R-6039 ИХТ Tetanus Тест для выявления антитоксиновых

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: [email protected]
TETANUS СТИК
Диагностический экспресс-тест для качественного определения антител против столбнячного токсина
(Clostridium tetani) в сыворотке и цельной крови человека.
(TETANUS STICK ONE STEP ASSAY)
Кат. № R-6039 (20 Определений)
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
НАЗНАЧЕНИЕ
TETANUS СТИК- иммунохроматографическая экспресс тестсистема для качественного одноэтапного выявления антител
против столбнячного (Clostridium tetani) токсина в сыворотке и
цельной крови человека с целью с целью противостолбнячной
профилактики для пациентов с высоким риском заражения
(глубокие раны).
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Clostridium tetani - грамположительная спорообразующая
облигантно анаэробная бактерия рода Clostridium, возбудитель
столбняка. При проникновении в организм через рану, они
начинают размножаться и вырабатывать тетаноспазмин,
обладающий нейротоксическими свойствами и тетанолизин,
обладающий
гемолитическими
свойствами.Тетаноспазмин
действует на периферическую нервную систему и вызывает
тонические
сокращения поперечнополосатой мускулатуры.
Тетанолизин вызывает лизис эритроцитов. Антитела к
столбнячному токсину вырабатываются в организме человека при
инъекции химически инактивированного столбнячного токсина
(tetanus toxoid). Иммунизация является лучшим способом для
предотвращения инфекции обусловленной C. tetani у детей и
взрослых. Кроме того, инъекции специфических и очищенных
антител IgG против столбнячного токсина используются для
противодействия влиянию токсина во время острой инфекции. В
острых ситациях желательно знать уровень антител к
столбнячному токсину у пациента, для правильной оценки его
иммунного статуса, с тем чтобы определить необходимость
дополнительной вакцинации, которая обеспечилa бы иммунитет к
столбнячному токсину.
ПРИНЦИП
TETANUS СТИК- иммунохроматографическая экспресс тестсистема предназначенная для качественного выявления антител
против столбнячного токсина в сыворотке и цельной крови
человека. TETANUS СТИК представляет собой помещенную в
пластиковый футляр (кассету) полоску нитроцеллюлозной
мембраны с фиксированным на ней в области добавления пробы
столбнячным токсином (tetanus toxoid), конъюгированным с
окрашенными частичками латекса. При попадании образца
человеческой крови или сыворотки на мембрану, антитела к
столбнячному токсину присутствующие в пробе, связываются со
столбнячным токсином (tetanus toxoid) конъюгированным с
частичками латекса. Образованный комплекс антителостолбнячный токсин (tetanus toxoid)-частички латекса мигрирует
вдоль мембраны и связывается с очищенным столбнячным
токсином - tetanus toxoid - (непатогенной производной токсина
столбняка), зафиксированным на мембране в зоне "Т" тестового
окошка, формируя серую цветную линию, что оценивается как
положительный результат. Непрореагировавший конъюгат
мигрирует далее по мембране к контрольной зоне формируя
сиреневую линию в контрольной зоне "С" тестового окошка.
Kонтрольная линия появляется всегда. Наличие контрольной
линии
подтверждает
корректность
результатов
теста
(правильный объем пробы, необходимый темп миграции,
требуемое качество реагентов).
КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
В состав набора входит:
20 тестовых устройств (кассет) TETANUS СТИК упакованных в
индивидуальные алюминиевые пакетики вместе с дессикантом;
20 одноразовых пластиковых пипеток;
1 пластиковая бутылочка-капельница содержащих 3 мл буфера
для разведения пробы;
1 инструкция к применению.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. TETANUS СТИК предназначен только для использования in
vitro в целях лабораторной диагностики.
2. Не допускается использование набора и его компонентов после
истечения срока годности.
3. Перед исследованием довести образец и компоненты набора до
комнатной температуры.
4. Не использовать тест из поврежденной упаковки.
5. При проведении исследования необходимо следовать правилам
работы
в
лаборатории,
в
частности,
использовать
специализированную одежду, одноразовые перчатки, не
принимать пищу и не курить на рабочем месте.
6. Исследование образцов человеческой сыворотки и цельной
крови регламентируется правилами работы с инфекционными
агентами.
7. После проведения исследования устройство TETANUS СТИК
должно быть утилизировано в соответствующий контейнер для
отходов.
8. Необходимо использовать TETANUS СТИК не позднее 2 ч
после вскрытия упаковки.
ХРАНЕНИЕ
TETANUS СТИК необходимо хранить при температуре 2-30оС.
Не замораживать! Срок годности набора указан на упаковке. До
использования тестовое устройство TETANUS СТИК должно
находиться в неповрежденной индивидуальной упаковке.
ОТБОР, ХРАНЕНИЕ И ПОДГОТОВКА ПРОБ.
1. В качестве образца может служить человеческая сыворотка или
цельная кровь. Образец крови должен быть собран согласно
правилам асептики, не допуская гемолиза пробы.
2. Цельную кровь исследуют не позднее 4 ч после забора. Если
немедленное исследование невозможно, материал хранят при
температуре 2-8°С в течение 72 ч.
3. Допускается замораживание и последующее хранение образцов
сыворотки в течение 6 месяцев при температуре -20° C. Перед
исследованием образец сыворотки полностью размораживают,
осторожно перемешивают и доводят до комнатной
температуры. Необходимо избегать повторного замораживания
и оттаивания пробы.
ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА
1. Перед исследованием довести образец и компоненты набора
до комнатной температуры.
2. Замороженные при 2-8оС образцы должны быть доведены до
комнатной температуры за 30 мин до выполнения теста.
3. Извлечь пластиковую кассету из индивидуальной упаковки и
промаркировать
инициалами или идентификационным
номером обследуемого.
Забор и подготовка образца к тестированию.
A. Капиллярная цельная кровь.
1. Протереть кожу пальца стерильной ватой, смоченной
спиртом или эфиром. Проколоть кожу пальца
одноразовым пером.
2. Надавливая на палец собрать пластиковой пипеткой
большую каплю крови.
3. Удерживая пипетку вертикально позволить ровно одной
капле цельной крови (приблизительно 20 мкл) упасть в
центр отверстия для добавления пробы "S" кассеты
TETANUS СТИК.
B. Сыворотка или венозная цельная кровь (EDTA)
1. Собрать образец сыворотки в сухую пробирку или
цельную кровь в пробирку содержащую EDTA.
2. Удерживая пипетку вертикально позволить ровно одной
капле цельной крови (приблизительно 20 мкл) или
сыворотки (приблизительно 10 мкл) упасть в центр
отверстия для добавления пробы "S" кассеты TETANUS
СТИК.
3. После полного впитывания образца в мембрану,
добавить 3 капли буфера для разведения пробы в центр
отверстия для добавления пробы "S" кассеты TETANUS
СТИК из бутылочки-капельницы прилагаемой к набору
TETANUS СТИК.
4. Включить таймер. Читать результаты TETANUS СТИК
в течение 5 минут.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Положительный
результат:
oдна
серая линия появляется в тестовой зоне
"Т" и вторая сиреневая линия
появляется в контрольной зоне "С"
тестового окошка кассеты. Образец
считается
положительным
при
содержании в нем уровня антител выше
0.1 UI/ml.
Отрицательный
результат:
oдна
сиреневая
линия
появляется
в
контрольной зоне "С" тестового окошка
кассеты.
Образец
считается
отрицательным при содержании в нем
уровня антител ниже 0.1 UI/ml.
Недействительный (сомнительный)
результат:
отсутствие
сиреневой
контрольной линии в зоне "С" вне
зависимости от наличия или отсутствия
серой линии в тестовой зоне "Т".
Неправильный
объем
пробы,
несоблюдение
процедуры
тестирования или качество реагентов – наиболее частые причины
отсутствия контрольной линии. Проанализируйте процедуру
тестирования и повторите ее с использованием новой тест-кассеты.
Если проблема остается, следует прекратить тестирование и
связаться с местным дистрибьютором.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
TETANUS СТИК предусматривает
внутренний контроль за
правильностью проведения процедуры. Сиреневая линия
появляющаяся в контрольной зоне "C" тестового окошка кассеты,
указывает на правильность проведения процедуры теста.
Результаты теста не учитывают в случае если неясный фон мешает
интерпретировать результаты..
ОГРАНИЧЕНИЯ
TETANUS СТИК дает
полу-количественный результат
содержания IgG антител против столбнячного токсина в
сыворотке и цельной крови человека. Отсутствие серой
положительной линии в тестовой зоне "Т" по истечении 5 минут
указывает на титр антител ниже "защитного" титра.
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
WHO рассматривает концентрацию антител 0.1 IU/ml как
"защитный" титр. Отсуствие положительной линии в тестовой
зоне "Т" свидетельствует об отсутствии защищенности
организма, что характерно для невакцинированных или давно
вакцинированных пациентов.
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА
Порог обнаружения.
Для определения порога обнаружения метода TETANUS СТИК
использовались образцы крови в которых титры IgG против
столбнячного токсина определялись при помощи коммерческого
иммуноферментного анализа Virotech ELISA tetanus (Virotech,
Russelsheim, Germany). Порог обнаружения TETANUS СТИК
оценивался
как для сыворотки, так и цельной крови.
Полученные результаты указали на титр IgG против
столбнячного токсина 0.1 UI/ml в сыворотке и целой крови в
качестве порога обнаружения.
Точность (Воспроизводимость)
Intra-assay
Точность (Воспроизводимость) была изучена на 10 повторных
тестированиях 5 различных образцов сыворотки и цельной крови
с известными уровнями анти-антител против столбнячного
токсина. Все образцы были правильно идентифицированы в
100% случаев.
Inter-assay
Точность (Воспроизводимость) была изучена на трех различных
образцах сыворотки и цельной крови с известным уровнем антиантител против столбнячного токсина. Все образцы были
проверены 10 раз тремя различными сериями теста. Все
образцы были правильно идентифицированы в 100% случаев.
Клинические испытания.
Исследование было выполнено на двух сериях образцов.
 Первая
серия
составляла
100
образцов
крови.
Соответствующие
сыворотки
были
проанализированы
коммерческиим тестом ИФА (Genzyme Virotech ref EC
124.00). TETANUS СТИК был проверен на цельной крови и на
сыворотке.
ИФА
+
+
90
0
TETANUS СТИК
9
1
Specificity-100%
Sensitivity-91%
 Специфичность TETANUS СТИК была проверена на
тестированиях цельной крови.
ИФА
+
+
1
0
TETANUS СТИК
1
12
ЛИТЕРАТУРА:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Kennedy, J.W., Carey, R.N., Coolen, R.B., et al, Evaluation of Precision
Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved
Guideline
(EP5-A). Villanova, PA: The National Committee for Clinical Laboratory
Standards, 1999.
Powers, D.M., Glick, M.R., et al, Interference Testing in Clinical
Chemistry; Approved Guideline (EP7-P).
Villanova, PA: The
National Committee for Clinical Laboratory Standards, 1986.
Passey, R.B., Bee, D.E., Caffo, A., et al, Evaluation of the Linearity of
Quantitative Analytical Methods (EP6-P). Villanova, PA:
The National
Committee for Clinical Laboratory Standards, 1986.
Wang, A.S., Burns, G.F., Kronborg, I.J. and Mackay, I.R., Detection of
antibodies
to
tetanus
toxoid:
comparison
of
a
direct
hemagglutination method with a radioimmunoassay, Journal of
Clinical Pathology 35: 1138-1141 (1982).
Kiessig, S.T., Hentschel, C., Jahn, S., Mehl, M., Starke, R. and Porstmann,
T., A solid-phase enzyme immunoassay for the
detection of tetanus
toxin using human and murine monoclonal antibodies, Journal of Basic
Microbiology 31: 135-140 (1991).
Gergen, P.J., McQuillan, G.M., Kiely, M., Ezzati-Rice, T.M., Sutter, R.W.
and Virella, G., A Population-Based Serologic Survey
of Immunity
to Tetanus in the United States, The New England Journal of Medicine
332(12): 761-766 (1995).
Simonsen, O., Bentzon, M.W. and Heron, I., ELISA for the routine
determination of antitoxic immunity to tetanus, Journal of
Biological
Standardization 14: 231-239 (1986).
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
________________С.А. Гольдберг
«17» сентября 2010 г.
Представительство в РФ:
ООО «ГЕМ» г.Москва, 8 Марта,
д.1,стр.12,эт.3, ком.11
Тел/факс: (499)651-91-35
[email protected]
IFU-TetanusStick-R-6039-HEM-russ- v.04-16.03.14