«УТВЕРЖДАЮ» Зав. кафедрой МЭиИБ Мельников В.Л. «……» ___________ 2011 г. РАБОЧАЯ ПРОГРАММА УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ ИММУНОЛОГИЯ Направление/специальность подготовки 31.00.00/31.05.01 – Лечебное дело _______________________________________________________________________ Профиль/специализация подготовки______________________________________ _______________________________________________________________________ Квалификация (степень) выпускника Форма обучения специалист очная г. Пенза 2011 г. ЦЕЛИ ОСВОЕНИЯ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ Целями освоения учебной дисциплины (модуля) «Иммунология» являются получение студентами фундаментальных знаний по структуре и функциям иммунной системы у взрослого человека, ее возрастным особенностям, механизмы развития и функционирования, основные методы иммунодиагностики, методы оценки иммунного статуса и показания к применению иммунотропной терапии. В результате студент становится способным освоить тот пласт фундаментальных и прикладных знаний, которые ему необходимо будет получить при изучении клинических дисциплин. 1. 2. МЕСТО УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ В СТРУКТУРЕ ООП ВПО Учебная дисциплина «Иммунология» относится к циклу математических и естественнонаучных дисциплин. Б.2. Иммунология опирается на знания, полученные в ходе изучения курсов биологии, химии, биохимии, микробиологии. Компетенции приобретенные в ходе изучения иммунологии готовят студента к освоению профессиональных компетенций. В задачи изучения иммунологии студентами входят: • получение представлений о структуре и функциях иммунной системы у взрослого человека; • формирование представлений о серологической диагностике инфекционных болезней; • использование основных реакций иммунитета для идентификации выделенной микробной культуры; • освоение методов иммунодиагностики, иммунопрофилактики и оценки иммунного статуса. Основные положения дисциплины должны быть использованы при дальнейшем изучении клинических дисциплин. 3. КОМПЕТЕНЦИИ СТУДЕНТА, ФОРМИРУЕМЫЕ В РЕЗУЛЬТАТЕ ОСВОЕНИЯ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ (МОДУЛЯ) / ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ОБРАЗОВАНИЯ И КОМПЕТЕНЦИИ СТУДЕНТА ПО ЗАВЕРШЕНИИ ОСВОЕНИЯ ПРОГРАММЫ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ (МОДУЛЯ) В ходе изучения дисциплины «Иммунология» формируются следующие профессиональные компетенции: «Способен и готов реализовать этические и деонтологические аспекты врачебной деятельности в общении с коллегами, медицинскими сестрами и младшим персоналом, пациентами и их родственниками» «Способен и готов анализировать закономерности функционирования отдельных органов и систем, использовать знания анатомо-физиологических основ, основные методики клинико-иммунологического обследования и оценки функционального состояния организма взрослого человека для своевременной диагностики заболеваний и патологических процессов» «Способен и готов изучать научно-медицинскую и парамедицинскую информацию, отечественный и зарубежный опыт по тематике исследования» «Способен и готов к участию в освоении современных теоретических и экспериментальных методов исследования с целью создания новых перспективных средств, 2 в организации работ по практическому использованию и внедрению результатов исследований» В результате освоения дисциплины студент должен: 1) Знать: структуру и функции иммунной системы человека, ее возрастные особенности, механизмы развития и функционирования, основные методы иммунодиагностики, методы оценки иммунного статуса и показания к применению иммунотропной терапии. 2) Уметь: обосновать необходимость клинико-иммунологического обследования больного, интерпретировать результаты иммунологических исследований, проводить серологическую диагностику инфекционных болезней. 3) Владеть навыками постановки предварительного диагноза на основании результатов лабораторного обследования населения, использовать основные реакции иммунитета для обнаружения антител в сыворотке больных при диагностике инфекционных болезней. 4. СТРУКТУРА И СОДЕРЖАНИЕ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ (МОДУЛЯ) Общая трудоемкость дисциплины составляет __3__ зачетных единиц, 108 / 72 часов. Раздел учебной дисциплины Виды учебной деятельности, включая самостоятельную работу студентов и трудоемкость (в часах) семестраНеделя № п/п Семестр 4.1. Структура преподавания дисциплины Лекци и 1 2 Прак Лаб тика Самост Инфекция Иммунитет. Неспецифичес кие факторы защиты. Иммунная система 4 4 2 2 4 16 6 6 4 4 12 8 4 Реакции иммунитета 4 0 20 8 5 Иммунобиолог ические препараты Итого Всего 4 0 12 8 8 64 36 3 72 Формы текущего контроля успеваемости (по неделям семестра) Форма промежуточной аттестации (по семестрам) Текущий контроль на каждом практическом занятии, тестирование после изучения каждого раздела, промежуточные аттестации на 8-й, и 16-й неделе, зачет в 4 семестре 108 3 Вид учебной работы Аудиторные занятия (всего) В том числе: Лекции Лабораторные занятия (ЛЗ) Семинары (С) Самостоятельная работа (всего) В том числе: Курсовой проект (работа) История болезни Реферат Другие виды самостоятельной работы 4 8 64 8 64 - - - - 36 Текущий контроль успеваемости Промежуточная аттестация (коллоквиум) Итоговая аттестация (экзамен) Общая трудоемкость Семестры Всего часов час зач. ед. 36 Опрос на занятии, компьютерное тестирование Опрос по темам раздела, компьютерное тестирование 108 3 108 3 Тематика лекций 4 семестр (по 2 часа) 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Учение об инфекции. Инфекция и инфекционная болезнь. Введение в иммунологию. Виды иммунитета. Неспецифические факторы защиты организма Иммунная система организма. Антигены. Формы иммунного ответа: антителообразование, иммунологическая память, иммунологическая толерантность. Формы иммунного ответа: ГНТ, ГЗТ. Особенности противовирусного, противоопухолевого, трансплантационного иммунитета. Основы иммунотерапии и иммунопрофилактики Клиническая иммунология: иммунный статус макроорганизма. Возрастные особенности иммунной системы.Оценка Клиническая иммунология: иммунодефициты, иммунокоррекция. Влияние различных факторов на иммунный статус 9. Тематика лабораторных работ 4 семестр (по 4 часа) 1. Иммунологическая лаборатория. Основные модели в иммунологии. Особенности работы с иммунокомпетентными клетками 2. Инфекция и инфекционный процесс 3. Иммунитет: виды иммунитета, неспецифические факторы защиты. 4. Иммунитет: антигены и антителообразование, иммунные реакции 4 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. Иммунитет: иммунологическая память и толерантность.иммунные реакции Иммунитет: взаимодействие факторов иммунитета и неспецифической резистентности при инфекциях различной этиологии. Противоопухолевый иммунитет. Комплемензависимые серологические реакции. ГНТ и ГЗТ. Антитоксический иммунитет Иммунитет: иммунные реакции с использованием меченых антител или антигенов. Иммунобиологические препараты Контрольное занятие Инфекция и иммунитет Клиническая иммунология: иммунный статус макроорганизма Влияние различных факторов на иммунный статус, иммунодефициты, иммунокоррекция Экспериментальные модели иммунодефицитных состояний. (тимэктомия, «нокаут» и др. Культура клеток in vivo и in vitro Первичные иммунодефициты Клиническая иммунология. Вторичные иммунодефициты Клиническая иммунология. Аутоиммунные заболевания. Принципы оценки иммунного статуса. Оценка неспецифической резистентности макроорганизма. Клиническая иммунология. Оценка иммунного статуса. Клиническая иммунология. Аллергические заболвания. Гиперчувствительность и ее диагностика Клиническая иммунология Иммуноанализы. Иммуноферментные методы в иммунологии. Постановка и оценка. Иммуноэлектрофорез, модификации, применение. Иммуноблотинг.Радиоиммунный метод Клиническая иммунология. Генетические методы исследования в иммунологии Иммунокоригирующая терапия. Иммуномодулирующие препараты Контрольное занятие Клиническая иммунология 4.2 Содержание учебной дисциплины УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ Определение понятия "инфекция", "инфекционный процесс", "инфекционная болезнь". Условия возникновения инфекционного процесса. Характерные особенности инфекционного процесса. 1. Роль микроорганизмов в инфекционном процессе Формы взаимодействия микро- и макроорганизма: мутуализм, комменсализм, паразитизм. Инфекция как разновидность паразитизма. Эволюция микробного паразитизма. Понятие о сапронозах. Патогенность микроорганизмов, определение. Облигатно-патогенные, условнопатогенные, непатогенные микроорганизмы. Вирулентность, определение, единицы измерения (DLm, LD50 и др.). Факторы патогенности микроорганизмов: адгезины, ферменты патогенности; факторы, вызывающие иммуносупрессию; микробные токсины. Характеристика факторов патогенности. Токсичность и токсигенность бактерий. Белковые токсины (экзотоксины), классификация, основные свойства и механизм действия. Единицы измерения силы токсинов (DLm, LD50). Эндотоксины, химический состав, свойства, механизм действия. Главные отличия от белковых токсинов. Аллергены и толерогены микробов. 5 Патогенные свойства риккетсий, хламидий, микоплазм, грибов, простейших. Облигатный внутриклеточный паразитизм вирусов. Генетический контроль факторов патогенности у микроорганизмов. Гетерогенность микробных популяций по признаку вирулентности и факторам патогенности. Роль плазмид в экспрессии факторов патогенности у микроорганизмов. 2. Роль макроорганизма в инфекционном процессе Роль организма хозяина в инфекционном процессе. Значение наследственного фактора. Гетерогенность популяции человека по признаку восприимчивости к инфекции. Значение пола, возраста, состояния нервной и эндокринной систем, а также влияние образа жизни, природных и социальных условий жизни человека на возникновение, развитие и исход инфекционного процесса. 3. Понятие о патогенезе инфекционных болезней Фазы развития инфекционного процесса: адгезия, колонизация, инвазия, повреждение микробами клеток и тканей. Критические дозы микроорганизмов, вызывающие инфекционную болезнь. Источники инфекции. Понятие об антропонозах, зоонозах, сапронозах. Проникновение патогенных микробов в организм. Входные ворота инфекции. Механизмы передачи инфекции: фекальнооральный, респираторный, кровяной, контактный. Пути передачи. Пути распространения микробов и токсинов в организме. Динамика развития инфекционной болезни, периоды. Формы инфекции: экзо- и эндогенная; очаговая и генерализованная; моно- и смешанная; вторичная инфекция, реинфекция, суперинфекция, рецидив; острая, хроническая, персистирующая инфекции; микробное носительство. Биологический метод исследования и его применение для изучения патогенеза инфекционных процессов. Патогенетические особенности вирусных инфекций. Инфекционность вирусных нуклеиновых кислот. Острая и персистирующая вирусная инфекция. МЕДИЦИНСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ 1. Задачи и история развития иммунологии Иммунология как наука о способах и механизмах защиты от генетически чужеродных веществ с целью подержания гомеостаза организма. Возникновение и становление иммунологии как науки, этапы формирования иммунологии. Роль отечественных и зарубежных ученых в развитии иммунологии, Нобелевские лауреаты в области иммунологии. Основные направления современной иммунологии: клеточная, молекулярная, клиническая, трансплантационная, экологическая иммунология; иммуногенетика, иммунопатология, аллергология, иммуноморфология, иммунохимия, иммуногематология, иммунология репродукции и др. Роль иммунологии в развитии медицины и биологии, ее связь с другими науками. Современное определение понятия "иммунитет". Виды иммунитета (врожденный, приобретенный, естественный, искусственный, активный, пассивный, стерильный, нестерильный, местный и др.). 2. Неспецифические факторы защиты организма человека Понятие о механических, физико-химических и биологических барьерах. 6 Механические защитные реакции кожи, слизистых оболочек. Физико-химическая защита организма: рН среды, ферментативная активность пепсина и др. Биологические факторы защиты. Фагоцитоз. Роль И.И. Мечникова в развитии учения о фагоцитозе. Классификация фагоцитирующих клеток, особенности морфологии нейтрофилов и макрофагов. Основные стадии фагоцитоза, их характеристика. Завершенный и незавершенный фагоцитоз. Методы определения фагоцитарной активности, фагоцитарный показатель и индекс фагоцитоза. Значение фагоцитоза в защите организма от микробов и чужеродного агента. Естественные киллеры, их роль в защите организма. Гуморальные неспецифические факторы защиты. Система комплемента, β-лизины, интерфероны, лейкины, противовирусные сывороточные ингибиторы, лизоцим, плакины, пропердин, фибронектин и др. Их физикохимические и биологические свойства. Номенклатура основных компонентов системы комплемента. Классический и альтернативный пути активации комплемента. Роль комплемента в хемотаксисе, опсонизации микробов, развитии аллергических и иммунопатологических процессов. Интерфероны. Классификация интерферонов, индукторы, механизм образования и действия интерферонов. Иммунобиологическое значение интерферонов (противовирусное, иммуномодулирующее, противопролиферативное), их получение и практическое использование. 3. Антигены Антигены. Определение. Понятие об антигенности, иммуногенности и специфичности. Условия антигенности. Антигенные детерминанты, их строение. Условия иммуногенности. Классификация антигенов. Биологическая роль антигенов. Полноценные антигены, гаптены, синтетические антигены, их свойства. Иммунохимическая специфичность антигенов, ее проявления: видовая, групповая, типовая, органная, гетероспецифическая. Антигены микробов, локализация, химический состав, их роль в инфекционном процессе и развитии иммунного ответа. Антигены групп крови, аутоантигены, эмбриоспецифические, опухолевые, трансплантационные антигены человека. Главный комплекс гистосовместимости, антигены гистосовместимости I и II классов. Процессинг антигена в макроорганизме. 4. Иммунная система организма человека и основные ее функции 4.1. Структура и функции иммунной системы. Центральные органы иммунной системы: костный мозг, вилочковая железа. Периферические органы иммунной системы: селезенка, лимфатические узлы и фолликулы. Возрастные особенности иммунной системы. 4.2. Клетки иммунной системы. Стволовые кроветворные клетки. Основные клетки иммунной системы: Т- и Влимфоциты, макрофаги (А-клетки), их онтогенез. Т-лимфоциты. Субпопуляции Т-клеток: Т-хелперы, цитотоксические Т-клетки (Тэффекторы); поверхностные маркеры и рецепторы этих клеток (СД-антигены). Продукты и функции Т-лимфоцитов. В-лимфоциты. Субпопуляции В-клеток. Поверхностные маркеры и рецепторы В-клеток: иммуноглобулины, Fc-рецепторы. Рецепторы для комплемента, митогенов и др. Продукты и функции В-лимфоцитов. Система рециркуляции лимфоцитов. 7 Нулевые клетки (нулевые лимфоциты), К-клетки и нормальные (естественные) киллеры. Взаимодействие (кооперация) между Т-, В-, А-клетками в процессе иммунного ответа. Принципы и механизмы управления иммунокомпетентными клетками. Распознавание антигена и индукция иммунного ответа. Роль иммуноцитокинов. 5. Специфические формы иммунного ответа Понятие о специфических формах иммунного ответа: антителообразование, иммунный фагоцитоз, киллерная функция, реакции гиперчувствительности, иммунологическая память и толерантность. 5.1. Антитела и антителообразование. Антитела. Определение. Физико-химические, биологические свойства и функции. Иммуноглобулины. Основные классы, их структурные и функциональные особенности. Константные и вариабельные участки, домены. Структура активных центров иммуноглобулинов и их основная функция. Механизм взаимодействия антитела с антигеном. Иммунный комплекс. Авидность и аффинность антител. Понятие о валентности антител. Антигенное строение иммуноглобулинов: изотипические, аллотипические, идиотипические детерминанты. Антиидиотипические антитела, Патологические иммуноглобулины. Полные и неполные антитела. Генетика иммуноглобулинов. Аутоантитела. Понятие о моноклональных антителах. Гибридомы. Биосинтез антител. Регуляция антителообразования. Понятие о HLA – рестрикции иммунного ответа. Динамика образования антител, первичный и вторичный иммунный ответ. Теории синтеза и разнообразия антител. Биологическая роль различных классов иммуноглобулинов в противоинфекционной защите организма. Развитие способности организма к иммунному ответу. Филогенез, онтогенез антителообразования. 5.2. Иммунный фагоцитоз и киллерная функция клеток. Виды иммунных реакций клеточного типа: реакции на внутриклеточные паразиты, цитотоксические эффекты лимфоцитов, разрушение опухолевых клеток активированными Тлимфоцитами, гиперчувствительность замедленного типа, клеточные реакции при аутоиммунных процессах. Понятие об иммунологическом надзоре, роль в этом процессе цитотоксических лимфоцитов, К-клеток, NK-клеток и макрофагов. 5.3. Гиперчувствительность замедленного типа. 5.4. Гиперчувствительность немедленного типа. 5.5. Иммунологическая толерантность. Определение. Роль П. Медавара и М. Гашека в изучении толерантности. Способы индукции толерантности (доза, свойства и путь введения антигена – толерогена; возрастной фактор, длительность пребывания в организме). Значение лимфоцитов в механизмах толерантности. Специфичность иммунологической толерантности. Отмена естественной иммунологической толерантности. Проявление толерантности и ее практическое использование в медицине. Толерогены. 5.6. Иммунологическая память. Определение. Формы проявления. Механизм иммунологической памяти. Методы индукции иммунологической памяти. Т- и В-клетки памяти. Особенности развития иммунологической памяти при клеточном и гуморальном иммунном ответе. Роль иммунологической памяти в защите организма от инфекции, использование феномена иммунологической памяти в диагностике и профилактике инфекционных болезней. 8 6. Аллергические реакции Понятие об аллергии. Классификация аллергических реакций по Джелу и Кумбсу: тип I – обусловленные IgE анафилактические (атопические) реакции; тип II – цитотоксические реакции; тип III – иммунокомплексные реакции; тип IV – клеточные, опосредованные Тлимфоцитами реакции. Аллергены, применение в аллергодиагностике. 6.1. Аллергические реакции гуморального (немедленного) типа (типы I-III), V. История открытия. Понятие о сенсибилизации. Характеристика аллергенов. Механизм развития аллергических реакций гуморального типа. Признаки различия между гуморальными и клеточными аллергическими реакциями. Проявления (анафилактический шок, сывороточная болезнь, местная анафилаксия и др.). Диагностические тесты для выявления аллергии гуморального типа. Иммунологические основы профилактики и лечения. Десенсибилизация. 6.2. Аллергические реакции клеточного (замедленного) типа (тип IV). Понятие о клеточно-опосредованном иммунитете. Механизмы развития реакций, роль медиаторов. Формы проявления: инфекционная, контактная, трансплантационная. Противоопухолевая, аутоиммунная аллергия. Методы выявления. Кожно-аллергические пробы, их диагностическое значение. 7. Особенности антибактериального, противовирусного, противогрибкового, антипротозойного, противогельминтного, противоопухолевого, трансплантационного иммунитета. Иммунологические аспекты эмбриогенеза 8. Иммунный статус человека Понятие об иммунном статусе человека. Принципы формирования. Возрастная динамика. Факторы, влияющие на иммунный статус: климато-географические, социально-бытовые, медицинские. 9. Методы оценки иммунного статуса 9.1. Гуморальный иммунитет. Выявление антител. Методы определения иммунных комплексов. Методы количественного и качественного определения иммуноглобулинов. 9.2. Клеточный иммунитет. Определение субпопуляций Т- и В-лимфоцитов: кластерный анализ, Е- и ЕАСрозеткообразование; оценка митотической и киллерной активности лимфоцитов, определение активности NK-клеток. Методы выявления: реакция бласттрансформации лимфоцитов, продукция лимфокинов, реакция торможения миграции лейкоцитов. Кожные тесты как метод индикации клеточного иммунитета. 9.3. Иммунограммы. 10. Иммунопатология Первичные и вторичные иммунодефициты. Недостаточность гуморального, клеточного иммунитета, комбинированные нарушения иммунитета. Роль инфекций в развитии иммунодефицитов человека. Роль факторов окружающей среды в индукции первичных и вторичных иммунодефицитов. Аллергические болезни. Аутоиммунные болезни. Иммунопролиферативные заболевания. 9 11. Иммунопрофилактика, иммунотерапия и иммунокоррекция Развитие учения об иммунопрофилактике и иммунотерапии. Э. Дженнер, Л. Пастер, Э. Беринг, Г. Рамон и др. Принципы иммунопрофилактики, иммунотерапии, иммунокоррекции. Иммуностимулирующая, иммунозаместительная, иммуносупрессивная терапия. Иммунотерапевтические препараты; интерфероны, интерлейкины, левамизол, препараты тимуса, антиметаболиты, кортикостероиды, циклофосфан, антилимфоцитарная сыворотка, моноклональные антитела и др. 12. Иммунобиологические препараты Понятие об иммунобиологических препаратах, их основные группы: вакцины и другие препараты микробного происхождения, иммуноглобулины и иммунные сыворотки, иммуномодуляторы, диагностические препараты, адаптогены. Современная классификация вакцин: живые, неживые, цельноклеточные (цельновирионные), субклеточные (субвирионные), молекулярные, аттенуированные, дивергентные, рекомбинантные, синтетические. Ассоциированные и комбинированные вакцины. Адъюванты. Аутовакцины, вакцинотерапия. Принцип и механизм действия вакцин. Способы приготовления вакцин, оценка их эффективности и контроль качества. Препараты для серопрофилактики и серотерапии. Гомологичные и гетерологичные сыворотки. Антитоксические, антибактериальные, антивирусные иммунные сыворотки. Иммуноглобулины (нормальные и направленного действия). Принципы получения, очистки, титрования и контроля сывороток и иммуноглобулинов. Побочные действия серотерапии и их профилактика. Работы А. Безредки. 13. Иммунологические реакции в диагностике инфекционных и неинфекционных болезней Понятие о серологических реакциях. Характеристика реакций антиген – антитело: специфичность, двухфазный характер, обратимость, оптимальное соотношение ингредиентов, качественный и количественный характер, чувствительность и др. Механизм реакций. Практическое использование серологических реакций: идентификация антигена, диагностическое выявление антител. Основные компоненты серологических реакций. Диагностические иммунные сыворотки, диагностикумы. Моноклональные антитела, их применение. Феномены проявления и способы регистрации серологических реакций. Реакции, основанные на феномене агглютинации: ориентировочная реакция агглютинации развернутая реакция агглютинации, непрямая гемагглютинация, торможение гемагглютинации, коагглютинация, латексагглютинация, реакция Кумбса. Реакции, основанные на феномене преципитации: кольцепреципитация, флоккуляция, преципитация в геле (двойная встречная иммунодиффузия, радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез). Реакции с участием комплемента: реакции иммунного лизиса (бактериолиз, гемолиз); реакция связывания комплемента; реакция иммобилизации микроорганизмов; опсонофагоцитарная реакция; реакция нейтрализации (токсинов, вирусов, риккетсий). Реакции с использованием меченых антигенов и антител: иммунофлюоресценция; иммуноферментный метод (прямой, непрямой, твердофазный, конкурентный); радиоиммунный анализ (конкурентный, прямой, непрямой), иммуноблоттинг. Иммуноэлектронная микроскопия (с использованием антител, меченных ферритином, коллоидным золотом, изотопами). 10 5. ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ Преподавание дисциплины ведётся с применением следующих видов образовательных технологий: 1) проведение лекций с использованием мультимедийной техники; 2) проведение лабораторных занятий с использованием микроскопической техники; 3) проведение контрольных занятий в форме коллоквиумов; 4) индивидуальные консультации преподавателя при выполнении заданий на лабораторных занятиях и групповые консультации перед тестированием по каждому разделу дисциплины; 5) самостоятельная работа студентов с наглядными материалами; 6) участие студентов в научно-исследовательских работах (работа кружка, участие в конференциях, конкурсах и т.д.). 6. ОЦЕНОЧНЫЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ТЕКУЩЕГО КОНТРОЛЯ УСПЕВАЕМОСТИ, ПРОМЕЖУТОЧНОЙ АТТЕСТАЦИИ ПО ИТОГАМ ОСВОЕНИЯ ДИСЦИПЛИНЫ И УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ СТУДЕНТОВ Контроль освоения дисциплины проводится по методике и графику рейтинговой оценки знаний студентов (инструкция И.151.1.02 – 2009), утверждённым заведующим кафедрой. Текущий контроль успеваемости студентов проводится преподавателем, ведущим занятие, в форме контроля своевременности и правильности выполнения задания студентом на каждом практическом занятии по дисциплине. Рубежная аттестация студентов проводится по окончании изучения очередного раздела дисциплины в форме компьютерного тестирования. 1. Контрольные вопросы для итоговых занятий (Приложение 1). 2. Тестовые задания (Митрофанова, Н. Н., Мельников В. Л., Правосудова Н. А. Медицинская микробиология: сборник тестовых заданий / Н. Н. Митрофанова, – Пенза : Информационно-издательский центр ПензГУ, 2009. – 132 с). 3. Перечень практических навыков (Приложение 2). 7. УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ И ИНФОРМАЦИОННОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ (МОДУЛЯ) а) Основная литература: 1. Воробьёв А.А., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова A.M. Микробиология (Учебник).- М: Медицина, 1998. 2. Коротяев А.И., Бабичев С.А.: Медицинская микробиология, иммунология, вирусология: Учебник для мед. вузов – 2-е издание, испр. – СПб.: СпецЛит, 2000. – 591 с.: ил. 3. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии, иммунологии / под ред. В.В. Теца – изд. 2-е, перераб. и доп. – М.: Медицина, 2002. – 352 с.: ил. б) Дополнительная литература 1. Микробиология с вирусологией и иммунологией / Под ред.Л.Б.Борисова, А.М.Смирновой.-М., 1994 2. Микробиология и иммунология / Под ред.А.А.Воробьева.- М., 1999 3. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии / Под ред. Л.Б.Борисова.М., 1984. 11 4. 5. Воробьев А.А. Основы медицинской биотехнологии.- М.,1990. Внутрибольничные инфекции / Под ред.В.П.Венцела.- М.,1990. 6. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология.- М.: Издво ВНИРО, 1995. 7. Барбер Н.М. Иммунобиология для практических врачей.- М.: «Медицина», 1999. 8. Клиническая иммунология / Под ред. А.В.Караулова.- М.: Мед. инф. агентство, 1999. 9. Галактионов В.Г. Иммунология.- М.: Изд-во МГУ, 1998. 10. Ярилин А.А. Основы иммунологии.- М.: Медицина, 1999. 11. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача.- СПб.: Гиппократ, 1992. 12. Медуницин Н.В. Вакцинология.- М.: Медицина, 1998. 13. Краткий терминологический словарь микробиолога / Под ред. Ю.А.Овчинникова. - М.: Изд-во АН СССР, 1989. 14. Елинов Н.П. Основы биотехнологии.- СПб.: Изд-во «Наука», 1995. 15. Bergey S. Manual of Determinativ Bacteriology, 9-th edition: Williams and Wilkins, 1994. в) программное обеспечение и Интернет-ресурсы 1. Методические указания, вопросы к семинарам, вопросы к экзаменационным билетам, практикум по иммунологии и др. необходимые пособия имеются на кафедре в электронном варианте. 2. iemrams.spb.ru › russian/immunru/journal.htm 3. immun.ru 4. immunologia.ru 5. collegemicrob.narod.ru › immunology/index.html 6. medportal.ru 8. МАТЕРИАЛЬНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ (МОДУЛЯ) Аудитория, оснащённая презентационной техникой (мультимедийный проектор, экран, компьютер). Комплект электронных презентаций/слайдов лекций. Комплект тестов по разделам дисциплины и дисциплине в целом. Лабораторные стенды таблицы и макеты; измерительные приборы, микроскопы, препаровальные инструменты, реактивы, экспериментальные животные. Программа составлена в соответствии с требованиями ФГОС ВПО с учетом рекомендаций и ПрООП ВПО по направлению и профилю подготовки 31.05.01 – Лечебное дело Авторы Зав. кафедрой МЭиИБ к.м.н. В.Л. Мельников Ст. преподаватель Н.Н. Митрофанова Рецензент Зав. кафедрой биологии ПГМИ, академик РАЕ, д.м.н., профессор М.Ю. Ледванов 12 Председатель методической комиссии д-р мед. наук, профессор О.В. Калмин Программа одобрена на заседании кафедры микробиологии, эпидемиологии, инфекционных болезней от , протокол № Приложение 1 ВОПРОСЫ К ИТОГОВОМУ ЗАНЯТИЮ по дисциплине «Иммунология» для студентов 2 курса специальности «Лечебное дело» ПО ТЕМАМ: Инфекция Иммунитет 1. Понятие об инфекции. Условия возникновения инфекционного процесса. Инфекционная болезнь. Стадии развития. Типы инфекционных заболеваний и их отличительные черты. 2. Роль внешней среды в процессах инфекции и иммунитета. Роль состояния макроорганизма в возникновении инфекции и развитии иммунитета. Роль условнопатогенных микроорганизмов в возникновении внутрибольничных инфекций. 3. Патогенность и вирулентность бактерий, единицы измерения. Патогенные, условнопатогенные и непатогенные микроорганизмы. 4. Морфологические и биохимические аспекты вирулентности. Токсины бактерий, их природа и свойства. Анатоксины. Получение, титрование, применение. 5. Принципы специфической профилактики и лечения инфекционных заболеваний. Вакцины, определение, классификация, применение. Вакцинопрофилактика и вакцинотерапия. 6. Неспецифические факторы зашиты организма. Фагоцитоз. Показатели фагоцитоза. 7. Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в иммунитете. 8. Интерфероны, их характеристика. Способы получения и применение. 9. Антигены. Определение. Понятие о полноценных и неполноценных антигенах. Требования, предъявляемые к антигенам. Понятие об антигенных свойствах микроорганизмов. Антигенная структура бактерий. 10. Серотипирование. Получение, титрование и применение агглютинирующих сывороток. Получение и применение монорецепторных сывороток. 11. Понятие об иммунитете. Общебиологическое значение иммунитета. Виды иммунитета. Особенности иммунологической реактивности детского возраста. 13 12. Иммуноглобулины, структура и функция. Механизм взаимодействия антитела и антигена. 13. Специфичность антител. Их классификация по методу специфичности. Моноклональные антитела. Полные и неполные антитела. 14. Структура и функция иммунной системы. 15. Кооперация иммунокомпетентных клеток в иммунном ответе. Иммунный ответ, его типы. Иммунокомпетентные клетки (Т - и В - лимфоциты, макрофаги), их кооперация в иммунном ответе. 16. Антителогенез. Первичный и вторичный иммунный ответ. Клонально-селекционная теория Бернета. 17. Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки. Применение. 18. Реакция преципитации. Механизм, компоненты. Способы постановки. Применение. 19. Нагрузочные серологические реакции. Реакция непрямой гемагглютинации. Компоненты. Применение. ВОПРОСЫ К ИТОГОВОМУ ЗАНЯТИЮ по дисциплине «Иммунология» для студентов 2 курса специальности «Лечебное дело» ПО ТЕМАМ: Клиническая иммунология Иммунопрофилактика 1. Серодиагностика инфекционных заболеваний. Принципы и критерии. 2. РСК. Реакции иммунного лизиса (гемолиз, бактериолиз). 3. РИФ. Реакция иммунофлюоресценции. Механизм, компоненты, применение. 4. ИФА. Иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг, механизм, компоненты, применение. 5. Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Механизм. Способы постановки, применение. 6. Антитоксический иммунитет, активный и пассивный. Антимикробные и антитоксические сыворотки. Получение, титрование, применение. 7. Понятие об аллергии. Типы аллергических реакций, Аллергены. 8. Гиперчувствительность немедленного типа. Механизм реакции. Атопия. Анафилаксия. 9. Трансплантационный иммунитет. Антигены гистосовместимости и их значение. Методы подавления трансплантационного иммунитета. 10. Серопрофилактика, серотерапия. Осложнения, их предупреждения. Анафилактический шок. Сывороточная болезнь. 11. Т-зависимая гиперчувствительность замедленного типа. Значение в патогенезе и диагностике инфекционных заболеваний. Аллергические пробы, их сущность, применение. 12. Иммунный статус человека и факторы, влияющие на него. Оценка иммунного статуса. Первичные и вторичные иммунодефициты. 13. Особенности противовирусного иммунитета. Вирусная гемагглютинация и её торможение, Практическое применение. Методические подходы к серодиагностике вирусных инфекций. 14. Методы иммунизации животных. Получение антисывороток. 15. Культура клеток in vivo и in vitro. 14 16. Экспериментальные модели иммунодефицитных состояний. Приложение 2 Список практических навыков 1. Ориентировочная реакция агглютинации Ориентировочную реакцию агглютинации ставят на предметном стекле.Наносят пастеровской пипеткой каплю физиологического раствора, затем в ней тщательно размешивают небольшое количество культуры до получения гомогенной взвеси бактерий. Рядом с первой каплей наносят каплю сыворотки в разведении 1 : 10, 1 : 20, и смешивают обе капли.Через несколько минут в случае положительного результата наблюдается образование агглютината , которое еще ускорится, если слегка покачивать стекло. 2. Реакция развернутой агглютинации с целью серотипирования E. сoli применяется для подтверждения результатов ориентировочной реакции агглютинации с моновалентными сыворотками. Сначала готовят основное разведение взвеси микроорганизмов (1:50), из которого делают серию разведений путем последовательного переноса 0,5 мл из предыдущей пробирки в следующую пробирку ряда (0,5 + 0,5 физраствора). Из последней пробирки 0,5 мл разведенной взвеси удаляют для сохранения одинакового объема. В контрольную пробирку (контроль антигена) вносят 1 мл изотонического раствора хлорида натрия. В каждую пробирку с разведениями и в контрольную пробирку вносят пастеровской пипеткой по 2 капли моновалентной сыворотки. Пробирки встряхивают и помещают в термостат при 37°С на 2 ч, затем сутки выдерживают при комнатной температуре. Учет реакции развернутой агглютинации производят, оценивая последовательно каждую пробирку, начиная с контрольных, при осторожном встряхивании. В контрольных пробирках агглютинации не должно быть. Интенсивность реакции агглютинации отмечают следующими знаками: "++++" — полная агглютинация (хлопья агтлютината в абсолютной прозрачной жидкости), "+++" — неполная агглютинация (хлопья в слабоопалесцирующей жидкости), "++" — частичная агглютинация (хлопья четко различимы, жидкость слегка 15 мутная), "+" — слабая , сомнительная агглютинация (жидкость очень мутная, хлопья в ней плохо различимы), "—" — отсутствие агглютинации (жидкость равномерно мутная). 3. Титрованне агглютинирующей сыворотки Тип реакции: реакция агглютинации. Исследуемый материал: сыворотка животного, гипериммунизированного бактериальной взвесью. Диагоностический препарат: взвесь убитых бактерий, применявшихся для гипериммунизации. Принцип метода: к серийным разведениям агглютинирующей сыворотки добавляют равные количества взвеси убитых бактерий, применявшихся для получения этой сыворотки. Положительный результат реакции: образование хлопьев, просветление жидкости. Отрицательный результат: равномерная муть. Применение: для определения титра агглютинирующей сыворотки. Титр агглютинирующей сыворотки - наибольшее разведение сыворотки, в которой еще наблюдается агглютинация. В данном случае титр агглютинирующей сыворотки равен ... 4. Реакция агглютинации по Видалю с целью серодиагностики брюшного тифа Для постановки реакции берут: 1) сыворотку исследуемого больного для определения в ней антител; 2) О - и Н-диагноста кумы бактерий брюшного тифа, паратифа А и паратифа В; 3) физиологический раствор. Кровь для получения сыворотки берут в количестве—15—20 капель путем укола мякоти пальца или 2 —3 мл при помощи венепункции. Дают крови свернуться в термостате в течение 30—60 минут, затем простерилизованной петлей обводят сгусток, отделяя его от стенки пробирки, и дают отстояться сыворотке на холоду до образования над сгустком прозрачного слоя. Сыворотку помещают пипеткой в отдельную пробирку. Первое разведение (1:50) делают при помощи пипетки—0,1 мл сыворотки + 4,9 мл физиологического раствора. Дальнейшие разведения (1:100— 1:200 — 1 : 400—1:800) готовят по обычной схеме. Берут 6 рядов пробирок по 6 пробирок в каждом. По 1 мл сыворотки разведения 1: 100 наливают в первую пробирку каждого ряда, 1: 200 — во вторую, 1 : 400 — в третью и т. д.; в шестую, контрольную, пробирку наливают 1 мл физиологического раствора. Во все пробирки первого ряда добавляют по 1—2 капли брюшнотифозного Ндиагностикума; в пробирки второго ряда — брюшнотифозный 0-диагностикум; в пробирки третьего я четвертого ряда добавляют А-паратифозный, Н - и 0-диагностикумы, а в 5-й и 6й ряд— В-паратифозный H - и 0-диагностикум. Пробирки ставят в термостат на 2 часа, отмечают результат реакции, затем оставляют при комнатной температуре на сутки; после этого срока дают заключение об окончательном результате реакции. Возбудителем заболевания считается тот микроб, который агглютинируется сывороткой больного. Реакция считается положителыной, если агглютинация произошла хотя бы в первой пробирке с разведением 1: 100; обычно она наступает в больших разведениях. Если происходит групповая агглютинация с двумя или с тремя антигенами, то за возбудителя болезни принимается тот микроб, с которым произошла агглютинация в наиболее высоком разведении сыворотки. 5. РСК с целью серодиагностики сыпного тифа Тип реакции - реакция связывания комплемента. 16 Исследуемый материал - парные сыворотки крови больного (сыворотки одного и того же больного, взятые у него с временным промежутком не менее 5-7 дней). Диагностический препарат - сыпнотифозный антиген для РСК. Дополнительные ингредиенты реакции: комплемент в рабочей дозе; гемолитическая сыворотка в рабочей дозе; эритроциты барана (3 % взвесь). Положительная реакция - задержка гемолиза; отрицательная - гемолиз. Диагностическим критерием является нарастание титра антител не менее, чем в 4 раза (во второй сыворотке по сравнению с первой). Обычно реакцию применяют для ретроспективной диагностике. В данном случае... (результат и вывод). 6. Реакции Вассермана (серодиагностика сифилиса) Тип реакции: РСК. Исследуемый материал: сыворотка обследуемого. Диагностические препараты: 1. Неспецифический кардиолипиновый АГ (антиген) для реакции Вассермана - спиртовая липидная вытяжка из миокарда быка, обогащенная холестерином. 2. Специфический ультраозвученный трепонемный АГ – содержит АГ культуральных трепонем, разрушенных ультразвуком. Дополнительные ингредиенты реакции: комплемент в рабочей дозе; гемолитическая сыворотка в рабочей дозе; эритроциты барана (3 % взвесь). Положительная реакция - задержка гемолиза; отрицательная - гемолиз. Качественный метод - сыворотку обследуемого вносят в 2 лунки, добавляют соответственно АГ 1 и АГ 2, а затем в обе лунки - дополнительные ингредиенты реакции. Применение: отбор лиц для постановки количественной реакции Вассермана. В данном случае обследованы пациенты ... (результат, вывод). Количественный метод - диагностика сифилиса, контроль эффективности терапии. Готовят разведения положительной сыворотки (по качественной реакции). К каждому разведению добавляют трепонемный ультраозвученный АГ (АГ2) и дополнительные ингредиенты реакции. Положительный результат - ЗГ (задержка гемолиза), отрицательный Г (гемолиз). Результат интерпретируют, основываясь на количестве антител. В данном случае...(результат и вывод). 7. РСК с целью раздельного определения IgM и IgG Тип реакции - реакция связывания комплемента. Исследуемый материал - сыворотка крови больного (нативная и обработанная меркаптоэтанолом). Диагностический препарат - известный антиген для РСК. Дополнительные ингредиенты реакции: комплемент в рабочей дозе; гемолитическая сыворотка в рабочей дозе; эритроциты барана (3 % взвесь). Положительная реакция - задержка гемолиза; отрицательная - гемолиз. Принцип метода: при обработке сыворотки меркаптоэтанолом разрушаются IgM. Следовательно, с обработаной сывороткой реакция идет только за счет IgG. Постановка реакции: готовят разведения нативной и обработанной сывороток, добавляют диагностический препарат и дополнительные ингредиенты реакции. Трактовка результатов: если с обработанной сывороткой реакция идет практически таком же титре, как с необработанной, значит она содержит преимущественно IgG Если в 17 обработанной сыворотке титр антител резко снизился значит она содержит преимущественно IgM. В данном случае...(результат и вывод). по сравнению с необработанной, 8. РНГА с Vi-эритроцитарным диагиостикумом Тип реакции - реакция непрямой гемагглютинации. Исследуемый материал - сыворотка крови обследуемого. Диагностический препарат - Vi-эритроцитарный диагностикум (взвесь в физиологическом растворе эритроцитов барана с нагруженными на них Vi - антигенами S.typhi ). Принцип реакции: к разведениям сыворотки обследуемого добавляют Vi-эритроцитарный диагностикум. Положительный результат – гемагглютинат ("зонтик"); отрицательный результат - плотный осадок эритроцитов на дне лунки ("пуговка"). Диагностический тигр реакции 1/ 40. Применение: отбор лиц, имеющих титр антител к Vi – антигенам S.typhi выше диагностического. Трактовка результатов: лица с положительной реакцией в титре выше, чем 1/40 считаются подозрительными на бактерионосительство S.typhi и подлежат бактериологическому обследованию на наличие S.typhi в кале, моче и желчи. В данном случае...(результат и вывод). 9. Реакция флоккуляции Тип реакции: частный случай реакции преципитации (нейтрализации). Исследуемый материал: антитоксическая сыворотка. Диагностический препарат: токсин или анатоксин в строго определенном количестве. Принцип метода: к серийным разведениям антитоксической сыворотки добавляют одинаковое количество антигенных единиц токсина или анатоксина. Положительный результат - образование хлопьев преципитата (флоккулята); отрицательный результат - прозрачная жидкость. Применение: определение активности антитоксической сыворотки (количества ME международных единиц в 1 мл сыворотки). Трактовка результатов: первичная (инициальная) флоккуляция наступает в пробирке, где АГ (антиген) и АТ (антитело), находятся в эквивалентных количествах. Зная количества ингредиентов в пробирке, где произошла инициальная флоккуляция, можно рассчитать активности антитоксической сыворотки. Например, инициальная флоккуляция наступила в пробирке, где находится 0,02 мл сыворотки и 4 АЕ (антигенных единиц) токсина или анатоксина. Составляем пропорцию: 0,02 мл сыворотки эквивалентно 4 АЕ токсина или анатоксина. Одна АЕ - это такое количество токсина или анатоксина, которое связывается одной ME антитоксической сыворотки, следовательно, 0,02 мл данной сыворотки содержит 4 ME. Титр антитоксической сыворотки - это количество ME в 1 мл этой сыворотки. В данном случае, составив пропорцию, можно определить титр: 0,02 мл - 4 ME 1 мл - ХМЕ Х = (1x4): 0,02 = 200 ME В данном случае...(результат и расчет). 10. Титрование комплемента 18 Тип реакции - реакция иммунного гемолиза. Исследуемый материал - свежая сыворотка крови. Дополнительные ингредиенты реакции: гемолитическая система (гемолитическая сыворотка в рабочей дозе и 3% взвесь эритроцитов барана). Положительная реакция - гемолиз; отрицательная - задержка гемолиза. Титр комплемента - наибольшее разведение комплемента, в котором наблюдается гемолиз. Применение: для определения титра комплемента. Если речь идет о титровании комплемента перед постановкой РСК, то титр определяют для дальнейшего расчета рабочей дозы. Используется разведение на 25% концентрированнее, чем титр. В данном случае...(результат). 11. Титрование гемолитической сыворотки Тип реакции - реакция иммунного гемолиза. Исследуемый материал сыворотка кролика, гипериммунизированного эритроцитами барана. Дополнительные ингредиенты реакции: комплемент в рабочей дозе и 3% взвесь эритроцитов барана. Положительная реакция - гемолиз; отрицательная - задержка гемолиза. Титр гемолитической сыворотки - это то ее наибольшее разведение, в котором еще наблюдается гемолиз. Применение: для определения рабочей дозы гемолитической сыворотки перед постановкой РСК. Рабочая доза гемолитической сыворотки - это разведение, которое меньше титра в 3 - 4 раза. В данном случае... (результат). 12. РТГА с целью идентификации вируса гриппа Тип реакции - реакция нейтрализации вируса. Исследуемый материал - вируссодержащая жидкость в рабочей дозе (4 гемагглютинируюших единицы). Диагностические препараты – противовирусные сыворотки, содержащие антитела к вирусам гриппа типа A (H1N1, Н2N2, H3N2) и к вирусу гриппа типа В. Дополнительные ингредиенты реакции-эритроциты курицы. Принцип метода: к серийным разведениям диагностических сывороток добавляют идентифицируемый вирус в рабочей дозе. Положительный результат реакции - отсутствие гемагглютинации ("пуговица"); отрицательный результат реакции - вирусная гемагглютинация ("зонтик"). Интерпретация результата: вирус имеет серовар, соответствующий сыворотке, которая нейтрализует его в высоком титре. В данном случае...(результат). 19