ОСОБЕННОСТИ ВЫБОРА ТЕМПЕРАТУРЫ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ

134
ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2008. Ò. 49. ¹ 2
ÓÄÊ 577.15:577.151.03:577.152.311:544.773.32
ÎÑÎÁÅÍÍÎÑÒÈ ÂÛÁÎÐÀ ÒÅÌÏÅÐÀÒÓÐÛ ÄËß ÏÐÎÂÅÄÅÍÈß
ÐÅÀÊÖÈÈ ÊÀÒÀËÈÒÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÃÈÄÐÎËÈÇÀ ÌÀÑËÀ ÑÀÔËÎÐÀ
ÏÎÄ ÄÅÉÑÒÂÈÅÌ ËÈÏÀÇÛ ÈÇ Candida rugosa
Ìàéäèíà, À.Á. Áåëîâà, À.Â. Ëåâàøîâ, Í.Ë. Êëÿ÷êî
(êàôåäðà õèìè÷åñêîé ýíçèìîëîãèè; e-mail: klyachko@enzyme.chem.msu.ru)
Ðàáîòà ïîñâÿùåíà èçó÷åíèþ êàòàëèçèðóåìîãî ëèïàçîé èç Candida rugosa ãèäðîëèçà ìàñëà
ñàôëîðà â ýìóëüñèè òèïà ìàñëî â âîäå, ñòàáèëèçèðîâàííîé ïîâåðõíîñòíî-àêòèâíûì âåùåñòâîì, äåçîêñèõîëàòîì íàòðèÿ, ïîä äåéñòâèåì òåìïåðàòóðû. Ïîêàçàíî, ÷òî âûáîð îïòèìàëüíîé äëÿ ïðîâåäåíèÿ äàííîé ðåàêöèè òåìïåðàòóðû îïðåäåëÿåòñÿ íå òîëüêî åå âëèÿíèåì íà
êàòàëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü è ñòàáèëüíîñòü ôåðìåíòà, íî è äåéñòâèåì íà ñîñòîÿíèå ðåàêöèîííîé ñðåäû, ýìóëüñèè, îò «êà÷åñòâà» êîòîðîé ñóùåñòâåííûì îáðàçîì çàâèñÿò êàê êèíåòè÷åñêèå ïàðàìåòðû ëèïàçû, òàê è âûõîä ïðîäóêòà ðåàêöèè, ëèíîëåâîé êèñëîòû. Òàê, íàïðèìåð,
íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî íàèáîëüøåå çíà÷åíèå íà÷àëüíîé ñêîðîñòè ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè íàáëþäàåòñÿ ïðè 40°Ñ è ôåðìåíò ïðàêòè÷åñêè íå èíàêòèâèðóåòñÿ ïðè åãî èíêóáàöèè (45°Ñ), íàèáîëüøèé âûõîä ðåàêöèè íàáëþäàåòñÿ ïðè 30°Ñ, è ïðè ïîâûøåíèè òåìïåðàòóðû ðåàêöèîííîé
ñìåñè îí ñíèæàåòñÿ, ÷òî îáóñëîâëåíî èìåííî èçìåíåíèåì “êà÷åñòâà” ýìóëüñèè.
Ëèïàçà (ãèäðîëàçà òðèãëèöåðèäîâ Ê.Ô.3.1.1.3) –
ôåðìåíò, êàòàëèçèðóþùèé ãèäðîëèç òðèãëèöåðèäîâ äî
ìîíîãëèöåðèäîâ è æèðíûõ êèñëîò, ñîäåðæèòñÿ â
îðãàíèçìå æèâîòíûõ [1], â ðàñòåíèÿõ [2] è â ìèêðîîðãàíèçìàõ [3–5]. Ëèïàçà – óíèêàëüíûé áèîêàòàëèçàòîð, èìåþùèé øèðîêóþ ñóáñòðàòíóþ ñïåöèôè÷íîñòü; â íàñòîÿùåå âðåìÿ øèðîêî èñïîëüçóåòñÿ â
îðãàíè÷åñêîì ñèíòåçå [6, 7], ìåäèöèíå [8–10] è öåëëþëîçíî-áóìàæíîé ïðîìûøëåííîñòè [12] (ñì. òàêæå
îáçîðû [13–14]).
Ñóáñòðàòàìè ëèïàçû ÿâëÿþòñÿ íåðàñòâîðèìûå â
âîäå òðèãëèöåðèäû, â òî âðåìÿ êàê ôåðìåíò õîðîøî
ðàñòâîðèì â âîäå, èíûìè ñëîâàìè, ðåàêöèè äîëæíû
ïðîòåêàòü íà ïîâåðõíîñòè ðàçäåëà ôàç. Îñíîâíîé îòëè÷èòåëüíîé îñîáåííîñòüþ ìíîãèõ ëèïàç ÿâëÿåòñÿ èõ
ñïîñîáíîñòü ê ïîâåðõíîñòíîé àêòèâàöèè ôåðìåíòà â
ïðèñóòñòâèè àãðåãèðîâàííûõ ìîëåêóë ñóáñòðàòà (æèðîâûõ êàïåëü) [15–17].
Èçâåñòíî, ÷òî ðàñòèòåëüíûå ìàñëà ðàçëè÷àþòñÿ ïî ñîñòàâó âõîäÿùèõ â íèõ æèðíûõ êèñëîò.
Ìàñëî ñàôëîðà ÿâëÿåòñÿ óíèêàëüíûì, â íeì ìîæåò ñîäåðæàòüñÿ äî 80% öåííîé ïîëèíåíàñûùåííîé ëèíîëåâîé êèñëîòû (öèñ-, öèñ-îêòàäåêàäèåí-912-îâàÿ êèñëîòà) [18]. Ôåðìåíòàòèâíîå ïîëó÷åíèå
ñâîáîäíûõ æèðíûõ êèñëîò èç òðèãëèöåðèäîâ ïðåäñòàâëÿåòñÿ âåñüìà ïåðñïåêòèâíûì ñïîñîáîì. Ïðèâëåêàòåëüíîñòü ôåðìåíòàòèâíûõ ïðîöåññîâ ñâÿçàíà ñ òåì, ÷òî, âî-ïåðâûõ, íå îêèñëÿþòñÿ äâîéíûå
ñâÿçè íåíàñûùåííûõ æèðíûõ êèñëîò, à, âî-âòîðûõ,
òåõíîëîãè÷åñêèå ïðîöåññû, îñíîâàííûå íà ïðèìå-
íåíèè ëèïàç, íå îêàçûâàþò îòðèöàòåëüíîãî âîçäåéñòâèÿ íà îêðóæàþùóþ ñðåäó [19].
 ñëó÷àå ëèïàç (ïîìèìî òðàäèöèîííûõ äëÿ ôåðìåíòàòèâíûõ ðåàêöèé ïàðàìåòðîâ) ñâîéñòâà ðåàêöèîííîé ñðåäû, â ÷àñòíîñòè “êà÷åñòâî” ýìóëüñèè, èãðàþò
îñîáóþ ðîëü.  äàííîé ðàáîòå ìåòîäîì ðÍ-ñòàòèðîâàíèÿ áûëè èçó÷åíû ïàðàìåòðû ðåàêöèè ôåðìåíòàòèâíîãî ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà ïîä äåéñòâèåì ëèïàçû â ýìóëüñèè òèïà ìàñëî â âîäå, ñòàáèëèçèðîâàííîé ïîâåðõíîñòíî-àêòèâíûì âåùåñòâîì (ÏÀÂ), äåçîêñèõîëàòîì íàòðèÿ, ïðè ðàçíûõ çíà÷åíèÿõ òåìïåðàòóðû
ñ öåëüþ âûáîðà îïòèìàëüíîãî òåìïåðàòóðíîãî ðåæèìà äëÿ ñêîðîñòè ðåàêöèè è âûõîäà ïîëó÷àåìîãî ïðîäóêòà. Ïðîâåäåíî èçó÷åíèå âëèÿíèÿ òåìïåðàòóðû êàê
íà ôåðìåíò, òàê è íà ðåàêöèîííóþ ñðåäó, à èìåííî
ñîñòîÿíèå ýìóëüñèè.
Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ ÷àñòü
Ìàòåðèàëû è ìåòîäû
 ðàáîòå áûëè èñïîëüçîâàíû ïîëó÷åííûå èç ðàçíûõ èñòî÷íèêîâ êîììåð÷åñêèå ïðåïàðàòû ëèïàç (ÊÔ
3.1.1.3) ôèðìû “Sigma” (ÑØÀ): Alcaligenes,
Burkholderia, Candida rugosa.  êà÷åñòâå ñóáñòðàòà
èñïîëüçîâàëè ìàñëî ñàôëîðà êðàñèëüíîãî (Carthamus tinctori) ïðîèçâîäñòâà ÊÍÐ. Äåçîêñèõîëàò, õëîðèä
è ãèäðîêñèä íàòðèÿ (“îñ.÷.”) èçãîòîâëåíû ôèðìîé
“ÄÈÀ-Ì”.
Âûäåëèâøóþñÿ ïðè ãèäðîëèçå ìàñëà êèñëîòó òèòðîâàëè 25 ìÌ ðàñòâîðîì ãèäðîêñèäà íàòðèÿ â àâòîìàòè÷åñêîì ðåæèìå ñ èñïîëüçîâàíèåì ðÍ-ñòàòà
ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2008. Ò. 49. ¹ 2
(TTT80, ABU80, “Radiometer”, Äàíèÿ) ñ òåðìîñòàòèðóåìîé ÿ÷åéêîé.
Äîïîëíèòåëüíóþ ñòàáèëèçàöèþ ýìóëüñèè òèïà ìàñëî â âîäå ïðîâîäèëè óëüòðàçâóêîâîé îáðàáîòêîé ñ èñïîëüçîâàíèåì óëüòðàçâóêîâîé âàííû (“Bransonic
1510E-MTH”, “150W”, “50-60Hz”).
Ïðèãîòîâëåíèå ñòàáèëüíîé ýìóëüñèè. Ê 5 èëè
10 ìë 20–50 ìÌ âîäíîãî ðàñòâîðà NaCl, pH 7,5–9,5,
äîáàâëÿëè 50–300 ìêë çàïàñíîãî (20%) ðàñòâîðà äåçîêñèõîëàòà íàòðèÿ (íåîáõîäèìàÿ îïòèìàëüíàÿ êîíöåíòðàöèÿ ÏÀÂ áûëà îïðåäåëåíà â ñïåöèàëüíîì ýêñïåðèìåíòå ïî çàâèñèìîñòè àêòèâíîñòè èñïîëüçóåìûõ
ôåðìåíòîâ îò êîíöåíòðàöèè ÏÀÂ), 60–100 ìêë ìàñëà
ñàôëîðà. Ýìóëüñèþ ïîäâåðãàëè äåéñòâèþ óëüòðàçâóêà
2 ðàçà ïî 10 ìèí, òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàÿ â ïðîìåæóòêå ìåæäó îáðàáîòêàìè.
Èçìåðåíèå ñêîðîñòè è îïðåäåëåíèå âûõîäà
ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Â ïðåäâàðèòåëüíî ïðèãîòîâëåííóþ ýìóëüñèþ äîáàâëÿëè 100 ìêë çàïàñíîãî
(10 ìã/ìë) ðàñòâîðà ôåðìåíòà (â ñëó÷àå ïðåïàðàòà
íåðàñòâîðèìîé èììîáèëèçîâàííîé ëèïàçû ôåðìåíò
äîáàâëÿëè íåïîñðåäñòâåííî â ÿ÷åéêó ðÍ-ñòàòà â
êîíöåíòðàöèè 2 ìã/5 ìë) è îïðåäåëÿëè êîëè÷åñòâî
âûäåëèâøåéñÿ êèñëîòû ìåòîäîì àâòîìàòè÷åñêîãî
òèòðîâàíèÿ åå ãèäðîêñèäîì íàòðèÿ ïðè ïîñòîÿííîì
çíà÷åíèè ðÍ ðàñòâîðà, îïòèìàëüíîì äëÿ êàæäîé èç
ëèïàç.
Èçó÷åíèå çàâèñèìîñòè àêòèâíîñòè, ñòàáèëüíîñòè ôåðìåíòà è âûõîäà ïðîäóêòà îò òåìïåðàòóðû. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñêîðîñòè ôåðìåíòàòèâíîé
ðåàêöèè â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû ïðîâîäèëè
èçìåðåíèÿ â ÿ÷åéêå ðÍ-ñòàòà ïðè ñîîòâåòñòâóþùåé
òåìïåðàòóðå. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñòàáèëüíîñòè (îñòàòî÷íîé àêòèâíîñòè) ôåðìåíòà åãî èíêóáèðîâàëè ïðè
òåìïåðàòóðå 20–55°Ñ. ×åðåç îïðåäåëåííûå ïðîìåæóòêè âðåìåíè îòáèðàëè àëèêâîòû, äîáàâëÿëè â ïðèãîòîâëåííóþ ýìóëüñèþ è èçìåðÿëè êîëè÷åñòâî âûäåëèâøåéñÿ êèñëîòû ìåòîäîì ðÍ-ñòàòèðîâàíèÿ â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ ïðè 30°Ñ. Ñòàáèëüíîñòü ýìóëüñèè è
âëèÿíèå åå “êà÷åñòâà” íà àêòèâíîñòü ôåðìåíòà îïðåäåëÿëè ïðè 30 è 45°Ñ, èíêóáèðóÿ èìåííî ýìóëüñèþ
ïðè äàííûõ òåìïåðàòóðàõ. ×åðåç îïðåäåëåííûå ïðîìåæóòêè âðåìåíè îòáèðàëè àëèêâîòû, äîáàâëÿëè ëèïàçó è èçìåðÿëè êîëè÷åñòâî âûäåëèâøåéñÿ êèñëîòû
ìåòîäîì ðÍ-ñòàòèðîâàíèÿ â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ
ïðè 30°Ñ.
Ðåçóëüòàòû è èõ îáñóæäåíèå
Èçâåñòíî, ÷òî òåìïåðàòóðà ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ôàêòîðîâ, âëèÿþùèõ íà ñêîðîñòü êàê õèìè÷åñêèõ, òàê è
135
Ðèñ. 1. Çàâèñèìîñòü íà÷àëüíîé ñêîðîñòè ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà
ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçàìè èç Alcaligenes (1), Burkholderia
(2) è Candida rugosa (3), îò òåìïåðàòóðû. Óñëîâèÿ ýêñïåðèìåíòà:
êîíöåíòðàöèÿ ôåðìåíòà, ìã/ìë: 1, 3 – 1; 2 – 2; êîíöåíòðàöèÿ
äåçîêñèõîëàòà íàòðèÿ 1,2%; ðÍ 9,5; 50 ìÌ NaCl
ôåðìåíòàòèâíûõ ðåàêöèé. Çàâèñèìîñòè íà÷àëüíîé ñêîðîñòè ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçàìè èç ðàçíûõ èñòî÷íèêîâ, ïðèâåäåíû íà
ðèñ. 1. Êàê âèäíî, âî âñåõ ñëó÷àÿõ ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû ðåàêöèè ïðèâîäèò ê åå óñêîðåíèþ äî íåêîòîðîãî ïðåäåëà, çà êîòîðûì ìîæåò ñëåäîâàòü óìåíüøåíèå ñêîðîñòè, êàê ýòî ïîêàçàíî íà ïðèìåðàõ ëèïàç
èç Alcaligenes è Candida rugosa. Äëÿ ëèïàçû èç
Burkholderia îáíàðóæèâàåòñÿ êàæóùàÿñÿ íåçàâèñèìîñòü ñêîðîñòè ðåàêöèè îò òåìïåðàòóðû. Òàêîé õîä
çàâèñèìîñòè ìîæåò áûòü îáóñëîâëåí ðàçëè÷íûìè
ïðîöåññàìè (èíàêòèâàöèÿ ôåðìåíòà, ïåðåõîä ðåàêöèè
â äèôôóçèîííî-êîíòðîëèðóåìûé ðåæèì è ò.ä.). Áûëî
ïîêàçàíî, ÷òî íåêîòîðîå ïîíèæåíèå ñêîðîñòè ðåàêöèè
ïðè ïîâûøåíèè òåìïåðàòóðû íå ñêàçûâàëîñü ñóùåñòâåííî íà âûõîäå ïðîäóêòà ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà – ëèíîëåâîé êèñëîòû. Èñêëþ÷åíèåì ÿâëÿëàñü ëèïàçà èç Candida rugosa, äàííûå äëÿ êîòîðîé
ïðèâåäåíû íà ðèñ. 2. Êàê âèäíî èç ðèñóíêà, íàðÿäó ñ
óìåíüøåíèåì ñêîðîñòè ðåàêöèè ïðè òåìïåðàòóðàõ
âûøå 30°Ñ (ðèñ. 2, à) íàáëþäàëîñü ñóùåñòâåííîå
óìåíüøåíèå âûõîäà ïðîäóêòà (ðèñ. 2, á). Òàê, âûõîä
ïðîäóêòà ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçîé èç Candida rugosa ïðè 45°Ñ, óìåíüøàåòñÿ áîëåå ÷åì â 2 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ íàáëþäàåìûì ïðè 30°Ñ (ðèñ. 2, á). Êàê óæå îòìå÷àëîñü
âûøå, ëèïàçà ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ôåðìåíòîâ, äëÿ ôóíêöèîíèðîâàíèÿ êîòîðûõ âàæíî íàëè÷èå ïîâåðõíîñòè
ðàçäåëà ôàç [15–17].  íàøåì ñëó÷àå ïîâåðõíîñòü
ðàçäåëà ôàç ñòàáèëèçèðîâàíà íàëè÷èåì ïîâåðõíîñòíîàêòèâíîãî âåùåñòâà – äåçîêñèõîëàòà íàòðèÿ. ×åì
ìîæåò áûòü îáóñëîâëåíî ñòîëü ñóùåñòâåííîå ñíèæå-
136
ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2008. Ò. 49. ¹ 2
Ðèñ. 2. Çàâèñèìîñòü íà÷àëüíîé ñêîðîñòè (a) è êîíöåíòðàöèè ïðîäóêòà (á) ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé
ëèïàçîé èç Candida rugosa, îò òåìïåðàòóðû. Óñëîâèÿ ýêñïåðèìåíòà ïðåäñòàâëåíû â ïîäïèñè ê ðèñ. 1
íèå âûõîäà, èíàêòèâàöèåé ôåðìåíòà èëè “êà÷åñòâîì”
ýìóëüñèè? Äëÿ îòâåòà íà ýòîò âîïðîñ â ñïåöèàëüíîì
ýêñïåðèìåíòå áûëî ïðîâåäåíî èíêóáèðîâàíèå ïðè
45°Ñ êàê ôåðìåíòà, òàê è ýìóëüñèè â òå÷åíèå 45 ìèí,
ò.å. âðåìåíè ïðîâåäåíèÿ ðåàêöèè äî ïîëíîãî åå èñòîùåíèÿ, ïðè êîòîðîì ôèêñèðîâàëîñü êîëè÷åñòâî îáðàçîâàâøåãîñÿ ïðîäóêòà (ðèñ. 2, á). Ðåçóëüòàòû ïðåäñòàâëåíû íà ðèñ. 3. Êàê âèäíî, ïðåäâàðèòåëüíîå èíêóáèðîâàíèå ôåðìåíòà (1) ïðàêòè÷åñêè íå ïðèâîäèëî íè
ê èçìåíåíèþ íà÷àëüíîé ñêîðîñòè (ðèñ. 3, à) ðåàêöèè
ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîãî ëèïàçîé èç
Candida rugosa, íè ê èçìåíåíèþ âåëè÷èíû âûõîäà
ïðîäóêòà ðåàêöèè (ðèñ. 3, á). Â òî æå âðåìÿ ïðåäâàðèòåëüíîå èíêóáèðîâàíèå ýìóëüñèè (2) ñêàçûâàëîñü
êàê íà íà÷àëüíîé ñêîðîñòè (ðèñ. 3, à), òàê è íà âûõîäå ïðîäóêòà ðåàêöèè (ðèñ. 3, á), ñóùåñòâåííî ñíèæàÿ
îáà ïàðàìåòðà êàòàëèçèðóåìîãî ëèïàçîé èç Candida
rugosa ïðîöåññà.
Òàêèì îáðàçîì, äëÿ ëèïàçû èç Candida rugosa
âûáîð òåìïåðàòóðû ðåàêöèè èìååò ïðèíöèïèàëüíîå
Ðèñ. 3. Çàâèñèìîñòü îñòàòî÷íîé àêòèâíîñòè ôåðìåíòà (à) è âûõîäà ïðîäóêòà (á) ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçîé èç Candida rugosa, èçìåðåííîé â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ ïðè 30°Ñ ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ôåðìåíòà (1) è ýìóëüñèè
(2) ïðè 30 è 45°Ñ â òå÷åíèå 45 ìèí. Óñëîâèÿ ýêñïåðèìåíòà ïðåäñòàâëåíû â ïîäïèñè ê ðèñ. 1
137
ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2008. Ò. 49. ¹ 2
çíà÷åíèå íå òîëüêî êàê ôàêòîð, âëèÿþùèé íà àêòèâíîñòü è ñòàáèëüíîñòü ôåðìåíòà, íî è êàê ôàêòîð,
âëèÿþùèé íà ñîñòîÿíèå ðåàêöèîííîé ñðåäû è/èëè ïîâåðõíîñòè ðàçäåëà ôàç.
ÑÏÈÑÎÊ ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ
1. Carrier F., Bezzine S., Verger R. // J. Mol. Catalysis. B. 1997. 3.
P. 55.
2. Borgstrom B., Brockman H.L. Lipases. Amsterdam, 1984.
3. Jaeger K.E., Ransas S., Dijkstra B.W., Colson C., van Heuvel
M., Misset O. // FEMS Microbiol. Rev. 1994. 15. P. 29.
4. Gilbert E.J. //Enzyme Microb. Technol. 1993. 15. P. 634.
5. Wohlfahrt S., Jaeger K. E. // Bio Engineering. 1993. 9. P. 39.
6. Gutman A.L., Shapira M. //Adv. Biochem. Eng. Biotechnol.
1995. 52. P. 87.
7. Chopineau J., Kieboom P.G., Klibanov A.M., Riva S. // J. Amer.
Chem. Soc. 1998. 110. P. 584.
8. Wicke-Planquart C., Canaan S., Riviere M., Dupius L., Verger R. // Protein Eng. 1996. 9. P. 1225.
9. Carriere F., Moreau H., Raphel V., Laogier R., Benicourt C.,
Junien J.L., Verger R. // Eur. J. Biochem. 1991. 202. P. 75.
10. Suzuki A., Mizumoto A., Sarr M.J., Dimagno E.P. //
Gastroenterology. 1997. 112. P. 2048.
11. Gudmundsson B.O., Almarsson O., Haraldsson G.G. //
Tetrahedron Lett. 1993. 34. P. 5791.
12. Fijita Y., Matsukura M., Hata K., SHimoto H., Sharyo M.,
Skaguchi H., Gibson K. // Tappi J. 1992. 75. P. 117.
13. Reetz M.T., Jaeger K.-E. // TIBTECH 1998. 161. P. 396.
14. Reetz M. // Curr. Opin. Chem. Biol. 2002. 6. P. 145.
15. Áðîêåðõîô Õ., Äæåíñåí Ð. Ëèïîëèòè÷åñêèå ôåðìåíòû.
Ì., 1978.
16. Schmid R.D., Verger R. // Angew. Chem. Int. Ed. 1998. 37.
P. 1608.
17. Verger R. // TIBTECH. 1997. 15. P. 32.
18. ×åí Õàî., Æèíü Ëè Õóà. Õèìèÿ ëèïèäîâ. Ïåêèí, 2004.
19. Xu X., Fomuso L. B., Akoh C. C. // J. Agric. Food Chem. 2000.
48. P. 3.
Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ 23.11.07
PECULIARITIES OF TEMPERATURE CHOISE FOR LYPASE
CATALISED HYDROLYSIS OF SUFFLOWER OIL
Ìaidina, A.B. Belova, A.V. Levashov, N.L. Klyachko
(Division of Chemical Enzymology)
The article is devoted to investigation of temperature influence on catalytic hydrolysis of
safflower oil in surfactant- stabilized water-in-oil emulsion. It was shown, that the choice of
optimal temperature is defined not only by the temperature influence on the enzyme stability, but
on the reaction media state also.