26 удк 577.152.34 стабильность протеолитического фермента
реклама
УДК 577.152.34 СТАБИЛЬНОСТЬ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОГО ФЕРМЕНТА БАКТЕРИИ, ВЫДЕЛЕННОЙ ИЗ АКВАТОРИИ ОСТРОВА ЗМЕИНЫЙ Нидялкова Н. А.1, Димова М. И.2 1 Институт микробиологии и вирусологии им. Д. К. Заболотного НАН Украины, 2 Одесский Национальный Университет им. И. И. Мечникова Протеолитические ферменты (КФ 3.4, протеазы) – класс гидролитических ферментов, которые необратимо отщепляют аминокислотные остатки от белков и пептидов с участием молекулы воды. Поскольку ферменты с протеолитическим действием необходимы для жизнедеятельности как макро-, так и микроорганизмов, то не вызывает удивления их широкое распространение. Протеолитические ферменты из различных источников используют в практике весьма широко. Их применяют в пищевой, легкой, медицинской промышленности, общественном питании и сельском хозяйстве. Так, протеолитические ферменты со специфичностью к коллагену могут быть использованы для улучшения качества мяса, поскольку они катализирует частичный гидролиз белков, в том числе и коллагенов, делая мясо более нежным. С момента открытия протеолитичеких ферментов (середина ХIX ст.) источниками их выделения служили растения и животные, но на сегодня наиболее перспективными продуцентами являются микроорганизмы благодаря высокой скорости размножения, возможности контроля биосинтеза ферментов, а также получения рекомбинантных штаммов (Kumar A., 2010; Hassanein W. A., 2011). В результате проведенного скрининга среди 25 штаммов микроорганизмов, выделенных из акватории острова Змеиный, отобрано один, который проявлял высокую протеолитическую (казеинолитическую) активность (0,53 ед/мл). Культивирование штамма проводили в 750 мл колбах Эрленмейера, содержащих 200 мл оптимизированной питательной среды для накопления протеолитических ферментов следующего состава (г/л): KH2PO4 – 1,6; MgSO4∙7H2O – 0,75; ZnSO4∙7H2O – 0,25; (NH4)2SO4 – 0,5; мальтоза – 1,0; желатин – 10,0; дрожжевой автолизат – 0, 15; рН – 6,5-6,7, при температуре 42 °С в условиях качалки при 220 об./мин. в течение 18 часов. Важной характеристикой любых ферментных препаратов является их оптимальные условия действия, которые, в первую очередь, определяются зависимостью активности и стабильности ферментов от рН и температуры. Ранее было показано, что рН и термооптимум действия исследуемого комплексного ферментного препарата находится при 8,0–9,0 и 60 °C, соответственно. Учитывая перспективность практического использования протеолитических 26 ферментов с такими свойствами в пищевой промышленности, общественном питании и сельском хозяйстве, целью данной работы было изучение рН- и термостабильности протеолитического фермента бактерии, выделенной из акватории острова Змеиный. Изучение влияния рН и температуры реакционной смеси на стабильность протеазы проводили в интервале температур от 4 оС до 60 оС и рН от 6,0 до 9,0. Было показано, что при инкубировании фермента при 37 °C в течении 2 часов при рН 6,0 и 7,0 сохраняется 84 и 92 % протеолитической активности соответственно. Инкубирование фермента при таких же условиях в течении 2 часов при рН 8,0 и 9,0 приводило к снижению активности на 15 % от исходной активности. При инкубировании исследуемого фермента при температуре 25 и 40 °C протеолитическая активность сохранялась в течении 2 часов, а при 60 °C активность его снижалась на 70 %. Полученные данные относительно высокой стабильности исследуемого фермента гидролизовать казеин при температуре 25 и 40 °C, а также в слабокислых и щелочных условиях рН является перспективным для дальнейшего использования фермента в пищевой промышленности и сельском хозяйстве для получения высокоусвояемых кормов (для скота и птицы), что особенно важно при кормлении молодняка. Научный руководитель: к. б. н., доцент Гудзенко Т. В. УДК 632.9:633.11 ЗНАЧЕННЯ АГРОТЕХНІЧНИХ ЗАХОДІВ В РЕГУЛЮВАННІ ФІТОПАТОГЕННОЇ МІКОФЛОРИ ГРУНТУ ПІД ПОСІВАМИ ПШЕНИЦІ ОЗИМОЇ Пармінська Л. М. Національний науковий центр «Інститут землеробства НААН» Всебічно обґрунтований цілеспрямований добір і поєднання агротехнічних заходів є основою сучасних систем інтегрованого захисту від комплексу шкідливих об’єктів. На сучасному етапі розвитку рослинництва сівозміни залишаються головним фактором в обмеженні шкодочинності шкідливих організмів. Вони відіграють вирішальну роль в мікробіологічній активності ґрунту та розвитку антагоністичних патогенам форм мікроорганізмів. Сучасні 27
