Выявление БЛРС и МБЛ у грамотрицательных бактерий

Выявление БЛРС и МБЛ у
грамотрицательных бактерий
таблетками Neo-Sensitabs
С.Х.Шамаева
ГБУ РС(Я) «Республиканская больница №2-Центр
экстренной медицинской помощи», г.Якутск
Материалы и методы
Отделение
гнойной
хирургии,
реанимации и интенсивной терапии,
ожоговое, неотложной терапии (НТ) и
колопроктологическое (2012 г.)
E. сoli n=19
Kl. рneumoniae n=26
Материалы и методы
P.aeruginosa n=14
Отделение экстренной хирургии и
гнойной
хирургии,
отделение
интенсивной
терапии,
ожоговое
отделение, за период 2010-2011 гг.
МУК 4.2. 1890 – 04 Методические указания по
определению чувствительности
микроорганизмов к антибактериальным препаратам
E. coli ATCC 25922 – отрицательный контроль БЛРС (–)
Kl.рneumonia 700603 – положительный контроль БЛРС (+)
P. aeruginosa ATCC 27853
Первичный фенотипический скрининг продукции БЛРС метод «двойных дисков»
Продукции МБЛ методом «двойных дисков с ЭДТА»
«Национальная программа мониторинга распространения
штаммов грамотрицательных микроорганизмов,
продуцирующих металло-ß-лактамазы в России (МЕТАЛЛ)»
P.aeruginosa n=14
IMI↔ЭДТА МEM↔ЭДТА CAZ↔ЭДТА MβL
синергизм
синергизм
синергизм фенотип
Да
Да
Да
Положит.
blaVIM ген
(ПЦР в
реальном
времени)
blaIMP ген
(ПЦР в
реальном
времени)
Обнаружен
Не обнаружен
Пиперациллину, пиперациллину-тазобактаму, цефтазидиму,
цефепиму, цефоперазон-сульбактаму, азтреонаму, имипенему,
меропенемеу, дорипенему, гентамицину, нетилмицину,
амикацину, ципрофлоксацину, левофлоксацину, фосфомицину.
Rosco Diagnostica: выявление БЛРС
Постановка теста
Mueller-Hinton agar (MHA)
Inoculum:0.5 McFarland standard
Incubation: 37 C
18 - 24 ч.
Таблетки Neo-Sensitabs:
цефотаксим 30 мкг
цефотаксим 30 мкг + клавулановая кислота 10 мкг,
амоксициллин 20 мкг + клавулановая кислота 10 мкг.
Rosco Diagnostica: выявление БЛРС
CAZ
FEP
20
FEP
CTAX
AZT
CAZ
15
20
20
15
15
AMC
TIC+CL
CAZ+CL
FEP+CL
CAZ+CL
FEP+CL
CTAX+CL
Выявление БЛРСEnterobacteriaceae
Выявление БЛРСНГОБ
Выявление БЛРС
Метод «двойных дисков»
С помощью таблеток
Neo-Sensitabs
Rosco Diagnostica: Комбинированный тест
(КРС+МВL)
Таблетки:
Меропенем (MRP 10)
Меропенем+дипиколиновая кислота (MRP+DP)
Меропенем+клоксациллин (MRP+CX)
Меропенем+бороновая кислота (MRP+BO)
Интерпретация результатов:
МБЛ – синергизм с дипиколиновой кислотой (увеличение зоны
>5 мм)
AmpC – синергизм с клоксациллином и бороновой кислотой
КРС – синергизм с бороновой кислотой
P.aeruginosa МБЛ+
Зоны задержки роста Meropenem+DPA больше на ≥ 5 мм диаметра зоны
задержки роста Meroрenem
Выводы
1. Устойчивость к цефалоспоринам расширенного спектра протестированных
штаммов E.coli и Kl.pneumoniae была обусловлена продукцией БЛРС, что
подтверждено фенотипическими методами «двойных дисков» и
с
помощью таблеток Neo-Sensitabs.
2. У всех штаммов P.aeruginosa методами «двойных дисков с ЭДТА» и с
помощью таблеток Neo-Sensitabs выявлена продукция МБЛ. Таким
образом, метод выявления БЛРС и МБЛ с помощью таблеток Neo-Sensitabs
показал абсолютную сопоставимость результатов с методом «двойных
дисков».
3. Следует однако отметить следующие ограничения проведенного нами
исследования:
• в исследование были включены только штаммы 2 видов энтеробактерий,
которые обычно не продуцируют AmpC цефалоспориназы.
• все протестированные штаммы P.aeruginosa были клонально родственны и
продуцировали один тип МБЛ – VIM-2.
4. Выбор подтверждающих тестов определяется возможностями лаборатории,
а также целями и задачами эпидемиологического исследования
резистентности в каждом конкретном случае.