α-L-Фукосидаза(АФУ)

α-L-Фукосидаза(АФУ)
Процедура анализа
Ферментативный колориметрический метод; один
реагент
Назначение
Диагностический
реагент
α-L-Фукосидаза(АФУ)
используется для количественного определения в
лабораторных условиях АФУ в сыворотке крови человека
с использованием фотометрических систем.
Обозначение
AF4541
AFU Reagent
AF6541
AFU Reagent
AF7541
AFU Reagent
AF9541
AFU Reagent
Содержание
3×400mL
2×80mL
2×60mL
2×80mL
Клиническое значение
АФУ является лизосомальным ферментом, участвующим
в
деградации
различных
групп
естсественных
фукоглюкоконюгатов. Активность сыворотки АФУ
считается
полезным
знаком
гепатоцеллюлярной
карциномы (ГЦК). Увеличение АФУ в сыворотке крови
является первым признаки ГЦК. Хотя измерения
сыворотки фетопротеина (АФП) является обычной
практикой для раннего выявления ГЦК, один АФП
анализ страдает от его низкой специфичности и
чувствительности, связанными с тем, что не все ГЦК
выделяют АФП. Целых 40% пациентов с ранними ГЦК и
15-20% пациентов с прогрессивным ГЦК, их уровни АФП
могут быть нормальными. Недавние исследования
показали, что измерения и АФП и АФУ могут
значительно повысить специфичность и чувствительность
обнаружения для ГЦК. По имеющимся данным АФУ
может быть более чувствительным показателем особенно
для обнаружения мелкоклеточных ГЦК.
Принцип
Анализ АФУ основан на ферментативном расщеплении
синтетических
субстратов
2-хлор-4-нитрофенил-α-L-фукопиранозид к α-L-фукозиду
и 2-хлор-4-нитрофенолу, которые можно измерить с
помощью измерения поглощения при 405 нм
кинетическим методом. Одна единица АФУ определяется
как количество АФУ, которое расщепляет один мкмоль
2-хлор-4-нитрофенил-α-L-фукозида за мин при 37 ℃.
Компоненты комплекта
Состав
Концентрация растворов
Буфер
100 мМ
2-хлор-4-нитрофенил-α-L1ммол/Л
фукопиранозид
Хранение и стабильность
Невскрытые комплекты(флаконы): до истечения срока
годности при 2-8 ℃..
Стабильность вскрытых реагентов при условии
нахождения на «борту» автоматического биохимического
анализатора 1 недель.
Подготовка препарата
Сыворотка
Стабильность: 1 неделя при 4℃
Действительно с 2010.05.01
версия: 01
Бланк
Образец
Реагент
225μl
225μl
Дистиллированная вода 25μl
Образец
25μl
Смесь инкубируется в течение 3 минут при
37 ℃.Прочит
а
т
ьк
оэ
ффицие
нтпог
л
още
ниявт
е
ч
е
ние3
минут и вычислить среднюю скорость изменения
коэффициента поглащения ΔA/ мин.
Основная длина волны
405нм
Суб длина волны
505нм
Метод
показатель
Фактор(Ф*)
1250
Расчеты
АФУ(U/L) = ΔA/мин × Ф*.
Tv × 1000
Фактор =
ε× Sv × L
ε:
коэффициент экстинкции ммол
Tv: Общий объем реакционной смеси (мл)
Sv: Объем образца (мЛ)
L:
оптический путь (1,0 см)
Референтный интервал
0-40 Ед / Л
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория устанавливала
свой образцовый интервал .
Контроль качества
Для ежедневного контроля качества рекомендуются
Лидмэн АФУ контроль.
Контроль интервалов и ограничений должен быть
адаптирован к индивидуальным требованиям каждой
лаборатории. Полученные значения должны находиться
в определенных пределах. Каждая лаборатория должна
выработать меры по устранению, которые должны быть
приняты, в случае если значения выходят за пределы.
Калибровка
Бланк калибровки рекомендуется:
- Меняется номер Лота реагентов.
- Контрольные значения изменились или находятся вне
диапазона и новая пробирка контроля не устраняет
проблему.
Метрологические характеристики
Линейность
Метод линейный до 300 Ед / Л.
Образцы выше этой концентрации необходимо разбавить
1 +1(один к одному) с 0,9% раствором хлорида натрия ,
результат умножается на 2.
Аналитическая чувствительность (нижний предел
обнаружения)
Предел
обнаружения:
1Ед/Л.
(АНАЛИЗАТОРЫ
ХИТАЧИ)
CE-JS-003-AFU-01
стр 1 из 2
α-L-Фукосидаза(АФУ)
Ферментативный колориметрический метод; один
реагент
Точность (при 37℃ )
Внутрисерийная
n= 20
Уровень 1 Уровень 2
Значение (U/L)
38.71
46.60
SD (U/L)
0.74
0.70
CV (%)
1.91
1.49
Межсерийная
n= 20
Уровень 1 Уровень 2
Значение (U/L)
38.56
45.34
SD (U/L)
0.96
1.04
CV (%)
2.48
2.29
Взаимное влияние
Влиянием следующих веществ можно пренебречь, если
концентрации следующих веществ находится на уровне
или ниже данных значений.
Вещества
Прямой билирубин
Общий билирубин
Гемоглобин
Интралипид
BC
Концентрации
8 мг/дл
8 мг/дл
100 мг/дл
0.40 %
50 мг/дл
Автоматизация
Специальные приспособления для автоматических
анализаторов могут быть сделаны по запросу
Данные
по
безопасности
материалов
профессиональных пользователей по запросу.
для
Ссылки
1. Зиелке K. и др. Фукозиды: Диагноз с помощью
анализа сыворотки α-L-фукозидазы. Дж.. Лаб. Клин.
Мед. 79: 164 (1972.)
2. Джардина М.Г. и др. Сыворотка α-L-фукозидаза. A
useful marker in the diagnosis of hepatocellular
carcinoma, 70:1044 (1992).
Полезный знак в
диагностике гепатоцеллюлярной карциномы, 70:1044
(1992).
3. Айдэ Д. и др. Значение активности сыворотки
α-L-фукозидаза в диагностике колоректального рака.
Онкология, 59:310 (2000).
IVD
Группа компаний «LEADMAN»
Адрес: Южная дорога Хонда, 5, Зона
технико-экономического развития, Пекин, Китай,
100176
Тел. 0086-10-67855500
Факс：0086-10-84923540
Меры предосторожности и предупреждения
Общие меры предосторожности
Использовать только для диагностики in vitro.
Диагноз должен быть поставлен только после принятия
во внимание клинических симптомов и результатов
других испытаний .
Выполнение
обычных
мер
предосторожности,
необходимых для обработки всех лабораторных
реагентов.
Удаление всех отходов должно осуществляться в
соответствии с местными правилами.
Меры предосторожности для измерения
Образцы должны рассматриваться как потенциально
инфекционные (ВИЧ, вирус гепатита В, вирус гепатита
С, и т.д.) и необходимо обращаться с ними с
соответствующей осторожностью.
Реагенты с другими серийными номерами не должны
быть заменены или смешаны.
Для диагностических целей, результаты всегда должны
быть оценены в сочетании с историей болезни пациента,
клиническими обследованиями и другими выводами.
Действительно с 2010.05.01
версия: 01
CE-JS-003-AFU-01
стр 2
из 2