроны осуществляют рецепцию с кожи, другие – со скелетных мышц, третьи – с внутренностей. Аналогичную ситуацию можно проследить и в ганглиях интрамуральных нервных сплетений [5, 9,13]. Наличие в интрамуральных ганглиях желудка и кишечника взрослых животных значительного количества незрелых нейроцитов послужило некоторым нейроморфологам [2,3] основанием считать последние «резервом» для восполнения естественной убыли нейронов. Прямую коррелятивную связь между уровнями морфофункциональной зрелости нейронов и иннервируемых ими структур мы считаем одним из основных эндогенных факторов гетерохронного морфогенеза нейроцитов. Вместе с тем мы, как и другие авторы [1-13], отмечаем усиливающееся в онтогенезе влияние на эти процессы внешних функцинального и алиментарного факторов. При этом следует отметить, что названные экзогенные факторы не вступают в противоречие с рассмотренным генетическим, а лишь изменяют его подвижность, выраженность и направленность. Анализ данных, представленных на рис. 1, 2, 5 показывает, что наибольшая подвижность морфогенеза свойственна исследованным нейроцитам в раннем постнатальном онтогенезе животных, когда происходит резкое усиление функциональной активности всех систем организма и, в частности, пищеварительной. Различная степень выраженности проявлений морфогенеза видна на рис. 5. У кур в третьей декаде после вылупления цыпленка объём ядра нейроцитов кишечника нарастает быстрее объёма нейроплазмы, вследствие чего увеличивается ядерно-нейроплазменное отношение. Но особенно значительно увеличивается объём ядер псевдоуниполярных чувствительных нейроцитов слепых кишок, что совпадает с началом их активного функционирования. Влияние условий кормления и содержания на постнатальный морфогенез нейроцитов показано нами и на примере интрамуральных нейроцитов кур, содержащихся в клетках и свободно [1]. Интенсивная клеточная технология содержания кур ускоряет постнатальный морфогенез нейроцитов кишечника, но вместе с тем обуславливает более раннее (1,5 года) появление деструктивных изменений (пикноз, кариолизис и др.). Экспериментально показано [2, 9, 15, 17], что достаточно сильное и длительное раздражение нейроцитов приводит к уменьшению объёма его ядра и нейроплазмы. Вли- 149 яние изменения типа кормления на постнатальный морфогенез нейроцитов чревного ганглия показано нами в опыте с ранним отъёмом поросят [13]. Установлено, что морфологические изменения нейроцитов симпатических ганглиев у собак в постнатальном периоде характеризуются неравномерным изменением ядерно-нейроплазменного отношения (рис. 6-8) [17]. Двухнедельный возраст является критическим в этом отношении. Мы связываем это с длительным периодом раздражения нейроцитов при безусловнорефлекторной адаптации щенков к раздражителям внешней среды. Рис. 6. - Правый краниальный шейный ганглий новорожденного щенка: 1-нейроциты; 2-глиоциты (окраска по Бильшовскому – Грос; ок. 7, об. 40) Рис. 7. - Левый краниальный шейный ганглий 2-ух летней собаки: 1-нейроциты (окраска по Бильшовскому – Грос; ок. 7, об. 40) 150 Ядерно-нейроплазменное отношение 0,2 0,15 0,1 0,05 0 0 0,5 1 2 4 6 24 Возраст, мес. - средние значения левого и правого краниального шейного ганглия; - средние значения звездчатого ганглия. Рис. 8. - Изменение ядерно-нейроплазменного отношения нейроцитов симпатических ганглиев собаки Сотрудники кафедры занимались также изучением возрастных изменений в периферических нервных стволах [3,5,6,9,10,12] и проводящих путях спинного мозга [4, 7, 15] (рис. 9,10). Рис. 9. - Шейногрудная часть симпатического отдела нервной системы у собаки, где 1 – краниальный шейный ганглий; 2 – шейно-грудной ганглий; 3 – чревный ганглий;4 – вагосимпатический ствол. Установлено, что общее количество нервных волокон в нервных стволах периферического отдела нервной системы и проводящих путях спинного мозга в постнатальном 151 онтогенезе увеличивается (рис. 10). Увеличение общего количества волокон в стволах блуждающего нерва связано с образованием новых нервных связей центров с иннервируемыми внутренними органами. В каудальном направлении от шейного до брюшного отдела блуждающего нерва домашних животных общее количество волокон и их миелинизация уменьшаются, что связано с ответвлением волокон по ходу нерва к иннервируемым внутренним органам. В структуре волокон преобладают тонкие мякотные и безмякотные волокна с небольшими «островками» миелиновых волокон. Из диаграммы (рис. 10) видно, что от рождения до двух месяцев у свиньи и собаки указанные показатели очень близки. В четырёхмесячном возрасте общее количество волокон в блуждающем нерве свиньи значительно увеличивается и превосходит в 18 мес. аналогичный показатель собаки в 1,3 раза. Мы связываем это с тем, что свинья является более скороспелым животным по сравнению с собакой и быстрее достигает зрелости тела. У телят количество нервных волокон при рождении превосходит таковое у свиньи и собаки в 24-26 раз, что можно связать с их зрелорождаемостью. Наиболее интенсивные морфологические изменения, увеличение диаметра мякотных волокон, процентного состава толстых и средних волокон блуждающего нерва и белого вещества спинного мозга происходят в первые месяцы после рождения животных, что свидетельствует об активном морфологическом созревании нервной системы и иннервируемых органов [3-15] . Сравнение относительных величин нейросегментов отделов спинного мозга у животных свидетельствует о преобладании темпа роста поясничного отдела в раннем постнатальном онтогенезе [4, 7, 15]. Таким образом, нами установлена гетерохрония постнатального морфогенеза нейроцитов гомологичных ганглиев у разных видов животных (рис. 1), различных отделов и ганглиев нервной системы в пределах одного вида (рис.2), нервных клеток в различных участках пищеварительной трубки (рис.5), разнотипных нейроцитов одного ганглия, состава и количества нервных волокон в гомологичных нервах у разных видов (рис. 10). Гетерохрония морфогенеза нейроцитов проявляется в объёме их ядра и цитоплазмы, величине ядерно-нейроплазменного отношения, структуре дендритного аппарата, нейроглиальном индексе и других показателях. Анализ результатов наших исследований показывает, что морфологические преобразования нейроцитов в той или иной степени продолжаются на протяжении всего постнатального онтогенеза животных, однако наибольшим динамизмом отличается начальный этап постнатального онтогенеза (рис. 2, 5). Лишь период от наступления зрелости до старости животных характерен относительной стабильностью морфологии нейроцитов. Здесь нужно оговориться, что речь идет о достаточно стойких и долговременных структурных изменениях нейронов, имея в виду, что экспериментально показаны [2] и значительные кратковременные изменения морфологии нервных клеток в связи с изменением интенсивности функций и условий их жизнедеятельности. Вышеизложенное показывает, что при всей сложности, разнообразии и неоднозначности проявлений постнатального морфогенеза нейроцитов и нервных стволов, он подчинен общим закономерностям и подвержен влиянию не только генетических, но и средовых экзогенных факторов. Это влияние не может не учитываться в практике ветеринарии и животноводства. Вопросы морфогенеза различных отделов нервной системы 152 домашних животных требует дальнейшего изучения. Библиографический список 1.Батраков, В.В. Постнатальный морфогенез нейроцитов мышечно-кишечного сплетения кур в условиях клеточного и напольного содержания / В.В. Батраков // Дисс. канд. биол. наук. Ульяновск, 1984. 2.Гейнисман, Ю.Я. Структурные и метаболические проявления функции нейрона / Ю.Я. Гейнисман // Москва, 1974. 3.Жеребцов, Н.А. Некоторые закономерности постнатального морфогенеза нейроцитов домашних млекопитающих и птиц / Н.А. Жеребцов // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: Материалы международной научно - практической конференции 25-26 сентября 2003. – Ульяновск: УГСХА, 2003. – с. 13. 4.Журавлева, Л.Д. Возрастные особенности скелетотопии спинного мозга у свиней / Л.Д. Журавлева // Вопросы морфологии нервной системы животных. – Ульяновск, 1976. – С.29 – 32. 5.Ильдутова, В.Н. Возрастные изменения отростков интрамуральных нейроцитов толстой у крупного рогатого скота / В.Н. Ильдутова // Журнал Морфология, СанктПетербург, 2000, № 3, том 117– С.51. 6.Перфильева, Н.П. К вопросу о внутриствольном строении блуждающего нерва голубого песца // Сборник научных трудов: Вопросы морфологии нервной системы животных. - Ульяновск, 1976-С.93-96. 7.Писалева, С.Г. Возрастные особенности скелетотопии спинного мозга собаки и кролика/ А.Н.Фасахутдинова, С.Г. Писалева // Материалы международной научно – практической конференции «Роль биологии и ветеринарной медицины в реализации государственной программы развития сельского хозяйства на 2008 – 2012 гг.»- Известия. ФГОУ ВПО «Оренбургский государственный аграрный университет», 2008. – С. 117 – 119. 8.Салимова, Н.П. Возрастные особенности миелоархитектоники блуждающего нерва у крупного рогатого скота // Сборник научных трудов: Возрастная и экологическая морфология животных в условиях интенсивного животноводства. Ульяновск, 1987 – С.7077. 9.Симанова, Н.Г. Гистогенез вегетативных ганглиев собаки / Н.Г. Симанова, С.Н. Хохлова, Т.Г. Скрипник, А.Н. Фасахутдинова, Е.Н.Исаева // Вестник УГСХА. № 2.- Ульяновск: УГСХА, 2011.- С.63-68. 10. Симанова, Н.Г. Закономерности постнатальных изменений миелоархитектоники блуждающего нерва животных / Н.Г. Симанова, Т.Г. Скрипник // Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования». Том 5. Ульяновск, УГСХА, 2008. 11. Симанова, Н.Г. Гистогенез дистального ганглия блуждающего нерва свиньи / Н.Г. Симанова, С.Н. Хохлова // Материалы Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения». Т.3. - Ульяновск: УГСХА, 2009.-С. 74-76. 12. Скрипник Т.Г. Возрастные особенности миелоархитектоники блуждающего нерва собаки // Сб.: Материалы международной научно-практической конференции “Актуальные проблемы ветеринарной медицины”- Т.1-Ульяновск, 2003.- С.61-63. 153 13. Степочкин, А.А. Морфология стенки тонкой кишки поросят / А.А. Степочкин // Журнал Архив АГ и Э, С.-Петербург, 2010, № 4, Том 137. 14. Тельцов, Л.П. Концепция выращивания животных в онтогенезе и увеличение продуктивности / Л.П.Тельцов // Ресурсосберегающие экологически безопасные технологические производства и переработки сельскохозяйственной продукции: Материалы VIII�� Международной практической конференции, посвященной памяти С.А.Лапшина.- Саранск, 2012._ С.353-360. 15. Фасахутдинова, А.Н. Морфология спинного мозга лабораторных животных» / А.Н. Фасахутдинова, С.Г. Писалева // «Вестник ветеринарии»: материалы I Международной научно – практической интернет – конференции «Современные направления в диагностике, профилактике и терапии заболеваний животных», Ставрополь, 2011.- Вып. 59.- № 4.- С. 105-106. 16. Хохлова, С.Н. Возрастные изменения ганглиев автономной нервной системы у собак / Н.Г Симанова, А.Н. Фасахутдинова, Е.Н. Исаева // Международная научно-исследовательская конференция «Аграрная наука», ноябрь, 2011 17. Хохлова, С.Н. Структурно-функциональные изменения некоторых симпатических ганглиев у плотоядных в разные возрастные периоды / С.Н. Хохлова, Н.Г. Симанова, А.Н. Фасахутдинова, О.Н. Мариьна // Вестник УГСХА. Научно-теоретический и практический журнал.- № 1.- Ульяновск: УГСХА, 2010. - С. 96-100. REGULARITIES OF POSTNATAL MORPHOGENESIS OF THE NERVOUS SYSTEM OF DOMESTIC ANIMALS Chochlova S.N., Simanova N. G., Stepochkin A.A., Fasahutdinova A. N., Pisalyeva S.G. FGBOU VPO “Ulyanovsk State Agricultural Academy of the name P. A. Stolypina “ Keywords: postnatal morphogenesis, the nervous system, the spinal cord, the vagus nerve, a sympathetic department, neurons, ganglia, nuclear-plasma relations, heterochrony. �� Studied postnatal morphogenesis neurons and nerve fibres of the Central and peripheral nervous system domestic mammals and birds (cattle, pig, dog, rabbit, Fox, chicken). In these nerve structures there are changes of the volume of нейроплазмы and nuclei neurons, nuclearplasma relations, nejroglial index, the amount and composition of the fibers. In different age periods, in different parts of the nervous system and the different animals of the mentioned transformations occur with varying intensity. 154 УДК 634.2.034:591.82 МОРФОЛОГИЯ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ СТЕНКИ ТОНКОЙ КИШКИ У ТЕЛЯТ КРАСНО-ПЕСТРОЙ ПОРОДЫ НОВОРОЖДЕННОГО ЭТАПА РАЗВИТИЯ Е. А. Усова*, А. А. Степочкин*, Л. П. Тельцов ** *Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина тел. 8(8422) 55-95-31, e-mail: [email protected] **Мордовский государственный университет им. Н.П.Огарева 8(8342)25-41-85 Ключевые слова: клетки соединительной ткани, размеры, митотический индекс, индекс апоптоза. В статье приводятся данные о клеточном составе соединительной ткани ( СТ ), о размерах клеток, о митотическом индексе и индексе апоптоза клеток СТ слизистой оболочки тонкой кишки телят новорожденного этапа развития. Введение. Соединительная ткань (СТ) кишечной стенки, в структурном соотношении, представляет собой сложное образование из рыхлой СТ со специфическими свойствами, кровеносных и лимфатических капилляров, сосудов и агрегированных лимфоузелков, обеспечивая транспорт метаболитов в кишечной стенке. СТ выполняет сложную трофическую, защитную, пластическую, кроветворную и иммунобиологическую функцию. В настоящее время интерес к исследованию СТ и крови резко возрос, в связи с изучением клеточной дифференцировки, клеточной иммунологии, радиационной биоло гии, трансплантации органов и тканей, пересадки стволовых клеток. Однако, объектом исследования остается по-прежнему рыхлая СТ кожи лабораторных животных (крыса, мышь, хомячок). Поэтому СТ стенки тонкой кишки человека и домашних животных, не являясь объектом выяснения общебиологических проблем, остается недостаточно изученной [1,2,4]. Генетически СТ стенки тонкой кишки является производной мезенхимы. Как показали исследования Л.П. Тельцова [6] на предплодном этапе развития эмбриона коровы в СТ стенки тонкой кишки выявляются макрофаги, лимфоциты и ядерные эритроциты, на раннеплодном этапе - ретикулярные на позднеплодном - плазмобластические, жировые и тучные (лаброциты) клетки. Аргирофильные волокна в межклеточном веществе СТ впервые выявляются в 2-х мес. возрасте, коллагеновые волокна - в 4-х месячном. К 7-ми месячному возрасту плода собственный слой слизистой оболочки стенки тонкой кишки дифференцируется в рыхлую соединительную ткань с ретикулярной функцией, а в подслизистой основе слизистой оболочки, в мышечной и в серозной - в рыхлую СТ [2,3,5,7]. Работа по изучению СТ стенки тонкой кишки у телят красно-пестрой породы на этапе новорожденности нет. Данная работа впервые посвящена морфологии СТ стенки тонкой кишки у телят красно-пестрой породы. Материалы и методы исследования. 155 Исследования проведены на 5 плодах 9 - месячного возраста и 18 телятах краснопестрой породы крупного рогатого скота в возрасте от рождения до 15 - суточного возраста. Сбор материала проводился в ООО «Левжен-ский», ООО «Александров», агросоюз «Рузаеский», племзавод «Атьмин-ский» Республики Мордовия и в личном подворье этих хозяйств, совместно с аспирантами И.Г. Музыка и Н.В. Тутаровой Мордовского госуниверситета. Материалом исследования служили двенадцатиперстная, тощая и подвздошная кишки. Кусочки стенки кишок фиксировали в 12,0% формалине, заливку проводили в парафин, срезы окрашивали гематоксинин-эозином, аргирофильные волокна - импрегнацией по Футу, эластические - по Вейгерту, коллагеновые - по Маллори и Ван-Гизону, форменные элементы крови и тучные клетки выявляли по Романовскому-Гимза, плазмобласты и плазмоци-ты - по Унна-Паппенгейму (реакция по Браше) (Семченко, 2006). Собственные исследования Соединительная ткань (СТ) собственной пластинки слизистой оболочки тонкой кишки на этапе новорожденности развивается по типу ретикулярных тканей. В подслизистой основе, в мышечной и серозной оболочках - по типу рыхлой неоформленной СТ. В СТ области ворсинок и крипт преобладают ретикулярные клетки над макрофагами, лимфоцитами, фиброцитами (табл.1). Плазмоциты и лаброциты встречаются, по сравнению с фибробластами, реже. В области ворсинок количество ретикулярных клеток, плазмоцитов, макрофагов, фибробластов за исследуемый этап развития увеличивается, а лаброцитов - уменьшается, лимфоцитов - остается на прежнем уровне. В области крипт происходит увеличение количества фиброцитов, макрофагов, лимфоцитов, плазмоцитов, а ретикулярных клеток - уменьшается, лаброцитов - сохраняется (см. табл. 1). Таблица 1. Динамика клеток соединительной ткани слизистой оболочки тощей кишки у телят красно-пестрой породы этапа новорожденности Клетки соединительной ткани Возраст фиброциты макрофаги лимфоциты ретикулярные клетки плазмоциты лаброциты Плоды 40-90 65-90 32-60 90-160 15-32 13-24 9-мес. 60-105 34-80 65-96 120-140 20-40 36-44 возраста Телята 46-95 70-95 35-65 95-160 16-32 13-24 1 суток 65-100 39-80 69-100 120-140 20-40 40-45 Телята 58-100 75-110 35-65 100-160 16-32 13-24 5 суток 75-100 48-80 80-100 110-120 20-40 36-44 Телята 75-105 85-110 32-65 120-160 26-32 5-20 10 суток 85-115 60-80 85-105 95-105 20-40 42-45 Телята 96-110 90-120 32-60 130-180 16-32 2=5 15 суток 100-120 64-82 90-110 90-110 25-48 а 44-45 Примечание: В числителе - количество клеток СТ в области ворсинок, в знаменателе - количество клеток СТ в области крипт. Среднее количество клеток в поле зрения микроскопа при 600-кратном увеличении (ок. 15 х об.40). В межклеточном веществе (МВ) собственной пластинки слизистой оболочки ар- 156 гирофильные волокна (АВ) интенсивно импрегнируются и образуют остов СТ, а каллагеновые волокна (КВ) формируют нежную сеточку вокруг крипт, концевых отделов дуоденальных желез, солитарных или агрегированных лимфоузелков. Количество последних за этап развития в тощей и в подвздошной кишках возрастает от 7 до 14. Величина лимфатических узелков в стенке тощей кишки у телят на этапе новорожденности увеличивается от 320,3±15,8 до 363,1±13,0 мкм (Р<0,05), а процентное отношение величины продольного диаметра к интервалу СТ между узелками увеличивается от 6,9 до 9,9. Сведения о динамике клеточного состава в процентах лимфоузелков стенки подвздошной кишки у телят красно-пестрой породы представлены в таблице №2. Таблица 2. Динамика клеточного состава в процентах лимфоузелков стенки подвздошной кишки у телят красно-пестрой породы новорожденного этапа (М±т) № п/п Объект исследования Плоды 9 мес. Телята 1 сут. Телята 5 сут. Телята 10 сут. Телята 15 сут. 1 Стромальные клетки 18,0±0,2 16,4±0,5 16,6±0,6 16,8±0,7 16,8±0,6 2 Бласты 16,0±0,2 17,0±0,3 17,4±0,3 17,4±0,2 17,6±0,3 3 Большие лимфоциты 15,4±0,2 16Д±0,9 16,4±0,8 16,4±0,7 16,2±0,8 4 Средние и малые лимфоциты 46,0±0,4 43,0±2,3 44,3±2,2 45,0±0,8 46,7±2,4 5 Нейтрофилы 0,1±0,01 0,3±0,01 0,3±0,01 0,3±0,01 0,4±0,01 6 Эозинофилы - - 0,1±0,01 0,1±0,01 0,3±0,01 7 Плазмобласты 1,4±0,1 1,4±0,2 1,6±0,3 1,9±0,2 2,8±0,4 8 Плазмоциты 0,2±0,01 0,2±0,01 0,3±0,01 0,4±0,01 0,6±0,01 9 Лаброциты 0,1±0,01 0,1±0,01 0,2±0,01 0,3±0,01 0,4±0,01 10 Макрофаги 0,2±0,01 0,2±0,01 0,3±0,01 0,3±0,01 0,5±0,01 11 Делящиеся клетки 2,0±0,1 2,1±0,1 2,6±0,1 2,6±0,1 2,7±0,01 12 Гибнущие клетки 0,2±0,01 0,2±0,01 0,6±0,03 0,6±0,02 0,8±0,04 7,0±0,7 7,0±1,0 9,8±0,9 12,6±1,1 14,0±0,7 320,6±3,0 320,3±15,8 353,0±13,4 370,0±17,4 363,1±13,0 52,45,1 46,2±2,3 43,0±2,0 42,1±4,0 40,2±2,0 6,1 6,9 8,2 8,7 9,0 13 14 15 16 Количество лимфоузелков в обобщенных фолликулах Величина продольного диаметра лимфоузелка (в мкм) Толщина СТ между узелками (в мкм) Отношение продольного диаметра к интервалу СТ между узелками Площадь ядер ретикулярных клеток, фибробластов макрофагов, лабро-цитов СТ 157 на этапе новорожденности - уменьшается (табл. 3). Площадь в клетках макрофагов, ретикулярных клеток, лаброцитов увеличивается, а фибробластов - снижается в возрасте 5 суток. В этом же возрасте площадь лимфоцитов увеличивается. Плазмоциты имеют тенденцию к уменьшению площади ядра и цитоплазмы (см. табл.3). Цитоплазменно-ядерное отношение (ЦЯО) макрофагов - увеличивается. Во всех остальных клетках СТ ЦЯО остается без изменений (см. табл. 3). Таблица 3. Данные цитометрии (в мкм) и цитоплазменно-ядерных (ЦЯО) клеток соединительной ткани слизистой оболочки стенки двенадцатиперстной кишки у телят красно-пестрой породы этапа новорожденности (М±ш)_ Объект исследования 1 Р е т и к ул я р ные клетки Длинный диаметр ядра Короткий диаметр ядра Площадь ядра Длинный диаметр клетки Короткий диаметр клетки Площадь клетки ЦЯО Фибробласты Длинный диаметр ядра Короткий диаметр ядра Площадь ядра Длинный диаметр клетки Короткий диаметр клетки Площадь клетки 158 Плоды 9 мес. Телята 1 сут. Телята 5 сут. Телята 10 сут. Телята 15 сут. 2 3 4 5 6 6,8±0,3 6,9±0,6 7,0±0,6 7,1±0,7 7,2±0,7 6,2±0,2 6,4±0,6 6,8±0,3 6,8±0,7 6,8±0,6 33,0±2,1 34,7±3,4 37,3±4,0 37,9±3,5 38,4±4,0 11,8±0,5 11,8±1,2 12,0±2,1 12Д±1,2 12,2±0,6 7,8±0,3 8,0±0,8 8,0±0,4 8,2±0,8 8,4±0,8 72,2±3,6 74,1±7,17 75,3±4,0 77,9±7,8 80,4±6,2 1,2 1Д 1,0 1,0 1,0 - - - - - 8,4±0,4 8,4±0,7 8,0±0,2 8,1±0,8 8,0±0,2 4,3±0,2 4,4±0,4 4,5±0,4 4,6±0,4 4,5±0,4 28,3±1,4 29,0±2,0 28,3±0,8 29,2±2,0 28,2±1,9 17,0±0,9 16,6±1,0 16,4±0,6 16,3±0,81 16,0±0,4 7,0±0,3 7,0±0,7 6,8±0,3 6,9±0,6 7,0±0,3 93,4±8,7 91,2±9,0 87,5±8,1 88,3 87,9±8,6 1 ЦЯО 2 3 4 5 6 2,3 2,1 2,1 2,0 2,1 6,6±0,3 6,6±0,6 6,6±0,3 6,5±0,5 6,4±0,3 4,8±0,1 4,9±0,4 4,9±0,4 4,9±0,4 4,9±0,4 24,8±1,3 25,4±3,0 25,3±2,3 25,0±3,0 24,6±2,4 13,6±0,6 14,3±1,5 14,5±0,5 14,6±0,9 14,8±0,7 9,4±0,4 9,8±0,8 10,0±0,8 10,1±0,9 10,2±2,3 100,3±5,4 110,0±10,0 113,8±9,8 115,8±10,1 118,5±5,6 3,0 3,3 3,4 3,6 3,8 4,2±0,4 4,2±0,2 4,4±0,4 4,4±0,4 4,3±0,3 4,2±0,2 4,2±0,4 4,4±0,2 4,4±0,4 4,3±0,2 13,8±0,7 13,8±2,0 15,2±0,7 15,2±0,7 14,5±0,9 6,2±0,3 6,6±0,6 6,8±0,6 6,8±0,7 6,8±0,6 6,2±0,3 6,6±0,6 6,8±0,5 6,6±0,6 6,4±0,6 30,2±2,0 34,2±3, 36,3±1,8 35,3±3,0 34,2±3,7 1,2 1,4 1,3 1,3 1,3 5,6±0,2 5,2±0,4 4,8±0,4 4,8±0,4 4,8±0,4 5,4±0,1 5,0±0,4 4,8±0,2 4,8±0,4 4,8±0,5 23,7±1,2 21,9±2,1 18,0±1,8 18,0±2,0 18,0±0,9 11,0±0,8 10,5±0,9 9,8±0,9 9,9±0,9 10,0±0,5 Макрофаги Длинный диаметр ядра Короткий диаметр ядра Площадь ядра Длинный диаметр клетки Короткий диаметр клетки Площадь клетки ЦЯО Лимфоциты Длинный диаметр ядра Короткий диаметр ядра Площадь ядра Длинный диаметр клетки Короткий диаметр клетки Площадь клетки ЦЯО Плазмоциты Длинный диаметр ядра Короткий диаметр ядра Площадь ядра Длинный диаметр клетки 159 1 Короткий диаметр клетки Площадь клетки ЦЯО 2 3 4 5 6 9,4±0,7 8,0±0,8 7,4±0,7 7,4±0,7 7,2±0,6 81,1±7,8 65,9±7,0 56,9±2,6 57,5±0,6 56^6±4,2 2,4 2,0 2,1 2,2 2,1 6,4±0,2 6,4±0,3 6,2±0,6 6,4±0,6 6,4±0,7 5,8±0,1 6,0±0,4 6,0± 6,0±0,5 6,0±0,6 29,1±1,4 30,1±3,1 ± 60,1±3,0 30,1±3,1 15,6±0,7 16,0±0,8 ± 16,1±2,0 16,2±0,7 9,9±0,3 10,2±1,1 ± 10,1±0,9 10,3±0,6 121,2±5,2 128,1±8,5 ± 127,6±13,1 130,9±7,0 3,2 3,2 3,3 3,2 3,3 Лаброциты Длинный диаметр ядра Короткий диаметр ядра Площадь ядра Длинный диаметр клетки Короткий диаметр клетки Площадь клетки ЦЯО Исследования показали, что митотически делящиеся фибробласты и макрофаги чаще всего выявляются около стенок кровеносных сосудов и капилляров в собственной пластинке слизистой оболочки области крипт. Ми-тотический индекс (МИ) фибробластов и макрофагов на этапе новорожденности снижается, а индекс апоптоза (ИА) возрастает лишь у ретикулярных клеток табл. 4). Отношение МИ и ИА макрофагов резко снижается - от 13,3 до 3,0%. Поэтому можно предположить, что активность макрофагальной реакции кишечной стенки на этапе новорожденности телят снижается. Отношение МИ и ИА фибробластов также снижается - от 14.0 до 6,6 (см. табл.4), но снижение протекает постепенно. На этапе новорожденности МИ ретикулярных клеток возрастает - от 6,0±0,5 до 12,4±1,2% (р<0,05), а индекс апоптоза возрастает — от 0,9±0,01 до 1,5±0,01 % (cм. табл. 4). Отношение МИ к ИА ретикулярных клеток возрастает с первых суток, по сравнению с 9-ти месячными плодами. На этапе новорожденности телят красно-пестрой породы отношение МИ к ИА ретикулярных клеток возрастает от 6,6 до 8,2 (см. табл. 4). Это свидетельствует об интенсивной перестройке соединительной ткани слизистой оболочки стенки тонкой кишки. 160 Таблица 4. Показатели митотического индекса (МИ) и индекса апоптоза (ИА) клеток соединительной ткани стенки тощей кишки у телят красно-пестрой породы на этапе новорожденности (в % ) № Объект исследования п/п 1 МИ фибробластов 2 ИА фибробластов Отношение МИ/ИА фи3 бробластов 4 МИ макрофагов 5 ИА макрофагов Отношение МИ/ИА ма6 крофагов 7 МИ ретикулярных клеток 8 ИА ретикулярных клеток Отношение МИ/ИА рети9 кулярных клеток Плоды 9 мес. 8,4±0,3 0,6±0,02 Телята 1 сут. 8,0±0,4 0,8±0,02 Телята 5 сут. 7,0±0,3 0,9±0,04 Телята 10 сут. 5,0±0,3 0,8±0,04 Телята 15 сут. 4,0±0,2 0,6±0,03 14,0 10,0 7,7 6,3 6,6 12,0±0,6 0,9±0,02 10,4±0,5 0,9±0,01 8,0±0,4 1,1±0,02 4,0±0,2 1,2±0,1 3,0±0,3 1,1±0,09 13,3 10,4 7,2 3,3 3,0 4,7±0,3 1,0±0,2 6,0±0,5 0,9±0,01 8,4±0,9 1,2±0,2 10,6±1,0 1,4±0,2 12,4±1,2 1,5±0,01 4,7 6,6 7,0 7,6 8,2 Выводы. Проведенные исследования СТ стенки тонкой кишки у телят красно-пестрой породы новорожденного этапа развития показали: 1. Клеточный состав СТ в области крипт, ворсинок, собственной пластинки и подслизистой основы различный (см. табл. 1). 2 Клеточный состав лимфатических узелков на этапе новорожденности меняется (см.табл. 2). 3 Площадь ядра, цитоплазмы и ЦЯО клеток СТ на этапе новорожденнности измняется незначительно (см. табл. 3). 4 Митотический индекс (МИ) и индекс апоптоза (ИА) фибробластов, макрофагов, ретикулярных клеток СТ стенки тонкой кишки телят различный. Соотношение МИ и ИА фибробластов, макрофагов уменьшается, а ретикулярных клеток возрастает (см. таблицу 4). Библиографический список 1. Антипов ,;Е. Е. Соединительнотканное замещение - фактор биологической надежности/ Е. Е.Антипов // Морфология, 1996. Т.109. В.2 - С.ЗО. 2. Видякина, М. А. Морфологические изменения лимфоидной ткани кишечника в онтогенезе у крупного рогатого скота /М. А. Видякина // Авто-реф. дис. ... к.в.н.- СанктПетербург, 2003.- 19 с. 3. Добрынина, И. В. Морфология и гистохимия соединительной ткани стенки тонкой кишки в раннем постнатальном онтогенезе / И. В. Добрынина, Л. П. Тельцов // Материалы Республ. н-пр. конф. по актуальным проблемам ветеринарии и животноводства. - Казань, 1997. - С. 162. 4. Серов, В. В. Соединительная ткань ( функциональная морфология и общая патология / В. В. Серов, А. Б. Шехтер. - М.: Медицина, 1981. - 312 с. 5. Столяров, В. А. Закономерности развития тканей тонкой кишки у плодов и телят черно-пестрой породы / В. А. Столяров // Автореф. дис. ... 161 д-ра в.н. - Казань, 2001. - 38 с. 6. Тельцов, Л. П. Закономерности морфофункционального развития тонкой кишки крупного рогатого скота в онтогенезе / Л. П. Тельцов // Автореф. дис. ...д - ра б.н. - Казань, 1984.-41 с. 7. Тельцов, Л. П. Закономерности развития соединительной ткани тонкой кишки в онтогенезе / Л. П. Тельцов, И. В. Добрынина // VI Конгресс морфологов. - Медицина, 2002. Т. 121. № 2-3. - С.153-154. UDC 634.2.034:591.82 MORPHOLOGY OF THE CONNECTIVE TISSUE WALL OF THE SMALL INTESTINE IN THE RED-MOTLEY BREED OF THE NEWBORN STAGE OF DEVELOPMENT E. A. Usova*, A.A. Stepochkin*, L.P. Teltsov** *Ulyanovsk SAA named P.A.Stolypin, **Ogarev Mordovia State University Keywords: the cells of the connective tissue, dimensions, mitotic index, the index of apoptosis. The article presents the data on the cellular structure of connective TKA-no (ART), about the size of the cells, the mitotic index and the index of apoptosis of cells article mucous membrane of the small intestine calves of the newborn stage of development. УДК: 504.53.054:504.75.05(470.42) ВЛИЯНИЕ ЗАГРЯЗНЕНИЯ ПОЧВ ТЯЖЕЛЫМИ МЕТАЛЛАМИ (КАДМИЕМ, НИКЕЛЕМ) НА ЗДОРОВЬЕ НАСЕЛЕНИЯ УЛЬЯНОВСКОЙ ОБЛАСТИ Е.А. Терехина, аспирант кафедры общей экологии ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет» тел. 8(8422)27-24-64, [email protected] В.Н. Горбачев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет» тел. 8(8422)27-24-64, [email protected] Е.Г. Климентова, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет» тел. 8(8422)27-24-64, [email protected] Ключевые слова: Тяжелые металлы, кадмий, никель, сахарный диабет, реактивные артропатии. Исследование посвящено анализу степени влияния загрязнения почв тяжелыми 162 металлами на состояние здоровья населения Ульяновской области. Рассмотрено содержание кадмия и никеля в пахотных почвах, а также изучены показатели заболеваемости населения районов области по нескольким нозологическим формам за последние 16 лет. Найдена закономерность в развитии некоторых патологий, обусловленная загрязнением почв. Введение. В настоящее время загрязнение почв тяжелыми металлами представляет экологическую опасность. С каждым годом в окружающую среду попадает все большее количество тяжелых металлов, которые в свою очередь осаждаются и накапливаются в почвах. Существует много исследовательских работ, подтверждающих миграцию тяжелых металлов в растения, органы и ткани животных и человеках[1,2]. Токсичные свойства кадмия, свинца, никеля и др. определяют нарушения метаболических процессов в организме и влекут развитие патологических состояний[3.4]. Цель настоящего исследования – установить наличие влияния загрязнения почв тяжелыми металлами (кадмием и никелем) на состояние здоровья населения Ульяновской области. Материалы и методы исследований. Объектами исследования стали почвы Ульяновской области, отобранные в 21 районе за период с 1995 по 2011 гг. В них были определено содержание кадмия и никеля. Были также проанализированы показатели заболеваемости с 2000 по 2011 гг. по 4 классам международной классификации болезней (МКБ-10): болезни крови, кроветворных органов и отдельные нарушения, вовлекающие иммунный механизм(�� III�� ), болезни эндокринной системы, расстройства питания и нарушения обмена веществ(�� IV�� ), болезни костно-мышечной системы и соединительной ткани(XIII), врожденные аномалии (пороки крови), деформации и хромосомные нарушения(XVII). Статистическая обработка данных выполнена с помощью программы Microsoft Excel 2007 для Windows 7. Результаты и их обсуждение. В результате агрохимического обследования пахотных почв за период с 1995 по 2011гг. было выявлено семь районов области, на территории которых было отмечено превышение ПДК по кадмию. К ним относятся Сурский, Карсунский, Майнский, Сенгилеевский, Мелекесский, Старокулаткинский, Николаевский. В районах с повышенным средневзвешенным содержанием кадмия наблюдалась самая высокая по области болезненность сахарным диабетом у населения всех возрастных групп. В Базарносызганском, Цильнинском, Чердаклинском районах с содержанием кадмия в пределах нормы такая патология эндокринной системы была редкой. Известно, что даже низкие концентрации данного металла нарушают обмен микроэлементов, подавляют активность пищеварительных ферментов, снижают синтез ряда гормонов, в том числе и инсулина, нехватка которого и служит причиной появления сахарного диабета[3]. В Инзенском, Сурском, Новоспасском, Кузоватовском, Чердаклинском и Мелекесском районах обнаружены локальные участки с превышением ПДК по никелю, а максимальное средневзвешенное содержание данного металла отмечено в Вешкаймском, Инзенском, Кузоватовском, Новоспасском, Сурском, Цильнинском и Чердаклинском. Анализ болезненности реактивными артропатиями показал, что в Инзенском, Кузоватовском, Цильнинском, Старомайнском районах их показатель максимальный. Учитывая накопление никеля в ороговевающих тканях, а также печени, поджелудочной железе и гипофезе, можно назвать одним из факторов развития реактивных артропатий повышенное содер- 163 жание никеля в окружающей среде[4]. Выводы. Резюмируя результаты исследования, можно сделать выводы: 1. Содержащиеся тяжелые металлы в пахотных почвах негативно отражаются на здоровье населения, длительно проживающего в одной местности. 2.Повышенный уровень кадмия в почвах способствует развитию сахарного диабета (P<0,02). 3. Загрязнение почв никелем отражается на развитии реактивных артропатий (P<0,01). Библиографический список: 1. Засорин, Б.В. Особенности иммунного статуса у населения урбанизированных территорий с повышенным содержанием тяжелых металлов / Б.В. Засорин, О.М. Курмангалиев, Л.С. Ермуханова // Гигиена и санитария. – 2012. - №3. – С.17-19. 2.Мамырбаев, А.А. Содержание металлов в волосах и крови детского населения городов Актюбинской области /А.А. Мамырбаев, Е.Ж. Бекмухамбетов, Б.В. Засорин, К.М. Кибатаев // Гигиена и санитария. – 2012. - №3. – С.61-62. 3.Скальный, А.В. Биоэлементы в медицине / А.В. Скальный, И.А. Рудаков. - М.: Мир, 2004.- 271с. 4.Стожаров, А.Н. Медицинская экология / А.Н. Стожаров. - Минск. : Высш.шк, 2007. – 368с. INFLUENCE OF THE POLLUTION OF SOILS BY THE HEAVY METALS (CADMIUM, NICKEL) ON THE HEALTH OF THE POPULATION OF THE ULYANOV PROVINCE Terechina E.A., Gorbfchev V.N., Klimentova E.G. Key words: Heavy metals, cadmium, nickel, diabetes mellitus, reactive arthropathies. The study is devoted to the analysis of the degree of the influence of the pollution of soils by heavy metals on the status of the health of the population of the Ulyanov province. The content of cadmium and nickel in the arable soils was examined, and the indices of the morbidity of the population of the regions of region on several nosologic forms in the last 16 years are also studied. Is found the regularity in the development of some pathologies, caused by the pollution of soils. 164 УДК 636.29:619.611 ТОПОГРАФО-АНАТОМИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРОЕКЦИИ АРТЕРИЕЙ В ОБЛАСТИ ПЯСТИ И ПАЛЬЦЕВ У ВЕРБЛЮДАБАКТРИАНА С.К. Токтамысова, магистрант А.К. Днекешев, кандидат ветеринарных наук, доцент Западно-Казахстанский аграрно-технический университет имени Жангир хана Samalek_0312@mail ru. Ключевые слова: Морфометрия, артерии, конечности, верблюд,подошвы. В статье даны, проекции основных артерии в области пясти и пальцев у верблюда-бактриана на основании топографо-анатомического исследования. Проекции основных артерии в области пясти нужно учитывать при проведении различных оперативных вмешательств в дистальной части грудной конечности, а также при применении интраваскулярных инъекции, как один из эффективных способов лечения при гнойно-некротических процессах подошвы у верблюда-бактриана. При гнойно-некротических заболеваниях конечностей у животных для разработки более эффективных и обоснованных методов диагностики и лечения, необходимы полные данные по их топографо-анатомическому строению. В особенности нужны сведения о кровоснабжении в дистальных частях конечностей, поскольку знание их проекционной анатомии в указанных отделах позволяет более результативно проводить лечебные мероприятия при поражении пальцев у животных. Верблюды зоологически рано отделившихся от домашних животных образуют самостоятельную ветвь среди жвачных и относятся к мозоленогим – Tylorida, выделяясь своеобразным строением конечностей и свободным, не включенным в тело животного, бедром. В учебных изданиях по морфологии у сельскохозяйственных животных, в научных руководствах и в монографиях по анатомии [1,2,3,4] нет данных по верблюдам, а если же имеются, то в основном указывается только на наиболее выраженные особенности строения организма. Во всем же остальном они описывают анатомо–топографическое строение верблюда свойственно крупному рогатому скоту и лошади [5,6,7]. Поэтому изучение и разработка проекции основных артерии на основании морфометрического исследования анатомии основных сосудов, а также проведение внутриартериальной инъекции в дистальной части у верблюда–бактриана представляет наибольший интерес среди ученых и практикуюших ветеринарных врачей [8,9,10]. Целью нашего исследования было на основании анатомо-морфометрического изучения определить проекции основных артерии в области пясти и пальцев у взрослых верблюдов породы казахский бактриан. Материалом для определения проекции на кожу основных артерии в области пясти и пальцев у верблюда-бактриана послужили 6 препаратов (дистальных конечностей) взятых у трех клинически здоровых животных из боен и частного сектора Жанакалинского 165 района Западно-Казахстанской области в возрасте 5-7 лет. Кровоснабжение пясти, а также пальцев грудной конечности верблюда-бактриана осуществляется в основном срединной артерией - a.mediana, которая проходит в составе мощного сосудисто-нервного пучка вместе с одноименными веной и нервом по медиальной поверхности лучевой кости. На уровне средней трети лучевой кости артерия переходит на медио-пальмарную поверхность предплечья. В области верхнего конца нижней трети лучевой кости от срединой артерии отходит крупной ветвью – срединно– лучевая артерия. Срединно-лучевая артерия – а.mediana radialis идет параллельно со срединной артерией вдоль медио-пальмарной поверхности запястья. Артерия по ходу отдает крупные ветви (диаметр 1,5-3мм) в блок лучевой кости, затем 3-4 веточки в запястье для пальмарной и дорсальной сети. Сама артерия далее идет по медио-пальмарной поверхности запястья. В области проксимального эпифиза пястной кости артерия погружается под межкостную среднюю мышцу и с этого уровня она именуется глубокой пальмарной пястной артерией - a.palmaris metacarpeae profundus. Артерия идет вниз в костном желобе пястной кости по ходу отдавая ветви в надкостницу пясти, в межкостную среднюю мышцу, на латеральную и медиальную поверхности пясти. Диаметр глубокой пальмарной пястной артерии в проксимальной части пясти у взрослых верблюдов равен 2,56±0,11мм в дистальной части - 2,40±0,11мм, при коэффициенте вариации соответственно Cv=4,29%, (p<0,05) и Cv=4,58%, (p<0,05) (таблица 1). На уровне середины нижней трети пясти она анастомозирует с поверхностной медио-пальмарной пястной артерией образуя при этом мощную дистальную пальмарную пястную артериальную дугу. До соединения с поверхностной медио-пальмарной пястной артерией, глубокая пальмарная пястная артерия отдает две горизонтально идущие на пясть ветви - латеральную и медиальную (диаметр 1,5мм), которые в свою очередь разветвляются на боковые веточки, васкуляризующие латеральные и медиальные поверхности путового сустава и пястную кость. Проекции глубокой пальмарной пястной артерии соответствует линия, проведенная от середины проксимальной части пясти сверху вниз по костному пальмарному желобу до середины нижней трети пясти. Поверхностная медио-пальмарная пястная артерия – а.�� metacarpeae� �� medio�� -�� palmaris�� superficialis�� с уровня эпифиза пястной кости является продолжением срединной артерии. Артерия на уровне верхней трети пясти лежит в хорошо выраженном желобе, образованном сухожилием глубокого пальцевого сгибателя и пястной костью, между веной и срединным нервом, последний прилегает к ней сверху. В области средней трети пясти от артерии отходит хорошо выраженная восходящая ветвь (диаметр 1,0-1,8мм), которая идет параллельно основной артерии на медиальную поверхность запястного сустава, по ходу отдавая веточки в межкостную среднюю мышцу. Начиная с уровня средней трети пясти, поверхностная медио-пальмарная пястная артерия вместе с пальмарными пястными нервами плавно отклоняется на заднюю поверхность сухожилия поверхностного пальцевого сгибателя. Диаметр поверхностной медио-пальмарной пястной артерии в проксимальной части пясти у взрослых верблюдов породы казахский бактриан равен 4,45±0,08мм и в дистальной части пясти 4,05±0,07мм при лимите соответственно 4,2-4,7мм и 3,8-4,2мм, где Cv=1,80%, (p<0,05), и Cv= 4,19%, 166 (p<0,01) (таблица 1). На уровне верхнего конца нижней трети пясти артерия располагается точно по середине пальмарной поверхности пясти в желобе, образованном сухожильными ветвями пальцевых сгибателей. На своем пути поверхностная медио-пальмарная пястная артерия отдает ветви на латеральную и медиальную поверхности пясти, в сухожильные влагалища, в межкостную среднюю мышцу, в глубокую фасцию и в фасциальный футляр. Проекцией поверхностной медио-пальмарной пястной артерии на уровне верхней трети пясти служит линия, проведенная сверху вниз по медио-пальмарному желобу, затем на уровне верхнего конца средней трети пясти линия проходит наискось к середине пальмарной поверхности конечности, далее она продолжается дистально точно по середине пальмарной поверхности конечности до середины нижней трети пясти. На уровне середины нижней трети пясти поверхностная медио-пальмарная пястная артерия отдает мощную ветвь – дистальную пальмарную пястную артериальную дугу – �� a�� .�� arcus�� metacarpea�� distalis�� , которая погружается и идет между ветвями сухожилий пальцевых сгибателей и межкостной средней мышцей вниз и затем вверх, анастомозируясь с глубокой пальмарной пястной артерией.�� Диаметр дистальной пальмарной пястной артериальной дуги у взрослых верблюдов равен 3,52±0,04мм при коэффициенте вариации соответственно Cv=2,84%, (p<0,05) (таблица 1). Таблица 1. Морфометрические показатели диаметра основных артерии в области пясти у верблюда-бактриана (мм) Название артерии n Поверхностная медио-пальмарная пястная артерия (на уровне верхней 6 трети пясти) Поверхностная медио-пальмарная пястная артерия (на уровне нижней 6 трети пясти) Дистальная пальмарная пястная арте6 риальная дуга Дистальная прободающая пястная 6 артерия Глубокая пальмарная пястная артерия 6 (на уровне верхней трети пясти) Глубокая пальмарная пястная артерия 6 (на уровне нижней трети пясти) Дорсальная пястная артерия (на уров6 не верхней трети пясти) Дорсальная пальмарная пястная (на 6 уровне нижней трети пясти) Lim _ _ х ± Sх σ Cv 4,2-4,7 4,45±0,08 0,08 1,80 3,8-4,2 4,05±0,07 0,17 4,19 3,2-3,8 3,52±0,04 0,10 2,84 1,2-1,8 1,51±0,03 0,10 6,62 2,2-2,9 2,56±0,11 0,11 4,29 2,0-2,7 2,40±0,11 0,04 4,58 1,3-1,8 1,65±0,04 0,11 6,66 1,1-1,7 1,35±0,04 0,11 8,14 От дистальной пальмарной пястной артериальной дуги отходит дистальная про- 167 бодающая пястная артерия – a.metacarpeae perforalins distalis. Последняя в свою очередь, после своего отделения, идет вперед и вниз через одноименное отверстие с пальмарной поверхности пястной кости на ее дорсальную поверхность. Можно полагать, что прободающая плантарная артерия представляет собой не что иное, как восходящую ветвь глубокой плантарной плюсневой артерии. Диаметр дистальной прободающей артерии у взрослых верблюдов в возрасте 5-7 лет был равен 1,51±0,03мм при коэффициенте вариации соответственно Cv=6,62%, (p<0,01) (таблица 1). Дистальная прободающая пястная артерия по ходу отдает веточки в межкостный канал, где разветвляется и на внутрикостные веточки, в область средней части пястной кости и в дистальную ее часть. Концевая часть дистальной прободающей артерии выходит на дорсальную поверхность пястной кости. Здесь наши наблюдения не совпадают с мнением Д.М. Аухадиевой [7], которая утверждает, что дистальная прободающая пястная артерия анастомозирует с дорсальной пястной артерией. Следовательно, можно полагать, что дорсальная пястная и дистальная прободающая пястная артерии васкуляризуют вместе полностью все слои путового сустава. Дорсальная пястная артерия – �� a�� .�� dorsalis�� metacarpeae�� берет свое начало из дорсальной запястной сети и идет в пястном дорсальном костном желобе под сухожилиями пальцевых разгибателей очень слабой ветвью, и только в дистальной части пясти она начинает разветвляться на мелкие ветви в области путового сустава. У взрослых верблюдов диаметр дорсальной пястной артерии в проксимальной части пясти равен 1,65±0,04мм, в дистальной части пясти 1,35±0,04мм при лимите соответственно 1,3…1,8мм и 1,1…1,7мм, где Cv=6,66%, (p<0,001) и Cv= 8,14%, (p<0,01) (таблица 1). Проекцией дорсальной пястной артерии служит линия, проведенная сверху вниз от середины проксимальной части пясти по дорсальной поверхности конечности до дистальной части пясти. На уровне середины нижней трети пясти, после отделения дистальной пальмарной артериальной дуги, поверхностная медио-пальмарная пястная артерия продолжается как общая пальмарная пальцевая артерия – a. digitalis palmaris communis. Она является основной артериальной магистралью для пальцев грудной конечности верблюда-бактриана. Таблица 2. Морфометрические показатели диаметра основных артерии в области пальцев грудной конечности у верблюда-бактриана (мм) Название артерии Общая пальмарная пальцевая артерия Специальная пальцевая артерия 4-го пальца Латеральная пальцевая артерия 4-го пальца Медиальная пальцевая артерия 4-го пальца Специальная пальцевая артерия 3-го пальца Медиальная пальцевая артерия 3-го пальца Латеральная пальцевая артерия 3-го пальца n 6 6 6 6 6 6 6 Lim 3,6-4,2 3,2-3,7 3,0-3,7 2,9-3,6 3,3-3,9 2,7-3,4 2,6-3,2 _ _ х ± Sх 3,88±0,04 3,43±0,03 3,40±0,04 3,27±0,05 3,58±0,04 3,08±0,05 2,93±0,04 σ 0,10 0,08 0,11 0,12 0,10 0,12 0,10 Cv 2,58 2,33 3,23 3,67 2,49 3,90 3,41 Проекция общей пальмарной пальцевой артерии будет линия, проведенная от 168 середины нижней трети пясти по середине пальмарной поверхности конечности до проксимальных концов путовых костей. Диаметр общей пальмарной пальцевой артерии грудной конечности у взрослых животных лимит составил 3,6…4,2мм, средняя статистическая была равна 3,88±0,04мм (таблица 2), где Cv=2,58%, (p<0,001). На пальмарной поверхности путового сустава артерия идет в желобе, образованном сухожилиями пальцевых сгибателей, в межпальцевую щель и на уровне проксимальных концов путовых костей она делится на специальные пальцевые артерии 3-го и 4-го пальцев. Угол расхождения специальных пальцевых артерий равен 40-45 градусам. Проекциям специальных пальцевых артерий соответствуют линии, проведенные по внутренним поверхностям пальцев до середины путовой кости соответствующего пальца. Специальная пальцевая артерия 4-го пальца – �� a�� .�� digitalis�� proprii�� после своего ответвления от общей пальмарной пальцевой артерии через 0,5см в большинстве случаев отдает пальмарную подошвенную артерию - a�� .�� palmaris�� solearis�� , которая идет по пальмарной поверхности пальцевого пространства к задней части подошвы. Кроме того, пальмарная подошвенная артерия в некоторых случаев отходит двумя ветвями – одна ветвь от специальной пальцевой артерии 4-го пальца, другая - от специальной пальцевой артерии 3-го пальца. Редко в отдельных случаев артерия отделяется непосредственно от общей пальмарной пальцевой. Специальная пальцевая артерия 4-го пальца идет по внутренней поверхности путовой кости и через 3,5см после ответвления пальмарной подошвенной артерии делится на латеральные и медиальные пальцевые артерии. У взрослых верблюдов диаметр специальной пальцевой артерии 4-го пальца в равен 3,43±0,03мм, при лимите соответственно 3,2…3,7мм, где Cv=2,33%, (p<0,001) (таблица 2). Латеральная пальцевая артерия 4-го пальца – а.lateralis digitalis IY, через 0,3см отдает две ветви - восходящую (диаметр 1мм), которая идет вверх вдоль медиального края сухожилий пальцевых сгибателей для пальмарной поверхности путового сустава, и нисходящую (диаметр 0,8мм), которая идет вдоль путовой кости для дистального конца последней. У взрослых верблюдов диаметр латеральной пальцевой артерии 4-го пальца равен 3,40±0,04мм, при лимите соответственно 3,0…3,7мм, где Cv=3,23%, (p<0,001) (таблица 2). Артерия проходит под сухожилиями пальцевых сгибателей и появляется на уровне середины путовой кости, на наружной поверхности 4-го пальца, где вновь отдает восходящую ветвь (диаметр 1мм), которая идет вверх вдоль латерального края сухожилий пальцевых сгибателей на латеральную поверхность путового сустава. Затем артерия идет между веной и нервом по наружным поверхностям – венечного сустава, венечной кости и когтевого сустава. Нерв прилегает к задней стенке артерии, а вена лежит выше ее. На уровне середины третьей фаланги артерия анастомозирует с медиальной пальцевой артерией 4-го пальца. По пути артерия отдает 6-8 веточек на дорсальную поверхность 4-го пальца и 7-10 веточек в область подошвы. Проекция латеральной пальцевой артерии 4-го пальца проходит по линии, проведенной по внешней поверхности 4-го пальца от нижнего края венечного сустава до середины когтя. Медиальная пальцевая артерия 4-го пальца - а.medialis digitalis IY, идет вместе с медиальным специальным пальцевым нервом 4-го пальца по внутренней поверхности 169 венечного сустава, венечной кости и когтевого сустава; нерв лежит впереди артерии. Проекция медиальной пальцевой артерии 4-го пальца проходит по линии, проведенной по внутренней поверхности 4-го пальца от середины путовой кости до середины когтя. Диаметр медиальной пальцевой артерии 4-го пальца у верблюдов равен 3,27±0,05мм, при лимите соответственно 2,9…3,6мм, где Cv=3,67%, (p<0,001) (таблица 2). На уровне середины третьей фаланги пальца артерия анастомозирует с латеральной пальцевой артерией 4-го пальца. По ходу она отдает 8-10 веточек в область подошвы и 6 веточек на дорсальную поверхность 4-го пальца. Специальная пальцевая артерия 3-го пальца – а.digitalis proprii III после своего ответвления от общей пальмарной пальцевой артерии направляется по внутренней поверхности путовой кости и на уровне середины последней делится на медиальную и латеральную пальцевые артерии 3-го пальца. Диаметр специальной пальцевой артерии 3-го пальца у взрослых животных лимит составил 3,3…3,9мм. До деления артерия через 1,5см после своего ответвления отдает в 15% случаев пальмарную подошвенную артерию (диаметр 1,2мм), которая направляется по пальмарной поверхности пальца к задней части подошвы. Медиальная пальцевая артерия 3-го пальца - а.medialis digitalis III проходит под сухожилиями пальцевых сгибателей, но предварительно она отдает две ветви – восходящую (диаметр 1,2мм), которая направляется вверх, вдоль латерального края сухожилий пальцевых сгибателей для путового сустава, и нисходящую (диаметр 1мм), идущую вдоль путовой кости вниз для венечного сустава. Далее артерия на уровне середины путовой кости выходит на наружную поверхность 3-го пальца, где вновь отдает восходящую веточку для путового сустава. Затем она идет между веной и нервом по наружной поверхности 3-го пальца, и на уровне середины третьей фаланги пальца артерия анастомозирует с латеральной пальцевой артерией 3-го пальца. По ходу артерия отдает веточки в область подошвы и на дорсальную поверхность 3-го пальца. Проекции медиальной пальцевой артерии 3-го пальца соответствует линия, проведенная по внешней поверхности 3-го пальца от середины путовой кости до середины когтя. Латеральная пальцевая артерия 3-го пальца - а. �� lateralis�� digitalis�� III, после своего отделения идет вместе с латеральным специальным пальцевым нервом 3-го пальца по внутренним поверхностям – венечного сустава, венечной кости, когтевого сустава и анастомозирует на уровне середины третьей фаланги пальца с медиальной пальцевой артерией 3-го пальца, образуя дистальную пальцевую дугу. Нерв располагается выше, прилегая к передней стенке артерии. Проекцией латеральной пальцевой артерии 3-го пальца будет линия, проведенная по внутренней поверхности 3-го пальца от середины путовой кости до середины когтевого сустава. Таким образом, можно сказать, что основной артерией обеспечивающий кровоснабжение дистальные части грудной конечности, в особенности подошвы у верблюда-бактриана, является поверхностная медио-пальмарная пястная артерия, которая в области пясти располагается более поверхностно. Проекцией артерии служит линия, проведенная сверху вниз по медио-пальмарному желобу, затем на уровне верхнего кон- 170 ца средней трети пясти линия проходит наискось к середине пальмарной поверхности конечности, далее она продолжается дистально точно по середине пальмарной поверхности конечности до середины нижней трети пясти. В заключении рекомендуем при разработке внутриартериального введения лекарственных средств, а также при проведении рациональных разрезов и вскрытии гнойно-некротических процессов в области подошвы, учитывать проекционную анатомию поверхностной медио-плантарной плюсневой и других артерии в области пясти и пальцев у верблюда-бактриана. Библиографический список: 1. Юдичев Ю.Ф., Дегтярев В.В., Хонин Г.А. Сравнительная анатомия домашних животных.- Оренбург-Омск.: Издат.центр Оренбур. гос. аграр. ун-та,1997.-Т.1. -344 с. 2. Акаевский А.И. Анатомия домашних животных.- М.: Колос,1984.-543с. 3. Садовский Н.В. Топографическая анатомия домашних животных.М.:Сельхозгиз.- 1960.- 421с. 4. Попеско П. Атлас топографической анатомии сельскохозяйствен-ных животных.- Братислава: Природа,CSSR,1978.- Т.3. Таз и конечности.- 207 с. 5. Новопольский Н.Ф. Анатомия верблюда// Архив ветеринарных наук. 1892.Кн.7,8,11,12; .- 1893.- Кн.4,5,6. 6. Ерофеев М.Г. Артериальная система одногорбого верблюда// Издание Туркменского междуведомоственного комитета по охране природы и развитию природных богатств.-Ашхабад,1935.- Вып.2.-С.3-48. 7. Аухадиева, Д.М. Артерии дистального звена грудной и тазовой конечностей верблюда (бактриана)/ Д.М. Аухадиева // Сб. науч. тр. Алма-Атинского и Семипалатинского зоовет. институтов.- Алма-Ата.,1975.-Вып.29.- С.3-7. 8. Днекешев, А.К. Топографическая анатомия поверхностной пальмарной пястной артерии у верблюда/ А.К. Днекешев //Резервы увеличения производства и повышения качества с/х продукции/Тез. докл. ХΙ межреспуб. науч. практ. конф. молодых ученых и специалистов.- Оренбург, 1992.-С.52-53. 9. Днекешев, А.К. К вопросу о вариантах ветвления пальмарной подошвенной артерии у верблюда-бактриана/ Днекешев А.К. //Вестник ветеринарии: Науч.труды Академии ветеринарной медицины.- Оренбург, 2002. Вып. 5.- С.68-69. 10. Токтамысова, С.К. Бактриан түйесінің артқы жіліншік аумағындағы негізгі артериялардың проекциялық анатомиясы/С.К. Токтамысова, А.К. Днекешев, И.Н. Жубантаев, Ф.Б. Закирова //Еуразиялық интеграция: инновациялық бағдарламаларды жүзеге асырудағы ғылым мен білімнің рөлі/Халықаралық ғылыми-практикалық конференциясының материалдары.-Орал,2012.-І бөлім.- Б.307-312. UDC 636.29:619.611 TOPOGRAPHIC-ANATOMIC SUBSTANTIATION PROJECTION ARTERY IN THE PASTERNS AND TOES OF A CAMEL-BACTRIAN SK Toktamysova - Master 171 A.K. Dnekeshev - candidate of veterinary sciences, associate professor West Kazakhstan Agro-Technical University Zhangir Khan Samalek_0312 @ mail ru. Keywords: morphometry, arteries, limbs, camel, foot. The article gives the projections major arteries in the pasterns and toes in the Bactrian camel-based topographic and anatomic study. The projections of the main arteries in the pasterns should be considered during various surgical procedures in the distal thoracic limbs, as well as the application of intravascular injection, as one of the most effective methods of treatment for necrotic processes in the sole-Bactrian camel. УДК 602.3:579.8 Научные исследования проводятся при финансовой поддержке государства в лице Министерства образования и науки Российской Федерации в рамках реализации федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (соглашение от №8267 от 10.08.2012). ОСНОВНЫЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ФАГОВ БАКТЕРИЙ BACILLUS MYCOIDES Н.А. Феоктистова, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] В.А. Макеев, аспирант ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» 8(8422) 55-95-47, [email protected] А.В. Алешкин, доктор биологических наук Московский НИИЭиМ им. Г.Н. Габричевского» 8-495-452-18-16, [email protected] Ключевые слова. Бактериофаги, Bacillus mycoides, биопрепарат, литическая активность, спектр литического действия�� , специфичность действия, изменение литической активности при хранении. В статье дана характеристика основных биологических свойств бактериофагов Bacillus mycoides (литическая активность, спектр литического действия, специфичность действия, изменение литической активности при хранении), изучение которых необходимо для конструирования биопрепарата для фагоиндикации и 172 фагоидентификации бактерий Bacillus mycoides в пищевом сырье и продуктах питания. Введение. Создание биопрепарата для фагоиндикации и фагоидентикации бактерий Bacillus mycoides в пищевом сырье на основе бактериофагов подразумевает изучение таких биологических свойств, как литическая активность, спектр литического действия, специфичность в пределах вида и изменение литической активности при хранении [3,5]. Литическая активность бактериофага оценивается по его способности вызывать лизис бактериальной культуры в жидких или плотных питательных средах и выражает это тем максимальным разведением, в котором испытуемый бактериофаг проявил свое литическое действие. Более точным методом оценки литической активности бактериофага является определение количества активных корпускул фага в единице объема. Однако, этот показатель относительный, так как активность фага зависит от различных условий, основными из которых являются биологические особенности бактериальной клетки, которые в свою очередь зависят от физических свойств среды, ее химического состава, окружающей температуры и так далее. Поэтому активность фага всегда определяется в конкретных, стандартных условиях [4]. Видовая специфичность фагов используется в практике для дифференциации бактерий. Эта способность фагов определяется, прежде всего, родством их к рецепторам лизируемых бактерий [2]. Так как для разработки технологических параметров изготовления биопрепарата на основе фагов необходимо изучить изменение литической активности при хранении, так как срок годности биопрепарата начинает исчисляться с момента наработки фага и его укупоривания в герметично закрытые флаконы [7]. Целью наших исследований было изучение основных биологических свойств бактериофагов Bacillus mycoides (литическая активность, спектр литической активности, специфичность действия, изменение литической активности при хранении). Материалы и методы исследований. В работе было использовано 12 штаммов бактерии Bacillus mycoides, 1 из них референс – штамм (Bacillus mycoides 537), 78 штаммов бактерий Bacillus cereus, Bacillus megaterium, Bacillus mesentericus, Bacillus subtilis, Bacillus thuringiensis, полученных из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина». Изучались биологические свойства 5 изолятов бактериофагов Bacillus mycoides, выделенных из объектов санитарного надзора Ульяновской и Самарской областей, Краснодарского края по методикам, предложенным Д.М. Гольдфарбом [2], И.П. Ревенко [6], В.Я. Ганюшкиным [1], С.Н. Золотухиным [3]. Результаты собственных исследований и их обсуждение Изучения литической активности селекционированных фагов Bacillus mycoides проводили методом агаровых слоев (Gracia, 1936) [6]. Определение этого показателя необходимо для создания биопрепарата, сохраняющего свою литическую активность в течение 12 месяцев. Накануне опыта по чашкам Петри разливали 1,5% мясопептонный агар в ламинарном боксе. Перед использованием чашки дополнительно подсушивали в термостате при 37 0С 15-20 минут. Индикаторные культуры Bacillus mycoides выращивались в условиях термостата в течение 18-20 часов при 37 0С на мясо-пептонном бульоне. Стерильный 0,7% мясопептонный агар, разлитый в пробирки по 2,5 мл, расплавляли на 173 водяной бане и остужали до 46-48 0С. Исследуемый на присутствие бактериофага субстрат в количестве 1,0 мл помещали в 2,5 мл 0,7% мясопептонного агара, туда же вносили 0,2 мл индикаторной культуры. Все быстро и тщательно перемешивали вращением пробирки в ладонях и выливали на поверхность 1,5% мясопептонного агара. Смесь осторожными движениями распределяли по поверхности мясопептонного агара, чашки Петри оставляли на горизонтальной поверхности стола до полного застывания мясопептонного агара, затем инкубировали посевы в термостате при 37 0С в течение 18 часов. Экспериментальным путем установлено, что литическая активность фагов колеблется в диапазоне от 106 до 10 12 БОЕ/мл. Результаты исследований представлены в таблице 1. Важной характеристикой фагов Bacillus mycoides является диапазон их действия на штаммы бактерий в пределах вида. Этот показатель чрезвычайно важен для создания диагностического препарата, способного лизировать строго бактерии Bacillus� mycoi�� des, выделенные из различных источников. Для изучения спектра литического действия селекционированных фагов использовали 10 штаммов бактерий Bacillus mycoides, выделенных нами их проб пищевого сырья и продуктов питания и 1 штамм, полученный из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина». Исследования проводили методом нанесения фага на газон бактериальной культуры методом «стекающая капля». Экспериментальным путем установлено, что изучаемые специфичные бактериофаги имеют различный диапазон действия по отношению к 12 изучаемым штаммам Bacillus mycoides (рис. 1). Опыты демонстрируют, что наиболее широким спектром литического действия по отношению к изучаемым культурам обладают штаммы фагов B.myc–3 и B.myc–5 серии УГСХА, совокупный процент лизиса которых составил 91,7 %. Вышеназванные фаги обладают перекрестным лизисом, в данном случае они лизируют следующие штаммы Bacillus mycoides, выделенные нами из пищевого сырья�� : Bacillus�� mycoides�� 1�� (пряности – мускатный орех�� ), Bacillus�� mycoides 2 (картофель), Bacillus mycoides 5 (лук репчатый), Bacillus mycoides 6 (рыба прудовая), Bacillus mycoides Н (пряности – корица) и референс-штамм Bacillus mycoides 537. Рис. 1. – Спектр литического действия фагов Bacillus mycoides Важнейшей характеристикой фага, входящего в состав биопрепарата для индикации и идентификации бактерий, является его специфичность в пределах вида. Изучение 174 специфичности 5 выделенных изолятов бактериофагов Bacillus mycoides мы проводили на культурах гомологичного рода: Bacillus subtilis – 25 штаммов, Bacillus mesentericus – 20 штаммов, Bacillus megaterium – 4 штаммов, Bacillus cereus – 25 штаммов, Bacillus thuringiensis – 4 штамма. Эксперимент ставили, используя методику, описанную С.Н. Золотухиным (2007). Таблица 1. Результаты исследований спектра литического действия и литической активности фагов бактерий Bacillus mycoides № Фаги 1 2 3 4 5 Совокупный процент лизиса B myc–1 УГСХА B myc–2 УГСХА B myc–3 УГСХА B myc–4 УГСХА B myc–5 УГСХА Количество лизированных культур Bacillus mycoides, шт 2 5 8 6 9 Процент лизируемых культур, % 16,7 41,7 66,7 50,0 75,0 Количество корпускул в 1 мл фага (по Грациа), БОЕ 1,5х109 ± 0,4 х109 2,3х106 ± 0,7 х106 6,2х1012 ± 0,8 х1012 7,8х108 ± 0,2 х108 1,6х1010 ± 0,6 х1010 91,7 На чашки Петри с разлитым в нее 1,5% накануне мясопептонным агаром наносили газон культуры вышеназванных видов бактерий рода Bacillus. Бактериальный газон подсушивали в условиях термостата в течение 20-30 минут при 37 0С. Затем чашку Петри с подготовленным газоном делили на три сектора: две «опытных» дорожки и контроль на механическое повреждение газона. На «опытные» дорожки наносили по 1-2 капли исследуемого бактериофага Bacillus mycoides, на «контрольную» дорожку – стерильный мясопептонный бульон в том же количестве, что и бактериофаги. Посевы помещали в термостат на 18 часов инкубации при 37 0С. На чашках Петри, засеянных культурами Bacillus subtilis, Bacillus mesenteri�� cus, Bacillus megaterium, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis, зон лизиса, при нанесении селекционированных нами фагов Bacillus mycoides B.myc–3 и B.myc–5 серии УГСХА на газон культур, обнаружено при визуальном осмотре не было. Полученные результаты свидетельствуют, что выделенные и селекционированные нами бактериофаги, строго специфичны в пределах вида Bacillus mycoides и могут быть компонентами биопрепарата для индикации и идентификации бактерий Bacillus mycoides. Для конструирования биопрепарата нами было отобрано два фага B.myc–3 и B.myc–5 серии УГСХА, которые характеризовались высокими титрами литической активности и максимально широким совокупным спектром литического действия (рис. 2). Последующие эксперименты были направлены на изучение изменения литической активности укупоренных во флаконы бактериофагов B.myc–3 и B.myc–5 серии УГСХА, хранящихся в условиях холодильника в течение 12 месяцев. Показатели литической активности фагов при хранении определяется по классической методике определения активности методом агаровых слоев (Gracia, 1936) [3]. Для получения достоверных 175 данных каждый эксперимент проводили троекратно и результаты исследований подвергали статистической обработке. Эталонные культуры бактерий Bacillus mycoides выращивали на мясо-пептонном бульоне в течение 18 часов в термостате при 37 °С. Результаты исследований представлены в таблице 2. Рис. 2. – Диапазон лизиса фагов В.myc-3 и В.myc-5 серии УГСХА Опытным путем установлено, что в течение 3 месяцев показатели литической активности исследуемых бактериофагов B.myc–3 и B.myc–5 серии УГСХА оставались без изменений, 6,2х1012 ± 0,8 х1012 и 1,6х1010 ± 0,6 х1010 БОЕ/мл фаголизата, соответственно. Через 6 месяцев литическая активность снижалась и составила у фага B.myc–3 4,7х108±1,5х108 БОЕ/мл и у B.myc–5 УГСХА - 2,5х108±1,7х108 БОЕ/мл, через 9 месяцев 0,9х107±0,2х107 и 1,1х108±0,4х108 БОЕ/мл, 12 месяцев - 0,4х107±0,1х107 и 1,3х107±0,5х107 БОЕ/ мл, соответственно. Экспериментально установлено, что пассирование бактериофагов на исходном штамме бактерий Bacillus mycoides в течение 7 пассажей методом агаровых слоев (Gracia, 1936)[3] восстанавливает литическую активность бактериофагов на 1 порядок. Таблица 2. Изменение литической активности фагов В.myc-3 и В.myc-5 серии УГСХА при хранении Бактериальная культура / название фага Временной интервал момент укупоривания 3 месяца Bacillus mycoides 537/ 6 месяцев В.myc-3 УГСХА 9 месяцев 12 месяцев Bacillus mycoides Н / В.myc-5 УГСХА момент укупоривания 1,6х1010 ± 0,6 х1010 176 Литическая активность, количество корпускул в 1 мл фага, БОЕ 6,2х1012 ± 0,8 х1012 6,2х1012 ± 0,8 х1012 4,7х108±1,5х108 0,9х107±0,2х107 0,4х107±0,1х107 3 месяца 6 месяцев 9 месяцев 12 месяцев 1,6х1010 ± 0,6 х1010 2,5х108±1,7х108 1,1х108±0,4х108 1,3х107±0,5х107 Заключение. Проведенные исследования по изучению основных биологических свойств фагов Bacillus mycoides принципиально важных для создания биопрепарата для фагоиндикации и фагоидентификации, показали, что изучаемые бактериофаги изменяют показатели литической активности, определяемые в стандартных условиях. Литическая активность фагов B.myc–1 - B.myc–5 серии УГСХА колеблется в диапазоне от 106 до 10 12 БОЕ/мл. Опыты демонстрируют, что наиболее широким спектром литического действия по отношению к изучаемым культурам обладают штаммы фагов B.myc–3 и B.myc–5 серии УГСХА, совокупный процент лизиса исследованных штаммов Bacillus mycoides которых составил 90,9 %. Установлено, что выделенные и селекционированные нами бактериофаги, строго специфичны в пределах вида Bacillus mycoides и могут быть компонентами биопрепарата для фагоиндикации и фагоидентификации бактерий Bacillus mycoides в объектах окружающей среды и продуктах питания. Для конструирования биопрепарата на основе фагов Bacillus mycoides нами было отобрано два фага B.myc–3 и B.myc–5 серии УГСХА, которые характеризовались высокими титрами литической активности и максимально широким совокупным спектром литического действия. Дальнейшие эксперименты были направлены на изучение изменения литической активности укупоренных во флаконы бактериофагов B.myc–3 и B.myc–5 серии УГСХА, хранящихся в условиях холодильника в течение 12 месяцев. Определено, что бактериофаги в течение 12 месяцев снижали показатели литической активности с 1012 до 107 БОЕ/мл. Согласно данным С.Н. Золотухина (2007), изменение литической активности фагов в диапазоне 107-109 не является критическим при конструировании биопрепарата и не отразится на его способности лизировать культуры в пищевом сырье и продуктах питания при проведении исследований по их индикации и идентификации [3]. Библиографический список 1.Васильев, Д.А. Бактериофаги рода Bacillus / Д.А. Васильев, Н.А. Феоктистова, С.Н. Золотухин. – Ульяновск: УГСХА, 2013. – С. 23. 2.Гольдфарб, Д.М. Бактериофагия / Д.М. Гольдфарб. – М.: Медгиз,1961. − С. 169–187. 3.Золотухин, С.Н. Создание и разработка схем применения диагностических биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий: автореф. дис. …докт. биол. наук: 03.00.07, 03.00.23 / Золотухин Сергей Николаевич. − Ульяновск, 2007. − С.32. 4.Каттер, Э. Бактериофаги. Биология и практическое применение / Э. Каттер, А. Сулаквелидзе. − М.: Научный мир, 2012. − С. 365-369. 5.Раутенштейн, Я.И. Изменчивость Bacillus mycoides. Морфология вариантов/ Я.И. Раутенштейн // Микробиология. − 1977. − №1 (16). − С.33–41. 6.Ревенко, И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике / И.П. Ревенко. – Киев: Урожай, 1978. − С. 41–88. 7.Юдина, М.А. Диагностика картофельной болезни хлеба, вызываемой 177 бактериями видов Bacillus subtilis и Bacillus mesentericus / М.А. Юдина, Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев, Е.О. Бахаровская [и др.] // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. – 2011. – №1 (13). – C. 61–67. BASIC BIOLOGICAL PROPERTIES PHAGES BACTERIA BACILLUS MYCOIDES Feoktistova N.A., Makeev V.A., Vasiliev D.A., Alyoshkin A.V. Keywords. Bacteriophages, Bacillus mycoides, biological product, lytic activity, the spectrum of lytic action, specificity, modification of lytic activity during storage. The paper presents the characteristics of the basic biological properties of bacteriophages Bacillus mycoides (lytic activity, the spectrum of lytic activity, specificity, modification of lytic activity during storage), the study of which is necessary for the construction of a biological product for fagoindikatsii and fagoidentifikatsii bacteria Bacillus mycoides in food raw materials and food products. УДК 602.3:579.8 Научные исследования проводятся при финансовой поддержке государства в лице Министерства образования и науки Российской Федерации в рамках реализации федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (соглашение от №8267 от 10.08.2012). РАЗРАБОТКА СИСТЕМЫ ФАГОВАРОВ BACILLUS CEREUS А.И. Калдыркаев, ассистент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Н.А. Феоктистова, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» 8(8422) 55-95-47, [email protected] А.В. Алешкин, доктор биологических наук Московский НИИЭиМ им. Г.Н. Габричевского» 8-495-452-18-16, [email protected] С.В. Мерчина, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» 178 тел. 8(8422) 55-95-47 Ключевые слова. Bacillus cereus, мониторинг, бактериофаги, система фаговаров, идентификация, биологические свойства, фаготипирование. Работа посвящена разработке системы фаговаров B. cereus . Разработана схема фаготипирования штаммов В. с�� ereus�� , делящая все изученные штаммы данного микроорганизма на 18 фаговаров. Выделено 57 фагов B. cereus. Изучены основные биологические свойства 57 изолятов�� фагов B. �� cereus: определено 4 типа негативных колоний, литическая активность выделенных фагов составила от 10-5 до 10-10 по методу Аппельмана и от 1,8×107±0,4×107 до 4×1012±1,8×1012 по методу Грациа, все выделенные бактериофаги проявляли свою литическую активность только в отношении вида B.cereus, причем 2 из них FBc-7 и FBc-28 обладали максимальным спектром, лизируя 12,4 % тестируемых штаммов бацилл. Введение. Бактерии Bacillus cereus относятся к грамположительным факультативно-анаэробным, подвижным, спорообразующим, палочковидным бактериям, широко распространенным в окружающей среде и имеющим фенотипические и генетические признаки, сходные с рядом других видов бактерий рода Bacillus: �� B�� . mycoides�� , B�� . pseudo�� mycoides, B. thuringiensis и B. anthracis (Rasko et al., 2005; Han et al., 2006; Auger et al., 2009). Бактерии B. cereus способны при определенных условиях вызывать у человека широкий спектр заболеваний, включающих пищевые токсикоинфекции, системные и местные гнойные инфекции, а у животных – мастит крупного рогатого скота (Musa et al., 1999; Brett et al., 2005; Darbar , Harris and Gosbell, 2005; Avashia et al., 2007; Abusin et al., 2008). Для лабораторной диагностики инфекции, вызванных бактериями B. сereus в настоящее время применяют классические методы бактериологической диагностики с использованием селективных питательных сред, позволяющие типировать микроорганизмы по биохимическим свойствам. За рубежом применяются дорогостоящие серологические (ИФА) и молекулярные (ПЦР) диагностические методы. Одним из альтернативных методов является фаго диагностика. В связи с этим разработка методов индикации и идентификации В. cereus на основе специфичных фагов, позволяющих проводить дифференциацию до вида, а так же внутри вида на биотипы и фаговары�� , является актуальной и перспективной. Начиная с 2006 года сначала в США, а потом и в Европе все более широкое распространение получает теория использования бактериофаг-опосредованного биоконтроля в сфере санитарно-эпидемиологических мероприятий, проводимых в сельском хозяйстве, пищевой промышленности, пунктах общественного питания, ЛПУ и организованных коллективах (Алешкин и др., 2012). W.J. Lee (2011) и J.H. Lee (2012) продемонстрировали возможность включения специфических бактериофагов, литически активных в отношении бактерий B. cereus, в процедуры по деконтаминации продуктов питания. В Российской Федерации на сегодняшний день отсутствуют данные о созданных фаговых биопрепаратов, в том числе диагностических, специфичных в отношении бактерий B. cereus. Разработка бактериофаговой тест-системы позволит не только ускорить процедуру по идентификации бактерий B. cereus в продуктах питания и клинических образцах, но и даст возможность дифференцировать бациллы внутри 179 данного вида на фаговары и фаготипы. Поэтому целью нашей работы было разработка системы фаговаров бактерий B. cereus для идентификации и мониторинга бактерий B. cereus в объектах санитарного надзора. Материалы и методы. Исследования по выделению и изучению биологических свойств бактериофагов бактерии B. cereus проводились в период с 2007 года по 2012 год на базе кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина». Объекты исследований. 105 штаммов бактерий B. cereus, из них 3 референсштамма Bacillus cereus №8035, №96, №2527 . Штаммы бактерий рода Bacillus: В. subtilis - 8 штаммов из них 2 референс-штамма №6633 и L2; В. mycoides - 8 штаммов из них 2 референс-штамма № 537 и H; В. thuringiensis - 3 штамма из них 1 референс-штамм В. thuringiensis var. kurstaki;вид B. mesentericus - 8 штаммов из них 1 референс-штамм № 66; B. megaterium - 8 штаммов из них 1 референс-штамм № 182; B. pseudoantracis - 3 штамма из них 1 референс-штамм. Штаммы бактериофагов – 57 изолята бактериофагов B. cereus, выделенные из проб почвы различного хозяйственного назначения Приволжского федерального округа, Южного федерального округа, Центрального федерального округа. Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов проводили методами, предложенными Д.М. Гольдфарбом (1961), Дж. Мейнеллом (1965), С. Лурия, Д. Дарнелом (1970), И.П. Ревенко (1978), В.Я. Ганюшкиным (1988), С.Н. Золотухиным (2007). Селекцию бактериофагов и повышение их литической активности проводили по методике, описанной С.Н. Золотухиным (2007). Результаты исследований и их обсуждение. Первый этап исследования был посвящен выделению фагов бактерий B. cereus. В первой серии опытов мы исследовали штаммы B. cereus на содержание профага без индуцирующего фактора по методике, предложенной С. Лурия и Д. Дарнелла (1970) в модификации А.Г. Шестакова (2010). Во второй серии экспериментов на культуры B. сereus оказывалось воздействие индуцирующим фактором – ультрафиолетовыми лучами, по методике Дж. Мейнелла (1965). В результате проведенного комплекса исследований лизогенных штаммов �� B�� . �� cereus среди тестируемых культур не обнаружено. В третьей серии экспериментов проводили выделение бактериофагов из объектов окружающей среды по методике Д.М. Гольдфарба (1961) в оригинальной модификации И.П. Ревенко (1978). По литературным данным, наиболее эффективно в качестве источника выделения бактерий рода Bacillus использовать пробы почвы, так как они являются почвенными сапрофитами. В результате исследования 388 проб почвы различного хозяйственного назначения Приволжского федерального округа, Южного федерального округа, Центрального федерального округа, нам удалось выделить 57 изолятов бактериофагов бактерий B. cereus. Четвертым этапом наших исследований было изучение основных биологических свойств (морфологии негативных колоний; специфичности действия; литической активности и ее изменения при хранении; спектра литического действия) выделенных бактериофагов B. cereus. 180 Экспериментальным путем было установлено, что негативные колонии, образуемые 57 изолятами фагов B. cereus, имели различный тип колоний. Согласно данным Ревенко И.П. (1978) морфология негативных колоний – это важный признак дифференциации фагов на умеренные и вирулентные. В нашем случае было выявлено 4 типа негативных колоний различающихся по размеру, форме и прозрачности. Литическая активность выделенных фагов составила от 10-5 до 10-10 по методу Аппельмана и от 1,8×107 ± 0,4×107до 4×1012±1,8×1012 по методу Грациа. Определение спектра литической активности проводили методом нанесения фага на газон бактериальной культуры (Адамс М, 1961; Ганюшкин В.Я., 1988). Установлено, что спектр литической активности фаготипов бактериофагов B.cereus находился в интервале от 0,9 до 12,4 % от всего количества изучаемых бактериальных штаммов. Причем, наиболее широким спектром литического действия по отношению к изучаемым культурам обладали штаммы бактериофагов: FBc-1 – 9,5 %, FBc-4 – 11,4 % , FBc -7 – 12,4 %, FBc-28 – 12,4 %. Кроме того имелись «нетипирующиеся» штаммы бактерий B. cereus №3, №10, №24, №34, №40, №44, №58, №63, №73, №86, №96, которые не лизировались ни одним из имеющихся бактериофагов. Изучение специфичности 57 выделенных изолятов бактериофагов B. cereus проводили на культурах гомологичного рода: B. mesentericus, B. subtilis, B. mycoides, B��. �� megaterium�� , �� B��. �� mesentericus�� B�� . �� thuringiensis�� , �� B�� . �� pseudoanthracis�� . Самой важной характеристикой выделенных фагов была специфичность по отношению к штаммам B. cereus и отсутствие способности лизировать культуры других видов Bacillus, которые по биохимическим свойствам сходны с исследуемыми культурами. В результате исследований установлено, что бактериофаги обладают выраженной специфичностью только по отношению к бактериям вида B. cereus. В результате проведенных исследований, была выявлена особенность селекционированных бактериофагов, связанная с избирательным лизисом тестируемых штаммов бацилл, позволившая объединить бактериофаги и бактерии во взаимосвязанные группы. Перекрест фагов не допускался, каждый фаг имел лизис строго внутри своей группы фаговаров. Фаг, обладающий более широким спектром литической активности исключался и далее не рассматривался. В результате такого отбора были исключены фаги FBc – 2; 5; 13; 29; 39; 53;54 серии УГСХА. Таким образом, отобранные фаги были разделены на 18 групп (табл. 1). В последующем на их основе предложили схему фаготипирования, позволяющую идентифицировать бактерии B. cereus на 18 фаговаров (табл. 2). Алгоритм фаготипирования может быть представлен следующим образом: чашку Петри делят бактериологическим карандашом на сектора, предварительно нумеруя группы бактериофага наносимого на газон. На поверхность МПА засеянного газоном исследуемой культуры пипеткой в намеченный сектор наносят каплю фага, дав ей впитаться в поверхность газона. В каждой чашке обязательно оставляют сектор, на который аналогичным образом наносится МПБ (для контроля). Результат учитывают по лизису исследуемой культуры. Лизируемые культуры сравниваются со схемой фаготипирования (табл. 3) и тестируемому штамму бацилл присваивается название группы фага, которой он лизируется (например, фаговар 1-Тип Вс - № штамма). Заключение. Выделено 57 фагов B. cereus. Изучены основные биологические свойства 57 изолятов фагов B. �� cereus: определено 4 типа негативных колоний (3 виру- 181 лентных и 1 умеренный), литическая активность выделенных фагов составила от 10-5 до 10-10 по методу Аппельмана и от 1,8×107±0,4×107 до 4×1012±1,8×1012 по методу Грациа, все выделенные бактериофаги проявляли свою литическую активность только в отношении вида B.cereus, причем 2 из них FBc-7 и FBc-28 обладали максимальным спектром, лизируя 12,4 % тестируемых штаммов бацилл. Разработана схема фаготипирования штаммов В. сereus, делящая все изученные штаммы данного микроорганизма на 18 фаговаров. Применение схемы фаговаров бактерий B. cereus позволит осуществлять более детальную дифференциацию отдельных биотипов и фаговаров внутри вида, а так же проводить мониторинг данного микроорганизма. Таблица 1. Характеристика фаговаров B. cereus Фаговары B. cereus Н а з в а н и е Морфология Название лизируемых штаммов бактериофагов негативных B.cereus УГСХА колоний 2 тип FBc – 28 УГСХА 4 тип FBc – 3 УГСХА 2 тип 5, 6, 16, 25, 29, 30, 31, 33 FBc – 6 УГСХА FBc – 56 УГСХА 1 тип 4 тип FBc – 1 УГСХА 2 тип FBc – 17 УГСХА FBc – 50 УГСХА FBc – 43 УГСХА FBc – 44 УГСХА 4 тип 3 тип 4 тип 2 тип 16, 31, 33 13, 25, 26, 29, 30 №2527, 53, 64, 82, 85, 87, 90, 95, 98, 100 38, 65, 82, 101 22, 76, 83 56 102 FBc – 30 УГСХА 2 тип 9, 27, 55, 77 FBc – 47 УГСХА FBc – 33 УГСХА FBc – 14 УГСХА FBc – 38 УГСХА 4 тип 2 тип 2 тип 4 тип 9, 72 19, 28, 32, 36, 57, 68, 71, 80 7, 15, 39, 41, 74, 89 14, 52 FBc – 21 УГСХА 1 тип 75 FBc – 55 УГСХА 3 тип 75 FBc – 9 УГСХА 1 тип 23 FBc – 15 УГСХА 3 тип 23 FBc – 18 УГСХА 2 тип 92 FBc – 49 УГСХА 1 тип 92 1-Фаг Вс 2-Фаг Вс 3- Фаг Вс 4- Фаг Вс 5- Фаг Вс 6- Фаг Вс 7- Фаг Вс 8- Фаг Вс 9- Фаг Вс 10-Фаг Вс 11- Фаг Вс 182 №8035, №96, 4, 8, 18, 12, 17, 18, 20, 37, 42, 49, 50, 54 1, 2, 4, 8, 18, 12, 17, 18, 20, 21, 37, 42, 49, 50 FBc – 7 УГСХА 12- Фаг Вс 13- Фаг Вс 14- Фаг Вс 15- Фаг Вс 16- Фаг Вс 17- Фаг Вс 18- Фаг Вс FBc – 41 УГСХА 1 тип 46, 51 FBc – 46 УГСХА 2 тип 51, 94 FBc – 23 УГСХА 2 тип 84 FBc – 37 УГСХА 1 тип 84 FBc – 19 УГСХА 2 тип 45, 59 FBc – 52 УГСХА FBc – 27 УГСХА FBc – 20 УГСХА FBc – 34 УГСХА FBc – 51 УГСХА 4 тип 1 тип 2 тип 2 тип 2 тип 45, 62 60, 70, 88, 91, 97 66, 78, 79 43, 81 35, 47, 48, 61, 67, 93, 99 Таблица 2. Схема фаготипирования 2-Тип Вс 3-Тип Вс 4-Тип Вс 5-Тип Вс 6-Тип Вс 7-Тип Вс 8-Тип Вс 9-Тип Вс 10-Тип Вс 11-Тип Вс 12-Тип Вс 13-Тип Вс 14-Тип Вс 15-Тип Вс 16-Тип Вс 17-Тип Вс 18-Тип Вс Фаговары (фаготипы) бактерии 1-Тип Вс 2-Тип Вс 3-Тип Вс 4-Тип Вс 5-Тип Вс 6-Тип Вс 7-Тип Вс 8-Тип Вс 9-Тип Вс 10-Тип Вс 11-Тип Вс 12-Тип Вс 13-Тип Вс 14-Тип Вс 15-Тип Вс 16-Тип Вс 17-Тип Вс 1-Тип Вс Типы фагов + - + - + - + - + - + - + - + - + - + - + - + - + - + - + - + - + - 18-Тип Вс Примечание – «+» - лизис; «-» - отсутствие лизиса. - - - - - + Библиографический список 1.Алешкин, А.В. Бактериофаги как пробиотики и средства деконтаминации пищевых продуктов / А.В. Алешкин, Н.В. Воложанцев, Э.А. Светоч, В.А. Алешкин, С.С. Афанасьев, А.И. Борзилов, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, А.В. Караулов, Х.М. Галимзянов, 183 Ю.Ф. Космачев, И.А. Киселева, М.С. Афанасьев, Е.О. Рубальский, М.О. Рубальский // Астраханский мед. журнал. – 2012. – №3 (7), – С.31-39 2.Ганюшкин, В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии / В.Я. Ганюшкин. – Ульяновск: СХИ, 1988. – С.42–45. 3.Гольдфарб, Д.М. Бактериофагия // Д.М. Гольдфарб. – М.: Медгиз,1961. − С. 169– 187. 4.Золотухин, С.Н. Создание и разработка схем применения диагностических биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий: автореф. дис. …докт. биол. наук: 03.00.07, 03.00.23 / Золотухин Сергей Николаевич. − Ульяновск, 2007. − С.32. 5.Лурия, С. Общая вирусология / С. Лурия, Д. Дарнелл. − М., Мир,1970. С.36–47. 6.Ревенко, И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике / И.П. Ревенко. – Киев: Урожай, 1978. − С. 41–88. 7.Шестаков, А.Г. Усовершенствование методов выделения, идентификации и индикации бактерий Pseudomonas aeruginosa: дис. . . канд. биол. наук: 03.00.07, 03.00.23 / Шестаков Андрей Геннаьевич. – Саратов, 2010. – 22 с. 8.Abusin, S. 2008. Bacillus cereus endocarditis in a permanent pacemaker / S. Abusin, A. Bhimaraj and S. Khadra // Cases Journal. – 2008 . – №1 . – Р. 95 -98 9.�� Auger, S. Biofilm formation and cell surface properties among pathogenic and nonpathogenic strains of the Bacillus cereus group / S. Auger, N. Ramarao, C. Faille, A. Fouet, S. Aymerich, M. Gohar // Appl. Environ. Microbiol. – 2009. –№ 10. – Р. 1128. 10. Avashia, S. B. Fatal pneumonia among metalworkers due to inhalation exposure to Bacillus cereus containing Bacillus anthracis toxin genes / S. B. Avashia, W. S. Wiggens, C. Lindley, A. H. Hoffmaster, R. Drumgoole, T. Nekomoto, P. J. Jackson, K. K. Hill, K. Williams, L. Lehman, M. C. Libal, P. P. Wilkins, J. Alexander, A. Tvaryanas, and T. // Betz.Clin. Infect. – 2007. – № 44. – Р.414–416. 11. Brett, M. M. Soft tissue infections by spore-forming bacteria in injecting drug users in the United Kingdom / M. M. Brett, J. Hood, J. S. Brazier, B. I. Duerden, J. M. Hahné // Epidemiol. Infect. – 2005. – № 133.–Р.575–582. 12. Darbar, �� A. Necrotizing infection due to Bacillus cereus mimicking gas gangrene following penetrating trauma / A. Darbar, I. A. Harris, I. B. Gosbell // J. Orthop. Trauma. – 2005. – №19. –Р. 353–355. 13. �� Han, C. S. Pathogenomic sequence Analysis of Bacillus cereus and Bacillus thuringiensis Isolates Closely Related to Bacillus anthracis / C. S. Han, G. Xie, J. F. Challacombe, M. R. Altherr, S. S. Bhotika, N. Brown, D. Bruce, C. S. Campbell, M. L. Campbell, J. Chen, O. Chertkov, C. Cleland // Journal of Bacteriology. – 2006. –V. 188(900). – Р. 3382–3390. 14. Musa, �� M.O. Fulminant septicaemic syndrome of Bacillus cereus: three case reports/ M. O. Musa, A.l. Douri, M. Khan, S. Shafi, T. Al Humaidh, A. Al Rasheed // J. Infect. – 1999. –№ 39. – Р.154–156. 15. Rasko, DA. Genomics of the Bacillus cereus group of organisms / D.A. Rasko, M.R. Altherr, C.S. Han, J. Ravel // FEMS Microbiol Rev. – 2005. – № 29. – Р.303–329. DEVELOPMENT OF BACILLUS CEREUS FAGOVAROV 184 Kaldyrkaev A.I., Feoktistova N.A., Vasiliev D.A., Alyoshkin A.V., Merchina S.V. Keywords: Bacillus cereus, monitoring, bacteriophages fagovarov system, identification, biological properties, phage typing. The work is devoted to development of fagovarov B. cereus. The scheme of phage-typing strains of B. sereus dividing all the studied strains of the pathogen by 18 fagovarov. Allocated 57 phages B. cereus. Studied the basic biological properties of 57 isolates of phage B. cereus: defined four types of negative colonies isolated phage lytic activity ranged from 10-5 to 10-10 by the method of Appelman and 1,8 × 107 ± 0,4 × 4 × 107 to 1012 ± 1,8 × 1012 method Grazia all isolated phages showed their lytic activity only against species B.cereus, wherein two of them FBc-FBc-7, and 28 had maximum spectrum lysing 12.4% of tested strains of bacilli. УДК 602.3:579.8 Научные исследования проводятся при финансовой поддержке государства в лице Министерства образования и науки Российской Федерации в рамках реализации федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (соглашение от №8267 от 10.08.2012). ПАРАМЕТРЫ ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ НАРАСТАНИЯ ТИТРА ФАГА ДЛЯ ИНДИКАЦИИ БАКТЕРИЙ РОДА PROTEUS В ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ Н.А. Феоктистова, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] М.А. Юдина, ассистент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» 8(8422) 55-95-47, [email protected] С.Н. Золотухин, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: индикация, бактерий рода �� Proteus�� , объекты ветеринарно-са- 185 нитарного надзора В статье описаны результаты исследований по подбору параметров постановки реакции нарастания титра фага для индикации бактерий рода Proteus в объектах окружающей среды. С помощью РНФ выявляли бактерии Proteus в фекалиях и мясе в концентрации 103 м.к./г. На обнаружение бактерий рода Proteus бактериологическим методом требовалась их более высокая концентрация, исчисляемая 104 м.к./г. и выше. Время же исследования увеличивалось с 22 часов до 96 часов. Введение Согласно литературным данным, заражение людей бактериями рода происходит при употреблении воды и пищевых продуктов, в том числе мясных �� Proteus. Причем, значение и роль микроорганизмов в развитии заболеваний �� не дооценивается�� , поэтому разработка методов идентификации протеев в мясе и в других продуктах питания имеет актуальное значение [1]. Возможность использования фагов для обнаружения патогенных бактерий без выделения их в чистом виде независимо друг от друга использовал Ф.И. Сергиенко, он пытался применить этот метод путем посева материала в определенные разведения фага с последующим учетом нарастания его титра для обнаружения дизентерийных и брюшнотифозных бактерий) [3]. H. Katznelson, M. Sutton использовали фаг для выявления фитопатогенных бактерий в семенах бобов�� . Но перечисленные выше работы носили чисто эмпирический характер, так как в них отсутствовало надлежащее теоретическое обоснование принципа [6]. В.Д. Тимаков и Д.М. Гольдфарб, основываясь на специфичности действия бактериофага и сравнительной простоте количественного его учета, теоретически обосновали и экспериментально разработали принципиально новый метод для обнаружения дизентерийных и брюшнотифозных бактерий, который назвали реакцией нарастания титра фага (РНФ), отличавшийся от существующих методов фагодиагностики, так как позволяет выявлять возбудителя непосредственно в исследуемом материале без выделения чистой культуры [4]. Цель – разработать схему ускоренной индикации бактерий рода Proteus с помощью специфических бактериофагов П-6 УГСХА и П-61 УГСХА. Достижение цели достигалось решением следующих задач: - определить концентрации протейных бактериофагов, имеющих диагностическое значение; - разработать режимы постановки РНФ; - провели исследования по выяснению возможности использования РНФ для обнаружения бактерий рода Proteus в патологическом материале, объектах внешней среды и пищевом сырье. Материал и методы исследования Реакцию нарастания титра фага ставили по методике В.Д. Тимакова, Д.М. Гольдфарба [5], В.Я. Ганюшкина [2]. В работе были использованы 2 штамма из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Ульяновской ГСХА: P�� . �� vulgaris�� 3, P. vulgaris 261. �� Бактериофаг П-�� 61 УГСХА. Бактериофаг выделен из сточных вод с. Новая Беденьга Ульяновской области. 186 Индикаторная культура P. vulgaris 216. Титр фага 1,8х109 фаговых корпускул в 1 миллилитре, титр по Аппельману 10-8. Размер негативных колоний 6,0 - 8,0 мм. Бактериофаг П-6 УГСХА. Бактериофаг выделен из сточных вод п. Октябрьский Ульяновской области. Индикаторная культура P. vulgaris 3. Титр фага 2,0х109 фаговых корпускул в 1 миллилитре, титр по Аппельману 10-8. Размер негативных колоний 2,0-3,0 мм. В качестве объектов ветеринарно-санитарного надзора использовали интактные�� : фекалии животных и комбикорм, контаминированное бактериями рода Proteus мясо. В исследованиях использовали мясопептонный бульон, мясо-пептонный агар, 0,04% спиртовый раствор генцианвиолета. Результаты исследований и их обсуждение В первую очередь для постановки РНФ определяли концентрации протейных бактериофагов, имеющих диагностическое значение. По данным В.Д. Тимакова и Д.М. Гольдфарба (1962) известно, что при обнаружении бактерий в РНФ считается отрицательным, если увеличение количества фага в опытной пробе по сравнению с контрольной составляет до 3 раз. Увеличение количества фага от 3 до 5 учитывается как слабо положительная�� реакция, от 5 до 10 раз – положительная�� [5]. Для определения количества фага, имеющего диагностическое значение при обнаружении бактерий рода Proteus, нами проведены эксперименты на МПБ контаминированном культурами P. vulgaris 3 и P. vulgaris 261 в концентрации от 101 до 105 м.к./мл. Выбранный критерий гарантировал достоверность результатов, поскольку он позволял исключить технические погрешности при титровании, при которых возможно выявление невысокой степени увеличения количества фага. Достоверность РНФ подтверждали выделением бактерий рода Proteus бактериологическим методом исследования. Определив количество фага, имеющее диагностическое значение при обнаружении бактерий рода Proteus в исследуемом тест-объекте, мы приступили к разработке режимов постановки РНФ. Для решения указанной задачи необходимо было провести эксперименты на тест-объекте по выявлению наиболее эффективного временного показателя взаимодействия фага и индикаторной культуры при сохранении остальных параметров (температурный режим, концентрация бактериальной культуры и фаговых корпускул в 1 мл) постановки РНФ. Оптимальное время экспозиции выбирали из шести следующих параметров: в предварительном подращивании исследуемого материала в течение 5 часов при температуре 37 0С, после добавления фагов смесь выдерживали в течение 5 часов при температуре 37 0С; в предварительном подращивании исследуемого материала в течение 16 часов при температуре 37 0С, после добавления фагов смесь выдерживали в течение 5 часов при температуре 37 0С; в предварительном подращивании исследуемого материала в течение 24 часов при температуре 37 0С, после добавления фагов смесь выдерживали в течение 5 часов при температуре 37 0 С; в увеличении времени контакта исследуемого материала с фагом до 10 часов при температуре 37 0С; в увеличении времени контакта исследуемого материала с фагом до 16 часов при температуре 37 0С; в увеличении времени контакта исследуемого материала с фагом до 24 часов при температуре 37 0С. В результате этих исследований было установлено, что при подращивании исследуемого материала в течение 24 часов чувствительность не повышалась по сравнению с чувствительностью РНФ при подращивании материала в течение 16 часов и позволяла обнаруживать протеи 102 м.к./мл. При подращивании исследуемого 187 материала в течение 5 часов при температуре 37 0С, нам удалось обнаруживать данные бактерии в концентрации 102 м.к./мл. При этом режиме подращивания чувствительность РНФ не снижается, но сокращается время исследования до 18 часов. Поэтому, это время подращивания мы считаем оптимальным. Экспериментальным путем установлено, что при увеличении контакта исследуемого субстрата с фагом в течение 10 часов при температуре 37 0С заметное нарастание количества фагов бактерии рода Proteus не наблюдается при концентрации гомологичных бактерий не менее 102 м.к./мл. Удлинение сроков инкубации (16-24 часа) также не дают возможности получить увеличение количества фага. Исходя из этого, можно предположить, что значение инкубации в течение 5 часов при температуре 37 0С сводится к тому, что за это время бактерии, находящиеся в исследуемом субстрате в очень малых количествах, размножаются. В результате этого между добавленным индикаторным фагом и бактериями устанавливаются такие количественные соотношения, при которых вероятность встреч между ними повышается, и бактерии инфицируются фагом. Отсюда вытекает, что исход реакции зависит не только от свойств индикаторного фага, но и от биологических особенностей данного возбудителя, обнаруживаемого с помощью РНФ. Таким образом, из числа испытанных режимов наиболее быстрым и чувствительным является подращивание исследуемого материала с фагом в течение 5 часов при температуре 37 0С. Учет результатов в этом случае проводят через 16 часов. Бактерии рода Proteus удается обнаружить в количестве 102 м.к./г. При сопоставлении результатов бактериологического исследования и РНФ позволили подтвердить специфичность РНФ и высокую чувствительность, которые согласуются с работами многих авторов. Бактериологическое исследование проводили в соответствии с правилами, указанными в «Методических указаниях по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями», утвержденными Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ 11.10.1999 г. Сведений о применении РНФ для обнаружения бактерий рода Proteus в объектах внешней среды мы не встречали. Поэтому необходимо было изучить возможность использования РНФ для обнаружения данных микроорганизмов в объектах ветеринарного ндзора�� . Для этого мы провели исследования по выяснению возможности использования РНФ для обнаружения бактерий рода Proteus в патологическом материале, объектах внешней среды и пищевом сырье. Прежде всего, мы провели опыты с фекалиями, содержащую постороннюю микрофлору, контаминировали различным количеством бактерий рода Proteus - от 101 до 105 м.к./г. Пробы объектов санитарного надзора в количестве 10 г вносили в колбы и контаминировали P. vulgaris 3 и P. vulgaris 261 в концентрации 105; 104; 103; 102; 101 м.к./ мл, заливали МПБ из расчета 10 мл бульона на 1 г объекта исследования. Брали колбу с пробой воды, не контаминированной бактериями рода Proteus. Содержимое всех колб встряхивали в шуттель-аппарате в течение 15 минут, затем в течение 10 минут отстаивали. Готовили для опытной и контрольной проб по 6 широких пробирок (диаметр 20 мм) и номеровали их (1, 2, 3 и соответственно 1к, 2к и 3к – для каждого разведения культуры). В пробирки № 1, 2 и 1к, 2к вносили по 9 мл исследуемого материала, в пробирки № 3 и 3к - 9 мл МПБ. Затем в пробирки № 1, 3 и 1к и 3к добавляли по 1 мл индикаторного фага в рабочем разведении 104 (для обоих штаммов фагов). Экспериментальным путем 188 установлено, что рабочее разведение фага должно содержать 1х104 корпускул в 1мл. При титре фага, равном 108 частиц в 1мл, фаг разводили 1:10000. В пробирки № 2 и 2к вносили по 1 мл стерильного МПБ (контроль на присутствие свободного фага). Пробирки № 1 и 1к, в которых находились взвеси воды и индикаторный фаг, являлись опытными. Пробирки № 2 и 2к - без фага - были контрольными, то есть служили для выявления в пробах воды свободного фага. Пробирки № 3 и 3к – контроль на титр индикаторного фага. После культивирования в термостате при температуре 37 0С в течение 5 часов содержимое каждой пробирки разводили МПБ (рН 7,4-7,6) так, чтобы при высеве 1 мл содержимого из пробирки № 3 и 3к (контроль на титр фага) на чашках образовалось несколько десятков негативных колоний (зон лизиса) фага. В пробирке № 3 и 3к индикаторный фаг находился в концентрации нескольких тысяч корпускул в 1 мл, и для того, чтобы получить в конечном разведении несколько десятков корпускул в 1 мл, содержимое пробирки № 3 разводили в 20 раз, т.е. 0,25 мл исследуемой смеси вносили в 4,5 мл МПБ. Содержимое опытных пробирок № 1, 1к и № 2, 2к разводили аналогично. Ввиду того, что селекционированные нами фаги являются термостабильными, то инактивацию микрофлоры разведенных смесей пробирок № 1 и 1к, № 2 и 2к, № 3 и 3к проводили путем прогревания в водяной бане при температуре 60 0С в течение 30 минут. После этого содержимое пробирок исследовали на определение количества корпускул бактериофага методом агаровых слоев по Грациа. Заключение На основании полученных данных при исследовании фекалий, РНФ оказалась эффективнее бактериологического метода исследования. С помощью РНФ выявляли бактерии Proteus в фекалиях в концентрации 103 м.к./г. На обнаружение бактерий рода Proteus в фекалиях бактериологическим методом требовалась более высокая концентрация протеев, исчисляемая 104 м.к./г. и выше. Время же исследования увеличивалось до 96 часов. При исследовании мяса, содержащего постороннюю микрофлору в количестве от 101 до 105 м.к./мл, нами было обнаружено явное преимущество РНФ перед бактериологическим методом исследования. С помощью РНФ за 22 часа исследования можно обнаружить протеев в мясе в количестве 103 м.к./г. Библиографический список 1.Бакулов, И.А. Токсикоинфекции и токсикозы. Вопросы профилактики / И.А. Бакулов, А.М. Смирнов, Д.А. Васильев. – Ульяновск: УГСХА, 2003. – С. 28 2.Ганюшкин, В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии / В.Я. Ганюшкин. – Ульяновск, УГСХА, 1988. – С. 45. 3.Сергиенко, Ф.Е. Новый метод бактерiологiчно дiагностики за допомогою бактерiофага / Ф.Е. Сергиенко // Мiкробiол. журн. АН УССР. – 1936. – №1. – С. 85. 4.Тимаков, В.Д. Об условиях взаимодействия фага и бактериальной клетки / В.Д. Тимаков, Д.М. Гольдфарб // Вестник АМН СССР. – 1958. – № 2. – С. 37. 5.Тимаков, В.Д. Реакция нарастания титра фага (РНФ) / В.Д. Тимаков, Д.М. Гольдфарб. – М., 1962. – С. 68,71. 6.Katzheson, H. Rapid phage plague count method for the detection of bacteria as applied to the demonsration of internalug borne bacterial infections of seed / Н. Katzheson, М. Sutton // J. Bact. – 1951. – №1. – Р. 689. 189 PARAMETERS OF STATEMENT OF REACTION PHAGE TITER RISE TO DISPLAY BACTERIA OF THE GENUS PROTEUS IN ENVIRONMENTAL OBJECTS N.A. Feoktistova, М.А. Yudinа, D.A. Vasiliev, S.N. Zolotukhin Keywords: Display, bacteria of the genus Proteus, objects veterinary sanitary inspection The paper describes the results of studies on the selection of parameters setting reaction phage titer rise to indicate the kind of Proteus bacteria in the environment. With RNF Proteus bacteria were detected in the feces and meat at a concentration of 103 microbial cells / g The detection of bacteria of the genus Proteus bacteriological method required a higher concentration of them, estimated 104 microbial cells / g above. While the same study increased from 22 hours to 96 hours. УДК 602.3:579.8 Научные исследования проводятся при финансовой поддержке государства в лице Министерства образования и науки Российской Федерации в рамках реализации федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (соглашение от №8267 от 10.08.2012). МОНИТОНИНГ ПШЕНИЧНОЙ МУКИ НА НАЛИЧИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ КАРТОФЕЛЬНОЙ БОЛЕЗНИ ХЛЕБА М.А. Юдина, ассистент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Н.А. Феоктистова, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-47, [email protected] Д.А. Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» 8(8422) 55-95-47, [email protected] Ключевые слова: идентификация, бактериофаги, Bacillus subtilis, Bacillus mesentericus, картофельная болезнь хлеба, пшеничная мука. В работе описаны результаты мониторинга проб пшеничной муки на наличие возбудителей картофельной болезни хлеба с использованием специфичных бактериофагов Bacillus subtilis, Bacillus mesentericus методом «стекающая капля». Введение. В настоящее время индикация и идентификация бактерий B. subtilis и 190 B. mesentericus на предприятиях, занимающихся производством хлеба и хлебобулочных изделий, проводятся бактериологическими методами. Задача изыскания простого и доступного метода индикации и идентификации названных микроорганизмов – актуальная тема для исследований, результаты которых позволят повысить эффективность применения микробиологического контороля и контрольных мер по системе ХАССП на перерабатывающих предприятиях, а также сделать данный этап исследований значительно дешевле [2, 3, 5, 6]. Применение тест-системы для индикация и идентификация бактерий B. subtilis и B. mesentericus на основе бактериофагов позволит контролировать чистоту зерна и муки при приемке на пекарнях и хлебокомбинатах [7]. Бактериофаг - вирус способный инфицировать бактериальную клетку, репродуцировать в ней, образуя многочисленное потомство, и вызывать ее лизис, сопровождающийся выходом фаговых части в среду обитания бактерий [7]. Материалы и методы исследований: 2 штамма бактерий Bacillus mesentericus (Bacillus mesentericus 32 и Bacillus mesentericus 10) и 2 штамма бактерии Bacillus subtilis (Bacillus subtilis 12 и Bacillus subtilis 26), полученных из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Ульяновской ГСХА. Данные штаммы обладали типичными для данных видов биологическими свойствами. Бактериофаг Bm-10 и Bm-11 серии УГСХА (Bacillus mesentericus), бактериофаг Bs-2 и Bs-13 серии УГСХА (Bacillus subtilis). Мука пшеничная высшего и первого сортов разных товаропроизводителей: ЗАО «Алейскзернопродукт им. С.Н. Старовойтова», ОАО «Вологодский комбинат хлебопродуктов», ОАО «ВКХП», ОАО «Мельник», ОАО «Мукомольный комбинат «Воронежский»», ОАО «Истра-хлебопродукт», ОАО «Бобруйский комбинат хлебопродуктов», ООО «Белый Город», ООО «Росэкспорт», ОАО «Рязаньзернопродукт», ООО «Сибирский Мельник», ОАО «Алтай-Батюшка», ОАО «Симбирск-мука». Подготовку и посев проб муки пшеничной высшего и первого сортов 12-ти производителей, подлежащих исследованию, проводили в соответствии ГОСТ 26669-85 «Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов» [1]. Методы окраски по Граму, Ольгу, Ауески [4]. Результаты и их обсуждение. Для этого пробы муки весом 10 г вносили в стерильные колбы объемом 100 мл, заливали стерильным МПБ из расчета 10 мл бульона на 1 г исследуемой пробы, последовательно делали разведения продукта в соотношении 1:100, 1:1000 и 1:10000. Полученные смеси встряхивали в шуттель-аппарате в течение 15 минут, прогревали при температуре 75 0С в течение 45 минут для подавления роста энтеробактерий, затем ставили в термостат на 24 часа при 37 0С. Затем надосадочную жидкость исследовали в соответствии со схемой фагоидентификации, представленной ниже. На поверхность МПА в чашках Петри пастеровской пипеткой наносили 3-4 капли бульонной 18-часовой культуры выделенных микроорганизмов. Нанесённую культуру равномерно распределяли по поверхности среды стерильным шпателем. Чашки ставили в термостат для подсушивания на 15-20 минут. Чашку делили бактериологическим карандашом на три сектора. На поверхность засеянной среды, в зоне первого сектора, пастеровской пипеткой легким прикосновением капли наносили фаг Bm-10 (Bs-2 УГСХА), 191 на второй сектор аналогично наносили фаг Bm-11 УГСХА (Bs-13 УГСХА), на третий сектор в качестве контроля наносили стерильный МПБ. Наклоняли чашку, чтобы капли стекли в виде дорожки. Чашки оставляли для подсушивания в боксе на 15-20 минут и помещали в термостат на 18 часов при 37 0С. Результат исследований считали положительным, если на месте нанесения фагов на газоне сплошного роста культуры образовывалась прозрачная зона лизиса с вторичным ростом фагорезистентных микроорганизмов или без него, а также рост негативных колоний фага. Экспериментальным путем было установлено, что 6 проб было контаминировано бактериями Bacillus mesentericus и Bacillus subtilis. Из литературных источников известно, что качество муки можно считать хорошим, если в ней содержание спорообразующих аэробных бактерий (САБ) – возбудителей картофельной болезни хлеба не более 200 БОЕ/г (БОЕ – бляшкообразующих единиц). В результате проведенных исследований (табл. 1, рис. 1) было установлено, что 6 проб муки контаминировано бактериями Bacillus mesentericus и Bacillus subtilis�� в различных концентрациях. Известно также, что мука, содержащая до 10 БОЕ/г САБ, считается слабо, до 100 БОЕ/г умеренно, более 1000 БОЕ/г сильно зараженной [4]. В наших исследованиях только 1 проба муки была сильно зараженной (ОАО «Мельник»). Таблица 1. Результаты исследований муки пшеничной высшего и первого сорта на наличие возбудителей картофельной болезни хлеба (КБХ) методом фагоидентификации Разведения первой пробы Разведения второй пробы Разведения третьей пробы 101 102 103 104 101 102 103 104 101 102 103 104 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + ОАО «ВКХП» + + + + + + + + + + + + ОАО «Мельник» + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Объекты ОАО «Алтай-Батюшка» ОАО «Симбирскмука» ЗАО «Алейскзерно продукт им. С.Н. Старовойтова» ОАО «Мукомольный комбинат «Воронежский»» ОАО «Истра-хлебопродукт» ОАО «Бобруйс кий комбинат хлебопродуктов» ООО «Белый Город» 192 ООО «Росэкспорт» ООО «Сибирский Мельник» ОАО «Рязаньзернопродукт» + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Рис. 1. - Наличие возбудителей картофельной болезни хлеба в исследованных пробах по наличию зон лизиса на газоне культур Одна проба муки была слабо зараженной (ЗАО «Алейскзернопродукт им. С.Н. Старовойтова�� ) и четыре пробы муки были умеренно зараженными (ОАО «Алтай-Батюшка», ООО «Росэкспорт», ОАО «Бобруйский комбинат хлебопродуктов», ОАО «Истрахлебопродукт»). Для подтверждения полученных результатов нами были проведены исследования по изучению биохимических свойств выделенных нами и идентифицированных как возбудители КБХ бактерий. Результаты исследований отражены в таблицах 2-3. Изучение морфологических свойств выделенных бактерий. Сравнили полученные результаты, с результатом окрашивания мазков, приготовленных из культур референс-штаммов�� Bacillus subtilis 6633 и Васillus mesentericus 66 (табл. 2).Все выделенные нами бактерии – это грамположительные тонкие палочки, располагаются одиночно, в виде нитей или цепочек. Они содержат овальные споры, не превышающие в поперечнике ширины микробной клетки. Капсулу не образуют. Окрашивали мазки по Граму, Ольгу, Ауески. 193 Таблица 2. Сравнительная таблица окраски выделенных бацилл и референсштаммов B. subtilis 6633 и Васillus mesentericus 66 Номер пробы Bасillus subtilis 6633 Васillus mesentericus 66 ОАО «Алтай-Батюшка» 1 тип колоний ОАО «Алтай-Батюшка» 2 тип колоний ЗАО «Алейскзернопродукт им. С.Н. Старовойтова» ОАО «Мельник» 1 тип колоний ОАО «Мельник» 2 тип колоний ОАО «Бобруйский комбинат хлебопродуктов» 1 тип колоний ОАО «Бобруйский комбинат хлебопродуктов» 2 тип колоний ООО «Росэкспорт» 1 тип колоний ООО «Росэкспорт» 2 тип колоний Методы окраски По Ольту По Ауески По Граму (капсула) (споры) + + + + + + + + + - + + - + + - + + - + + + - + + Для дальнейших исследований отбирались колонии, которые на плотной питательной среде образовывали колонии мучного цвета, мелко складчатые, на мясопептонном бульоне растущие в виде морщинистой пленки. Для дальнейших исследований по биохимическим свойствам [8] и дополнительным тестам (согласно отработанной нами схеме), были отобраны все выделенные штаммы бацилл. Изучение биохимических свойств выделенных бактерий (табл. 3), а также проведенные нами исследования на дополнительных тестах свидетельствует, что 9 из 10 исследованных проб пищевых продуктов оказались контаминированы бактериями вида Bасillus subtilis и Васillus mesentericus. В результате проведенных исследований нами были выделены методом фагоидентификации из шести проб муки пшеничной 12 культур спорообразующих бактерий, которые мы классифицировали по биологическим свойствам (на основании тестов, описанных в литературных источниках и результатах изучения биохимических свойств штаммов Bасillus subtilis 6633 и Васillus mesentericus 66, полученных из музея НИИЦМиБ ФГБОУ ВПО «УГСХА им. П.А. Столыпина»), и отнесли их к виду Васillus subtilis 6 культур и к виду Васillus mesentericus также 6 культур. 194 Таблица 3. Сравнительная таблица биохимических свойств референс- штаммов Bасillus. subtilis 6633, Васillus mesentericus 66 и выделенных бацилл Глюкоза Лактоза Сахароза Сорбит Адонит Манноза D-Арабиноза Триптофандезаминаза Фенилаланиндезаминаза Лизиндекарбоксилаза Аргининдегидролаза Уреаза Маннит желатин молоко Название теста Bасillus subtilis 6633 + - + + - + + - - - + + + + + Васillus mesentericus 66 + + + - - + - - - - + + + + + ОАО «АлтайБатюшка» 1 тип колоний + - + + - + + - - - + + + + + + - - - - + + + + + Культура ОАО «АлтайБатюшка» + + + 2 тип колоний Продолжение таблицы 3 Глюкоза Лактоза Сахароза Сорбит Адонит Манноза D-Арабиноза Триптофандезаминаза Фенилаланиндезаминаза Лизиндекарбоксилаза Аргининдегидролаза Уреаза Маннит желатин молоко Название теста ЗАО «Алейскзернопродукт + им. С.Н. Старовойтова» - + + - + + - - - + + + + + Культура 195 ОАО «Мельник» 1 тип + + + + + + + колоний ОАО «Бобруйский комбинат хлебопро+ + + + + + дуктов» 2 тип колоний ООО «Росэкспорт» 1 тип + + + + + + + колоний ООО «Росэкспорт» 2 тип + + + + + + колоний ОАО «Мельник» 2 тип + + + + + + колоний Примечания: “+” - ферментация сахара с образованием кислоты, газа и т.д. “-” - отрицательный результат. + + + + + + + + + + + + + + + Заключение. Установлено, 50 % проб муки, присутствующей на продовольственном рынке г. Ульяновска в той или иной степени контаминирована возбудителями картофельной болезни хлеба. Процентное соотношение выделенных из этих проб культур составляет 1: 1 Bасillus subtilis и Васillus mesentericus, соответственно. Споровые бактерии, попадая в организм человека, способны вызывать очень серьезные нарушения функционирования иммунной системы, желудочно-кишечного тракта, печени, органов дыхания, нервной системы. Поэтому, даже если споровые бактерии не вызывают органолептически выраженной картофельной болезни хлеба, все же их наличие в готовых изделиях нежелательно. Библиографический список 1.ГОСТ 26669-85 «Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов». 2.�� Афанасьева�� , О.А. Микробиологический контроль хлебопекарного производства / О.А. Афанасьева. - М.: Пищевая промышленность, 1976. - С. 113. 3.Витавская, А.В. Биологическая защита хлеба от картофельной болезни хлеба / А.В. Витавская, Г.Н. Дудикова, К.А. Тулемисова. – Алматы, 1998. – С. 432. 4.Егоров, В.В. Практикум по микробиологии / В.В. Егоров. – М.: Изд-во МГУ, 1986. - С. 35-42. 5.�� Крючков�� , А.Г. Основные принципы и методология агроэкологического районирования зерновых культур в степи Южного Урала / А.Г. Крючков. // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук – 2006. – С. 704. 6.Медведев, П.В�� . Оценка уровня зараженности зерна пшеницы различных природно-географических зон Оренбургской области возбудителями картофельной болезни 196 хлеба / П.В. Медведев, А.С. Степанов, В.А. Федотов // Вестник ОГУ, № 2 (108) – Оренбург, 2010. – С. 114-118. 7.Феоктистова, Н.А. Оценка качества пшеничной муки на наличие возбудителей картофельной болезни хлеба / Н.А. Феоктистова, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев // материалы IV Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения», 22-24 ноября 2012. – Ульяновск: УГСХА, 2012. - Т. 1. – С.320-327. 8.Bergey’s manual of determinative bacteriology. – 8th ed. – Baltimore: Williams and Wilkins Co. 1974. – Р.1258. MONITONING WHEAT FLOUR FOR THE PRESENCE OF POTATO DISEASE BREAD Yudinа M.A., Feoktistova N.A., Vasiliev D.A. Keywords: identification, bacteriophages, Bacillus subtilis, Bacillus mesentericus, potato disease of bread wheat flour. This paper describes the results of the monitoring of wheat flour samples for the presence of potato disease bread using specific bacteriophages Bacillus subtilis, Bacillus mesentericus by «dripping». УДК 619:615.32:614.31:637:636.4.053 БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В КРОВИ СВИНОМАТОК ПРИ ПАТОЛОГИЯХ ПЕЧЕНИ Н. К. Хлебус, магистр ветеринарии УО «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия», г. Горки, Республика Беларусь, тел. (+375 2233) 7-96-63, [email protected] С. В. Петровский, кандидат ветеринарных наук УО «Витебская ордена «Знак Почёта» государственная академия ветеринарной медицины», г. Витебск, Республика Беларусь, тел. (+375 0212) 37-26-60, [email protected] Т. А. Зданович, студентка УО «Витебская ордена «Знак Почёта» государственная академия ветеринарной медицины», г. Витебск, Республика Беларусь тел. (+375 0212) 37-26-60, [email protected], Ключевые слова: гепатит, гепатоз, свиноматки, биохимические синдромы цитолиза и печёночно-клеточной недостаточности 197 Введение. Широкое распространение у свиней, содержащихся в условиях промышленных комплексов, имеют различные заболевания с поражениями печени. В большинстве случаев данные заболевания протекают субклинически, не проявляются какими-либо специфическими симптомами (например, желтушностью слизистых оболочек) и диагностируются посмертно. Постановка прижизненного диагноза возможна только при проведении биохимической диагностики. Целью нашей работы стало изучение биохимических изменений в крови, возникающих у супоросных и подсосных свиноматок при патологических изменениях в печени. Материалы и методы исследований. Исследования проводились в условиях убойных пунктов свиноводческих комплексов. Перед убоем свиноматок проводился отбор крови для получения сыворотки, в которой определялись концентрации общего белка (ОБ), альбумина (А.), активности аспартат- и аланиламинотрансфераз (АсАт и АлАт), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), холинэстеразы (ХЭ). Были рассчитаны концентрация глобулинов (Г.) в крови, коэффициент де Ритиса (КДР) (соотношение активностей АсАт и АлАт), относительное содержание альбумина в крови (А./ОБ) и соотношение белковых фракций (А./Г.). После убоя свиноматок проводилось макроскопическое исследование печени, и отбирались пробы печёночной ткани для гистологического изучения. По итогам патологоанатомической диагностики были сгруппированы группы свиноматок без патоморфологических изменений в печени, с признаками острого (1-ая группа), хронического (2-ая группа) гепатита и гепатоза (3-я группа) печени. Данные результаты были сопоставлены с данными, полученными при биохимических исследованиях крови свиноматок [1,2,3]. Результаты исследований и их обсуждение. Проведенные патоморфологические исследования и сопоставление их с результатами биохимических исследований позволили выявить некоторые закономерные изменения со стороны активности ферментов и белкового состава крови (таблицы 1, 2). Таблица 1. Активность ферментов в крови свиноматок различных групп, ИЕ/л (Х±σ) Группы свиноматок 1-ая 2-ая 3-я 4-ая АсАт АлАт КДР ЛДГ ХЭ 64,25± 10,142 51,99± 3,955 49,47± 8,693 32,07± 4,043 154,56± 3,787 54,03± 4,574 46,34± 6,549 38,29± 5,909 0,42± 0,068 0,97± 0,096 1,09± 0,275 0,87± 0,244 1060,11± 196,422 737,27± 105,747 538,08± 99,324 458,89± 32,062 392,11± 26,321 366,94± 17,934 331,37± 19,044 505,30± 50,790 Как следует из данных таблицы, в крови свиноматок при развитии печёночной патологии повышалась активность ряда ферментов, что характеризует синдром цитолиза. Данный синдром возникает при увеличении проницаемости клеточных мембран или разрушении гепатоцитов. Наиболее выраженные изменения активности ферментов были установлены в крови свиноматок 1-ой группы. У данных животных значение коэффици- 198 ента де Ритиса было наименьшим, что указывает на преобладание активности фермента АлАт над активностью АсАт при остром гепатите. У остальных животных активность АсАт превышала уровень показателей свиноматок 4-ой группы у животных 2-ой на 62,1%, у животных 3-ей – на 54,2%, а для АлАт – на 41,1 и 21,0% соответственно. Данные изменения указывают на развитие цитолитических изменений в паренхиме печени, как при воспалительных, так и при дистрофических изменения в печени свиноматок. Активность фермента ХЭ в крови у свиноматок 1-3 групп по сравнению с животными 4-ой группы находилась на более низком уровне. Наиболее значительное снижение было установлено в крови свиноматок 3-ей группы (на 81,6%). Изменение данного показателя указывает на развитие у свиноматок 1-3 группы синдрома гепатодепрессии, характеризующего снижение синтетической функции печени. Таблица 2. Показатели, характеризующие белковый обмен в крови свиноматок различных групп (Х±σ) Группы свиноматок 1-ая 2-ая 3-я 4-ая ОБ, г/л А., г/л А./ОБ Г., г/л А./Г. 97,84± 5,118 88,91± 2,222 78,35± 4,626 65,03± 5,316 31,0± 1,327 29,31± 0,495 26,14± 2,542 35,56± 3,191 0,32± 0,020 0,33± 0,008 0,34± 0,044 0,55± 0,079 66,84± 5,093 59,60± 2,081 52,21± 5,928 29,47± 7,075 0,47± 0,044 0,49± 0,018 0,51± 0,100 1,31± 0,416 В крови свиноматок 1-ой-3-ей отмечалось снижение относительного содержания альбумина. У свиноматок 1-ой и 2-ой группы данный признак развивался вследствие увеличения уровня общего белка, а у свиноматок 3-ей группы – за счёт снижения концентрации альбумина (гепатодепрессивный синдром). Соотношение А./Г. было наименьшим у свиноматок 1-ой группы (за счёт высокого содержания глобулинов). Возрастание уровня глобулинов в крови свидетельствует о развитии синдрома воспаления. Заключение. �� У свиноматок гепатит характеризуется развитием в крови изменений, характерных для биохимических синдромов цитолиза и воспаления, гепатоз – изменений, характерных для синдромов цитолиза и гепатодепрессии. Библиографический список: 1.Kalai, K. Investigation of parasitic and bacterial diseases in pigs with analysis of hematological and serum biochemical profile / K. Kalai // J. Parasit. Dis.- 2012.- Vol. 36, № 1.- P. 129–134. 2.Kekwick, R. G. O. Serum-cholinesterase activity in health and in liver disease / R. G. O. Kekwick // Biochem. J.- 1960.- Vol. 76, №3.- P. 420–424. 3.Thapa, B. R. Liver function tests and their interpretation / B. R. Thapa, W. Anuj // Indian J. Pediatr.- 2007.- Vol.74, № 5.- P. 663–671. 199 BIOCHEMICAL CHANGES IN THE BLOOD OF SOWS DURING LIVER PATHOLOGY Chlebus N. K., Petrovskiy S. V., Zdanovitch T. A. Key words: hepatitis, steatosis, sows, biochemical syndromes of cytolysis, inflammation and hepatocellular insufficiency Sows hepatitis is characterized by the development in the blood changes typical for biochemical syndromes of cytolysis and inflammation, hepatosis - changes typical for biochemical syndromes of cytolysis and hepatocellular insufficiency. УДК: 602.68:57.083.3 ПОДБОР МЕТОДА ЛИОФИЛЬНОЙ СУШКИ БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ БЕРЕМЕННОСТИ И БЕСПЛОДИЯ ДОМАШНЕГО СКОТА Хлынов Д.Н., научный сотрудник Богданов И.И., кандидат ветеринарных наук, доцент Богданова М.А., кандидат биологических наук ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия им. П.А. Столыпина» Фомин А.Н., кандидат технических наук, доцент ООО «Научно-Технический Центр «ПромТехЭнерго» Ключевые слова: стельность, диагностика, экспресс-тест, лиофилизация, крупный рогатый скот. Представлена информация о разрабатываемом лиофильновысушенном биопрепарате для диагностики беременности и бесплодия домашнего скота. В настоящее время рядом исследователей (Богданова М.А., Богданов И.И.) разработан, производится и реализуется биопрепарат для диагностики беременности и бесплодия коров. Биопрепарат основан на иммунологической реакции идентификации хорионического гонадотропина в моче коров. Данный биопрепарат показал себя, как высокоэфективное диагностическое средство, позволяющий устанавливать беременность в достаточно ранние сроки. Следует отметить, что география потребителей препарата достаточно широка и включает регионы России и сраны ближнего зарубежья с различными климатическими условиями, не благоприятно отражающимися на качестве биопрепарата при его пересылке и транспортировки. Жидкие препараты требуют определенного режима хранения и транспортирования - от 2 до 8°С, нарушение 200 которого, как в сторону повышения, так и в сторону понижения температуры, могут приводить к полной потере активности. В связи с этим возникает необходимость усовершенствования формы выпуска препарата, позволяющее исключить вышеуказанные отрицательные воздействия. В данном аспекте одним из решения проблемы является усовершенствования диагностикума. Перед нами была поставлена задача - разработать технологию производства экспресс-тестов в лиофилизированной форме для диагностики беременности и бесплодия домашнего скота в условиях животноводческих ферм и частных подворий . Лиофилизация — способ мягкой сушки веществ, при котором высушиваемый препарат замораживается, а потом помещается в вакуумную камеру, где и происходит возгонка растворителя. Сухие препараты, полученные лиофилизацией, не претерпевают химических изменений и не теряют присущих им свойств при длительном хранении даже при положительных значениях температуры, вследствие чего упрощаются условия транспортировки и хранения, увеличивается срок годности. При лиофилизации большинство белков не подвергается денатурации и может длительно сохраняться при умеренном охлаждении (около 0 °C). Лиофилизированные ткани и препараты при увлажнении восстанавливают свои первоначальные свойства. Лиофилизации, как правило, подвергаются микроорганизмы и бактериофаги. Она широко применяется для получения способной к долговременному хранению плазмы крови (сухая плазма) и ее отдельных фракций, иммунных сывороток, иммуноглобулинов, вакцин, антибиотиков, гормонов, трансплантатов тканей, поэтому для них отработаны разнообразные режимы замораживания и высушивания. Отсутствие унифицированной технологии лиофильного высушивания биологических объектов обусловливает необходимость проведения исследований по стабилизации каждого конкретного препарата. Известен способ лиофилизации биопрепарата, включающий этапы его замораживания и вакуумного обезвоживания. Однако процесс лиофилизации по данной технологии зачастую ведет к значительной (иногда - полной) потере специфической активности препарата, а лиофилизированный материал часто «размазан» по дну флакона вследствие малого содержания суммарного сухого остатка. Предлагаемый метод лиофилизации, включает добавление в раствор биопрепарата перед лиофилизацией стабилизаторов - смеси глицина и маннитола. Это позволяет уменьшить падение биологической активности на этапе лиофилизации и сформировать объемную таблетку [Henderson L.O. at all.]. Разрабатываемый метод изготовления лиофилизированного биопрепарата будет включать следующие операции (этапы): 1.Изготовление жидкой формы биопрепарата и котроль его качества. 2.Лиофилизация Биопрепарат для диагностики беременностии и бесплодия разливают в стерильные пробирки по 1 мл и подвергают лиофилизации. Замораживание осуществляют в низкотемпературном холодильнике в режиме быстрого охлаждения. 201 Лиофилизацию проводят в сублимационных камерных аппаратах марки Labconco. Продолжительности режима лиофилизации - (25±1) часов. Начальные параметры температуры конденсатора сублимационной установки составляют -(60±2)°С, температура греющих полок - -(42±2)°С, температура материала - -(50±1)°С, глубина вакуума - 5,3-5,9 Па. Герметизацию ампул после лиофилизации осуществляют в атмосфере осушенного очищенного воздуха при нормальном атмосферном давлении. 3.Контроль качества лиофилизированного биопрепарата. Минимальный срок годности полученного препарата составляет будет 3 года (срок наблюдения) и может быть увеличен при накоплении экспериментальных данных, в то время как срок годности жидкого биопрепарата составляет 1 года. Биопрепарат для диагностики беременностии и бесплодия, полученный заявляемым способом, при хранении стабильно сохраняет физико-химические и биологические свойства. В соответствии с нормативной документацией, жидкий биопрепарат для диагностики беременностии и бесплодия домашнего скота должен храниться и транспортироваться при температуре от 0 до 8°С . Допускается транспортирование при температуре до 20°С не более 5 суток. Не допускается замораживание. Изучение стабильности жидких и лиофилизированных биопрепаратов для диагностики беременностии и бесплодия домашнего скота в условиях повышенной (37°С) температуры (тест «ускоренного старения») подтвердило стабильность сухих форм. Таким образом, заявляемый способ позволяет без применения стабилизаторов получить биопрепарат для диагностики беременностии и бесплодия домашнего скота в лиофилизированной форме, характеризующийся стабильностью свойств при хранении и более длительным сроком годности по сравнению с жидким аналогом. Библиографический список: 1.Подольский М.В. Высушивание препаратов крови и кровезаменителей. - М.: Медицина, 1973. - 198 с. 2.Белоус A.M., Цветкова Ц.Д. Научные основы технологии сублимационного консервирования. - Киев: Наукова думка, 1985. - 208 с. 3.Физико-химические, химические, физические и иммунохимические методы контроля медицинских иммунобиологических препаратов. ФС 42-3874-99. - Москва, 1999. - С.71. 4.Henderson L.O., Hazlehurst J.S., Taylor L., Hannon W.H. Preparation of lyophillzed human serum based reference materials with graded levels of apolipoproteins A-I and В. - Clin. Biochem. - 1988. - v.21. - p.219-223. 5.Chang B.S., C.S.Randall, Cryobiology, 1992, v.29, p.632. 202 УДК 619:578 ИЗУЧЕНИЕ КУЛЬТУРАЛЬНЫХ СВОЙСТВ БАКТЕРИЙ ERWINIA HERBICOLA А.В. Мастиленко, кандидат биологических наук, старший преподаватель ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», Тел. 8-903-336-37-36. А.А.Черных, аспирант ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», Тел. 8-937-453-15-17. E-mail: [email protected] Н.И.Молофеева, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина»,. Тел. 8-927-819-21-40. E-mail: pulcherovskaya. [email protected] Д.А.Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», Тел. 8-927-270-34-80.. E-mail: [email protected] Ключевые слова: бактерия, морфология, культуральные свойства, фитопатогенные бактерии. В статье описываются морфологические, культуральные и биохимические свойства бактерий рода Erwinia Введение. В настоящее время сельское хозяйство в Российской Федерации переживает новый виток перемен, связанным с разработкой и внедрением новых технологий возделывания и переработки культур, имеющих первостепенное значение для экономики страны. Вместе с тем, немаловажное значение для современного состояния сельского хозяйства имеет отрасль микробиологии, непосредственно занимающаяся методами индикации, идентификации и профилактики фитопатологий, вызванных патогенными для растительной ткани видами бактерий. Это связано с тем, что зачастую немалые потери сельскохозяйственной продукции происходят из-за поражений культурных растений на всех этапах деятельности человека, начиная от инфицирования посевного материала и заканчивая значительными потерями зерновых и плодов при хранении. Немаловажную роль в этих процессах играют бактерии рода Erwinia. В связи с существующими сложностями микробиологической дифференции представителей рода Erwinia становиться очевидной необходимость разработки современных схем бактериологической индикации и идентификации фитопатогенных эрвиний. Материалы и методы. Референс штамм Erwinia herbicola №607, мясо-пептонный бульон, мясо-пептонный агар, ЭНДО агар, лабороторное оборудование. Результаты исследований и их обсуждение. Для изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств был использован референс штамм Erwinia�� herbi�� cola №607. Морфологические свойства оценивали в фиксированных мазках, окрашенных по Грамму. При окраске по Граму установили, что Erwinia herbicola мелкая, грамотрицательная палочка. Клетки расположены одиночно, парами, редко короткими цепочками .Спор не образует. 203 На МПА на 1-2 день образовывались мелкие(d≈1мм) куполообразные колонии округлой формы , края ровные , поверхность колоний блестящая с глянцем. Консистенция пастообразная, цвет- кремовый. В МПБ на вторые сутки эрвинии вызывали равномерное помутнение с последующим образованием осадка. Подвижность Erwinia herbicola определяли посевом “уколом” в 0,7% агар. Наблюдался рост микроорганизмов только по ходу прокола среды, при этом окружающая среда остается совершенно прозрачной , что свидетельствует о неподвижности культуры. На селективной среде ЭНДО на 1-2 сутки образовывались мелкие куполообразные колонии, округлой формы. Цвет колоний – красный. Края ровные, поверхность колоний гладкая, блестящая с глянцем. На казеиновоугольном агаре рост появлялся на первые – вторые сутки. Вырастали мелкие, куполообразные, блестящие, молочно-мутные колонии 1-2 мм в диаметре. На кровяном агаре рост на 1-2 сутки, мелкие, куполообразные колонии молочномутного цвета. Края ровные, поверхность колоний гладкая, блестящая. Зона гемолиза отсутствует. На селективной среде для иерсиний и псевдотуберкулеза референс штамм показал хороший рост. На 1-2 сутки образовывались мелкие куполообразные колонии мутно-синего цвета. Среда изменила цвет с зеленого на синий, и при открывании чашки ощущался запах аммиака – что свидетельствует на наличие у Erwinia herbicola фермента уреазы. На цитратном агаре Симмонса, предназначенном для определения утилизации цитрата натрия энтеробактериями, исследуемый штамм Erwinia herbicola растет с изменением цвета среды из зеленого в синий, что свидетельствует о способности Erwinia herbicola утилизировать цитрат натрия и защелачивать субстрат. Также были произведены посевы на висмут-сульфит агар, агар Клиглера, среду Плоскерева и среду Левина. Рост на данных средах отсутствовал. Исследования на средах Гисса показали, что Erwinia herbicola не ферментирует углеводы: сахарозу, мальтозу, ксилозу; многоатомные спирты: дульцит, манит. Вреакциях с лактозой и глюкозой дает положительный результат. Наличие фермента каталазы определяли реакцией с 4% перекисью водорода. Реакция –положительная. Тест на оксидазу при помощи индикатора диметилпарафенилендиамин дигидрохлорид – отрицательный. Способность вырабатывать фермент желатиназу, определяли посевом культур Erwinia herbicola в желатиновый столбик. Исследуемый штаммы не образует фермент желатиназу. Проведенные исследования являются основой дальнейших исследований по разработке бактериологической схемы индикации и идентификации фитопатогенных эрвиний. Библиографический список 1.Stuart, C. A., Mickle, F. L., and Borman, E. K. Suggested grouping of slow lactose fermenting coliform organisms. Am. J. Pub. Health, 1940, 30, 499-508. 2.Stanley, A. R. Physiologic and serologic studies of the soft-rot and colon group of 204 bacteria. W. Va. Agr. Exp. Sta. Bull., 1939, 287. 3. Золотухин С.Н., Кузнецов А.Ю., Васильев Д.А., Каврук Л.С. Методические рекомендации по индикации и идентификации энтеробактерий вида Morganella�� morganii в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов // Утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 4 октября 2004 года. Москва.- 2005. - С. 16. 4.Лабинская, А.С. Микробиология с техников микробиологических исследований / А.С. Лабинская. – М.: Медицина – 1978. – С.394. 5.Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / под ред. А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой, А.С. Ещиной // Учебное пособие – М.: Медицина, 2004. – С.576. STUDY OF CULTURAL PROPERTIES BACTERIA ERWINIA HERBICOLA Mastilenko A.V., Chernyh A.A.,.Molofeeva N.I,.Vasilev D.A. Key words: bacteria, morphology, cultural properties, phytopathogenic bacteria. This article describes morphological, cultural and biochemical properties of bacteria of the genus Erwinia. УДК 619:578 СООТНОШЕНИЕ БАКТЕРИОФАГОВ В БИОПРЕПАРАТЕ ПОЛИФАГА А.Г. Шестаков, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник ФГБОУ ВПО «УлГУ», E-mail: [email protected] Н.И.Молофеева, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина»,. Тел. 8-927-819-21-40. E-mail: pulcherovskaya. [email protected] Л.П.Пульчеровская, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина»,. Тел. 8-927-819-21-40. E-mail: pulcherovskaya. [email protected] С.Н.Золотухин, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», Тел. 8-927-270-34-80. E-mail: [email protected] Д.А.Васильев, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», Тел. 8-927-270-34-80.. E-mail: [email protected] Е.Н.Семанина, кандидат биологических наук., Тел. 8-909-360-61-64 Е.Г.Семанин, м.н.с. ФГБОУ ВПО «УлГУ», Тел. 8-927-830-00-90. 205 Ключевые слова: биопрепарат, бактериофаги, фаголизат, бактерии, титр бактериофага, спектр действия бактериофагов. В статье описано соотношение бактериофагов в биопрепарате полифага. Подобраны оптимальные количественные и качественные показатели соотношения монофаговых фаголизатов в биопрепарате. Определено количество бактериофагов в монофаговых фаголизатах после изготовления биопрепарата полифага. Исследован спектр действия бактериофагов в биопрепарате полифага по отношению к чувствительным бактериям. Введение. Сферы применения биопрепаратов полифагов достаточно широки, для того чтобы сконцентрировать на них внимание современных исследователей. Бактериофаги используются в диагностике, лечении и профилактике бактериальных инфекций. Приведем некоторые примеры применения бактериофагов. Фагодиагностика основана на специфической способности фагов, взаимодействовать с определёнными видами (идентификация) или типами (фаготипирование) бактерий, в результате чего происходит их лизис. Феномен лизиса является основой для использования фага в диагностических целях, Метод фагодиагностики широко используется в лабораторной практике для идентификации различных видов микроорганизмов. Реакция нарастания титра фага остается положительной значительно дольше, вплоть до полной ликвидации местных проявлений болезни. По данной реакции предложены методические рекомендации для индикации бактерий: E. coli 0157 (Золотухин, Молофеева, Васильев, Каврук; 2005), Citrobaсtera (Золотухин, Пульчеровская, Васильев, Каврук; 2005), Morganella (Золотухин, Кузнецов, Васильев, Каврук; 2005). Материалы и методы. Штаммы бактерий родов Echerichia, Proteus, Klebsiella, Pseudomonas�� , мясо-пептонный бульон, мясо-пептонный агар, лабораторное оборудование, методические рекомендации по индикации вышеуказанных бактерий. Результаты исследований и их обсуждение. Для изготовления лечебно-профилактического препарата против колибактериоза телят из изученных штаммов фагов были отобраны изоляты, способные за время пятиминутного контакта фага с клетками эшерихий адсорбироваться в количестве 86-91% фаговых частиц, и имели скорость адсорбции 5,9х10-8 – 9,4х10-9 см/мин. Диапазон литического действия по отношению к возбудителям колибактериоза телят различных серологических О-групп составил от 24 до 52%. Латентный период внутриклеточного развития у них был равен 21-26 минутам, а средняя урожайность 126-262 фаговых частицы на одну инфицированную бактерию (Ленев, Малахов, 1988). При лечении детей больных иерсиниозом использовали поливалентный иерсиниозный бактериофаг (Галкина, Феоклистова, 2000). Биопрепараты бактериофагов представляют собой фильтраты полностью лизированной тем или иным фагом соответствующей бульонной культуры бактерий. Полифаги – биопрепараты, которые содержат в своем составе от двух и более бактериофагов. Монофаговые фаголизаты изготавливают из бактериофагов как выделенных из очага бактериальных инфекций и внешней среды, так и из самих бактериальных клеток, под действием различных индуцирующих факторов (Васильев Д.А., Семанина Е.Н., Золотухин С.Н., Хайруллин И.Н., Васильева Ю.Б., Шестаков А.Г.; 2011). Технология изготовления 206 монофаговых фаголизатов достаточно хорошо изучена и зависит лишь от биологических свойств самих бактериофагов. Иначе обстоит дело с биопрепаратами, в состав которых входит целый набор бактериофагов. Таким образом, при возрастающем интересе к бактериофагам, возникает целый ряд вопросов об оптимальном содержании монофаговых фаголизатов в составе биопрепарата полифага. Основные параметры изготовления монофаговых фаголизатов – соотношение бактериофага и чувствительной к нему культуры (среднее значение для всех бактериофагов составляет 1:2), pH среды культивирования (среднее значение для всех бактериофагов составляет 7,0), время культивирования системы бактериофаг и чувствительная бактерия (среднее значение для всех бактериофагов составляет 8 часов). Изначально готовили монофаговые фаголизаты с титром не меньше 109 вирионов в 1 мл. Для этого 4500 мл МПБ готовили согласно прописи и автоклавировали при 1,1 атм. Питательный бульон разливали на 42 колбы по 100 мл в каждую. Количество питательного бульона рассчитывали на три варианта смеси биопрепарата полифага. Первый вариант содержал 21 бактериофаг, второй вариант содержал только бактериофаги кишечной группы, в количестве 14 штаммов и третий вариант содержал бактериофаги неферментирующих бактерий в количестве 7 штаммов. В связи с этим в каждые две колбы вносили по одному штамму бактериофага в количестве 4,5 мл с содержанием вирионов 109 в 1 мл и чувствительные штаммы бактерий в количестве 9 мл с содержанием 109 микробных клеток в 1мл. Культивирование проводили при оптимальной для различных штаммов бактерий температуре в течение 8 часов. Параллельно ставили три колбы, с бактериями различной температуры культивирования, для контроля лизиса. Спустя указанное время отмечали просветление бульона в колбах с бактериофагами и помутнение в контрольных колбах. Колбы с фаголизатом обрабатывали хлороформом в соотношении 1:10 в течение 30 минут при комнатной температуре. Колбы оставляли при комнатной температуре для осаждения бактериальных клеток на 2 часа. Далее чувствительные бактерии для каждого штамма бактериофага выращивали на плотной среде в виде сплошного газона. Затем делали смывы с чашек Петри стерильным физиологическим раствором, содержащим 8,5% NaCl, в стерильные колбы объемом 500 мл. После смыва, объем физраствора с взвесью бактерий доводили до 90 мл, с содержанием 109 микробных клеток в 1 мл. Вносили фаголизаты (прозрачный верхний слой бульона) из колб, обработанных хлороформом, специфично для каждого вида бактерий в количестве 45 мл. Дополнительно в суспензию бактериофагов и бактериальных клеток в физиологическом растворе объемом 135мл вносили CaCl2 и MgCl2 в количествах 0,3г/л. Колбы культивировали при оптимальной температуре для каждого вида бактерий в течение 8 часов. Далее, полученные фаголизаты обрабатывали хлороформом в соотношении 1:10, с последующим отстаиванием осадка в течение 2 часов. Надосадочную жидкость в объеме 100 мл переносили в стерильные колбы и производили подсчет фаговых частиц в 1 мл полученных монофаговых фаголизатов по методу Грациа. Результаты представлены в таблице №1. 207 Таблица 1. Количество фаговых частиц в 1 мл полученных монофаговых фаголизатов Название фага Echerichia сoli №1 Echerichia сoli №4 Echerichia сoli №9 Echerichia сoli №18 Proteus vulgaris №35 Proteus vulgaris №44 Proteus mirabilis №52 Klebsiella pneumoniae №26 Proteus vulgaris №13 Proteus vulgaris №21 Proteus mirabilis №45 Yersinia pseudotuberculosis №2 Yersinia enterocolitica №54 Yersinia enterocolitica №11 Pseudomonas fluorescens №7 Pseudomonas aeruginosa №8 Pseudomonas fluorescens №65 Pseudomonas fluorescens №67 Pseudomonas aeruginosa №37 Pseudomonas aeruginosa №115 Pseudomonas aeruginosa №128 Литическая активность по Грациа Количество фаговых частиц в 1мл 7 х 108 4 х 108 5 х 109 7 х 109 6 х 108 7 х 109 8 х 108 6 х 109 7 х 109 9 х 108 5 х 108 3 х 108 7 х 108 2 х 109 3 х 108 3 х 109 4 х 109 5 х 108 8 х 109 6 х 109 2 х 109 По данным таблицы №1, отмечено, что содержание активных фаговых частиц в 1 мл монофаговых фаголизатах различно и отличается на порядок. При конструировании биопрепаратов полифагов полученные монофаговые фаголизаты смешивали таким образом, чтобы получить одинаковое количество активных фаговых частиц каждого штамма бактериофага в 1 мл биопрепарата полифага. Для этого, монофаговый фаголизат с содержанием наименьшего количества фаговых частиц в 1 мл брали за единицу, а фаголизат с большим содержанием активных фаговых частиц в 1 мл вносили в меньшем количестве. При конструировании биопрепарата полифага с содержанием всех монофаговых фаголизатов соблюдали следующие пропорции: бактериофаги с титром 108 вносили по 100мл, а бактериофаги с титром 109 вносили по 10мл. В аналогичных пропорциях смешивали другие варианты биопрепаратов полифагов. Биопрепарат полифага из 21 бактериофага содержал 1110мл. Биопрепарат из 14 бактериофагов бактерий семейства Enterobacteriaceae содержал 860мл. Биопрепарат из 7 бактериофагов бактерий рода Pseudomonas содержал 250мл. Определение количества бактериофагов в монофаговых фаголизатах после изготовления биопрепарата полифага. В биопрепарате полифага состоящего из смеси 208 монофаговых фаголизатов в указанных выше пропорциях было определено количество жизнеспособных бактериофагов каждого вида. Для этого брали 1 мл биопрепарата полифага состоящего из 21 бактериофага и специфично для каждого штамма определяли титр, то есть содержание активных фаговых частиц в 1 мл методом Грациа. Установлено, что содержание каждого штамма бактериофага в 1 мл биопрепарата полифага составляет порядка 105 активных фаговых частиц. Подобным образом, определены титры бактериофагов в биопрепаратах полифага состоящих из 14 и 7 монофаговых фаголизатов. Установлено, что титры бактериофагов в биопрепарате, состоящем из 14 фаголизатов, составляют порядка 105 активных вирусных частиц. Титры бактериофагов состоящих из 7 фаголизатов составляют порядка 106 активных вирусных частиц. В результате полученных данных можно сделать вывод, что изготавливать биопрепараты полифага с количеством бактериофагов от 21 и выше, указанным способом не целесообразно. Заключение. С целью определения спектра действия бактериофагов в биопрепарате полифага, состоящем из 21 штамма, использовали метод Отто. Для этого, каплю биопрепарата полифага наносили на сплошной газон бактериальной культуры, отдельно каждого из имеющихся штаммов бактерий. Просветление по ходу стекание капли на фоне матового газона сплошного роста бактериальной культуры указывало на лизис бактерий. Установлено, что биопрепарат полифага лизировал все штаммы бактериальных культур. Библиографический список 1.Галкина Л.А., Феклистова Л.В.Результаты применения поливалентного иерсиниозного бактериофага в лечении иерсиниоза у детей // Материалы международной конференции «Инфекции, обусловленные иерсинимями (иерсиниоз, псевдотуберкулез), и другие актуальные инфекции». – Санкт-Петербург 2000. – С.11. 2.Золотухин С.Н., Кузнецов А.Ю., Васильев Д.А., Каврук Л.С. Методические рекомендации по индикации и идентификации энтеробактерий вида Morganella morganii в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов // Утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 4 октября 2004 года. Москва.- 2005. - С. 16. 3.Золотухин С.Н., Молофеева Н.И., Васильев Д.А., Каврук Л.С. Методические рекомендации по индикации и идентификации энтерогеморрагической кишечной палочки E�� . с�� oli�� О157:Н7 и О157:Н- в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов // Утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 4 октября 2004 года. Москва. - 2005. - С. 16. 4.Золотухин С.Н., Пульчеровская Л.П., Васильев Д.А. Бактерии рода Citrobacter и их бактериофаги // Вопросы микробиологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы. Сборник научных трудов. Ульяновск. - 2000. - С.53-58. 5.Ленев С.В., Малахов Ю.А. Бактериофаги энтеропатогенных эшерихий, их выделение и биологические свойства // Эпизоотология, эпидемиология, средства диагностики, терапии и специфической профилактики инфекционных болезней, общих для человека и животных. / Материалы Всесоюзной конференции. - Львов. – 1988. - С.375. 6.Васильев Д.А., Семанина Е.Н., Золотухин С.Н., Хайруллин И.Н., Васильева Ю.Б., Шестаков А.Г. Изучение основных биологических свойств бактериофагов Bordetella bronchiseptica, выделенных методом индукции // Вестник Ульяновской государственной 209 сельскохозяйственной академии. – 2011. №1(13). – С. 59-63. THE RATIO OF BACTERIOPHAGES IN THE BIOLOGICS POLYPHAGES Shestakov A.G., Molofeeva N.I., Pulcherovskya L.P., Zolotukhin S. N., Vasilyev D.A., Semanina E.H., Semanin E.G. Key words: biological product, bacteriophages, phageslisates, bacteria, titer bacterio. In article the ratio of bacteriophages in a polyphage biological product is described. Optimum quantitative and quality indicators of a ratio monofagovy phageslisates in a biological product are picked up. The quantity of bacteriophages in monofagovy phageslisates after manufacturing of a biological product of a polyphage is defined. The range of action of bacteriophages in a polyphage biological product in relation to sensitive bacteria is investigated. УДК 619:616-07 ТРАВМАТИЧЕСКИЙ РЕТИКУЛИТ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Н.К.Шишков, кандидат ветеринарных наук, доцент ФГБОУ ВПО “Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина” тел. 8(8422)55-95-31, [email protected] А.Н.Казимир, кандидат ветеринарных наук, доцент ФГБОУ ВПО “Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина” тел. 8(8422)55-95-31, [email protected] А.З.Мухитов, кандидат ветеринарных наук, доцент ФГБОУ ВПО “Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина” тел. 8(8422)55-95-31, [email protected] Ключевые слова: сетка, ретикулит�� , металлоиндикатор�� , магнитный зонд, зондирование, металлоносительство. Работа посвящена изучению металлоносительства у крупного рогатого скота в условиях хозяйства. Проведены диагностические, лечебные и профилактические мероприятия при травматическом ретикулите у дойных коров. Введение. По литературным данным известно, что большинство молочных коров (55-87%) являются ретикулометаллоносителями. Острые инородные металлические предметы вместе с кормом попадают в сетку, где вызывают её воспаление – ретикулит. Под действием сокращений преджелудков эти предметы травмируют органы брюшной (брюшину, печень, селезенку, диафрагму, кишечник) или грудной (легкие, сердце) полостей [1,2,3,4]. Основной причиной болезни является заглатывание с кормом острых металлических предметов. Заглатыванию посторонних предметов способствует 210 минеральная недостаточность, в результате неполноценного кормления крупного рогатого скота. Возникновению болезни способствует и нерегулярное кормление. Чувство голода побуждает животных к жадному, быстрому поеданию корма и плохому его пережевыванию [1,2,5]. Экономический ущерб, наносимый молочному скотоводству травматизацией сетки значителен. Ущерб складывается из потерь от снижения молочной и мясной продуктивности, потерь от падежа, вынужденного убоя, недополучения приплода, затрат на лечебно-профилактические мероприятия [2,4]. В связи с этим, разработка диагностических, лечебных и профилактических мероприятий, направленных на предупреждение проникновения в преджелудки инородных металлических предметов , их извлечение и освобождение животных от металлоносительства, имеют огромное значение в системе ветеринарного обслуживания ферм по производству говядины и молочных комплексов [1,3,6,7,8]. Целью наших исследований было изучение распространенности ретикулита среди крупного рогатого скота, выявление клинических признаков при повреждении сетки, определение диагностической ценности металлоиндикатора�� Метокс�� 351, проведение лабораторных исследований крови, мочи, содержимого рубца у коров, проведение зондирования животных магнитным зондом Коробова (ЗМК-14) рис. 1,2. Рис.1. - Зонд магнитный ЗМК-14М Рис. 2. - Металлоиндикатор Метокс 351 Материалы и методы исследований. Работа выполнялась в летний период с июня по август 2012 года на кафедре клинической диагностики, внутренних незаразных болезней и патологии животных ФГБОУ ВПО “Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина” и на базе ООО КФК “Возрождение” Чердаклинского района Ульяновской области. Для изучения распространенности заболеваний сетки у коров черно-пестрой и симментальской пород проведена диспансеризация 464 голов дойного стада. У клинически здоровых и больных ретикулитом животных проводили следующие исследования: - клинические – определяли общее состояние, аппетит, температуру тела, частоту 211 пульса и дыхания, количество сокращений рубца; - лабораторные – исследование крови, мочи, содержимого рубца. В крови определяли количество эритроцитов, лейкоцитов , содержание гемоглобина. Мочу исследовали на белок и кетоновые тела, в содержимом рубца определяли количество инфузорий, уровень РН. Все лабораторные исследования проводили по общепринятым методикам, используемым в ветеринарии [9]. Результаты исследований и их обсуждение. Наиболее характерными клиническими признаками травматических болезней сетки, выявляемых общими методами (осмотр, пальпация, перкуссия, аускультация, термометрия) были следующие: уменьшение аппетита, угнетение, повышение температуры тела на 0,5 – 1°С, учащение пульса (до 100 ударов в минуту) и дыхания (до 34-38 дыхательных движений в минуту), атония и гипотония преджелудков, сгорбленность спины, периодическое беспокойство, ноги поставлены под живот, животные с трудом встают, поднимая переднюю часть туловища (по-лошадиному), у них вытянутая шея, опущенная голова (рис. 2,3). Рис. 2,3. – Вынужденные позы животных при заболевании Клинический диагноз подтверждался металлоиндикацией и извлечением инородных металлических предметов из сетки с помощью магнитного зонда Коробова. У животных извлекали куски проволоки, огарки электродов, металлическую стружку, обрезки жести, гвозди различной величины (рис. 5,6). 212 Рис. 5,6. – Инородные металлические предметы При исследовании морфологических показателей крови у больных животных было отмечено повышение количества лейкоцитов у 24% животных, существенных изменений в содержании гемоглобина и количества эритроцитов не было. В моче животных, больных травматическими болезнями сетки, увеличено содержание кетоновых тел у 18% , обнаруживался белок у 26% коров; в содержимом рубца количество инфузорий уменьшено у 32% , уровень РН был снижен у 28% животных. Все животные на 3-4 сутки после магнитного зондирования выглядели клинически здоровыми. У них улучшался аппетит, они стали более активными в передвижении, исчезли другие признаки, характерные для травматизации сетки. Показатели крови, мочи и содержимого рубца на 4-5 сутки были близки к физиологическим нормам. Больные животные, у которых в сетке оставались инородные тела, подвергались повторному зондированию, но дополнительно извлечь металлические предметы не удавалось. Этих животных (3 головы) сдали на мясокомбинат. Заключение. Проведенные исследования позволяют констатировать, что у коров травматические болезни сетки имеют значительную степень распространенности, в период нашей работы с поражениями сетки выделена 241 голова (52%) от общего поголовья. У больных животных отмечались следующие изменения: угнетение, беспокойство, повышение температуры тела, учащение пульса и дыхания, гипотония и атония преджелудков�� , лейкоцитоз, протеинурия, �� кетонурия�� , снижено количество инфузорий и уровень РН в содержимом рубца. Библиографический список: 1.Коробов, А.В. Травматические болезни сетки крупного рогатого скота и пути 213 их профилактики/ А.В.Коробов, Р.В.Обойшев// Мат.Международ, уч.- методич. И науч.практич.конф., посвящ. 85 – летию академии: В 3 частях. – Ч.2.- М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина.- 2004.- С.158-162. 2.Обойшев�� , Р.В. Травматические болезни сетки крупного рогатого скота и их профилактика: диссерт.канд.в.н. – М., 2005.- С.186 3.Коробов, А.В. Практикум по внутренним болезням животных / А.В. Коробов, Г.Г.Щербаков.- СПб.: Лань, 2004.- 544 с. 4.Данилевская, Н.В. Справочник ветеринарного терапевта / Н.В. Данилевская, А.В.Коробов, В.С. Старченков, Г.Г.Щербаков. – СПб.:Лань,2000.- С. 137-141. 5.Коробов, А.В. Использование магнитных зондов, блокаторов для диагностики и лечения травматических болезней сетки крупного рогатого скота/А.В.Коробов, Р.В.Обойшев// Мат. Международ, уч.-методич. и науч.-практич. конф., посвящ. 85 – летию академии: В 3 частях. – Ч.2.- М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина.- 2004.- С.162-167. 6.Коробов, А.В. Применение нового высокоэффективного магнитного зонда (ЗМК-21) и магнитных блокаторов. Методические указания / А.В.Коробов, Р.В.Обойшев. – М.:ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И.Скрябина.- 2004.- 18 с. 7.Якуб, Г. Металлоносительство среди коров больных гипотонией и атонией преджелудков. Научно-практический журнал “Ученые записки учреждения образования Витебская государственная академия ветеринарной медицины”.-Т.43,вып.1.-2007.- с.260261. 8.Уша, Б.В. Внутренние болезни животных / Б.В. Уша, С.Э. Жавнис, И.Г. Серегин, Г.Г. Щербаков. – М.: КолосС.- 2010.-311с. 9.Кондрахин, И.П. Клиническая лаборатория диагностика в ветеринарии / И.П. Кондрахин, Н.В. Курилов, А.Г.Малахов [и др.].- М.: Агропромиздат.-1985.-172с. TRAUMATIC RETIKULO IN CATTLE N.K.Shishkov, A.N.Kazimir, A.Z.Muhitov Key words: grid, Reticulate, metalloindikator, magnetic probe, probing, metallonositelstvo. This is a study metallonositelstva cattle in farms. And the diagnostic, therapeutic and preventive measures in traumatic reticulo in dairy cows. 214 УДК 619:612: + 634.4.087.72 ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ КОСТНОЙ ТКАНИ МОЛОДНЯКА СВИНЕЙ ПРИ ВВЕДЕНИИ В РАЦИОН МИНЕРАЛЬНЫХ ДОБАВОК Шленкина Т. М. кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина». 8(8422) 55-95-64 Ключевые слова: кремнеземистый мергель, полисоли, кальций, фосфор, костная ткань, рацион, органический матрикс, минеральная фаза. Проведены исследования по применению кремнеземистого мергеля Сиуч – Юшанского месторождения в качестве минеральной подкормки в рационах свиней. Анализ полученных данных указывает на снижении воды в костной ткани, а также создает благоприятные условия для отложения кальция и фосфора в костную ткань. Свиноводство является одной из отраслей скороспелого животноводства, имеющих первостепенное значение в разрешении мясной проблемы страны. Это обусловливается биологическими особенностями свиней — их скороспелостью, плодовитостью, высокой оплатой корма, хорошим убойным выходом и всеядностью [10]. Влияние минералов начинается с момента зарождения организма. От правильного минерального кормления зависят рост и развитие, состояние здоровья, мясная и воспроизводящая продуктивность животного. Потребности в минеральных веществах зависят от возраста животных, физиологического состояния, их производительности [6]. Каждый химический элемент в организме играет свою особую роль. Для свиней - два важнейших минерала — это кальций и фосфор. 80% этих макроэлементов депонируется в костях. При их недостатке в организме кости искривляются, ломаются. Поэтому кальций и фосфор особенно нужны в момент формирования скелета. Любая несбалансированность рациона приводит к нарушениям [8,9]. В последние годы отмечена тенденция возрастания патологии опорно-двигательного аппарата сельскохозяйственных животных. Это вызывает необходимость изучения химического состава костной ткани в постнатальный период развития и в зависимости от факторов питания. Особую актуальность здесь приобретают исследования по изучению роли кремнеземистого мергеля [4,5,7] в процессах формирования костной ткани у свиней. Экспериментальные исследования были проведены в условиях хозяйства ОАО «Витязь» Майнского района Ульяновской области на поросятах крупной белой породы, полученных от 15 свиноматок – аналогов, разделённых на три группы. Поросята I группы были получены от свиноматок, которым на протяжении супоросности и лактации скармливали хозяйственные рационы, сбалансированные по основным питательным веществам, но с недостаточным содержанием меди, цинка, кобальта и марганца. Начиная с 7 суток постнатального развития, в период выращивания и откорма поросята I группы получали хозяйственные рационы с низким уровнем этих микроэлементов. 215 Поросята II группы, а также свиноматки, от которых они были получены, содержались на рационах, в которые дополнительно вводили комплексную минеральную подкомку для свиней, изготовленную научно – производственной ветеринарной лабораторией Главного Управления ветеринарии Кабинета Министров Республики Татарстан (г. Буинск), в количестве, соответствующем рекомендациям по использованию. В результате уровень меди и цинка был сбалансирован согласно существующих норм, а по остальным элементам приближался к нормам. Для восполнения недостатка минеральных веществ в рацион поросят III опытной группы вводили 2%, а в корма свиноматок, от которых они были получены 3% кремнеземистого мергеля Сиуч – Юшанского месторождения (от сухого вещества корма), что соответствовало количеству микроэлементов вводимых в рацион животных II группы в составе полисолей. Отъём поросят от свиноматок проводили в 60 суточном возрасте. В 1, 60, 105 и 270 суточном возрасте свиней проводили убой по три головы из каждой группы. В отобранных во время убоя образцах трубчатых костей определяли содержание Воды, кальция и фосфора. Анализ химического состава костной ткани трубчатых костей животных (таблица 1) показывает уменьшение концентрации воды в ткани за период опыта, связанное с созреванием органического матрикса и процессами кристаллизации минеральной фазы кости. Содержание воды в ткани трубчатых костей животных II группы за 9 месяцев роста и развития уменьшилось на 45,42 % (<0,05). В I опытной группе животных количество воды в костной ткани костей скелета за 270 суток роста и развития снизилось на 32,76 %(P<0,05). Сравнивая значения этого показателя в I и II опытных группах животных можно отметить, что при рождении поросят содержание воды в трубчатых костях животных этих групп было практически одинаковым, в 60-суточном возрасте поросят отмечалась тенденция понижения содержания воды во II группе на 16,31 % (P>0,05) по сравнению с уровнем I группы. В период доращивания отмечалось активное увеличение воды в костях животных II группы, и этот показатель был на 25,4 % (P>0,05) больше, чем у животных I группы. К концу откорма (270-суточный возраст свиней) значения этого показателя во II группе на 10,23 % (P<0,01) были больше по сравнению с I группой. Содержание воды в ткани трубчатых костей животных �� III�� группы за период опыта снизилось на 33,31 %(P<0,05). Активная потеря воды из ткани трубчатых костей в III группе наблюдалась в период доращивания, то есть от 60 до 105 суток. Сравнивая содержание воды в ткани костей животных �� I�� , II�� и III�� групп, нужно отметить, что количество воды в костях животных III опытной группы при рождении было меньше на 5,01 % (P<0,05) и 8,42 % (P<0,1), чем в I и II группах соответственно. В возрасте 60 суток значения этого показателя в III группе были на 3,07 % (P<0,05) меньше, чем в I группе и на 15,81 % (P>0,05) больше, чем во II группе. Количество воды в ткани трубчатых костей животных III�� группы были меньше, чем в I�� и �� II�� группах в 105-суточном возрасте поросят на 26,9 % (P>0,05) и 41,71 % (P<0,001), а в 9-месячном возрасте – на 5,4 % (P<0,05) и 14,19 % (P<0,01) соответственно. Содержание кальция в костной ткани свиней за 9 месяцев постанатального онтогенеза увеличилось во всех группах подопытных животных с 11,13-12,51 г до 16,0-17,5 216 г / 100 г натуральной ткани. В то же время можно отметить тенденцию более высокого содержания кальция в ткани костей скелета поросят II опытной группы по сравнению с I группой на протяжении первых 105 суток развития животных. Различия между этими группами составляли 4,9 % (�� P�� <0,05), 6 % (�� P�� <0,05), 4,09 % (�� P�� <0,1) в 1, 60, 105-суточном возрасте соответственно. Следовательно, введение в рацион свиней полисолей способствовало в этот период более активной кальцификации костей скелета свиней. Однако у 9-месячных свиней I и II групп статистически значимых различий по уровню кальция мы не установили (рис. 1). Рис. 1. - Характеристика минеральной фазы трубчатых костей свиней Концентрация кальция в ткани трубчатых костей поросят III опытной группы также была выше, чем у животных I группы. Причем, обнаруженные нами различия по этому показателю были более четко выражены, чем между I и II опытными группам и составили 9,7 % (P<0,01), 9,3 % (P<0,01), 8,4 % (P<0,05) и 9,3 % (P>0,05) в 1, 60, 105 и 270-суточном возрасте соответственно. В то же время прослеживалась тенденция более активной кальцификации костной ткани свиней III опытной группы по сравнению со II опытной группой. Уровень кальция в ткани костей скелета свиней III группы был выше, чем во II на 4,1 % (P<0,1) в суточном, на 3,5 % (P<0,01) в 2-месячном возрасте. Изменение концентрации фосфора в костной ткани поросят в возрастном аспекте имело ту же направленность, что и кальция. Содержание фосфора в костной ткани свиней за 270 суток постнатального развития увеличилось во всех группах подопытных животных с 5,066,31 г до 6,5-6,9 г /100 г натуральной ткани. В то же время можно отметить тенденцию более высокого содержания фосфора в ткани костей скелета поросят II�� опытной группы по сравнению с �� I�� группой на протяжении всех 9 месяцев развития животных. Различия между этими группами составили 6,72 % (P<0,001), 8,33 % (P<0,001), 1,5 % (P>0,05) и 5,54 % (P>0,05) в 1, 60, 105 и 270-суточном 217 возрасте соответственно. Следовательно, введение в рацион свиней полисолей способствовало более активному отложению фосфора в костях скелета свиней (рис. 2). Концентрация фосфора в ткани трубчатых костей поросят III опытной группы также была больше, чем у животных I группы. Причем обнаруженные нами различия по этому показателю были более четко выражены, чем между I и II опытными группами и составили 24,7 % (P<0,001), 18,89 % (P<0,1), 12,83 % (P>0,05) и 6,15 % (P<0,001) в 1, 60, 105 и 270-суточном возрасте соответственно. В то же время прослеживалась тенденция более активного отложения фосфора в костной ткани свиней III опытной группы по сравнению Рис. 2. - Характеристика минеральной фазы трубчатых костей свиней Рис. 3. - Характеристика минеральной фазы трубчатых костей свиней 218 со II опытной группой. Уровень фосфора в ткани костей скелета свиней III группы был выше, чем во II группе на 16,85% (P<0,001), 9,74 % (P<0,1), 11,17 % (P>0,05) и 4,39 % (P<0,001) в 1, 60, 105 и 270-суточном возрасте соответственно. Отношение Ca : P в костях свиней за 9 месяцев роста и развития увеличивалась во всех группах подопытных животных с 1,98 - 2,26 г до 2,52-2,54 г/100 г натуральной ткани. В то же время хочется отметить, что отношение Са : Р в ткани костей скелета поросят II опытной группы по сравнению с I группой на протяжении опыта мы не установили статистически значимых различий (рис. 3). Отношение Са : Р в костях поросят в III опытной группе было на 3,98% (P<0,05), 6,04 % (P<0,001) и 3,88 % (P<0,02) в 1, 60, 105-суточном возрасте соответственно меньше, чем в I группе. В 270 суток этот показатель различий практически не имел. Отношение Са : Р в ткани костей скелета свиней III группы было ниже, чем во II на 5,65 % (P<0,001) и 6,3 % (P>0,05) в 60 и 105-суточном возрасте, а в 270 суток на 1,6 % (P<0,1) больше. Наши данные согласуются с другими исследователями [1,2,3], которые показывают, что под влиянием добавок цеолита повышается содержание минеральных элементов и регенерация костной ткани. Выводы. 1. Анализ химического состава костной ткани указывает на понижение в ней концентрации воды, связанное с созреванием органического матрикса и процессами кристаллизации минеральной фазы костной ткани с возрастом животных. Причём, влажность костной ткани в первой и второй группы постепенно начала уменьшаться с двух месяцев, а во второй группе с тёх месячного возраста. 2. Введение в рацион свиней добавок кремнеземистого мергеля создало более благоприятные условия для отложения кальция и фосфора в их костную ткань, чем добавки полисолей. 3. Отношение кальция к фосфору на протяжении всего опыта возрастает, это, по видимому, связано со структурными изменениями неорганической фазы кости, что отражает накопление кристаллической фракции фосфата кальция. AGE FEATURES OF BONE FABRIC OF YOUNG GROWTH OF PIGS AT INTRODUCTION IN A DIET OF MINERAL ADDITIVES Shlenkina t.M. Candidate of Biology, associate professor FGBOU VPO “Ulyanovsk GSHA of P.A.Stolypin”. 8(8422) 55-95-64 Keywords: silicic marl, polysalts, calcium, phosphorus, bone fabric, diet, organic ма�� трикс, mineral phase. Researches on application of silicic marl of Siuch – the Yushansky field as mineral top dressing in diets of pigs are conducted. The analysis of the obtained data specifies on decrease in water in bone fabric, and also creates favorable conditions for calcium and phosphorus adjournment in bone fabric. 219 Библиографический список: 1. Бледнова А.В. Влияние квантовой энергии и природных цеолитов на репаративную регенерацию костной ткани при интрамедуллярном остеосинтезе у собак : Дис. ... канд. вет. наук : 16.00.05, 16.00.04 : Воронеж, 2003. 135 c. 2. Герасев А.Д., Луканина С.Н., Сигарева Н.А Святаш Г.А. Влияние цеолитов на регенерацию костной ткани в эксперименте «Актуальные вопросы ветеринарии»: материалы научно-практической конференции, Новосибирск, 2001. 3. Герасев А.Д., Луканина С.Н., Святаш Г.А. и др. Влияние цеолитов на минеральный обмен организма // Бюл. СО РАМН, 2004. Т. 114, № 4. C. 91-95. 4. Диких Н.Ю. Цеолиты в рационах молодняка свиней // Ветеринарная жизнь. 2006. № 20. С. 15. 5. Казакова Н.В., Саткеева А.Б., Пак В. Цеолит в рационах молодняка свиней на откорме // Аграрный вестник Урала. 2007. Т. 42, № 6. С. 65-67. 6. Кальницкий Б.Д. Особенности минерального питания и депонирования макрои микроэлементов в организме молодняка свиней при раннем отъеме. В кн.: Биохимия питания и кормления молодняка сельскохозяй-ственных животных при раннем отъеме. Сб. научн. тр. – Боровск, 1982. – с.14-21. 7. Рахимов А.Р. Применение природных цеолитов Майнского месторождения для профилактики нарушения минерального обмена у коров: дисс. ... канд. вет. наук. Казань, 2001. 8. Стеценко И.И., Любин Н.А., Шленкина Т.М. Активность роста и прочность костей скелета свиней при введении в рацион минеральных добавок. Научно – теоретический журнал «Вестник» Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии, №2 (14), 2011. – С…41 - 46 9. Стеценко И.И., Любин Н.А., Шленкина Т.М. Биохимические законо-мерности формирования костной ткани свиней под воздействием минеральных добавок. Научно – теоретический журнал «Вестник» Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии, №4 (16), 2011. – С….57 – 63. 10. http://www.fermadoma.ru/2010-04-22-16-05-37 УДК 619:616-07 БОЛЕЗНИ КОПЫТЕЦ У КОРОВ В РАЗЛИЧНЫХ СТРАНАХ МИРА Якоб В.К., аспирант кафедры хирургии, акушерства и ОВД Ермолаев В.А., доктор ветеринарных наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: корова, язва, болезни копытец Работа посвящена изучению болезней копытец у коров в различных регионах Европы, США и Канады, а также указанны меры профилактики и лечение, проводимое в 220 этих странах для данных заболеваний. Болезни конечностей становятся всё более острой проблемой для молочного производства во всём мире. Профилактические мероприятия важны для получения устойчивого производства, как в экономическом, так и животном аспекте. Сообщения о распространенности различных нарушениях в области дистального отдела конечностей в молочных стадах, стали появляться достаточно часто течение последних лет. Распространённость пододерматита на много возросла за последние 20 лет на промышленных комплексах, чего нельзя сказать о фермерских хозяйствах. Данные из исследовательского центра Kungsängens показывают, что различные эрозии в области копытец и профилактические мероприятия имеют большое значение. Как правило, чтобы предотвратить копытные заболевания, нужна регулярная обработка, хорошая гигиена окружающей среды и особое внимание к коровам в чувствительные периоды жизни. Общая стоимость хромой коровы в странах Европы составляет около 245 €. Стоимость животного с единичной язвой мякиша составляет 160 €, в то время как общая стоимость лечения одного случая пододерматита составляет 99 €. Это означает, что в единичный случай язвы мякиша имеет, больший экономический эффект, чем один случай пододерматита. Распространенность в странах для пододерматита колеблется от 20% до 35%, а распространенность язвы мякиша колеблется от 4% до 10%. Поскольку распространение пододерматита выше, во многих стадах, то удельные затраты на пододерматит на100 коров, это 1973 € (20% распространенности) или 3453 € (35% распространения), а удельные затраты на 100 коров, с язвой мякиша 641 € (4% распространенности) или 1282 € (10% распространенности). Это означает, что общее экономическое воздействие пододерматита может быть выше, чем для язвы мякиша в конкретном стаде. Проблемы конечностей в молочном стаде возросла за последние десятилетия (Кларксон и др., 1996; Сомерс и др., 2003) и в настоящее время является третьим по распространенности и стоимости заболеванием молочных комплексов, стоящих перед сегодняшними хозяйствами (Watson, 2007). Выбраковка из-за плохого здоровья копытец в Швеции увеличилось с 3% до 6% в течение последних 20 лет (Манске и соавт., 2002). Согласно исследованию, проведенному Манске и соавт. (2002), более 72% коров в шведских молочных фермах имеют какие-то поражения копытец. Увеличение заболеваний копыт и конечностей может быть связано с более интенсивным производством, с повышенным надоем молока, так же из-за невозможности уследить за всеми животными. (Шведская Молочная ассоциация, 2011). Хромота оказывает негативное влияние на потребление корма за счет уменьшения способности ходить и стоять во время питания. Исследования, проведенные Грин и др.. (2002) показали, что суммарные потери в течение 305 дней лактации составляют примерно 360 кг. Также с хромотой связано снижение рождаемости. Использование AMS (система автоматического доения) становится все более распространенным в молочных хозяйствах, особенно в Европе (Borderas и соавт., 2007), а также предлагается сократить ручной труд и в то же время увеличить частоту доения (Borderas и соавт., 2007) . Тем не менее, успешное производство молока с AMS зависит от коров, добровольно посещения доильного аппарата (Рашен и др., 2004; Баха и др., 2007; Borderas и др., 2007), что делает последствия болезней конечностей еще более суровыми. Исследования показали, что хромые коровы меньше посещают доильные аппараты 221 (Рашен и др., 2004; Баха и др., 2007), это приводит к уменьшению надоев в день, что приводит не только к снижению прибыли (Borderas и др. ., 2007), но может также увеличивает риск развития мастита (Agenäs, 2011). Копытные заболевания можно разделить на две различные категории, инфекционно-воспалительные заболевания и неинфекционных проблемы, вызванные экологическими факторами. К первой категории относятся такие заболевания, как инфекционный пододерматит, а вторая включает в себя ламинит (Манске и соавт., 2002). Пододерматит был впервые описан в Италии 1974 (Cheli и Mortellaro, 1974) и в настоящее время присутствует во всей Европе, США, Австралии и Японии (Watson, 2007) . Больные животные часто поднимают и трясут инфицированной ногой, как бы пытаясь чтото удалить, стараются не наступать на неё. Одним из признаков является специфический запах. Лечение пододерматита включает в себя антибиотики, сульфат меди, формалин, сульфат цинка, или другие дезинфицирующие средства. Эрозии копытного рога являются общим поражением копыта, связанным в основном с влажной окружающей средой. Кератин, содержащийся в роговых клетках, растворяется в моче, что приводит к деградации копытного рога (Андерсон, 1982). Копытный рог может дополнительно разрушаться бактериями Bacteroides nodosus которая обычно находятся в желудочно-кишечном тракте коровы (Йоханнессон, 2003). Эрозия копытного рог может развиваться вторично при пододерматите. (Йоханнессон, 2003). Больные животные обычно угнетены, что приводит к снижению потребления корма и, следовательно, снижению молочной продуктивности (Манске, 2002). Незначительные повреждения копытного рога могут излечиться спонтанно, но, как правило, обрезка копыта является основным лечением этого заболевания. Кроме того, ванны для ног содержащие формалин могут быть эффективным лечением (Сомерс и соавт., 2005c). Распространенность заболевания в последние годы Исследование, проведенное в штате Висконсин (США) показывает распространенность хромоты летом до 21,1% ± 10,5%, а зимой она составила 23,9% ± 10,7%. Из них тяжелая хромота имела 3,0%, распространенности в диапазоне от 0,0% до 16,7%, летом и 3,2%, в диапазоне от 0,0% до 12,3%, в зимний период. В другом исследовании, в штате Миннесота средняя распространенность хромоты для всех групп было 24,6%, в диапазоне от 3,3% до 57,3%. Распространенность тяжелой хромоты была 6% (Espejo и соавт., 2006). Среди хромых коров в США 16% определяется с язвами, а ежегодный риск заболеваемости был установлено на уровне 7,8% (Сандерс и соавт., 2009). Данные из Великобритании показывают, что из всех исследуемых коров распространенность хромоты составила 34,9% (Амори и соавт., 2008). Отчет из Великобритании, в том, что распространенность хромота коров, была измерена в 2 балла были 31,5% и на 3 балла было 5,3%. В датском исследовании, хромых животных было 5% от исследуемых коров, и из них, 2,3% были тяжелыми хромой (Capion и соавт., 2008). (Сapion и соавт. 2008) обнаружили, что распространенность язвенного поражения была 6% в исследовании, проведенном в Дании. Исследование, проведенное, в Норвегии сообщает, что задние конечности сильнее пострадали от хромоты, чем передние. Распространенность хромоты на задних конечностях составила 0,7% среди всех рассмотренных коров (Sogstad и соавт., 2005a). В 222 большинстве случаев хромота присутствовала при решетчатых полах в связи с механическими поврежденьями конечностей животных (Fjeeldas и соавт., 2011). Sogstad и соавт. (2005a) сообщили, что в ходе исследования у крупного рогатого скота в Норвегии была распространенна язва мякиша в беспривязном содержании составила 3,0%, а в привязном 2,6%. Распространенность язв у телок в исследовании, проведенном в Норвегии сообщилось, что заболеваемость на низком уровне, передние конечности были затронуты на 0,3% и задних у 0,5% (Sogstad и соавт., 2005b). По данным другого исследования, в Норвегии распространенность язв составил 2,9% (Fjeeldas и соавт., 2011). В результатах изучения распространенности различных язв на конечностях в Нидерландах составила 4,8% (Сомерс и соавт., 2003). По данным другого исследования, в 5,4% (Ван-дер-Waaij и соавт., 2005). В другом исследовании, в Нидерландах количество коров пострадавших от язв конечностей варьировалось от 0-26%, а среднее значение было 5,6%. (Holzhauer и соавт., 2008). По данным исследования, из Нидерландов, было показано, что больными чаще всего являются задние конечности, распространенность составила 37,4% и колебалась от периода содержания стада, с 1 до 63% и в течение пастбищного и от 2 до 73% в стойловый период. Коровы на бетонном полу имели средний показатель в 30%, и все стада на бетонном полу были затронуты. Коровы на мягкой подстилке были затронуты в меньшей степени (Сомерс и соавт., 2003). В другом исследовании, проведенном в Нидерландах распространенность пододерматита составила 21,2% (Holzhauer и соавт., 2006). (Ван дер Waaij и соавт. 2005) обнаружили, что распространенность инфекционного пододерматита проведенном в Нидерландах была в 21,7%. В Финляндии (Kujala и соавт. 2009) обнаружили, что 442 из 11 302 коров (3,9%) были с язвами на конечностях. При беспривязном содержании 226 коров из 5490 были с язвами (4,1%). Пододерматит является одним из наиболее распространенных заболеваний конечностей в Канаде в исследовании (Крамера и соавт. 2008). Согласно этому исследованию распространенность пододерматита при привязном содержании составила 9,3%. Распространенность данной болезни была выше при беспривязном содержании и составила 22,9% коров от исследуемого поголовья. МЕРЫ ПРОФИЛАКТИКИ Исследование Alban (1995) показали, что коровы, которые телятся во время стойлового периода (октябрь-апрель) имели более высокий риск развития хромоты по сравнению с коровами, что отелились в течение пастбищного периода (май-сентябрь). Это могло быть, по мнению автора, связанно с различиями в климате, питание и окружающей среде. В целом, больше выпаса скота на свежем воздухе, снижает хромоту (Bielfeldt и др., 2005). Хозяйства с использованием половины пастбищ - половину стойлового содержания имеют более низкий уровень хромоты (Faye и Lescourret, 1989). Так как моцион, вероятно, снижает риск возникновения хромоты (Густафсон, 1993; Alban, 1995). Другие исследования показывают, что часто хромота несколько выше, при беспривязном содержании (Faye и Lescourret, 1989;. Sogstad и др., 2005). Это может быть связано с более высокой степенью влажности навоза в этих системах и, следовательно, надлежащее удаление навоза и сточных вод имеет большое значение (Blowey, 2005). Мокрый пол не только уменьшает твердость копыт и делает их более восприимчивыми к износу и повреждению, но может также увеличить риск передачи бактерии, вызывающие инфек- 223 ционные заболевания копыт (Рашен и соавт., 2004). Резиновые полы, особенно в проведении выгула (Strudsholm, 2011), может снизить заболеваемость хромоты, хотя и на них быть проблемы (Blowey, 2005; Кремер и др., 2006. ). Однако, это может быть компенсировано за счет того, что резиновые полы уменьшают травматизм и тем самым снижается хромота (Blowey, 2005). Использование песка в качестве подстилки показало в Дании хороший результат. Песок положительно влияет на комфорт коровы и здоровье копыта (Strudsholm, 2011). В целом, исходя из приложенного материала, можно подвести итог, что заболевания копытец у крупного рогатого скота достаточно распространенно по всему миру и при всех системах содержания, поэтому новые технологии профилактики и лечения болезней копытец у коров должны развиваться. Библиографический список: 1.Agenäs, S. Assistant professor, Swedish university of agricultural science. Sweden. Personal message, 2011-10-03. 2.Alban, L. (1995). Lameness in Danish dairy cows: frequency and possible risk factors. Preventive Veterinary Medicine, vol. 22, pp. 213-225. 3.Amory, J.R., Barker, Z.E., Wright, J.L., Mason, S.A., Blowey, R.W. & Green, L.E. (2008). Associations between sole ulcer, white line disease and digital dermatitis and the milk yield of 1824 dairy cows on 30 dairy cow farms in England and Wales from February 2003–November 2004. Preventive Veterinary Medicine, vol. 83, pp. 381–391. 4.Andersson, L. (1982). Klövar Om klövvård och klövsjukdomar. 3. Ed. Hållsta. SHS Text och tryck service. 5.Barker, Z.E., Leach, K.A., Whay, H.R., Bell, N.J. & Main, D.C.J. (2010). Assessment of lameness prevalence and associated risk factors in dairy herds in England and Wales. Journal of Dairy Science, vol. 93, pp. 932-941. 6.Biefeldt, J. J., Badertscher, R., Tölle, K. H. & Krieter, J. (2005). Risk Factors influencing lameness and claw disorders in dairy cows. Livestock Production Science, vol. 95, pp. 265-271. 7. Borderas, T. F., Fournier, A., Rushen, A & de Passillé, A. M. (2007). Effect of lameness on dairy cows’ visits to automatic milking systems. Canadian Journal of Animal Science, vol. 88, pp. 1-8. 8.Blowey, R. (2005). Factors associated with lameness in dairy cattle. Farm Animal Practice, vol. 27, pp. 154-162. 9.Capion, N., Thamsborg, S.M. & Enevoldsen, C. (2008). Prevalence of foot lesions in Danish Holstein cows. Veterinary Record, vol. 163, pp. 80-86. 10. Cheli, R. & Mortellaro, C. (1974). La dermatite digitale del bovino. Proc. Of the 18th Int. Meeting on diseases of cattle, Milan, pp 208-213. 11. Clarkson, M.J., Downham, D.Y., Faull, W.B., Hughes, J.W., Manson, F.J., Merritt, J.B., Murray, R.D., Russel, W.B., Sutherst, J.E. & Ward, W.R. (1996). Incidence and prevalence of lameness in dairy cattle. The Veterinary Record, vol. 138, pp. 563-567. 12. Cramer, G., Lissemore, K.D., Guard, C.L., Leslie, K.E. & Kelton, D.F. (2008). Herd and Cow level Prevalence of Foot Lesions in Ontario Dairy Cattle. Journal of Dairy Sciences, vol. 91, pp. 3888-3895. 13. Cramer, G., Lissemore, K. D., Guard, C. L., Leslie, K. E. & Kelton, D. F. (2009). Herd- 224 level risk factors for seven different foot lesions in Ontario Holstein cattle housed in tie stalls or free stalls. American Dairy Science Association, vol. 92, pp. 1404-1411. 14. Espejo, L.A., Endres, M.I. & Salfer, J.A. (2006). Prevalence of Lameness in HighProducing Holstein Cows Housed in Frestall Barns in Minnesota. Journal of Dairy Sciences, vol. 89, pp. 3052-3058. 15. Faye, B. & Lescourret, F. (1989). Environmental factors associated with lameness in Dairy cattle. Preventive Veterinary Medicine, vol. 7, pp. 267-287. 16. Fjeldaas, T., Sogstad, Å.M. & Østerås, O. (2011). Locomotion and claw disorders in Norwegian dairy cows housed in freestalls with slatted concrete, solid concrete or solid rubber flooring in the alleys. Journal of Dairy Science, vol. 94, pp. 1243-1255. 17. Green, L. E., Hedges, V. J. & Schukken, Y. H. (2002). The impact of clinical lameness on the milk yield of dairy cows. Journal of Dairy Science, vol. 85, pp. 2250-2256. 18. Gustafson, G. M. (1993). Effects of daily exercise on the health of tied dairy cows. Preventive Veterinary Medicine, vol. 17, pp. 209-223. 19. Holzhauer, M., Hardenberg, C. & Bartels, C. J. M. (2008). Herd and cow-level prevalence of sole ulcers in the Netherlands and associated-risk factors. Preventive Veterinary Medicine, vol. 85, pp. 125-135. 20. Johannesson P. (2003) Miljö- och skötselfaktorer som påverkar förekomsten av klövröta hos svenska mjölkkor. Examensarbete. Skara, Sveriges Lantbruksuniversitet. ISSN 16507045. 21. Kremer, P. V., Nueske, A. M. & Foerster, M. (2006). Comparison of claw health and milk yield in dairy cows on elastic or concrete flooring. American Dairy Science Association, vol. 90, pp. 4603-4611. 22. Kujala, M., Dohoo, I.R., Laakso, M., Schnier, C. & Soveri, T. (2009). Sole ulcers in Finnish dairy cattle. Preventive Veterinary Medicine, vol. 89, pp. 227-236. 23. Manske T. (2002). Hooflesions and lameness in Swedish Dairy Cattle. Doctoral thesis. Skara: Swedish University of Agricultural Sciences. 24. Rushen, J., de Passillé, A. M., Borderas, F., Tucker, C. & Weary, D. (2004). Designing better environments for cows to walk and stand. Advances in Dairy Technology, vol. 16, pp. 55. 25. Sanders, A. H., Shearer, J. K. & De Vries, A. (2009). Seasonal incidence of lameness and risk factors associated with thin soles, white line disease, ulcers, and sole punctures in dairy cattle. Journal of Dairy Science, vol. 92, pp. 3165-3174. 26. Sogstad, M., Fjeldaas, T., Østerås, O., & Plym Forshell, K. (2005a). Prevalence of claw lesions in Norwegian dairy cattle housed in tie stalls and free stalls. Preventive Veterinary Medicine, vol. 70, pp. 191-209. 27. Sogstad, M., Fjeldaas, T. & Østerås, O. (2005b). Lameness and Claw Lesions of the Norwegian Red Dairy Cattle Housed in Free Stalls in Relation to Environment, Parity and Stage of Lactation. Acta Veterinaria Scandinavica , vol. 46, pp. 203-217. 28. Somers, J. G. C. J., Frankena, K., Noordhuizen-Stassen, E. N. & Metz, J. H. M. (2003). Prevalence of claw disorders in Dutch dairy cows exposed to several floor system. Journal of Dairy Science, vol. 86, pp. 2082-2093. 29. Somers, J. G. C. J., Frankena, K., Noordhuizen-Stassen, E. N., Metz, J. H. M. (2005a) Risk factors for digital dermatitis in dairy cows kept in cubicle houses in the Netherlands. Preventive Veterinary Medicine 71, 11-21. 225 30. Somers, J. G. C. J., Frankena, K., Noordhuizen-Stassen, E. N. & Metz, J. H. M. (2005b). Development of claw traits and claw lesions in dairy cows kept on different floor systems. Journal of Dairy Science, vol. 88, pp. 110-120. 31. Somers, J.G.C.J., Frankena, K., Noordhuizen-Stassen, E.N. & Metz, J.H.M. (2005c). Risk factors for interdigital dermatitis and heel horn erosion in dairy cows kept in cubicle houses in the Netherlands. Preventive Veterinary Medicine, vol. 71, pp. 23-34. 32. Van der Waaij, E.H., Holzhauer, M., Ellen. E., Kamphuis, C. & de Jong, G. (2005). Genetic parameters for claw disorders in Dutch dairy cattle and correlations with conformation traits. Journal of Dairy Science, vol. 88, pp. 3672-3678. 33. Watson, C. (2007). Lameness in cattle. Wiltshire, UK: The Crowood Press ISBN: 978 1 86126 905 8. DISEASES OF THE HOOVES OF COWS IN DIFFERENT COUNTRIES OF THE WORLD Jacob V.K., Yermolaev V.A. Key words: cow, ulcer, disease hooves This is a study of disease in cows hooves in various regions of Europe, the U.S. and Canada, as well as an indication prevention and treatment given in these countries for these diseases. 226 ИНЖЕНЕРНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ АПК УДК 631.5 УСТРОЙСВО ДЛЯ ПЕПЕРАБОТКИ ПТИЧЬЕГО ПОМЁТА Н.Н. Аксёнова, кандидат технических наук ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А Столыпина» Тел. 8 927 80 89 559; Е-mail: [email protected] Ключевые слова: птичий помёт, переработка помета, сушка помёта В работе представлен анализ технологий и средств переработки птичьего помёта. Предложена установка для сушки птичьего помёта. Условия содержания птицы в современных условиях - это, прежде всего сосредоточение на ограниченных площадях большого поголовья, использование многоярусных батарей, создание искусственного микроклимата в помещениях, включение в рационы нетрадиционных кормов. Одна средней мощности птицефабрика (400 тыс. кур-несушек или 6 млн. цыплят бройлеров) за год «вырабатывает» до 40 тыс. т. помета. К утилизации такого количества отходов хозяйства России оказались неподготовленными и буквально обрастают залежами. Так пропадает природное сырье для получения удобрений и появляется реальная опасность загрязнения окружающей среды. В мировой практике применяются множество способов переработки куриного помета. Рассмотрим существующие методы утилизации и переработки помета: а) биотермический метод переработки используются на небольших птицеводческих фабриках. При выходе 10…15 т помета в сутки, влажностью 60…65 %, его загружают в ямы, построенные из влаго- и термоустойчивого материала, закрывают крышками с отверстиями для притока воздуха и выдерживают 35…40 суток. В результате образуется однородный, не имеющий запаха компост, пригодный для удобрения почвы. Этот метод не пригоден для использования на современных крупных птицеводческих фабриках с ежедневным производством не менее 200 т жидкого помета, влажностью 75…85 %; б) метод электроосмоса заключается в сушке помета энергией СВЧ. Он не приемлем из-за значительных затрат электрической энергии, всегда дефицитной в мегаполисах; в) метод термического обезвоживания куриного помета является наиболее прогрессивным и эффективным. Предпочтение все больше отдается термическим технологиям, параметры которых контролируемы и поддаются управлению. Основная цель - обезвоживание (сушка) и обеззараживание сырой пометной массы. 227 Термическая сушка птичьего помета в сушильных установках - наиболее эффективный способ переработки этого ценного органического удобрения. При термической сушке масса сырого птичьего помета уменьшается в 3…4 раза, а физические свойства сухого удобрения позволяют вносить его в почву практически всеми машинами, предназначенными для разбрасывания минеральных удобрений. Сушка помёта при температуре теплоносителя 600…800 °С способствует уничтожению патогенных бактерий, яиц гельминтов и семян сорняков. В процессе термической обработки сырой помет превращается в сыпучее вещество влажностью 12…14 %. Из 1 т помета влажностью 65…70 % получается до 300…350 кг сухого продукта. Термически высушенный птичий помет не имеет неприятного запаха и может быть затарен в бумажные или полиэтиленовые мешки. Наиболее распространенными являются установки для сушки помёта туннельного типа с конвективным способом подвода теплоты. На рисунке 1 приведена схема коридорной (туннельной) сушильной установки с вагонетками, предназначенными для перемещения материала. Рис. 1. – Туннельная сушилка: 1 – канал (коридор); 2 – транспортирующие устройства (вагонетки); 3 – вентилятор; 4 – калорифер Туннельная сушилка представляет собой камеру с одним или несколькими параллельно расположенными закрытыми каналами 1, вдоль которых в вагонетках 2 медленно перемещается высушиваемый материал. Однако существующие технологии сушки помёта характеризуются технической сложностью организации данного процесса, а существующие установки для сушки помёта энергозатратны и обладают высокой неравномерностью сушки. Это приводит к тому, что помет чаще используют сырым. В результате на поля в большом количестве попадают семена сорняков, яйца гельминтов, патогенная микрофлора. С целью устранения указанного явления нами предложено устройство для сушки птичьего помёта (рисунок 2) [2]. 228 Рис. 2. – Устройство для сушки птичьего помёта (обозначения в тексте) Устройство работает следующим образом. От электродвигателя 9 посредством передачи 10 приводят во вращение транспортирующий орган 5. Включают вентилятор 6 и нагревательные элементы 8. Затем подают птичий помет в загрузочный бункер 2, откуда он поступает в кольцевой зазор между кожухом 1 и перфорированным стаканом 4, где захватывается винтовой поверхностью вращающегося транспортирующего органа 5 и по внешней поверхности перфорированного стакана 4 перемещается к выгрузному окну 3. Нагретый воздух проходит через внутреннюю полость и перфорацию стакана 4, поступает в кольцевой зазор между кожухом 1 и перфорированным стаканом 4. В кольцевом зазоре, проходя через слой помета, нагретый воздух отбирает у него излишки влаги и выходит наружу через загрузочный бункер 2 и выгрузное окно 3. В процессе работы устройства воздух также нагревает перфорированный стакан 4. Контактируя с нагретой поверхностью перфорированного стакана 4, помет также нагревается и теряет излишки влаги, которые в виде пара удаляются через загрузочный бункер 2 и выгрузное окно 3 потоком, воздуха, создаваемым вентилятором 6. Сухой помет удаляется из устройства через выгрузное окно 3. Устройство можно применять как автономно, так и в составе технологических линий для переработки помета. Оно позволяет снизить удельную энергоемкость процесса сушки помета и улучшить качество готового продукта. Библиографический список: 1. Аверьянов Ю.И., Глемба В.К., Глемба К.В. Энергосберегающая технология переработки помета. Вестник. - Челябинск: ЧГАУ., 2009. 2. Курдюмов В.И., Аксенова Н.Н. Устройство для сушки помёта. Патент РФ на полезную модель № 91147. Опубл. 27.01.2010 г., Бюл № 3. 3. Курдюмов В.И., Аксенова Н.Н., Х.Х.Губейдуллин. Устройство для сушки помёта. Патент РФ на полезную модель № 91148. Опубл. 27.01.2010 г., Бюл № 3. 4. Курдюмов В.И., Аксенова Н.Н., Павлушин А.А., Спирина Е.В. Совершенствование средств механизации переработки птичьего помёта. -Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения: материалы IV Международной научно-практической конференции. - Ульяновск: УГСХА им. П.А.Столыпина, 2012. - С. 80-84. 229 УДК 631.3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОГРУЗЧИКА МИНЕРАЛЬНЫХ УДОБРЕНИЙ А.О. Барышов, аспирант ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Ключевые слова: спирально-винтовой рабочий орган, диаметр кожуха, производительность, коэффициенты осевого отставания и наполнения Работа посвящена определению максимальной производительности, энергоёмкости, коэффициентов осевого отставания и наполнения устройства для погрузки минеральных удобрений. В ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» была предложена схема погрузчика и проведены исследования по выявления оптимальных параметров погрузки минеральных удобрений, в качестве минерального удобрения была использована аммиачная селитра [2, 3]. В данной статье представлены исследования, в которых применялось минераль- ное удобрение – азофоска. Плотность азофоски составляет ρ = 1060 кг/м3, гранулометрический состав менее 1 мм - 3 %, от 1 до 6 мм – 95 %, менее 6 мм - 100 %. Спиральный винт с наружным диаметром d = 72 мм, шаг винтовой линии S = 70 мм, диаметр проволоки 1 – приёмный бункер; 2 – рама; 3 – кожух; 4 – электродвигатель. Рис. 1. – Общий вид погрузчика минеральных удобрений 230 δ = 8 мм, длина кожуха L = 4,6 м, внутренний диаметр кожуха Dn = 80 мм, угол наклона кожуха 450, частота вращения спирального винта n = 300...900 мин-1, теоретически V ≈ 0,02242 объем материала в кожухе T м3. На рисунке 1 изображен общий вид погрузчика минеральных удобрений. Определим массу материала при полном заполнении кожуха: GT = ρVT = 1060 ⋅ 0,02242 = 23,8 кг (1) При частоте вращения спирального винта 300 мин-1, масса материала заполненного кожуха составила Gm = 12,4 кг, энергоёмкость Коэффициент заполнения равен: N = 0,215 Вт ⋅ ч/кг. = K f G= 13,1= / 23,8 0,55 m / GT Осевая скорость винтовой поверхности (при 300 мин-1): vzn = Sn / 60 = 0,07 ⋅ 300 / 60 = 0,35 м/с (2) (3) Осевая скорость материала при этом: = vzm L= / t 4,6 / 38,9 = 0,118 м/с (4) Коэффициент осевого отставания: = K v v= 0,118= / 0,35 0,34 zm / v zn Результаты исследования занесены в таблицу 1. (5) Рис. 2. – Результаты исследования погрузчика минеральных удобрений 231 Таблица 1. Результаты исследования погрузчика минеральных удобрений n , мин-1 W , т/ч vzn , м/с vzn , м/с Kv Kf N , Вт ⋅ ч/кг 300 500 700 900 1,86 3,5 3,58 3,3 0,35 0,583 0,817 1,05 0,118 0,2 0,39 0,48 0,34 0,34 0,48 0,46 0,55 0,46 0,4 0,32 0,215 0,218 0,265 0,407 Рассмотрим данные исследования в виде графика представленного на рисунке 2. Исходя из графика видно, что производительность возрастает прямо пропорционально частоте вращения спирального винта до 700 мин-1, при которой она достигает максимального значения, а коэффициент заполнения кожуха уменьшается при увеличении частоты вращения спирального винта. Библиографический список: 1. Артемьев В. Г. Теория пружинных транспортёров сельскохозяйственного назначения // Ульяновск, 1997, 245 с. 2. Артемьев В.Г., Барышов А.О. Погрузчик минеральных удобрений // Материалы IV Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образо-вание на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения», Ульяновск, 2012, с. 30…34 3. Артемьев В.Г., Барышов А.О. Смеситель минеральных удобрений // Сельский механизатор, № 2, 2013, с. 8 RESEARCH RESULTS LOADER FERTILIZERS Baryshov A.O. Key words: spiral screw working body diameter casing, performance ratios of the axial gap and filling. Paper is to define the maximum performance, power consumption, the coefficients of the axial gap and filling device for the loading of mineral fertilizers. 232 УДК 631.347.4.004:681.3.06 АВТОМАТИЗАЦИЯ ПОДБОРА ДОЖДЕВАЛЬНЫХ МАШИН С. М. Васильев, доктор технических наук, доцент ФГБНУ «Российский научно-исследовательский институт проблем мелиорации» тел. 8(8635) 26-51-11, [email protected] Е. В. Павелко, аспирант ФГБНУ «Российский научно-исследовательский институт проблем мелиорации» тел. 8(8635) 26-51-11, [email protected] Ключевые слова: Дождевальная машина, подбор, этап, режим орошения, севооборот. Приводится уточненная программа для ЭВМ по подбору дождевальных машин для орошения без проектирования оросительной сети. Данная программа позволяет подобрать наиболее оптимальную дождевальную машину не только на первый год эксплуатации, но и на протяжении пяти лет работы на полях орошения различных дождевальных машин. В настоящее время эксплуатация оросительных земель, несмотря на очевидную выгоду, является дорогостоящим мероприятием. Если в недавнем прошлом все затраты, как правило, несло государство, то на сегодняшний день бремя расходов лежит на плечах сельхозпроизводителей. Как известно, дождевальные машины являются низовым звеном в иерархичной структуре мелиоративной системы, но стоимость даже отечественных моделей зачастую превышает несколько миллионов рублей. Правильно и своевременно подобрать дождевальную машину для конкретного орошаемого участка – задача ответственная и в некоторой степени трудоемкая. Актуальность наших исследований заключается в том, что сейчас весьма мало автоматизированных программ для подбора дождевальных машин, учитывающих мелиоративное состояние орошаемых полей, на которых эти устройства будут применяться. Ко всему прочему имеющиеся программы не имеют баз данных и часто приходится эту информацию вносить вручную. Для решения поставленной проблемы нами была разработана и предложена электронно-вычислительная программа для подбора наиболее выгодного комплекта дождевальных машин (ДМ). Данная программа имеет базу данных, которая содержит информацию о параметрах и характеристиках 87 ДМ, что делает возможным производить все вычисления автоматически. Имея в качестве исходных данных информацию по следующим позициям: режим орошения, севооборот, характеристику проектируемого участка местности, программа позволяет без проектирования оросительной сети определить наиболее выгодный вариант или хотя бы сузить до минимума список подходящих ДМ. 233 2-6 2-6 «Кубань-ЛК-1» Дефицит испаряемости, тыс. м3/га ЭДМФ «Кубань-Э» ЭДМК «Кубань-Л» МДФА-800/200 «Таврия» Наименование ДМ Скорость ветра, м/с До 10 До 10 Скорость впитывания в 1-й ч, см/ч 5 -30 5 -30 Глубина почвенного покрова, м > 0,5 > 0,5 Дождевальная техника 0,035 0,001 Условия районирования <5 <5 3,0 1,5 3,5 Глубина засоления грунтовых вод, м 3,0 Высота наземной части растений 1,5 2,5 0,3-0,8 0,3-0,8 Расчетная глубина корневой системы, м Хозяйственные 470 800 Минимальная ширина участка, м Почвенные Водохозяйственные 1 1 Прямоугольная Квадратная Конфигурация участка Климатические Минерализация воды, г/л Условия районирования ГеоморГидрогеологифолоБиологические ческие гические Таблица 1. Условия применимости поливной техники в зависимости от природных и хозяйственных факторов 5 5 Минимальная температура воздуха, ºС. 234 Зерновые, зернобобовые, технические Орошаемые культуры, поля, сады На первом этапе производиться подбор ДМ. Подбор ДМ должен отвечать следующим требованиям, а именно: 1 Технические характеристики машины должны соответствовать тем параметрам, которые имеются на участке (уклон местности, допустимая скорость ветра, возможная высота полива наземной части растений, минимальная скорость впитывания почвы, сельскохозяйственное назначение и т. д.). 2 Дождевальная машина должна «справляться» с установленным режимом орошения, то есть сроки проведения поливов не должны накладываться друг на друга. Это возможно при малом расходе ДМ на больших площадях и больших поливных нормах. 3 Выбранный вариант ДМ должен быть самым рентабельным. Первое условие для подбора ДМ показано в таблице 1, в которой отражены основные требования к поливной технике в зависимости от природных и хозяйственных факторов [1]. В таблице «Исходные данные» (характеристика участка) заполняют все ячейки (рисунок 1), после чего идет сравнение данных с таблицей «Технические характеристики ДМ», которая частично показана на рисунке 2. Рис. 1. – Исходные данные проектируемого участка КЗИ Обслуж персонал чел. на 1 машину Расход, л/с Дождевальная техника № Название ДМ ДДА – 100 МА 0,92 2 130 2 ДДА - 145 0,92 1 145 3 ДДПА – 130/140 0,92 1 140 4 ДДА – 100 ВХ 60 0,96 1 60 ДДА – 100 ВХ 80 0,96 1 80 ДДА – 100 ВХ 100 0,96 1 100 ДДА – 100 ВХ 130 0,96 1 130 5 6 7 ДДА-100ВХ 1 Рис. 2. – Фрагмент таблицы «Технические характеристики ДМ» 235 Для того чтобы начался третий этап нужно ввести данные в таблицу «Севооборот» (рисунок 3). № Наиме- Начало Конец нование вегетац. вегетац. культур периода периода 1 2 3 Кол-во дней Урожайность, ц/га Закупочная цена, ц/га Площадь, га Сельхоз. издержки, ц/га 5 6 7 8 9 4 Рис. 3. – Фрагмент таблицы «Севооборот» Затем необходимо в таблице «Режим орошения» (рисунок 4) проставить необходимые данные для проверки совместимости ДМ с режимом орошения (рисунок 5). № Наименование культур № Полива Поливная норма, м³/га 1 2 4 5 Рис. 4. – Фрагмент таблицы «Режим орошения» Дождевальная техника 1 2 3 4 5 6 7 Показатель Показатель Основные совместимости совместимости виды ДМ по 1 этапу по 2 этапу 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 ДДА-100ВХ № Рис. 5. – Фрагмент таблицы «Совместимость ДМ с режимом орошения» В таблице показаны два показателя совместимости: по первому этапу и по второму. Если ДМ не прошла по первому показателю, но прошла по второму, она все равно будет исключена из списка, то есть необходимо, чтобы ДМ соответствовала обоим показателям совместимости. Переходя к третьему этапу, нужно внести данные в таблицу «Тарифы и коэффициенты» (рисунок 6). Хотя программа и не дает 100 % точности в расчете прибыли (более точное количество можно получить при составлении укомплектованного графика водоподачи, не совсем точный расчет мощности на валу насоса), но это позволит оценить основные экономические показатели. После расчета прибыли нужно перейти во вкладку «Общий график», где построен общий график прибыли ДМ. 236 Рис. 6. – Общий вид вкладки «Тарифы и коэффициенты» Для дальнейшего анализа нужно перейти во вкладку «Результирующий график» (рисунок 7). График строится по десяти ДМ с максимальными значениями прибыли в порядке убывания. Рис. 7. – Результирующий график 237 Отличительной особенностью данной программы является наличие баз данных (информация о параметрах ДМ), что облегчает работу проектировщика. Использование данной программы снижает затраты рабочего времени на подбор ДМ на 10-15 %, что позволит подбирать ДМ, отвечающие экологическим требованиями требованиям экономической эффективности. Библиографический список: 1 Гниненко В.И., Кисиль А.А., Полякова В.Н., Сенчуков Г.А. Мелиорация земель. Технология полива дождеванием // Новочеркасск, 2005, 24 с. COMPUTERIZATION OF SPRINKLER IRRIGATION SYSTEM SELECTION Vasilyev S.M., Pavelko Ye.V. Key words: sprinkler irrigation system, selection, stage, irrigation mode, crop rotation. The adjusted computer program for the selection of sprinkler irrigation system without designing irrigation network is revealed. This program allows selecting the most optimal sprinkler irrigation system not only for the first year of operation but for five year period at the irrigation fields. 238 УДК 631.171 СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕХАНИЗИРОВАННЫХ ПРОЦЕССОВ В ПОЛЕВОДСТВЕ Г.В. Гаранин, кандидат технических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия им. П.А. Столыпина» 8(8422)55-95-90. [email protected] Ключевые слова: контроль качества, средства контроля, урожайность, способы управления. Для научного управления механизированными процессами в полеводстве необходимы средствам контроля качества работ, документация, обучение специалистов, разработка комплексной системы и отдельных средств механизированного и автоматизированного контроля качества и управления механизированными процессами. Составлена схема способов управления механизированными процессами в полеводстве. Механизированными процессами необходимо управлять, а это невозможно сделать без измерения нормативных показателей и надзора за их изменением, как в ходе данной полевой работы, так и всех механизированных процессов. «Управлять можно только тем, что можно измерить» [1]. Специалисты контролируют полевые работы в основном без каких-либо средств измерения и без документации, то есть «на глазок». Проблемы отсутствия эффективного контроля составляющих механизированного процесса в полеводстве - описаны в работах [2],[3],[4],[5] и др. Совершенен ли этот способ управления механизированными процессами? «На авось мужик и пашню пашет. На авось мужик и хлеб сеет» –давно известные пословицы о способах управления. Знаменитый историк В.О. Ключевский считал, что характер нашего человека, с его привычкой полагаться не на результаты кропотливого труда, а на удачу, «авось», сложился под влиянием занятий земледелием в природно-климатических условиях, не гарантировавших стабильные урожаи. Российские агрокомпании не испытывают недостатка в предложении современных западных технологий ведения полеводства. Средства на их внедрение тоже есть. Однако консерватизм, привычка соблюдать нормативы «на глазок» и полагаться на авось при использовании техники и технологий часто сводят на нет усилия крестьян. Разработана классификационная схема способов управления механизированными процессами в полеводстве (рисунок 1). 239 Рис. 1. - Классификационная схема способов управления механизированными процессами в полеводстве Способы управления механизированными процессами в полеводстве подразделяют на пять видов (таблица 1). Таблица 1. Характеристика способов управления механизированными процессами в полеводстве. Способы управления механизированными процессами в полеводстве 1.На самотек 2. «На глазок» 240 Характеристика способов управления механизированными процессами в полеводстве Достоинства Недостатки 1.Низкая урожайность. 2.Высокая себестоимость. 1.Достаточно низкой квалификации 3.Низкая производительработников. 2.Документация не веность труда. 4.Убыток. дется. 3.Не требуются средства кон5.Отсутствие развития. 6. троля и управления. 3.Не требуются Отсутствие анализа, раси не ведутся научные исследования. четов, выводов, решений, 4.Нет затрат на все это. 5. Не нужно правильных действий. Ренаучно думать, анализировать. зультат производства мало кого интересует. Важен сам процесс. 1.Нестабильная урожай1.Не требуется высокая квалификаность. 2.Завышенная себеция работников. 2.Документация стоимость. 3.Недостаточобрывочная, мизерная. 3.Не треная производительность буется система средств контроля труда. 4.Убыток. 5.Отсути управления. 3.Не требуются и не ствие развития ведутся научные исследования. 4.Нет 6. Отсутствие анализа, расзатрат на все это. 5. Не нужно научно четов, выводов, решений, думать и управлять. правильных действий 3. По интуиции 4.Научные 1.Таланты появляются сами – нет никаких затрат. 2.Приносят большой доход. 3.Не требуют помощи. 4.Украшают вышестоящее руководство. 1.Очень малая доля таланНикто не хочет видеть реальную кар- тов 2.Подготовить таланты тину, куда приятнее обозревать лаконевозможно (трудно). вые миниатюры в редких успешных хозяйствах. 5.Доказывают огромные возможности для других хозяйств. Требуется:1.Обучить руководителей, специалистов управлять полевыми 1.Открывают истинные пути повымеханизированными рашения урожайности, эффективности ботами с применением и производительности труда. 2.Руко- средств измерения и доводители и специалисты смогут при- кументации. 2.Обеспечить нимать обдуманные, обоснованные специалистов, преподарешения. 3.Снизится себестоимость вателей и учащихся учебзерна. 4. Начнется объективный ных заведений по этим анализ производства на всех уровспециальностям учебной нях управления. 5.Появится базовая литературой, средствами краеугольная основа для развития контроля качества механисельского хозяйства на собственных зированных работ в поледоходах. водстве, документацией. 3.Организовать научные исследования по этому направлению. 5.КомбинированСмотрите выше. Смотрите выше. ные Предлагается проводить оценку способов управления механизированными процессами в полеводстве при производстве зерна (таблица 2), для определения оптимальных вариантов. Таблица 2. Оценка способов управления механизированными процессами в полеводстве при производстве зерна. Способы управления механизированными процессами в полеводстве 1.На самотек 2.«На глазок» 3.По интуиции 4.Научные 5.Комбинированные Возможные результаты способов управления механизированными процессами в полеводстве Валовой сбор Доля в общем объеме Урожайность, по стране, млн. производства зерна, % ц/га тонн 30…35 10…12 50…60 30…40 16…25 65…90 2…3 30…60 100…130 1…2 30…70 115…150 и более 10…20 15…30 80…100 И в авиации, и в кораблестроении первые конструкторы самолетов и кораблей 241 все строили «на глазок», полагаясь на чутье и опыт, которые нередко подводили их. И как только ученые поставили на научную основу всю авиационную и кораблестроительную практику, отрасли достигли выдающихся результатов. Только научный способ управления механизированными процессами в полеводстве позволит повысить урожайность, эффективность и производительности труда. Для научного управления механизированными процессами в полеводстве, необходимо обеспечить хозяйства соответствующими средствами контроля качества механизированных работ, документацией, обучить специалистов. Необходима разработка комплексной системы и отдельных средств механизированного и автоматизированного контроля качества и управления механизированными процессами. Разработанная классификационная схема способов управления механизированными процессами в полеводстве и предлагаемая их оценка при производстве зерна полезны для выявления оптимальных вариантов. Библиографический список 1. http://www.icgrp.ru/docs/list/article/?action=showproduct&id=99 2. Гаранин Г.В. Не «на глазок», а по науке. Информационный бюллетень. Министерство сельского хозяйства Российской Федерации. 2012, №8. 3. Гаранин Г.В. Комплексная система средств контроля качества механизированных работ в полеводстве. Тракторы и сельхозмашины. №1, 2012. 4. Гаранин Г.В. Средства для технологического контроля и настройки МТА на качество и эффективность работы. Тракторы и сельхозмашины. №6, 2009. 5. Гаранин Г.В. Система технических средств контроля качества механизированных работ в полеводстве. Повышение энергетической и временной загрузки машиннотракторного парка. Ульяновск. Ульяновский сельскохозяйственный институт. 1984. IMPROVEMENT OF THE MECHANIZED PROCESSES IN FIELD HUSBANDRY Garanin G.V. Key words: The mechanized processes, ways of management, quality control, control devices, productivity. Documentation, training of experts are necessary for control devices of quality of works for scientific management of the mechanized processes in field husbandry. Development of complex system and separate means of the mechanized and automated quality control and management of the mechanized processes is necessary. The classification scheme of ways of management by the mechanized processes in field husbandry is made. 242 УДК 662.758:621.431.73 ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ РАБОТЫ ДИЗЕЛЯ НА РАСТИТЕЛЬНО-МИНЕРАЛЬНОМ ТОПЛИВЕ В.А. Голубев, кандидат технических наук, старший преподаватель ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-73, E-mail: [email protected] Ключевые слова: отработавшие газы, альтернативные топлива, биотопливо, дизельное смесевое топливо, горчично-минеральное топливо, экологические показатели. При работе автотракторных двигателей на традиционных видах моторного топлива с отработавшими газами выделяется значительное количество токсичных веществ. Одним из способов снижения вредных примесей в отработавших газах является применение топлив растительного происхождения. Проведенные моторные исследования при работе тракторного дизеля на горчично-минеральном топливе показали на улучшение экологических показателей по сравнению с работой на минеральном дизельном топливе. Экологические проблемы, связанные с использованием традиционного моторного топлива в автотракторных двигателях, актуальны не только для России, но и для всех стран мира. Наиболее опасной примесью в отработавших газах (ОГ) двигателей являются оксиды азота (NOx), вклад в формирование опасности составляет от 80 до 100%. Следующей по значимости является оксид углерода (СО), вклад которого в формирование общей опасности выбросов колеблется от 4 до 15%. Наименее значимой является опасность углеводородных соединений, которая составляет от 2 до 5% по коэффициенту опасности веществ (1). В развитых странах введены ограничения, устанавливающие максимально допустимые удельные массовые выбросы токсичных веществ в ОГ дизелей (таблица 1), которые определены Правилами ЕЭК ООН №83 (ГОСТ Р41.83-99) [2]. Это создает предпосылки для поиска топлива, соответствующего высоким экологическим стандартам. В настоящее время многие зарубежные машиностроительные фирмы взяли курс на достижение низкой токсичности отработавших газов. Их многолетний опыт показывает, что добиться этого можно путем использования альтернативных (не нефтяных) видов моторного топлива. Исследовательские работы в области достижения наиболее высокой эффективности, низких издержек производства и создания значительных запасов новых видов моторных топлив проводятся практически в каждой промышленно развитой стране производителями и научными организациями. 243 Таблица 1. Предельно-допустимые выбросы отработавших газов дизелей Нормирующий документ Евро – I Евро – II Евро – III Евро – IV Евро – V Евро - VI Год введения требований Предельно-допустимые выбросы, г/км Европа Россия СО NОх СН+ NОх 1992 1996 2000 2005 2009 2014 1999 2002 2004 2010 - 2,72 1,00 0,64 0,50 0,50 0,50 0,50 0,25 0,18 0,08 0,97 0,70 0,56 0,30 0,23 0,17 Твердые частицы 0,14 0,08 0,05 0,025 0,005 0,005 Причем в отличие от топлив из полезных ископаемых, при сгорании которых в атмосферу выбрасывается углекислый газ, способствующий возникновению парникового эффекта, более предпочтительны топлива, вырабатываемые из возобновляемого источника энергии - сырья растительного происхождения. Использование топлив из этого сырья не нарушает баланс между кислородом и углекислым газом в атмосфере, поскольку при сгорании топлив растительного происхождения выделяется такое количество СО2, которое было потреблено из атмосферы растениями за период их жизни [3]. Однако, применение биотоплива для работы дизелей в чистом виде затруднено в связи с существенными отличиями их физико-химических и эксплуатационных свойств от свойств нефтяного моторного топлива [4]. Наиболее простым способом улучшения свойств топлив растительного происхождения, является смешивание их с минеральным дизельным топливом (ДТ). Получаемое в результате смешивания дизельное смесевое топливо (ДСТ), может иметь различные свойства в зависимости от соотношения компонентов смеси. Для оценки влияния растительно-минеральных топливных смесей на экологические показатели тракторного дизеля были проведены сравнительные исследования при его работе на ДТ и ДСТ, представляющем смесь ДТ и горчичного масла (ГорМ). Для чего была скомплектована моторная установка, включающая дизель Д-243 (4Ч11/12,5), динамометрическую машину KS-56/4 и комплекс измерительных приборов. Дымность (Д, %) отработавших газов на каждом виде топлива при работе дизеля на различных нагрузочно-скоростных режимах измерялась дымомером КИД-2. Для определения концентрации в ОГ оксида углерода (СО, %) и углеводородов (СН, %) применялся газоанализатор АВТОТЕСТ СО-СН-Д-Т. Экспериментальные исследования проводились на товарном минеральном ДТ Л-0,2-62 и 3 смесевых горчично-минеральных топливах: 1) 25% ГорМ + 75% ДТ; 2) 50% ГорМ + 50% ДТ; 3) 75% ГорМ + 25% ДТ. Анализ экологических показателей в режиме полных нагрузок (нагрузка на тормозе стенда 100%) показывает (таблица 2), что по мере увеличения содержания ГорМ в смесевом топливе дымность отработавших газов снижается на номинальной частоте вра- 244 щения коленчатого вала (к.в.) до наименьшего значения 24% при работе на топливе 75% ГорМ + 25% ДТ (снижение на 25% ). На этом же топливе в отработавших газах наблюдается минимальное содержание оксида углерода, которое снижается, по сравнению с работой на ДТ на 28 % (с 0,25 % до 0,18 %). Изменение содержания углеводородов носит неопределенный характер. Таблица 2. Экологические показатели дизеля Д-243 при работе на различных видах моторного топлива в режиме полных нагрузок Виды топлива ДТ 25% ГорМ + 75% ДТ 50% ГорМ + 50% ДТ 75% ГорМ + 25% ДТ ДТ 25% ГорМ + 75% ДТ 50% ГорМ + 50% ДТ 75% ГорМ + 25% ДТ ДТ 25% ГорМ + 75% ДТ 50% ГорМ + 50% ДТ 75% ГорМ + 25% ДТ Частота вращения коленчатого вала, мин-1 1400 1600 1800 2000 Содержание оксида углерода (СО), % 1,24 0,72 0,35 0,26 1,21 0,7 0,33 0,24 1,15 0,68 0,32 0,21 1,12 0,67 0,28 0,19 Содержание углеводородов (СН), % 0,006 0,005 0,004 0,003 0,002 0,001 0,001 0,001 0,003 0,002 0,002 0,002 0,002 0,002 0,002 0,001 Дымность, % 52 42 35 32 45 36 31 29 43 34 29 27 38 30 27 25 2200 0,25 0,23 0,20 0,18 0,002 0,001 0,002 0,002 32 28 26 24 Содержание оксида углерода, % Характер изменения показателей на номинальном режиме сохраняется на всех частотах вращения к.в. двигателя в режиме регуляторной характеристики, о чем свидетельствуют графические зависимости представленные на рисунке. 1,4 1,2 1 ДТ 0,8 75%ГорМ+25%ДТ 0,6 0,4 0,2 0 1400 50%ГорМ+50%ДТ 25%ГорМ+75%ДТ 1600 1800 2000 -1 Частота вращения коленчатого вала, мин 2200 а) содержание оксида углерода 245 Содержание углеводородов, % 0,006 ДТ 0,005 50%ДТ+50%ГорМ 0,004 0,003 0,002 0,001 0 75%ДТ+25%ГорМ 1400 1600 25%ДТ+75%ГорМ 1800 2000 2200 Частота вращения коленчатого вала, мин -1 б) содержание углеводородов Дымность, % 54 45 36 ДТ 25%ГорМ+75%ДТ 50%ГорМ+50%ДТ 75%ГорМ+25%ДТ 27 18 1400 1600 1800 2000 Частота вращения коленчатого вала, мин-1 2200 в) дымность Рис. 1. – Изменение экологических показателей дизеля Д-243 в режиме полных нагрузок Заключение. Результаты сравнительных моторных исследований при работе дизеля на горчично-минеральном топливе, показывают, что с повышением доли горчичного масла улучшаются экологические показатели двигателя. Библиографический список: 1. Коротков, М.В. Оценка экологической эффективности применения различных видов моторного топлива в ДВС автотранспортных средств / М.В. Коротков, А.А. Филиппов // Транспорт на альтернативном топливе. – 2008. - № 2 (2). – С. 72-75. 2. Евро идет вверх. // За рулем. -2009. -№12. -С. 140-142. 3. Нагорнов, С.А. Современное состояние топлив, используемых в АПК / С.А. Нагорнов, С.В. Романцова, О.В. Матвеев и др. // Новые технологии и техника для ресурсосбережения и повышения производительности труда в сельскохозяйственном производстве: 246 Сб. научных докладов XIII международной науч.-практ. конф. – М.: «Издательство ВИМ», 2005. – С. 347-349. 4. Девянин, С. Н. Растительные масла и топлива на их основе для дизельных двигателей / С. Н. Девянин, В. А. Марков, В. Г. Семенов. – М.: Изд-во МГАУ им. В.П. Горячкина, 2007. ENVIRONMENTAL PERFORMANCE OF A DIESEL ENGINE ON VEGETABLE-MINERAL FUELS Golubev V.A. Keywords: exhaust gases, alternative fuels, biofuels, diesel fuel, composite cream and mineral fuels, environmental indicators. The tractor engines from conventional motor fuel from exhaust gases released large quantities of toxic substances. One way to reduce harmful substances in exhaust gases is the use of fuels of plant origin. Research conducted by the motor when working on diesel tractor mustard mineral fuels have shown to improve environmental performance in comparison with the work on the mineral diesel fuel. УДК 631.316 РАБОЧИЙ ОРГАН КУЛЬТИВАТОРА ДЛЯ МЕЖДУРЯДНОЙ ОБРАБОТКИ ПРОПАШНЫХ КУЛЬТУР В.П. Зайцев, кандидат технических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П.А. Столыпина» Тел. 8(84231) 55-95-73 [email protected] Ключевые слова: пропашные культуры, междурядная обработка, культиватор, рабочий орган В статье приведено описание рабочего органа культиватора. Предлагаемый рабочий орган культиватора позволяет обрабатывать полные междурядья пропашных культур, включая и защитные зоны растений. Представлены результаты лабораторных исследований предлагаемого рабочего органа. Для получения высоких урожаев пропашных культур, как установлено передовиками сельскохозяйственного производства и научно-исследовательскими учреждениями, необходимы не только рациональное размещение растений по площади питания и глубине их заделки в почву, но своевременный и правильный уход за ними в период их вегетации. В системе мероприятий по уходу за пропашными культурами особое значение имеет своевременное рыхление почвы для улучшения воздушно-водного режима почвы и в целях борьбы с почвенной коркой и сорняками. 247 При механизированной обработке междурядий культурные растения могут повреждаться рабочими органами. Во избежание этого рабочие органы культиваторов размещают на требуемом расстоянии от рядка растений. Поэтому после прохода культиватора с обеих сторон рядка оставляется необработанная полоса (защитная зона). Ширина защитной зоны зависит от вида и сорта культуры, степени развития растений, глубины рыхления почвы и качества посева (прямолинейность рядков). В разные периоды обработки междурядий защитные зоны растений составляют 28…43 % от общей площади междурядий. Именно такая площадь остается необработанной, что ведет к резкому снижению урожайности. Применяемые рабочие органы культиваторов, для междурядной обработки пропашных культур, можно классифицировать следующим образом: - основные – для обработки междурядий до защитных зон; - дополнительные – для обработки защитных зон растений. К основным рабочим органам относятся стрельчатые, полольные и специальные лапы. Дополнительные рабочие органы: лапы-отвальчики, диски игольчатые, катки роторно-штифтовые, боронки прополочные, ротационно-пальчатые приспособления и загортачи типа предплужника. Выпускаемые промышленностью дополнительные рабочие органы для обработки защитных зон применяются крайне редко, так как имеют малый диапазон применения на различных видах обработки и выполняют ограниченное число технологических операций. Многие исследователи, предлагая конструктивные решения машин для обработки полных междурядий (А.А. Аутко, В.А. Дьяченко, Н.Е. Руденко и другие) считают, что для борьбы с сорняками в защитных зонах необходим сдвиг почвы в рядок растений. При таком способе обработки, кроме подавления сорняков в защитной зоне, происходит мульчирование, подокучивание культурных растений, которое способствует развитию у них дополнительных корней и укреплению их в вертикальном положении. Развитие дополнительной корневой системы, как указывают многие исследователи и практики, способствует повышению урожайности культур. До настоящего времени промышленность выпускает лапы-отвальчики, способные сдвигать слой почвы в околорядную зону растений. К недостаткам этих рабочих органов можно отнести: - конструкция лап-отвальчиков не позволяет изменять высоту сдвигаемого в защитную зону слоя почвы, что может привести к заваливанию культурных растений в ранней стадии их развития; - лапы-отвальчики производят сдвиг почвы с его оборотом, что приводит к иссушению почвы. Учитывая выше изложенное, предлагается рабочий орган культиватора для обработки полных междурядий пропашных культур, включая и защитные зоны культурных растений [2]. 248 7 12 15 5 11 1 6 3 4 2 9 14 10 8 13 (а) (б) 1 и 6 – стойка; 2 – стрельчатая лапа; 3 – ось диска; 4 – диск сферический; 5 и 7 – кронштейн; 8 – пластина; 9 и 13 – отверстия; 10 – брус; 11 – паз; 12 – втулка; 14 и 15 – болт. Рис. 1. - Рабочий орган культиватора: а) вид сбоку; б) вид сверху Рабочий орган культиватора состоит из стрельчатой лапы 2 и сферического диска 4, установленных на стойках 1 и 6 с возможностью перемещения их вдоль стоек. На стойке 6 установлен дополнительный кронштейн 7 на, котором установлена пластина 8 с отверстиями 9 с возможностью изменения угла постановки диска к направлению движения (угла атаки) в пределах 5…25° (рисунок 1). Рабочий орган культиватора работает следующим образом. Стрельчатая лапа 2 подрезает пласт почвы и сорняки, производит его рыхление. Слой почвы, сходящий с лапы 2, поступает на рабочую поверхность приваливающего диска 4 и сдвигается в зону рядка растений. Требуемую толщину сдвигаемого слоя почвы в защитные зоны растений приваливающим диском 4 в зависимости от вида культуры и от возраста растений обеспечивают изменением следующих параметров: угла установки приваливающего диска, глубины обработки почвы и скорости движения агрегата. Глубину хода лапы 2 и приваливающего диска 4 изменяют путем перемещения стоек 1 и 6 в кронштейнах 5 и 7 таким образом, чтобы толщина слоя почвы, сдвигаемого в защитную зону, находилась в пределах 3…6 см. Лабораторные исследования описанного выше рабочего органа проводили в почвенном канале с размещенными в нем имитаторами защитных зон и культурных растений. В качестве варьируемых факторов были приняты глубина обработки почвы H�� , ско- ϑ θ рость движения рабочего органа и угол установки приваливающего диска . Предварительно с помощью поисковых опытов и с учетом агротехнических требований к междурядной обработке пропашных культур были определены диапазоны варьирования факторов. Глубину обработки почвы изменяли от 3…8 см с шагом 1 см, скорость движения рабочего органа выбирали в пределах 1,2…2,4 м/с с шагом 0,4 м/с, угол 249 установки приваливающего диска изменяли в диапазоне 5…25° с шагом 5°. При различных сочетаниях H, δ ϑ иθ с помощью профиломера определяли толщину присыпаемого слоя почвы по пяти контрольным точкам, находящимся на равном расстоянии друг от друга по ширине почвенного канала в границах обработанной зоны. Затем вычисляли δ среднюю арифметическую толщину присыпаемого слоя почвы . Опыты проводились с рабочим органом, оснащенным приваливающим сферическим диском диаметром 250 мм. В результате проведенных опытов были получены значения толщины присыпаемого слоя почвы рабочим органом культиватора при величине защитной зоны 10 см на различных режимах работы в зависимости от установочных параметров: глубины обработки почвы H, скорости движения рабочего органа диска θ. ϑ , угла установки приваливающего На рисунке 2 представлена зависимость толщины присыпаемого слоя почвы от угла установки приваливающего диска θ при различной глубине обработки почвы H и на заданной скорости движения рабочего органа δ, см 8 7,6 7,2 6,8 6,4 6 5,6 5,2 4,8 4,4 4 3,6 3,2 2,8 2,4 2 1,6 1,2 0,8 0,4 0 0 δ ϑ равной 1,2 м/с. Н = 8 см Н = 7 см Н = 6 см Н = 5 см Н = 4 см Н = 3 см 5 10 15 20 25 30 θ, град. Рис. 2. - Зависимость толщины присыпаемого слоя валивающего диска 250 θ δ от угла установки при- при различной глубине обработки почвы H и на постоянной скорости ϑ = 1,2 м/с Данные экспериментов показали, что толщина присыпаемого слоя почвы δ при постоянной ширине защитной зоны 10 см зависит в основном от угла установки приваливающего диска и глубины обработки почвы H. θ В результате исследований оказалось, что оптимальным является режим работы, при котором скорость движения рабочего органа = 1,2 м/с, угол установки привали- ϑ вающего диска θ = 10° и глубина обработки почвы H = 5 см. Библиографический список 1. Кленин Н.И., Кисилев С.Н., Левшин А.Г. Сельскохозяйственные машины. – М.: КолосС, 2008. – 816 с. 2. Рабочий орган культиватора. Патент RU №2 245007 C2. Опубл. 27.01.2005 г. 3. Халанский В.М., Горбачев И.В. Сельскохозяйственные машины. – М.: КолосС, 2003. – 623 с. WORKING BODY OF THE CULTIVATOR FOR INTERROW PROCESSING PROPASHNYKH OF CULTURES V.P. Zaisev, candidate of technical sciences, associate professor FGBOU VPO “The Ulyanovsk state agricultural academy of a name of P.A. Stolypin” Ph. 8 (84231) 55-95-73 Zaicev. VP @ mail. ru Keywords: propashny cultures, interrow processing, cultivator, working body The description of working body of a cultivator is provided in article. The offered working body of a cultivator allows to process full row-spacings of propashny cultures, including and protective zones of plants. Results of laboratory researches of offered working body are presented. 251 УДК 631.331 ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПЛОТНОСТИ ПОЧВЫ ПОСЛЕ ПРОХОДА КОМБИНИРОВАННОГО СОШНИКА В.И. Курдюмов, доктор технических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» [email protected] Е.С. Зыкин, кандидат технических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» [email protected] И.В. Бирюков, инженер ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: гребень почвы, пропашные культуры, сошник, посев, каток, комбинированные агрегаты, сеялка Предложен комбинированный сошник для гребневого посева пропашных культур. Представлено теоретическое обоснование плотности почвы после прохода гребневой сеялки, оснащенной комбинированными сошниками. Выявлено, что плотность почвы в гребне зависит как от конструктивных параметров сошника, так и физикомеханических свойств почвы. Одним из перспективных направлений возделывания пропашных культур является гребневой посев пропашных культур, при котором создаются благоприятные температурные, водные и воздушные условия для быстрого и дружного прорастания семян. Такой способ посева пропашных культур может быть реализован применением гребневой сеялки, оснащенной комбинированными сошниками (рис. 1) [1-5]. При движении посевного агрегата комбинированный сошник высевает семена на глубину 1,5…2 см, одновременно присыпает семена рыхлым и прогретым слоем почвы, сдвигаемым из междурядий, в результате чего над высеянными семенами образуется почвенный бугорок трапециевидной формы, а следом идущие катки уплотняют его боковые стороны. Геометрические размеры гребня и плотность почвы в гребне зависят от угла атаки плоских щитков, глубины их хода в почве, усилия сжатия пружины сошника, а также физико-механических свойств почвы. Плотность почвы в гребне, которая по агротехническим требованиям должна составлять 1200 ± 100 кг/м3, регулируют изменением усилия сжатия пружины комбинированного сошника. Известно, что давление катка на почву нельзя рассматривать как простое отношение веса, приходящегося на каток, к площади, передающей давление (площади контакта цилиндрических частей и сферического обода катка с почвой), поскольку при перекатывании на каток вместе с весом действует сила тяги, расходуемая на преодоление силы сопротивления перекатыванию (рис. 2). 252 Рис. 1. - Гребневая сеялка, оснащенная комбинированными сошниками Рис. 2. - К определению давления катка на гребень почвы Следовательно, при расчете давления, создаваемого катком, необходимо использовать равнодействующую этих сил: RÊ = G 2 + Ò 2 , (1) где G – вес катка и приходящаяся на него вертикальная нагрузка, Н; Т – тяговое 253 усилие, Н. Тогда давление катка на почву ðÊ = G 2 + Ò2 ï FÊ ï , (2) где Fк – площадь контакта катка с почвой, м2; п – количество катков в сошнике, шт. Силу сопротивления перекатыванию катка по поверхности почвы определяют по эмпирической формуле [6]: Ò = 0,86 3 G4 q bî áù d 2 , (3) где q – коэффициент объемного смятия почвы, Н/м3; bобщ – ширина катка, м; d – диаметр катка, м. bобщ = 2 bц + bоб, м. (4) где bц – ширина цилиндрической части катка, м; bоб – длина дуги DЕК, м; d = 2 dк + dоб, м. (5) где dк – диаметр цилиндрической части катка сошника, м; dоб – диаметр сферического обода катка, м. Длина дуги DЕК bî á = π rñ.î á , (6) где rс.об – радиус поперечного сечения сферического обода катка, м. Подставляя (6) в (4), а (4) и (5) в (3) получим Ò = 0,86 3 G4 q (2 bö + π rñ.î á )(2d ê + d î á ) 2 . (7) Площадь контакта катка сошника с почвой, м2, Fк = 2 Fк.ц + Fк.об, (8) где Fк.ц – площадь контакта цилиндрической части катка, м2; Fк.об – площадь контакта сферического обода катка, м2. Площадь контакта цилиндрической части катка с почвой, м2, определим следующим образом: Fê.ö = Fï .ö θ 360 , (9) 5 где Fп.ц – площадь поверхности цилиндрической части катка, м2; θ ≤ 4 мальный угол контакта катка с почвой, град. [6]. Площадь поверхности, м2, цилиндрической части катка Fп.ц = 2 bц Lц, (10) 254 0 – макси- где Lц – длина развертки цилиндрической части катка, м. Длина развертки, м, цилиндрической части катка ðör= 2 L ê . (11) Подставляя (11) в (10), а (10) в (9) и, выполняя соответствующие преобразования, получим площадь контакта с почвой цилиндрической части катка: π bö rö θ max FÊ.Ö max = 90 . (12) Площадь контакта сферического обода катка с почвой, м2, определим следующим образом: Fê.î á = Fï .î á θ 360 , (13) где Fп.об – площадь поверхности сферического обода катка, м2; θ мальный угол контакта с почвой сферического обода катка, град. Площадь поверхности сферического обода катка Fï .î á = Lî á bî á , ≤ 45 0 – макси- (14) где L – длина развертки сферического обода, м. Длина развертки, м, сферического обода катка ðî rá = 2 L îá . (15) Подставляя (15) и (6) в (14), а (14) в (13) и, выполняя соответствующие преобразования, получим максимальную площадь контакта сферического обода катка с почвой при θ ≤ 45 ° : FÊ.Î Á MAX = π 2 rî á rñ.î á θ ì àõ 180 . (16) Подставляя (12) и (16) в (8) и, выполняя соответствующие преобразования, получим: Fê = θ ì àõ (π bö rê + π 2 rî á rñ.î á ) 45 , (17) Подставляя (7) и (17) в (2) , после соответствующих преобразований, получим минимальное давление катков, с учетом их угла наклона, на боковые стороны гребня почвы: ïG 2 + ðÊ min = где γ  G4  0,86 3  q (2 bö + π rñ.î á )(2 d ê + d î á ) 2  2 ⋅10−2 θ ì àõ ï (π bö rê + π 2 rî á rñ.î á )     2 cos γ , (18) - угол естественного откоса почвы, град. 255 Таким образом, при известных весе катка, его конструктивных параметрах и угле контакта катка с почвой можно определить давление, создаваемое катком сошника на боковые стороны гребня почвы. Это позволит эффективно разрушать почвенные комки и уплотнять почву на заданную агротехническими требованиями глубину. Плотность почвы в гребне, кг/м3, после прохода по нему катка определяют по эмпирической формуле [6]: ρÊ = U Ê Ï + 1 , (19) где U – плотность твердой фазы почвы на глубине 0…0,2 м, кг/м3, для черноземных почв U = 2400 кг/м3 [6, 7]; Кп – коэффициент пористости. Коэффициент пористости определим по формуле [6]: Ê= Ê0 − Ï ðÊ min 1 ln 9,8 ⋅104 , N (20) где К0 – коэффициент пористости при нагрузке 9,8 · 104 Па; N = 5…10 – степень изменения коэффициента пористости при нагрузке. Подставляя формулу (18) в (20), а (20) в (19) и, выполняя соответствующие преобразования, определим плотность почвы в гребне U Nот действия катков сошника: ρÊ = 2   G4 2 ï +  0,86 3 G   q (2 bö + π rñ.î á )(2 d ê + d î á ) 2   cosγ θ ì àõ ï (π bö rê + π 2 rî á rñ.î á ) Ê (1 + 0 ) − ln N 0,2 ⋅106 . (21) Следовательно, плотность почвы в гребне зависит как от конструктивных параметров катка сошника, так и физико-механических свойств почвы. Библиографический список: 1. Патент RU 115613. Гребневая сеялка / В.И. Курдюмов, Е.С. Зыкин, И.В. Бирюков; Опубл. 10.05.2012 г. Бюл. № 14. 2. Патент RU 115614. Гребневая сеялка / В.И. Курдюмов, Е.С. Зыкин, И.В. Бирюков; Опубл. 10.05.2012 г. Бюл. № 14. 3. Патент RU 84663. Сошник / В.И. Курдюмов, Е.С. Зыкин, И.В. Бирюков; Опубл. 20.07.2009 г. Бюл. № 20. 4. Патент RU 87861. Сошник / В.И. Курдюмов, Е.С. Зыкин, Е.А. Зыкина; Опубл. 27.10.2009 г. Бюл. № 30. 5. Патент RU 100872. Комбинированный сошник / В.И. Курдюмов, Е.С. Зыкин, И.В. Бирюков; Опубл. 10.01.2011 г. Бюл. № 1. 6. Зыкин Е.С. Способ посева пропашных культур с разработкой катка-гребнеобразователя. Дисс. … канд. техн. наук. – Пенза, 2007. – 181 с. 256 THEORETICAL JUSTIFICATION OF DENSITY OF THE SOIL AFTER THE COMBINED SOSHNIK’S PASS Kurdyumov V.I., Zykin E.S., Biryukov I.V. Keywords: soil crest, propashny cultures, vomer, crops, a skating rink, the combined units, a seeder The combined soshnik for grebnevy crops of propashny cultures is offered. Theoretical justification of density of the soil after pass of the grebnevy seeder equipped with combined soshnik is presented. It is revealed that soil density in a crest depends as on design data of a soshnik, and physicomechanical properties of the soil. УДК 631.3:662 АЛЬТЕРНАТИВНОЕ ТОПЛИВО НА ОСНОВЕ РАПСОВОГО МАСЛА Н.С.Киреева, кандидат технических наук О.Н. Степанидина, ст. преподаватель ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-90 [email protected] Ключевые слова: рапс, нефтяное топливо, биотопливо, дизель. Работа посвящена обоснованию необходимости и возможности применения биотоплив растительного происхождения на дизельных двигателях. Одной из наиболее актуальных проблем современного двигателестроения является проблема поиска моторных топлив, которые смогут успешно заменить минеральные топлива. Это обусловлено как постепенным истощением нефтяных месторождений, так и непрерывным повышением цен на нефть и нефтепродукты. В последние годы повышенный интерес проявляется к топливам, получаемым из возобновляемых энергетических ресурсов растительного происхождения, сырьевые запасы которых практически неограничены. В первую очередь - это биотоплива, производимые из растительных масел. Цена этих топлив соизмерима или даже ниже цены топлив нефтяного происхождения. Применительно к условиям европейской части России наиболее перспективными представляются топлива на основе рапсового масла. Рапс отличается сравнительно неплохой урожайностью и с агрономической точки зрения рапс является желательной культурой для улучшения севооборота (он улучшает структуру и плодородие почвы). Получаемый при отжиме растительных масел жмых (шрот) является ценным белковым продуктом, который может быть использован для откорма крупного рогатого скота и других 257 животных. Со 100 га посевов рапса сорта «Ратник» можно получить 150 т семян. При средней масличности семян 30% будет получено около 50 т рапсового масла и 4,5 т глицерина (из него производят моющие средства, жидкое мыло и фосфорные удобрения) и 24 тонны шрота. Использование биотоплив на базе рапсового масла позволит не только заместить нефтяные моторные топлива альтернативными, но и улучшить показатели токсичности отработавших газов. Работа дизеля на биотопливах обеспечивает снижение выбросов с отработавшими газами по оксиду углерода и дымности в 1,5-2 раза. Кроме того, использование топлив растительного происхождения обеспечивает кругооборот углекислого газа в атмосфере, поскольку при сжигании биотоплив в двигателях внутреннего сгорания, в атмосферу выбрасывается примерно такое же количество углекислого газа, которое поглощается в процессе выращивания сырья для производства биотоплива. Это приводит к уменьшению выброса в атмосферу парниковых газов, и предотвращению парникового эффекта, способствующего глобальному потеплению и возникновению различных природных аномалий. Следует отметить, что по своим физико-химическим свойствам биотоплива ближе к дизельным топливам, чем к бензинам: они имеют сравнительно высокие плотность и вязкость, плохую испаряемость. Поэтому их использование возможно лишь в дизельных двигателях, отличающихся меньшей чувствительностью к свойствам применяемого топлива. К тому же, дизельные двигатели, работающие с большой степенью сжатия и повышенными значениями коэффициента избытка воздуха, характеризуются лучшими показателями топливной экономичности и токсичности отработавших газов. Вместе с тем, биотоплива имеют физико-химические свойства, отличающиеся от свойств традиционного дизельного топлива. Поэтому при переводе двигателей, изначально адаптированных к работе на дизельном топливе, на биотоплива, возникает ряд проблем, связанных с организацией рабочих процессов, в первую очередь - процессов топливоподачи, распыливания топлива, смесеобразования и сгорания. При этом возможно нарушение исходных регулировок двигателя, ухудшение ряда эксплуатационных показателей дизельных двигателей, увеличение износа деталей двигателей и уменьшение ресурса их работы. Поэтому необходима адаптация двигателей к работе на этом виде топлива. Одним из эффективных путей адаптация двигателей к работе на биотопливах является применение смесевых биотоплив — смесей дизельного топлива и рапсового масла. Изменяя состав смесевого биотоплива можно достичь наибольшего приближения свойств этого топлива к свойствам стандартного дизельного топлива и обеспечения требуемых показателей топливной экономичности и токсичности отработавших газов. Исходя из вышесказанного, следует, что в качестве заменителя минерального топлива для дизелей наиболее целесообразно использование растительных масел и, в частности, рапсового масла. Несмотря на относительно высокую стоимость биотоплива на основе рапсового масла в настоящее время его можно рассматривать как перспективный вид моторного топлива и альтернативу нефтяному (минеральному) топливу. Наиболее приемлемым для эксплуатации транспортных дизелей является смесевое растительно-минеральное топливо (биодит, биотопливные композиции, бинарные смеси), которые в наименьшей степени требуют адаптации дизеля, так как параметры рабочего цикла, мощностные, экономические и экологические показатели дизеля, рабо- 258 тающего на таких биотопливах, близки к соответствующим показателям при работе на нефтяном (минеральном) дизельном топливе. Библиографический список: 1.Горлов, С.Л. Состояние, перспективы и научное обеспечение отрасли рапсосеяния в РФ //Переработка рапса на биологическое топливо: Сб.трудов Всероссийской науч.практ. конф. – Ростов-на-Дону.-2006.–С.8-11. 2.Данилов, А.М. Альтернативные топлива: достоинства и недостатки. Проблемы применения / А.М. Данилов, Э.Ф. Каминский, В.А. Хавкин // Российский химический журнал. – 2003. – Т. XL VII.–№6. – С. 4-11. 3.Измайлов, А.Ю. Эффективность производства и использования биодизельного топлива из рапсового масла в России / А.Ю. Измайлов, Г.С. Савельев //Ваш сельский консультант. – 2006. - N3.- С. 18-23. 4.Кулманаков, С.П. Применение рапсового масла в качестве моторного топлива // Сб. тр. науч.-практ. конф. – Ростов-на-Дону. - 2006. – С. 24-25. ALTERNATIVE FUEL ON THE BASIS OF RAPE OIL Kireeva N.S. Stepanidina O. N. Key words: rape, oil fuel, biofuel, diesel Work is devoted to justification of need and possibility of application of biofuels of a phytogenesis on diesel engines. УДК 631.331.6 ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЗЕРНОВОЙ СЕЯЛКИ В.И. Курдюмов, доктор технических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия», 8(84231)55-95-47, [email protected] В.В. Курушин, кандидат технических наук, старший преподаватель ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия», 8(84231)55-95-47, [email protected] Ключевые слова: стерневой посев, сеялка, технические характеристики, рабочие органы. Изложены основные особенности конструкции зерновой сеялки, которые позволяют выполнять посев зерновых культур по стерневому фону. Представлены основные технические характеристики предлагаемой сеялки. 259 В настоящее время одним из наиболее востребованных направлений развития растениеводства стало использование нулевой обработки почвы и высев зерновых непосредственно по стерневому фону [1]. Посев по стерневому фону признается учеными многих стран перспективным при возделывании зерновых культур, кукурузы, многолетних и однолетних трав, масличных и зернобобовых культур. Данный способ посева исключает ряд технологических операций, что позволяет уменьшить количество проходов агрегатов по полю, а также проводить посев в заданные агротехнические сроки. Эффективность такого посева заключается в значительном снижении энергозатрат за счет отказа от вспашки и предпосевной обработки почвы. При посеве по стерневому фону себестоимость возделываемой продукции снижается в два раза, экономия топлива составляет 45 %, времени – 32 % по сравнению с традиционной технологией. На основании вышеизложенного нами разработана принципиально новая конструкция зерновой сеялки [2, 3], выполняющая посев по стерневому фону (рис. 1). а б Рис. 1. – Зерновая сеялка (а - вид сбоку; б - вид спереди) Отличительной особенностью разработанной сеялки является форма рамы, которая выполнена в виде равнобедренного треугольника. Такая конфигурация рамы позволяет более выгодно расположить рабочие органы на сеялке, что позволяет менять углы атаки плоских и сферических дисков, а также менять расстояние между ними. Данные регулировки рабочих органов позволяют высевать зерновые культуры, как по обработанной почве, так и по стерневому фону. Использование сферических дисков в качестве сошника позволяет заделывать пожнивные и растительные остатки в надсеменном слое почвы, и укладывать семена высеваемых растений в уплотненное и очищенное от растительных остатков ложе. Для подтверждения эффективности предлагаемой сеялки нами проведены производственные исследования, на основании которых выявлены основные технические характеристики. Оценку технических параметров сеялки проводили в соответствии с ГОСТом 26025 и прилагающемуся к нему нормативному документу. Результаты оценки занесены в таблицу. 260 Таблица. Технические характеристики зерновой сеялки Наименование показателя Тип машины Число высевающих аппаратов / сошников, шт. Конструктивная ширина междурядий, см Рабочая ширина захвата, м Марка агрегатируемого трактора Норма высева семян, кг/га Привод высевающих аппаратов Мощность двигателя трактора, кВт Рабочие скорости, км/ч Транспортная скорость, км/ч Производительность по культурам за час: - основного времени - сменного времени Количество персонала, обслуживающего агрегат Габаритные размеры машины, мм, в рабочем положении: - длина - ширина - высота в транспортном положении: - длина - ширина - высота Ходовая система (тип и размер ходовых колес) Дорожный просвет, мм Масса машины, кг: - сухая конструкционная - эксплуатационная Минимальный радиус поворота агрегата, м: - по следу наружного колеса Необходимая ширина поворотной полосы, м Ширина колеи ходовых колес, мм - в рабочем положении - в транспортном Продолжение таблицы 1 Пределы регулирования семенного сошника по глубине, мм: Количество точек смазок: - ежесменных - сезонных Значение показателя Сеялка зерновая 2/48 15 4,8 Т – 150К 60 - 320 механический 110 6,5…8 до 12 3,1 2,8 2 7400 5600 1950 7400 5600 2200 пневматическая, КФ – 97, R – 16.5 250 2300 4300 4,32 21,8 3770 3770 0 – 150 4 12 261 Количество передач: - шарнирных (карданных) - цепных - ременных - редукторов 3 1 - Результаты, занесенные в таблицу, позволяют оценить технические возможности пневматической зерновой сеялки. На основании представленных в таблице данных можно рассчитать норму выработки предлагаемой сеялки за посевную компанию при условии выполнения агротехнических требований. Библиографический список: 1. Курдюмов В.И. Энергосберегающее средство механизации для стерневого посева / В.И. Курдюмов, В.В. Курушин Сельский механизатор – 2011. - № 2. – С. 5 - 6. 2. Корчагин В.А. Почвозащитные и влагосберегающие технологии возделывания яровых зерновых культур в черноземной степи Среднего Заволжья / Корчагин В.А., Горянин О.И. // Аграрный вестник Юго – Востока: - 2009, - № 2. С. 43 – 44. 3. Патент RU 90961. Сеялка / В.И. Курдюмов, Е.С. Зыкин, В.В Курушин; Опубл. 27.01.2010 г. Бюл. № 3. TECHNICAL CHARACTERISTICS OF THE GRAIN SEEDER Kurdyumov V.I., Kurushin V.V. Keywords: sternevy crops, seeder, technical characteristics, working bodies. The main features of a design of a grain seeder which allow to carry out crops of grain crops on a sternevy background are stated. The main technical characteristics of an offered seeder are presented. УДК 664.08 ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ ПРОВЕРКА УСТАНОВКИ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СЛИВОЧНОГО МАСЛА С.А. Лазуткина, кандидат технических наук, ассистент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Ключевые слова: маслоизготовитель, акустический динамик, сливки, масло. В статье рассматриваются результаты производственных исследований установки для приготовления сливочного масла. На основании анализа конструкций маслоизготовителей, был предложен способ и устройство для приготовления сливочного масла, основанный на воздействии низко- 262 частотных акустических колебаний, как на емкость, так и непосредственно на жировые шарики. Способ осуществляется следующим образом. В емкости 3 заливают сливки, после чего произвольно (в том числе под углом к основанию) их располагают на платформе 2, установленной на динамике 1 (рис. 1). С генератора акустических колебаний на динамик 1 подается сигнал, амплитуда и частота которого могут регулироваться как в зависимости от характеристик сливок, поступающих на переработку, так и непосредственно в процессе сбивания масла [1]. Емкость со сливками на виброприводе может быть не одна, а несколько, и их расположение может быть произвольным. При этом на процесс сбивания будут оказывать существенное влияние варианты исполнения емкости 3 (форма, размеры, толщина стенки) и примененный материал (пластичный, упругий). Например, при пластичных и толстых стенках емкости 3 колебания платформы 2 будут передаваться непосредственно на сбиваемую массу, а при упругих и тонких стенках емкости 3 в ней могут образовываться вторичные источники колебаний (в том числе на кратных частотах и частотах гармоник). Рис. 1. – Устройство, реализующее способ приготовления сливочного масла 1 – платформа; 2 – акустический динамик; 3 – емкости со сливками Основным преимуществом данного способа является активация сбиваемого продукта снаружи (от колеблющейся емкости, в целом, и ее стенок, в частности) и изнутри (от колеблющихся масложировых шариков). Кроме того, интенсификация сбивания сливок может быть повышена за счет использования частотно- и/или амплитудно-модулированного сигнала. На основании полученных лабораторных исследований были проведены эксперименты по выбору характеристик маслоизготовителя для бесконтактного сбивания сливок применительно к производству масла в условиях малого и среднего агробизнеса [2, 3]. При проведении исследований в производственных условиях была использована следующая комплектация установки: герметично закрывающаяся молочная емкость 35 литров, резиновый подвес, акустический динамик НХ-301, генератор Г3-36, усилитель 35У-102 (рис. 2). Емкость крепилась к потолку помещения за резиновый подвес, а на ее дне был закреплен акустический динамик мощностью 40 Вт, соединенный с выходом усилителя, 263 подключенного к генератору. Рис. 2. – Установка для приготовления сливочного масла: 1 – генератор; 2 – усилитель; 3 – акустический динамик; 4 – емкость; 5 – резиновый подвес Производственные исследования показали, что масло, полученное при 45…60-минутном сбивании сливок на частоте колебаний 5 Гц и амплитуде 5 мм, соответствовало требованиям стандарта по основным качественным показателями (жирность 74-78%; влага 20-24%, сухое вещество 2,5%) при условии заполнения сливками 25…30% от общего объема емкости (рис. 3). Рис. 3. – Масло после сбивания сливок Библиографический список: 1. Пат. 2446695 РФ, МКП А 01 J�� 15/10. Способ приготовления сливочного масла / А.А. Симдянкин, Е.Е. Симдянкина, С.А. Лазуткина. – № 2010112678/10; Заявлено 01.04.2010; Опубл. 10.04.2012, Бюл. № 10. 264 2. Лазуткина, С.А. Оценка амплитудно-частотных характеристик устройства для «бесконтактного» сбивания сливок / С.А. Лазуткина, А.А. Симдянкин, Е.Е. Симдянкина// Тракторы и сельскохозяйственные машины. – 2010. – № 9. – С. 43–44. 3. Лазуткина, С.А. Анализ характеристик маслоизготовителя для «бесконтактного» сбивания сливок / С.А. Лазуткина, А.А. Симдянкин, Е.Е. Симдянкина//Тракторы и сельскохозяйственные машины. – 2012. – № 3. – С.55–56. PRODUCTION CHECK OF INSTALLATION FOR BUTTER PREPARATION Lazutkina S.A. Key words: buttermaker, acoustic loudspeaker, cream, butter In article results of production researches of installation for butter preparation are considered УДК 621.77.04 ПОВЫШЕНИЕ ФИЗИКОМЕХАНИЧЕСКИХ СВОЙСТВ РАБОЧЕЙ ПОВЕРХНОСТИ ВТУЛКИ ГОРИЗОНТАЛЬНОГО ШАРНИРА ТРАКТОРА К-701 ЭЛЕКТРОМЕХАНИЧЕСКОЙ ЗАКАЛКОЙ А.В. Морозов, кандидат технических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Тел. 8(8422)559597, [email protected] В.А. Фрилинг, ассистент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Тел. 8(8422)559597, [email protected] Ключевые слова: упрочнение, электромеханическая закалка, твердость, глубина упрочнения В данной работе предложен и исследован процесс электромеханической закалки втулки горизонтального шарнира рамы трактора К-701 с целью повышения ее послеремонтного ресурса. Для осуществления электромеханической закалки данной втулки была спроектирована и изготовлена инструментальная державка. Построены зависимости глубины упрочненного слоя в зависимости от силы тока. Горизонтальный шарнир является составной частью шарнира рамы трактора К-701 и его модификаций. Сопряжение горизонтального шарнира подверженное ускоренному износу состоит из трубы рамы и двух втулок. В следствии больших габаритных размеров деталей данного сопряжения целесо- 265 образно на стадии ремонта не заменять детали на новые, а в основном из экономических соображений, подвергать изношенные восстановлению. Восстановление деталей горизонтального шарнира наплавкой в среде защитных газов широко применяется в ОАО «Мелекесскремтехпред» г. Димитровград. Но, как показала практика, послеремонтный ресурс восстановленного сопряжения не велик, что вызывает необходимость применения упрочняющих технологий. Наиболее приемлемой и эффективной для условий ремонтного производства является электромеханическая закалка (ЭМЗ) восстановленных наплавкой рабочих поверхностей деталей сопряжения. Электромеханическая закалка наружных цилиндрических поверхностей достаточно широко исследована в сравнении с внутренними, хотя объем деталей имеющих гладкие цилиндрические отверстия не уступает по количеству деталям с наружным цилиндрическим поверхностями. Сложность при обработке внутренних поверхностей в первую очередь объясняется ограничением доступа, что в свою очередь ведет к усложнению конструкции обрабатывающего инструмента, а также требует определенного подхода в зависимости от диаметра обрабатываемого отверстия. Основной сложностью при осуществлении ЭМЗ рабочей поверхности втулки горизонтального шарнира трактора К-701 является большой диаметр отверстия, который составляет 285 мм. В вязи с этим для осуществления ЭМЗ рабочих поверхностей данных втулок была спроектирована (рисунок 1) и в последующем изготовлена державка с двумя независимыми инструментальными блоками для упрочнения отверстий большого диаметра 270…350 мм. Рис. 1. - Двухроликовая инструментальная державка для ЭМУ отверстий большого диаметра Инструментальная державка состоит из штанги 1 конец которой выполнен в виде конуса морзе, направляющей 2 в пазу которой перемещаются инструментальные блоки 3. Перемещение инструментальных блоков относительно центральной оси державки осуществляется посредством регулировочного винта с левой и правой резьбой, также при помощи данного винта осуществляется прижатие роликов к обрабатываемой поверхно- 266 сти втулки. Державка устанавливается в пиноли задней бабки токарного станка. Для ЭМЗ отверстия втулки инструментальные блоки выдвигают на величину соответствующую номинальному внутреннему диаметру втулки подводят ролики к краю втулки и последующим вращением винта создается необходимое усилие прижатия роликов к обрабатываемой поверхности. В последующем включают скорость вращения и подачу инструмента относительно детали далее нажатием кнопки осуществляют подачу технологического тока к бронзовым роликам. Исследования эффективности ЭМЗ втулок горизонтального шарнира трактора К-701 с применением разработанной инструментальной державки оценивали по величине твердости и глубине упрочненного слоя в зависимости от силы технологического тока в диапазоне от 500 до 700 А. Электромеханическую закалку рабочей поверхности втулки горизонтального шарнира рамы трактора К-701 проводили на следующих режимах: I = 500, 600, 700 А; Р = 20 Н; υ = 8 мин-1; s = 2,5 мм/об на станке 1К62 в условиях кафедры «Материаловедение и технология машиностроения» Ульяновской ГСХА им. П.А. Столыпина. Рабочие инструменты державки были изготовлены из безоловянистой бронзы БрХ1. На рисунке 2 представлена компоновка экспериментальной установки для ЭМЗ втулки горизонтального шарнира трактора К-701. 1 - токарно-винторезный станок 1К62; 2 - втулка горизонтального шарнира трактора К-701; 3 – двухроликовая инструментальная державка; 4 – токоподводящие кабели; 5 – УЭМО-2 Рис. 2. - Компоновка экспериментальной установки Втулка фиксировалась в трехкулачковом патроне станка, инструментальную державку устанавливали в пиноли станка, токоподводящие кабели подключали к установке УЭМО - 2 и к державке. Подведя инструмент к втулке, при помощи регулировочного винта создавали необходимое усилие прижатие. В результате исследования микроструктуры образцов упрочненных втулок (сталь 45) во всех случаях был выявлен «белый слой» структура повышенной твердости, состоящая из мелкоигольчатого мартенсита. 267 На рисунке 3 графически отражено влияние основного технологического режима ЭМЗ – силы тока на микротвердость и глубину упрочнения втулки горизонтального шарнира рамы трактора К-701. Из представленного графика можно отметить, что с увеличением силы тока увеличивается как глубина так и микротвердость обработанной ЭМУ поверхности втулки. Рис. 3. - График распределения микротвердости после ЭМЗ втулки горизонтального шарнира в зависимости от силы тока Также следует отметить, что твердость поверхности после ЭМУ превышает изначальную твердость поверхности в 1,5 раза. На основании проведенных исследований следует, что применение ЭМЗ существенно повышает твердость рабочих поверхностей втулок горизонтального шарнира, в следствии чего повышается качество ремонта и послеремонтный ресурс восстановленного сопряжения. IMPROVEMENT OF PHYSICOMECHANICAL PROPERTIES OF A WORKING SURFACE OF THE HUB HORIZONTAL HINGE TRACTORS K-701 ELECTRO-MECHANICAL HARDENING Morozov A.V., Friling V.A. Key words: Hardening, electro-mechanical hardening, hardness, depth of hardening Is suggested in this paper and the process of electro-mechanical hardening of the hub horizontal swivel frame of the tractor K-701 with a view to improving its послеремонтного resource. For the implementation of the electro-mechanical hardening of the hub has been designed and manufactured instrumental �� державка�� . Built dependence of the depth of the hard- 268 ened layer depending on the strength of the current. УДК 621.77.04 АНАЛИЗ УСЛОВИЙ ЭКСПЛУАТАЦИИ И ПРИЧИН ИЗНОСА ШАРНИРА РАМЫ ТРАКТОРА К-701 И ЕГО МОДИФИКАЦИЙ А.В. Морозов, кандидат технических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Тел. 8(8422)559597, [email protected] Ключевые слова: шарнир рамы, сопряжение, износ, восстановление В работе проанализированы причины выхода из строя тракторов марки К-701 и его модификаций. В результате анализа было установлено, что большой процент выхода из строя трактора связан с износом деталей горизонтального и вертикального шарниров рамы. Трактора марки К-701 и Т-150К широко распространены на территории Ульяновской области, они задействованы для выполнения разнообразных сельскохозяйственных работ. Суммарная доля данных тракторов составляет около 20 % всего тракторного парка области. Отличительной чертой тракторов К-701 и Т-150К является оригинальная компоновочная схема, которая называется «ломающаяся рама». При движении по пересеченной местности рама трактора не испытывает вредных «изгибающих» напряжений, машина как бы плавно огибает все неровности, что обеспечивает постоянное зацепление всех колес трактора с почвой и хорошую маневренность. Дальнейший анализ проводили на примере трактора К-701 и его модификаций, так как его детали являются крупногабаритными, что представляет определенные сложности при их ремонте. На рисунке 1 представлена диаграмма процентного соотношения дефектов тракторов К-701. Рис. 1. – Процентное соотношение дефектов тракторов К-701 269 Из диаграммы (рисунок 1) видно, что в основном неисправности возникают в системе силовой передачи, ходовой части и механизме управления и двигателе. В результате анализа было установлено, что большой процент выхода из строя имеет ходовая часть трактора К-701 (28 %), на что существенно оказывает влияние тяжелые условия эксплуатации в сочетании с большой массой трактора. В дальнейшем были проанализированы основные дефекты ходовой части трактора К-701 и его модификаций. На рисунке 2 представлена диаграмма процентного соотношения дефектов. Рис. 2. – Процентное соотношение дефектов ходовой части тракторов К-701 и его модификаций Из диаграммы (рисунок 3) видно, что основной процент дефектов ходовой части приходится на подвеску и раму. Рама трактора состоит из двух полурам - передней и задней, соединенных между собой горизонтальным и вертикальным шарнирами (рисунок 3). Первый дает возможность перемещения полурам при движении по неровной поверхности, второй же обеспечивает «складывание» полурам в горизонтальной плоскости при повороте трактора. В результате уменьшается ширина (не нужно пространство между шинами и рамой для поворота колеса) и радиус поворота [1]. Рис. 3. – Состав шарнира рамы трактора К-701 270 В процессе работы рама и механизмы задней навески испытывают воздействие от постоянно меняющихся по величине и направлению сил реакции сопротивления почвы на сельскохозяйственное орудие, нагрузки при колебаниях и раскачивании поднятой навесной машины, а также при транспортировке прицепов с грузом. Во время вспашки на них воздействуют силы, которые стараются развернуть трактор относительно направления движения в следствии чего изнашиваются детали вертикального и горизонтального шарниров, обеспечивающие угловое смещение полурам при поворотах, а также их взаимный поворот относительно горизонтальной оси. Суммарный износ в сопряжении может доходить до 8-10 мм. На износ деталей горизонтального шарнира существенное влияние оказывают и постоянно попадающая в зазоры между ними абразивная пыль, грязь, влага, остатки минеральных и органических удобрений, химикатов, которые вызывают коррозию рабочих поверхностей сопрягаемых деталей. Все указанные факторы, накапливаясь, изменяют геометрию рамы и пространственное расположение деталей механизма навески, приводят к появлению трещин в лонжеронах, ослаблению сварных, заклепочных и резьбовых соединений, деформации тяг, нарушают работу трактора и машинно-тракторного агрегата. Существующая технология восстановления работоспособности сопряжения наплавкой продлевает его послеремонтный ресурс на 60-70 % от нового, что является недостаточным. С другой стороны приобретение новых деталей в разы увеличит стоимость ремонта. В связи с вышесказанным эффективным направлением повышения послеремонтного ресурса шарнира рамы является применение в существующей технологической схеме ремонта упрочняющих технологий. Библиографический список: 1. Бурков В.В., Горбунов М.С., Гореликов В.Е. и др. «Эксплуатация и техническое обслуживание трактора К-700». Россельхозиздат, 1969 г. – 345 с. ANALYSIS OF OPERATING CONDITIONS AND CAUSES WEAR OF THE JOINT FRAME OF THE TRACTOR K-701 AND ITS MODIFICATIONS Morozov A.V. Key words: the Hinge of the frame, pairing, depreciation, restoration This paper analyses the reasons of failure of the brand tractors K-701 and its modifications. As a result of analysis it was found that a large percentage of failure of the tractor associated with the wear of parts of horizontal and vertical joints of frame. 271 УДК 631:362.7 ОСОБЕННОСТИ ОХЛАЖДЕНИЯ ЗЕРНА В ЗЕРНОСУШИЛКАХ КОНТАКТНОГО ТИПА В.И. Курдюмов, доктор технических наук, профессор; А.А. Павлушин, кандидат технических наук, доцент; Г.В. Карпенко, кандидат технических наук, доцент; С.А. Сутягин, кандидат технических наук, старший преподаватель; А.В. Журавлёв, студент 5 курса инженерного факультета ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Тел.: 89084788926; [email protected] Ключевые слова: сушка зерна, установка контактного типа, система охлаждения зерна. Сформулирована актуальность процесса охлаждения зерна после сушки. Рассмотрен критерий эффективности охлаждения высушенного зерна. Предложена установка контактного типа для сушки зерна включающая в себе систему охлаждения зерна после сушки. Использование предлагаемого средства механизации процесса сушки зерна позволит на высоком технологическом уровне обеспечит качественную сушку зерна с последующим его охлаждением до требуемой температуры. Сохранность зерна, его обработка и переработка в масштабах нашей страны - сложное и дорогостоящее дело, требующее современной материально-технической базы. В то же время опыт передовых хозяйств показывает, что производство высококачественного зерна выгодно - уровень рентабельности не менее 40 %. В ближайшие годы можно прогнозировать рост спроса на новую технику для обработки и хранения зерна. Увеличение валовых сборов зерна и уменьшение удельных затрат на его производство возможно лишь путём разработки и внедрения высокоэффективных технологических средств мирового уровня, созданные на основе концептуальных положений их развития. Таким образом, создание и адаптация средств механизации тепловой обработки зерна к условиям российского сельскохозяйственного производства является актуальной и важной научно-технической проблемой. При этом выбор и обоснование оптимальных технологических параметров процесса тепловой обработки зерна и режимов работы средств механизации этого процесса должны быть выполнены на основе всестороннего анализа физической и математической моделей этого процесса с учетом основных конструктивных особенностей и условий функционирования соответствующих устройств. Одним из условий правильно организованного процесса сушки зерна является обязательное охлаждение зерна после сушки. Выбор режимных параметров процесса охлаждения зерна после сушки зависит от ряда факторов, в том числе допустимого снижения температуры охлаждаемого зерна в условиях оптимального режима работы охладительной камеры зерносушилки. Температура зерна в охладительной камере должна снизиться до максимально низких температур. Для достижения необходимой температуры охлаждающего воздуха 272 требуются специальные условия, которых в условиях использования для этих целей атмосферного воздуха к моменту выпуска зерна из охладительной камеры нет. Поэтому действующая инструкция по сушке регламентирует температуру зерна после охлаждения на уровне, не превышающем температуру наружного воздуха более чем на 10 °С. Исследованиями установлено, что если работу охладительных камер зерносушилок оценивать только по разности температур охлажденного зерна и охлаждающего воздуха, то наиболее эффективно они работают в летних условиях. Это происходит потому, что летом температура наружного воздуха приближается к температуре зерна, поступающего на охлаждение после сушки. Такой метод оценки эффективности работы охладительных камер зерносушилок несовершенен, так как не учитывает исходной температуры поступающего на охлаждение зерна. К тому же продолжительность пребывания зерна в охладительной камере связана с производительностью зерносушилки и начальной влажностью сырого зерна и остается постоянной при изменении величины температурного перепада. С учетом изложенного выше, разработан критерий эффективности охлаждения высушенного зерна, учитывающий начальную температуру подаваемого на охлаждение зерна и степень его охлаждения [1]: где t2, t3 – соответственно исходная (до охлаждения) и конечная (после охлаждения) температура зерна, °С; t2опт– оптимальная температура охлаждённого зерна. Используя рассмотренный критерий эффективности охлаждения, можно анализировать кинетику процесса сушки зерна при различных режимах или способах охлаждения зерна и при этом устранить влияние таких параметров, как начальная температура зерна и температура охлаждающего воздуха. Для обеспечения эффективного процесса охлаждения при сушке зерна в контактных установках нами предложено следующее устройство для сушки зерна [2]. Устройство для сушки зерна включает вертикально установленный цилиндрический кожух 1, внешняя поверхность которого покрыта слоем теплоизолирующего материала 2, загрузочный бункер 3, выгрузное окно 4, соосно установленный внутри кожуха с возможностью вращения транспортирующий рабочий орган 5, выполненный в виде шнека, охлаждающее устройства, включающее вентилятор 6 и воздуховод 7, а также нагревательные элементы 8, размещенные на внешней поверхности кожуха 1 под слоем теплоизолирующего материала 2 между загрузочным бункером 3 и выгрузным окном 4 с возможностью индивидуального регулирования температуры нагрева каждого из участков кожуха 1 (рисунок). Кожух 1 выполнен составным, причём составные части кожуха разделены между собой кольцами 9, выполненными из теплоизолирующего материала. Каждая составная 273 часть кожуха 1 снабжена индивидуальным нагревательным элементом 8. С выгрузным окном 4 последовательно соединены два рукава 10 и 11. Рукав 10 установлен с наклоном вниз, а рукав 11 – с подъемом вверх. В месте соединения рукавов 10 и 11 выполнено окно 12, к которому присоединены воздуховод 7 с вентилятором 6. Рис. 1. – Устройство для сушки зерна (обозначения в тексте) Угол наклона воздуховода 7 равен углу наклона рукава 11, а на конце рукава 11 установлен приёмный бункер 13, выполненный сужающимся вниз. Верхняя часть приемного бункера 13 выполнена с плавным переходом от верхней части колена 11 к наружной стенке приёмного бункера 13. Транспортирующий рабочий орган 5 получает привод от шкива 14. В нижней части приемного бункера 13 выполнено выпускное окно 15. Устройство работает следующим образом. Включают нагревательные элементы 8. После достижения необходимой температуры кожуха 1 подают зерно в загрузочный бункер 3, откуда оно поступает в рабочую зону транспортирующего рабочего органа 5 и перемещается им к выгрузному окну 4. Контактируя с нагретой поверхностью кожуха 1, зерно также нагревается, теряет излишки влаги. Из выгрузного окна 4 нагретое зерно поступает в рукав 10, а затем потоком воздуха, создаваемым вентилятором 6 через воздуховод 7, зерно охлаждается и по рукаву 11 поступает в приёмный бункер 13. Сухое и охлаждённое зерно удаляется из приёмного бункера 13 через выпускное окно 15. При использовании зерна другой культуры меняют температуру нагрева каждого из участков кожуха 1 с помощью индивидуальных нагревательных элементов 8, изменяют частоту вращения рабочего органа 5 с помощью шкива 14, а также снижают или увеличивают скорость воздушного потока в воздуховоде 7 и рукаве 11, изменяя частоту вращения вентилятора 6. 274 Вертикальное расположение кожуха установки позволяет повысить коэффициент заполнения транспортирующего рабочего органа, что увеличивает площадь контакта зерна с греющей поверхностью и позволяет обеспечить более равномерный прогрев зерна. Последовательное соединение с выгрузным окном двух рукавов, первый из которых установлен с наклоном вниз, а второй – с подъемом вверх, а также выполнение верхней части приемного бункера с плавным переходом от верхней части второго колена к наружной стенке приёмного бункера позволяет обеспечить охлаждение зерна при выгрузке из сушилки без его травмирования. Это снижает время сушки при большой начальной влажности зерна и необходимости его повторного пропускания через устройство. Лёгкая выгрузка сухого и охлаждённого зерна обеспечивается выполнением приёмного бункера сужающимся вниз. Таким образом, охлаждение зерна после сушки является важной технологической операцией, влияющей на эффективность дальнейшей сохранности зерновой массы. Использование предлагаемого средства механизации процесса сушки зерна позволит на высоком технологическом уровне обеспечит качественную сушку зерна с последующим его охлаждением до требуемой температуры. Библиографический список: 1. Малин Н.И. Энергосберегающая сушка зерна. - М.: Колос, 2004. – 240 с. 2. Патент RU № 2428642. Устройство для сушки зерна. / В.И. Курдюмов, А.А. Павлушин; Опубл. 10.09.2011; Бюл. № 25. FEATURES COOL BEANS THE DRYER CONTACT TYPE Kurdyumov V.I., Pavlushin A.A., Karpenko G.V., Sutyagin S.A. Keywords: corn drying, setting a contact type cooling system grain. We formulate the relevance of the cooling process of grain after drying. The criteria of the cooling performance of dried grain. Proposed attaching a contact-type grain dryer comprising a cooling system grain after drying. Use of the proposed means of mechanization of the process of drying the grain will allow a high level of technology will provide high-quality grain drying followed by cooling it to the desired temperature. 275 УДК 631:362.7 К ВОПРОСУ О ПОВЫШЕНИИ ЭФФЕКТИВНОСТИ СУШКИ ЗЕРНА В.И. Курдюмов, доктор технических наук, профессор А.А. Павлушин, кандидат технических наук, доцент С.А. Сутягин, кандидат технических наук Д.В. Нестерова, студент 4 курса инженерного факультета ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия им П.А. Столыпина» тел. 89279842587, [email protected] Ключевые слова: зерно, установка контактного типа, сушка зерна Предложена новая конструкция установки контактного типа для сушки зерна, приведены технико-экономические показатели предложенной установки и зерносушилки СЗ-0,3. В технологии производства зерна широко распространен процесс его сушки. Для того, чтобы сохранить зерно, необходимо снизить его влажность до 14 %. С увеличением влажности зерна в его клетках появляется свободная влага, которая способствует повышению активности ферментов. Поэтому доведение влажности зерна до кондиционной, при соблюдении режимов обработки в сушильных установках, позволяет сохранять зерновой материал длительное время без потери его семенных и технологических свойств. Для сушки зерна в настоящее время применяют в основном установки конвективного типа. Однако такие установки имеют ряд недостатков: повышенные удельные затраты энергии на сушку зерна, высокие металлоемкость и удельная капиталоемкость. Поэтому применение существующих установок конвективного типа в фермерских хозяйствах снижает рентабельность производства как минимум на 30 %. Рис. 1. - Схема установки контактного типа для сушки зерна (обозначения в тексте) 276 На современном этапе развития зерносушильной техники появился широкий спрос в фермерских хозяйствах на малогабаритные установки, которые позволяют получить сухое зерно требуемого качества при низких эксплуатационных затратах. Нами предложена новая конструкция установки контактного типа для сушки зерна (рисунок 1) [1]. Устройство для сушки зерна состоит из кожуха прямоугольного сечения 1, покрытого слоем теплоизолирующего материала 2, загрузочного бункера 3, выгрузного окна 4, установленного внутри кожуха транспортирующего рабочего органа 5, нагревательных элементов 6, установленных между загрузочным бункером 3 и выгрузным окном 4, а также охлаждающего устройства, состоящего из вентилятора 7 и воздуховода 8. Транспортирующий рабочий орган 5 выполнен в виде бесконечной цепи со скребками. Внутри кожуха 1 горизонтально и параллельно одна над другой установлены верхняя пластина 9 и нижняя пластина 10. Между пластинами 9, 10 расположены на равном расстоянии от загрузочного бункера 3 и выгрузного окна 4 нагревательные элементы 6. Верхняя ветвь цепи со скребками опирается на верхнюю пластину, которая выполнена короче горизонтального участка верхней ветви цепи, причем ее край установлен на уровне внешнего края выгрузного окна, а нижняя ветвь цепи со скребками опирается на нижнюю пластину. Воздуховод 8 охлаждающего устройства расположен на равном расстоянии от загрузочного бункера 3 и выгрузного окна 4. В предложенной установке сушка зерна происходит в теплоизолированном кожухе 1. При этом зерно перемещается транспортирующим рабочим органом 5 от загрузочного бункера 3 к выгрузному окну 4 по греющим пластинам 9 и 10 в единичном слое и равномерно нагревается, что повышает качество и эффективность сушки. Основные технико-экономические показатели предложенной и серийно выпускаемой установки конвективного типа СЗ-0,3 представлены на рисунке 2. Рис. 2. - Технико-экономические показатели сушильных установок Таким образом, анализ технико-экономических показателей показывает, что применение предложенной установки контактного типа позволит повысить эффективность 277 сушки зерна, получить сухое зерно требуемого качества и сократить удельные затраты энергии как минимум в 6 раз, удельные металлоемкость и капиталоемкость - в 4 раза. Библиографический список: 1. Патент на изобретение № 2465527 РФ/ Устройство для сушки зерна/ В.И. Курдюмов, А.А. Павлушин; С.А. Сутягин. Опубликовано 27.10.2012г. Бюл. 30. ON THE QUESTION OF INCREASING THE EFFICIENCY OF GRAIN DRYING V.I. Kurdyumov, A.A. Pavlushin, S.A. Sutyagin Ulyanovsk state academy of agriculture Keywords: grain, the installation of the contact type, drying of grain. A new design of the installation of the contact type for drying of grain, shows economic performance of our installation and grain dryers GD-0, 3. УДК 631.173:658.58 ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМЫ ТЕХНИЧЕСКОГО ОБСЛУЖИВАНИЯ И РЕМОНТА ЗЕРНОУБОРОЧНЫХ КОМБАЙНОВ В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ К.В. Шленкин, кандидат технических наук, доцент; А.А. Павлушин, кандидат технических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Тел.: 89084788926; [email protected] Ключевые слова: технический сервис, ремонт сельскохозяйственной техники, эксплуатационные показатели. Рассмотрено современное состояние системы технического обслуживания и ремонта зерноуборочных комбайнов. Выявлены возможные пути повышения эффективности системы организации и управления системы технического обслуживания. Научно-технический прогресс является главным фактором повышения эффективности и интенсификации сельскохозяйственного производства, повышение производительности труда, увеличения объемов производства продукции земледелия и животноводства, улучшения использования ресурсов, преобразования сельскохозяйственного труда в разновидность индустриального. Для задействования этого фактора в полную силу требуется осуществить мероприятия по дальнейшему совершенствованию техники 278 и техническому перевооружению сельского хозяйства. Одной из основных целью технического перевооружения АПК в части зернопроизводства является формирование эффективно функционирующего парка зерноуборочных комбайнов. Для достижения необходимых параметров отечественного парка машин необходимо осуществить: оснащение дилерской сети сельскохозяйственных товаропроизводителей приоритетными отечественными техническими средствами для ведущих отраслей сельского хозяйства и освоение системы их эффективного использования; реформирование инженерной инфраструктуры сельского хозяйства и формирование высокоэффективных структур производства продукции коллективными, крестьянскими (фермерскими) и приусадебными хозяйствами, машинно-технологическими станциями с освоением ресурсосберегающих машинных технологий; реструктуризацию и реконструкцию предприятий машиностроения для агропромышленного комплекса; возрождение и развитие системы комплексного технического сервиса сельскохозяйственных предприятий; реформирование системы материально-технического обеспечения сельскохозяйственных предприятий; создание системы информационно-консультационного обеспечения агропромышленного комплекса. Текущий этап развития сельского хозяйства характеризуется все большей концентрацией, специализацией и интеграцией производства. Этот процесс выдвигает новые требования к составу технических средств, их характеристикам и вносит определенные изменения в сельскохозяйственные технологии, связывая в единую цепочку операции по выращиванию и переработке основных видов продукции. В общем виде тенденции развития зерноуборочных комбайнов можно охарактеризовать как разработку и внедрение более совершенной механики, электроники, гидравлики, гидроавтоматики и прогрессивных материалов, применение заводами современных технологий и прогрессивных видов оборудования, оснастки и инструментов. Исследование показало, что из предоставляемых производителям сельскохозяйственной продукции услуг особую значимость имеют услуги технического обслуживания и ремонта комбайнов. По значению и масштабам их производства, количеству участниковисполнителей организация этих работ представляется наиболее сложной, она охватывает отрасли машиностроения, энергетики, ремонтные мастерские и средства технического обслуживания бывших совхозов и колхозов, преобразованных в различные хозяйственные формирования, ремонтно-обслуживающие предприятия АПК. Анализ состояния сложившейся системы показывает, что радикальное улучшение организации и управления ТОР зерноуборочных комбайнов, а значит соответствующих технологий и средств, возможно при условии максимального использования экономических рычагов и определенного государственного регулирования. Все работы ТОР можно разделить на две группы [4]. К первой группе относят технологические процессы, без проведения которых сельскохозяйственные машины (или МТА) не могут функционировать (заправка топливом, маслом, замена деталей, вышедших из строя, операция по восстановлению мощности дизеля и т.п.). Ко второй группе относят операции, невыполнение в срок (или некачественное выполнение) которых сопряжено с отдаленными негативными последствиями в виде сокращения наработки на отказ, ухудшения работы машины и т.п. Эту группу работ обычно 279 не выполняют, поэтому здесь следует задействовать экономические и административные рычаги. В качестве экономических рычагов выступают приемлемая цена ТОР, рентабельность работ исполнителя технического сервиса, гарантии на выполненные операции как по сроку, качеству, так и по времени гарантийного ремонта и, наконец, санкции за невыполнение договорных работ. Административные рычаги выполнения ТОР могут быть задействованы в первую очередь через обязательную сертификацию операций, от выполнения которых зависят показатели безопасной работы машин (концентрация токсических веществ в отработавших газах двигателя. Течь топлива, масла, других рабочих жидкостей, вибрация на сиденье оператора, рычагах и педалях управления, уровень шума, состояние тормозной системы и др.). Санкции, как один из экономических рычагов улучшения ТОР, должны в обязательном порядке учитывать убытки (упущенную прибыль) от простоя машин из-за отказов. Их нужно учитывать также при оптимизации основных эксплуатационных показателей ТОР. Величину убытков за 1 ч простоя машины предлагается определять по формуле [1], Cn= Цn РУПc К n(Тср- Та) / (2000 Тср. Тсм.К г), (1) где Цn – средняя закупочная цена сельскохозяйственной продукции, руб./т; Р – средняя рентабельность производства сельскохозяйственной культуры, %; У – урожайность при условии выполнения всех сроков возделывания и уборки, ц/га; Пс – сезонная наработка машины или обрабатываемая ею площадь, га; Кп – доля потерь продукции при задержке работ на одни сутки; Тф,Та – фактические и агротехнические (зоотехнические) сроки выполнения работ (вспашка, посев, культивация, уборка и др.), сутки; Тсм- средняя продолжительность рабочей смены, ч; Кг - коэффициент готовности машины. С учетом издержек от простоя техники из-за отказов нуждается в обосновании такой важный показатель, как Кг. Его оптимальную величину следует устанавливать, используя выражение[3]: Êã = 1 1   ( β +1)  1 +  Ö ï ÐÓÏ ñ Ê n     2000Tñì dβ    (2) где d, b - показатели скорости изменения издержек на техническую эксплуатацию машины (руб/ч) и степени функции их изменения. При дилерской системе технического сервиса, как показывает опыт ее применения за рубежом, в несколько раз уменьшаются кратковременные остановки, простои. Необходимо сопоставить надежность отремонтированной техники при различных формах обслуживания. Прямая связь завода-изготовителя и ремонтно-обслуживающих предприятий (РОП) позволяет своевременно провести технический сервис, расширяя сферу обслуживания техники у товаропроизводителей, повышая тем самым надежность и долговечность техники. 280 Существует несколько основных форм организации технического обслуживания машинно-тракторного парка сельскохозяйственных предприятий [2]: а) ТО проводят мастера-наладчики хозяйств с участием механизаторов при техническом руководстве РОП или «Мехэнергосервис» на договорных началах; б) ТО проводят в хозяйствах, не имеющих ПТО; в) ТО проводят в хозяйствах, имеющих ПТО. Техническое обслуживание силами хозяйства выполняют при следующих условиях; 1. Достаточная мощность ЦРМ, оснащенная необходимым технологическим оборудованием с возможностью его рациональной загрузки в течение года; 2. Наличие кадров, обслуживающих технику; 3. Наличие инженерно-технических кадров, позволяющих укомплектовывать инженерно-техническую службу хозяйства; 4. Отсутствие надежной транспортной связи с районными РОП. При современной системе рыночных отношений такой вид ТО в хозяйствах наиболее выгоден, так как это дешево, быстро, но в хозяйствах, где нет ПТО, резко падает показатель технического использования сельскохозяйственной техники - надежность. Техническое обслуживание сельскохозяйственной техники силами РОП хозяйствам невыгодно, так как запасные части и услуги дорожают. Но, имея хорошо оснащенную материально-техническую базу, различные агрегаты ТО хозяйство может своевременно и качественно провести ремонт и ТО, увеличивая надежность машин. Следует отметить, что полное оснащение средствами производства ремонтно-обслуживающей базы хозяйств и обеспечение с помощью этих средств регламентированного технического обслуживания, позволят повысить надежность сельскохозяйственной техники, в частности, комбайнов «Дон-1500». Таким образом, качество и надежность отремонтированных машин в значительной степени зависят не только от уровня технологии и организации ремонтных работ и восстановления изношенных деталей непосредственно на ремонтных предприятиях, но и от системы организации технического обслуживания и ремонте машин в целом. Комбайны чувствительны к качеству проводимого обслуживания. Поэтому необходим поиск организации таких сервисных услуг, которые обеспечат требуемую работоспособность этой сложной техники. В современных экономических условиях нужны новые формы управления элементами надежности. Библиографический список: 1.Ежемесячный сельскохозяйственный журнал «Ульяновск – Агро»: Ульяновск, 2008, № 1-2, № 3…4. 2.Михлин В.М. Прогнозирование технического состояния машин. - М.: Колос, 1976. -278 с. 3.Черноиванов В.И. Состояние и перспективы технического сервиса в АПК Российской Федерации. -М.: ГОСНИТИ, 1993. - С. 3...7. 4.Черноиванов В.И., Михлин В.И. Новые направления технического сервиса в условиях рынка. // Тракторы и сельскохозяйственные машины. 1994. – С. 11…14. 281 FEATURES OF MAINTENANCE AND REPAIR COMBINE HARVESTERS CURRENT CONDITIONS Shlenkin K.V., Pavlushin A.A. Keywords: technical support, repair of agricultural machinery, operational performance. The current state of maintenance and repair of combine harvesters. Identifies possible ways to improve the organization and management of the maintenance system. УДК 658.9 ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ШУМ, ЕГО ВЛИЯНИЕ НА ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА И МЕТОДЫ БОРЬБЫ С НИМ О.Н. Степанидина, ассистент Н.С. Киреева к.т.н., доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» ТЕЛ.8(8422)55-95-90, [email protected] Ключевые слова: Шум, ультразвук, воздействие, работоспособность В работе анализируется вредное влияние шума на организм человека и приводятся методы борьбы с ним. Снижение шума в жизнедеятельности человека становится актуальной проблемой. Эксплуатация современного промышленного оборудования и средств транспорта сопровождается значительным шумовым загрязнением окружающей среды. Шум является одним из наиболее распространенных вредных производственных факторов и при определенных условиях может выступать как опасный производственный фактор. Среди всех шумов, оказывающих воздействие на человека, выделяется шум производственного происхождения, а именно механический шум. Уровни этого шума достигают 120 дБ. Во многих отраслях промышленности преобладают шумы импульсные и ударные, которые выделяются как весьма вредные. Шум наносит вред не только здоровью людей, но и экономике страны. Так люди, занятые трудом умственной напряженности, делали на фоне шума в 70 дБ почти в два раза больше ошибок, чем в тишине. Работоспособность занятых умственным трудом падает примерно на 60 %, а физическим - на 30 %. Шум ударного происхождения наиболее характерен для промышленности (металлургия, машиностроение, транспорт) и обуславливает соударение машин и механизмов в процессе работы. Эта проблема относится к числу наиболее актуальных проблем, связанных с оценкой поведения различных конструкций в условиях воздействия интенсивных импульсивных нагрузок, которые возникают при эксплуатации современного оборудования. 282 Проявление вредного воздействия шума на организм человека весьма разнообразно. Длительное воздействие интенсивного шума (выше 80 дБА) на слух человека приводит к его частичной или полной потере. В зависимости от длительности и интенсивности воздействия шума происходит большее или меньшее снижение чувствительности органов слуха, выражающееся временным смещением порога слышимости, которое исчезает после окончания воздействия шума, а при большой длительности и (или) интенсивности шума происходят необратимые потери слуха (тугоухость), характеризуемые постоянным изменением порога слышимости. Различают следующие степени потери слуха: · I степень (легкое снижение слуха) – потеря слуха в области речевых частот составляет 10 - 20 дБ, на частоте 4000 Гц – 20 - 60 дБ; · II степень (умеренное снижение слуха) – потеря слуха в области речевых частот составляет 21 - 30 дБ, на частоте 4000 Гц – 20 - 65 дБ; · III степень (значительное снижение слуха) – потеря слуха в области речевых частот составляет 31 дБ и более, на частоте 4000 Гц – 20 - 78 дБ. Действие шума на организм человека не ограничивается воздействием на орган слуха. Через волокна слуховых нервов раздражение шумом передается в центральную и вегетативную нервные системы, а через них воздействует на внутренние органы, приводя к значительным изменениям в функциональном состоянии организма, влияет на психическое состояние человека, вызывая чувство беспокойства и раздражения. Человек, подвергающийся воздействию интенсивного (более 80 дБ) шума, затрачивает в среднем на 10 – 20% больше физических и нервно-психических усилий, чтобы сохранить выработку, достигнутую им при уровне звука ниже 70 дБ(А). Установлено повышение на 10 – 15% общей заболеваемости рабочих шумных производств. Воздействие на вегетативную нервную систему проявляется даже при небольших уровнях звука (40 – 70 дБ(А). Из вегетативных реакций наиболее выраженным является нарушение периферического кровообращения за счет сужения капилляров кожного покрова и слизистых оболочек, а также повышения артериального давления (при уровнях звука выше 85 дБА). При импульсных и нерегулярных шумах степень воздействия шума повышается. Изменения в функциональном состоянии центральной и вегетативной нервных систем наступают гораздо раньше и при меньших уровнях шума, чем снижение слуховой чувствительности. В настоящее время «шумовая болезнь» характеризуется комплексом симптомов: · снижение слуховой чувствительности; · изменение функции пищеварения ( понижение кислотности); · сердечно-сосудистая недостаточность; · нейроэндокринные расстройства. Работающие в условиях длительного шумового воздействия испытывают раздражительность, головные боли, головокружение, снижение памяти, повышенную утомляемость, понижение аппетита, боли в ушах и т.д.. Установлено, что при работах, требующих повышенного внимания, при увеличении уровня звука от 70 до 90 дБА производительность труда снижается на 20%. Ультразвуки (свыше 20000 Гц) также являются причиной повреждения слуха, хотя человеческое ухо на них не реагирует. Мощный ультразвук воздействует на нервные клет- 283 ки головного мозга и спинной мозг, вызывает жжение в наружном слуховом проходе и ощущение тошноты. Не менее опасными являются инфразвуковые воздействия акустических колебаний (менее 20 Гц). При достаточной интенсивности инфразвуки могут воздействовать на вестибулярный аппарат, снижая слуховую восприимчивость и повышая усталость и раздражительность, и приводят к нарушению координации. Особую роль играют инфрачастотные колебания с частотой 7 Гц. В результате их совпадения с собственной частотой альфа - ритма головного мозга наблюдаются не только нарушения слуха, но и могут возникать внутренние кровотечения. Инфразвуки (6 - 8 Гц) могут привести к нарушению сердечной деятельности и кровообращения. Методы борьбы с шумом. Для борьбы с шумом в помещениях проводятся мероприятия как технического, так и медицинского характера. Основными из них являются: • изоляция источника шума от окружающей среды (применение глушителей, экранов, звукопоглощающих строительных материалов); • ограждение шумящих производств зонами зеленых насаждений; • применение рациональной планировки помещений; • использование дистанционного управления при эксплуатации шумящего оборудования и машин; • использование индивидуальных средств защиты (беруши, наушники, ватные тампоны); • проведение периодических медицинских осмотров с прохождением аудиометрии; • проведение профилактических мероприятий, направленных на восстановление здоровья. Нужно помнить, что против шума человек практически беззащитен. Ослепительно яркий свет заставляет нас инстинктивно зажмуриваться. Тот же инстинкт самосохранения спасает нас от ожога, отводя руку от огня или от горячей поверхности. А вот на воздействие шумов защитной реакции у человека нет. Библиографический список: 1. ГОСТ 12.1.003-83. Шум. Общие требования безопасности / ССБТ. – М.: Изд-во стандартов, 1991. – 6 с. 2.Г.А.Суворов, А.М.Лихницкий “Импульсный шум и его влияние на организм человека”, Ленинград, 1995 3.Борьба с шумом на производстве: Справочник под ред. Е. Я. Юдина – М.: Машиностроение, 1985. PRODUCTION NOISE, ITS INFLUENCE ON THE HUMAN BODY AND METHODS OF FIGHT AGAINST IT Stepanidina O. N. Kireeva N.S. Keywords: Noise, ultrasound, influence, working capacity. 284 In work the adverse effect of noise on a human body is analyzed and methods of fight against it are given. УДК 421.43 ДВУХТОПЛИВНАЯ СИСТЕМА ПИТАНИЯ ДИЗЕЛЯ С АВТОМАТИЧЕСКИМ РЕГУЛИРОВАНИЕМ СОСТАВА СМЕСЕВОГО ТОПЛИВА Е.А. Сидоров, кандидат технических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-41, [email protected] Л.И. Сидорова, ассистент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-41, [email protected] Ключевые слова: биотопливо, дизельное смесевое топливо, дизельный двигатель, двухтопливная система питания дизеля. Работа посвящена конструктивной адаптации топливной системы дизельного двигателя для работы на дизельном смесевом топливе. Предлагаемая двухтопливная система питания дизеля позволяет автоматически регулировать состав смесевого топлива в зависимости от нагрузочного режима работы дизеля. На сегодняшний день в России ведутся исследования�� , направленные на изучение различных видов биотоплива, произведенных на основе растительного сырья, одним из которых является дизельное смесевое топливо (ДСТ), получаемое путем смешивания минерального дизельного топлива (ДТ) и растительного масла (РМ) [1]. Исследования показали, что ДСТ обеспечивает эффективную работу дизеля, а также улучшает его экологические показатели, что способствует экономии минерального ДТ и улучшению экологической обстановки [2]. Однако применение смесевого топлива требует конструктивной адаптации штатной системы питания дизеля. Предлагаемая двухтопливная �� система питания дизеля с автоматическим регулированием состава смесевого топлива, представленная на рисунке позволит использовать ДСТ в дизельных двигателях [3]. 285 Рис. – Двухтопливная система питания дизеля с автоматическим регулированием состава смесевого топлива (наименование позиций по тексту) Двухтопливная система питания дизеля содержит бак минерального топлива 1, бак биологического топлива 2, линию забора минерального топлива 3, состоящую из фильтра грубой очистки 4 и дозатора 6, линию забора биологического топлива 7, состоящую из фильтра грубой очистки 8, электронасоса 9 с обратным клапаном 10 и дозатора 11, мембранного исполнительного механизма, состоящего из штока 16, корпуса 17, мембраны 18 и пружины 19, кинематически связанного с дозаторами 6 и 11 с помощью управляющих 12, 13 и регулируемых 14,15 тяг, смеситель биологического и минерального топлива 20, линии подачи дизельного смесевого топлива 21, топливоподкачивающего насоса 22, фильтра тонкой очистки 5, топливного насоса высокого давления 23 и форсунок 24. Работает двухтопливная система питания дизеля следующим образом. Пуск дизеля и его прогрев осуществляется на минеральном топливе. При этом дозатор минерального топлива 6 полностью открыт, а дозатор биологического топлива 11 полностью закрыт. Минеральное топливо из бака 1, пройдя фильтр грубой очистки 4, дозатор 6, смеситель 20, топливоподкачивающий насос 22, фильтр тонкой очистки 5, то- 286 пливный насос высокого давления 23 и далее форсунками 24 впрыскивается в цилиндры дизеля. После прогрева дизеля на минеральном топливе, включают электрический насос 9, обеспечивающий подачу биологического топлива из бака 2 через топливный фильтр 8 и дозатор 11 в смеситель 20. Минеральное топливо при этом подается в смеситель 20 аналогично работе дизеля в режиме пуска и прогрева. В смесителе 20 оба вида топлива перемешиваются, и полученное дизельное смесевое топливо, подаётся топливоподкачивающим насосом 22, через фильтр тонкой очистки 5 в топливный насос высокого давления 23 и далее форсунками 24 впрыскивается в цилиндры дизеля. При изменении нагрузочного режима работы дизеля, в результате изменения величины разряжения во впускном коллекторе дизеля, приводится в действие мембранный исполнительный механизм, шток которого через кинематически связанные с ним регулируемые 14, 15 и управляющие 12,13 тяги, изменяет положение заслонок дозаторов 6 и 11, тем самым меняя соотношение поступающего в смеситель 20 минерального и биологического топлива. Тем самым, достигается автоматическое регулирование состава дизельного смесевого топлива непосредственно в процессе работы дизеля. Таким образом, предлагаемая система питания позволяет адаптировать дизель для работы на дизельном смесевом топливе. Библиографический список: 1. �� ГОСТ Р�� 52808-2007 Нетрадиционные технологии. Энергетика биоотходов. Термины и определения. – М.: Стандартинформ, 2008. – 25 с. 2. Экспериментальная оценка влияния смесевого топлива на показатели рабочего процесса дизеля / Уханов А�� .�� П�� ., �� Сидоров Е�� .�� А�� ., �� Сидорова Л�� .�� И�� ., �� Година Е�� .�� Д�� . // Известия Самарской ГСХА. – 2012. –№3. – С.33-38. 3. Пат. 2476716 РФ, МПК F02M 43/00. Двухтопливная система питания дизеля с автоматическим регулированием состава смесевого топлива / Уханов А.П., Уханов Д.А., Сидоров Е.А., Сидорова Л.И., Година Е.Д. – Опубл. 27.02.13. – Бюл. №6. – 6 с. DUAL-FUEL DIESEL INJECTION SYSTEM WITH AUTOMATIC REGULATION OF THE COMPOSITION MIXED FUEL E.A. Sidorov, L.I. Sidorova Key words: biofuels, diesel mixed fuel, diesel engine, dual-fuel diesel injection system. The work is devoted to the constructive adaptation of the fuel system of a diesel engine to run on diesel mixed fuel. The proposed dual-fuel diesel injection system automatically adjusts the composition of mixed fuel, depending on the load mode of the diesel engine. 287 УДК 658.562.014:006.354 РОЛЬ ВХОДНОГО КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ЗАПАСНЫХ ЧАСТЕЙ НА ПРЕДПРИЯТИЯХ АГРОПРОМЫШЛЕННОГО КОМПЛЕКСА Л.Л. Хабиева, аспирантка кафедры «ТС и РМ» ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8-937-459-29-08, [email protected] В.В. Варнаков, доктор технических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 67-50-53, [email protected] Ключевые слова: входной контроль качества, компьютерная система управления качеством продукции, анализ уровня дефектности деталей В статье проводится обзор качества выпускаемой сельскохозяйственной техники и предлагается создать компьютерную систему управления качеством продукции, соответствующую требованиям стандартов ИСО серии 9000: 2000. Современная рыночная экономика предъявляет принципиально новые требования к качеству выпускаемой продукции. Главным образом это связано с тем, что в настоящее время выживаемость любого завода-изготовителя, его устойчивое положение на рынке товаров и услуг определяется уровнем конкурентоспособности, которая зависит от многих факторов, из них можно выделить два основных - уровень цены и качество продукции. Причем второй фактор постепенно выходит на первое место. Теперь сельскохозяйственные товаропроизводители, покупая продукцию машиностроения, руководствуются не только ее стоимостью, но и качеством изготовления. Это обусловлено в первую очередь тем, что производители сельскохозяйственной продукции пытаются избегать затрат, связанных с ремонтом некачественной техники. Кризис в машиностроительной промышленности незамедлительно сказался на качестве машин, поставляемых агропромышленному комплексу. С каждым годом, начиная с 1991г., происходит ухудшение качества новых машин, несмотря на то, что цены на их приобретение возрастают. Заводы-изготовители не в полной мере, а порой и совсем, не проводят входной контроль качества поступающих материалов и комплектующих изделий, осуществляют текущий контроль качества по упрощенным схемам, что приводит к изготовлению низкокачественной продукции. Анализ выпускаемой в настоящее время заводами-изготовителями сельскохозяйственной техники показал, что количество машин, имеющих отклонения от требований технических условий, составляет 95% - 96% (рисунок 1), то есть такие отклонения, практически имеют все поставляемые машины. 288 Рис. 1. - Сельскохозяйственная техника, выпускаемая в настоящее время Нормативам по надежности не соответствуют до 30% предъявленных образцов техники. Отклонения по основным эксплуатационным показателям наблюдаются у 33% машин. В село поступают более 35% бракованных изделий сельхозмашиностроения. Вот почему одним из главных элементов в системе повышения качества сельхозмашиностроительной продукции является организация входного контроля её качества на базах агросервиса, ремонтно-технических предприятиях и непосредственно у производителей сельскохозяйственной продукции. Актуальность входного контроля качества обусловлена, в первую очередь, крайне недостаточным уровнем механизации сельского хозяйства. Например, наличие основных видов техники в сельском хозяйстве в 1990-2011 гг. уменьшилось более чем в 4 раза (рисунок 2). Это обостряется низким качеством техники и запасных частей, поставляемых селу. Рис. 2. – График изменения парка техники сельскохозяйственных предприятий в 1990 – 2011гг. в процентном соотношении В этой связи входной контроль качества сельхозтехники и запасных частей, организованный у дилера, обеспечит заслон поступлению некачественной продукции сель- 289 хозтоваропроизводителям и ремонтным предприятиям. В зависимости от потребностей и возможностей предприятия, желающего создать компьютерную систему управления качеством продукции (КС УКП), соответствующую требованиям стандартов ИСО серии 9000: 2000, на рынке должны предлагаться различные версии КС УКП, отличающиеся набором электронных модулей, решающих различные задачи обеспечения эффективности производства высококачественной и конкурентоспособной продукции. Автоматизированный модуль «Входной контроль комплектующих изделий» (модуль «ВК») должен производить сбор, накопление и оперативный анализ результатов контроля получаемых комплектующих изделий. Файл базы данных модуля «ВК» может иметь следующую структуру: наименование и модель изделия, заводской номер, дата проведения проверки, коды отказавших деталей и элементов и т.д. На основе этой информации модуль «ВК» позволяет производить определение и анализ уровня дефектности получаемых материалов, деталей, узлов и комплектующих изделий за интересующий потребителя период времени, анализ динамики изменения потока отказов, построение гистограммы распределения отказов по заданным кодам и т.д. Анализ уровня дефектности деталей проводится при помощи выборочного контроля, основанного на математической теории вероятности. При выборочном контроле проверяется относительно небольшое количество единиц продукции из той совокупности, которой она принадлежит. Для расчета объема выборки можно использовать формулу А.Н. Колмагорова: n = N·[1-(β/100)(100/qN)], (1) где n – объём выборки; N – общее число единиц продукции в партии; β – средний процент принимаемых партий с заданной долей дефекных единиц; q – допустимая доля дефектных изделий, %. Следовательно из формулы (1) выражаем допустимую долю дефектных изделий: q = (100/N) · [(lg 90 -2)/lg (1 – (n/N))]. (2) Пример приёмки в среднем 90 % партий продукции при плане контроля: N = 200, n = 42, c = 0 (рисунок 3). Рис. 3. – Оперативная характеристика плана контроля 290 Cредняя доля дефектных изделий в партиях составит: q = (100/200) · [(lg 90 -2)/lg (1 – (42/200))] = 0,5· [(-0,045)/(-0,1)] = 0,0022 q = 0,22 %. Получаемая информация необходима для представления поставщику обоснованных претензий по качеству поставляемых изделий, разработки и согласования с поставщиком конкретных конструкторско-технологических и организационных мероприятий по обеспечению качества получаемых изделий, совершенствования методики входного контроля комплектующих изделий у потребителя и выходного контроля изделий у изготовителя, а также других вопросов по обеспечению их качества. Библиографический список: 1.В. Барабанов, Н. Херсонский, С. Карасев, В. Пономаренко, В. Рожков - Применение Cals-технологий для электронного описания систем качества предприятий с учетом реализации принципов TQM 2.Новицкий Н.М., Олексюк В.Н. Управление качеством продукции: учебное пособие – Минск: Новое знание, 2001 - 238с. ROLE INCOMING QUALITY CONTROL OF SPARE PARTS IN ENTERPRISES OF AGRICULTURE L.L. KHABIEVA, V.V. VARNAKOV Keywords: incoming quality control, computer system of product quality control, analysis of the level of defective parts. The article provides an overview of the quality of agricultural machinery and proposed to establish a computer system of product quality control that meets the requirements of ISO 9000: 2000. Analysis of defective parts is carried out by means of sampling, based on the mathematical theory of probability. УДК 543.082/.084 КОМПЛЕКТ ПРИБОРОВ ДЛЯ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ СМАЗОЧНЫХ МАСЕЛ В.М. Холманов, кандидат технических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 25-95-53 М.В. Селезнев, аспирант ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 25-95-53, [email protected] Ключевые слова: комплект приборов, смазочное масло, нерастворимые при- 291 меси, кинематическая вязкость, общая коррозионность. Разработан комплект приборов, позволяющий контролировать состояние моторного и трансмиссионного масла в процессе эксплуатации в агрегатах грузовых автомобилей. Данный комплект приборов позволяет осуществлять оценку масел, как в лабораториях, так и непосредственно в условиях эксплуатации. Смазочное масло в системе смазки выполняет важную функцию и является одной из главных её деталей. Масло, так же как и всякая деталь, имеет свои размеры и параметры, такие как объём, загрязнённость, кинематическая вязкость, кислотность и другие, которые могут измеряться с помощью системы измерительных приборов. Под системой измерительных приборов следует понимать такую их совокупность, при которой обеспечивается максимальный контроль состояния масла. Для определения состояния масла в настоящее время существуют всевозможные технические средства и приборы. Однако зачастую они довольно сложны по своей конструкции или конструктивно не доработаны, дают большой процент погрешности при проведении анализа [1]. В данной статье предлагается комплект приборов для оценки состояния смазочного масла (рисунок 1). Рис.1. - Комплект приборов для оценки состояния масла С помощью него определяется общее содержание механических и нерастворимых примесей, значение кинематической вязкости и концентрация корродирующих элементов в масле. По мере работы автомобиля, масло загрязняется органическими и неорганическими примесями. Величина содержания этих примесей, может определяться в данном приборе, с помощью светового потока, проходящего через тонкий слой масла (рисунок 2). 292 Рис. 2. – Принципиальная схема комплекта приборов Для этого, капля масла, взятая масляным щупом из картера трансмиссии, помещается между стёклами 3, которые вставляются в специальную обойму 5, где они сжимаются пружинами. По периметру одного стекла нанесена полоска эпоксидного клея шириной 3 мм и высотой 0,3 мм, за счёт чего обеспечивается постоянная толщина масляного слоя. Под действием силы сжатия масло растекается до тонкого равномерного слоя 4, просвечиваемого лучами, исходящими от источника света 1, закреплённого в отражателе 2. Ослабленный пучок света попадает на фотоэлемент 6, где возникает ЭДС, фиксируемая регистрирующим устройством 7. Стрелка гальванометра в зависимости от плотности слоя отклоняется на соответствующую величину. Шкала прибора отградуирована в условных единицах от 0 до 30, по которым можно судить о запасе функциональных свойств смазочного масла. Под действием контактных давлений и нагрузочных сил масло изменяет свои свойства и увеличивается такой показатель как кинематическая вязкость, определяемая пружинным вискозиметром. Пружинный вискозиметр (рисунок 2) состоит из корпуса 8, шприца 9, нагревателя воды 10, штока 12, сжимающего пружину 14 и фиксирующего поршень в верхнем положении фиксатором 15. Имеется заборная трубка 17, через которую закачивается трансмиссионное масло объёмом 200 см³. Верхним контактом 11 фиксатор освобождает шток, одновременно включая секундомер. Пружина 14 разжимается и при достижении нижней точки размыкает второй контакт 16. Зная время истечения масла через калиброванное отверстие и постоянную вискозиметра при 100 °С, определяют значение кинематической вязкости [2]. По мере работы масла в нём постепенно накапливаются корродирующие вещества, содержащие в себе элементы серной и сернистой кислот. 293 Для определения общей коррозионности масла разработан метод её измерения в потоке света, отражённого от поверхности свинцовой пластинки. Работа прибора осуществляется следующим образом. Предварительно отполированная до Ra = 0,32 – 0,16 мкм наждачной бумагой № 000 свинцовая пластинка 19, размером 45×45×5 мм, помещается в ёмкость с испытуемым маслом. Масло нагревается до 100 ± 2 °С и в нём пластинка выдерживается в течении одного часа. Под воздействием корродирующих веществ полированные поверхности пластинки приобретают более тёмный цвет. После высыхания пластинку помещают в устройство, где на неё от источника 21 направляется пучок света, который отражаясь от потемневшей поверхности, попадает на фотоэлемент 18 , на котором возникает ЭДС, регистрируемая устройством 20. По величине отражённого светового потока судят о коррозионной агрессивности смазочного масла. Шкала прибора отградуирована в условных единицах от 0 до 40. Погрешность прибора составляет 2,73 % [3]. Вывод: Разработанный комплект приборов является простым и универсальным, так как при минимальном количестве показателей, позволяет наиболее полно и достоверно осуществлять оценку состояния смазочного масла. Питание комплекта приборов осуществляется напряжением 220 и 12 вольт. Библиографический список: 1.Холманов В. М. Диагностика и восстановление моторного масла / В. М. Холманов – Ульяновск, УГСХА, 2006 – 268 с. 2.Селезнев М.В. «Приборы для оценки свойств трансмиссионного масла»// журнал «Сельский механизатор», вып.№9, Москва, 2012 г. 3.Яковлев Л. Г. Погрешность контрольно-измерительных устройств / Л. Г. Яковлев-Киев: Техника, 1975 - 231 с. SET OF DEVICES FOR THE ASSESSMENT OF THE CONDITION OF LUBRICANT OILS Keywords: set of devices, lubricant oil, insoluble impurity, kinematic viscosity, general corrodibility The set of the devices, allowing to supervise a condition of engine and transmission oil in use in units of trucks is developed. This set of devices allows to carry out an assessment of oils, as in laboratories, and directly under operating conditions. 294 УДК 631.3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ШЕРОХОВАТОСТИ ПОВЕРХНОСТИ ВАЛОВ ПОСЛЕ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВ ЭЛЕКТРОМЕХАНИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКИ С.А. Яковлев, кандидат технических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(8422) 55-95-97, [email protected] И.Г. Яковлева, кандидат педагогических наук, ассистент Технологический институт – филиал ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8(84235) 2-07-27, [email protected] С.К. Львов, студент 1 курса инженерного факультета ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» тел. 8-953-98-02-681, [email protected] Ключевые слова: микрогеометрия, шероховатость, поверхность, электромеханическая обработка Работа посвящена определению шероховатости поверхности после различных методов электромеханической обработки валов из стали 45. При проведении исследований авторами установлено, что после электромеханической обработки снижается шероховатость поверхности. Применение электромеханического сглаживания обеспечивает минимальную шероховатость поверхности, что сравнимо с финишными методами обработки. Введение. Электромеханическая обработка (ЭМО) обеспечивается одновременным воздействием двух разнородных по своей природе потоков энергии - теплового, от прохождения тока большой плотности и низкого напряжения, и деформационного, от силового воздействия на поверхностный слой металла обрабатывающего электрод-инструмента. Деформационное воздействие позволяет изменять микро и макрогеометрию поверхностного слоя изделия и обеспечивает упрочнение металла, тепловое воздействие интенсифицирует процессы упрочнения. В зависимости от соотношения указанных потоков энергии процессы электромеханической обработки классифицируют на следующие виды: электромеханическое сглаживание (ЭМС), электромеханическое упрочнение (ЭМУ) и электромеханическую поверхностную закалку (ЭМПЗ) [1, 2]. Целью работы являлось определение шероховатости поверхности после различных методов ЭМО. Материалы и методы исследований. Материалом для исследований являлась сталь 45, как наиболее распространенная в машиностроении. В качестве образцов для исследований изготавливались три образца диаметром 30 мм (см. рисунок), поверхности которых обрабатывались чистовым точением (скорость резания v=60 м/с, подача резца s�� =0,07 мм/об.) проходным резцом (α=8˚; γ=3˚; ε=86˚; φ=90˚; �� r�� =0,5 мм) на токарно-винторезном станке 1К62. Далее поверхности 1…7 образцов подвергались различному дополнительному упрочнению в соответствии с приведенным рисунком. Упрочнение проводилось на том же станке 1К62 с помощью установки УЭМО-2 и применяющейся для 295 ЭМО технологической оснастки. 1 - чистовое точение + ППД; 2 - чистовое точение + ЭМС; 3 - чистовое точение + ЭМУ; 4 - чистовое точение + АЭМC; 5 - чистовое точение + АЭМУ; 6 - чистовое точение + ЭМПЗ; 7 - чистовое точение + ДЭМПЗ; 8 - чистовое точение Рис. – Общий вид образцов для исследований шероховатости поверхности после различных методов обработки Поверхность №1 образцов подвергалась дополнительному выглаживанию твердосплавным роликом (материал Т15К6) диаметром D=60 мм, радиусом скругления r=15 мм с режимами поверхностной пластической деформации (ППД) (частота вращения шпинделя n=315 мин-1, подача инструмента s�� =0,07 мм/об, сила тока I�� =0 �� A�� , давление инструмента P= 200 Н). Поверхность №2 образцов подвергалась электромеханическому сглаживанию (ЭМС) твердосплавным роликом (материал Т15К6) диаметром �� D�� =60 мм, радиусом скругления r=15 мм (частота вращения шпинделя n=200 мин-1, подача инструмента s=0,07 мм/ об, сила тока I=450 A, давление инструмента P= 200 Н). Поверхность №3 образцов подвергалась электромеханическому упрочнению (ЭМУ) твердосплавным роликом (материал Т15К6) диаметром �� D�� =60 мм, радиусом скругления r=15 мм (частота вращения шпинделя n=50 мин-1, подача инструмента s=0,26 мм/ об, сила тока I=800 A, давление инструмента P= 300 Н). Поверхность №4 образцов подвергалась антифрикционному электромеханическому сглаживанию (АЭМС), путем нанесения на поверхность латуни (материал Л53) и электромеханического сглаживания поверхности твердосплавным роликом (материал Т15К6) диаметром D=60 мм, радиусом скругления r=15 мм (частота вращения шпинделя n=200 мин-1, подача инструмента s=0,07 мм/об, сила тока I=450 A, давление инструмента P= 200 Н). Поверхность №5 образцов подвергалась антифрикционному электромеханическому упрочнению (АЭМУ), путем нанесения на поверхность латуни (материал Л53) и электромеханического упрочнения твердосплавным роликом (материал Т15К6) диаметром D=60 мм, радиусом скругления r=15 мм (частота вращения шпинделя n=50 мин-1, подача инструмента s=0,26 мм/об, сила тока I=800 A, давление инструмента P= 300 Н). Поверхность №6 образцов подвергалась электромеханической поверхностной закалке (ЭМПЗ) бронзовым роликом (материал БрОСЦ-3-5-5) диаметром D�� =60 мм, шириной рабочей части b=3,5 мм (частота вращения шпинделя n=12,5 мин-1, подача инстру- 296 мента s=3 мм/об, сила тока I=1200 A, давление инструмента P= 100 Н). Поверхность №7 образцов подвергалась двухинструментальной электромеханической поверхностной закалке (ДЭМПЗ) [3, 4] бронзовыми роликами (материал БрОСЦ-3-5-5) диаметром D=60 мм, шириной рабочей части b=3,5 мм (частота вращения шпинделя n=12,5 мин-1, подача инструмента s=12 мм/об, сила тока I=1200 A, давление инструмента P= 100 Н). Поверхность №8 образцов дополнительному упрочнению не подвергалась. Скорость обработки образцов задавалась вращением шпинделя станка, сила тока контролировалась с помощью измерительного комплекса К-50, давление инструментов на поверхность определялось по сжатию тарированной пружины державки. Шероховатость поверхности определялась в результате трехкратного измерения трех образцов профилометром HOMMEL TESTER T500, ((арт. № 10010384, номер 999500) паспорт поверки прибора от 10.11.2012 г., срок действия 12 месяцев) в условиях ООО ИПК «ХАЛТЕК» г. Ульяновска. Длина измеряемого участка l=4,8 мм. Результаты исследований и их обсуждение. В результате исследований установлено, что чистовое точение резцом (поверхность № 8) обеспечивает шероховатость Ra=3,07…3,18 мкм (см. таблицу). Дополнительное применение упрочняющих технологий во всех случаях снижает шероховатость поверхности. Применение выглаживания без тока (ППД) обеспечивает шероховатость �� Ra�� =0,76…0,85мкм. Наименьшую шероховатость имеют поверхности после электромеханического сглаживания (Ra=0,51…0,53 мкм). Заключение. В результате определения шероховатости установлено, что все поверхности имеют различную шероховатость. Максимальное значение шероховатости наблюдается у образцов №8 - после чистового точения (�� Ra�� =3,10 мкм). Минимальное значение шероховатости у образцов № 2 - после чистового точения и последующего ЭМС (Ra=0,52 мкм). Таблица. Результаты измерения шероховатости поверхности образцов, обработанных по различным технологиям, в соответствии с рисунком Среднее значеНомер ние шероховаповерхности тости Ra первого образца, мкм 1 0,76 2 0,52 3 2,93 4 1,98 5 2,01 6 2,79 7 2,87 8 3,07 Среднее значение шероховатости Ra второго образца, мкм 0,85 0,51 2,95 1,89 2,29 2,61 2,79 3,07 Среднее значение шероховатости Ra�� третьего образца, мкм 0,82 0,53 2,99 1,89 2,22 2,47 2,68 3,18 Среднее значение Ra, мкм 0,81 0,52 2,95 1,92 2,17 2,62 2,78 3,10 Библиографический список: 1. Яковлев С.А., Каняев Н.П. Влияние электрофизических параметров электроме- 297 ханической обработки на ее технологические особенности. // Вестник УГСХА, 2012, № 3, с.130-134. 2 Федоров С.К. Морозов А.В. Электромеханическая поверхностная закалка втулок трака бульдозера �� KOMATSU�� . // Вестник Алтайского государственного аграрного университета, 2013, №3, с. 102…107. 3. Яковлев С.А., Каняев Н.П. Способ электромеханической обработки деталей машин. Патент РФ № 2414514. Опубл. 20.03.2011. Бюл. №8. 4. Яковлев С.А., Каняев Н.П. Двухинструментальная державка для электромеханической обработки деталей. Патент РФ № 97077. Опубл. 27.08.2010. Бюл. №24. RESULTS OF RESEARCH ROUGHNESSES OF THE SURFACE OF SHAFT AFTER VARIOUS METHODS OF ELECTROMECHANICAL PROCESSING Yakovlev S.A., Yakovleva I.G., Lvov S.K. Key words: microgeometry, roughness, surface, electromechanical processing Work is devoted to definition of a roughness of a surface after various methods of electromechanical processing of shaft from steel 45. When carrying out researches by authors it is established that after electromechanical processing the surface roughness decreases. Application of electromechanical smoothing provides the minimum roughness of a surface that is comparable with finishing methods of processing. УДК 636.2.082 ТОВАРНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ШКУР И ХРОМОВЫХ КОЖ ПОЛУЧЕННЫХ ОТ МОЛОДНЯКА РАЗНЫХ ГЕНОТИПОВ Зеленов Г.Н., доктор сельскохозяйственных наук, профессор ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия им. П.А. Столыпина» 432063, г. Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1 (8422) 44-30-62. Ключевые слова: кожевенное сырье, парная шкура, хромовая кожа, относительное удлинение, сопротивление разрыву. Интенсивное выращивание бестужевского и помесного молодняка полученного от скрещивания бестужевских коров с быками производителями ангусской, герефордской и шаролезской пород позволяет в 15-18,5 месячном возрасте получать кожевенное сырье, характеризующееся высокими товарно-технологическими свойствами при производстве товаров народного потребления и технических изделий. 298 Введение. Получение высококачественных тяжелых кож и выращивание животных с большой живой массой и высокой мясной продуктивностью взаимосвязаны между собой. В связи с этим важным резервом увеличения количества и качества шкур крупного рогатого скота является интенсивное выращивание помесного молодняка до высокой живой массы, полученных при промышленном скрещивании [1,3,5]. В России удельный вес шкур массой более 25 кг составляет всего 5-7% в общем объеме заготовок кожевенного сырья, поэтому увеличение численности скота мясных пород имеет важное народно-хозяйственное значение [2,4,6]. Материал и методика исследований Для исследования использовали шкуры, полученные при контрольном убое молодняка и взрослых животных. После убоя производили взвешивание, измерение длины, ширины парной шкуры и толщины в области локтя и на последнем ребре по общепринятой методике ВНИИМС. Шкуры бычков после посола на мясокомбинате были отправлены на Ульяновский кожевенно-обувной комбинат для производства хромовых кож. Изучались шкуры следующих помесей: коровы первого поколения ½Б + ½АА и ½Б + ½Г, первотелки указанных генотипов и трехпородные - ¼Б+¼Г+½Ш и ¼Б+¼АА+½Ш, молодняк в возрасте 18,5-19,5 месяцев от следующих вариантов скрещивания: ½Б + ½Г, ¼Б+¼Г+½Ш и ¼Б+¼АА+½Ш. Результаты исследований и их обсуждение В соответствии с ГОСТ 28425-90 «Сырье кожевенное» шкуры крупного рогатого скота подразделяются по массе или площади на мелкие и крупные. К мелкому кожевенному сырью относят шкуры телят: склизок, опоек и выросток массой до 10 кг. К крупному кожевенному сырью относят: полукожник, массой от 10 до 13 кг, бычок, массой от 13 до 17 кг, яловка легкая – 13 – 17 кг, средняя – 17-25 кг, тяжелая – свыше 25 кг, бычина легкая – 17-25 кг, тяжелая – свыше 25 кг, бугай легкая – 17-25 кг, тяжелая – свыше 25 кг. Средняя живая масса помесных коров составила 560 кг, двухпородных первотелок – 502 кг, трехпородных: ¼Б+¼Г+½Ш -516,9 кг и ¼Б+¼АА+½Ш – 505 кг, двухпородный молодняк в возрасте 18,5 месяцев весил – 517 кг бычки и 436 кг телки, трехпородные соответственно ¼Б+¼Г+½Ш – 510 и 440 кг, и ¼Б+¼АА+½Ш - 545 и 451 кг и бестужевские – 465 и 390 кг. Средняя масса шкур помесных коров от ангусского быка составила 42 кг или 7,5% к предубойной живой массе, от герефордского быка 48 кг (8,6%). От двухпородных первотелок шкуры весили 38,5 кг, трехпородных: ¼Б+¼Г+½Ш – 32 кг, ¼Б+¼АА+½Ш – 30 кг. Полученные нами данные свидетельствуют, что в соответствии с ГОСТ 28425-90, шкуры подопытных животных существенно превосходят минимальные требования стандарта, предъявляемые к крупному кожевенному сырью (табл. 1). Так уже в 15 месяцев превышение требований ГОСТа по массе шкуры,у трехпородных бычков составляло 6 кг (12,4%), двухпородных 14 кг (15,8%), в 18,5-месячном возрасте у бычков бестужевской породы - 10 кг (14,0%), 1/2Б+1/2Г – 22 кг (18,8%), ¼Б+¼Г+½Ш – 13 кг (15,4%) и ¼Б+¼АА+½Ш – 14 кг (15,7%). От бестужевских бычков получены самые легкие шкуры - 35,3 кг. 299 Таблица 1. Показатели качества шкур бычков Показатели Б+Б Генотип бычков ½Б + ½Г ¼Б+¼Г+½Ш Предубойная живая масса в 15 месяцев, кг 360,0 ± 7,3 370,0 ± 8,1 390,0 ± 15,1* Масса шкуры, кг 25,5 ± 0,5 39,5 ± 0,6* 31,0 ± 0,4 Выход шкуры, % 7,0 10,6 8,0 Площадь шкуры, дм² 310,6 ± 2,2 360,0 ± 2,6 372,7 ± 2,1 Толщина, мм на локте 2,3 ± 0,11 3,5 ± 0,13 2,6 ± 0,14 на последнем ребре 4,3 ± 0,15 5,7 ± 0,14 3,9 ± 0,11 Предубойная живая масса в 18,5 мес., кг 423,0 ± 20,0 460,0 ± 13,7 448,8 ± 19,6 Масса шкуры, кг 35,3 ± 1,3 47,1 ± 1,5* 38,5 ± 0,9 Выход шкуры, % 8,3 10,2 8,6 Площадь шкуры, дм² 382,7 ± 2.3 397,0 ± 2,4 404,2 ± 2,3 Толщина, мм на локте 3,0 ± 0,21 4,0 ± 0,32 2,8 ± 0,22 на последнем ребре 4,9 ± 0,32 7,9 ± 0,41 4,2 ± 0,28 ¼Б+¼АА+½Ш 484,0 ± 6,0* 39,4 ± 0,5 8,1 422,3 ± 2,2* 3,7 ± 0,41 5,6 ± 0,45 По площади шкуры, трехпородные животные превосходили двухпородных и бестужевских, однако шкуры двухпородного молодняка имели преимущество в массе и толщине в стандартных точках. Как свидетельствуют данные массы, площади и толщины шкур, а также результаты визуальной оценки, трехпородные помеси дают отличные шкуры. Что касается различий в группах телок, то во всех случаях оценки шкур, лучшими показателями характеризовались трехпородные телки (табл. 2). Таблица 2. Показатели качества шкур телок Показатели Б+Б Предубойная живая масса в 15,5 месяцев, кг 310,0 ± 7,3 Масса шкуры, кг 22,5 ± 0,4 Выход шкуры, % 7,3 Площадь шкуры, дм² 306,4 ± 2,8 Толщина, мм на локте 1,7 ± 0,09 на последнем ребре 4,0 ± 0,12 Предубойная живая масса в 19,5 мес., кг 342,0 ± 9,3 Масса шкуры, кг 25,0 ± 1,8 Выход шкуры, % 7,3 Площадь шкуры, дм² 354,9 ± 2.6 Толщина, мм на локте 2,6 ± 0,31 на последнем ребре 4,3 ± 0,41 300 Генотип телок ½Б + ½Г ¼Б+¼Г+½Ш ¼Б+¼АА+½Ш - 345,0 ± 9,6* 25,8 ± 0,6 7,5 321,1 ± 2,6 315,0 ± 8,1 24,6 ± 0,3 7,8 349,2 ± 2,5 1,6 ± 0,13 4,9 ± 0,14 1,8 ± 0,10 4,5 ± 0,12 367,0 ± 21,8 32,5 ± 1,5 8,8 347,1 ± 2,7 403,0 ± 14,8* 31,5 ± 1,8 7,8 378,3 ± 2,4 400,0 ± 12,3* 29,8 ± 1,7 7,5 376,2 ± 2,6 3,3 ± 0,29 5,9 ± 0,43 3,0 ± 0,28 5,1 ± 0,56 2,4 ± 0,33 4,6 ± 0,61 - Установлены и межпородные различия по товарно-технологическим свойствам шкуры. При этом как по массе, так и площади помеси, особенно двухпородные значительно превосходили бестужевских сверстников. Достаточно отметить, что превосходство двухпородных бычков по массе парной шкуры в 18,5 месяцев составляло 11,8 кг (33,4%), трехпородных – на 3,2 кг (9,0%). В группах телок установлена аналогичная закономерность в преимуществе помесного молодняка. Для оценки товарно-технологических качеств хромовых кож шкуры бычков были переработаны на Ульяновском кожевенно-обувном предприятии. Результаты физико-механических испытаний кож позволили установить различия в их качестве (табл. 3). При определении качества готовых хромовых кож, большое значение предается физико-механической оценке. Относительное удлинение хромовых кож, выработанных из шкур трехпородных бычков составило 21,5%, двухпородных – 24,2 и бестужевских – 28%. Прочность хромовых кож к разрыву наибольшая у трехпородных помесей 3,5 кг/мм², бестужевских – 2,7 и наименьшая у двухпородных – 2,3 кг/мм². Это говорит о том, что фабрикат от помесных, особенно трехпородных бычков, по многим показателям лучше, чем от чистопородных бестужевских сверстников. Таблица 3. Физико-механические свойства кож Показатель Площадь готовых кож, дм² Средняя толщина кож в стандартных точках, мм Относительное удлинение, 1 кг/мм², % Сопротивление разрыву, кг/мм² Сопротивление разрыву лицевого слоя, кг/мм² Порода, породность Бестужевская 404,0 ½ Б+ ½ Г 411,0 ¼ Б+ ¼ Г+ ½ Ш 406,0 1,4 1,4 1,5 28,0 2,7 24,2 2,3 21,5 3,5 2,4 2,3 3,5 Основной показатель прочности шкуры – ее плотность, которая зависит от структуры дермы. Кожи от трехпородных и бестужевских бычков достаточно плотные и эластичные. Сопротивление разрыву у них больше, чем у двухпородных на 1,2 кг/мм² (52%). Поэтому их лучше использовать на верх хромовой обуви. Кожи от двухпородных бычков менее плотные, их следует перерабатывать на подошвенные кожи. Сортировка кож, проведенная с участием специалистов комбината, показала, что кожи помесей были мягче и эластичнее на ощупь, с выровненной толщиной по всей площади чепрака. Наиболее выровненные кожи получены от трехпородных бычков, все кожи равномерно окрашены, с неломким и нелипким покрытием по всей площади. Заключение. Следовательно, интенсивное выращивание бестужевского и помесного молодняка позволяет уже в 15-18,5 месячном возрасте получать высококачественное кожевенное сырье, обладающее товарно-технологическими свойствами, позволяющими использовать его для производства товаров народного потребления и технических изделий высокого качества. 301 Библиографический список 1. Калинин Г.Ю. Эффективность выращивания и откорма бычков разных генотипов / Г.Ю Калинин, М.М Долгачев. // Зоотехния. – 2001. - № 1. – С. 32 2. Каюмов Ф.Г. Сравнительная характеристика гистоструктуры кожи бычков разных генотипов / Ф.Г. Каюмов, М.П. Дубовскова, Т.М. Сидихов, Л.А. Маевская // Молочное и мясное скотоводство. – 2010. - № 1. – С. 23-25. 3. Косилов В.И. Продуктивные качества молодняка бестужевской породы и ее помесей с симменталами: Монография. / В.И. Косилов, С.А. Жуков, Р.С. Юсупов. – Оренбург: ОГАУ, 2004. – 232 с. 4. Стенькин Н.И. Бестужевский скот и генетические факторы воздействия на его мясную продуктивность: Монография / Н.И. Стенькин. – Ульяновск: УГСХА, 2008. – 170 с. 5. Черекаев А.В. Мясное скотоводство. / А.В. Черекаев, А.Г. Зелепухин, В.И. Левахин. – Оренбург, ОГУ, 2000. – 350 с. 6. Юдин М.Ф. Характеристика мясной продуктивности молодняка бычков разных генотипов / М.Ф. Юдин, Р.Р. Фаткуллин, С.М. Пилипенко // Аграрный вестник Урала. – 2005. - № 4. – С. 44-47. COMMERCIAL-TECHNOLOGICAL CHARACTERISTICS OF HIDES AND CHROMIUM CALFSKIN HAVE DIFFERENT GENOTYPES. Zelenov G.N. Key words: hide, raw hide, chromium hide, relative strength, resistance to tear Abstract: Intensive breeding of Bestushev and crossbred young have been produced from crossing of Bestushev cows with Anguss, Hereford, Charolais stears allows to get within 15-18.5 month age hide that is characterized by high commercial-technological abilities for manufacture of public goods and technical items. 302 Содержание: АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ, МИКРОБИОЛОГИИ, БИОЛОГИИ, ЭКОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Артамонов А.М., Викторов Д.А., Васильев Д.А. СПЕКТР ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ И СПЕЦИФИЧНОСТЬ БАКТЕРИОФАГОВ PSEUDOMONAS FLUORESCENS Баймишев М.Х. ФУНКЦИЯ РАЗМНОЖЕНИЯ ТЕЛОК ЧЕРНО-ПЕСТРОЙ ПОРОДЫ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ПЕРИОДОВ ИХ МАТЕРЕЙ Барт Н.Г., Золотухин С.Н., Васильев Д.А. СПЕКТР ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ БАКТЕРИОФАГОВ PROVIDENCIA Васильева Ю.Б., Васильев Д.А., Семанина Е.Н., Семанин Е.Г. БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПОДХОД В РАЗАРБОТКЕ МЕТОДА ИДЕНТИФИКАЦИИ BORDETELLA BRONCHISEPTICA Васильев Д.А., Васильева Ю.Б., Семанина Е.Н., Семанин Е.Г. ИНДИКАЦИЯ BORDETELLA BRONCHISEPTICA ИЗ ОБЪЕКТОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ И КЛИНИЧЕСКИХ ОБРАЗЦОВ Вишневская Т.Я., Абрамова Л.Л. ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ КАРТИНА СЕЛЕЗЕНКИ КРОЛИКОВ ПРИ СТРЕССЕ Воякин С.Н.,Вишневский А.Н. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ВЫСОКОБЕЛКОВОГО ГРАНУЛЯТА Горшков И.Г., Куклина Н.Г., Викторов Д.А., Васильев Д.А. ВЫДЕЛЕНИЕ БАКТЕРИЙ ВИДА AEROMONAS SOBRIA Гринева Т.А., Викторов Д.А., Васильев Д.А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ PSEUDOMONAS�� CHLO� RORAPHIS Дежаткина С.В., Силова Н.В., Ахметова В.В. ПРИМЕНЕНИЕ СОЕВОЙ ОКАРЫ В ПИТАНИИ КУР Дежаткина С.В., Мухитов А.З. ВЛИЯНИЕ ДОБАВОК СОЕВОЙ ОКАРЫ И ЦЕОЛИТОВ НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ В ПЕЧЕНИ ПОРОСЯТ Джубанышева Г.Х., Днекешев А.К. АНАТОМО-ПРОЕКЦИОННОЕ ОБОСНОВАНИЕ БЛОКАД ОСНОВНЫХ НЕРВОВ В ОБЛАСТИ ПЛЮСНЫ У ВЕРБЛЮДА ПОРОДЫ КАЗАХСКИЙ БАКТРИАН Енгашева Е.С., Новиков Д. Д., Тухфатова Р. Ф., Кузнецов Ю. Е. ИЗУЧЕНИЕ МЕСТНО-РАЗДРАЖАЮЩИХ И АЛЛЕРГЕННЫХ СВОЙСТВ ПРЕПАРАТА ЭМИДОНОЛ 10% 3 7 12 16 18 22 25 28 31 34 38 41 46 303 Енгашева Е.С., Напалкова В.В., Кузнецов Ю. Е., Тухфатова Р. Ф. КУМУЛЯТИВНЫЕ СВОЙСТВА ПРЕПАРАТА ЭМИДОНОЛ 10% Енгашева Е.С., Тухфатова Р. Ф., Бирюкова Н.П. МУТАГЕННОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭМИДОНОЛА 10% Енгашева Е.С., Новиков Д.Д., Тухфатова Р.Ф. ОСТРАЯ И СУБХРОНИЧЕСКАЯ ТОКСИЧНОСТЬ ПРЕПАРАТА ЭМИДОНОЛ 10% Енгашева Е.С., Новиков Д. Д., Морозова А.В., Кузнецов Ю. Е. ЭМБРИОТОКСИЧЕСКОЕ И ТЕРАТОГЕННОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭМИДОНОЛА 10% РАСТВОРА Романова Е.М., Игнаткин Д.С., Индирякова Т.А., Видеркер М.А. ИНВАЗИРОВАННОСТЬ МОЛЛЮСКОВ РОДА LYMNAEA ЛИЧИНКАМИ ТРЕМАТОД НА ТЕРРИТОРИИ УЛЬЯНОВСКОЙ ОБЛАСТИ Исмагилова Э.Р., Хисамов И.Ж. ВЛИЯНИЕ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ НА МИЕЛОПЕРОКСИДАЗНУЮ АКТИВНОСТЬ ОВЕЦ РОМАНОВСКОЙ ПОРОДЫ Карамышева Н. Н., Васильев Д. А., Викторов Д.А., Золотухин С. Н. ВЛИЯНИЕ ЛЕЧЕБНО - ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ НА ОСНОВЕ ДИАТОМИТА С БАКТЕРИОФАГАМИ НА КУР НЕСУШЕК ПОРОДЫ ЛОМО – БРАУН Кузнецов К.К., Любин Н.А., Мухитов А.З. ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СВИНЕЙ ПРИ ВВЕДЕНИИ В ИХ РАЦИОН СОЕВОЙ ОКАРЫ И ЦЕОЛИТОВ Кузнецов К. К., Любин Н.А., Дежаткина С.В. МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ СВИНОМАТОК ПРИ ДОБАВЛЕНИИ В ИХ РАЦИОН СОЕВОЙ ОКАРЫ И ЦЕОЛИТОВ Куклина Н.Г., Горшков И.Г., Викторов Д.А., Васильев Д.А. ИЗУЧЕНИЕ�� КУЛЬТУРАЛЬНЫХ�� СВОЙСТВ�� БАКТЕРИИ�� ВИДА�� AEROMONAS�� SAL�� MONICIDA Ларионова И.С., Байматов В.Н., Хромова Е.В. ИНФОРМАЦИЯ В БИОЛОГИИ Логинова Е.Г., Викторов Д.А., Васильев Д. А. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ БАКТЕРИИ YERSINIA RUCKERI – ВОЗБУДИТЕЛЯ БОЛЕЗНИ КРАСНОГО РТА ФОРЕЛИ (ERM) Любин Н.А., Стеценко И.И., ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В РАЦИОНАХ СВИНЕЙ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМ ВИТАМИНА А И БЕТА-КАРОТИНА ДЛЯ СТИМУЛИРОВАНИЯ ПРОДУКТИВНЫХ КАЧЕСТВ СВИНОМАТОК И РОСТА ПОРОСЯТ Любина Е.Н. РОЛЬ ВИТАМИНА А И БЕТА-КАРОТИНА В РЕГУЛЯЦИИ БИОМЕХАНИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК КОСТЕЙ СКЕЛЕТА ПОРОСЯТ 304 51 55 57 62 64 69 71 74 77 81 83 89 92 96 Ляшенко Е.А., Золотухин С.Н., Васильев Д.А. ОБНАРУЖЕНИЕ БАКТЕРИЙ РОДА KLEBSIELLA C ПОМОЩЬЮ РЕАКЦИИ НАРАСТАНИЯ ТИТРА ФАГА В ПИЩЕВОМ СЫРЬЕ И ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ Ляшенко П.М., Ермолаев В.А. ВЛИЯНИЕ ГИДРОФИЛЬНЫХ МАЗЕЙ НА ГЕМОСТАЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПЛАЗМЫ КРОВИ У ТЕЛЯТ С ГНОЙНЫМИ РАНАМИ Пристяжнюк О.Н., Баймишев Х.Б. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АДАПТОГЕНА «УТЕРОМАСТИН» ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПОСЛЕРОДОВЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ У КОРОВ Васильев Д.А., Мерчина С.В., Калабеков И.М., Кавеева А.Р. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ОСЕТРОВЫХ РЫБ НА НАЛИЧИЕ ГЕРПЕСВИРУСА И ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА ПОЛУЧЕННОГО ПИЩЕВОГО СЫРЬЯ Романов А.В. ПРОВЕДЕНИЕ ОПЕРАТИВНОГО ДОСТУПА К КРУГЛОЙ СВЯЗКЕ ПЕЧЕНИ У КОШЕК МЕТОДОМ ЛАПАРОТОМИИ Романов А.В. ОПОГРАФИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ВНУТРИБРЮШИННОГО ХОДА ПУПОЧНОЙ ВЕНЫ У ЩЕНКОВ И КОТЯТ Романов А.В. МЕТОДИКА ВВЕДЕНИЯ КОНТРАСТНЫХ ВЕЩЕСТВ В ОБЛАСТЬ КРУГЛОЙ СВЯЗКИ ПЕЧЕНИ У КОШЕК ПРИ ГЕПАТОЗАХ Романов А.В. МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТРОЕНИЯ ПУПОЧНОГО КАНАТИКА У НОВОРОЖДЕННЫХ ЩЕНКОВ И КОТЯТ Романова Е.М. , Мухитова М.Э., Игнаткин Д.С. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА РЕПРОДУКТИВНЫХ ХАРАКТЕРИСТИК КОМПОСТНОГО ЧЕРВЯ EISENIA FETIDA (SAVINGY, 1926) ЛОКАЛЬНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ УЛЬЯНОВСКОЙ ОБЛАСТИ Сапожников А.В., Ермолаев В.А., Марьин Е.М., Ляшенко П.М. ЗАЖИВЛЕНИЕ ИНФИЦИРОВАННЫХ КОЖНО-МЫШЕЧНЫХ РАН У СОБАК ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕ СВЕТОДИОДНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ КРАСНОГО ДИАПАЗОНА Седова Е.А., Н.А. Любин, С.В. Дежаткина АКТИВНОСТЬ ЭНЗИМОВ КРОВИ СВИНОМАТОК ПРИ ДОБАВЛЕНИИ В ИХ РАЦИОН БЕЛКОВЫХ ДОБАВОК Симанова Н.Г., Хохлова С.Н., Перфильева Н.П., Фасахутдинова А.Н., Степочкин А.А., Писалева С.Г. ЗАКОНОМЕРНОСТИ ПОСТНАТАЛЬНОГО МОРФОГЕНЕЗА НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ Усова Е. А., Степочкин А. А., Тельцов Л. П. МОРФОЛОГИЯ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ СТЕНКИ ТОНКОЙ КИШКИ У ТЕЛЯТ КРАСНО-ПЕСТРОЙ ПОРОДЫ НОВОРОЖДЕННОГО ЭТАПА РАЗВИТИЯ 101 104 107 112 116 121 124 129 133 137 142 146 155 305 Терехина Е.А., Горбачев В.Н., Климентова Е.Г. ВЛИЯНИЕ ЗАГРЯЗНЕНИЯ ПОЧВ ТЯЖЕЛЫМИ МЕТАЛЛАМИ (КАДМИЕМ, НИКЕЛЕМ) НА ЗДОРОВЬЕ НАСЕЛЕНИЯ УЛЬЯНОВСКОЙ ОБЛАСТИ Токтамысова С.К., Днекешев А.К. ТОПОГРАФО-АНАТОМИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРОЕКЦИИ АРТЕРИЕЙ В ОБЛАСТИ ПЯСТИ И ПАЛЬЦЕВ У ВЕРБЛЮДА-БАКТРИАНА Феоктистова Н.А., Макеев В.А., Васильев Д.А., Алешкин А.В. ОСНОВНЫЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ФАГОВ БАКТЕРИЙ BACILLUS�� MYCOIDES Калдыркаев А.И., Феоктистова Н.А., Васильев Д.А., Алешкин А.В., Мерчина С.В. РАЗРАБОТКА СИСТЕМЫ ФАГОВАРОВ BACILLUS CEREUS Феоктистова Н.А., Юдина М.А., Васильев Д.А., Золотухин С.Н. ПАРАМЕТРЫ ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ НАРАСТАНИЯ ТИТРА ФАГА ДЛЯ ИНДИКАЦИИ БАКТЕРИЙ РОДА PROTEUS В ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ Юдина М.А., Феоктистова Н.А., Васильев Д.А. МОНИТОРИНГ ПШЕНИЧНОЙ МУКИ НА НАЛИЧИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ КАРТОФЕЛЬНОЙ БОЛЕЗНИ ХЛЕБА Хлебус Н. К., Петровский С. В., Зданович Т. А. БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В КРОВИ СВИНОМАТОК ПРИ ПАТОЛОГИЯХ ПЕЧЕНИ Хлынов Д.Н., Богданов И.И., Богданова М.А., Фомин А.Н. ПОДБОР МЕТОДА ЛИОФИЛЬНОЙ СУШКИ БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ БЕРЕМЕННОСТИ И БЕСПЛОДИЯ ДОМАШНЕГО СКОТА Мастиленко А.В., Черных А.А., Молофеева Н.И., Васильев Д.А. ИЗУЧЕНИЕ КУЛЬТУРАЛЬНЫХ СВОЙСТВ БАКТЕРИЙ ERWINIA HERBICOLA Шестаков А.Г., Молофеева Н.И., Пульчеровская Л.П., Золотухин С.Н., Васильев Д.А., Семанина Е.Н., Семанин Е.Г. СООТНОШЕНИЕ БАКТЕРИОФАГОВ В БИОПРЕПАРАТЕ ПОЛИФАГА Шишков Н.К., Казимир А.Н., Казимир А.Н., Мухитов А.З. ТРАВМАТИЧЕСКИЙ РЕТИКУЛИТ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Шленкина Т. М. ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ КОСТНОЙ ТКАНИ МОЛОДНЯКА СВИНЕЙ ПРИ ВВЕДЕНИИ В РАЦИОН МИНЕРАЛЬНЫХ ДОБАВОК Якоб В.К., Ермолаев В.А. БОЛЕЗНИ КОПЫТЕЦ У КОРОВ В РАЗЛИЧНЫХ СТРАНАХ МИРА 162 165 172 178 185 190 197 200 203 205 210 215 220 ИНЖЕНЕРНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ АПК Аксёнова Н.Н. УСТРОЙСВО ДЛЯ ПЕПЕРАБОТКИ ПТИЧЬЕГО ПОМЁТА Барышов А.О. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОГРУЗЧИКА МИНЕРАЛЬНЫХ УДОБРЕНИЙ 306 227 230 Васильев С.М., Павеленко Е.В. АВТОМАТИЗАЦИЯ ПОДБОРА ДОЖДЕВАЛЬНЫХ МАШИН Гаранин Г.В. СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕХАНИЗИРОВАННЫХ ПРОЦЕССОВ В ПОЛЕВОДСТВЕ Голубев В.А. ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ РАБОТЫ ДИЗЕЛЯ НА РАСТИТЕЛЬНОМИНЕРАЛЬНОМ ТОПЛИВЕ Зайцев В.П. РАБОЧИЙ ОРГАН КУЛЬТИВАТОРА ДЛЯ МЕЖДУРЯДНОЙ ОБРАБОТКИ ПРОПАШНЫХ КУЛЬТУР Курдюмов В.И., Зыкин Е.С., Бирюков И.В. ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПЛОТНОСТИ ПОЧВЫ ПОСЛЕ ПРОХОДА КОМБИНИРОВАННОГО СОШНИКА Киреева Н.С., Степанидина О.Н. АЛЬТЕРНАТИВНОЕ ТОПЛИВО НА ОСНОВЕ РАПСОВОГО МАСЛА Курдюмов В.И., Курушин В.В. ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЗЕРНОВОЙ СЕЯЛКИ Лазуткина С.А. ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ ПРОВЕРКА УСТАНОВКИ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СЛИВОЧНОГО МАСЛА Морозов А.В., Фрилинг В.А. ПОВЫШЕНИЕ ФИЗИКОМЕХАНИЧЕСКИХ СВОЙСТВ РАБОЧЕЙ ПОВЕРХНОСТИ ВТУЛКИ ГОРИЗОНТАЛЬНОГО ШАРНИРА ТРАКТОРА К-701 ЭЛЕКТРОМЕХАНИЧЕСКОЙ ЗАКАЛКОЙ Морозов А.В. АНАЛИЗ УСЛОВИЙ ЭКСПЛУАТАЦИИ И ПРИЧИН ИЗНОСА ШАРНИРА РАМЫ ТРАКТОРА К-701 И ЕГО МОДИФИКАЦИЙ Курдюмов В.И., Павлушин А.А., Карпенко Г.В., Сутягин С.А., Журавлев А.В. ОСОБЕННОСТИ ОХЛАЖДЕНИЯ ЗЕРНА В ЗЕРНОСУШИЛКАХ КОНТАКТНОГО ТИПА Курдюмов В.И., Павлушин А.А., Сутягин С.А., Нестерова Д.В. К ВОПРОСУ О ПОВЫШЕНИИ ЭФФЕКТИВНОСТИ СУШКИ ЗЕРНА Шленкин К.В., Павлушин А.А. ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМЫ ТЕХНИЧЕСКОГО ОБСЛУЖИВАНИЯ И РЕМОНТА ЗЕРНОУБОРОЧНЫХ КОМБАЙНОВ В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ Степанидина О.Н., Киреева Н.С. ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ШУМ, ЕГО ВЛИЯНИЕ НА ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА И МЕТОДЫ БОРЬБЫ С НИМ Сидоров Е.А., Сидорова Л.И. ДВУХТОПЛИВНАЯ СИСТЕМА ПИТАНИЯ ДИЗЕЛЯ С АВТОМАТИЧЕСКИМ РЕГУЛИРОВАНИЕМ СОСТАВА СМЕСЕВОГО ТОПЛИВА 233 239 243 247 252 257 259 262 265 269 272 276 278 282 285 307 Хабиева Л.Л., Варнаков В.В. РОЛЬ ВХОДНОГО КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ЗАПАСНЫХ ЧАСТЕЙ НА ПРЕДПРИЯТИЯХ АГРОПРОМЫШЛЕННОГО КОМПЛЕКСА Холманов В.М., Селезнев М.В. КОМПЛЕКТ ПРИБОРОВ ДЛЯ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ СМАЗОЧНЫХ МАСЕЛ Яковлев С.А., Яковлева И.Г., Львов С.К. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ШЕРОХОВАТОСТИ ПОВЕРХНОСТИ ВАЛОВ ПОСЛЕ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВ ЭЛЕКТРОМЕХАНИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКИ Зеленов Г.Н. ТОВАРНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ШКУР И ХРОМОВЫХ КОЖ ПОЛУЧЕННЫХ ОТ МОЛОДНЯКА РАЗНЫХ ГЕНОТИПОВ 308 288 291 295 298 МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ДЕПАРТАМЕНТ НАУЧНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ ПОЛИТИКИ И ОБРАЗОВАНИЯ УЛЬЯНОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМ. П.А.СТОЛЫПИНА Материалы V Международной научно-практической конференции АГРАРНАЯ НАУКА И ОБРАЗОВАНИЕ НА СОВРЕМЕННОМ ЭТАПЕ РАЗВИТИЯ: ОПЫТ, ПРОБЛЕМЫ И ПУТИ ИХ РЕШЕНИЯ Том II Подписано в печать 28.05.2013 Формат 60х84 1/16 Усл.п.л. 19,3 Заказ Тираж 110 экз. 432017, г.Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1 309

Том II АГРАРНАЯ НАУКА И ОБРАЗОВАНИЕ НА

Похожие документы

Разделы

Поддержка

Том II АГРАРНАЯ НАУКА И ОБРАЗОВАНИЕ НА

Похожие документы

Добавить этот документ в коллекции

Добавить этот документ в сохраненные

Предложите, как улучшить StudyLib